CN114423445A - 使用补体抑制剂治疗神经疾病 - Google Patents

Abstract

本公开提供了用补体抑制剂化合物和组合物治疗炎性适应症的方法。包括用于治疗肌萎缩侧索硬化症(ALS)的化合物和方法。

Description

使用补体抑制剂治疗神经疾病

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年9月12日提交的题为NEUROLOGICAL DISEASE TREATMENT WITHCOMPLEMENT INHIBITORS的美国临时申请号62/899,488、2020年2月4日提交的题为NEUROLOGICAL DISEASE TREATMENT WITH COMPLEMENT INHIBITORS的美国临时申请号62/969,742、2020年3月12日提交的题为NEUROLOGICAL DISEASE TREATMENT WITH COMPLEMENTINHIBITORS的美国临时申请号62/988,587和2020年5月8日提交的题为NEUROLOGICALDISEASE TREATMENT WITH COMPLEMENT INHIBITORS的美国临时申请号63/021,742的优先权，其各自的内容通过引用以其整体并入本文。

技术领域

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背景技术

脊椎动物的免疫应答包括适应性免疫组分和先天性免疫组分。适应性免疫应答对特定病原体具有选择性并且应答缓慢，而先天性免疫应答的组分识别的病原体范围宽并且在感染后应答迅速。补体系统是先天性免疫应答的一种这样的组分。

补体系统包括约20种循环补体组分蛋白，主要由肝脏合成。这种特定免疫应答的组分由于观察到它们在细菌的破坏中补充抗体应答而最早被称为“补体”。这些蛋白在响应于感染而激活之前保持无活性形式。激活借助于由病原体识别引发并导致病原体破坏的蛋白水解性裂解途径发生。在补体系统中已知三种这样的途径，被称作经典途径、凝集素途径和旁路途径。当IgG或IgM分子结合至病原体的表面时，激活经典途径。凝集素途径由甘露聚糖结合凝集素蛋白识别细菌细胞壁的糖残基而引发。旁路途径在没有任何特定刺激存在时以低水平保持活性。尽管所有三种途径的引发事件不同，但是所有三种途径在裂解补体组分C3方面一致。C3被裂解成两种产物，称为C3a和C3b。其中，C3b共价连接至病原体表面，而C3a充当可扩散信号来促进炎症并募集循环免疫细胞。与表面结合的C3b与其他组分形成复合物，以引发补体系统后面组分之间的级联反应。由于需要表面结合，补体活性保持局部化，并对非靶细胞的破坏最小化。

结合病原体的C3b以两种方式促进病原体破坏。在一种途径中，C3b被吞噬细胞直接识别并导致病原体吞噬(engulfment)。在第二种途径中，结合病原体的C3b引发膜攻击复合物(membrane attack complex，MAC)的形成。在第一个步骤中，C3b与其他补体组分复合以形成C5-转化酶复合物。该复合物的组分取决于最初的补体激活途径，可以不同。由经典补体途径形成的C5-转化酶除C3b以外还包含C4b和C2a。当由旁路途径形成时，C5-转化酶包含C3b的两个亚基以及一个Bb组分。

补体组分C5被任一种C5-转化酶复合物裂解成C5a和C5b。C5a很像C3a，扩散到循环中并促进炎症，从而充当炎症细胞的化学引诱物(chemoattractant)。C5b保持结合在细胞表面，在该处它通过与C6、C7、C8和C9的相互作用来触发MAC的形成。MAC是跨膜的亲水性孔，并促进流体自由流入和流出细胞，从而破坏所述细胞。

所有免疫活性中的一个重要组分是免疫系统区分自身细胞与非自身细胞的能力。当免疫系统不能进行这种区分时，出现病理。在补体系统的情况下，脊椎动物细胞表达保护其免受补体级联作用的蛋白。这确保补体系统的靶标局限于致病细胞。许多补体相关病症和疾病都与导致或产生自补体级联反应对自身细胞的异常破坏的炎症有关。

肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis，ALS)是一种导致身体肌肉无力的进行性疾病。个体之间的疾病进展各不相同，中位生存期为3年，且出现症状，并且80％的患者在5年内死亡。尽管疾病的具体原因尚不清楚，但补体相关的免疫失调被认为是一个促成因素。补体组分由中枢神经系统的细胞合成，所述细胞包括神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞。此外，经典补体激活途径的生物标志物(C1q和C4)已在ALS血清、脑脊液、运动皮层和脊髓实质以及骨骼肌组织中鉴定出。

本领域仍然需要用于解决补体相关疾病和病症包括影响神经系统的那些(例如ALS)的化合物和治疗方法。本公开通过提供相关的化合物和治疗方法来满足这种需要。

发明内容

在一些实施方案中，本公开提供了一种通过向受试者施用补体抑制剂来治疗受试者的方法，其中受试者患有或怀疑患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)，其中补体抑制剂降低、预防、稳定或逆转受试者经历的ALS的一种或多种影响。补体抑制剂可以是C5抑制剂。补体抑制剂可以是齐鲁考普(zilucoplan)。在治疗之前，受试者ALS疾病严重程度可以升高和/或可以以特定速率增加。补体抑制剂治疗可以稳定或降低受试者ALS疾病严重程度和/或降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。受试者ALS疾病严重程度的变化可以通过修订的ALS功能评分量表(ALS Functional Rating Scale-Revised，ALSFRS-R)来测量。在治疗之前，受试者呼吸功能可以降低和/或以特定速率下降。补体抑制剂治疗可以稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。受试者呼吸功能的变化可以通过慢肺活量(SVC)来评估。在治疗之前，受试者肌肉力量可以降低和/或以特定速率下降。补体抑制剂治疗可以稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。受试者肌肉力量的变化可以通过手持测力仪(hand held dynamometry，HHD)测量。补体抑制剂治疗可以稳定或改善受试者言语能力(speech capability)和/或稳定或改善受试者言语能力下降的速率。受试者言语能力可以包括以下一项或多项：发音精确度(articulatory precision)、语速(speaking rate)、言语信号出声百分比(percent ofspeech signal voiced)、发声长度(phonation length)、辅音长度(consonant length)和鼻音(nasality)。补体抑制剂治疗可以稳定或改善受试者ALS生物标志物谱(biomarkerprofile)和/或受试者ALS生物标志物谱变化的速率。受试者ALS生物标志物谱可以包括选自神经丝重链(pNfH)、神经丝轻链(NfL)、C5和补体活性生物标志物的一种或多种的生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体活性生物标志物可以在受试者脑脊液(CSF)、血浆和/或血清中检测。受试者可以患有或可以怀疑患有重症肌无力(myasthenia gravis)。受试者可以对至少一种自身抗体呈阳性。所述至少一种自身抗体可以是以下的一种或多种：抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4、抗集聚蛋白(anti-agrin)和抗肌肉相关受体酪氨酸激酶。受试者可以具有血脑屏障功能受损。可以通过确定受试者的白蛋白商来评估血脑屏障功能受损。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS(definite ALS)或可能的ALS(probable ALS)。

在一些实施方案中，本公开提供了一种诊断受试者的ALS的方法，其通过检测和/或定量与受试者或来自受试者的生物样品相关的补体活性和基于检测和/或定量的补体活性诊断受试者患有ALS。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体活性生物标志物可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量。

在一些实施方案中，本公开提供了一种监测受试者的ALS的方法，所述方法包括(1)检测和/或定量与以下相关的补体活性：(a)在初始时间点或初始时间段内的受试者；或(b)在初始时间点或初始时间段内从受试者获得的生物样品；和(2)检测和/或定量与以下相关的补体活性：(a)在随后时间点或随后时间段内的受试者；(b)在随后时间点或随后时间段内从受试者获得的生物样品；(3)通过评估在初始时间点或时间段与随后时间点或时间段之间检测和/或定量的补体活性的任何变化来监测受试者的ALS。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体活性生物标志物可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

在一些实施方案中，本公开提供了将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者分层为两组或更多组的方法，所述方法包括检测和/或定量与每个受试者或来自每个受试者的生物样品相关的补体活性，和基于检测和/或定量的补体活性将每个受试者分配至所述两组或更多组中的至少一组。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体活性生物标志物可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量。可以基于与未患有ALS的受试者中CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平相比升高的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平将受试者分配至治疗组。治疗组的特征可以在于有资格进行补体抑制剂治疗。补体抑制剂治疗可以包括齐鲁考普治疗。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

根据本文所述的治疗方法向受试者施用的补体抑制剂的剂量和/或方案可以基于在治疗之前从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物的水平来确定。在治疗之前从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。施用的补体抑制剂的剂量和/或方案可以在一次或多次在先补体抑制剂施用之后，基于在一次或多次在先施用之后从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物水平来调整。在一次或多次在先施用之后从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。施用的补体抑制剂可以是齐鲁考普。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗具有补体相关适应症的受试者的方法，其中受试者具有或怀疑具有受损的血脑屏障。所述方法可以包括向受试者施用补体抑制剂。补体抑制剂可以降低、预防、稳定或逆转补体相关适应症的一种或多种影响。补体抑制剂可以包括C5抑制剂。补体抑制剂可以包括齐鲁考普。补体相关适应症可以包括神经肌肉炎性适应症(neuromuscular inflammatory indication)。神经肌肉炎症适应症可以包括ALS。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。可以通过确定受试者的白蛋白商来评估受试者的血脑屏障损伤。

在一些实施方案中，本公开提供了一种选择用补体抑制剂治疗的受试者的方法，其中所述受试者患有或怀疑患有ALS，所述方法包括评估受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平，并基于对受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平的评估来选择用补体抑制剂治疗的受试者。所述至少一种生物标志物可以包括以下的一种或多种：神经轴索变性生物标志物(neuroaxonal degeneration biomarker)、神经炎症生物标志物和补体活性生物标志物。受试者样品可以包括血浆样品和/或CSF样品。神经轴索变性生物标志物可以是pNfH和/或NfL。神经炎症生物标志物可以包括单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractant protein-1，MCP-1)、壳三糖酶-1(chitotriosidase-1，CHIT1)和/或壳多糖酶-3样蛋白1(chitinase-3-like protein1)(YKL-40)。补体活性生物标志物可以包括C5a、C5b-9、sC5b-9、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和/或因子H。补体抑制剂可以包括齐鲁考普。受试者样品中的Nfl、pNfH、CHIT1、C5a和sC5b-9的一种或多种的水平相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。受试者样品和来自未患有ALS的受试者的受试者样品可以包括CSF。受试者样品可以从血脑屏障功能受损的受试者获得。受试者样品中C3a、Bb和Ba的一种或多种相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。受试者样品和来自未患有ALS的受试者的受试者样品可以包括血浆。受试者样品中的C3a水平相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。

在一些实施方案中，本公开提供了治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法，所述方法包括根据本文所述的任何方法[例如，基于评估至少一种生物标志物(例如，神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和/或补体活性生物标志物)的存在或水平]选择用补体抑制剂治疗的受试者以及向受试者施用补体抑制剂。补体抑制剂可以包括齐鲁考普。

在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗患有或怀疑患有ALS的受试者的方法中的包含补体抑制剂的组合物，其中所述组合物降低、预防、稳定或逆转受试者经历的ALS的一种或多种影响。补体抑制剂可以包括C5抑制剂。补体抑制剂可以包括齐鲁考普。在治疗之前，受试者ALS疾病严重程度可以升高和/或可以以特定速率增加。治疗可以稳定或降低受试者ALS疾病严重程度和/或降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。受试者ALS疾病严重程度的变化可以通过ALSFRS-R测量。在治疗之前，受试者呼吸功能可以降低和/或可以以特定速率下降。用补体抑制剂治疗可以稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。可以通过SVC评估受试者呼吸功能的变化。在治疗之前，受试者肌肉力量可以降低和/或以特定速率下降，用组合物治疗可以稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。受试者肌肉力量的变化可以通过HHD测量。所述治疗可以稳定或改善受试者言语能力和/或受试者言语能力下降的速率。受试者言语能力可以包括以下一项或多项：发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音。所述治疗可以稳定或改善受试者ALS生物标志物谱和/或受试者ALS生物标志物谱变化的速率。受试者ALS生物标志物谱可以包括选自pNfH、NfL、C5和补体活性生物标志物的一种或多种的生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体活性生物标志物可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测。组合物的剂量和/或方案可以基于在一次或多次在先组合物施用之后从受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物水平来调整。在一次或多次在先组合物施用之后从受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清中检测的补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。受试者可以患有或怀疑患有重症肌无力。受试者可以对至少一种自身抗体呈阳性。所述至少一种自身抗体可以包括以下的一种或多种：抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4、抗集聚蛋白和抗肌肉相关受体酪氨酸激酶。受试者可以具有受损的血脑屏障功能。受损的血脑屏障功能可以通过确定受试者的白蛋白商来评估。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

在一些实施方案中，本公开提供了一种诊断受试者的ALS的方法，其通过检测和/或定量与从受试者获得的生物样品相关的补体活性和基于检测和/或定量的补体活性诊断受试者患有ALS。检测和/或定量与生物样品相关的补体活性的步骤可以包括检测和/或定量生物样品中的补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。生物样品可以包括受试者CSF、血浆和/或血清。

在一些实施方案中，本公开提供了一种通过以下步骤来监测受试者的ALS的方法：检测和/或定量与在初始时间点或初始时间段内从受试者获得的生物样品相关的补体活性；检测和/或定量与在随后时间点或随后时间段内从受试者获得的生物样品相关的补体活性；和通过评估在初始时间点或初始时间段内从受试者获得的生物样品与在随后时间点或随后时间段内从受试者获得的生物样品之间检测和/或定量的补体活性的任何变化来监测受试者的ALS。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。在初始时间点或初始时间段内从受试者获得的生物样品和/或在随后时间点或随后时间段内从受试者获得的生物样品可以包括CSF、血浆和/或血清。如基于修订的El Escorial标准所评估的，受试者可以患有确定的ALS或可能的ALS。

在一些实施方案中，本公开提供了一种将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者分层为两组或更多组的方法，其通过检测和/或定量与从每个受试者获得的生物样品相关的补体活性和基于检测和/或定量的补体活性将每个受试者分配至所述两组或更多组中的至少一组。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。从每个受试者获得的生物样品可以包括CSF、血浆和/或血清。所述两组或更多组可以包括治疗组，其中基于与未患有ALS的受试者中的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平相比升高的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平而将受试者分配至治疗组。治疗组的特征可以在于有资格进行补体抑制剂治疗。补体抑制剂治疗可以包括齐鲁考普治疗。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。组合物的剂量和/或方案可以基于在治疗之前从受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清中检测的补体活性生物标志物的水平来确定。在治疗之前从受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清中检测的补体活性生物标志物可以选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗患有补体相关适应症的受试者的方法中的包括补体抑制剂的组合物，其中受试者具有或怀疑具有受损的血脑屏障，其中所述组合物降低、预防、稳定或逆转补体相关适应症的一种或多种影响。补体抑制剂可以是C5抑制剂。补体抑制剂可以是齐鲁考普。补体相关适应症可以是神经肌肉炎性适应症。神经肌肉炎性适应症可以是ALS。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。可以通过确定受试者的白蛋白商来评估受试者的血脑屏障损伤。

在一些实施方案中，本公开提供了一种用于治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法中的包括补体抑制剂的组合物，所述方法包括评估受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平，和基于对受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平的评估来选择用补体抑制剂治疗的受试者。所述至少一种生物标志物可以包括神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和补体活性生物标志物的一种或多种。受试者样品可以包括血浆样品和/或CSF样品。神经轴索变性生物标志物可以是pNfH和/或NfL。神经炎症生物标志物可以包括MCP-1、CHIT1和/或YKL-40。补体活性生物标志物可以包括C5a、C5b-9、sC5b-9、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I、和/或因子H。受试者样品(例如CSF)中Nfl、pNfH、CHIT1、C5a和sC5b-9的一种或多种的水平相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。受试者样品可以从血脑屏障功能受损的受试者获得。受试者样品(例如血浆)中C3a、Bb和Ba的一种或多种相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。受试者样品中的C3a水平相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平可以升高。补体抑制剂可以包括C5抑制剂。C5抑制剂可以包括齐鲁考普。

附图说明

本公开的具体实施方案的前述和其他目的、特征和优点将根据附图中的以下描述和说明变得显而易见。

图1是显示来自血脑屏障受损的受试者的CSF生物标志物水平的倍数变化(由CSF白蛋白:血浆白蛋白比率确定)的图。统计学分析使用克鲁斯卡尔-沃利斯检验(Kruskal-Wallis test)进行(*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001)。箱须(whisker)表示5-95百分位数，并且方框内的“+”表示平均数。

图2是显示来自具有完整血脑屏障的受试者的CSF生物标志物水平的倍数变化(由CSF白蛋白:血浆白蛋白比率确定)的图。统计学分析使用克鲁斯卡尔-沃利斯检验进行(*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，****p<0.0001)。箱须表示5-95百分位数，并且方框内的“+”表示平均数。

图3是显示来自健康对照受试者的血浆样品中C5a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验(Mann-Whitney test)确定，阈值为p>0.05。

图4是显示来自健康对照受试者的血浆样品中sC5b9的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图5是显示来自健康对照受试者的血浆样品中C3a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图6是显示来自健康对照受试者的血浆样品中C4a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图7是显示来自健康对照受试者的血浆样品中Ba的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图8是显示来自健康对照受试者的血浆样品中Bb的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图9是显示来自健康对照受试者的血浆样品中fH的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图10是显示来自健康对照受试者的血浆样品中fI的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图11是显示来自健康对照受试者的CSF样品中C5a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图12是显示来自健康对照受试者的CSF样品中sC5b9的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图13是显示来自健康对照受试者的CSF样品中C3a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图14是显示来自健康对照受试者的CSF样品中C4a的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图15是显示来自健康对照受试者的CSF样品中Ba的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图16是显示来自健康对照受试者的CSF样品中Bb的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图17是显示来自健康对照受试者的CSF样品中fH的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图18是显示来自健康对照受试者的CSF样品的fI的中位水平与患有确定的或可能的ALS的受试者的中位水平相比较的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值为p>0.05。

图19是显示使用来自健康对照受试者和患有确定的或可能的ALS的受试者的血浆和CSF样品确定的白蛋白商值的图。指示了与完整、轻度受损或中度受损的血脑屏障相关的水平。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验确定，阈值p>0.05。

图20是显示来自健康对照受试者和患有确定的或可能的ALS的受试者的CSF中的神经丝轻链(NfL)和磷酸化神经丝重链(pNfH)生物标志物水平的图。对于ALS中的NfL，N＝28，对于ALS中的pNfH，N＝17。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验(2个组)或克鲁斯卡尔-沃利斯检验(3个组)确定。

图21是显示来自健康对照受试者和患有ALS的受试者(N＝17)的CSF中的壳三糖酶-1(CHIT1)和壳多糖酶-3样蛋白1(YKL-40)生物标志物水平的图。误差条表示95％置信区间。显著性值由曼-惠特尼检验(2个组)或克鲁斯卡尔-沃利斯检验(3个组)确定。“ns”表示没有显著差异。

发明详述

介绍

本公开的实施方案涉及用于调节补体活性的化合物和组合物以及相关使用方法。补体活性保护身体免受外来病原体的侵害，但会因活性增加或调节不良而导致自身细胞破坏。补体调节剂可以是补体抑制剂，例如齐鲁考普。齐鲁考普是一种合成的大环肽，其以亚纳摩尔亲和力结合补体组分5(C5)，并通过变构抑制C5在经典、旁路或凝集素途径激活后被裂解为C5a和C5b(参见，例如，美国专利号10,106,579，其内容通过引用以其整体并入本文)。

本文包括通过施用补体抑制剂(例如，齐鲁考普)来治疗补体相关适应症的方法。此类补体相关适应症包括神经肌肉炎性适应症，包括肌萎缩侧索硬化症(ALS)。补体抑制剂可以用于通过减少或消除与补体过度活跃相关的补体介导的自身组织破坏的有害作用来治疗这些病况。下文详细描述了本公开的这些和其他实施方案。

I.化合物和组合物

在一些实施方案中，本公开提供了功能为调节补体活性的化合物和组合物。这样的化合物和组合物可以包括阻断补体激活的抑制剂。如本文所用，“补体活性”包括补体级联的激活，由补体组分如C3或C5形成裂解产物，裂解事件后下游复合物的组装，或伴随补体组分例如C3或C5裂解或源自其的任何过程或事件。补体抑制剂可以包括在补体组分C5水平上阻断补体激活的C5抑制剂。C5抑制剂可以结合C5并通过C5转化酶阻止其裂解成裂解产物C5a和C5b。如本文所用，“补体组分C5”或“C5”定义为被C5转化酶裂解为至少裂解产物C5a和C5b的复合物。如本文所提及，“C5抑制剂”包括抑制预裂解的补体组分C5复合物或补体组分C5的裂解产物的加工或裂解的任何化合物或组合物。

可以理解的是，抑制C5裂解防止了细胞溶解膜攻击复合物(MAC)在糖基磷脂酰肌醇(GPI)粘附蛋白缺陷型红细胞上的组装和活性。在一些情况下，本文提出的C5抑制剂也可以结合C5b，从而防止C6结合和随后的C5b-9MAC的组装。

C5抑制剂化合物可以包括，但不限于表1中呈现的任何化合物。所列出的参考文献和支持所列出的临床研究编号的信息通过引用以其整体并入本文。

表1：C5抑制剂

基于肽的化合物

在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂是多肽。根据本公开，任何基于氨基酸的分子(天然的或非天然的)均可被称为“多肽”，且该术语包括“肽”、“模拟肽(peptidomimetics)”和“蛋白”。“肽”传统上被认为在约4至约50个氨基酸的大小范围内。大于约50个氨基酸的多肽通常被称作“蛋白”。

C5抑制剂多肽可以是直链或环状。环状多肽包括具有一个或多个环状特征(例如环和/或内部键)作为它们的结构的一部分的任何多肽。在一些实施方案中，当分子充当桥连部分以连接多肽的两个或更多个区域时，形成环状多肽。如本文所用，术语“桥连部分(bridging moiety)”是指在多肽中的两个相邻或不相邻的氨基酸、非天然氨基酸或非氨基酸之间形成的桥的一个或多个组分。桥连部分可以具有任意大小或组成。在一些实施方案中，桥连部分可以包括在两个相邻或不相邻的氨基酸、非天然氨基酸、非氨基酸残基或它们的组合之间的一个或多个化学键。在一些实施方案中，这样的化学键可以是在相邻或不相邻的氨基酸、非天然氨基酸、非氨基酸残基或它们的组合上的一个或多个官能团之间。桥连部分可以包括酰胺键(内酰胺)、二硫键、硫醚键、芳族环、三唑环和烃链中的一个或多个。在一些实施方案中，桥连部分包括在各自存在于氨基酸、非天然氨基酸或非氨基酸残基侧链中的胺官能团和羧酸酯官能团之间的酰胺键。在一些实施方案中，胺或羧酸酯官能团是非氨基酸残基或非天然氨基酸残基的一部分。

C5抑制剂多肽可以如下进行环化：通过羧基末端、氨基末端，或通过任意其他方便的连接点，例如通过半胱氨酸的硫(例如，通过在序列中两个半胱氨酸残基之间形成二硫键)或氨基酸残基的任何侧链。形成环状环的其他连接(linkage)可以包括但不限于马来酰亚胺连接、酰胺连接、酯连接、醚连接、硫醚连接、腙连接或乙酰胺连接。

在一些实施方案中，肽可以经由固相肽合成(SPPS)在固体支持物(例如rink酰胺树脂)上合成。SPPS方法是本领域已知的，并且可以使用正交保护基团进行。在一些实施方案中，本公开的肽可以使用Fmoc化学和/或Boc化学，经由SPPS合成。合成的肽可以使用标准技术从固体支持物上裂解下来。

肽可以经由色谱法[例如尺寸排阻色谱法(SEC)和/或高效能液相色谱法(HPLC)]纯化。HPLC可以包括反相HPLC(RP-HPLC)。肽可以在纯化后冷冻干燥。纯化的肽可以以纯肽或以肽盐的形式获得。形成肽盐的残基盐可以包括，但不限于三氟乙酸(TFA)、乙酸盐和/或盐酸盐。在一些实施方案中，本公开的肽以肽盐的形式获得。肽盐可以是具有TFA的肽盐。残基盐可以根据已知的方法(例如，通过使用脱盐柱)从纯化的肽移除。

在一些实施方案中，本公开的环状C5抑制剂多肽使用内酰胺部分形成。这样的环状多肽可以例如通过使用标准Fmoc化学在固体支持物Wang树脂上合成而形成。在一些情况下，Fmoc-ASP(烯丙基)-OH和Fmoc-LYS(alloc)-OH被并入多肽中以作为用于形成内酰胺桥的前体单体。

本公开的C5抑制剂多肽可以是肽模拟物。“肽模拟物”或“多肽模拟物”是多肽，其中该分子包含天然多肽(即仅包含20种蛋白原性氨基酸的多肽)中不存在的结构元件。在一些实施方案中，肽模拟物能够重现或模拟天然肽的生物作用。肽模拟物可以以许多方式不同于天然多肽，例如通过改变骨架结构或通过具有自然界中不存在的氨基酸。在一些情况下，肽模拟物可以包括带有在已知的20种蛋白原性氨基酸中未发现的侧链的氨基酸；用于实现分子末端或内部部分之间的环化的基于非多肽的桥接部分；酰胺键氢部分被甲基(N-甲基化)或其他烷基取代；用对化学或酶处理有抗性的化学基团或键替代肽键；N-末端和C-末端修饰；和/或与非肽延伸(例如聚乙二醇、脂质、碳水化合物、核苷、核苷酸、核苷碱基、各种小分子或磷酸酯或硫酸酯基团)缀合。

如本文所使用，术语“氨基酸”包括天然氨基酸以及非天然氨基酸的残基。20种天然蛋白原性氨基酸由如下一个字母或三个字母的命名在本文中标识和提及：天冬氨酸(Asp：D)、异亮氨酸(Ile：I)、苏氨酸(Thr：T)、亮氨酸(Leu：L)、丝氨酸(Ser：S)、酪氨酸(Tyr：Y)、谷氨酸(Glu：E)、苯丙氨酸(Phe：F)、脯氨酸(Pro：P)、组氨酸(His：H)、甘氨酸(Gly：G)、赖氨酸(Lys：K)、丙氨酸(Ala：A)、精氨酸(Arg：R)、半胱氨酸(Cys：C)、色氨酸(Trp：W)、缬氨酸(Val：V)、谷氨酰胺(Gln：Q)、甲硫氨酸(Met：M)、天冬酰胺(Asn：N)。天然存在的氨基酸以其左旋(L)立体异构体形式存在。除非另有说明，否则本文所提及的氨基酸为L-立体异构体。术语“氨基酸”还包括带有常规氨基保护基(例如乙酰基或苄氧基羰基)的氨基酸，以及在羧基末端处被保护的天然和非天然氨基酸(例如为(C1-C6)烷基、苯基或苄基酯或酰胺；或为α-甲基苄基酰胺)。其他合适的氨基和羧基保护基是本领域技术人员已知的(参见例如Greene,T.W.；Wutz,P.G.M.,Protecting Groups In Organic Synthesis；第二版，1991,New York,John Wiley&sons,Inc.，和其中引用的文献，它们中的每一篇的内容通过引用方式以其整体并入本文)。本公开的多肽和/或多肽组合物还可以包括经修饰的氨基酸。

“非天然”氨基酸具有上文中列出的20种天然存在的氨基酸中不存在的侧链或其他特征，包括，但不限于：N-甲基氨基酸、N-烷基氨基酸、α,α-取代的氨基酸、β-氨基酸、α-羟基氨基酸、D-氨基酸和本领域已知的其他非天然氨基酸(参见，例如，Josephson et al.,(2005)J.Am.Chem.Soc.127:11727-11735；Forster,A.C.et al.(2003)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 100:6353-6357；Subtelny et al.,(2008)J.Am.Chem.Soc.130:6131-6136；Hartman,M.C.T.et al.(2007)PLoS ONE 2:e972；和Hartman et al.,(2006)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 103:4356-4361)。可用于优化本公开的多肽和/或多肽组合物的其他非天然氨基酸包括，但不限于1,2,3,4-四氢异喹啉-1-甲酸、1-氨基-2,3-氢-1H-茚-1-甲酸、高赖氨酸、高精氨酸、高丝氨酸、2-氨基己二酸、3-氨基己二酸、β-丙氨酸、氨基丙酸、2-氨基丁酸、4-氨基丁酸、5-氨基戊酸、5-氨基己酸、6-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基异丁酸、3-氨基异丁酸、2-氨基庚二酸、锁链素、2,3-二氨基丙酸、N-乙基甘氨酸、N-乙基天冬酰胺、高脯氨酸、羟赖氨酸、别羟赖氨酸、3-羟基脯氨酸、4-羟基脯氨酸、异锁链素、别异亮氨酸、N-甲基戊基甘氨酸、萘丙氨酸、鸟氨酸、戊基甘氨酸、硫代脯氨酸、正缬氨酸、叔丁基甘氨酸、苯基甘氨酸、氮杂色氨酸、5-氮杂色氨酸、7-氮杂色氨酸、4-氟苯丙氨酸、青霉胺、肌氨酸、高半胱氨酸、1-氨基环丙烷甲酸、1-氨基环丁烷甲酸、1-氨基环戊烷甲酸、1-氨基环己烷甲酸、4-氨基四氢-2H-吡喃-4-甲酸、(S)-2-氨基-3-(1H-四唑-5-基)丙酸、环戊基甘氨酸、环己基甘氨酸、环丙基甘氨酸、η-ω-甲基-精氨酸、4-氯苯丙氨酸、3-氯酪氨酸、3-氟酪氨酸、5-氟色氨酸、5-氯色氨酸、瓜氨酸、4-氯-高苯丙氨酸、高苯丙氨酸、4-氨基甲基-苯丙氨酸、3-氨基甲基-苯丙氨酸、辛基甘氨酸、正亮氨酸、氨甲环酸、2-氨基戊酸、2-氨基己酸、2-氨基庚酸、2-氨基辛酸、2-氨基壬酸、2-氨基癸酸、2-氨基十一烷酸、2-氨基十二烷酸、氨基戊酸和2-(2-氨基乙氧基)乙酸、六氢吡啶羧酸(pepecolic acid)、2-羧基氮杂环丁烷、六氟亮氨酸、3-氟缬氨酸、2-氨基-4,4-二氟-3-甲基丁酸、3-氟异亮氨酸、4-氟异亮氨酸、5-氟异亮氨酸、4-甲基-苯基甘氨酸、4-乙基-苯基甘氨酸、4-异丙基-苯基甘氨酸、(S)-2-氨基-5-叠氮基戊酸(本文中也称为“X02”)、(S)-2-氨基庚-6-烯酸(本文中也称为“X30”)、(S)-2-氨基戊-4-炔酸(本文中也称为“X31”)、(S)-2-氨基戊-4-烯酸(本文中也称为“X12”)、(S)-2-氨基-5-(3-甲基胍基)戊酸、(S)-2-氨基-3-(4-(氨基甲基)苯基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(3-(氨基甲基)苯基)丙酸、(S)-2-氨基-4-(2-氨基苯并[d]恶唑-5-基)丁酸、(S)-亮氨醇、(S)-缬氨醇、(S)-叔-亮氨醇、(R)-3-甲基丁-2-胺、(S)-2-甲基-1-苯基丙-1-胺和(S)-N,2-二甲基-1-(吡啶-2-基)丙-1-胺、(S)-2-氨基-3-(恶唑-2-基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(恶唑-5-基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(1,3,4-恶二唑-2-基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(1,2,4-恶二唑-3-基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(5-氟-1H-吲唑-3-基)丙酸和(S)-2-氨基-3-(1H-吲唑-3-基)丙酸、(S)-2-氨基-3-(恶唑-2-基)丁酸、(S)-2-氨基-3-(恶唑-5-基)丁酸、(S)-2-氨基-3-(1,3,4-恶二唑-2-基)丁酸、(S)-2-氨基-3-(1,2,4-恶二唑-3-基)丁酸、(S)-2-氨基-3-(5-氟-1H-吲唑-3-基)丁酸和(S)-2-氨基-3-(1H-吲唑-3-基)丁酸、2-(2’MeO苯基)-2-氨基乙酸、四氢3-异喹啉甲酸及其立体异构体(包括但不限于D和L异构体)。

可用于优化本公开的多肽或多肽组合物的另外的非天然氨基酸包括但不限于其中一个或多个碳结合的氢原子被氟替代的氟化氨基酸。所包括的氟原子的数量可为1个至直至并包括所有氢原子的范围内。这样的氨基酸的实例包括但不限于3-氟脯氨酸、3,3-二氟脯氨酸、4-氟脯氨酸、4,4-二氟脯氨酸、3,4-二氟脯氨酸、3,3,4,4-四氟脯氨酸、4-氟色氨酸、5-氟色氨酸、6-氟色氨酸、7-氟色氨酸及其立体异构体。

可用于优化本公开的多肽的其他非天然氨基酸包括但不限于在α-碳处被双取代的那些。这些包括其中在α-碳上的两个取代基相同的氨基酸，例如α-氨基异丁酸和2-氨基-2-乙基丁酸，以及其中取代基不同的氨基酸，例如α-甲基苯基甘氨酸和α-甲基脯氨酸。此外，α-碳上的取代基可以一起形成环，例如1-氨基环戊烷甲酸、1-氨基环丁烷甲酸、1-氨基环己烷甲酸、3-氨基四氢呋喃-3-甲酸、3-氨基四氢吡喃-3-甲酸、4-氨基四氢吡喃-4-甲酸、3-氨基吡咯烷-3-甲酸、3-氨基哌啶-3-甲酸、4-氨基哌啶亚基-4-甲酸(4-aminopiperidinnne-4-carboxylix acid)及其立体异构体。

可用于优化本公开的多肽或多肽组合物的另外的非天然氨基酸包括但不限于色氨酸的类似物，其中吲哚环系统被另一个具有0个、1个、2个、3个或4个独立地选自N、O或S的杂原子的9或10元二环环系统替代。各环系统可以是饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的。环系统可以在任何可取代的原子处被0个、1个、2个、3个或4个取代基取代。各取代基可以独立地选自H、F、Cl、Br、CN、COOR、CONRR'、氧代、OR、NRR'。各R和R'可独立地选自H、C1-C20烷基或C1-C20烷基-O-C1-20烷基。

在一些实施方案中，色氨酸的类似物(本文中也称为“色氨酸类似物”)可以用于优化本公开的多肽或多肽组合物。色氨酸类似物可以包括但不限于5-氟色氨酸[(5-F)W]、5-甲基-O-色氨酸[(5-MeO)W]、1-甲基色氨酸[(1-Me-W)或(1-Me)W]、D-色氨酸(D-Trp)、氮杂色氨酸(包括但不限于4-氮杂色氨酸、7-氮杂色氨酸和5-氮杂色氨酸)、5-氯色氨酸、4-氟色氨酸、6-氟色氨酸、7-氟色氨酸及其立体异构体。除非另有相反指示，否则本文所使用的术语“氮杂色氨酸”及其缩写“azaTrp”是指7-氮杂色氨酸。

可用于优化本公开的多肽和/或多肽组合物的经修饰的氨基酸残基包括但不限于被化学阻断(可逆地或不可逆地)；在其N末端氨基或其侧链基团上进行化学修饰；在酰胺主链上进行化学修饰，为例如N-甲基化、D(非天然氨基酸)和L(天然氨基酸)立体异构体；或其中侧链官能团被化学修饰成另一官能团的残基的那些。在一些实施方案中，经修饰的氨基酸包括但不限于甲硫氨酸亚砜；甲硫氨酸砜；天冬氨酸-(β-甲基酯)，天冬氨酸的经修饰的氨基酸；N-乙基甘氨酸，甘氨酸的经修饰的氨基酸；丙氨酸羧酰胺；和/或丙氨酸的经修饰的氨基酸。非天然氨基酸可以购自Sigma-Aldrich(St.Louis,MO)、Bachem(Torrance,CA)或其他供应商。非天然氨基酸可以进一步包括美国专利公开US 2011/0172126的表2中列出的任何非天然氨基酸，其内容通过引用以其整体并入本文。

本公开涵盖本文提出的多肽的变体和衍生物。这些包括取代、插入、缺失以及共价变体和衍生物。如本文所用，术语“衍生物”与术语“变体”同义使用，并且是指相对于参考分子或起始分子以任何方式被修饰或改变的分子。

本公开的多肽可以包括以下任意组分、特征或部分，其在本文所用的缩写包括：“Ac”和“NH2”分别表示乙酰基和酰胺化末端；“Nvl”代表正缬氨酸；“Phg”代表苯基甘氨酸；“Tbg”代表叔丁基甘氨酸；“Chg”代表环己基甘氨酸；“(N-Me)X”代表由代替变量“X”的字母或三字母氨基酸代码表示的氨基酸的N-甲基化形式，写为N-甲基-X[例如(N-Me)D或(N-Me)Asp代表天冬氨酸的N-甲基化形式或N-甲基天冬氨酸]；“azaTrp”代表氮杂色氨酸；“(4-F)Phe”代表4-氟苯丙氨酸；“Tyr(OMe)”代表O-甲基酪氨酸，“Aib”代表氨基异丁酸；“(homo)F”或“(homo)Phe”代表高苯丙氨酸；“(2-OMe)Phg”是指2-O-甲基苯基甘氨酸；“(5-F)W”是指5-氟色氨酸；“D-X”是指给定氨基酸“X”的D-立体异构体[例如，(D-Chg)代表D-环己基甘氨酸]；“(5-MeO)W”是指5-甲基-O-色氨酸；“homoC”是指高半胱氨酸；“(1-Me-W)”或“(1-Me)W”是指1-甲基色氨酸；“Nle”是指正亮氨酸；“Tiq”是指四氢异喹啉残基；“Asp(T)”是指(S)-2-氨基-3-(1H-四唑-5-基)丙酸；“(3-Cl-Phe)”是指3-氯苯丙氨酸；“[(N-Me-4-F)Phe]”或“(N-Me-4-F)Phe”是指N-甲基-4-氟苯丙氨酸；“(m-Cl-homo)Phe”是指间氯高苯丙氨酸；“(des-氨基)C”指3-硫代丙酸；“(α-甲基)D”是指α-甲基L-天冬氨酸；“2Nal”是指2-萘基丙氨酸；“(3-氨基甲基)Phe”是指3-氨基甲基-L-苯丙氨酸；“Cle”是指环亮氨酸；“Ac-吡喃”是指4-氨基-四氢-吡喃-4-羧酸；“(Lys-C16)”是指N-ε-棕榈酰基赖氨酸；“(Lys-C12)”是指N-ε-月桂基赖氨酸；“(Lys-C10)”是指N-ε-癸酰基赖氨酸(N-ε-capryl lysine)；“(Lys-C8)”是指N-ε-辛酸赖氨酸(N-ε-caprylic lysine)；“[x二甲苯基(y,z)]”是指两个含硫醇的氨基酸之间的二甲苯基桥连部分，其中x可以是m、p或o，(分别)表示使用间、对或邻二溴二甲苯以生成桥连部分，并且数字标识符y和z表示氨基酸在参与环化的氨基酸的多肽内的位置；“[环(y,z)]”是指两个氨基酸残基之间的键形成，其中数字标识符y和z表示参与该键的残基的位置；“[环-烯烃基(y,z)]”是指通过烯烃复分解在两个氨基酸残基之间形成键，其中数字标识符y和z表示参与该键的残基的位置；“[环-硫代烷基(y,z)]”是指在两个氨基酸残基之间形成硫醚键，其中数字标识符y和z表示参与该键的残基的位置；“[环-三唑基(y,z)]”是指在两个氨基酸残基之间形成三唑环，其中数字标识符y和z表示参与该键的残基的位置。“B20”是指N-ε-(PEG2-γ-谷氨酸-N-α-十八烷二酸)赖氨酸[也称为(1S,28S)-1-氨基-7,16,25,30-四氧代-9,12,18,21-四氧杂-6,15,24,29-四氮杂四十六烷-1,28,46-三羧酸。]

B20

“B28”是指N-ε-(PEG24-γ-谷氨酸-N-α-十六酰基)赖氨酸。

B28

“K14”是指N-ε-1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代环己-1-亚基)-3-甲基丁基-L-赖氨酸。所有其他符号是指标准的单字母氨基酸代码。

一些C5抑制剂多肽包含约5个氨基酸至约10个氨基酸、约6个氨基酸至约12个氨基酸、约7个氨基酸至约14个氨基酸、约8个氨基酸至约16个氨基酸、约10个氨基酸至约18个氨基酸、约12个氨基酸至约24个氨基酸或约15个氨基酸至约30个氨基酸。在一些情况下，C5抑制剂多肽包括至少30个氨基酸。

本公开的一些C5抑制剂包含C末端脂质部分。这样的脂质部分可以包括脂肪酰基(例如，饱和的或不饱和的脂肪酰基)。在一些情况下，脂肪酰基可以是棕榈酰基。

具有脂肪酰基的C5抑制剂可以包含一个或多个连接脂肪酸与肽的分子接头。这样的分子接头可以包括氨基酸残基。在一些情况下，L-γ谷氨酸残基可以用作分子接头。在一些情况下，分子接头可以包括一个或多个聚乙二醇(PEG)接头。本公开的PEG接头可以包括约1至约5个、约2至约10个、约4至约20个、约6至约24个、约8至约32个或至少32个PEG单元。

本文公开的C5抑制剂的分子量可以是约200g/mol至约600g/mol、约500g/mol至约2000g/mol、约1000g/mol至约5000g/mol、约3000g/mol至约4000g/mol、约2500g/mol至约7500g/mol、约5000g/mol至约10000g/mol或至少10000g/mol。

在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂多肽包括齐鲁考普。齐鲁考普的核心氨基酸序列([环(1,6)]Ac-K-V-E-R-F-D-(N-Me)D-Tbg-Y-azaTrp-E-Y-P-Chg-K；SEQ ID NO：1)包括15个氨基酸(全部为L-氨基酸)，包括4个非天然氨基酸[N-甲基-天冬氨酸或“(N-Me)D”、叔丁基甘氨酸或“Tbg”、7-氮杂色氨酸或“azaTrp”和环己基甘氨酸或“Chg”]；介于该多肽序列的K1和D6之间的内酰胺桥；和具有经修饰的侧链的C-末端赖氨酸残基，形成N-ε-(PEG24-γ-谷氨酸-N-α-十六酰基)赖氨酸残基(本文中也称为“B28”)。该C-末端赖氨酸侧链修饰包括聚乙二醇(PEG)间隔子(PEG24)，该PEG24连接至用棕榈酰基衍生的L-γ谷氨酸残基。

齐鲁考普的游离酸形式的分子式为C₁₇₂H₂₇₈N₂₄O₅₅，分子量为3562.23道尔顿(Da)，且精确质量为3559.97amu(见CAS号1841136-73-9)。齐鲁考普的四钠形式的分子式为C₁₇₂H₂₇₈N₂₄O₅₅Na₄。齐鲁考普的钠盐形式的化学结构显示于结构I中：

结构I

结构中的四个钠离子显示为与指定的羧酸根缔合，但其可与该分子中的任何酸性基团缔合。齐鲁考普药物物质通常以钠盐形式提供并且是冻干的。术语“齐鲁考普”涵盖齐鲁考普的游离碱形式或齐鲁考普的任何药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，本公开包括齐鲁考普的变体。在一些齐鲁考普变体中，C-末端赖氨酸侧链部分可以被改变。在一些情况下，C-末端赖氨酸侧链部分的PEG24间隔子(具有24个PEG亚基)可以包括更少或另外的PEG亚基。在其他情况下，C-末端赖氨酸侧链部分的棕榈酰基可以被另一饱和或不饱和脂肪酸取代。在其他情况下，C-末端赖氨酸侧链部分的L-γ谷氨酸接头(介于PEG和酰基之间)可以被替代性氨基酸或非氨基酸接头取代。

在一些实施方案中，C5抑制剂可以包括齐鲁考普的活性代谢物或变体。代谢物可以包括棕榈酰基尾的ω-羟基化。可以合成或可以通过将齐鲁考普前体羟基化来形成这样的变体。

在一些实施方案中，齐鲁考普变体可以包括对齐鲁考普中的核心多肽序列的修饰，其可以与齐鲁考普中的一个或多个环状或C-末端赖氨酸侧链部分特征组合使用。这样的变体可以与(SEQ ID NO：1)的核心多肽序列具有至少50％、至少55％、至少65％、至少70％、至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性。

在一些情况下，齐鲁考普变体可以通过在齐鲁考普中所使用的那些氨基酸以外的氨基酸之间形成内酰胺桥而环化。

在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂可以包括美国公开号US2017/0137468(其内容通过引用以其整体并入本文)的表1中所列的那些中的任何一种。

可以开发或修饰本公开的C5抑制剂以实现特定的结合特征。抑制剂结合可以通过测定与特定靶标的缔合和/或解离的速率来评估。在一些情况下，化合物显示出与靶标的强而快速的缔合，以及缓慢的解离速率。在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂显示出与C5强而快速的缔合。这样的抑制剂可以进一步显示出与C5的缓慢的解离速度。

本文公开的结合C5蛋白的C5抑制剂可以与C5补体蛋白结合，平衡解离常数(K_D)为约0.001nM至约0.01nM、约0.005nM至约0.05nM、约0.01nM至约0.1nM、约0.05nM至约0.5nM、约0.1nM至约1.0nM、约0.5nM至约5.0nM、约2nM至约10nM、约8nM至约20nM、约15nM至约45nM、约30nM至约60nM、约40nM至约80nM、约50nM至约100nM、约75nM至约150nM、约100nM至约500nM、约200nM至约800nM、约400nM至约1,000nM或至少1,000nM。

在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂阻断从C5形成或生成C5a。在一些情况下，补体激活的旁路途径激活之后C5a的形成或生成被阻断。在一些情况下，本公开的C5抑制剂阻断膜攻击复合物(MAC)的形成。这样的MAC形成抑制可能是由于C5抑制剂与C5b亚基结合所致。C5抑制剂与C5b亚基结合可以阻止C6结合，从而导致MAC形成被阻断。在一些实施方案中，这种MAC形成抑制发生在经典、旁路或凝集素途径激活之后。

本公开的C5抑制剂可以使用化学方法合成。在一些情况下，这样的合成消除与在哺乳动物细胞系中制造生物产品相关的风险。在一些情况下，化学合成可能较生物生产过程更简单，且更具成本效益。

在一些实施方案中，C5抑制剂(例如齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)组合物可以是包括至少一种药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂可以包括盐和缓冲剂中的至少一种。盐可以是氯化钠。缓冲剂可以是磷酸钠。氯化钠可以以约0.1mM至约1000mM的浓度存在。在一些情况下，氯化钠可以以约25mM至约100mM的浓度存在。磷酸钠可以以约0.1mM至约1000mM的浓度存在。在一些情况下，磷酸钠以约10mM至约100mM的浓度存在。

在一些实施方案中，C5抑制剂(例如齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)组合物可以包括约0.01mg/ml至约4000mg/ml的C5抑制剂。在一些情况下，C5抑制剂以约1mg/ml至约400mg/ml的浓度存在。

齐鲁考普与C5结合并且抑制C5被经典补体途径转化酶裂解，如国际公开号WO2018106859中所述，其内容通过引用以其整体并入本文。齐鲁考普还结合C5b，防止由C5的非经典裂解诱导的膜攻击复合物的形成。齐鲁考普结合和抑制活性不受临床相关人C5多态性(包括p.R885>H/C)存在的影响。与抗C5单克隆抗体抑制剂依库丽单抗不同，齐鲁考普不与表面结合的C5b-9或可溶性膜攻击复合物(sC5b-9)结合。

同位素变体

本公开的化合物可以包括一个或多个为同位素的原子。如本文所用，术语“同位素”是指具有一个或多个另外的中子的化学元素。在一些实施方案中，本公开的化合物可以是氘化的。如本文所用的术语“氘化(deuterated)”是指一个或多个氢原子已被氘同位素替代的物质。氘同位素是氢的同位素。氢的原子核包含一个质子，而氘的原子核包含一个质子和一个中子。本公开的化合物和组合物可以被氘化以改变物理性质(例如稳定性)或允许用于诊断和实验应用。

II.方法和用途

在一些实施方案中，本公开提供了涉及使用和评价本文所述的化合物和组合物用于治疗性治疗多种治疗适应症的方法。一些方法包括使用本文所述的化合物和/或组合物来调节补体活性。

治疗适应症

在一些实施方案中，本公开的方法包括使用本文公开的化合物和/或组合物来治疗治疗适应症的方法。如本文所用，术语“治疗适应症(therapeutic indication)”是指可以通过某种形式的治疗或其他治疗干预(例如，通过补体抑制剂施用)来减轻、稳定、改善、治愈或以其他方式解决的任何症状、病况、病症或疾病。治疗适应症可以包括但不限于炎性适应症、伤口、损伤、自身免疫适应症、血管适应症、神经适应症、肾相关适应症、眼适应症、心血管适应症、肺适应症和妊娠相关适应症。与补体活性和/或功能障碍相关的治疗适应症在本文中称为“补体相关适应症”。在一些实施方案中，本公开的方法可以包括通过施用本文公开的化合物和/或组合物(例如，补体抑制剂化合物)来治疗补体相关适应症。

在一些实施方案中，补体抑制剂化合物可用于治疗补体相关适应症，其中补体激活导致疾病、病症和/或病况的进展。此类补体相关适应症可以包括但不限于炎性适应症、伤口、损伤、自身免疫适应症、血管适应症、神经适应症、肾相关适应症、眼适应症、心血管适应症、肺适应症和妊娠相关适应症。补体相关适应症可以包括但不限于美国专利号10,106,579中列出的那些中的任何一种，其内容通过引用以其整体并入本文。

补体抑制剂化合物和组合物可用于治疗感染性疾病、病症和/或病况，例如在患有感染的受试者中。在一些实施方案中，可以用本文所述的补体抑制剂来治疗患有感染或处于发展败血症(sepsis)或败血综合征(septic syndrome)的风险中的受试者。在一些情况下，补体抑制剂化合物可用于治疗败血症。

也可以施用补体抑制剂化合物和组合物以改善其中需要补体抑制的临床程序的结果。此类程序可以包括但不限于移植(grafting)、移植(transplantation)、植入(implantation)、导管插入(catheterization)、插管(intubation)等。在一些实施方案中，补体抑制剂化合物和组合物用于涂覆此类程序中使用的装置、材料和/或生物材料。在一些实施方案中，管的内表面可以用化合物和组合物涂覆以在体内或离体防止通过管的体液内的补体激活，例如体外分流(extracorporeal shunting)，例如透析和心脏搭桥。

如本文所用，术语“治疗(treat)”、“治疗(treatment)”等是指病理过程的缓解或减轻。在本公开的上下文中，就其涉及下文所述的任何其他病况而言，术语“治疗(treat)”、“治疗(treatment)”等意指缓解或减轻与此类病况相关的至少一种症状，或减缓或逆转此类病况的进展或预期进展。

在疾病标志物或症状的背景下，“降低”或“减少”表示这样的水平的显著降低，通常是统计学上显著的。降低可以是例如至少10％、至少20％、至少30％、至少40％或更多，且优选下降至不具有这样的病症的个体的正常范围内所接受的水平。

在疾病标志物或症状的背景下，“增加”或“升高”意指这样的水平的显著升高，通常是统计学上显著的。增加可以是例如至少10％、至少20％、至少30％、至少40％或更多，且优选高达不具有这样的病症的个体的正常范围内所接受的水平。

可例如通过测量疾病进展、疾病缓解、症状严重程度、疼痛减轻、生活质量、维持治疗效果所需的药物剂量、疾病标志物水平或任何其他适用于正在治疗或针对其进行预防的给定疾病的可测量参数，来评估治疗功效或疾病改善。通过测量此类参数中的任意一个或参数的任意组合来监测治疗或预防功效完全在本领域技术人员的能力范围内。就多肽或其药物组合物的施用而言，“有效针对(effective against)”疾病或病症表示以临床上合适的方式施用对至少一部分患者产生有益效果，例如改善症状、治愈、减少疾病负荷、减少肿瘤质量或细胞数量、延长生命、改善生活质量、减少输血需求或其他被熟悉治疗特定类型的疾病或病症的医生通常认为是积极的效果。

当疾病状态的一个或多个参数具有显著的改善，通常为统计学上显著的，或没有恶化或没有发展出原本预期的症状时，治疗或预防效果是明显的。例如，可测量的疾病参数具有至少10％的有利变化，且优选至少20％、30％、40％、50％或更多的有利变化可以是有效治疗的指示。也可以使用本领域已知的针对给定疾病的实验动物模型来判断给定化合物或组合物的功效。当使用实验动物模型时，当观察到标志物或症状的统计学上显著的调节时，证明了治疗的功效。

本公开的化合物与另外的治疗剂可组合施用。这样的组合可以是在同一组合物中，或者所述另外的治疗剂可作为单独组合物的一部分施用或通过本文所描述的另一方法施用。

在一些实施方案中，本公开提供通过使组织与组织穿透性C5抑制剂接触来抑制组织中的C5活性的方法。如本文所用，术语“组织穿透性”是指通过组织渗透性表征的性质。与具有较差或没有组织穿透的药剂相比较，具有增强的组织穿透的药剂可以显示出更佳的组织中分布。组织穿透可以通过穿过基底膜的能力来评估。如本文所用，术语“基底膜(basement membrane)”是指将内皮细胞与其下层的组织分开的胞外基质(ECM)蛋白层。组织穿透评估可以在体内或体外进行，并可以包括使用基底膜模型。这样的模型可以包括测量化合物穿过人造基底膜的扩散。这样的模型可以包括使用被人造基底膜分开的上方和下方贮库(reservoir)。人造基底膜可以包括以下文献中描述的任何ECM凝胶膜：Arends,F.etal.2016.IntechOpen,DOI:10.5772/62519，其内容通过引用以其整体并入本文。可以制备ECM凝胶膜，以包括模仿在神经肌肉接头(neuromuscular junction)的基底层中发现的基质组分的基质组分。在一些模型中，将被测试的化合物引入上方贮库，并在下方贮库中检测化合物的扩散。

组织穿透评估可以包括视觉评估，例如通过使用荧光标记使分析物穿过基底膜的运动可视化。一些评估可以包括对从基底膜的透过侧获得的样品的生化分析。

在一些实施方案中，化合物渗透性可以使用定量全身分析(QWBA)测定。QWBA是一种使用放射线照相术评估经放射标记的分析物的分布的分析形式。在一些实施方案中，将经放射标记的化合物施用给受试者并随时间分析该化合物的组织分布。

组织穿透性C5抑制剂可以是多肽。组织穿透性C5抑制剂可以包括齐鲁考普(参见国际公开号WO2020086506，其内容通过引用以其整体并入本文)。使组织与组织穿透性C5抑制剂接触可以包括将组织穿透性C5抑制剂作为制剂的一部分施用给组织。此类制剂可以通过皮下注射施用。组织穿透性C5抑制剂(例如齐鲁考普)渗透组织和/或扩散穿过组织。组织穿透性C5抑制剂可能能够穿透基底膜。多肽组织穿透性C5抑制剂的基底膜渗透性可以大于较大蛋白(例如抗体)的基底膜渗透性。这样的优点可能是由于蛋白和抗体的大尺寸受限所致。齐鲁考普的基底膜渗透性可以比依库丽单抗的基底膜渗透性高约3倍至约5倍，相对于依库丽单抗提供了抑制组织中的C5活性和治疗相关的补体相关适应症的优点。在一些实施方案中，与依库丽单抗相比，齐鲁考普渗透性增强了在下列一种或多种中的分布：肺、心脏、肌肉、小肠、大肠、脾、肝、骨、胃、淋巴结、脂肪、脑、胰腺、睪丸和胸腺。

炎性适应症

可以用本公开的化合物和/或组合物解决的治疗适应症可以包括炎性适应症。如本文所用，术语“炎性适应症(inflammatory indication)”是指涉及免疫系统激活的治疗适应症。炎性适应症可以包括补体相关适应症。在补体系统的蛋白水解级联期间，炎症可以被上调。尽管炎症可以具有有益作用，但过度炎症可以导致多种病理(Markiewski etal.2007.Am J Pathol.17:715-27)。在一些实施方案中，本公开的补体抑制剂化合物和组合物可以用于治疗、预防或延迟炎性适应症的发展。

炎性适应症可以包括但不限于急性播散性脑脊髓炎(Acute DisseminatedEncephalomyelitis，ADEM)、急性坏死性出血性脑白质炎(Acute necrotizinghemorrhagic leukoencephalitis)、阿狄森氏病(Addison's disease)、无γ球蛋白血症(Agammaglobulinemia)、斑秃(Alopecia areata)、淀粉样变性(Amyloidosis)、强直性脊柱炎(Ankylosing spondylitis)、器官移植后的急性抗体介导排斥(Acute antibody-mediated rejection following organ transplantation)、抗GBM/抗TBM肾炎(Anti-GBM/Anti-TBM nephritis)、抗磷脂综合征(Antiphospholipid syndrome，APS)、自身免疫性血管性水肿(Autoimmune angioedema)、自身免疫性再生障碍性贫血(Autoimmune aplasticanemia)、自身免疫性家族性自主神经机能异常(Autoimmune dysautonomia)、自身免疫性肝炎(Autoimmune hepatitis)、自身免疫性高脂血症(Autoimmune hyperlipidemia)、自身免疫性免疫缺陷(Autoimmune immunodeficiency)、自身免疫性内耳病(Autoimmune innerear disease，AIED)、自身免疫性心肌炎(Autoimmune myocarditis)、自身免疫性胰腺炎(Autoimmune pancreatitis)、自身免疫性视网膜病变(Autoimmune retinopathy)、自身免疫性血小板减少性紫癜(Autoimmune thrombocytopenic purpura，ATP)、自身免疫性甲状腺疾病(Autoimmune thyroid disease)、自身免疫性荨麻疹(Autoimmune urticaria)、轴索和神经元神经病(Axonal&neuronal neuropathy)、细菌性败血症(Bacterial sepsis)和败血性休克(septic shock)、巴洛病(Balo disease)、白塞病(Behcet’s disease)、大疱性类天疱疮(Bullous pemphigoid)、心肌病(Cardiomyopathy)、Castleman病(Castlemandisease)、乳糜泻(Celiac disease)、恰加斯病(Chagas disease)、慢性疲劳综合征(Chronic fatigue syndrome)、慢性炎性脱髓鞘性多发性神经病(Chronic inflammatorydemyelinating polyneuropathy，CIDP)、慢性复发性多灶性骨髓炎(Chronic recurrentmultifocal osteomyelitis，CRMO)、查格-施特劳斯综合征(Churg-Strauss syndrome)、瘢痕性类天疱疮(Cicatricial pemphigoid)/良性黏膜类天疱疮(benign mucosalpemphigoid)、克罗恩病(Crohn’s disease)、Cogans综合征(Cogans syndrome)、冷凝集素病(Cold agglutinin disease)、先天性心脏传导阻滞(Congenital heart block)、柯萨奇病毒性心肌炎(Coxsackie myocarditis)、CREST病(CREST disease)、特发性混合性冷球蛋白血症(Essential mixed cryoglobulinemia)、脱髓鞘性神经病(Demyelinatingneuropathies)、疱疹样皮炎(Dermatitis herpetiformis)、皮肌炎(Dermatomyositis)、德维克病(Devic's disease)(视神经脊髓炎(neuromyelitis optica))、I型糖尿病(Diabetes Type I)、盘状狼疮(Discoid lupus)、德雷斯勒氏综合征(Dressler’ssyndrome)、子宫内膜异位症(Endometriosis)、嗜酸性粒细胞食管炎(Eosinophilicesophagitis)、嗜酸性粒细胞筋膜炎(Eosinophilic fasciitis)、结节性红斑(Erythemanodosum)、实验性过敏性脑脊髓炎(Experimental allergic encephalomyelitis)、伊文综合征(Evans syndrome)、纤维肌痛(Fibromyalgia)、纤维化肺泡炎(Fibrosingalveolitis)、巨细胞性动脉炎(Giant cell arteritis)(颞动脉炎(temporalarteritis))、肾小球肾炎(Glomerulonephritis)、古德帕斯综合征(Goodpasture’ssyndrome)、肉芽肿性多血管炎(Granulomatosis with Polyangiitis，GPA)见韦格纳氏肉芽肿(Wegener's)、格雷夫斯病(Graves'disease)、格林巴利综合征(Guillain-Barresyndrome)、桥本脑炎(Hashimoto's encephalitis)、桥本甲状腺炎(Hashimoto’sthyroiditis)、溶血性贫血(Hemolytic anemia)(包括非典型性溶血性尿毒综合征(atypical hemolytic uremic syndrome)和血浆疗法抗性非典型性溶血性尿毒综合征(plasma therapy-resistant atypical hemolytic-uremic syndrome))、亨-舍二氏紫癜(Henoch-Schonlein purpura)、妊娠疱疹(Herpes gestationis)、低γ球蛋白血症(Hypogammaglobulinemia)、特发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenicpurpura，ITP)、IgA肾病(IgA nephropathy)、IgG4相关硬化病(IgG4-related sclerosingdisease)、免疫调节性脂蛋白(Immunoregulatory lipoproteins)、包涵体肌炎(Inclusionbody myositis)、胰岛素依赖型糖尿病(Insulin-dependent diabetes)(1型)、间质性膀胱炎(Interstitial cystitis)、青少年型关节炎(Juvenile arthritis)、青少年型糖尿病(Juvenile diabetes)、川崎综合征(Kawasaki syndrome)、兰伯特-伊顿综合征(Lambert-Eaton syndrome)、大血管血管病变(Large vessel vasculopathy)、白细胞破碎性血管炎(Leukocytoclastic vasculitis)、扁平苔藓(Lichen planus)、硬化性苔藓(Lichensclerosus)、木样结膜炎(Ligneous conjunctivitis)、线状IgA病(Linear IgA disease，LAD)、狼疮(Lupus，SLE)、莱姆病(Lyme disease)、梅尼埃病(Meniere’s disease)、显微镜下多血管炎(Microscopic polyangiitis)、混合性结缔组织病(Mixed connective tissuedisease，MCTD)、莫伦氏溃疡(Mooren’s ulcer)、穆-哈二氏病(Mucha-Habermanndisease)、多发性内分泌肿瘤综合征(Multiple endocrine neoplasia syndromes)、多发性硬化(Multiple sclerosis)、多灶性运动神经病(Multifocal motor neuropathy)、肌炎(Myositis)、重症肌无力(Myasthenia gravis)、发作性睡病(Narcolepsy)、视神经脊髓炎(德维克病)、嗜中性粒细胞减少症(Neutropenia)、眼瘢痕性类天疱疮(Ocularcicatricial pemphigoid)、视神经炎(Optic neuritis)、骨关节炎(Osteoarthritis)、复发性风湿病(Palindromic rheumatism)、PANDAS(链球菌相关性小儿自身免疫性神经精神障碍(Pediatric Autoimmune Neuropsychiatric Disorders Associated withStreptococcus))、副肿瘤性小脑变性(Paraneoplastic cerebellar degeneration)、阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria，PNH)、帕罗综合征(Parry Romberg syndrome)、巴-特二氏综合征(Parsonnage-Turner syndrome)、睫状体扁平部炎(Pars planitis)(周围葡萄膜炎(peripheral uveitis))、天疱疮(Pemphigus)、周围神经病变(Peripheral neuropathy)、静脉周脑脊髓炎(Perivenousencephalomyelitis)、恶性贫血(Pernicious anemia)、POEMS综合征(POEMS syndrome)、结节性多动脉炎(Polyarteritis nodosa)、I型、II型和III型自身免疫多腺体综合征(TypeI,II,&III autoimmune polyglandular syndromes)、多内分泌病(Polyendocrinopathies)、风湿性多肌痛(Polymyalgia rheumatica)、多肌炎(Polymyositis)、心肌梗塞后综合征(Postmyocardial infarction syndrome)、心包切开术后综合征(Postpericardiotomy syndrome)、黄体酮皮炎(Progesterone dermatitis)、原发性胆汁性肝硬化(Primary biliary cirrhosis)、原发性硬化性胆管炎(Primarysclerosing cholangitis)、银屑病(Psoriasis)、银屑病关节炎(Psoriatic arthritis)、特发性肺纤维化(Idiopathic Pulmonary fibrosis)、坏疽性脓皮病(Pyodermagangrenosum)、纯红细胞再生障碍(Pure red cell aplasia)、雷诺现象(Raynaudsphenomenon)、反应性关节炎(Reactive arthritis)、反射性交感神经营养不良(Reflexsympathetic dystrophy)、赖特综合征(Reiter’s syndrome)、复发性多软骨炎(Relapsingpolychondritis)、不宁腿综合征(Restless legs syndrome)、腹膜后纤维化(Retroperitoneal fibrosis)、风湿热(Rheumatic fever)、类风湿性关节炎(Rheumatoidarthritis)、结节病(Sarcoidosis)、施密特综合征(Schmidt syndrome)、巩膜炎(Scleritis)、硬皮病(Scleroderma)、产志贺毒素大肠杆菌溶血-尿毒综合征(Shiga-Toxinproducing Escherichia Coli Hemolytic-Uremic Syndrome，STEC-HUS)、干燥综合征(Sjogren’s syndrome)、小血管血管病变(Small vessel vasculopathy)、精子和睾丸自身免疫(Sperm&testicular autoimmunity)、僵人综合征(Stiff person syndrome)、亚急性细菌性心内膜炎(Subacute bacterial endocarditis，SBE)、苏萨克综合征(Susac'ssyndrome)、交感性眼炎(Sympathetic ophthalmia)、大动脉炎(Takayasu’s arteritis)、颞动脉炎/巨细胞性动脉炎、血小板减少性紫癜(Thrombocytopenic purpura，TTP)、托-亨综合征(Tolosa-Hunt syndrome)、横贯性脊髓炎(Transverse myelitis)、管状自身免疫病症(Tubular autoimmune disorder)、溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis)、未分化结缔组织病(Undifferentiated connective tissue disease，UCTD)、葡萄膜炎(Uveitis)、水疱性皮肤病(Vesiculobullous dermatosis)、血管炎(Vasculitis)、白癜风(Vitiligo)和韦格纳肉芽肿病(Wegener’s granulomatosis)(也称为肉芽肿性多血管炎(GPA))。

神经肌肉炎性适应症

可以用本公开的化合物和/或组合物解决的治疗适应症可以包括神经肌肉炎性适应症。如本文所用，术语“神经肌肉炎性适应症(neuromuscular inflammatoryindication)”是指涉及神经系统、肌肉系统和这两个系统重叠或整合的区域的组分的炎性适应症。神经肌肉炎性适应症可以包括补体相关适应症。在补体系统的蛋白水解级联期间，神经肌肉炎症可以被上调。尽管炎症可能具有有益作用，但过度炎症可以导致多种病理(Markiewski et al.2007.Am J Pathol.17:715-27)。在一些实施方案中，本公开的补体抑制剂化合物和组合物可以用于治疗、预防神经肌肉炎性适应症或延迟其发展。

在一些实施方案中，本公开提供了通过向受试者施用补体抑制剂来治疗神经肌肉炎性适应症的方法。神经肌肉炎性适应症可以包括肌萎缩侧索硬化症。治疗神经肌肉炎性适应症的方法可以包括施用补体抑制剂。此类方法可以包括本文公开的补体抑制剂化合物(例如C5抑制剂化合物，例如齐鲁考普)和组合物。在一些实施方案中，补体抑制剂化合物与其他治疗剂和/或治疗方案组合施用。

用于治疗神经炎性适应症的补体抑制剂可以包括齐鲁考普。齐鲁考普可以以约0.1mg/kg至约0.3mg/kg的剂量施用。齐鲁考普可以每天施用。齐鲁考普可以通过皮下注射施用。皮下注射可以包括使用自动注射装置。自动注射(与“自行注射”同义)装置可以包括BD ULTRASAFE PLUS^TM自行施用装置(BD，Franklin Lakes，NJ)。

肌萎缩侧索硬化症(ALS)

可以用本公开的化合物和/或组合物解决的神经炎性适应症可以包括ALS。ALS，也称为Lou Gehrig病(Lou Gehrig's disease)，是一种初级运动皮质、脑干和脊髓的上和下运动神经元损失的进行性神经退行性疾病。皮质和脊髓运动神经元通常在自主运动期间将信号从脑传递到肌肉。神经元损失破坏这些信号，导致逐渐减弱和/或肌肉萎缩和自主运动能力的破坏。除了持续的虚弱，患者还经历疼痛的肌肉痉挛(muscle cramping)和肢体痉挛(limb spasticity)。受影响的个体最终损失肌肉力量、活动能力和关键的神经运动功能(说话、进食、吞咽和呼吸的能力)。随着时间的推移，患者通常需要呼吸辅助，并且大多数在诊断后2-5年内死于呼吸衰竭。只有5-10％的病例被认为是家族性的，而90-95％的病例是散发的。

已鉴定出约20种导致家族性病例的基因突变。这些包括但不限于Cu²⁺/Zn²⁺超氧化物歧化酶(SOD1)、TAR DNA结合蛋白43(TDP-43)、肉瘤融合/肉瘤易位(Fused in Sarcoma/Translocated in Sarcoma，FUS)、血管生成素(ANG)、Ataxin-2(ATXN2)、含有缬酪肽的蛋白(VCP)、视神经蛋白(Optineurin，OPTN)和在染色体9开放阅读框72(C9ORF72)中的非编码GGGGCC六核苷酸重复扩增。在一些情况下，ALS患者还会出现额颞叶痴呆(frontotemporaldementia，FTD-ALS)。

ALS诊断可以根据修订的El Escorial标准进行，如Brooks RB,et al.AmyotrophLateral Scler Other Motor Neuron Disord.2000Dec；1(5):293-9和Ludolph,A.et al.,ALS and FD,2015.Early Online:1-2中所述。根据这样的分析，在身体的延髓、颈部、胸部和腰骶部区域中评估受试者上运动神经元(UMN)和下运动神经元(LMN)损伤。UMN评估包括痉挛状态和反射亢进(hyperreflexivity)的分析。LMN评估包括对无力、萎缩和肌束震颤(fasciculation)的评估。在至少三个测试区域具有UMN和LMN损伤体征的受试者被诊断为患有“确定的”ALS。在至少两个测试区域中具有UMN和LMN损伤体征的受试者被诊断为患有“可能的”ALS。在一个区域具有UMN和LMN体征且通过肌电图(electromyography，EMG)证明在另一区域中涉及LMN的受试者被表征为患有“实验室结果支持的可能的”ALS。在一个测试区域具有UMN和LMN损伤体征或在两个或更多个区域中仅具有UMN损伤的受试者被表征为患有“可能的”ALS。在两个或更多个测试区域中仅具有LMN损伤体征的受试者被表征为患有“怀疑的”ALS。

当前的治疗不是治愈性的并且用于暂时缓解或减缓症状的进展。此类治疗包括利鲁唑(Riluzole)，其用于减少病理性谷氨酸反应。采用这种治疗报道的寿命延长未超过三个月，并且仅在早期治疗中(Bensimon G et al.,J Neurol.2002,249,609–615)。其他治疗方法包括Radicava(依达拉奉(edaravone))，其已被证明可以减缓疾病进展，但不能治愈疾病。

补体级联激活在外周和中枢ALS病理生理学中是明显的，并且与正在进行的神经炎性过程密切相关。补体激活可能暂时先于外周中的运动终板退变。补体抑制剂的使用可以被用于阻断或减缓这一过程。最近的研究已经确定了ALS患者的脊髓和脑神经元细胞、神经胶质细胞和神经肌肉接头中的MAC沉积。这些细胞产生参与经典途径激活的补体蛋白C1q和C4。在来自ALS死后供体和ALS疾病模型中使用的SOD1G93A转基因动物的运动神经元中也显示出C5a受体(C5aR1)上调。此外，已显示在ALS疾病模型中C5aR1敲除和抑制可延长动物存活期。

在一些实施方案中，本公开的方法包括通过施用补体抑制剂来治疗ALS的方法。此类补体抑制剂可以包括本文公开的化合物(例如C5抑制剂化合物，例如齐鲁考普)和组合物。可以使用根据本公开的补体抑制剂进行ALS治疗以减少、预防、稳定和/或逆转患有或怀疑患有ALS的受试者所经历的ALS的一种或多种影响。在一些实施方案中，本公开的治疗方法包括与其他治疗剂和/或治疗方案组合施用补体抑制剂。

用于治疗ALS的补体抑制剂可以包括C5抑制剂。此类C5抑制剂可以包括齐鲁考普。齐鲁考普可以以约0.1mg/kg至约0.3mg/kg的剂量施用。齐鲁考普可以每天施用。齐鲁考普可以通过皮下注射施用。皮下注射可以包括使用自动注射装置。自动注射装置可以包括BDULTRASAFE PLUS^TM自行施用装置(BD，Franklin Lakes，NJ)。

根据本公开的治疗ALS的方法可以包括评估治疗功效和/或其他治疗结果。此类评估可以在治疗之前、期间和/或之后进行。可以进行评估以监测患者症状和/或神经运动功能的变化。评估可以在临床访视期间或在家中进行。一些评估可以由接受治疗的受试者进行，本文称为“自我评估”。可以使用智能设备(例如，智能手表、手机、计算机等)进行自我评估。治疗功效的测量可以包括但不限于修订的ALS功能评分量表(ALSFRS-R)的评估；肺活量的评估；通过手持测力仪(HHD)进行的评估；双侧手握力的评估；和声音分析。

在一些实施方案中，对ALS治疗方法进行的评估包括身体和/或神经学检查。一些评估可以包括生命体征评估。一些评估可以包括身高和体重评估。一些评估可以包括临床实验室评估。一些评估可以包括爱丁堡认知和行为ALS筛查(Edinburgh Cognitive andBehavioral ALS Screen，ECAS)。一些评估可以包括哥伦比亚自杀严重程度评定量表(Columbia Suicide Severity Rating Scale，C-SSRS)。

在一些实施方案中，对ALS治疗方法进行的评估包括从接受治疗的受试者收集一个或多个样品。此类受试者样品可以包括生物样品。样品可以包括但不限于血液样品、血浆样品、血清样品、尿液样品、脊髓液样品或脑脊液(CSF)样品。一些受试者样本可以包括DNA。在一些实施方案中，针对一种或多种生物标志物分析受试者样品。生物标志物可以包括神经丝加工和/或轴索神经变性的生物标志物(本文称为“神经轴索变性生物标志物”)。此类生物标志物可以包括但不限于磷酸化神经丝重链(pNfH)和神经丝轻链(NfL)。生物标志物可以包括神经营养因子(neurotrophin)受体p75细胞外结构域(p75ECD)。在一些实施方案中，生物标志物包括神经炎症的生物标志物(本文称为“神经炎症生物标志物”)。神经炎症生物标志物可以包括但不限于单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、壳三糖酶-1(CHIT1)和壳多糖酶-3样蛋白1(YKL-40)。生物标志物可以包括补体组分C5或补体活性的生物标志物(本文称为“补体活性生物标志物”)。补体活性生物标志物可以包括C5的裂解产物。补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9(sC5b-9)、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

可以根据标准方法在受试者或从受试者获得的生物样品中检测生物标志物。在一些实施方案中，通过免疫测定来检测生物标志物。如本文所用，术语“免疫测定”是指使用抗体(例如用于结合和/或检测抗体特异性靶标)的任何形式的科学分析。免疫测定可以包括酶联免疫测定(ELISA)。免疫测定可以使用固体(例如，使用固定的表面、板或孔)或基于溶液的(例如，使用溶液中的珠子或其他抗体包被的颗粒)平台进行。在一些实施方案中，使用基于表面等离子共振(SPR)的平台检测生物标志物。在一些实施方案中，补体活性生物标志物分析可以使用商业测定或试剂盒(例如，来自Quidel Corporation，San Diego，CA的单一或多重分析测定)进行。

在一些实施方案中，受试者生物标志物评估用于制备ALS生物标志物谱。如本文所用，术语“ALS生物标志物谱(ALS biomarker profile)”是指一组生物标志物评估，其中生物标志物与ALS相关(例如，由于与疾病或疾病结果的相关性)。ALS生物标志物谱可以用于评估疾病严重程度。ALS生物标志物谱随时间的变化可以用于监测疾病状态的变化(即稳定、改善或下降)。在一些实施方案中，稳定的ALS生物标志物谱(即，不随时间变化)可以用于指示疾病状态没有变化。在一些实施方案中，ALS生物标志物谱的变化可以指示疾病状态的改善或下降。在一些实施方案中，ALS生物标志物谱随时间的变化可以用于确定疾病状态改善或下降的速率。

在一些实施方案中，受试者在补体抑制剂治疗之前表现出升高的ALS疾病严重程度和/或以特定速率增加的ALS疾病严重程度。用根据本公开的补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗此类受试者可以稳定或降低ALS疾病严重程度和/或降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。受试者ALS疾病严重程度的变化可以通过ALSFRS-R测量。

在一些实施方案中，受试者在补体抑制剂治疗之前表现出降低的呼吸功能和/或呼吸功能以特定速率下降。用根据本公开的补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗此类受试者可以稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。受试者呼吸功能的变化可以通过慢肺活量(SVC)评估。

在一些实施方案中，受试者在补体抑制剂治疗之前表现出降低的肌肉力量和/或以特定速率下降的肌肉力量。用根据本公开的补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗此类受试者可以稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。受试者肌肉力量的变化可以通过手持测力仪(HHD)评估。

在一些实施方案中，受试者在补体抑制剂治疗之前表现出降低的言语能力和/或以特定速率下降的言语能力。用根据本公开的补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗此类受试者可以稳定或改善受试者言语能力和/或降低受试者言语能力下降的特定速率。受试者言语能力可以通过评估发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音的一项或多项来评估。

在一些实施方案中，本公开的方法包括通过施用补体抑制剂来治疗患有或怀疑患有重症肌无力或全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis)(本文统称为“MG”)的受试者的ALS的方法。此类补体抑制剂可以包括本文公开的化合物(例如C5抑制剂化合物，例如齐鲁考普)和组合物。可以进行此类治疗以减少、预防、稳定和/或逆转受试者经历的ALS和/或MG的一种或多种影响。患有或怀疑患有MG的受试者可以通过对至少一种自身抗体的阳性测试来确定。所述至少一种自身抗体可以包括以下的一种或多种：抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4(LRP4)、抗集聚蛋白和抗肌肉相关受体酪氨酸激酶。检测受试者的此类自身抗体的方法可以根据本领域已知的方法进行(例如，参见Rivner et al.,2017.Muscle Nerve.55(3):430-2；Takahashi et al.,2016.BMC Neurology.16:229；Tzartos et al.,2014.Ann Clin Transl Neurol.1(2):80-7；Amador et al.,2016.Neuromuscul Disord.26(6):342-6；和Mantovani,et al.,2014.JNeuroimmunol.2014.276(1-2):213-8，其每一个的内容通过引用以其整体并入本文)。

在一些实施方案中，本公开提供了用于治疗患有或怀疑患有ALS的受试者的方法中的包含补体抑制剂的组合物。此类组合物可以减少、预防、稳定和/或逆转受试者经历的ALS的一种或多种影响。所包含的补体抑制剂可以包括C5抑制剂(例如，齐鲁考普)。受试者ALS疾病严重程度在治疗前可以升高和/或可以以特定速率增加。用根据本公开的组合物进行的治疗可以稳定或降低受试者ALS疾病严重程度和/或降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。受试者ALS疾病严重程度的变化可以通过ALSFRS-R测量。受试者呼吸功能在治疗前可以降低和/或可以以特定速率下降。用组合物治疗可以稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。受试者呼吸功能的变化可以通过SVC评估。受试者肌肉力量在治疗前可以降低和/或以特定速率下降。治疗中使用的组合物可以稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。受试者肌肉力量的变化可以通过HHD测量。组合物可以用于稳定或改善受试者言语能力和/或受试者言语能力下降的速率。受试者言语能力可以包括以下的一项或多项：发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音。组合物可以用于稳定或改善受试者ALS生物标志物谱和/或受试者ALS生物标志物谱变化的速率。受试者ALS生物标志物谱可以包括以下的一种或多种：pNfH、NfL、C5和补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。可以在受试者CSF、血浆、和/或血清中检测补体活性生物标志物。组合物的剂量和/或方案可以基于在先组合物施用之后从受试者获得的CSF、血浆和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物水平进行调整。在先组合物施用之后从受试者获得的CSF、血浆和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。受试者可以患有或可以怀疑患有重症肌无力。此类受试者可能对至少一种自身抗体(例如，抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4、抗集聚蛋白和/或抗肌肉相关受体酪氨酸激酶)呈阳性。受试者可以具有受损的血脑屏障功能(例如，通过受试者白蛋白商评估)。可以基于修订的El Escorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

在一些实施方案中，根据本公开治疗ALS的方法包括治疗具有或怀疑具有受损的血脑屏障功能(例如，由于补体活性升高)的ALS受试者。可以通过测量受试者CSF和血浆血清中的白蛋白水平来进行血脑屏障(BBB)损伤的评估。CSF白蛋白水平与血浆血清白蛋白水平的比率称为“白蛋白商(albumin quotient)”或“白蛋白-Q(albumin-Q)”。BBB损伤增加导致白蛋白从血浆区室进入CSF增加，这增加了白蛋白商。白蛋白商值大于9指示BBB损伤。在一些实施方案中，具有其他补体相关适应症的受试者可以具有BBB损伤(例如，如通过白蛋白商测定评估)。本公开的方法包括使用补体抑制剂(例如，C5抑制剂)施用来治疗此类受试者的方法。在一些实施方案中，补体抑制剂包括齐鲁考普。

根据本公开治疗患有ALS的受试者的方法可以包括治疗通过修订的El Escorial标准所确定的患有确定的或可能的ALS的受试者。

在一些实施方案中，本公开提供了包含补体抑制剂的组合物，其用于治疗患有补体相关适应症的受试者的方法中，其中所述受试者具有或怀疑具有受损的血脑屏障。此类组合物可以减少、预防、稳定和/或逆转补体相关适应症的一种或多种影响。所包含的补体抑制剂可以包括C5抑制剂。所包含的补体抑制剂可以包括齐鲁考普。补体相关适应症可以包括神经肌肉炎性适应症。神经肌肉炎性适应症可以包括ALS。可以基于修订的ElEscorial标准来确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。可以通过白蛋白商分析来评估受试者的血脑屏障损伤。

在一些实施方案中，本公开提供了通过检测和/或定量与此类受试者或来自此类受试者的生物样品相关的补体活性来诊断受试者的ALS的方法。诊断可以基于检测和/或定量的与受试者生物样品相关的补体活性。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。此类补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量补体活性生物标志物。

在一些实施方案中，本公开提供了通过检测和/或定量在初始或早期时间点或时间段与此类受试者(或源自其的生物样品)相关的补体活性并与来自后续时间点或时间段的类似分析结果进行比较来监测受试者的ALS的方法。此类比较可以用于通过评估初始/早期时间点或时间段与随后时间点或时间段之间补体活性变化来监测受试者的ALS。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量补体活性生物标志物。根据本公开监测受试者的ALS的方法可以对如通过修订的El Escorial标准所确定的患有确定的或可能的ALS的受试者进行。

在一些实施方案中，本公开提供了将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者分层为两组或更多组的方法。此类方法可以包括检测和/或定量与受试者(或来自其的生物样品)相关的补体活性，并基于检测和/或定量的补体活性将每个受试者分配至所述两组或更多组中的至少一组。补体活性检测和/或定量可以包括检测和/或定量补体活性生物标志物。此类补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。可以在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量补体活性生物标志物。可以基于CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平将受试者分配至治疗组。如本文所用，术语“治疗组”是指特征在于选择、资格、适合性或以其他方式指定进行特定治疗(例如，医学治疗)的一组患者或受试者。可以基于与未患有ALS的受试者的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平相比升高的补体活性生物标志物水平将受试者分配至治疗组。治疗组的特征可以在于有资格进行补体抑制剂治疗。此类补体抑制剂治疗可以包括齐鲁考普治疗。根据本公开的将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者进行分层的方法可以对如通过修订的ElEscorial标准所确定的患有确定的或可能的ALS的受试者进行。

在一些实施方案中，本公开提供了选择进行补体抑制剂治疗的受试者的方法，其中受试者患有或怀疑患有ALS。此类方法可以包括评估受试者样品中生物标志物的存在或水平。此类生物标志物可以包括但不限于神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和补体活性生物标志物。可以基于受试者样品中评估的生物标志物的存在或水平选择进行补体抑制剂治疗的受试者。受试者样品可以包括血浆和/或CSF样品。神经轴索变性生物标志物可以包括但不限于pNfH和/或NfL。神经炎症生物标志物可以包括但不限于MCP-1、CHIT1和YKL-40。补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、sC5b-9、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。用于治疗所选受试者的补体抑制剂可以包括齐鲁考普。受试者样品中Nfl、pNfH、CHIT1、C5a和sC5b-9的一种或多种的水平相对于来自未患有ALS的受试者(非ALS受试者)的受试者样品中的水平可以升高。此类受试者样品可以包括CSF。来自患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的CSF样本中的C3a、Bb和/或Ba的水平可以升高，其中受试者的BBB功能受损[例如，通过白蛋白商分析(CSF白蛋白:血浆血清白蛋白比)确定]。此类水平相对于非ALS受试者CSF样品中的水平可以升高。来自BBB受损的ALS受试者的血浆样品中的C3a水平相对于非ALS受试者血浆中的水平可以升高。

在一些实施方案中，本公开提供了治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法，此类方法包括根据上述任何方法(例如，通过评估受试者样品中的神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和/或补体活性生物标志物的存在或水平)来选择进行补体抑制剂治疗的受试者，和向受试者施用补体抑制剂。所施用的补体抑制剂可以包括齐鲁考普。

在一些实施方案中，本公开提供了包含补体抑制剂的组合物，其用于治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法中，所述方法包括评估受试者样品中生物标志物的存在或水平和基于评估选择进行组合物治疗的受试者。生物标志物可以包括以下的一种或多种：神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和补体活性生物标志物。受试者样品可以包括血浆和/或CSF样品。神经轴索变性生物标志物可以包括pNfH和/或NfL。神经炎症生物标志物可以包括MCP-1、CHIT1和/或YKL-40。补体活性生物标志物可以包括C5a、C5b-9、sC5b-9、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和/或因子H。ALS受试者样品(例如，CSF样品)中的生物标志物水平相对于来自未患有ALS的受试者的样品中的水平可以升高。受试者样品可以获自血脑屏障功能受损(例如，通过白蛋白商分析评估)的受试者。受试者样品(例如血浆样品)中的C3a、Bb和/或Ba相对于来自未患有ALS的受试者的样品中的水平可以升高。受试者样品中的C3a水平相对于来自未患有ALS的受试者的样品中的水平可以升高。组合物补体抑制剂可以包括C5抑制剂。C5抑制剂可以包括齐鲁考普。

根据本文所述的治疗方法向受试者施用的补体抑制剂(例如，齐鲁考普)的剂量和/或方案可以基于在治疗之前从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物的水平来确定。在治疗之前从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中可以检测的此类补体活性生物标志物可以包括但不限于C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。补体抑制剂(例如，齐鲁考普)施用的剂量和/或方案可以在一次或多次在先施用之后基于一次或多次在先施用之后从受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物水平进行调整。

在一些实施方案中，对受试者CSF中的C5a、sC5b-9和/或Bb水平进行评估并将其用于ALS诊断、受试者分层(例如，至特定治疗组)、ALS监测和确定补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗的剂量和/或方案中的一种或多种。此类评估可以包括与健康受试者(未患有ALS)的水平进行比较。在一些实施方案中，可以对受试者血清中补体活性生物标志物(例如，C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H)的水平进行评估并将其用于以下的一项或多项：ALS诊断、受试者分层(例如，至特定治疗组)、ALS监测和确定补体抑制剂(例如，齐鲁考普)治疗的剂量和/或方案中的一种或多种。此类评估可以包括与健康受试者(未患有ALS)的水平进行比较。

在一些实施方案中，本公开的ALS治疗方法包括通过向受试者施用齐鲁考普来治疗ALS的方法。齐鲁考普在经典途径激活后以剂量依赖性方式抑制C5a形成，并在经典和旁路补体途径激活后抑制C5b形成(如通过补体激活表面上的C5b-9或MAC沉积所测量的)。(美国专利号9,937,222)。齐鲁考普施用可以是皮下(SC)施用。齐鲁考普可以以以下剂量施用：约0.01mg/kg(mg齐鲁考普/kg受试者体重)至约1.0mg/kg、约0.02mg/kg至约2.0mg/kg、约0.05mg/kg至约3.0mg/kg、约0.10mg/kg至约4.0mg/kg、约0.15mg/kg至约4.5mg/kg、约0.20mg/kg至约5.0mg/kg、约0.30mg/kg kg至约7.5mg/kg、约0.40mg/kg至约10mg/kg、约0.50mg/kg至约12.5mg/kg、约0.1mg/kg至约0.6mg/kg、约1.0mg/kg至约15mg/kg、约2.0mg/kg至约20mg/kg、约5.0mg/kg至约25mg/kg、约10mg/kg至约45mg/kg、约20mg/kg至约55mg/kg、约30mg/kg至约65mg/kg、约40mg/kg至约75mg/kg、约50mg/kg至约150mg/kg、约100mg/kg至约250mg/kg、约200mg/kg至约350mg/kg、约300mg/kg至约450mg/kg、约400mg/kg至约550mg/kg、或约500mg/kg至约1000mg/kg。

在一些实施方案中，齐鲁考普可以以约0.10mg/kg至约0.42mg/kg的剂量施用。

本公开的方法可以包括以约0.1mg/kg至约0.3mg/kg的每日剂量施用齐鲁考普。在一些实施方案中，齐鲁考普以0.3mg/kg的每日剂量施用。

齐鲁考普施用可以通过自行施用。齐鲁考普施用可以包括使用预填充注射器。自行施用可以包括使用自行施用装置。自行施用装置可以包括预填充注射器或与预填充注射器结合。

齐鲁考普可以以溶液提供。齐鲁考普溶液可以包括水性溶液。齐鲁考普溶液可以包括磷酸盐缓冲盐水(PBS)。齐鲁考普溶液可以不含防腐剂。齐鲁考普可以以以下浓度存在于溶液中：约0.01mg/mL至约1mg/mL、约0.05mg/mL至约2mg/mL、约1mg/mL至约5mg/mL、约2mg/mL至约10mg/mL、约4mg/mL至约16mg/mL、约5mg/mL至约20mg/mL、约8mg/mL至约24mg/mL、约10mg/mL至约30mg/mL、约12mg/mL至约32mg/mL、约14mg/mL至约34mg/mL、约16mg/mL至约36mg/mL、约18mg/mL至约38mg/mL、约20mg/mL至约40mg/mL、约22mg/mL至约42mg/mL、约24mg/mL至约44mg/mL、约26mg/mL至约46mg/mL、约28mg/mL至约48mg/mL、约30mg/mL至约50mg/mL、约35mg/mL至约55mg/mL、约40mg/mL至约60mg/mL、约45mg/mL至约75mg/mL、约50mg/mL至约100mg/mL、约60mg/mL至约200mg/mL、约70mg/mL至约300mg/mL、约80mg/mL至约400mg/mL、约90mg/mL至约500mg/mL或约100mg/mL至约1000mg/mL。

在一些实施方案中，自行施用装置包括齐鲁考普溶液。自行施用装置可以包括以下体积的齐鲁考普溶液：约0.010mL至约0.500mL、约0.050mL至约0.600mL、约0.100mL至约0.700mL、约0.150mL至约0.810mL、约0.200mL至约0.900mL、约0.250mL至约1.00mL、约0.300mL至约3.00mL、约0.350mL至约3.50mL、约0.400mL至约4.00mL、约0.450mL至约4.50mL、约0.500mL至约5.00mL、约0.550mL至约10.0mL、约0.600mL至约25.0mL、约0.650mL至约50.0mL、约0.700mL至约60.0mL、约0.750mL至约75.0mL、约0.800mL至约80.0mL、约0.850mL至约85.0mL、约0.900mL至约90.0mL、约0.950mL至约95.0mL、约1.00mL至约100mL、约2.00mL至约200mL、约5.00mL至约500mL、约10.0mL至约750mL、约25.0mL至约800mL、约50.0mL至约900mL或约100mL至约1000mL。

制剂

在一些实施方案中，本公开的化合物或组合物(例如药物组合物)被配制成水性溶液。在一些情况下，水性溶液进一步包括一种或多种盐和/或一种或多种缓冲剂。盐可以包括氯化钠，其浓度可以是约0.05mM至约50mM、约1mM至约100mM、约20mM至约200mM或约50mM至约500mM。其他溶液可以包括至少500mM的氯化纳。在一些情况下，水性溶液包括磷酸钠。水性溶液中可以包括以下浓度的磷酸钠：约0.005mM至约5mM、约0.01mM至约10mM、约0.1mM至约50mM、约1mM至约100mM、约5mM至约150mM或约10mM至约250mM。在一些情况下，使用至少250mM的磷酸钠浓度。

本公开的组合物可以包括以下浓度的C5抑制剂：约0.001mg/mL至约0.2mg/mL、约0.01mg/mL至约2mg/mL、约0.1mg/mL至约10mg/mL、约0.5mg/mL至约5mg/mL、约1mg/mL至约20mg/mL、约15mg/mL至约40mg/mL、约25mg/mL至约75mg/mL、约50mg/mL至约200mg/mL或约100mg/mL至约400mg/mL。在一些情况下，组合物包括浓度为至少400mg/mL的C5抑制剂。

本公开的组合物可以包括浓度为大约、约或恰好任意以下值的C5抑制剂：0.001mg/mL、0.2mg/mL、0.01mg/mL、2mg/mL、0.1mg/mL、10mg/mL、0.5mg/mL、5mg/mL、1mg/mL、20mg/mL、15mg/mL、40mg/mL、25mg/mL、75mg/mL、50mg/mL、200mg/mL、100mg/mL或400mg/mL。在一些情况下，组合物包括浓度为至少40mg/mL的C5抑制剂。

在一些实施方案中，本公开的组合物包含含有至少水和C5抑制剂(例如，环状C5抑制剂多肽)的水性组合物。水性C5抑制剂组合物可以进一步包括一种或多种盐和/或一种或多种缓冲剂。在一些情况下，水性组合物包括水、环状C5抑制剂多肽、盐和缓冲剂。

水性C5抑制剂制剂的pH水平可以是约2.0至约3.0、约2.5至约3.5、约3.0至约4.0、约3.5至约4.5、约4.0至约5.0、约4.5至约5.5、约5.0至约6.0、约5.5至约6.5、约6.0至约7.0、约6.5至约7.5、约7.0至约8.0、约7.5至约8.5、约8.0至约9.0、约8.5至约9.5或约9.0至约10.0。

在一些情况下，本公开的化合物和组合物是根据良好生产规范(GMP)和/或现行GMP(cGMP)制备的。用于实施GMP和/或cGMP的指南可以从美国食品药品管理局(FDA)、世界卫生组织(WHO)和国际协调会议(ICH)中的一个或多个获得。

剂量和施用

为了治疗人类受试者，可以将C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)配制为药物组合物。根据待治疗的受试者、施用方式和所需的治疗类型(例如，防止、预防或治疗)，可以以与这些参数相符的方式配制C5抑制剂。在以下文献中找到了此类技术的概述：Remington:The Science and Practice of Pharmacy，第21版，LippincottWilliams&Wilkins,(2005)；和Encyclopedia of Pharmaceutical Technology,J.Swarbrick和J.C.Boylan编,1988-1999,Marcel Dekker,New York，其每一篇均通过引用并入本文。

可以以治疗有效量提供C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)。在一些情况下，可以通过施用以下剂量的一种或多种C5抑制剂来达到C5抑制剂的治疗有效量：约0.1mg至约1mg、约0.5mg至约5mg、约1mg至约20mg、约5mg至约50mg、约10mg至约100mg、约20mg至约200mg或至少200mg。

在一些实施方案中，可以基于受试者的体重向此类受试者施用治疗量的C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)。在一些情况下，以下述剂量施用C5抑制剂：约0.001mg/kg至约1.0mg/kg、约0.01mg/kg至约2.0mg/kg、约0.05mg/kg至约5.0mg/kg、约0.03mg/kg至约3.0mg/kg、约0.01mg/kg至约10mg/kg、约0.1mg/kg至约2.0mg/kg、约0.2mg/kg至约3.0mg/kg、约0.4mg/kg至约4.0mg/kg、约1.0mg/kg至约5.0mg/kg、约2.0mg/kg至约4.0mg/kg、约1.5mg/kg至约7.5mg/kg、约5.0mg/kg至约15mg/kg、约7.5mg/kg至约12.5mg/kg、约10mg/kg至约20mg/kg、约15mg/kg至约30mg/kg、约20mg/kg至约40mg/kg、约30mg/kg至约60mg/kg、约40mg/kg至约80mg/kg、约50mg/kg至约100mg/kg或至少100mg/kg。这样的范围可以包括适合施用给人类受试者的范围。剂量水平可以高度取决于病况的性质、药物功效、患者的状况、从业者的判断以及施用的频率和方式。在一些实施方案中，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体可以以约0.01mg/kg至约10mg/kg的剂量施用。在一些情况下，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体可以以约0.1mg/kg至约3mg/kg的剂量施用。

在一些情况下，以调节的浓度提供C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)，以在样品、生物系统或受试者中达到期望的C5抑制剂水平(例如受试者的血浆水平)。在一些情况下，样品、生物系统或受试者中期望的C5抑制剂浓度可以包括以下浓度：约0.001μM至约0.01μM、约0.005μM至约0.05μM、约0.02μM至约0.2μM、约0.03μM至约0.3μM、约0.05μM至约0.5μM、约0.01μM至约2.0μM、约0.1μM至约50μM、约0.1μM至约10μM、约0.1μM至约5μM、约0.2μM至约20μM、约5μM至约100μM或约15μM至约200μM。在一些情况下，受试者血浆中期望的C5抑制剂浓度可以是约0.1μg/mL至约1000μg/mL。受试者血浆中期望的C5抑制剂浓度可以是约0.01μg/mL至约2μg/mL、约0.02μg/mL至约4μg/mL、约0.05μg/mL至约5μg/mL、约0.1μg/mL至约1.0μg/mL、约0.2μg/mL至约2.0μg/mL、约0.5μg/mL至约5μg/mL、约1μg/mL至约5μg/mL、约2μg/mL至约10μg/mL、约3μg/mL至约9μg/mL、约5μg/mL至约20μg/mL、约10μg/mL至约40μg/mL、约30μg/mL至约60μg/mL、约40μg/mL至约80μg/mL、约50μg/mL至约100μg/mL、约75μg/mL至约150μg/mL或至少150μg/mL。在其他实施方案中，以足以达到以下最大血清浓度(C_max)的剂量施用C5抑制剂：至少0.1μg/mL、至少0.5μg/mL、至少1μg/mL、至少5μg/mL、至少10μg/mL、至少50μg/mL、至少100μg/mL或至少1000μg/mL。

在一些实施方案中，C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)每天以足以递送每kg受试者体重约0.1mg/天至约60mg/天的剂量施用。在一些情况下，每次剂量所获得的C_max为约0.1μg/mL至约1000μg/mL。在此类情况下，剂量之间的曲线下面积(AUC)可以是约200μg*hr/mL至约10,000μg*hr/mL。

根据本公开的一些方法，以达到期望效果所需的浓度提供C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)。在一些情况下，以使给定反应或过程减少一半所需的量提供本公开的化合物和组合物。实现这种减少所需的浓度在本文中称为半数最大抑制浓度或“IC₅₀”。或者，可以以使给定反应、活性或过程增加一半所需的量提供本公开的化合物和组合物。这样的增加所需的浓度在本文中称为半数最大有效浓度或“EC₅₀”。

C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)可以以总计占组合物总重量的0.1-95重量％的量存在。在一些情况下，通过静脉内(IV)施用提供C5抑制剂。在一些情况下，通过皮下(SC)施用提供C5抑制剂。

在一些情况下，C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)的SC施用可以提供优于IV施用的优点。SC施用可以允许患者提供自行治疗。此类治疗的优点可以在于患者可在自己家里对自己提供治疗，避免前往提供者或医疗机构的需求。此外，SC治疗可以使患者避免与IV施用相关的长期并发症，例如感染、静脉通路的丧失、局部血栓形成和血肿。在一些实施方案中，SC治疗可以增加患者依从性、患者满意度、生活质量、减少治疗费用和/或药物需求。

在一些情况下，每日SC施用提供1-3剂量、2-3剂量、3-5剂量或5-10剂量内达到的稳态C5抑制剂浓度。在一些情况下，约0.1mg/kg至约0.3mg/kg的每日SC剂量可以实现大于或等于2.5μg/mL的持续C5抑制剂水平和/或大于90％的补体活性抑制。

在SC施用后，C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)可以表现出缓慢的吸收动力学(达到最大观察浓度的时间为大于4至8小时)和高生物利用度(从约75％至约100％)。

在一些实施方案中，改变剂量和/或施用以调节受试者或受试者体液(例如血浆)中C5抑制剂水平的半衰期(t_1/2)。在一些情况下，t_1/2为至少1小时、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少10小时、至少12小时、至少16小时、至少20小时、至少24小时、至少36小时、至少48小时、至少60小时、至少72小时、至少96小时、至少5天、至少6天、至少7天、至少8天、至少9天、至少10天、至少11天、至少12天、至少2周、至少3周、至少4周、至少5周、至少6周、至少7周、至少8周、至少9周、至少10周、至少11周、至少12周或至少16周。

在一些实施方案中，C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)可以表现出长终末t_1/2。延长的终末t_1/2可以归因于广泛的靶标结合和/或额外的血浆蛋白结合。在一些情况下，血浆和全血中C5抑制剂的t_1/2值均大于24小时。在一些情况下，C5抑制剂在人全血中于37℃孵育16小时后不丧失功能活性。

在一些实施方案中，改变剂量和/或施用以调节C5抑制剂的稳态分布容积。在一些情况下，C5抑制剂的稳态分布容积为约0.1mL/kg至约1mL/kg、约0.5mL/kg至约5mL/kg、约1mL/kg至约10mL/kg、约5mL/kg至约20mL/kg、约15mL/kg至约30mL/kg、约10mL/kg至约200mL/kg、约20mL/kg至约60mL/kg、约30mL/kg至约70mL/kg、约50mL/kg至约200mL/kg、约100mL/kg至约500mL/kg或至少500mL/kg。在一些情况下，调节C5抑制剂的剂量和/或施用以确保稳态分布容积等于总血液体积的至少50％。在一些实施方案中，C5抑制剂分布可以限于血浆区室。

在一些实施方案中，C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)表现出以下总清除率：约0.001mL/hr/kg至约0.01mL/hr/kg、约0.005mL/hr/kg至约0.05mL/hr/kg、约0.01mL/hr/kg至约0.1mL/hr/kg、约0.05mL/hr/kg至约0.5mL/hr/kg、约0.1mL/hr/kg至约1mL/hr/kg、约0.5mL/hr/kg至约5mL/hr/kg、约0.04mL/hr/kg至约4mL/hr/kg、约1mL/hr/kg至约10mL/hr/kg、约5mL/hr/kg至约20mL/hr/kg、约15mL/hr/kg至约30mL/hr/kg或至少30mL/hr/kg。

可以通过改变剂量和/或施用(例如皮下施用)来调节维持受试者(例如受试者血清)中C5抑制剂的最大浓度的时间段(T_max值)。在一些情况下，C5抑制剂的T_max值为约1分钟至约10分钟、约5分钟至约20分钟、约15分钟至约45分钟、约30分钟至约60分钟、约45分钟至约90分钟、约1小时至约48小时、约2小时至约10小时、约5小时至约20小时、约10小时至约60小时、约1天至约4天、约2天至约10天或至少10天。

在一些实施方案中，可以施用C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)而没有脱靶效应。在一些情况下，即使浓度小于或等于300μM，C5抑制剂也不抑制hERG(人ether-a-go-go相关基因)。SC注射剂量水平高达10mg/kg的C5抑制剂可以耐受良好，并且不导致心血管系统(例如，心室复极延长的风险增加)和/或呼吸系统的任何不良作用。

可以使用在另一物种中观察到的无观察到的不良作用水平(NOAEL)确定C5抑制剂剂量。此类物种可以包括但不限于猴、大鼠、兔和小鼠。在一些情况下，可以通过在其他物种中观察到的NOAEL进行异速增长律(allometric scaling)，来确定人等效剂量(HED)。在一些情况下，HED导致的治疗余量(therapeutic margin)为约2倍至约5倍、约4倍至约12倍、约5倍至约15倍、约10倍至约30倍或至少30倍。在一些情况下，通过使用在灵长类动物中的暴露量和人类中估计的人C_max水平来确定治疗余量。

在一些实施方案中，本公开的C5抑制剂在延长的补体系统抑制是有害的感染的情况下允许快速清除期。

可以修改根据本公开的C5抑制剂施用，以降低对受试者的潜在临床风险。脑膜炎奈瑟球菌(Neisseria meningitidis)感染是C5抑制剂(包括依库丽单抗)的已知风险。在一些情况下，通过采取一项或多项预防步骤将脑膜炎奈瑟球菌的感染风险降至最低。这样的步骤可以包括排除可能已经被这些细菌定殖的受试者。在一些情况下，预防步骤可以包括与一种或多种抗生素共同施用(coadministration)。在一些情况下，可以共同施用环丙沙星(ciprofloxacin)。在一些情况下，可以以约100mg至约1000mg(例如500mg)的剂量经口共同施用环丙沙星。

在一些实施方案中，以以下频率施用C5抑制剂(例如，齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)：每小时、每2小时、每4小时、每6小时、每12小时、每18小时、每24小时、每36小时、每72小时、每84小时、每96小时、每5天、每7天、每10天、每14天、每周、每两周、每3周、每4周、每月、每2个月、每3个月、每4个月、每5个月、每6个月、每年或至少每年。在一些情况下，C5抑制剂每天施用一次，或在一天中以合适的间隔以两次、三次或更多次的亚剂量施用。

在一些实施方案中，C5抑制剂以多个每日剂量施用。在一些情况下，C5抑制剂每天施用，持续7天。在一些情况下，C5抑制剂每天施用，持续7至100天。在一些情况下，C5抑制剂每天施用，持续至少100天。在一些情况下，C5抑制剂每天施用，持续无限期。

可以通过在一段时间内(例如在5分钟、10分钟、15分钟、20分钟或25分钟的时间段内)进行输注来递送静脉内递送的C5抑制剂。可以例如有规律地，例如每小时、每天、每周、每双周(即每两周)，重复施用，持续一个月、两个月、三个月、四个月或多于四个月。在最初的治疗方案之后，可以不那么频繁地施用治疗。例如，在每两周施用持续三个月后，可以每月一次重复施用，持续六个月或一年或更长时间。C5抑制剂施用可以使结合或任何生理学上有害的过程(例如在患者的细胞、组织、血液、尿液或其他区室中)减少、降低、增加或改变至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％或更多。

在施用全剂量的C5抑制剂和/或C5抑制剂组合物之前，可对患者施用较小的剂量(例如全剂量的5％)并监测不良作用，例如过敏反应或输注反应，或升高的血脂水平或血压。在另一实例中，可监测患者的不想要的免疫刺激作用，例如增加的细胞因子(例如TNF-α、IL-1、IL-6或IL-10)水平。

遗传易感性在一些疾病或病症的发展中起作用。因此，可以通过家族史分析，或者例如筛查一种或多种遗传标志物或变体来鉴定需要C5抑制剂的患者。健康护理提供者(例如医生或护士)或家庭成员可以在开立或施用本公开的治疗组合物之前分析家族史信息。

III.试剂盒和装置

在一些实施方案中，本公开提供了试剂盒和装置。此类试剂盒和装置可以包括本文所述的任何化合物或组合物。在一个非限制性实例中，可以包括齐鲁考普。

试剂盒

在一些实施方案中，本公开的化合物和/或组合物作为试剂盒的一部分提供。此类试剂盒可以用于实施治疗本文所述的补体相关适应症的方法。

试剂盒组分可以包装在液体(例如水性或有机)介质中或以干燥(例如冻干)形式进行包装。试剂盒可以包括容器，所述容器可以包括但不限于小瓶、试管、烧瓶、瓶、注射器或袋子。试剂盒容器可以用于等分试样、储存、保存、隔离和/或保护试剂盒组分。试剂盒组分可以一起或分开包装。一些试剂盒可以包括无菌的、药学上可接受的缓冲剂和/或其他稀释剂(例如磷酸盐缓冲盐水)的容器。在一些实施方案中，试剂盒包括干燥形式的试剂盒组分的容器以及单独的用于溶解干燥组分的溶液的容器。在一些实施方案中，试剂盒包括用于施用一或多种试剂盒组分的注射器。

当多肽以干燥粉末的形式提供时，预期在试剂盒中提供10微克至1000毫克的多肽，或者至少或至多那些量的多肽。

容器可以包括至少一个小瓶、试管、烧瓶、瓶、注射器和/或其他容器，其中可以放置(优选适当地分配)多肽制剂。试剂盒也可以包括用于无菌的、药学上可接受的缓冲剂和/或其他稀释剂的容器。

试剂盒可以包括使用试剂盒组分和使用未包括在试剂盒中的任何其他试剂的说明书。说明书可以包括可实施的变通方案。

在一些实施方案中，本公开提供了包括具有齐鲁考普的注射器和说明书的试剂盒。注射器可以是自行注射装置。自行注射装置可以包括BD ULTRASAFE PLUS^TM自行施用装置(BD，Franklin Lakes，NJ)。试剂盒可以包括一种或多种用于处理注射器伤口的物品。此类物品可以包括但不限于酒精擦拭物和伤口敷料(例如棉球、网眼垫、绷带、胶带、纱布等)。试剂盒可以进一步包括用于处置用过的试剂盒组分的处理容器。处理容器可以设计成用于处置尖锐物体，例如针头和注射器。一些试剂盒可以包括用于处置尖锐物体的说明书。

在一些实施方案中，本公开的试剂盒包括呈粉末形式或溶液形式的齐鲁考普。溶液可以是水性溶液。溶液可以包括PBS。齐鲁考普溶液可以包括约4mg/ml至约200mg/ml的齐鲁考普。在一些实施方案中，齐鲁考普溶液包括约40mg/ml的齐鲁考普。齐鲁考普溶液可以包含防腐剂。在一些实施方案中，齐鲁考普溶液不含防腐剂。

装置

在一些实施方案中，本公开的化合物和组合物可以作为装置的一部分提供。设备可以包括预填充注射器。如本文所用，“预填充注射器(pre-loaded syringe)”是指用于注射施用的递送装置，其中将所述装置与包括在装置内的待注射的有效载荷(payload)一同制造、制备、包装、储存和/或分配。由于环肽的稳定性，环肽抑制剂尤其适合在预填充注射器中制造、储存和分配。此外，预填充注射器尤其适用于自行施用(即，在没有医疗专业人员帮助的情况下由受试者施用)。自行施用代表受试者无需依赖可能位于一定距离或因其他方式难以到达的医疗专业人员而获得治疗的便利方式。这使得自行施用选项非常适合于需要频繁注射(例如，每日注射)的治疗。

在一些实施方案中，本公开提供了用于递送补体抑制剂的预填充注射器。预填充注射器可以包括配制为用于注射的补体抑制剂组合物。组合物可以配制为用于皮下注射。补体抑制剂可以包括环肽。在一些实施方案中，预填充注射器包括C5抑制剂。C5抑制剂可以包括齐鲁考普或其变体或衍生物。齐鲁考普可以以磷酸盐缓冲盐水溶液的形式被包括在预填充注射器中。齐鲁考普可以以约4mg/ml至约400mg/ml的浓度存在于溶液中。在一些实施方案中，预填充注射器包括40mg/ml齐鲁考普的PBS溶液。在一些实施方案中，注射器可以包括约0.1ml至约1ml或约0.5ml至约2ml的体积。溶液可以包括防腐剂。

预填充注射器可以包括ULTRASAFE PLUS^TM被动式针头保护装置(BectonDickenson,Franklin Lakes,NJ)。其他预填充注射器包括注射笔。注射笔可以是多剂量笔。一些预填充注射器包括针头。在一些实施方案中，针规(needle gauge)为约20号至约34号。针规可以为约29号至约31号。

IV.定义

组合施用：如本文所用，术语“以组合施用”或“组合施用”是指受试者在同一时间或在一段时间内同时暴露于所施用的两种或更多种药剂，使得受试者在某个时间点同时暴露于这两者和/或使得每种药剂对患者的作用可以存在重叠。在一些实施方案中，在一种或多种药剂的至少一个剂量的约24小时、12小时、6小时、3小时、1小时、30分钟、15分钟、10分钟、5分钟或1分钟内施用一种或多种其他药剂的至少一个剂量。在一些实施方案中，施用以重叠剂量方案进行。如本文所用，术语“剂量方案(dosage regimen)”是指在时间上间隔开的多个剂量。此类剂量可以定期发生或可以在施用中包括一次或多次间断。生物利用度：如本文所用，术语“生物利用度”是指向受试者施用的给定量的化合物(例如，C5抑制剂)的全身利用度。可以通过在向受试者施用化合物后测量未改变形式的化合物的曲线下面积(AUC)或最大血清或血浆浓度(C_max)来评估生物利用度。AUC是当相对于沿横坐标(X轴)的时间对沿纵坐标(Y轴)的化合物血清或血浆浓度绘图时曲线下面积的测定值。通常，可以使用本领域普通技术人员已知和/或如以下文献中所述的方法来计算特定化合物的AUC：G.S.Banker,Modern Pharmaceutics,Drugs and the Pharmaceutical Sciences,v.72,Marcel Dekker,New York,Inc.,1996，其内容通过引用以其整体并入本文。

生物系统：如本文所用，术语“生物系统”是指细胞、一组细胞、组织、器官、一组器官、细胞器、生物液、生物信号传导途径(例如受体激活的信号传导途径、电荷激活的信号传导途径、代谢途径、细胞信号传导途径等)、一组蛋白、一组核酸或一组分子(包括但不限于生物分子)，其在细胞膜、细胞区室、细胞、细胞培养物、组织、器官、器官系统、生物体、多细胞生物体、生物液或任何生物实体中执行至少一项生物学功能或生物学任务。在一些实施方案中，生物系统是包括细胞内和/或细胞外信号传导生物分子的细胞信号传导途径。在一些实施方案中，生物系统包括蛋白水解级联(例如，补体级联)。

缓冲剂：如本文所用，术语“缓冲剂”是指为了抵抗pH变化而在溶液中使用的化合物。此类化合物可以包括但不限于乙酸、己二酸、乙酸钠、苯甲酸、柠檬酸、苯甲酸钠、马来酸、磷酸钠、酒石酸、乳酸、偏磷酸钾、甘氨酸、碳酸氢钠、磷酸钾、柠檬酸钠和酒石酸钠。

清除率：如本文所用，术语“清除率”是指从生物系统或流体清除特定化合物的速度。

化合物：如本文所用，术语“化合物”是指不同的化学实体。在一些实施方案中，特定化合物可以一种或多种异构体或同位素形式(包括但不限于立体异构体、几何异构体和同位素)存在。在一些实施方案中，仅以单一的此类形式提供或使用化合物。在一些实施方案中，以两种或更多种此类形式的混合物(包括但不限于立体异构体的外消旋混合物)的形式提供或使用化合物。本领域技术人员将理解，一些化合物以不同形式存在，显示出不同的性质和/或活性(包括但不限于生物学活性)。在此类情况下，根据本公开选择或避免使用化合物的特定形式在本领域技术人员的普通技能范围内。例如，含有不对称取代的碳原子的化合物可以以旋光形式或消旋形式分离。

环状或环化的：如本文所用，术语“环状”是指存在连续环。连续环可以由化合物不同区域之间的化学键(本文也称为“环键”)形成。环状分子不需要是圆形的，只需结合以形成亚基的连续链即可。环状多肽可以包括当两个氨基酸通过桥连部分连接时形成的“环状环”。环状环包含沿着桥接氨基酸之间存在的多肽的氨基酸。环状环可以包括2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个或更多个氨基酸。

下游事件：如本文所用，术语“下游”或“下游事件”是指在另一事件之后和/或由于另一事件而发生的任何事件。在一些情况下，下游事件是在C5裂解和/或补体激活之后并作为其结果发生的事件。此类事件可以包括但不限于C5裂解产物的产生、MAC激活、溶血和溶血相关疾病(例如PNH)。

平衡解离常数：如本文所用，术语“平衡解离常数”或“K_D”是指代表两种或更多种试剂(例如，两种蛋白)可逆分离的趋势的值。在一些情况下，K_D表示主要试剂(primaryagent)的浓度，在该浓度下次要试剂(secondary agent)的总水平的一半与主要试剂缔合。

半衰期：如本文所用，术语“半衰期”或“t_1/2”是指给定过程或化合物浓度达到最终值一半所需的时间。“终末半衰期”或“终末t_1/2”是指因子的浓度达到拟平衡后因子血浆浓度降低一半所需的时间。

同一性：如本文所用，术语“同一性”在提及多肽或核酸时是指序列之间的比较关系。所述术语用于描述聚合序列之间的序列相关性程度，并且可以包括由特定数学模型或计算机程序(即“算法”)解决的具有缺口比对(如果有的话)的匹配单体组分的百分比。相关多肽的同一性可以通过已知方法容易地计算。此类方法包括但不限于其他人先前所描述的那些方法(Lesk,A.M.,ed.,Computational Molecular Biology,Oxford UniversityPress,New York,1988；Smith,D.W.,ed.,Biocomputing:Informatics and GenomeProjects,Academic Press,New York,1993；Griffin,A.M.et al.,ed.,ComputerAnalysis of Sequence Data,Part 1,Humana Press,New Jersey,1994；von Heinje,G.,Sequence Analysis in Molecular Biology,Academic Press,1987；Gribskov,M.et al.,ed.,Sequence Analysis Primer,M.Stockton Press,New York,1991；和Carillo et al.,Applied Math,SIAM J,1988,48,1073)。

抑制剂：如本文所用，术语“抑制剂”是指阻断特定事件、细胞信号、化学途径、酶促反应、细胞过程、两个或更多个实体之间的相互作用、生物事件、疾病、病症或病况的发生或引起其减少的任何试剂。

初始加载剂量：如本文所用，“初始加载剂量”是指治疗剂的第一剂量，其可以不同于一个或多个后续剂量。初始加载剂量可以用于在施用随后剂量之前达到治疗剂的初始浓度或活性水平。

静脉内：如本文所用，术语“静脉内”是指血管内的区域。静脉内施用通常是指通过注射到血管(例如静脉)中将化合物递送到血液中。

体外：如本文所用，术语“体外”是指在人工环境中(例如，在试管或反应容器中、在细胞培养物中、在培养皿中等)发生的事件，而不是在生物体(例如动物、植物或微生物)内发生的事件。

体内：如本文所用，术语“体内”是指在生物体(例如动物、植物或微生物或其细胞或组织)内发生的事件。

内酰胺桥：如本文所用，术语“内酰胺桥”是指在分子中的化学基团之间形成桥的酰胺键。在一些情况下，在多肽的氨基酸之间形成内酰胺桥。

接头：本文所用的术语“接头”是指用于连接两个或更多个实体的一组原子(例如10-1,000个原子)、(一个或多个)分子或其他化合物。接头可以通过共价或非共价(例如，离子或疏水)相互作用连接此类实体。接头可以包括两个或更多个聚乙二醇(PEG)单元的链。在一些情况下，接头可以是可裂解的。

每分钟通气量：如本文所用，术语“每分钟通气量”是指每分钟从受试者的肺吸入或呼出的空气的体积。

非蛋白原性的：如本文所用，术语“非蛋白原性的”是指任何非天然蛋白，例如具有非天然组分如非天然氨基酸的那些蛋白。

患者：如本文所用，“患者”是指可能寻求或需要治疗、要求治疗、正在接受治疗、将要接受治疗的受试者，或正处于受过培训的专业人员针对特定疾病或病况进行的护理下的受试者。

药物组合物：如本文所用，术语“药物组合物”是指具有至少一种活性成分(例如，C5抑制剂)的组合物，所述活性成分的形式和量允许该活性成分为治疗上有效的。

药学上可接受的：在本文中使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断范围内适合与人类和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症且与合理的收益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。

药学上可接受的赋形剂：如本文所用，短语“药学上可接受的赋形剂”是指药物组合物中存在的除活性剂(例如，活性剂齐鲁考普和/或其活性代谢物或变体)以外的且在患者中具有基本上无毒且无炎性的性质的任何成分。在一些实施方案中，药学上可接受的赋形剂是能够悬浮或溶解活性剂的溶媒。赋形剂可以包括例如抗粘剂、抗氧化剂、粘合剂、包衣剂、压缩助剂、崩解剂、染料(着色剂)、软化剂(emollient)、乳化剂、填充剂(稀释剂)、成膜剂或包衣剂、调味剂、香料、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮剂或分散剂、甜味剂和水合水。示例性的赋形剂包括但不限于：丁羟甲苯(BHT)、碳酸钙、磷酸钙(磷酸氢钙)、硬脂酸钙、交联羧甲基纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露醇、甲硫氨酸、甲基纤维素、对羟基苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶化淀粉、对羟基苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、淀粉羟乙酸钠、山梨醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C和木糖醇。

血浆区室：如本文所用，术语“血浆区室”是指血浆所占据的血管内空间。

盐：如本文所用，术语“盐”是指由阳离子与结合的阴离子组成的化合物。此类化合物可以包括氯化钠(NaCl)或其他类型的盐，包括但不限于乙酸盐、氯化物、碳酸盐、氰化物、亚硝酸盐、硝酸盐、硫酸盐和磷酸盐。术语“盐”也可以用于指本文所述的多肽的盐形式(例如，齐鲁考普盐)。此类多肽盐可以包括齐鲁考普钠盐。

样品：如本文所用，术语“样品”是指从来源获取和/或提供用于分析或处理的等分试样或部分。在一些实施方案中，样品来自生物来源(本文称为“生物样品”)，例如组织、细胞或组分部分(例如，体液，包括但不限于血液、粘液、淋巴液、滑液、脑脊液、脊髓液、唾液、羊水、脐带血、尿液、阴道液和精液)。在一些实施方案中，样品可以是或包括从整个生物体或其组织、细胞或组分部分的亚组或其级分或部分(包括但不限于例如血浆；血清；脊髓液；淋巴液；皮肤、呼吸道、肠道和泌尿生殖道的外部部分；泪液；唾液；乳汁；血细胞；肿瘤或器官)制备的匀浆、裂解物或提取物。在一些实施方案中，样品是或包括培养基，例如营养肉汤或凝胶，其可以包含细胞组分例如蛋白。在一些实施方案中，“初始”样品是来源的等分试样。在一些实施方案中，对初始样品进行一个或多个处理(例如，分离、纯化等)步骤，以制备用于分析或其他用途的样品。

皮下：如本文所用，术语“皮下”是指皮肤下面的空间。皮下施用是在皮肤下递送化合物。

受试者：如本文所用，术语“受试者”是指可以例如出于实验、诊断、预防和/或治疗目的向其施用或施加根据本公开的化合物或方法的任何生物体。典型的受试者包括动物(例如哺乳动物，如小鼠、大鼠、兔、猪受试者、非人灵长类动物和人)。

基本上：如本文所用，术语“基本上”是指表现出目标特征或性质的全部或接近全部广度或程度的定性情况。生物学领域的普通技术人员将理解，生物学和化学现象极少(如果有过的话)达到完成和/或进行到完全或达到或避免绝对结果。因此，本文中使用术语“基本上”来涵盖许多生物学和化学现象中固有的潜在的完整性缺乏。

治疗有效量：如本文所用，术语“治疗有效量”是指待递送的药剂(例如，C5抑制剂)的量，其当施用给患有或易患疾病、病症和/或病况的受试者时足以治疗所述疾病、病症和/或病况；改善所述疾病、病症和/或病况的症状；诊断、预防所述疾病、病症和/或病况；和/或延迟所述疾病、病症和/或病况的发作。

潮气量：如本文所用，术语“潮气量”是指呼吸之间(在没有任何额外努力的情况下)置换的正常肺空气体积。

T_max：如本文所用，术语“T_max”是指在受试者或流体中维持化合物的最大浓度的时间段。

治疗：如本文所用，术语“治疗”是指部分或完全减轻、改进、改善、缓解特定的疾病、病症和/或病况，延迟其发作，抑制其发展，减轻其严重程度和/或降低其一种或多种症状或特征的发生率。出于降低发展出与疾病、病症和/或病况相关的病理的风险的目的，可以向未表现出该疾病、病症和/或病况的迹象的受试者和/或仅表现出该疾病、病症和/或病况的早期迹象的受试者施用治疗。

治疗剂量：如本文所用，“治疗剂量”是指在解决或减轻治疗适应症的过程中施用的治疗剂的一个或多个剂量。可以调节治疗剂量以维持治疗剂在体液或生物系统中的期望浓度或活性水平。

分布容积：如本文所用，术语“分布容积”或“V_dist”是指以与血液或血浆中相同的浓度在体内包含化合物总量所需的流体体积。分布容积可以反映化合物在血管外组织中存在的程度。分布容积大反映了与血浆蛋白组分相比化合物结合组织组分的趋势。在临床环境中，V_dist可用于确定用以获得化合物稳态浓度的该化合物的加载剂量。

等同方案和范围

本领域技术人员仅使用常规实验就将认识到或能够确定根据本文所述的发明的具体实施方案的许多等同方案。本公开的范围不旨在限于以上描述，而是如所附权利要求书中所述。

在权利要求中，例如“一(a/an)”和“该/所述(the)”的冠词可以意指一个或多于一个，除非相反地指出或以其他方式从上下文中明显可见。如果组成员中的一个、多于一个或所有成员存在于指定的产品或过程中、在指定的产品或过程中使用、或以其他方式与指定的产品或过程相关，那么认为满足了在组的一个或多个成员之间包括“或”的权利要求或描述，除非指示相反情形或以其他方式从上下文显而易见。本发明包括其中组的刚好一个成员存在于给定产品或方法中、用于给定产品或方法中或者以其他方式与给定产品或方法相关的实施方案。本发明包括其中多于一个或全部组成员都存在于给定产品或方法中、用于给定产品或方法中或者以其他方式与给定产品或方法相关的实施方案。

还应当指出，术语“包含”旨在是开放式的，并且允许但不要求包括额外的要素或步骤。因此，当在本文中使用术语“包含”时，因此也涵盖和公开了术语“由……组成”。

在给出范围的情况下，包括端点。此外，应当理解，除非另外指示或以其他方式从上下文和本领域普通技术人员的理解显而易见，以范围表述的数值可以取在本发明的不同实施方案中所述范围内的任何具体数值或子范围，至该范围的下限单位的十分之一，除非上下文另外清楚地指明。

另外，应当理解，落入现有技术内的本发明的任何特定实施方案可以明确地从任意一项或多项权利要求排除。因为这样的实施方案被视为本领域技术人员已知的，所以可以排除它们，即使所述排除并未在本文中明确地阐明。本发明的组合物的任何特定实施方案(例如，由其编码的任何核酸或蛋白；任何生产方法；任何使用方法；等)可出于任何原因从任意一项或多项权利要求排除，无论是否与现有技术的存在相关。

所有引用的来源，例如，在本文中引用的参考文献、出版物、数据库、数据库条目和论文，均通过引用并入本申请中，即便没有在引文中明确地说明。在引用的来源的描述与本申请发生冲突的情况下，应当以本申请中的描述为准。

章节和表的标题并非旨在进行限制。

实施例

实施例1：齐鲁考普水溶液的制备

使用标准固相Fmoc/tBu方法合成多肽。使用标准方案用Rink酰胺树脂在Liberty自动化微波肽合成仪(CEM,Matthews NC)上进行合成，尽管也可以使用没有微波能力的其他自动化合成仪。所有氨基酸均获自商业来源。使用的偶联剂是2-(6-氯-1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基铵六氟磷酸盐(HCTU)，并且碱是二异丙基乙胺(DIEA)。用95％TFA、2.5％TIS和2.5％水从树脂裂解多肽3小时，并通过用乙醚沉淀进行分离。使用C18柱，在30min内用从20％至50％的乙腈/水0.1％TFA梯度，在反相制备型HPLC上纯化粗制的多肽。收集含有纯多肽的部分并冻干，并通过LC-MS对所有多肽进行分析。

将如国际公开号WO2017105939和WO2018106859中所述的齐鲁考普(SEQ ID NO:1)(另参见CAS号:1841136-73-9)制备为包含15个氨基酸(其中4个为非天然氨基酸)、乙酰化N-末端和C-末端羧酸的环肽。核心肽的C-末端赖氨酸具有修饰的侧链，形成N-ε-(PEG24-γ-谷氨酸-N-α-十六碳酰基)赖氨酸残基。该修饰的侧链包括与L-γ谷氨酸残基连接的聚乙二醇间隔子(PEG24)，所述L-γ谷氨酸残基用棕榈酰基进行衍生化。齐鲁考普的环化是经由L-Lys1和L-Asp6的侧链之间的内酰胺桥。齐鲁考普中的所有氨基酸均为L-氨基酸。齐鲁考普的分子量为3562.23g/mol，化学式为C₁₇₂H₂₇₈N₂₄O₅₅。

与依库丽单抗一样，齐鲁考普阻断C5蛋白水解裂解为C5a和C5b。与依库丽单抗不同，齐鲁考普还可以与C5b结合并阻断C6结合，其阻止了MAC的后续组装。

将齐鲁考普制备为注射用水溶液，其在pH 7.0的50mM磷酸钠和75.7mM氯化钠的制剂中含有40mg/mL的齐鲁考普。根据现行的良好生产规范(cGMP)，将所得的组合物用于制备医疗产品，所述医疗产品包括1mL玻璃注射器和置于具有指凸缘和柱塞杆的针头安全性自行施用装置(ULTRASAFE PLUS^TM,Becton Dickenson,Franklin Lakes,NJ)内的29号、1/2英寸立桩针头(staked needle)。

实施例2：齐鲁考普施用和储存

通过皮下(SC)或静脉内(IV)注射施用齐鲁考普，并基于受试者体重以mg/kg为单位来调节施用的剂量(剂量体积)。这由一组重量范围(weight bracket)对准的一组固定剂量实现。总之，人给药支持43-109kg的宽重量范围(参见表2)。注射体积为约0.4mL至0.8mL。根据医疗监护仪器，按个例调整具有较高体重(>109kg)的受试者。

表2：按体重组的剂量呈现

在2℃至8℃[36°F至46°F]下储存齐鲁考普。一旦分配给受试者，将齐鲁考普在受控的室温(20℃至25℃[68°F至77°F])下储存至多30天，并保护其免受过度温度波动源(例如高热或暴露于光)的影响。优选地，避免在室温以外储存齐鲁考普。在这些条件下，齐鲁考普可以储存至多30天。

实施例3：齐鲁考普治疗ALS

使用齐鲁考普的ALS治疗作为随机、双盲和安慰剂对照研究的一部分进行，随后是开放标签的长期扩展。研究参与者选自被诊断为患有ALS的个体的广泛患者群体，其包括家族性和散发性ALS患者群体中被诊断为可能的(possible)、可能的(probable)、实验室支持的可能的或确定的ALS的个体(根据修订的El Escorial标准，参见Ludolph,A.et al.,ALSand FD,2015.Early Online:1-2)，其自无力发作后少于或等于三年，具有大于50％的预测肺活量(基于性别、年龄和身高)，并且在筛选时不存在或稳定给药利鲁唑或依达拉奉(至少一个或多个治疗周期)多于或等于30天。

齐鲁考普和匹配的安慰剂以无菌、不含防腐剂的水溶液形式提供，其预填充至置于自行施用装置内的具有29号、1/2英寸立桩针头的1mL玻璃注射器(BD ULTRASAFE PLUS^TM自行施用装置，BD，Franklin Lakes，NJ)中。基于受试者体重范围调整填充量以达到正确的mg/kg剂量范围。指导受试者每天自行施用SC剂量。

在治疗期期间，受试者以预定的时间间隔返回诊所以评价安全性、耐受性和功效。该研究的主要终点是修订的ALS功能评分量表(ALSFRS-R)得分从基线到治疗24周的变化。从研究期间采集的样品评估C5、齐鲁考普和任何齐鲁考普代谢物的血浆和CSF浓度。还通过溶血测定和检测C5裂解产物的测定来测试样品的补体活性。

还使用在临床访视期间进行的各种评估来确定治疗功效。这些包括慢肺活量(SVC)评估、通过手持测力仪(HHD)进行的肌肉力量评估、言语能力评估(包括对以下一项或多项的评估：发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音)和ALS生物标志物谱评估[包括对以下一种或多种的水平的评估：神经丝重链(pNfH)、神经丝轻链(NfL)、神经营养因子受体p75细胞外结构域(p75ECD)、可溶性C5b-9和C5裂解产物]。一些功效确定包括可以使用智能设备(手表、手机、计算机等)进行的基于家庭的自我评估。

在临床访视期间还进行其他实验室评估。这些包括血液学组评估(血细胞比容、血红蛋白、血小板计数、红细胞指数、总红细胞、总白细胞以及白细胞和分类)；血液化学组/肝功能测试(丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、白蛋白、碱性磷酸酶、碳酸氢盐、血尿素氮、钙、氯化物、肌酐、葡萄糖、镁、磷酸盐、钾、钠、总胆红素和总蛋白以及尿酸)；和尿液分析(白蛋白、胆红素、血液、透明度、颜色、葡萄糖、酮、硝酸盐、pH、蛋白、比重、尿胆素原和白细胞筛查)。还进行了标准12导联ECG以审查所获得的描记。进行身体和神经学检查以检查头/颈、眼、耳、鼻/喉咙、心血管系统、肺、腹部、肌肉骨骼系统、中枢神经系统、四肢和皮肤。

用齐鲁考普治疗的受试者表现出降低的或稳定的疾病严重程度。

实施例4：对CSF中补体C5活性的直接评估

测定从用或不用齐鲁考普治疗的人类受试者获得的脑脊液(CSF)样品的补体活性和相关生物标志物。通过将CSF样品与C5耗尽的正常人类血清合并并测试促进红细胞裂解的能力(基于CSF衍生的C5)来评估CSF样品中的C5活性水平。还分析了CSF样品的齐鲁考普水平、C5水平和C5活性生物标志物水平[例如，可溶性C5b-9(sC5b-9)]。来自经齐鲁考普治疗的受试者的样品表现出较低的溶血活性水平和较低的C5活性生物标志物水平，水平与治疗依赖性齐鲁考普抑制剂水平相关。

实施例5：中枢神经系统补体合成

将人类肝脏移植到C5缺陷小鼠中以使其能够表达人类C5。在随后的时间点，对小鼠实施安乐死，并分析血清和脑组织样品的人类C5水平。在小鼠血清中检测到人类C5，但在脑组织中未检测到。这些结果表明C5不穿过血脑屏障(BBB)并且在脑中的表达归因于局部合成。

实施例6：补体活性生物标志物分析

评估来自患有ALS(n＝20)或未患有ALS(n＝14)的人类受试者的CSF和匹配血清样品的C5水平和补体活性生物标志物水平。根据制造商的说明，使用商业试剂盒(目录号ab125963；Abcam，Cambridge，UK)通过酶联免疫吸附测定(ELISA)评估C5水平。补体活性生物标志物通过Quidel Complement Multiplex LLOQ测定(Quidel Corporation，SanDiego，CA)进行评估。结果如表3所示。在该表中，p值表示相对于相应健康对照水平的显著性水平(由曼-惠特尼检验确定)。

表3：生物标志物水平

与来自健康对照的样品相比，ALS CSF样品中补体活性生物标志物C5a、sC5b-9和Bb的水平显著升高。在来自患有ALS的受试者的血清样品中，测试的所有补体活性生物标志物的水平均显著升高。有趣的是，在健康受试者和患有ALS的受试者之间没有观察到C5 CSF或血清水平的统计学显著差异，这表明C5在消耗后在CSF和血清区室中得到补充。C5的CSF水平比血清水平低约600倍。总体而言，这些结果表明受试者血清中的补体活性生物标志物和受试者CSF中的C5a、sC5b-9和Bb水平与ALS相关。

计算每个受试者的CSF白蛋白水平与血浆白蛋白水平的比率以获得白蛋白商值，作为BBB渗透性的量度。白蛋白商值表明47％的患ALS受试者和仅7％的健康受试者患有BBB损伤(大于9.0)。基于白蛋白商测定比较BBB受损的受试者(图1)和完整BBB(图2)的受试者之间的CSF生物标志物水平，以评价补体活性和主要补体激活途径(经典、旁路或凝集素途径)。在BBB受损的受试者的CSF中，旁路激活途径的标志物(C3a、Ba和Bb)显著升高(图1)。有趣的是，在相应的血浆中进行了类似的生物标志物分析，仅观察到经典或凝集素激活途径的标志物，而未观察到旁路途径的标志物。

实施例7：亚群分析

用来自患有可能的ALS的人类受试者的CSF和匹配的血浆样品进行补体活性生物标志物分析，并将结果与来自患有确定的ALS的受试者和健康对照的结果进行比较(如上文实施例6中所述)。患有“确定的”或“可能的”ALS的受试者是根据Brooks RB,etal.Amyotroph Lateral Scler Other Motor Neuron Disord.2000Dec；1(5):293-9所述的修订的El Escorial标准确定的。与从中获得和分析样品的受试者相关的完整详细信息如表4所示。

表4：群体特征

在分析的血浆样品中，与健康对照相比，C5a(图3)、sC5b9(图4)、C3a(图5)和C4a(图6)水平在患有ALS的受试者(确定的和可能的合并)中显著升高。Ba(图7)、Bb(图8)、fH(图9)和fI(图10)生物标志物水平的差异在健康对照血浆和来自受试者ASL(确定和可能的ALS合并)的血浆之间不显著。在CSF中，与来自健康对照的CSF相比，仅C5a(图11)和sC5b9(图12)水平在确定的或可能的ALS中显著升高，而C3a(图13)、C4a(图14)、Ba(图15)、Bb(图16)、fH(图17)和fI(图18)生物标志物水平没有。

还在患有确定的或可能的ALS的受试者和健康对照受试者之间比较了白蛋白商值(参见图19)。36％的患有确定的或可能的ALS的受试者确定为患有血脑屏障损伤，而健康对照组仅为7％。

总体而言，CSF中产生的C5a和sC5b-9水平与血浆中观察到的那些不相关。这一发现与在不存在BBB损伤的情况下观察到的CSF中补体裂解产物的升高一起，支持了ALS中的局部CNS补体活性，这与外周中的活性无关。

在来自健康对照受试者和患有可能的或确定的ALS的受试者的CSF样品中还分析了与神经轴索变性(NfL和pNfH)和神经炎症[壳三糖酶-1(CHIT1)和壳多糖酶-3样蛋白1(YKL-40)]相关的生物标志物水平。与健康对照相比，在来自患有可能的或确定的ALS的受试者的CSF中的NfL和pNfH水平均升高(图20)。与健康对照相比，来自患有ALS的受试者的CSF样品中的CHIT1水平也升高，而对YKL-40水平未观察到统计学差异(图21)。

实施例8：扩展的亚群分析

用来自健康人类对照受试者、患有可能的ALS的人类受试者或患有确定的ALS的人类受试者的另外的CSF和匹配血浆样品重复前一实施例中描述的补体活性生物标志物分析。患有“确定的”或“可能的”ALS的受试者是根据Brooks RB,et al.Amyotroph LateralScler Other Motor Neuron Disord.2000 Dec；1(5):293-9中所述的修订的El Escorial标准确定的。在扩展分析中，患有“可能的”ALS的受试者包括：(1)基于在至少两个区域存在上运动神经元(UMN)和下运动神经元(LMN)体征进行诊断的受试者，其中UMN体征与LMN体征相接(UMN signs rostral to LMN signs)；和(2)基于在一个区域存在UMN和LMN体征以及通过肌电图(EMG)证明在另一个区域涉及LMN，被诊断为实验室结果支持的可能的ALS的受试者。与从中获得和分析样品的受试者相关的完整详细信息如表5所示。

表5：群体特征

在每个亚组中检测的平均生物标志物水平如表6所示。在该表中，p值表示相对于相应健康对照水平的显著性水平(如通过克鲁斯卡尔-沃利斯检验确定的)。

表6：生物标志物水平

在任何健康对照或ALS样品组之间未检测到C5水平的显著差异。在分析的血浆样品中，与健康对照相比，在患有确定的ALS的受试者中，sC5b9、C3a和C4a水平显著升高，但在患有可能的ALS的受试者中则没有。在来自可能的ALS受试者的样品中，仅Bb水平与健康对照水平相比表现出显著差异。与健康对照相比，来自患有确定的或可能的ALS的受试者的CSF样品中的C5a和sC5b9水平显著升高。与来自健康对照的CSF相比，C3a和fI水平仅在可能的ALS中显著升高。

如先前所述，CSF中产生的C5a和sC5b-9水平与在血浆中观察到的那些不相关，这进一步表明ALS中的局部CNS补体活性与外周中的活性无关。

在扩展的样品集中，29％的患有确定的或可能的ALS的受试者确定为患有BBB损伤(白蛋白商值>9.0)。在与完整(N＝26)或受损(N＝10)BBB相关的ALS CSF样品(确定的和可能的)中检测的平均生物标志物水平以及来自健康对照CSF样品的水平如表7所示。在该表中，p值表示相对于相应健康对照水平的显著性水平(通过克鲁斯卡尔-沃利斯检验确定)。

表7：生物标志物水平

C5a和sC5b-9的水平在与完整和受损BBB相关的ALS CFS中都显著升高，而C3a、Ba、Bb、fH和fI仅在与受损BBB相关的ALS CSF中显著升高。

序列表

<110> RA制药公司(RA PHARMACEUTICALS, INC.）

<120> 使用补体抑制剂治疗神经疾病

<130> 2011.1058PCT

<140> PCT/US2020/XXXXXX

<141> 2020-09-11

<150> 63/021,742

<151> 2020-05-08

<150> 62/988,587

<151> 2020-03-12

<150> 62/969,742

<151> 2020-02-04

<150> 62/899,488

<151> 2019-09-12

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<221> 来源

<223> /注意="人工序列的描述：合成肽"

<220>

<221> 来源

<223> /注意="N-末端Ac"

<220>

<221> 位点(SITE)

<222> (1)..(6)

<223> /注意="残基之间的内酰胺桥"

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> N-甲基-天冬氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> 叔丁基甘氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> 7-氮杂色氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (14)..(14)

<223> 环己基甘氨酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (15)..(15)

<223> N-ε-(PEG24-γ-谷氨酸-N-α-十六酰基)赖氨酸

<400> 1

Lys Val Glu Arg Phe Asp Xaa Xaa Tyr Xaa Glu Tyr Pro Xaa Lys

1 5 10 15

Claims (117)

1.一种治疗受试者的方法，其中所述受试者患有或怀疑患有肌萎缩侧索硬化症(ALS)，所述方法包括向所述受试者施用补体抑制剂，其中所述补体抑制剂减少、预防、稳定或逆转所述受试者经历的ALS的一种或多种影响。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述补体抑制剂包括C5抑制剂。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在治疗之前：

受试者ALS疾病严重程度升高；和/或

受试者ALS疾病严重程度以特定速率增加；并且

其中用补体抑制剂治疗：

稳定或降低受试者ALS疾病严重程度；和/或

降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。

5.如权利要求4所述的方法，其中受试者ALS疾病严重程度的变化通过修订的ALS功能评分量表(ALSFRS-R)来测量。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在治疗之前，受试者呼吸功能降低和/或以特定速率下降；并且其中用补体抑制剂治疗稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。

7.如权利要求6所述的方法，其中受试者呼吸功能的变化通过慢肺活量(SVC)来评估。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中在治疗之前，受试者肌肉力量降低和/或以特定速率下降；并且其中用补体抑制剂治疗稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。

9.如权利要求8所述的方法，其中受试者肌肉力量的变化通过手持测力仪(HHD)来测量。

10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述补体抑制剂治疗稳定或改善受试者言语能力；和/或稳定或改善受试者言语能力下降的速率。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述受试者言语能力包括以下一项或多项：发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中补体抑制剂治疗稳定或改善受试者ALS生物标志物谱；和/或稳定或改善受试者ALS生物标志物谱变化的速率。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述受试者ALS生物标志物谱包含选自以下一种或多种的生物标志物：神经丝重链(pNfH)、神经丝轻链(NfL)、C5和补体活性生物标志物。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

15.如权利要求14所述的方法，其中在受试者脑脊液(CSF)、血浆和/或血清中检测所述补体活性生物标志物。

16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述受试者患有或怀疑患有重症肌无力。

17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述受试者对至少一种自身抗体呈阳性。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述至少一种自身抗体包括以下的一种或多种：抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4、抗集聚蛋白和抗肌肉相关受体酪氨酸激酶。

19.如权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述受试者具有受损的血脑屏障功能。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述受损的血脑屏障功能通过确定受试者的白蛋白商来评估。

21.如权利要求1-20中任一项所述的方法，其中基于修订的El Escorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

22.一种诊断受试者的ALS的方法，所述方法包括检测和/或定量与所述受试者或来自所述受试者的生物样品相关的补体活性，并基于检测和/或定量的补体活性诊断所述受试者患有ALS。

23.如权利要求22所述的方法，其中补体活性检测和/或定量包括检测和/或定量补体活性生物标志物。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

25.如权利要求23或24所述的方法，其中在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量所述补体活性生物标志物。

26.一种监测受试者的ALS的方法，所述方法包括：

检测和/或定量与以下相关的补体活性：

在初始时间点或初始时间段内的受试者；或

在初始时间点或初始时间段内从受试者获得的生物样品；

检测和/或定量与以下相关的补体活性：

在随后时间点或随后时间段内的受试者；或

在随后时间点或随后时间段内从受试者获得的生物样品；和

通过评估在初始时间点或时间段与随后时间点或时间段之间检测和/或定量的补体活性的任何变化来监测受试者的ALS。

27.如权利要求26所述的方法，其中补体活性检测和/或定量包括检测和/或定量补体活性生物标志物。

28.如权利要求27所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

29.如权利要求27或28所述的方法，其中在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量所述补体活性生物标志物。

30.如权利要求26-29中任一项所述的方法，其中，基于修订的ElEscorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

31.一种将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者分层为两组或更多组的方法，所述方法包括检测和/或定量与每个受试者或来自每个受试者的生物样品相关的补体活性，并基于检测和/或定量的补体活性将每个受试者分配至所述两组或更多组中的至少一组。

32.如权利要求31所述的方法，其中补体活性检测和/或定量包括检测和/或定量补体活性生物标志物。

33.如权利要求32所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

34.如权利要求32或33所述的方法，其中在受试者CSF、血浆和/或血清中检测和/或定量所述补体活性生物标志物。

35.如权利要求34所述的方法，其中基于与未患有ALS的受试者中CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平相比升高的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平，将受试者分配至治疗组。

36.如权利要求35所述的方法，其中所述治疗组的特征在于有资格进行补体抑制剂治疗。

37.如权利要求36所述的方法，其中所述补体抑制剂治疗包括齐鲁考普治疗。

38.如权利要求31-37中任一项所述的方法，其中基于修订的ElEscorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

39.如权利要求1-21中任一项所述的方法，其中基于在治疗之前从所述受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物水平来确定施用的补体抑制剂的剂量和/或方案。

40.如权利要求39所述的方法，其中在治疗之前从所述受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

41.如权利要求1-21、39或40中任一项所述的方法，其中在一次或多次在先补体抑制剂施用之后，基于在一次或多次在先施用之后从所述受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物水平来调整施用的补体抑制剂的剂量和/或方案。

42.如权利要求41所述的方法，其中在一次或多次在先施用之后从所述受试者获得的CSF、血浆和/或血清中检测的补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

43.如权利要求39-42中任一项所述的方法，其中施用的补体抑制剂是齐鲁考普。

44.一种治疗患有补体相关适应症的受试者的方法，其中所述受试者具有或怀疑具有受损的血脑屏障，所述方法包括向所述受试者施用补体抑制剂，其中所述补体抑制剂降低、预防、稳定或逆转所述补体相关适应症的一种或多种影响。

45.如权利要求44所述的方法，其中所述补体抑制剂包括C5抑制剂。

46.如权利要求44或45中任一项所述的方法，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

47.如权利要求44-46中任一项所述的方法，其中所述补体相关适应症包括神经肌肉炎性适应症。

48.如权利要求47所述的方法，其中所述神经肌肉炎性适应症包括ALS。

49.如权利要求48所述的方法，其中基于修订的ElEscorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

50.如权利要求44-49中任一项所述的方法，其中通过确定所述受试者的白蛋白商来评估所述受试者的血脑屏障损伤。

51.一种选择用补体抑制剂治疗的受试者的方法，其中所述受试者患有或怀疑患有ALS，所述方法包括：

评估受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平，其中所述至少一种生物标志物选自神经轴索变性生物标志物、神经炎症生物标志物和补体活性生物标志物的一种或多种；和

基于对所述受试者样品中至少一种生物标志物的存在或水平的评估来选择用补体抑制剂治疗的受试者。

52.如权利要求51所述的方法，其中所述受试者样品包括血浆样品和/或CSF样品。

53.如权利要求51或52所述的方法，其中所述神经轴索变性生物标志物是pNfH或NfL。

54.如权利要求51-53中任一项所述的方法，其中所述神经炎症生物标志物是单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、壳三糖酶-1(CHIT1)或壳多糖酶-3样蛋白1(YKL-40)。

55.如权利要求51-54中任一项所述的方法，其中所述补体活性生物标志物是C5a、C5b-9、sC5b-9、C5b6复合物、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I或因子H。

56.如权利要求51-55中任一项所述的方法，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

57.如权利要求56所述的方法，其中相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平，所述受试者样品中Nfl、pNfH、CHIT1、C5a和sC5b-9中一种或多种的水平升高。

58.如权利要求57所述的方法，其中所述受试者样品和来自未患有ALS的受试者的受试者样品包括CSF。

59.如权利要求58所述的方法，其中所述受试者样品从血脑屏障功能受损的受试者获得。

60.如权利要求59所述的方法，其中所述受试者样品中C3a、Bb和Ba中的一种或多种相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平升高。

61.如权利要求57所述的方法，其中所述受试者样品和来自未患有ALS的受试者的受试者样品包括血浆。

62.如权利要求61所述的方法，其中相对于来自未患有ALS的受试者的受试者样品中的水平，所述受试者样品中的C3a升高。

63.一种治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法，所述方法包括：

根据权利要求51-62中任一项所述的方法选择用补体抑制剂治疗的受试者；和

向所述受试者施用所述补体抑制剂。

64.如权利要求63所述的方法，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

65.一种包含补体抑制剂的组合物，其用于治疗患有或怀疑患有ALS的受试者的方法中，其中所述组合物降低、预防、稳定或逆转所述受试者经历的ALS的一种或多种影响。

66.如权利要求65所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括C5抑制剂。

67.如权利要求65或66所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

68.如权利要求65-67中任一项所述的组合物，其中在治疗之前：

受试者ALS疾病严重程度升高；和/或

受试者ALS疾病严重程度以特定速率增加；并且

其中所述治疗：

稳定或降低受试者ALS疾病严重程度；和/或

降低受试者ALS疾病严重程度增加的特定速率。

69.如权利要求68所述的组合物，其中受试者ALS疾病严重程度的变化通过ALSFRS-R测量。

70.如权利要求65-69中任一项所述的组合物，其中在治疗之前，受试者呼吸功能降低和/或以特定速率下降；并且其中用补体抑制剂治疗稳定或改善受试者呼吸功能和/或降低受试者呼吸功能下降的特定速率。

71.如权利要求70所述的组合物，其中受试者呼吸功能的变化通过SVC评估。

72.如权利要求65-71中任一项所述的组合物，其中在治疗之前，受试者肌肉力量降低和/或以特定速率下降；并且其中用所述组合物治疗稳定或改善受试者肌肉力量和/或降低受试者肌肉力量下降的特定速率。

73.如权利要求72所述的组合物，其中受试者肌肉力量的变化通过HHD测量。

74.如权利要求65-73中任一项所述的组合物，其中所述治疗稳定或改善受试者言语能力；和/或稳定或改善受试者言语能力下降的速率。

75.如权利要求74所述的组合物，其中所述受试者言语能力包括以下一项或多项：发音精确度、语速、言语信号出声百分比、发声长度、辅音长度和鼻音。

76.如权利要求65-75中任一项所述的组合物，其中所述治疗稳定或改善受试者ALS生物标志物谱；和/或稳定或改善受试者ALS生物标志物谱变化的速率。

77.如权利要求76所述的组合物，其中所述受试者ALS生物标志物谱包含选自pNfH、NfL、C5和补体活性生物标志物的一种或多种的生物标志物。

78.如权利要求77所述的组合物，其中所述补体活性生物标志物选自C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H的一种或多种。

79.如权利要求78所述的组合物，其中在受试者CSF、血浆和/或血清中检测所述补体活性生物标志物。

80.如权利要求65-79中任一项所述的组合物，其中所述受试者患有或怀疑患有重症肌无力。

81.如权利要求65-80中任一项所述的组合物，其中所述受试者对至少一种自身抗体呈阳性。

82.如权利要求81所述的组合物，其中所述至少一种自身抗体包括以下的一种或多种：抗乙酰胆碱受体抗体、抗LDL受体相关蛋白4、抗集聚蛋白和抗肌肉相关受体酪氨酸激酶。

83.如权利要求65-82中任一项所述的组合物，其中所述受试者具有受损的血脑屏障功能。

84.如权利要求83所述的组合物，其中所述受损的血脑屏障功能通过确定所述受试者的白蛋白商来评估。

85.如权利要求65-84中任一项所述的组合物，其中基于修订的El Escorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

86.一种诊断受试者的ALS的方法，所述方法包括检测和/或定量与从受试者获得的生物样品相关的补体活性，并基于检测和/或定量的补体活性诊断所述受试者患有ALS。

87.如权利要求86所述的方法，其中检测和/或定量与所述生物样品相关的补体活性的步骤包括检测和/或定量所述生物样品中的补体活性生物标志物。

88.如权利要求87所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

89.如权利要求87或88所述的方法，其中所述生物样品包括受试者CSF、血浆和/或血清。

90.一种监测受试者的ALS的方法，所述方法包括：

在初始时间点或初始时间段内检测和/或定量与从所述受试者获得的生物样品相关的补体活性；

在随后时间点或随后时间段内检测和/或定量与从所述受试者获得的生物样品相关的补体活性；和

通过评估在以下之间检测和/或定量的补体活性的任何变化来监测所述受试者的ALS：

在初始时间点或初始时间段内从所述受试者获得的生物样品；和

在随后时间点或随后时间段内从所述受试者获得的生物样品。

91.如权利要求90所述的方法，其中补体活性检测和/或定量包括检测和/或定量补体活性生物标志物。

92.如权利要求91所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

93.如权利要求90-92中任一项所述的方法，其中在所述初始时间点或所述初始时间段内从所述受试者获得的生物样品和/或在所述随后时间点或所述随后时间段内从所述受试者获得的生物样品包括CSF、血浆和/或血清。

94.如权利要求90-93中任一项所述的方法，其中所述受试者具有确定的ALS或可能的ALS，如基于修订的El Escorial标准所评估的。

95.一种将患有ALS或怀疑患有ALS的受试者分层为两组或更多组的方法，所述方法包括检测和/或定量与从每个受试者获得的生物样品相关的补体活性，并基于检测和/或定量的补体活性将每个受试者分配至所述两组或更多组中的至少一组。

96.如权利要求95所述的方法，其中补体活性检测和/或定量包括检测和/或定量补体活性生物标志物。

97.如权利要求96所述的方法，其中所述补体活性生物标志物选自以下的一种或多种：C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

98.如权利要求96或97所述的方法，其中从每个受试者获得的生物样品包括CSF、血浆和/或血清。

99.如权利要求98所述的方法，其中所述两组或更多组包括治疗组，其中基于与未患有ALS的受试者中CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平相比升高的CSF、血浆和/或血清补体活性生物标志物水平将所述受试者分配至治疗组。

100.如权利要求99所述的方法，其中所述治疗组的特征在于有资格进行补体抑制剂治疗。

101.如权利要求100所述的方法，其中所述补体抑制剂治疗包括齐鲁考普治疗。

102.如权利要求95-101中任一项所述的方法，其中基于修订的El Escorial标准确定所述受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

103.如权利要求65-85中任一项所述的组合物，其中基于在治疗之前从受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物的水平来确定所述组合物的剂量和/或方案。

104.如权利要求103所述的组合物，其中在治疗前从所述受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物选自C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H。

105.如权利要求65-85、103或104中任一项所述的组合物，其中在一次或多次在先组合物施用之后，基于在一次或多次在先组合物施用之后从所述受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物水平来调整所述组合物的剂量和/或方案。

106.如权利要求105所述的组合物，其中在一次或多次在先组合物施用之后从所述受试者获得的CSF样品、血浆样品和/或血清样品中检测的补体活性生物标志物选自C5a、C5b-9、可溶性C5b-9、C3a、C4a、Ba、Bb、因子I和因子H的一种或多种。

107.如权利要求103-106中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含齐鲁考普。

108.一种包含补体抑制剂的组合物，其用于治疗患有补体相关适应症的受试者的方法中，其中所述受试者具有或怀疑具有受损的血脑屏障，其中所述组合物降低、预防、稳定或逆转补体相关适应症的一种或多种影响。

109.如权利要求108所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括C5抑制剂。

110.如权利要求108或109所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括齐鲁考普。

111.如权利要求108-110中任一项所述的组合物，其中所述补体相关适应症包括神经肌肉炎性适应症。

112.如权利要求111所述的组合物，其中所述神经肌肉炎性适应症包括ALS。

113.如权利要求112所述的组合物，其中基于修订的ElEscorial标准确定受试者患有确定的ALS或可能的ALS。

114.如权利要求108-113中任一项所述的组合物，其中通过确定所述受试者的白蛋白商来评估受试者的血脑屏障损伤。

115.一种包含补体抑制剂的组合物，其用于治疗患有ALS或怀疑患有ALS的受试者的方法中，其中所述方法包括：

根据权利要求51-62中任一项所述的方法选择用所述组合物治疗的受试者；和

将所述组合物施用给受试者。

116.如权利要求115所述的组合物，其中所述补体抑制剂包括C5抑制剂。

117.如权利要求116所述的组合物，其中所述C5抑制剂包括齐鲁考普。

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