CN114099364B - 一种含蜂王浆酶解多肽的乳液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及一种含蜂王浆酶解多肽的乳液及其制备方法。根据本申请的制备方法首先将蜂王浆酶解以分解其中的蛋白质，获得蜂王浆多肽，之后采用β‑环糊精等组分并冻干以稳定蜂王浆酶解多肽，保持其活性，之后混合乳液组分和植物提取物，从而得到根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液。所述制备方法能够有效酶解蜂王浆中易引发皮肤过敏反应的蛋白质，从而提高了乳液的修护功效，并且还使制得的乳液保存稳定性优异。此外，根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽，是一种适合各种肤质的功效性护肤品。
Description
技术领域：
本申请属于化妆品领域，具体地，涉及一种含蜂王浆酶解多肽的乳液及其制备方法。
背景技术：
衰老是一个复杂的、多因素的过程，表现为机体的生理功能和调节代谢压力的能力逐渐下降。皮肤老化表现出外观和功能上的变化，影响皮肤老化的外源性因素主要是紫外线辐射。皮肤真皮层中胶原蛋白的破坏是皮肤老化的核心。因此，重建皮肤真皮层中的胶原蛋白是预防皮肤老化的一个有效途径，这包括两方面，即促进胶原蛋白的合成以及抑制基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases，MMPS)的活性。
近年来，皮肤生物学的发展逐渐帮助人们认识皮肤稳态及其衰老过程，以及紫外线辐射导致的皮肤光老化和皮肤疾病的产生机制。光老化是指长期暴露在紫外线下或阳光照射下，皮肤上表现出的老化效应，它对肤色较浅的人影响更为严重。与光老化相关的临床症状有色素沉着、松弛、黄色、皱纹、毛细血管扩张、皮革样外观和皮肤恶性肿瘤等。这些变化都与紫外线辐射对皮肤细胞外基质(Extracellular Matrix，ECM)的影响有关。人体皮肤分为表皮层、真皮层和皮下组织，真皮层中成纤维细胞所产生的胶原蛋白是真皮层ECM中最主要的成分，其在光老化过程中表现为含量下降，进而引起皮肤皱纹的产生。
蜂王浆又名蜂王乳、蜂皇浆等，由5～15日龄工蜂舌腺和上颚腺分泌，呈乳白色或淡黄色，是一种专门用来喂养蜂王及3日龄幼蜂的特殊浆状物质，是蜂王幼虫整个发育期及3日龄以内工蜂和雄峰幼虫的唯一食物，类似于哺乳动物的乳汁，所以又称蜂乳。蜂王浆含有复杂的的生物活性物质，具有很高的营养价值。新鲜蜂王浆中蛋白质含量占11％～14％，占蜂王浆干物质总重的38％～50％，蛋白质在其干重中所占比例最高，另外还含有丰富的氨基酸、脂类、维生素和矿物质。众多研究和临床应用表明：蜂王浆具有调节免疫、抗疲劳、抗菌、消炎、抗过敏、抗衰老、抗癌、抗肿瘤、扩张血管、降血压、抗高胆固醇、抗氧化、改善睡眠、促进细胞生长和类胰岛素活性等功能，已广泛应用于食品、保健品、医药、化妆品等领域。
目前蜂王浆已大量用于护肤品领域。研究表明，蜂王浆可以通过诱导胶原合成和抑制MMPS的作用来发挥抗皮肤光老化作用。将蜂王浆涂抹在皮肤上能显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度。但蜂王浆中的蛋白质存在引起过敏反应、储存不稳定以及不易被人体皮肤吸收利用等缺点。如何通过酶解方法，来改良蜂王浆的理化性质，使蜂王浆抗光老化等生物学活性提到有效的发挥，是本领域的重要研究课题之一。
发明内容：
针对上述现有技术存在的不足，本申请的一个目的在于提供一种含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法，所述制备方法能够有效酶解蜂王浆中易引发皮肤过敏反应的蛋白质，从而提高了乳液的修护功效，并且还使制得的乳液保存稳定性优异。
本申请的另一个目的在于提供一种由上述制备方法制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液，所述乳液含有蜂王浆酶解多肽，该蜂王浆酶解多肽不仅水溶性较强，比较容易被机体吸收，而且含丰富的生物活性物质，结合美白、养颜等作用的植物成分提取物，可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽，是一种适合各种肤质的功效性护肤品。
为了实现上述目的，第一方面，本申请提供了一种含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法，其包括以下步骤：
1)将蜂王浆在胰蛋白酶和胃蛋白酶的存在下进行水解，过滤并冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末；
2)在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液混合，然后均质处理，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒；
3)将螯合剂、皮肤调理剂、保湿剂混合均匀得到混合物A；
4)在负压下向部分所述混合物A中加入润肤剂，搅拌均匀，加入剩余混合物A，搅拌均匀，然后均质处理，之后加入乳化剂，搅拌均匀，然后均质处理；以及
5)在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌，加入植物提取物，搅拌，然后均质处理，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤1)可以优选为：将底物浓度为70％～90％(质量浓度)，优选80％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.5％～0.7％，优选0.6％的胰蛋白酶和0.3％～0.5％，优选0.4％的胃蛋白酶，在40℃～45℃，优选45℃的环境下恒温水解5h～7h，优选6h，之后灭活蛋白酶，过滤，并将滤液冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述灭活蛋白酶可以为：在80℃～90℃，优选85℃下加热25min～35min，优选30min。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤1)中的所述冷冻干燥可以为：将滤液预冷3.5h～4.5h，优选4h后在-60℃～-90℃，优选-80℃的低压环境下冷冻干燥40h～56h，优选48h。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)可以优选为：在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为4％～6％，优选5％的β-环糊精水溶液混合，然后在30MPa～40MPa，优选35MPa的压力下均质处理25min～35min，优选30min，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)中，所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液的重量比可以为1:(5～10)，优选1:7。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)中的所述冷冻干燥可以为：在-60℃～-90℃，优选-80℃的低压环境下冷冻干燥。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤3)可以优选为：将螯合剂加水溶解，再加入皮肤调理剂完全溶解，之后加入保湿剂，搅拌加热至85℃～90℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤4)可以优选为：在负压下向部分所述混合物A，优选为3/4的所述混合物A中加入润肤剂，搅拌3min～7min，优选5min，加入剩余混合物A，搅拌3min～7min，优选5min，然后均质处理3min～7min，优选5min，之后加入乳化剂，搅拌3min～5min，然后均质处理5min～10min。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤4)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤5)可以优选为：在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌3min～5min，加入植物提取物，搅拌3min～5min，然后均质处理25min～35min，优选30min，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤5)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤1)中的蜂王浆水溶液还包含质量浓度为0.10％～0.20％，优选0.15％的D-甘露醇和0.20％～0.40％，优选0.30％的L-鼠李糖。进一步地，所述D-甘露醇和所述L-鼠李糖的质量比为1:2。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其包括蜂王浆酶解多肽固体颗粒0.5～3重量份，皮肤调理剂0.02～0.05重量份，保湿剂3～15重量份，润肤剂2～10重量份，植物提取物0.05～0.2重量份，鳌合剂0.01～0.05重量份，乳化剂1～5重量份以及余量的水。
进一步地，在一种可行的实施方式中，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其包括蜂王浆酶解多肽2.6重量份，皮肤调理剂0.04重量份，保湿剂5.2重量份，润肤剂6.12重量份，植物提取物0.06重量份，螯合剂0.01重量份，乳化剂1.2重量份以及余量的水。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述皮肤调理剂包括重量比为(1～2):(1～3)的透明质酸钠和可溶性胶原。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述保湿剂包括重量比为(3～5):(2～4):(2～4)的丙二醇、丁二醇和异戊二醇。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述润肤剂包括重量比为(2～3):(2～4):(1～3):(0.5～2):(0.2～0.5):(0.1～0.2)的异壬酸异壬酯、C13～16异链烷烃、辛酸\癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、矿油和C10～13异链烷烃。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述螯合剂为EDTA二钠。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述乳化剂包括重量比为(0.5～2):(0.5～1.5):(0.5～0.8):(0.5～0.8):(0.2～0.5):(0.01～0.03)的鯨蜡硬脂醇、甘油硬脂酸酯、PEG～100硬脂酸酯、PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、鯨蜡醇磷酸酯钾和聚山梨醇酯-80。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述植物提取物包括重量比为(1～3):(1～3):(1～3):(1～3):(1～3)的光果甘草根提取物、库拉索芦荟叶提取物、积雪草提取物、雪莲花提取物和芍药根提取物。
第二方面，本申请提供了一种由上述制备方法制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
本申请提供的技术方案，相比于现有技术至少包括以下有益效果：
根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法能够有效酶解蜂王浆中易引发皮肤过敏反应的蛋白质，从而提高了乳液的修护功效，并且还使制得的乳液保存稳定性优异。此外，根据本申请的制备方法能够使得蜂王浆酶解多肽的溶解度更高，更易与脂质结合，具有起泡和乳化性质等，因而比较容易被机体所吸收；另一方面通过与β-环糊精的复配以及冷冻干燥技术的使用，进一步确保蜂王浆酶解多肽活性成分在后续工艺步骤中不被破坏，增强了其各种生物学作用，如加快机体组织再生、抗菌、抗肿瘤、提高机体免疫力以及抗氧化等功能。并且，通过加入特定组成和配比的D-甘露醇和L-鼠李糖，能够进一步地协同β-环糊精发挥稳定蜂王浆酶解多肽活性成分的作用，提高其美白护肤的功效。因此，以蜂王浆酶解多肽为主要原料所制备的功能性乳液有效提升了蜂王浆的生物学活性和产品的附加值。
此外，根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液中的蜂王浆酶解多肽不仅水溶性较强，比较容易被机体吸收，而且含丰富的生物活性物质，结合美白、养颜等作用的植物提取物，可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽，是一种适合各种肤质的功效性护肤品。
并且，根据本申请的乳液以蜂王浆酶解多肽作为主要功能原料，通过协同作用，使淡斑效果达到最佳；通过光果甘草提取物能深入皮肤内部并保持高活性，有效抑制黑色素生成过程中多种酶(如抑制酪氨酸酶)的活性；通过库拉索芦荟叶提取物能使皮肤细嫩、有弹性，具有防腐等作用；通过积雪草提取物可以紧致表皮与真皮连接部分，使皮肤变柔软而有弹性，还能促进真皮层中胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生；通过雪莲提取物有效地保护皮肤受紫外线侵害；以及通过芍药提取物延缓皮肤组织的衰老。本申请的修护乳液保存稳定性优异，对皮肤的浸透性高，皮肤弹性修护好。
具体实施方式
为了使本领域技术人员能够更清楚地理解本申请，以下将结合实施例详细地描述本申请。在进行描述之前，应当理解的是，在本说明书和所附的权利要求书中使用的术语不应解释为限制于一般含义和字典含义，而应当在允许发明人适当定义术语以进行最佳解释的原则的基础上，根据与本申请的技术方面相应的含义和概念进行解释。因此，这里提出的描述仅仅是出于举例说明目的的优选实例，并非意图限制本申请的范围，从而应当理解的是，在不偏离本申请的精神和范围的情况下，可以由其获得其他等价方式或改进方式，而本申请要求保护的范围应以权利要求限定的范围为准。除非特别说明，以下实施例中使用的试剂和仪器均为市售可得产品。
本申请通过如下的技术方案实现：首先将蜂王浆酶解以分解其中的蛋白质，获得蜂王浆多肽，之后采用β-环糊精等组分并冻干以稳定蜂王浆酶解多肽，保持其活性，之后混合乳液组分和植物提取物，从而得到根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
第一方面，本申请提供了一种含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法，其包括以下步骤：
1)将蜂王浆在胰蛋白酶和胃蛋白酶的存在下进行水解，过滤并冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末；
2)在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液混合，然后均质处理，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒；
3)将螯合剂、皮肤调理剂、保湿剂混合均匀得到混合物A；
4)在负压下向部分所述混合物A中加入润肤剂，搅拌均匀，加入剩余混合物A，搅拌均匀，然后均质处理，之后加入乳化剂，搅拌均匀，然后均质处理；以及
5)在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌，加入植物提取物，搅拌，然后均质处理，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
在根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法中，通过酶解、混合稳定组分β-环糊精等和冷冻干燥，不但消除了易引发皮肤过敏反应的蛋白质，还得到多种营养多肽，并且这些多肽溶解度更高，更易与脂质结合，具有起泡和乳化性质等，因而比较容易被机体所吸收，从而获得能够稳定维持生物活性的蜂王浆酶解多肽。之后，将所述蜂王浆酶解多肽与乳液活性组分和植物提取物混合均质，得到适合各种肤质的功效性护肤品，其能够显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽。
在根据本申请的一种可行的实施方式的制备方法中，所述步骤1)可以优选为：将底物浓度为70％～90％(质量浓度)(例如，可以为70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％或90％，或者为所述范围内的其它质量浓度百分比)，优选80％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.5％～0.7％(例如，可以为0.5％、0.51％、0.52％、0.53％、0.54％、0.55％、0.56％、0.57％、0.58％、0.59％、0.6％、0.61％、0.62％、0.63％、0.64％、0.65％、0.66％、0.67％、0.68％、0.69％或0.7％，或者为所述范围内的其它底物浓度比)，优选0.6％的胰蛋白酶和0.3％～0.5％(例如，可以为0.3％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％、0.4％、0.41％、0.42％、0.43％、0.44％、0.45％、0.46％、0.47％、0.48％、0.49％或0.5％，或者为所述范围内的其它底物浓度比)，优选0.4％的胃蛋白酶，在40℃～45℃，优选45℃的环境下恒温水解5h～7h(例如，可以为5h、5.5h、6h、6.5h或7h，或者为所述范围内的其它具体时间)，优选6h，之后灭活蛋白酶，过滤，并将滤液冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末。通过所述酶解过程，能够将蜂王浆中的蛋白质组分充分水解为多肽，即避免了相关的可能产生的过敏反应，还能够提供营养多肽。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述灭活蛋白酶可以为：在80℃～90℃，优选85℃下加热25min～35min，优选30min。在此条件下，能够将蛋白酶充分灭火，并有利于随后的过滤除去。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤1)中的所述冷冻干燥可以为：将滤液预冷3.5h～4.5h(例如，可以为3.5h、4.0h或4.5h，或者为所述范围内的其它具体时间)，优选4h后在-60℃～-90℃(例如，可以为-60℃、-65℃、-70℃、-75℃、-80℃、-85℃或-90℃，或者为所述范围内的其它具体温度值)，优选-80℃的低压环境下冷冻干燥40h～56h(例如，可以为40h、41h、42h、43h、44h、45h、46h、47h、48h、49h、50h、51h、52h、53h、54h、55h或56h，或者为所述范围内的其它具体时间)，优选48h。通过冷冻干燥，能够避免破坏蜂王浆酶解多肽中各种成分的结构，极大地保留了其生物活性。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)可以优选为：在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为4％～6％(例如，可以为4％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％或6％，或者为所述范围内的其它质量浓度百分比)，优选5％的β-环糊精水溶液混合，然后在30MPa～40MPa(例如，可以为30MPa、31MPa、32MPa、33MPa、34MPa、35MPa、36MPa、37MPa、38MPa、39MPa或40MPa，或者为所述范围内的其它具体值)，优选35MPa的压力下均质处理25min～35min(例如，可以为25min、26min、27min、28min、29min、30min、31min、32min、33min、34min或35min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，优选30min，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒。通过将预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与用作稳定剂的β-环糊精混合均质，从而能够有效提高蜂王浆酶解多肽粉末中的各个活性成分的稳定性，极大地保留其生物活性，使之能够在乳液中稳定存在，并具有较长的保质期。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)中，所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液的重量比可以为1:(5～10)，优选1:7。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤2)中的所述冷冻干燥可以为：在-60℃～-90℃(例如，可以为-60℃、-65℃、-70℃、-75℃、-80℃、-85℃或-90℃，或者为所述范围内的其它具体温度值)，优选-80℃的低压环境下冷冻干燥。通过冷冻干燥，能够避免破坏蜂王浆酶解多肽中各种成分的结构，极大地保留了其生物活性。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤3)可以优选为：将螯合剂加水溶解，再加入皮肤调理剂完全溶解，之后加入保湿剂，搅拌加热至85℃～90℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。通过上述过程，能够将螯合剂、皮肤调理剂和保湿剂充分混合。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤4)可以优选为：在负压下向部分所述混合物A，优选为3/4的所述混合物A中加入润肤剂，搅拌3min～7min(例如，可以为3min、4min、5min、6min或7min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，优选5min，加入剩余混合物A，搅拌3min～7min(例如，可以为3min、4min、5min、6min或7min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，优选5min，然后均质处理3min～7min(例如，可以为3min、4min、5min、6min或7min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，优选5min，之后加入乳化剂，搅拌3min～5min(例如，可以为3min、4min或5min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，然后均质处理5min～10min(例如，可以为5min、6min、7min、8min、9min或10min，或者为所述范围内的其它具体时间值)。通过上述过程，可以将乳液组分完全混合均匀，达到均一状态。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤4)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa(例如，可以为-0.03MPa、-0.035MPa、-0.04MPa、-0.045MPa、-0.05MPa、-0.055MPa、-0.06MPa、-0.065MPa或-0.07MPa，或者为所述范围内的其它具体值)。在上述负压下，能够有效防止在混合均质中氧气对乳液组分的影响，以及防止携入气体、抑制气泡的产生。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤5)可以优选为：在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌3min～5min(例如，可以为3min、4min或5min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，加入植物提取物，搅拌3min～5min(例如，可以为3min、4min或5min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，然后均质处理25min～35min(例如，可以为25min、26min、27min、28min、29min、30min、31min、32min、33min、34min或35min，或者为所述范围内的其它具体时间值)，优选30min，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述步骤5)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa。维持在上述负压下，能够有效防止在混合均质中氧气对乳液组分的影响，以及防止携入气体、抑制气泡的产生。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，所述步骤1)中的蜂王浆水溶液还包含质量浓度为0.10％～0.20％(例如，可以为0.10％、0.11％、0.12％、0.13％、0.14％、0.15％、0.16％、0.17％、0.18％、0.19％、0.2％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.22％、0.27％、0.28％、0.29％或0.3％，或者为所述范围内的其它底物浓度比)，优选0.15％的D-甘露醇和0.20％～0.40％(例如，可以为0.20％、0.21％、0.22％、0.23％、0.24％、0.25％、0.22％、0.27％、0.28％、0.29％、0.3％、0.31％、0.32％、0.33％、0.34％、0.35％、0.36％、0.37％、0.38％、0.39％或0.40％，或者为所述范围内的其它底物浓度比)，优选0.30％的L-鼠李糖。进一步地，所述D-甘露醇和所述L-鼠李糖的质量比为1:2。通过加入特定配比的D-甘露醇和和L-鼠李糖，能够与β-环糊精相互配合，进一步的协同提高针对蜂王浆酶解多肽活性成分的稳定作用，提高其美白护肤的功效。
结合第一方面，在一种可行的实施方式中，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其包括蜂王浆酶解多肽固体颗粒0.5～3重量份(例如，可以为0.5重量份、0.6重量份、0.7重量份、0.8重量份、0.9重量份、1.0重量份、1.1重量份、1.2重量份、1.3重量份、1.4重量份、1.5重量份、1.6重量份、1.7重量份、1.8重量份、1.9重量份、2.0重量份、2.1重量份、2.2重量份、2.3重量份、2.4重量份、2.5重量份、2.6重量份、2.7重量份、2.8重量份、2.9重量份或3重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，皮肤调理剂0.02～0.05重量份(例如，可以为0.02重量份、0.025重量份、0.03重量份、0.035重量份、0.04重量份、0.045重量份或0.05重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，保湿剂3～15重量份(例如，可以为3重量份、3.5重量份、4重量份、4.5重量份、5重量份、5.5重量份、6重量份、6.5重量份、7重量份、7.5重量份、8重量份、8.5重量份、9重量份、9.5重量份、10重量份、10.5重量份、11重量份、11.5重量份、12重量份、12.5重量份、13重量份、13.5重量份、14重量份、14.5重量份或15重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，润肤剂2～10重量份(例如，可以为2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份、4.5重量份、5重量份、5.5重量份、6重量份、6.5重量份、7重量份、7.5重量份、8重量份、8.5重量份、9重量份、9.5重量份或10重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，植物提取物0.05～0.2重量份(例如，可以为0.05重量份、0.06重量份、0.07重量份、0.08重量份、0.09重量份、0.10重量份、0.11重量份、0.12重量份、0.13重量份、0.14重量份、0.15重量份、0.16重量份、0.17重量份、0.18重量份、0.19重量份或0.2重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，鳌合剂0.01～0.05重量份(例如，可以为0.01重量份、0.015重量份、0.02重量份、0.025重量份、0.03重量份、0.035重量份、0.04重量份、0.045重量份或0.05重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)，乳化剂1～5重量份(例如，可以为1重量份、1.5重量份、2重量份、2.5重量份、3重量份、3.5重量份、4重量份、4.5重量份或5重量份，或者为所述范围内的其它具体重量份)以及余量的水。根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液通过包含蜂王浆酶解多肽、植物提取物等丰富的生物活性物质，可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽，美白、养颜，是一种适合各种肤质的功效性护肤品。
进一步地，在一种可行的实施方式中，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其优选包括蜂王浆酶解多肽2.6重量份，皮肤调理剂0.04重量份，保湿剂5.2重量份，润肤剂6.12重量份，植物提取物0.06重量份，螯合剂0.01重量份，乳化剂1.2重量份以及余量的水。在上述优选配比下，根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液能够更加有效地发挥其护肤功效。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述皮肤调理剂包括重量比为(1～2):(1～3)的透明质酸钠和可溶性胶原。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述保湿剂包括重量比为(3～5):(2～4):(2～4)的丙二醇、丁二醇和异戊二醇。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述润肤剂包括重量比为(2～3):(2～4):(1～3):(0.5～2):(0.2～0.5):(0.1～0.2)的异壬酸异壬酯、C13～16异链烷烃、辛酸\癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、矿油和C10～13异链烷烃。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述螯合剂为EDTA二钠。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述乳化剂包括重量比为(0.5～2):(0.5～1.5):(0.5～0.8):(0.5～0.8):(0.2～0.5):(0.01～0.03)的鯨蜡硬脂醇、甘油硬脂酸酯、PEG～100硬脂酸酯、PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、鯨蜡醇磷酸酯钾和聚山梨醇酯-80。
进一步地，在一种可行的实施方式中，所述植物提取物包括重量比为(1～3):(1～3):(1～3):(1～3):(1～3)的光果甘草根提取物、库拉索芦荟叶提取物、积雪草提取物、雪莲花提取物和芍药根提取物。在所述植物提取物中，所述光果甘草提取物具有深入皮肤内部并保持高活性，有效抑制黑色素生成过程中多种酶(如抑制酪氨酸酶)的活性作用；所述库拉索芦荟叶提取物具有能使皮肤细嫩、有弹性的功效，并且还具有防腐等作用；所述积雪草提取物具有紧致表皮与真皮连接部分，使皮肤变柔软而有弹性的功效，还能促进真皮层中胶原蛋白形成，使纤维蛋白再生；所述雪莲提取物具有有效地保护皮肤受紫外线侵害的功效；以及所述芍药提取物则能够延缓皮肤组织的衰老。通过这些植物提取物，能够极大地改善肤质。
第二方面，本申请提供了一种由上述制备方法制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法能够有效酶解蜂王浆中易引发皮肤过敏反应的蛋白质，从而提高了乳液的修护功效，并且还使制得的乳液保存稳定性优异。并且，通过加入特定组成和配比的D-甘露醇和L-鼠李糖，能够进一步地协同β-环糊精发挥稳定蜂王浆酶解多肽活性成分的作用，提高其美白护肤的功效。因此，以蜂王浆酶解多肽为主要原料所制备的功能性乳液有效提升了蜂王浆的生物学活性和产品的附加值。
此外，根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液中的蜂王浆酶解多肽不仅水溶性较强，比较容易被机体吸收，而且含丰富的生物活性物质，结合美白、养颜等作用的植物提取物，可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度，改善肌肤的色泽，对皮肤的浸透性高，皮肤弹性修护好，是一种适合各种肤质的功效性护肤品。
实施例
实施例1
采用以下的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
1)将底物浓度为80％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.6％的胰蛋白酶和0.4％的胃蛋白酶，在45℃的环境下恒温水解6h，之后在85℃下加热30min以灭活蛋白酶，过滤，并将滤液预冷4h后在-80℃的低压环境下冷冻干燥48h，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末；
2)在搅拌的同时将质量比为1:7的所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为5％的β-环糊精水溶液混合，然后在35MPa的压力下均质处理30min，之后在-80℃的低压环境下冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒；
3)将0.01g的螯合剂EDTA二钠盐加适量水溶解，再加入0.04g的皮肤调理剂(包含0.02g的透明质酸钠和0.02g的可溶性胶原)完全溶解，之后加入5.2g的保湿剂(包含2g的丙二醇重量、1.2g的丁二醇和2g的异戊二醇)，搅拌加热至85℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。
4)在-0.05MPa的负压下向3/4的所述混合物A中加入6.12g的润肤剂(包含1.5g的异壬酸异壬酯、1.5g的C13-16异链烷烃、1.5g的癸酸甘油三酯、0.9g的聚二甲基硅氧烷、0.5g的矿油和0.22g的C10-13异链烷烃)，搅拌5min，加入剩余混合物A，搅拌5min，然后均质处理5min，之后加入1.2g的乳化剂(包含0.2g的鯨蜡硬脂醇、0.2g的甘油硬脂酸酯、0.2g的PEG-100硬脂酸酯、0.2g的PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、0.2g的鯨蜡醇磷酸酯钾和0.2g的聚山梨醇酯-80)，搅拌5min，然后均质处理5min；以及
5)维持-0.05MPa的负压，将步骤4)的所得物控温在45℃，加入2.6g的蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌4min，加入0.06g的植物提取物(包括0.01g的光果甘草根提取物、0.01g的库拉索芦荟叶提取物、0.01g的积雪草提取物的、0.01g的雪莲花提取物和0.02g的芍药根提取物)，搅拌4min，然后均质处理30min，加水稀释至100g，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
实施例2
除了采用3g的蜂王浆酶解多肽、0.04g的皮肤调理剂(包含0.02g的透明质酸钠和0.02g的可溶性胶原)、6g的保湿剂(包含2.3g的丙二醇重量、1.4g的丁二醇和2.3g的异戊二醇)、8g的润肤剂(包含2g的异壬酸异壬酯、2g的C13-16异链烷烃、2g的癸酸甘油三酯、1.0g的聚二甲基硅氧烷、0.7g的矿油和0.3g的C10-13异链烷烃)，0.1g的植物提取物(包括0.015g的光果甘草根提取物、0.015g的库拉索芦荟叶提取物、0.015g的积雪草提取物的、0.015g的雪莲花提取物和0.04g的芍药根提取物)、0.02g的螯合剂EDTA二钠盐和2.4g的乳化剂(包含0.4g的鯨蜡硬脂醇、0.4g的甘油硬脂酸酯、0.4g的PEG-100硬脂酸酯、0.4g的PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、0.4g的鯨蜡醇磷酸酯钾和0.4g的聚山梨醇酯-80)之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
实施例3
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
1)将底物浓度为70％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.5％的胰蛋白酶和0.3％的胃蛋白酶，在45℃的环境下恒温水解5h，之后在90℃下加热25min以灭活蛋白酶，过滤，并将滤液预冷4.5h后在-90℃的低压环境下冷冻干燥40h，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末；以及
2)在搅拌的同时将质量比为1:5的所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为4％的β-环糊精水溶液混合，然后在30MPa的压力下均质处理35min，之后在-60℃的低压环境下冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒。
实施例4
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
1)将底物浓度为90％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.7％的胰蛋白酶和0.5％的胃蛋白酶，在40℃的环境下恒温水解7h，之后在80℃下加热35min以灭活蛋白酶，过滤，并将滤液预冷3.5h后在-60℃的低压环境下冷冻干燥56h，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末；以及
2)在搅拌的同时将质量比为1:10的所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为6％的β-环糊精水溶液混合，然后在40MPa的压力下均质处理25min，之后在-90℃的低压环境下冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒。
实施例5
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
3)将0.05g的螯合剂EDTA二钠盐加适量水溶解，再加入0.02g的皮肤调理剂(包含0.01g的透明质酸钠和0.01g的可溶性胶原)完全溶解，之后加入3g的保湿剂(包含1.25g的丙二醇重量、0.5g的丁二醇和1.25g的异戊二醇)，搅拌加热至85℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。
4)在-0.03MPa的负压下向3/4的所述混合物A中加入10g的润肤剂(包含2.5g的异壬酸异壬酯、2.5g的C13-16异链烷烃、2.5g的癸酸甘油三酯、1.5g的聚二甲基硅氧烷、0.7g的矿油和0.3g的C10-13异链烷烃)，搅拌3min，加入剩余混合物A，搅拌7min，然后均质处理3min，之后加入1g的乳化剂(包含0.15g的鯨蜡硬脂醇、0.15g的甘油硬脂酸酯、0.2g的PEG-100硬脂酸酯、0.2g的PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、0.15g的鯨蜡醇磷酸酯钾和0.15g的聚山梨醇酯-80)，搅拌5min，然后均质处理5min。
实施例6
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
3)将0.01g的螯合剂EDTA二钠盐加适量水溶解，再加入0.05g的皮肤调理剂(包含0.025g的透明质酸钠和0.025g的可溶性胶原)完全溶解，之后加入15g的保湿剂(包含6g的丙二醇重量、3g的丁二醇和6g的异戊二醇)，搅拌加热至90℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。
4)在-0.07MPa的负压下向3/4的所述混合物A中加入2g的润肤剂(包含0.5g的异壬酸异壬酯、0.5g的C13-16异链烷烃、0.5g的辛酸甘油三酯、0.3g的聚二甲基硅氧烷、0.2g的矿油和0.1g的C10-13异链烷烃)，搅拌7min，加入剩余混合物A，搅拌3min，然后均质处理7min，之后加入5g的乳化剂(包含0.8g的鯨蜡硬脂醇、0.9g的甘油硬脂酸酯、0.8g的PEG-100硬脂酸酯、0.8g的PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、0.8g的鯨蜡醇磷酸酯钾和0.9g的聚山梨醇酯-80)，搅拌3min，然后均质处理10min。
实施例7
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
5)维持-0.03MPa的负压，将步骤4)的所得物控温在45℃，加入3g的蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌3min，加入0.2g的植物提取物(包括0.04g的光果甘草根提取物、0.04g的库拉索芦荟叶提取物、0.04g的积雪草提取物的、0.04g的雪莲花提取物和0.04g的芍药根提取物)，搅拌5min，然后均质处理25min，加水稀释至100g。
实施例8
除了以下步骤之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液：
5)维持-0.07MPa的负压，将步骤4)的所得物控温在40℃，加入0.5g的蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌5min，加入0.05g的植物提取物(包括0.01g的光果甘草根提取物、0.01g的库拉索芦荟叶提取物、0.01g的积雪草提取物的、0.01g的雪莲花提取物和0.01g的芍药根提取物)，搅拌3min，然后均质处理35min，加水稀释至100g。
实施例9
除了在蜂王浆水溶液中还包含质量浓度为0.10％％的D-甘露醇和0.20％的L-鼠李糖之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
实施例10
除了在蜂王浆水溶液中还包含质量浓度为0.20％％的D-甘露醇和0.40％的L-鼠李糖之外，以与实施例1相同的制备方法来制备根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
对比例1
除了不进行步骤1)和2)，直接采用市售新鲜蜂王浆拉来替代蜂王浆酶解多肽固体颗粒作为原料之外，以与实施例1相同的制备方法来制备乳液。
对比例2
除了不进行步骤2)，直接采用步骤1)制得的预处理的蜂王浆酶解多肽粉末来替代蜂王浆酶解多肽固体颗粒作为原料之外，以与实施例1相同的制备方法来制备乳液。
实验实施例
以下通过实验数据进一步说明本申请的有益效果：
稳定性评价
将实施例1至10制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液和对比例1和2制得的乳液分别在50℃、25℃、以及-5℃下保存2个月时间，之后用肉眼观察其外观，并进一步用光学显微镜(400倍)观察，确认有无结晶的析出。作为结果，将在任意温度下都没有发现乳化分离或者结晶析出，在稳定性上优异的表示为“○”，将在任意的温度下有发现乳化分离或者结晶析出，不稳定的表示为“×”，结果列于以下表1中：
表1：稳定性测试
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从上述表1的数据可以看出，根据本申请的方法制备得到的含蜂王浆酶解多肽的乳液即使在-5℃下保存2个月稳定性依然非常良好，未发现乳化分离或者结晶析出现象。
人体试验评价
(1)受试对象
选取受试者260人，年龄20～45岁，均为室内工作者，分为13组，每组20人，其中12组为实验组，1组为对照组。受试者排除条件符合GB 171492《化妆品接触性皮炎诊断标准及处理原则》；无严重系统性疾病、无免疫缺陷或自身免疫性疾病；无活动性过敏性疾病；对护肤类化妆品无过敏史；1个月内未曾全身使用激素类药物及免疫抑制剂；非妊娠或哺乳期；无伦理学禁忌；根据Chardon分组法，皮肤颜色在Ⅱ～Ⅳ之间。
(2)测试指标
皮肤黑色素含量(MI值)：MI值表征黑色素指数，数值范围为0～999，测量数值越高说明皮肤中黑色素含量越高。Mexameter MX18皮肤黑色素和血红素测试探头的测定原理是基于光谱吸收的原理(RGB)，通过测定特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素的含量。
皮肤白度(亮度)(L*值)：L*值为白平衡，值越大颜色越偏向白色，反之偏向黑色。
皮肤明亮度(暗黄度)(ITA°值)：ITA°值为皮肤个体类型角，是与L*值和b*值相关的表征皮肤明亮度的数值。ITA°值越大，皮肤越明亮，反之皮肤越暗沉。
(3)测试方法
①控制温度20℃±2℃，相对湿度55％±3％。测试者面部稍作清洁后，在此环境下静坐30min后进行测试，用皮肤黑色素和血红素测试探头检测受试者使用样品前面部颧骨区域的MI值；用皮肤色差测试探头测试受试者使用样品前面部的L*值和ITA°值；用VISIA面部图像分析系统对受试者使用样品前的全脸进行拍照，分析区域尽量避免笑纹、反光区域、黑痣和头发。
②根据受试者使用样品前测试的MI值、L*值和ITA°值情况，将所有受试者分为对照组和实验组，保证对照组和实验组受试者的初始值无明显差异。
③受试者在每天洁面后，12组实验组分别将实施例1至10制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液和对比例1和2制得的乳液以1.25μL/cm2涂敷密度均匀涂敷测试部位，每天早晚各1次，而1组对照组洁面后不使用任何产品。
④在使用试样后的1、2和4周，在步骤①中所述的条件下分别检测对照组和实验组受试者的MI值、L*值和ITA°值，每次测量3次，取平均值，并利用VISIA面部图像分析系统拍摄实验组受试者的全脸照片。
(4)数据分析
应用spss 17.0软件对数据进行统计学分析，采用配对t检验方法对数据进行显著性分析，p＜0.05，认定为差异显著；p＜0.01，认定为差异极其显著。
(5)试验结果分析
皮肤MI值
皮肤MI值的测试结果如以下表2所示。由表2可知，在测试4周内，受试者使用根据本申请的实施例1至10制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液后，MI值呈明显降低的趋势，且在第1、2和4周时，均低于对比例1和2以及对照组。统计学结果显示，第2和4周时，实验组相对于未涂抹样品前，MI值已然存在显著性差异(p＜0.05)，以及实验组相对于对照组，MI值也存在明显的降低。
表2：皮肤MI值测试(平均值±SD，n＝3)
| 检测温度 | 第0周 | 第1周 | 第2周 | 第4周 |
| 对照组 | 230 | 229 | 231 | 230 |
| 实施例1 | 230 | 220 | 201 | 173 |
| 实施例2 | 230 | 219 | 196 | 174 |
| 实施例3 | 230 | 220 | 199 | 170 |
| 实施例4 | 230 | 218 | 195 | 168 |
| 实施例5 | 231 | 220 | 200 | 179 |
| 实施例6 | 230 | 216 | 194 | 172 |
| 实施例7 | 229 | 219 | 196 | 170 |
| 实施例8 | 230 | 219 | 198 | 174 |
| 实施例9 | 231 | 211 | 187 | 162 |
| 实施例10 | 229 | 210 | 189 | 160 |
| 对比例1 | 230 | 220 | 210 | 199 |
| 对比例2 | 230 | 215 | 203 | 192 |
皮肤L*值
皮肤L*值的测试结果如以下表3所示。由表3可知，在测试4周内，受试者使用根据本申请的实施例1至10制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液后，L*值呈升高趋势，且在第1、2和4周时，均高于对比例1和2以及对照组。统计学结果显示，第2和4周时，实验组相对于未涂抹样品前，L*值已然存在显著性差异(p＜0.05)；实验组相对于对照组，L*值已然存在显著性差异(p＜0.05)，说明本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液可以有效改善肌肤的色泽。
表3：皮肤L*值测试(平均值±SD，n＝3)
皮肤ITA°值
皮肤ITA°值的测试结果如以下表4所示。由表4可知，在测试4周内，受试者使用根据本申请的实施例1至10制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液后，ITA°值呈升高趋势，且在第1、2和4周时，均高于对比例1和2以及对照组。统计学结果显示，第2和4周时，实验组相对于未涂抹样品前，ITA°值已然存在显著性差异(p＜0.05)；说明本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液可以显著改善肌肤的暗黄情况，提高皮肤的明亮度。
表4：皮肤ITA°值测试(平均值±SD，n＝3)
使用根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液前后的VISIA效果分析
在使用根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液前及使用4周后，利用VISIA面部图像分析系统拍摄受试者的全脸照片。结果表明，受试者在使用乳液前，皮肤暗黄、有散在小斑点；使用4周后皮肤质地较使用前变细，色泽变白，斑点变淡，使用前后相对比，斑点数减少了18％，棕色斑减少了8％，说明根据本申请的含蜂王浆酶解多肽的乳液还具有一定的淡斑效果，有效减少黑色素的沉积。
本申请的上述具体实施例仅仅是用于对本申请进行解释的优选实施例而已，而并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要做出没有创造性贡献的修改，然而，凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (15)
1.一种含蜂王浆酶解多肽的乳液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将蜂王浆在胰蛋白酶和胃蛋白酶的存在下进行水解，过滤并冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末，其中蜂王浆水解时还加入质量浓度为0.10％～0.20％的D-甘露醇和0.20％～0.40％的L-鼠李糖，所述D-甘露醇和所述L-鼠李糖的质量比为1:2；
2)在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液混合，然后均质处理，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒；
3)将螯合剂、皮肤调理剂、保湿剂混合均匀得到混合物A；
4)在负压下向部分所述混合物A中加入润肤剂，搅拌均匀，加入剩余混合物A，搅拌均匀，然后均质处理，之后加入乳化剂，搅拌均匀，然后均质处理；以及
5)在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌，加入植物提取物，搅拌，然后均质处理，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)为：将底物浓度为70％～90％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.5％～0.7％的胰蛋白酶和0.3％～0.5％的胃蛋白酶，在40℃～45℃的环境下恒温水解5h～7h，之后灭活蛋白酶，过滤，并将滤液冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末，
所述灭活蛋白酶为：在80℃～90℃下加热25min～35min；
所述冷冻干燥为：将滤液预冷3.5h～4.5h后在-60℃～-90℃的低压环境下冷冻干燥40h～56h。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)为：将底物浓度为80％的蜂王浆水溶液调节pH值为8.0，加入底物浓度比为0.6％的胰蛋白酶和0.4％的胃蛋白酶，在45℃的环境下恒温水解6h，之后灭活蛋白酶，过滤，并将滤液冷冻干燥，得到预处理的蜂王浆酶解多肽粉末，
所述灭活蛋白酶为：在85℃下加热30min；
所述冷冻干燥为：将滤液预冷4h后在-80℃的低压环境下冷冻干燥48h。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)为：在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为4％～6％的β-环糊精水溶液混合，然后在30MPa～40MPa的压力下均质处理25min～35min，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒，
所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液的重量比为1:(5～10)，
所述冷冻干燥为：在-60℃～-90℃的低压环境下冷冻干燥。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)为：在搅拌的同时将所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与质量浓度为5％的β-环糊精水溶液混合，然后在35MPa的压力下均质处理30min，冷冻干燥，得到蜂王浆酶解多肽固体颗粒，
所述预处理的蜂王浆酶解多肽粉末与β-环糊精水溶液的重量比为1:7，
所述冷冻干燥为：在-80℃的低压环境下冷冻干燥。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)为：将螯合剂加水溶解，再加入皮肤调理剂完全溶解，之后加入保湿剂，搅拌加热至85℃～90℃，直到保湿剂完全溶解均匀，得到混合物A。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)为：在负压下将部分所述混合物A加入润肤剂，搅拌3min～7min，加入剩余混合物A，搅拌3min～7min，然后均质处理3min～7min，之后加入乳化剂，搅拌3min～5min，然后均质处理5min～10min，
所述步骤4)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤4)为：在负压下将3/4的所述混合物A中加入润肤剂，搅拌5min，加入剩余混合物A，搅拌5min，然后均质处理5min，之后加入乳化剂，搅拌3min～5min，然后均质处理5min～10min。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)为：在负压下将步骤4)的所得物控温在40℃～45℃，加入所述蜂王浆酶解多肽固体颗粒，搅拌3min～5min，加入植物提取物，搅拌3min～5min，然后均质处理25min～35min，加水稀释，得到含蜂王浆酶解多肽的乳液，
所述步骤5)中的所述负压为-0.03MPa～-0.07MPa。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述步骤5)中所述均质处理30min。
11.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中的蜂王浆水解时还包含质量浓度为0.15％的D-甘露醇和0.30％的L-鼠李糖。
12.根据权利要求1至11任一项所述的制备方法，其特征在于，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其包括蜂王浆酶解多肽固体颗粒0.5～3重量份，皮肤调理剂0.02～0.05重量份，保湿剂3～15重量份，润肤剂2～10重量份，植物提取物0.05～0.2重量份，鳌合剂0.01～0.05重量份，乳化剂1～5重量份以及余量的水。
13.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，基于100重量份的所述含蜂王浆酶解多肽的乳液，其包括蜂王浆酶解多肽2.6重量份，皮肤调理剂0.04重量份，保湿剂5.2重量份，润肤剂6.12重量份，植物提取物0.06重量份，螯合剂0.01重量份，乳化剂1.2重量份以及余量的水。
14.根据权利要求12所述的制备方法，其特征在于，
所述皮肤调理剂包括重量比为(1～2):(1～3)的透明质酸钠和可溶性胶原；
所述保湿剂包括重量比为(3～5):(2～4):(2～4)的丙二醇、丁二醇和异戊二醇；
所述润肤剂包括重量比为(2～3):(2～4):(1～3):(0.5～2):(0.2～0.5):(0.1～0.2)的异壬酸异壬酯、C13～16异链烷烃、辛酸\癸酸甘油三酯、聚二甲基硅氧烷、矿油和C10～13异链烷烃；
所述螯合剂为EDTA二钠；
所述乳化剂包括重量比为(0.5～2):(0.5～1.5):(0.5～0.8):(0.5～0.8):(0.2～0.5):(0.01～0.03)的鲸蜡硬脂醇、甘油硬脂酸酯、PEG～100硬脂酸酯、PEG-40失水山梨醇硬脂酸酯、鲸蜡醇磷酸酯钾和聚山梨醇酯-80；以及
所述植物提取物包括重量比为(1～3):(1～3):(1～3):(1～3):(1～3)的光果甘草根提取物、库拉索芦荟叶提取物、积雪草提取物、雪莲花提取物和芍药根提取物。
15.一种权利要求1至14任一项所述的制备方法制得的含蜂王浆酶解多肽的乳液。
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| CN110882207A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-03-17 | 北京蜜慕科技有限公司 | 一种用于皮肤修护的精华液制备工艺与方法 |
-
2021
- 2021-12-09 CN CN202111499543.9A patent/CN114099364B/zh active Active
Patent Citations (6)
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