CN114557447A - 一种复合营养品及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种复合营养品及其制备方法，包括以下重量份原料：40‑50重量份谷物、3‑8重量份肌肽、10‑15重量份L‑精氨酸、1‑5重量份维生素C、12‑20重量份L‑谷氨酰胺、0.5‑2重量份酵母β‑葡聚糖、10‑15重量份大豆蛋白、5‑15重量份植物提取物长循环脂质体、1‑3重量份动物水解蛋白复合物。本发明的复合营养品配方科学合理、口感好、取用方便，易于人体消化吸收，对伤口愈合有很好的促进作用。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品技术领域，尤其涉及一种复合营养品及其制备方法。
背景技术
对于术后调养恢复的人来说，充足的能量补给、易消化吸收的蛋白营养及必需维生素是必不可少的。配方科学合理、吸收利用率高的营养品可以加快机体康复，促进伤口愈合，增强免疫力。此外，一些术后人群会出现炎症，伴随发热、腹痛等症状，因此，通过及时补充促进炎症消散、抗菌消炎的营养物质来增强体质、抗病力，对于减少并发症十分有效。
中国专利CN200410052564.6公开了一种采用中药材与五谷杂粮组合的健康营养品及其加工方法，由以下原料组成：玉米、黑芝麻、小粟、黑豆、地瓜、灵芝、淮山、枸杞子、土茯苓、制首乌，将上述原料经过清洗、干燥、熟化、粉碎得到健康营养品，该专利的营养品可以平衡膳食，全面提供人体所需营养成分，促进人体健康、预防疾病、增强体质；中国专利CN201410438043.8公开了一种具有缓解体力疲劳功能的营养食品及其制备方法，包括以下原料：燕麦粉、全南瓜粉、大豆分离蛋白粉、小麦低聚肽粉、乳清蛋白粉、全脂奶粉、玉米膨化粉、牛磺酸、植脂末、赤藓糖醇、麦精，该专利的营养食品搭配合理，能够为人体提供充足的蛋白质、氨基酸、矿物质等，可以缓解体力疲劳，增强人体劳动能力，方便携带取用；但是上述营养食品以谷物、中药、蛋白等为主要成分，对于体质虚弱的老人和病人来说，胃肠道消化负担较重，营养不易被吸收利用。
发明内容
有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明提供了一种复合营养品及其制备方法。
复合营养品，包括以下重量份原料：40-50重量份谷物、3-8重量份肌肽、10-15重量份L-精氨酸、1-5重量份维生素C、12-20重量份L-谷氨酰胺、0.5-2重量份酵母β-葡聚糖、10-15重量份大豆蛋白、5-15重量份植物提取物。
所述谷物为小麦、燕麦、小米、黑米、芝麻、杏仁中的一种或两种或两种以上混合物。优选的，所述谷物为燕麦、芝麻按质量比(1-3)：(1-3)混合而成。
燕麦，拉丁学名：Avena sativa L.，为禾本科植物。燕麦含有丰富的淀粉、蛋白质、脂肪、维生素E等营养物质，具有增加人体免疫力、美容养颜的食疗功效。同时燕麦中含有丰富的燕麦β-葡聚糖、燕麦肽等物质，有效促进成纤细胞合成胶原蛋白，促进伤口愈合，具有良好的伤口修复功能。
芝麻，拉丁学名：Sesamum indicum Linn.，是胡麻的籽种，一年生直立草本植物，含有丰富的维生素E，能防止过氧化脂质对皮肤的危害，抵消或中和细胞内有害物质游离基的积累，能有效防止皮肤各种炎症，同时芝麻还具有养血的作用。
肌肽是一种有β-丙氨酸和L-组氨酸组成的内源性二肽，具有促进伤口愈合并减轻炎症反应，肌肽还能螯合金属离子调节多种生理环境。肌肽能够刺激胶原蛋白的形成，而胶原蛋白是伤口愈合的重要条件。肌肤也可作为营养成分，为伤口愈合需要的营养物质。
酵母β-葡聚糖能有效增加宿主预防寄生虫的能力，增强细胞的免疫功能，促使免疫细胞运动到异物(细菌、真菌、病毒)处，提高巨噬细胞的吞噬能力，具有良好的抗炎症作用；同时酵母β-葡聚糖参与机体的自然防御和加速皮肤创伤愈合的过程。
所述植物提取物的制备方法，包括以下制备方法：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过80-100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、40-50wt％乙醇水溶液按浴比1g：(15-30)mL混合均匀，在室温下静置10-12h，然后进行超声处理1-2h，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物。
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参中的一种或两种或两种以上混合物混合而成。优选的，所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比(1-6):(1-6):(1-6):(1-6)混合而成。
葡萄叶提取物中富含黄酮类化合物，如槲皮素、山奈酚和柚皮苷等物质；柚皮苷通过下调炎症(NF-κB、TNF-α和ILs)和凋亡因子(pol-γ和Bax)的表达，并上调生长因子的表达，从而调节胶原蛋白的表达来诱导血管生成。因此，在葡萄叶提取物中存在这种具有伤口愈合特性的类黄酮，以及它们对氧化应激和伴随伤口愈合进程的炎症状态的调节作用，强烈提高了愈合潜力。
丹参，拉丁学名：Salvia miltiorrhiza Bunge，双子叶植物唇形科鼠尾草属多年生直立草本植物，丹参提取物的主要成分为丹参酮类二萜化合物，可以改善伤口处局部组织血容量的调节，促进伤口愈合、预防伤口感染。
积雪草，拉丁学名：Centella asiatica(L.)Urban，多年生草本，积雪草提取物主要成分为积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸等三萜类化合物，能刺激肉芽生长，加快表皮修复，有效促进伤口愈合，还能抑制瘢痕组织过快生长。
人参，拉丁学名：Panax ginseng C.A.Meyer，是五加科、人参属多年生草本植物，人参提取物的主要成分为人参皂苷，人参皂苷具有促血管生成且抑制TGF-β1的刺激胶原增生，人生提取物具有促进伤口愈合同时预防增生性瘢痕产生的作用。
但是植物提取物由于其水溶性和生物利用度较差，其给药一直受到阻碍，限制了植物提取物的进一步应用。
脂质体一般是由磷脂和胆固醇组成，是一种将植物提取物包封于双分子层内的空心微囊结构体，因与细胞膜结构相似，具有良好的组织相容性、细胞亲和性、修饰靶向性和提高药物稳定性等特点，改善植物提取物的水溶性和生物利用度。
优选的，复合营养品，包括以下重量份原料：40-50重量份谷物、3-8重量份肌肽、10-15重量份L-精氨酸、1-5重量份维生素C、12-20重量份L-谷氨酰胺、0.5-2重量份酵母β-葡聚糖、10-15重量份大豆蛋白、5-15重量份植物提取物脂质体。
所述植物提取物脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过80-100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、40-50wt％乙醇水溶液按浴比1g：(15-30)mL混合均匀，在室温下静置10-12h，然后进行超声处理1-2h，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将10-15重量份植物提取物、30-50重量份蛋黄卵磷脂、30-50重量份磷脂酰丝氨酸、5-10重量份胆固醇、3-8重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至30-50℃反应10-30min，其中混合物与无水乙醇按质量比(1-5):1混合，然后加入0.01-0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比(1-3):(1-3)混合，静置1-2h，再进行超声处理10-30min，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，然后在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物质体。
本发明人以植物提取物、蛋黄卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯为原料制备植物提取物脂质体，脂质体具有两亲性，可以提高脂质体的稳定性，同时延缓植物提取物缓释来提高其利用度。其中醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯是羟丙甲纤维素的乙酸酯和琥珀酸酯的混合物，采用蛋黄卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯对中药提取物进行脂质体制备，植物提取物脂质体在酸性(胃酸)条件下溶解度低，因此植物提取物脂质体进行肠道，随着肠道pH的增加，植物提取物脂质体的溶解性也增加，进一步增强植物提取物的生物利用度。
但是，由于脂质体不稳定性，在体内易被清除，从而导致药物过早泄露或解离。因此本发明人在脂质体表面用亲水性物质修饰制成长循环脂质体，可以防止脂质体与血清中多种成分相互作用，减少单核吞噬细胞系统的摄入来延长血液循环时间，从而提高药物的生物利用度。
进一步优选的，复合营养品，包括以下重量份原料：40-50重量份谷物、3-8重量份肌肽、10-15重量份L-精氨酸、1-5重量份维生素C、12-20重量份L-谷氨酰胺、1-1重量份酵母β-葡聚糖、10-15重量份大豆蛋白、5-15重量份植物提取物长循环脂质体。
所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过80-100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、40-50wt％乙醇水溶液按浴比1g：(15-30)mL混合均匀，在室温下静置10-12h，然后进行超声处理1-2h，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将10-15重量份植物提取物、30-50重量份蛋黄卵磷脂、30-50重量份磷脂酰丝氨酸、5-10重量份胆固醇、3-8重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至30-50℃反应10-30min，其中混合物与无水乙醇按质量比(1-5):1混合，然后加入0.01-0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比(1-3):(1-3)混合，静置1-2h，再进行超声处理10-30min，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，然后在0.01-0.05MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:(10-15)mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比(1-3):(1-3)混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:(5-8)混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖中的一种或两种混合物；优选的，所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖按质量比(1-3):(1-3)混合。
在上述基础上采用茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖修饰植物提取物脂质体制备植物提取物长循环脂质体，通过茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖修饰制备的植物提取物长循环脂质体可以降低其与血液中成分的相互作用，延长血液的循环，进而提高药物的利用率；另一方面，茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可通过表面包裹或插入磷脂双分子层，防止植物提取物泄露，提高植物提取物的利用率。同时，茶多酚能够有效促进胶原蛋白产生，对伤口愈合具有促进作用，并且有效抑制致病菌的生长繁殖，防止伤口出现炎症；羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖对致病菌具有良好的抑菌作用，且羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可以有效改善双歧杆菌的生长、繁殖，有效促进免疫球蛋白的分泌，进一步改善机体免疫力。茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖与植物提取物相互作用，具有持续消炎、促进伤口愈合的能力并且改善植物提取物的水溶性、生物利用度。
更优选的，复合营养品，包括以下重量份原料：40-50重量份谷物、3-8重量份肌肽、10-15重量份L-精氨酸、1-5重量份维生素C、12-20重量份L-谷氨酰胺、1-1重量份酵母β-葡聚糖、10-15重量份大豆蛋白、5-15重量份植物提取物长循环脂质体、1-3重量份动物水解蛋白复合物。
所述动物水解蛋白复合物由以下方法制备而成：
将10-15重量份鱼皮胶原蛋白与15-18重量份牛骨胶原蛋白加入到200-300重量份水中在95-100℃、200-300r/min下搅拌0.5-1h；再置于40-50℃、10000-15000r/min高剪切均质条件下处理3-5min；结束后冷却至35-40℃，调节pH至7.5-8.5，加入0.5-0.8重量份菠萝蛋白酶、0.1-0.3重量份胰蛋白酶在50-100r/min下搅拌2-4h；在110-120℃灭酶0.5-1min后冷却至25-30℃，得到酶解蛋白液；将动物双歧杆菌、植物乳杆菌接种于上述酶解蛋白液中发酵1-3h，接种量均为1-2％；发酵结束后浓缩、冷冻干燥，得到所述动物水解蛋白复合物。
本发明的动物水解蛋白复合物精选两种来源的蛋白(鱼皮、牛骨)合理搭配作为原料，经过均质、酶解及益生菌发酵处理，得到更易被人体利用吸收的水解复合物，加快了蛋白合成、促进肌肉组织恢复，更利于创伤后的愈合，提高人体对创伤后的耐受能力、减少创伤后并发症。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过80-100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物/植物提取物脂质体/植物提取物长循环脂质体、动物水解蛋白复合物混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:(10-15)mL混合均匀，然后加热至100℃保持3-5min，冷却至室温，干燥，粉碎过80-100目筛，得到复合营养品。
本发明的有益效果：本发明的复合营养品配方科学合理、口感好、取用方便，易于人体消化吸收，对伤口愈合有很好的促进作用。其中添加了以葡萄叶、丹参、积雪草、人参为原料的植物提取物，并采用茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖进行修饰得到长循环脂质体，提高了生物利用度。二者在改善植物提取物的水溶性、提高生物利用度的同时，茶多酚还能有效促进胶原蛋白产生，对伤口愈合具有促进作用，并且有效抑制致病菌的生长繁殖，防止伤口出现炎症；羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可以有效改善双歧杆菌的生长繁殖，促进免疫球蛋白的分泌，改善机体免疫力。
具体实施方式
实施例中部分原料来源：
肌肽，L-Carnosine，学名：β-丙氨酰-L-组氨酸，是由是一种由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的二肽，结晶状固体，货号：YJJC0725，购买自深圳乐芙生物科技有限公司。
酵母β-葡聚糖，货号：864542，购买自西安仟诺生物工程有限公司。
大豆蛋白，规格：蛋白质≥55％、水份≥7％、脂肪≤1％、灰分≤4％、纤维总量≤4％，粒径：100-150目，购买自河南析翊生物科技有限公司。
菠萝蛋白酶，10万U/g，沧州夏盛酶生物技术有限公司。
胰蛋白酶，50万U/g，苏州寅缇生物科技有限公司。
鱼皮胶原蛋白，货号：02247，郑州明瑞化工产品有限公司。
牛骨胶原蛋白，货号：TZ-658965，西安通泽生物科技有限公司。
蛋黄卵磷脂，型号：Natps-pm1，购买自河南吉乾生物科技有限公司。
醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯，型号：L-型，购买自南京百慕达生物科技有限公司。
羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖，货号：by99324，购买自武汉华翔科洁生物技术有限公司。
葡萄叶，采用巨峰葡萄叶，采摘自葡萄成熟期(7月份)新鲜葡萄叶。
实施例1
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3：1混合而成。
所述植物提取物的制备方法，包括以下制备方法：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
实施例2
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物脂质体。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3:1混合而成。
所述植物提取物脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将15重量份植物提取物、50重量份蛋黄卵磷脂、50重量份磷脂酰丝氨酸、8重量份胆固醇、5重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至50℃反应30min，其中混合物与无水乙醇按质量比5:1混合，然后加入0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比1:1混合，静置2h，再进行超声处理30min，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz，然后在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物脂质体；
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物脂质体混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
实施例3
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物长循环脂质体。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3:1混合而成。
所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，干燥，得到植物提取物；
(3)将15重量份植物提取物、50重量份蛋黄卵磷脂、50重量份磷脂酰丝氨酸、8重量份胆固醇、5重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至50℃反应30min，其中混合物与无水乙醇按质量比5:1混合，然后加入0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比1:1混合，静置2h，再进行超声处理30min，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz，然后在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:15mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比1:3混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:6混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖按质量比1:3混合。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物长循环脂质体混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
实施例4
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物长循环脂质体。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3:1混合而成。
所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将15重量份植物提取物、50重量份蛋黄卵磷脂、50重量份磷脂酰丝氨酸、8重量份胆固醇、5重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至50℃反应30min，其中混合物与无水乙醇按质量比5:1混合，然后加入0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比1:1混合，静置2h，再进行超声处理30min，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz，然后在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:15mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比1:3混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:6混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
所述功能助剂为茶多酚。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物长循环脂质体混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
实施例5
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物长循环脂质体。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3:1混合而成。
所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将15重量份植物提取物、50重量份蛋黄卵磷脂、50重量份磷脂酰丝氨酸、8重量份胆固醇、5重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至50℃反应30min，其中混合物与无水乙醇按质量比5:1混合，然后加入0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比1:1混合，静置2h，再进行超声处理30min，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz，然后在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:15mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比1:3混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:6混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
所述功能助剂为羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物长循环脂质体混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
实施例6
复合营养品，由以下重量份原料组成：50重量份谷物、5重量份肌肽、12重量份L-精氨酸、5重量份维生素C、18重量份L-谷氨酰胺、1重量份酵母β-葡聚糖、13重量份大豆蛋白、10重量份植物提取物长循环脂质体、3重量份动物水解蛋白复合物。
所述谷物为燕麦、芝麻按质量比3:1混合而成。
所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、50wt％乙醇水溶液按浴比1g:15mL混合均匀，在室温下静置12h，然后进行超声处理2h，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，干燥，得到植物提取物；
(3)将15重量份植物提取物、50重量份蛋黄卵磷脂、50重量份磷脂酰丝氨酸、8重量份胆固醇、5重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至50℃反应30min，其中混合物与无水乙醇按质量比5:1混合，然后加入0.01mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比1:1混合，静置2h，再进行超声处理30min，其中超声功率为100W、超声频率为40kHz，然后在0.01MPa、40℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:15mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比1:3混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:6混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参按质量比2:3:3:4混合而成。
所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖按质量比1:3混合。
所述动物水解蛋白复合物由以下方法制备而成：
将12重量份鱼皮胶原蛋白与16重量份牛骨胶原蛋白加入到250重量份水中在97℃、200r/min下搅拌0.5h；再置于50℃、
10000r/min高剪切均质条件下处理3.5min；结束后冷却至40℃，调节pH至8，加入0.7重量份菠萝蛋白酶、0.2重量份胰蛋白酶在80r/min下搅拌3.5h；在115℃灭酶0.5min后冷却至28℃，得到酶解蛋白液；将动物双歧杆菌、植物乳杆菌接种于上述酶解蛋白液中发酵2h，接种量均为2％；发酵结束后浓缩、冷冻干燥，得到所述动物水解蛋白复合物。
复合营养品的制备方法，包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎过100目筛，备用；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物长循环脂质体、动物水解蛋白复合物混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水按浴比1g:15mL混合均匀，然后加热至100℃保持5min，冷却至室温，干燥，粉碎过100目筛，得到复合营养品。
按照测试例1的方法测定实施例6复合营养品的7天伤口愈合率为62.3％。实施例6的复合营养品中增加了动物水解蛋白复合物，其精选两种来源的蛋白(鱼皮、牛骨)合理搭配作为原料，经过均质、酶解及益生菌发酵处理，得到更易被人体利用吸收的水解复合物，加快了蛋白合成、促进肌肉组织恢复，更利于创伤后的愈合，提高人体对创伤后的耐受能力、减少创伤后并发症。
测试例1
伤口愈合率：选择SPF级别、体重为25±2g的豚鼠作为试验对象，随机分为6组，每组20只，其中雌性豚鼠10只，每组雄性豚鼠10只。在动物房适应性饲养一周后开始试验，饲养环境温度21-24℃，湿度50％-60％。在脊椎中部左右两侧相同位置选择面积为3×3cm2区域进行脱毛，并用手术刀刮干净，采用1wt％戊巴比妥酸钠将豚鼠麻醉，经常规皮肤消毒，用消毒过的环形皮肤打孔器制造圆形全层皮肤切除创伤模型，手术后消毒包扎。造模后将手术过的小鼠进行单笼饲养，禁食禁水过夜。将实施例1-5制备的复合营养品分别称取50g，分别用150mL 45℃水调制成糊状；术后次日，于第二天给予标准饲料和饮水，并将调制成糊状的营养品分别喂食豚鼠，容积2mL/10g体重，对照组除正常治疗外服用安慰剂(一种和本发明产品类似的淀粉，无任何治疗作用)，每日观察伤口变化情况，每隔7天给豚鼠伤口拍照，采用毫米方格坐标纸记数法计算伤口面积，观察0-14天。伤口完全愈合即创面完全上皮化的标准：愈合面积大于原始伤口面积的95％。
伤口愈合率(％)＝(初始创面面积-未愈合创面面积)/初始创面面积×100。
每个伤口重复测量三次，其平均值作为最终伤口面积，计算伤口愈合率。
表1复合营养品伤口愈合率的测试结果
通过实施例1与实施例2进行对比发现，实施例2中服用含植物提取物脂质体的营养品在第14天的伤口愈合率为89.1％，实施例1中服用植物提取物的营养品在第14天的伤口愈合率为83.7％，实施例2的伤口愈合率显著优于实施例1，其可能的原因是：植物提取物由于其水溶性和生物利用度较差，其给药一直受到阻碍，限制了植物提取物的进一步应用。本发明人以植物提取物、蛋黄卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯为原料制备植物提取物脂质体，脂质体具有两亲性，可以提高脂质体的稳定性，同时延缓植物提取物缓释来提高其利用度。其中醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯是羟丙甲纤维素的乙酸酯和琥珀酸酯的混合物，采用蛋黄卵磷脂、磷脂酰丝氨酸、胆固醇、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯对中药提取物进行脂质体制备，植物提取物脂质体在酸性(胃酸)条件下溶解度低，因此植物提取物脂质体进行肠道，随着肠道pH的增加，植物提取物脂质体的溶解性也增加，进一步增强植物提取物的生物利用度。
通过实施例2与实施例3进行对比发现，实施例3的伤口愈合率明显优于实施例2，其可能的原因是：由于脂质体不稳定性，在体内易被清除，从而导致药物过早泄露或解离。采用茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖修饰植物提取物脂质体制备植物提取物长循环脂质体，通过茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖修饰制备的植物提取物长循环脂质体可以降低其与血液中成分的相互作用，延长血液的循环，进而提高药物的利用率；另一方面，茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可通过表面包裹或插入磷脂双分子层，防止植物提取物泄露，提高植物提取物的利用率。
通过实施例3-5进行对比发现，实施例5的伤口愈合率最好，其可能的原因是：茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可通过表面包裹或插入磷脂双分子层，防止植物提取物泄露，提高植物提取物的利用率。同时，茶多酚能够有效促进胶原蛋白产生，对伤口愈合具有促进作用，并且有效抑制致病菌的生长繁殖，能够有效防止伤口出现炎症的；羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖对致病菌具有良好的抑菌作用，且羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖可以有效改善双歧杆菌的生长、繁殖，有效促进免疫球蛋白的分泌，进一步改善机体免疫力。茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖与植物提取物相互作用，具有持续消炎、促进伤口愈合的能力并且改善植物提取物的水溶性、生物利用度。
测试例2
伤口组织的羟脯氨酸含量测定：
分别于造模后的第7天、第14天切取测试例1中实验鼠左侧伤口周围1～2mm的全层皮肤用于测定羟脯氨酸含量。使用南京建成的羟脯氨酸试剂盒(碱水解法)测定。羟脯氨酸作为胶原蛋白特异性的基本成分，其含量可作为伤口组织胶原含量的重要指标。具体测试方法参照(《中华鳖裙边胶原蛋白的提取及其胶原蛋白肽对小鼠伤口愈合机制的研究》张强，江南大学，2019年6月硕士论文中2.4.14伤口组织羟脯氨酸含量测定)进行测试。
表2羟脯氨酸含量的测定
测试例3
动物毒性试验：
选择SPF级别、体重为25±2g的豚鼠60只，其中雌性豚鼠30只，雄性豚鼠30只。将60只豚鼠分为6组，每组10只，其中每组雌性豚鼠5只，每组雄性豚鼠5只。分别对实施例1-6制备的复合营养品进行动物毒性试验测试。
测试方法：将实施例1-6制备的复合营养品分别称取50g，分别用150mL 45℃水调制成糊状；将调制成糊状的营养品分别喂食豚鼠，容积2mL/10g体重，密切观察10h并做记录，继续观察7天。
试验结果：7天中，各组豚鼠均无死亡现象，行为活泼，摄食量正常，毛色光亮，眼、口、鼻及肛周无异常分泌物。分别将各组的豚鼠处死，心、肝、肺、胃、胸腺等重要器官，未见异常改变，表明本发明制备的复合营养品无毒性。
Claims (8)
1.一种复合营养品，其特征在于：包括以下重量份原料：40-50重量份谷物、3-8重量份肌肽、10-15重量份L-精氨酸、1-5重量份维生素C、12-20重量份L-谷氨酰胺、0.5-2重量份酵母β-葡聚糖、10-15重量份大豆蛋白、5-15重量份植物提取物长循环脂质体、1-3重量份动物水解蛋白复合物。
2.如权利要求1所述的复合营养品，其特征在于：所述动物水解蛋白复合物由以下方法制备而成：
将10-15重量份鱼皮胶原蛋白与15-18重量份牛骨胶原蛋白加入到200-300重量份水中在95-100℃、200-300r/min下搅拌0.5-1h；再置于40-50℃、10000-15000r/min高剪切均质条件下处理3-5min；结束后冷却至35-40℃，调节pH至7.5-8.5，加入0.5-0.8重量份菠萝蛋白酶、0.1-0.3重量份胰蛋白酶在50-100r/min下搅拌2-4h；在110-120℃灭酶0.5-1min后冷却至25-30℃，得到酶解蛋白液；将动物双歧杆菌、植物乳杆菌接种于上述酶解蛋白液中发酵1-3h，接种量均为1-2％；发酵结束后浓缩、冷冻干燥，得到所述动物水解蛋白复合物。
3.如权利要求1所述的复合营养品，其特征在于：所述植物提取物长循环脂质体的制备方法，包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过80-100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、40-50wt％乙醇水溶液按浴比1g：(15-30)mL混合均匀，在室温下静置10-12h，然后进行超声处理1-2h，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将10-15重量份植物提取物、30-50重量份蛋黄卵磷脂、30-50重量份磷脂酰丝氨酸、5-10重量份胆固醇、3-8重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至30-50℃反应10-30min，其中混合物与无水乙醇按质量比(1-5):1混合，然后加入0.01-0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比(1-3):(1-3)混合，静置1-2h，再进行超声处理10-30min，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，然后在0.01-0.05MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:(10-15)mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比(1-3):(1-3)混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:(5-8)混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体。
4.如权利要求1所述的复合营养品，其特征在于：所述谷物为小麦、燕麦、小米、黑米、芝麻、杏仁中的一种或两种或两种以上混合物。
5.如权利要求1所述的复合营养品，其特征在于：所述植物为葡萄叶、丹参、积雪草、人参中的一种或两种或两种以上混合物混合而成。
6.如权利要求3所述的复合营养品，其特征在于：所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖中的一种或两种混合物。
7.如权利要求1-6中任一项所述的复合营养品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1将谷物洗净、干燥、粉碎，得到谷物粉末；
S2按配方，将谷物、肌肽、L-精氨酸、维生素C、L-谷氨酰胺、酵母β-葡聚糖、大豆蛋白、植物提取物长循环脂质体、动物水解蛋白复合物混合均匀，得到混合物料；将混合物料、水混合均匀，加热，冷却，干燥，粉碎，得到复合营养品。
8.一种植物提取物长循环脂质体的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)将植物进行干燥、粉碎，过80-100目筛，得到植物粉末；
(2)将植物粉末、40-50wt％乙醇水溶液按浴比1g：(15-30)mL混合均匀，在室温下静置10-12h，然后进行超声处理1-2h，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，反应结束后，减压抽滤，得到滤液，将滤液在0.01-0.02MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到植物提取物；
(3)将10-15重量份植物提取物、30-50重量份蛋黄卵磷脂、30-50重量份磷脂酰丝氨酸、5-10重量份胆固醇、3-8重量份醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯混合均匀后，得到混合物；将上述混合物加入无水乙醇中加热至30-50℃反应10-30min，其中混合物与无水乙醇按质量比(1-5):1混合，然后加入0.01-0.03mol/L磷酸盐缓冲溶液，所述无水乙醇与磷酸盐缓冲溶液按体积比(1-3):(1-3)混合，静置1-2h，再进行超声处理10-30min，其中超声功率为100-300W、超声频率为30-40kHz，然后在0.01-0.05MPa、40-50℃减压浓缩，冷冻干燥，得到分散相脂质体；
(4)将功能助剂、水按浴比1g:(10-15)mL混合，得到混合溶液Ⅰ，然后将分散相脂质体加入混合溶液Ⅰ中混合均匀，其中功能助剂、分散相脂质体按质量比(1-3):(1-3)混合而成，得到混合溶液Ⅱ；
(5)将酪蛋白酸钠加入上述混合溶液Ⅱ中混合均匀，其中酪蛋白酸钠与混合溶液Ⅱ按质量比1:(5-8)混合，然后进行冷冻干燥，得到植物提取物长循环脂质体；所述功能助剂为茶多酚、羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖中的一种或两种混合物。
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication | ||
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