CN114324673A - 一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 - Google Patents
一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114324673A CN114324673A CN202210036902.5A CN202210036902A CN114324673A CN 114324673 A CN114324673 A CN 114324673A CN 202210036902 A CN202210036902 A CN 202210036902A CN 114324673 A CN114324673 A CN 114324673A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fumarate
- solution
- chloromalastine
- mobile phase
- isomers
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 title claims abstract description 75
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 60
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 65
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 55
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 33
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- PMGQWSIVQFOFOQ-BDUVBVHRSA-N (e)-but-2-enedioic acid;(2r)-2-[2-[1-(4-chlorophenyl)-1-phenylethoxy]ethyl]-1-methylpyrrolidine Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.CN1CCC[C@@H]1CCOC(C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PMGQWSIVQFOFOQ-BDUVBVHRSA-N 0.000 claims description 23
- 229960002689 clemastine fumarate Drugs 0.000 claims description 22
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 15
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 13
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 10
- SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N (3,5-dimethylphenyl) carbamate Chemical compound CC1=CC(C)=CC(OC(N)=O)=C1 SBTVLCPCSXMWIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 5
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 4
- KBRZBBOTZJFKFH-UHFFFAOYSA-N (3,5-dichlorophenyl) carbamate Chemical compound NC(=O)OC1=CC(Cl)=CC(Cl)=C1 KBRZBBOTZJFKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 229960002881 clemastine Drugs 0.000 description 8
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 8
- YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N clemastine Chemical compound CN1CCC[C@@H]1CCO[C@@](C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNNUSGIPVFPVBX-NHCUHLMSSA-N 0.000 description 7
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 6
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- -1 ethanol-trifluoroacetic acid-diethylamine Chemical compound 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 102000003834 Histamine H1 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000110 Histamine H1 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 229940124056 Histamine H1 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical class COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004856 capillary permeability Effects 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000938 histamine H1 antagonist Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000010971 suitability test Methods 0.000 description 1
- 238000011003 system suitability test Methods 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明提供了一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，该方法操作简便，专属性、线性、精密度均良好，且溶液稳定、灵敏度高、方法耐用性好，可用于富马酸氯马斯汀原料药或其制剂的质量控制。
Description
1、技术领域
本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法。
2、背景技术
富马酸氯马斯汀是二苯甲醚类组胺H1受体拮抗剂。它选择性作用于H1受体，阻止组胺作用于靶细胞，减少毛细血管通透性，对抗5-羟色胺(5-HT)或胆碱的作用轻微。氯马斯汀具有显著的抗组胺作用和止痒效果，特点是起效快、作用持续时间长。最早由瑞士Sandoz公司(1996年Sandoz与Ciba-Geigy合并为Novartis)研制，已在美国、日本、欧洲、中国等多个国家和地区上市。
富马酸氯马斯汀化学名为[R-(R*，R*)]-1-甲基-2-[2-[1-(4-氯苯基)-1-苯乙氧基]乙基]吡咯烷(E)-2-丁烯二酸盐，结构式如下：
富马酸氯马斯汀存在两个手性中心，上市产品为(R,R)构型。其异构体为R,S构型、S,S构型、S,R构型，异构体的结构式分别如下：
富马酸氯马斯汀(R,S)异构体
富马酸氯马斯汀(S,S)异构体
富马酸氯马斯汀(S,R)异构体
富马酸氯马斯汀上市为(R,R)构型，另外三个构型的异构体在终产品中作为杂质需要对其进行控制。对于手性药物而言，对光学异构体进行质量控制一直是药学研究工作的重点和难点。目前，尚未发现关于富马酸氯马斯汀中异构体杂质检测的文献报道。
因此，亟需建立出一种简便、准确、快速、可靠、稳定的富马酸氯马斯汀多个异构体同时检测的方法，以实现对富马酸氯马斯汀的质量控制。
3、发明内容
本发明提供了一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，该方法操作简便，专属性、线性、精密度、准确度均良好，且溶液稳定、灵敏度高、方法耐用性好，可用于富马酸氯马斯汀的质量控制，满足现有需要。
本发明提供了一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，包括以下步骤：
(1)系统适用性溶液的配制：取富马酸氯马斯汀消旋体对照品各适量，加流动相溶解并稀释制成系统适用性溶液；
(2)供试品溶液的配制：取富马酸氯马斯汀适量，加流动相溶解并稀释制成供试品溶液；
(3)对照溶液的配制：量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成对照溶液；
(4)系统适用性试验：量取系统适用性溶液适量注入液相色谱仪，记录色谱图；
(5)供试品溶液试验：量取供试品溶液及对照溶液各适量注入液相色谱仪，记录色谱图。
步骤(1)中，所述的富马酸氯马斯汀消旋体对照品包括富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体。其中，所述的富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体的含量比约为1:1:1:1。
步骤(5)中，采用自身对照法计算供试品中各异构体的含量。
步骤(4)～(5)中，色谱条件采用正相高效液相色谱仪进行分析。
所述高效液相色谱条件为：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：硅胶表面共价键合有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、硅胶表面共价键合有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)或硅胶表面共价键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)为固定相的手性色谱柱；
柱温：15～40℃；
流动相：以正己烷、甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、三氟乙酸或二乙胺中的一种或多种的混合液为流动相；
流速：0.5～2.0ml/min；
进样量：5～50μl；
检测波长：205-250nm。
优选的，所述高效液相色谱条件为：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：硅胶表面共价键合有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相的手性色谱柱；
柱温：20～30℃；
流动相：正己烷、无水乙醇、三氟乙酸和二乙胺的混合液为流动相，正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺的体积比为800-980:20-200:0-5:0-5；
流速：1ml/min；
进样量：20μl；
检测波长：220nm。
更优选的，色谱柱采用CHIRALPAK AD-H 250mm×4.6mm，5μm色谱柱，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为940:60:2:2，柱温为25℃。
本发明进一步提供了一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，包括以下步骤：
(1)系统适用性溶液的配制：取富马酸氯马斯汀消旋体对照品各适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为系统适用性溶液；
(2)供试品溶液的配制：称取富马酸氯马斯适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含氯马斯汀2mg的溶液，作为供试品溶液；
(3)对照溶液的配制：量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯马斯汀10μg的溶液，作为对照溶液；
(4)系统适用性试验：量取系统适用性溶液适量注入液相色谱仪，记录色谱图；
(5)供试品溶液试验：量取供试品溶液及对照溶液各适量注入液相色谱仪，记录色谱图。
步骤(1)中，所述的富马酸氯马斯汀消旋体对照品包括富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体。其中，所述的富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体的含量比约为1:1:1:1。
步骤(5)中，采用自身对照法计算供试品中各异构体的含量。
步骤(4)～(5)中，色谱条件采用正相高效液相色谱仪进行分析。
所述高效液相色谱条件为：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：硅胶表面共价键合有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相的手性色谱柱；
柱温：20～30℃；
流动相：以正己烷、无水乙醇、三氟乙酸和二乙胺的混合液为流动相；正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺的体积比为800-980:20-200:0-5:0-5；
流速：1ml/min；
进样量：20μl；
检测波长：220nm。
优选的，色谱柱采用CHIRALPAK AD-H 250mm×4.6mm，5μm色谱柱，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为940:60:2:2，柱温为25℃。
本发明的有益技术效果为：本发明可将富马酸氯马斯汀与富马酸氯马斯汀的(R,S)异构体、(S,S)异构体和(S,R)异构体进行良好的分离；解决了分离测定富马酸氯马斯汀与其异构体的问题，可快速、准确地分离检测出富马酸氯马斯汀及其制剂中的异构体杂质，从而保证了富马酸氯马斯汀及其制剂的质量可控。
4、附图说明
图1-1为实施例1流动相选择测试条件1试验图谱。
图1-2为实施例1流动相选择测试条件2试验图谱。
图1-3为实施例1流动相选择测试条件3试验图谱。
图1-4为实施例1流动相选择测试条件4试验图谱。
图1-5为实施例1流动相选择测试条件5试验图谱。
图1-6为实施例1流动相选择测试条件6试验图谱。
图1-7为实施例1流动相选择测试条件7试验图谱。
图1-8为实施例1流动相选择测试条件8试验图谱。
图1-9为实施例1流动相选择测试条件9试验图谱。
图1-10为实施例1流动相选择测试条件10试验图谱。
图2-1为实施例2系统适用性试验图谱。
图2-2为实施例2供试品溶液试验图谱。
图3-1为实施例3(R,S)异构体和(S,S)异构体准确度试验图谱。
图3-2为实施例3(S,R)异构体准确度试验图谱。
图4-1为实施例4(R,S)异构体、(S,S)异构体和氯马斯汀对照品溶液稳定性试验图谱。
图4-2为实施例4(S,R)异构体对照品溶液稳定性试验图谱。
图4-3为实施例4对照溶液稳定性试验图谱。
图4-4为实施例4供试品溶液稳定性试验图谱。
图5-1为实施例5(R,S)异构体线性试验图谱。
图5-2为实施例5(S,S)异构体线性试验图谱。
图5-3为实施例5氯马斯汀线性试验图谱。
图5-4为实施例5(S,R)异构体线性试验图谱。
图6-1为实施例6(R,S)异构体和(S,S)异构体定量限试验图谱。
图6-2为实施例6氯马斯汀定量限试验图谱。
图6-3为实施例6(S,R)异构体定量限试验图谱。
图6-4为实施例6(R,S)异构体和(S,S)异构体检测限试验图谱。
图6-5为实施例6氯马斯汀检测限试验图谱。
图6-6为实施例6(S,R)异构体检测限试验图谱。
图7为实施例7精密度试验图谱。
图8-1为实施例8耐用性试验中不同色谱柱试验图谱。
图8-2为实施例8耐用性试验中不同柱温试验图谱。
图8-3为实施例8耐用性试验中不同无水乙醇比例试验图谱。
图8-4为实施例8耐用性试验中不同三氟乙酸比例试验图谱。
5、具体实施方式
下面详细描述本发明的具体实施例，需要说明的是下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
仪器及色谱条件
仪器：高效液相色谱仪，紫外检测器
色谱柱：直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)硅胶为填充剂的色谱柱，
CHIRALPAK AD-H 250mm×4.6mm 5μm；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃；
检测波长：220nm；
进样体积：20μl；
溶液配制
系统适用性溶液的配制：取富马酸氯马斯汀消旋体对照品[含富马酸氯马斯汀及其三个异构体，含量比约为(1∶1∶1∶1)适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为系统适用性溶液。
供试品溶液的配制：取富马酸氯马斯汀适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含氯马斯汀2mg的溶液。
对照溶液的配制：精密量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯马斯汀10μg的溶液，作为对照溶液。
实施例1流动相选择
将本品系统适用性试验溶液采用高效液相色谱进行检测分析。取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。液相色谱条件：CHIRALPAK AD-H(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，紫外检测波长220nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，流动相条件选择见表1。
表1富马酸氯马斯汀异构体检查流动相条件的选择
实施例2系统适用性试验
根据实施例1所筛选的流动相组成、比例可得测试条件10结果较优，但保留时间较靠后，后续优化至流动相为正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺(940∶60∶2.0∶2.0)。
液相色谱条件：CHIRALPAK AD-H(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，紫外检测波长220nm，流速1.0ml/min，柱温25℃，流动相：正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺(940∶60∶2.0∶2.0)。精密量取系统适用性溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，系统适用性试验结果见表2及图2-1。精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表3及图2-2。供试品溶液的色谱图中如有与上述各异构体保留时间一致的色谱峰(富马酸峰除外)，按自身对照法计算各异构体的量。
表2富马酸氯马斯汀异构体检查系统适用性溶液试验结果
| 名称 | 保留时间(分钟) | 分离度 |
| R,S异构体 | 8.924 | - |
| S,S异构体 | 10.280 | 2.26 |
| 富马酸 | 12.164 | 2.91 |
| 氯马斯汀 | 14.544 | 3.12 |
| S,R异构体 | 25.849 | 8.47 |
表3富马酸氯马斯汀异构体检查供试品溶液试验结果
| 名称 | 保留时间(分钟) | 面积 | ％面积 | 分离度 |
| R,S异构体 | 8.921 | 197835 | 0.267 | — |
| 氯马斯汀 | 13.768 | 73809008 | 99.733 | 4.87 |
结果：系统适用性溶液色谱图中，流动相为正己烷-无水乙醇-三氟乙酸-二乙胺(940∶60∶2.0∶2.0)时分离良好且保留时间缩短，因此以该流动相作为最优选择。在该色谱条件下R,S异构体、S,S异构体、富马酸、氯马斯汀与S,R异构体依次出峰，各峰峰型良好，保留时间合适，各相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5，分离良好。供试品溶液色谱图中，异构体检出量均小于0.5％，符合要求。
实施例3准确度试验
方法的准确度通过考察样品中加入不同量的异构体的准确度来实现。考察异构体的浓度包括定量限浓度、5μg/ml的异构体(0.25％)、10μg/ml的异构体(0.5％)、15μg/ml的异构体(0.75％)。每个浓度重复3次，回收率平均值均符合100±10％，相对标准偏差≤5％，方法准确度良好，结果见表4～表6及图3-1～图3-2。
准确度由测得量/加入量×100％计算所得。
表4富马酸氯马斯汀(R,S)异构体准确度试验结果
表5富马酸氯马斯汀(S,S)异构体准确度试验结果
表6富马酸氯马斯汀(S,R)异构体准确度试验结果
实施例4溶液稳定性试验
配制富马酸氯马斯汀及各异构体对照品溶液、供试品溶液、对照溶液，室温自然光下放置，分别于0、2、4、8、24小时时进样检测，与0小时比较，计算峰面积或各异构体量的变化值，均不大于10％，测定溶液在24小时内稳定性良好，结果见表7～表9及图4-1～图4-4。
表7富马酸氯马斯汀异构体检查对照品溶液稳定性试验结果
表8富马酸氯马斯汀异构体检查对照溶液稳定性试验结果
表9富马酸氯马斯汀异构体检查供试品溶液稳定性试验结果
实施例5线性试验
方法的线性通过考察至少6个不同浓度溶液的线性来实现。取富马酸氯马斯汀及其异构体各适量，用流动相溶解并逐步稀释，摇匀，配置成对照品溶液。精密量取20μl注入液相色谱仪。以测得的峰面积对浓度作曲线，用最小二乘法计算回归方程、相关系数及截距，方法线性良好，结果见表10及图5-1～图5-4。
表10富马酸氯马斯汀异构体线性试验结果
实施例6定量限与检测限试验
取富马酸氯马斯汀及其异构体各适量，用流动相溶解并逐步稀释，摇匀，配置成对照品溶液。精密量取20μl注入液相色谱仪，至测得各成分峰的响应值约为噪音信号的10倍高和3倍高，即为相应成分的定量限和检测限。结果见表11及图6-1～图6-6。
表11富马酸氯马斯汀异构体定量限及检测限结果表
实施例7精密度试验
通过方法重复性和中间精密度两项来进行精密度试验。方法重复性通过重复配制同一批供试品6次，计算每份供试品溶液中各异构体检出量及检出量的相对标准偏差，RSD不超过10％；中间精密度通过不同的分析人员、在不同的日期、用不同的仪器来重复进行“方法重复性”验证，RSD不超过10％；并且方法重复性和中间精密度的结果的相对偏差不超过10％，符合要求。结果见表12及图7。
表12富马酸氯马斯汀异构体检查精密度试验结果
实施例8耐用性试验
通过改变色谱柱批号、柱温、流动相比例等参数来考察测试方法的耐用性。每次测试仅改变其中一个参数，其结果与不改变参数时的测定结果进行比较。与标准条件相比，改变色谱柱批号、柱温变化±5℃、流动相中无水乙醇比例变化±1％、三氟乙酸比例变化±0.02％，R,S异构体、S,S异构体、富马酸、氯马斯汀与S,R异构体各相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5，均符合所有系统适用性试验要求，供试品异构体含量变化值均＜0.05％，表明方法的耐用性良好。结果见表13及图8-1～图8-4。
表13富马酸氯马斯汀异构体检查耐用性试验结果
Claims (10)
1.一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)系统适用性溶液的配制：取富马酸氯马斯汀消旋体对照品各适量，加流动相溶解并稀释制成系统适用性溶液；
(2)供试品溶液的配制：取富马酸氯马斯汀适量，加流动相溶解并稀释制成供试品溶液；
(3)对照溶液的配制：量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成对照溶液；
(4)系统适用性试验：量取系统适用性溶液适量注入液相色谱仪，记录色谱图；
(5)供试品溶液试验：量取供试品溶液及对照溶液各适量注入液相色谱仪，记录色谱图。
步骤(1)中，所述的富马酸氯马斯汀消旋体对照品包括富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体；
步骤(4)～(5)中，色谱条件采用正相高效液相色谱仪进行分析。
2.根据权利要求1所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，所述的色谱条件为：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：硅胶表面共价键合有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)、硅胶表面共价键合有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)或硅胶表面共价键合有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)为固定相的手性色谱柱；
柱温：15～40℃；
流动相：以正己烷、甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、三氟乙酸或二乙胺中的一种或多种的混合液为流动相；
流速：0.5～2.0ml/min；
进样量：5～50μl；
检测波长：205-250nm。
3.根据权利要求2所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，所述的色谱条件为：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：硅胶表面共价键合有直链淀粉-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)为固定相的手性色谱柱；
柱温：20～30℃；
流动相：以正己烷、无水乙醇、三氟乙酸和二乙胺的混合液为流动相；
流速：1ml/min；
进样量：20μl；
检测波长：220nm。
4.根据权利要求3所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为800-980:20-200:0-5:0-5。
5.根据权利要求4所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为940:60:2:2。
6.根据权利要求3所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，所述的色谱柱为
AD-H 250mm×4.6mm，5μm。
7.根据权利要求3所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，所述的柱温为25℃。
8.一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)系统适用性溶液的配制：取富马酸氯马斯汀消旋体对照品各适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液，作为系统适用性溶液；
(2)供试品溶液的配制：取富马酸氯马斯汀适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中含氯马斯汀2mg的供试品溶液；
(3)对照溶液的配制：量取供试品溶液适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯马斯汀10μg的对照溶液；
(4)系统适用性试验：量取系统适用性溶液适量注入液相色谱仪，记录色谱图；
(5)供试品溶液试验：量取供试品溶液及对照溶液各适量注入液相色谱仪，记录色谱图；
步骤(1)中，所述的富马酸氯马斯汀消旋体对照品包括富马酸氯马斯汀、富马酸氯马斯汀(R,S)异构体、富马酸氯马斯汀(S,S)异构体和富马酸氯马斯汀(S,R)异构体；
步骤(4)～(5)中，色谱条件采用正相高效液相色谱仪进行分析，具体如下：
检测器：紫外检测器；
色谱柱：
AD-H 250mm×4.6mm，5μm；
柱温：25℃；
流动相：以正己烷、无水乙醇、三氟乙酸和二乙胺的混合液为流动相；
流速：1.0ml/ml；
进样体积：20μl；
检测波长：220nm。
9.根据权利要求8所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为800-980:20-200:0-5:0-5。
10.根据权利要求9所述的同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法，其特征在于，流动相中，正己烷:无水乙醇:三氟乙酸:二乙胺的体积比为940:60:2:2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210036902.5A CN114324673B (zh) | 2022-01-12 | 2022-01-12 | 一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210036902.5A CN114324673B (zh) | 2022-01-12 | 2022-01-12 | 一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114324673A true CN114324673A (zh) | 2022-04-12 |
| CN114324673B CN114324673B (zh) | 2023-06-20 |
Family
ID=81026928
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210036902.5A Active CN114324673B (zh) | 2022-01-12 | 2022-01-12 | 一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114324673B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5382773A (en) * | 1976-12-28 | 1978-07-21 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co | Process for preparing fumaric cremastine useful as medicine |
| CN111302996A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-19 | 山东科源制药股份有限公司 | 一种高手性纯度的富马酸氯马斯汀的制备方法 |
-
2022
- 2022-01-12 CN CN202210036902.5A patent/CN114324673B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5382773A (en) * | 1976-12-28 | 1978-07-21 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co | Process for preparing fumaric cremastine useful as medicine |
| CN111302996A (zh) * | 2020-03-19 | 2020-06-19 | 山东科源制药股份有限公司 | 一种高手性纯度的富马酸氯马斯汀的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MIREIA PÉREZ-BAEZA等: "Comparative modelling study on enantioresolution of structurally unrelated compounds with amylose-based chiral stationary phases in reversed phase liquid chromatography-mass spectrometry conditions", vol. 1625, pages 1 - 9 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114324673B (zh) | 2023-06-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107543872B (zh) | 通过手性高效液相色谱法分离测定甲苯磺酸依度沙班水合物与其异构体杂质的方法 | |
| CN115453012B (zh) | 一种同时测定氢溴酸伏硫西汀中多个位置异构体的反相hplc方法 | |
| CN115097023A (zh) | 佐米胺有关物质的高效液相色谱检测方法 | |
| CN112611820A (zh) | 奥扎格雷钠残留溶剂的测定方法 | |
| CN115060832A (zh) | 奥卡西平口服混悬液中奥卡西平及防腐剂含量检测方法 | |
| CN113484430B (zh) | 一种采用高效液相色谱法测定l-丙氨酸异丙酯盐酸盐有关物质的方法 | |
| CN106525994B (zh) | 一种氨酚曲马多胶囊有关物质的测定方法 | |
| CN111122736B (zh) | 一种用于检测布瓦西坦中间体中对映异构体的方法 | |
| CN111679010A (zh) | 瑞德西韦中间体gs-441524的高效液相色谱检测方法 | |
| CN116297978A (zh) | Hplc法分离测定泊沙康唑z3及其杂质与溶剂的方法 | |
| CN114965742B (zh) | 一种维生素k1滴剂有关物质的测定方法 | |
| CN109765316B (zh) | 一种从药物中检测右乙拉西坦的方法 | |
| CN114324673B (zh) | 一种同时测定富马酸氯马斯汀及其异构体的分析方法 | |
| CN113125587B (zh) | 一种托法替尼中间体及其对映异构体的检测方法 | |
| CN114660183A (zh) | 一种分离测定l-丙氨酸异丙酯盐酸盐对映异构体的高效液相色谱分析方法 | |
| CN115248260A (zh) | 一种苯磺顺阿曲库铵原料药中有关物质的hplc分析检测方法 | |
| CN111323493A (zh) | 一种泊沙康唑起始物料对映异构体的检测方法 | |
| CN114113402B (zh) | 一种采用高效液相色谱法测定硼替佐米中蒎烷二醇含量的方法 | |
| RU2756549C1 (ru) | Способ количественного определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии | |
| CN114200067B (zh) | 一种6-溴-3-羟基吡嗪-2-甲酰胺及杂质的高效液相色谱分析方法 | |
| CN117630202B (zh) | 盐酸丁螺环酮中间体杂质的检测方法 | |
| CN115327006B (zh) | 一种氧化氯吡格雷异构体的检测方法 | |
| CN112557541B (zh) | 一种枸橼酸马罗匹坦及其有关物质的检测方法 | |
| CN111060629B (zh) | 一种利非司特有关物质的检测方法 | |
| CN115420826B (zh) | 一种枸橼酸爱地那非原料药中起始物料邻乙氧基苯甲酸中杂质的分离检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20230705 Address after: No. 28, High-tech Industrial Park, Economic and Technological Development Zone, Wuhan City, Hubei Province, 430030 Patentee after: GRAND PHARMA (CHINA) CO.,LTD. Address before: 250101 3rd floor, East Building, DIA venture base, 2766 Yingxiu Road, high tech Zone, Jinan City, Shandong Province Patentee before: SHANDONG BESTCOMM PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. |