CN113896796A - 一种抗trop2抗体 - Google Patents

一种抗trop2抗体 Download PDF

Info

Publication number
CN113896796A
CN113896796A CN202110678447.4A CN202110678447A CN113896796A CN 113896796 A CN113896796 A CN 113896796A CN 202110678447 A CN202110678447 A CN 202110678447A CN 113896796 A CN113896796 A CN 113896796A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibody
seq
scfv
fab
ser
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110678447.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113896796B (zh
Inventor
朱义
张勇
卓识
丁沐然
王尊
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd
Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd, Sichuan Baili Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Chengdu Bailidote Biological Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN202210931407.0A priority Critical patent/CN116589587A/zh
Publication of CN113896796A publication Critical patent/CN113896796A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113896796B publication Critical patent/CN113896796B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/77—Internalization into the cell
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及单价和多价的抗TROP2抗体，该类抗体与TROP2蛋白特异性结合，相对亲和力强，内吞效率高，该特性抗体在ADC药物开发中具有广阔的应用前景。本发明还涉及鼠单克隆抗体，人鼠嵌合抗体，人源化抗体以及该类抗体在肿瘤诊断和治疗中的用途。

Description

一种抗TROP2抗体
技术领域
本发明涉及能特异性结合人的TROP2蛋白的抗体，特别是鼠、嵌合和人源化来源的单克隆抗体，以及编码这些抗体的氨基酸和核苷酸序列。本发明也包含这些抗体作为诊断试剂或者药物在诊断性和/或治疗性处理恶性肿瘤或者所述受体过表达有关的任何病变的用途。
技术背景
Trop2蛋白，又名II类滋养层抗原(trophoblast antigen 2)、肿瘤钙信号转导因子2(tumou associated calcium signal transducer 2)，其由染色体1p32位的单拷贝基因TACSTD2编码。其对应的mRNA合成36kDa初生多肽，在经过N端糖基化后形成单跨膜域的单体膜蛋白(Annie R.A.et al.,2015)。
在TROP2的26氨基酸长度之胞内区序列中，存在第303位的丝氨酸位点，此位点在物种间的保守性较高(Basu et al.,1995；Annie R.A.et al.,2015)，且能被PKC激酶磷酸化，既成信号转导分子PIP2的结合位点，并下游刺激胞质钙离子浓度的上升(Sewedy etal.,1998；Alberti.et al.,1999)。而在体外细胞系中过表达缺失胞质区的Trop2，此蛋白即失去生长刺激的功能，表明Trop2胞质区域的其它信号通路刺激作用(Guerra.et al)。Trop2的胞外区具有能够结合EGF生长因子的结构域，从而可潜在截获EGF以下调IGF-1R/Akt信号通路的活性，因此，Trop2表达量的下降可反向激活IGF-1R/Akt信号通路(Lin.etal.,2011；Annie R.A.et al.,2015)。
Trop2在肿瘤发生过程中具有明显促进作用。过表达Trop2可显著增强NIH3T3细胞的成瘤性(Wang.et al.,2008),Trop2亦可影响上皮-间质转化(EMT)，并增强癌细胞的迁徙与侵入能力(Trerotola.et al.,2013；Li.et al.,2017)此过程可能通过影响PI3K/Akt信号通路而实现：在过表达Trop2的胆囊癌细胞中，Akt的磷酸化激活程度明显提升，反之，敲低Trop2的表达则可抑制此信号通路的活性(Li.et al.,2017)。此外，Trop2过表达亦能刺激MAPK/ERK信号通路的活性，从而导致胰腺癌细胞的增殖上调，及荷瘤小鼠的肿瘤恶化程度增加(Cubas.et al.,2010)。
Trop2蛋白的表达见诸于一系列表皮源性组织，如胚胎发育和成体时期的乳腺、肾脏和胰腺等(Annie R.A.et al.,2015)。但在正常组织对应的肿瘤组织中，Trop2蛋白的表达量无差别地显著上升，且表达程度的强弱与动物模型中肿瘤生长程度呈现正相关性质(Trerotola.et al.,2013)，由于Trop2基因序列本身未发生突变或扩增，因此Trop2在癌症中的表达量上调被认为是转录调控层面的刺激所致(Trerotola.et al.,2013)。在不同种类的实质瘤病患体内，此蛋白的过表达通常预示肿瘤的预后不良(Zeng.et al.,2016)。在胆囊癌(Chen.et al.,2014)、肠胃癌(Muhlmann.et al.,2009)、肝门部胆管癌(Ning.etal.,2013)和胰腺癌(Fong.et al.,2008)病症的案例中，Trop2高表达病患者的生存率明显下降。鉴于Trop2在多种癌症中的高表达性，以及其对病患生存率的显著影响，此蛋白被认为是一个潜在的肿瘤治疗靶点。
在已知的抗体药物种类中，一项针对Trop2靶点的毒素藕联抗体(ADC)：IMMU-132(Goldenberg.et al.,2015)。此ADC的装载抗体RS7是通过杂交瘤制备手段，经肺癌细胞膜粗提物免疫的小鼠脾脏淋巴细胞与鼠骨髓瘤细胞融合筛选获得(Stein.et al.,1990)。而在粗提物中，RS7所结合的抗原后被证明为Trop2(Stein.et al.,1994)。RS7抗体本身可被多种癌细胞所内吞，因而使其具有制备成ADC的潜力(Stein.et al.,1993)。在鼠源RS7经过序列人源化以后，人源化版本的RS7被用于制备抗体偶联药物，并以链间巯基藕联的方式装载SN-38药物、一种拓扑异构酶的抑制剂(Moon,et al.,2008；Sahota.et al.,2017)在最近的临床I期数据中，IMMU-132在多种癌症，尤其在三阴性乳腺癌的治疗中具有临床有效性(Starodub.et al.,2015；Sahota and Vahdat.,2017)。
此专利披露的信息涉及医药领域，具体而言，本专利所述嵌合抗体或人源化抗体可结合人II类滋养层抗原蛋白(Trop2)，且具备抗体偶联药物疗法中的靶向抗体功能。
发明内容
本发明不涉及天然形式的抗体，发明中所涉及抗体均通过免疫小鼠以及鉴定和分离手段获得，或者通过基因重组获得。根据本发明所述，要求保护对象为抗体或功能片段或衍生物，所述抗体的特征在于包含至少一个CDR，其氨基酸序列来源于SEQ ID No.1至SEQID No.12。
任何一个抗体片段或者衍生物若含有至少一个CDR，且该CDR的序列在与序列SEQID No.1至SEQ ID No.12进行优化比对后，至少具有80％的同一性，或优选的85％、90％、95％或者98％同一性的，都应该理解为本发明的等同物，因此也是本发明的一部分。
更具体的，本发明所述的抗体或者起功能片段之一或者衍生物的特征在于其包含重链，所述的重链包含至少一个CDR，所述的CDR选自含有氨基酸序列SEQ ID No.1至SEQ IDNo.6的序列。
更具体的，本发明所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物的特征在于其包含轻链，所述的重链包含至少一个CDR，所述的CDR选自含有氨基酸序列SEQ ID No.7至SEQ IDNo.12的序列。
根据所述方面，更具体的第一个具体实施方式，本发明所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含重链，所述重链包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其中CDR-H1包含氨基酸序列SEQ ID No.1,CDR-H2包含氨基酸序列SEQ ID No.2,CDR-H3包含氨基酸序列SEQ IDNo.3.
更具体的,根据第一个具体实施方式,所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含重链，所述重链的序列中，嵌合抗体包含序列SEQ ID No.13,人源化抗体包含序列SEQ ID No.17。
根据所述方面，更具体的第一个具体实施方式,本发明所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含轻链，所述轻链包含CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3，其中CDR-L1包含氨基酸序列SEQ ID No.7，CDR-L2包含氨基酸序列SEQ ID No.8，CDR-L3包含氨基酸序列SEQ IDNo.9。
更具体的,根据第一个具体实施方式,所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含轻链，所述轻链的序列中，嵌合抗体包含序列SEQ ID No.14，人源化抗体包含序列SEQ ID No.18。
根据所述方面，更具体的第二个具体实施方式,本发明所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含重链，所述重链包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3，其中CDR-H1包含氨基酸序列SEQ ID No.4，CDR-H2包含氨基酸序列SEQ ID No.5,CDR-H3包含氨基酸序列SEQ IDNo.6。
更具体的,根据第二个具体实施方式,所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含重链，所述重链的序列中，嵌合抗体包含序列SEQ ID No.15,人源化抗体包含序列SEQ ID No.19.
根据所述方面，更具体的第二个具体实施方式,本发明所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含轻链，所述轻链包含CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3，其中CDR-L1包含氨基酸序列SEQ ID No.10,CDR-L2包含氨基酸序列SEQ ID No.11,CDR-L3包含氨基酸序列SEQID No.12
更具体的,根据第二个具体实施方式,所述的抗体或者其功能片段之一或者衍生物包含轻链，所述轻链的序列中嵌合抗体包含序列SEQ ID No.16,人源化抗体包含序列SEQID No.20
作为发明的另一方面，本发明涉及分离的DNA，其特征包含选自下述DNA序列的核酸：其每一条核酸编码的氨基酸序列为上述氨基酸序列SEQ ID No.1至SEQ ID No.20中的一条。
更为具体的，包括选自下述的DNA序列的核酸：
第一个具体实施方式包含序列SEQ ID No.21、SEQ ID No.22、SEQ ID No.23和序列SEQ ID No.27、SEQ ID No.28、SEQ ID No.29的核酸序列。
第二个具体实施方式包含序列SEQ ID No.24、SEQ ID No.25、SEQ ID No.26和序列SEQ ID No.30、SEQ ID No.31、SEQ ID No.32的核酸序列。
再进一步具体说明
第一个具体实施方式嵌合抗体序列包含序列SEQ ID No.33和SEQ ID No.34，人源化抗体序列包含序列SEQ ID No.37和SEQ ID No.38的核酸序列。
第二个具体实施方式嵌合抗体序列包含序列SEQ ID No.35和SEQ ID No.36，人源化抗体序列包含序列SEQ ID No.39和SEQ ID No.40的核酸序列。
附图说明
图1是4D3轻链、重链可变区序列CDR区识别以及二维结构图；
图2是7F11轻链、重链可变区序列CDR区识别以及二维结构图；
图3是ch4D3、ch7F11的ELISA结合曲线；
图4是ch4D3与ch7F11的细胞表面结合活性图；
图5是ch4D3与ch7F11抗体在BXPC-3活细胞上的内吞活性图；
图6是4D3鼠源抗体的轻重链可变区序列，其在人源化前后的类人分值(humanness；Z-score)变化图；
图7是7F11鼠源抗体的轻重链可变区序列，其在人源化前后的类人分值(humanness；Z-score)变化图；
图8是4D3人源化抗体与嵌合抗体在同等稀释浓度下的结合曲线图；
图9是4D3人源化抗体在Day7(图A)，Day14(图B)，Day21(图C)时刻的SEC检测结果图；
图10是7F11人源化抗体与嵌合抗体在同等稀释浓度下的结合曲线图；
图11是7F11人源化抗体在Day7(图A)，Day14(图B)，Day21(图C)时刻的SEC检测结果图；
图12是4D3-humanized-biotin抗体分别与0.02～50ug/ml的ch4D3与hu4D3抗体结合表位竞争结果；
图13是7F11-humanized-biotin抗体分别与0.02～50ug/ml的ch7F11与hu7F11抗体结合表位竞争结果。
图14是hu7F11抗体在3种细胞中的结合数据。
图15是Hu4D3抗体在3种细胞中的结合数据。
图16是hu7F11抗体在3种细胞中的内吞数据。
图17是Hu4D3抗体在3种细胞中的内吞数据。
具体实施方式
实施例1TROP2抗原免疫6～8周龄的Balb/c小鼠
构建TROP2胞外区表达载体，用悬浮细胞293F瞬时表达毫克级的TROP2蛋白。选择6-8周龄的小鼠，按如下表格中的免疫剂量和时间点进行TROP2抗原的皮下免疫，终免选择三免后血浆效价最高的小鼠，免疫流程如表1所示。
程序 免疫进程(天数) 途径、剂量等
初免 0 100ug/0.25ml/每只鼠，完全佐剂，皮下免疫
二免 14 100ug/0.25ml/每只鼠，不完全佐剂，皮下免疫
三免 35 100ug/0.25ml/每只鼠，不完全佐剂，皮下免疫
三免采血 42 TROP2抗原包板的ELISA检测尾静脉血浆效价
终免 56 50ug/0.25ml/每只鼠，磷酸盐缓冲液，腹腔免疫
表1
实施例2免疫小鼠脾脏细胞体外融合
预先培养小鼠骨髓瘤细胞SP2/0于DMEM+FBS 10％完全培养基中，融合前使用巴斯德吸管吹取5x107个SP2/0细胞，以1000g，5min转速离心并用37℃预热的无血清DMEM润洗残留血清，同时采集KM鼠腹腔内的饲养细胞，并以5x103个/100ul/孔的细胞量将饲养细胞铺于96孔板。在终免后第3天眼球采血、并处死终免疫小鼠，75％酒精浸泡消毒后置于无菌操作台剪取脾脏组织。用预热的无血清DMEM吹取脾细胞，取1/2个脾脏的细胞进行计数，以脾细胞:SP2/0细胞数量比例1:1～10:1混合，离心后吸干残留DMEM。加入1ml体积的预热PEG-1450并均匀混合，3min后加入35ml预热的DMEM培养基稀释终止。1000rpm，5min离心细胞，后用HAT筛选培养基重悬细胞，铺板于10块96孔板中。
实施例3杂交瘤细胞上清阳性检测
融合后7～10天，观察细胞形成克隆的情况。在上清检测前一天用DMEM+10％FBS培养基换液一次。同时以2ug/ml浓度的TROP2抗原包被ELISA酶标板。在检测当天，在无菌操作台上用多通道电动移液器吸取96孔板中的培养基上清，悬空加入对应的ELISA酶标板孔中。将ELISA板置于37℃孵育1hr，后PBST洗涤孔板3次，加入1:5000稀释的HRP标记羊抗小鼠抗体。37℃孵育1hr后，PBST洗涤3次。配置TMB底物显色液，每孔添加50ul，于室温条件反应5～10min。随后加入50ul/孔2M硫酸溶液终止显色。根据酶标板上的OD450读值筛选阳性克隆。
实施例4阳性细胞株亚克隆筛选
标记OD450值较高的融合细胞板孔，持续培养不超过2天。按照实施例2中方法铺板饲养细胞，并用200ul枪头吹匀阳性细胞，取不超过5ul细胞悬液体积进行亚克隆，将其稀释至100ul，并加入预先含有100ul/孔饲养细胞悬液的96孔板中的第一个空。从A1到H1的方向以100ul体积均匀吹打至最后一排，再用多通道电动移液器吸取100ul从A1～A12的方向均匀吹打至最后一列。将孔板培养7～10天，标记单一克隆形成的板孔，并参照实施例中的方法进行上清阳性检测。
实施例5腹水制备单克隆抗体
制备腹水前7日，向Balb/c小鼠腹腔注射1ml/每只用量的石蜡油。随后挑取第一次亚克隆后阳性率稳定的单克隆细胞，进行扩大培养。在细胞长至至少一个6孔板板孔规模时收取细胞，以1000g，3min离心条件，用磷酸缓冲液润洗细胞3次。按每只小鼠注射1～2x106个/每只的量制备。饲养小鼠7～10天并观察小鼠腹腔。用18号无菌针头采集腹水，并以14000g，5min转速收集腹水上清。所得上清经过proteinA/G亲和柱纯化后即得到4D3和7F11细胞株的单克隆抗体。
实施例6获取4D3抗体轻重链可变区编码序列
培养单克隆细胞株至6孔板，其汇合率达到90～100％时用trizol收集细胞。在无RNase环境中提取总RNA，使用oligo dT作为逆转录引物合成cDNA文库。此cDNA文库经过末端转移酶TdT的5’端加dGTP反应后用作PCR模板，使用上游引物为oligo dC,下游引物对应抗体轻重链的5’端CH1恒定区的引物搭配，借助高保真酶primerSTAR进行可变区基因5’RACE扩增。将PCR产物进行DNA琼脂糖凝胶电泳分析，回收位于～750bp长度的DNA片段，进行下游TA克隆。将菌落PCR鉴定为阳性的菌株实施测序。所得序列由在线IMGT数据库进行序列比对鉴定以及可变区序列二维作图。
实施例7获取7F11抗体轻重链可变区编码序列
参照实施案例6中的操作过程，得到7F11克隆的轻重链可变区序列，如图2所示。
实施例8抗体的表达与纯化
使用FreestyleTM 293-F(Invitrogen)悬浮细胞表达抗体。转染前一天，以6×105个/mL密度将细胞接种于含300mL F17完全培养基(FreestyleTM F17表达培养基，Gibco公司)的1L摇瓶中，37℃，5％CO2，120rpm细胞培养摇床过夜培养。次日，用PEI进行抗体表达质粒的转染，其中质粒:PEI比例为2:1。转染后一天，按2.5％(v/v)加入TN1补料培养基，继续培养4天后离心收集上清。收集得到的表达上清，经Protein A亲和层析柱(Mabselect SureLX，GE公司)，以0.1M柠檬酸(pH3.0)洗脱，捕获的抗体用1M Tris-HCl(pH9.0)按1/10(v/v)调节至pH7.0，再通过凝胶过滤层析柱SEC(Superdex 200，GE公司)去除多聚体和内毒素等杂质，同时将抗体缓冲液置换成PBS(pH7.4)，通过此方法获得的抗体，目标抗体单体(POI％)大于99％，用于后续试验。
实施例9 ELISA方法评估抗体亲和性
将可变区基因克隆至含有人抗体恒定区的表达质粒上，参照实施例8方案瞬时转染真核细胞293F并纯化分泌的4D3与7F11嵌合抗体。将嵌合抗体稀释为50ug/ml浓度，添加至TROP2包被的ELISA酶标板上的A1～H1孔，再从A1至A12方向进行3倍体积横向稀释；37℃孵育1hr后润洗，加入小鼠抗人Fc的HRP标记抗体，37℃孵育后进行显色。
图3表明4D3与7F11均具有较好的相对亲和力。EC50(B4)：0.047ug/ml；EC50(B7)：0.071ug/ml。
实施例10细胞免疫荧光方法评估抗体生物学活性
将BXPC-3细胞铺板并生长24～48hr，使96孔细胞培养板内的细胞汇合率达到40～50％。实验当天吸弃上清并洗涤2次。添加3％BSA含量之PBS溶液，37℃封闭1hr。将嵌合抗体以及hRS7抗体稀释至10ug/ml于37℃孵育1h，吸弃一抗溶液，洗涤4次后，加入4％多聚甲醛溶液，100μL/孔并室温静置20min，重复洗涤2次后，按1:800比例，用1％BSA溶液稀释二抗，100ul/孔。吸弃二抗悬液，重复洗涤4次，将2μg/ml浓度的DAPI染液按100μL/孔添加，室温避光孵育5min。吸弃DAPI染液，重复洗涤4次后，加入1×DPBS溶液，100μL/孔，于荧光显微镜下观察，并拍照记录实验结果。
附图4：同等抗体浓度及处理条件下，ch4D3与ch7F11的细胞表面结合活性。
实施例11细胞内吞方法评估抗体生物学活性
参照实施例10中的方法铺板BXPC-3细胞。实验当天，吸弃细胞培养液，加入PBS溶液，重复洗涤2次。用含1％FBS之培养基，将嵌合抗体以及hRS7抗体稀释至10ug/ml于4℃孵育1h，吸弃一抗溶液，加入待检细胞培养用的完全培养基，37℃孵育1hr。吸弃细胞培养基，重复洗涤4次后，加入4％多聚甲醛溶液，100μL/孔并静置20min。重复洗涤2次后，添加含0.5％Triton-X100的3％BSA封闭液，100μL/孔，室温静置1h。吸弃打孔液，重复洗涤2次。按1:800比例稀释抗人IgG荧光二抗；100μL/孔，37℃孵育1h。吸弃荧光二抗溶液，重复洗涤4次后进行DAPI染色，室温避光静置15min。重复洗涤4次，加入1×DPBS溶液，100μL/孔，于荧光显微镜下观察荧光染色结果，如图4、5所示。
实施例12 4D3人源化序列改造
获得4D3可变区的核酸序列测序结果，将序列输入网站IMGT所提供的V-QUEST序列查对窗口(http://www.imgt.org/IMGT_vquest/vquest)。以得到轻重链可变区的序列特征，包括三个CDR区序列和四个FR区序列，以及亲缘关系最相近的胚系基因家族序列。在IMGT-DomainGapAlign氨基酸查对窗口中，查找序列相似度最高的人源胚系基因家族序列，4D3轻链对应人IGKV1-27*01+IGKJ2*02家族序列，4D3重链对应人IGHV1-3*01+IGHJ4*01家族序列。将此人源胚系基因序列上的CDR区替换为4D3轻重链的CDR，再使用IMGT-Structural query查对抗体结构信息。最终获得4D3-Hum版本的轻重链人源化序列。将4D3鼠源序列及人源化序列输入线上网站评估人类抗体相似性分值。
图6蓝色线代表鼠源抗体库的Z-score分布范围和频率，绿色线代表人抗体库的Z-score分布范围和频率。红色直线代表4D3轻链重链所获得的Z-score分值。人源化后，4D3的Z-score分值明显上升。
实施例13 7F11人源化序列改造
参照实施案例12中的操作过程，得到7F11鼠抗体的轻重链人源化序列。将7F11鼠源序列，人源化序列输入线上网站评估人类抗体相似性分值。
图7中蓝色线代表鼠源抗体库的Z-score分布范围和频率，绿色线代表人抗体库的Z-score分布范围和频率。红色直线代表4D3轻链重链所获得的Z-score分值。在人源化以后，7F11的Z-score分值明显上升。
实施例14 4D3人源化抗体相对亲和力分析
将4D3人源化抗体序列克隆至真核表达载体，参照实施例8方案瞬时转染真核细胞293F。纯化后的抗体统一稀释至2ug/ml，与人源化之前的鼠源抗体一同添加至TROP2包被的ELISA酶标板上的A1～H1孔，再从A1～A12方向进行3倍稀释；37℃孵育1hr后润洗，再加入抗人Fc的HRP标记抗体，37℃孵育后进行显色。最终通过EC50和曲线形态来比较ch4D3和hum4D3抗体之间的相对亲和力。
图8，EC50(4D3-chimeric)：0.056ug/ml；EC50(4D3-humanized)：0.0502ug/ml。
实施例15 4D3人源化抗体热稳定性分析
将纯化后的hum4D3抗体透析，以PBS缓冲液透析并标定终浓度为2mg/ml，并按70ul/管分两批，每批3管。将两批样品各放置于4℃和37℃，并按照第0天，第7天，第14天分别取出样品管。将样品用于SEC分析以评估抗体的降解及聚集情况。
图9：4D3人源化抗体在Day7(图A)，Day14(图B)，Day21(图C)时刻的SEC检测结果。4D3-humanized抗体在37℃条件下各时间点的单体和聚集体，以及其所占检测分子的比例(％)显示于图D表格。
实施例16 7F11人源化抗体相对亲和力及结合表位一致性分析
参照实施例14中的操作过程进行7F11人源化抗体的相对亲和力评估
图10：7F11人源化抗体与嵌合抗体在同等稀释浓度下的结合曲线，EC50(7F11-chimeric)：0.061ug/ml；EC50(7F11-humanized)：0.0601ug/ml。
实施例17 7F11人源化抗体热稳定性分析
参照实施例15中的操作过程进行7F11人源化抗体的热稳定性分析。
附图11：7F11人源化抗体在Day7(图A)，Day14(图B)，Day21(图C)时刻的SEC检测结果。7F11-humanized抗体在37℃条件下各时间点的单体和聚集体，以及其所占检测分子的比例(％)显示于图D表格。
实施例18人源化抗体与亲本抗体的抗原亲和力分析
采用Pall ForteBio Octet光学分析技术平台，评估抗体-抗原结合的绝对亲和力。在该方法中，生物素标记的抗原被固定在链霉亲和素生物传感器芯片表面，基线平衡180sec，后与溶液中的浓度梯度稀释之抗体发生30sec的结合，使得芯片的光学厚度增加，导致波长发生漂移(Δλ)，随后进入30sec的解离阶段。Trop2抗原和相应的抗体相互作用被实时测定，在各浓度下对结合的特异性、结合速率、解离速率或者样品浓度进行精密准确的检测。汇总至少5个浓度梯度下的k-on和k-off值后，到KD结合常数。
Ab Code KD(M) ka(1/Ms) kd(1/s) R<sup>2</sup>
ch4D3 6.89E-09 2.35E+05 1.62E-03 0.9935
Hu4D3 3.07E-08 1.39E+05 4.28E-03 0.9916
ch7F11 6.11E-11 2.43E+05 1.45E-05 0.9925
Hu7F11 9.94E-11 1.86E+05 1.85E-05 0.9966
实施例19 4D3人源化抗体与嵌合抗体的活性分析及结合表位一致性分析
生物素标记4D3-humanized抗体，并通过ELISA测定结合曲线的拐点值为0.5ng/ml。配置含0.5ng/ml 4D3生物素标记抗体的ELISA封闭液，在此溶液基础上配置50ug/ml的竞争抗体4D3-chimeric与4D3-humanized。添加含生物素标记抗体与竞争抗体的溶液于A1～A12，每孔150ul，后吸出50ul添加至B2～B12中，与预先添加的体积为100ul之生物素抗体溶液充分混合，再依次稀释3倍至H1～H12，37℃孵育1hr，后洗涤并孵育anti-human IgG Fc二抗，37℃孵育1hr后洗涤3次，进行25min时长的显色并读值。
附图12：4D3-humanized-biotin抗体分别与0.02～50ug/ml的ch4D3与hum4D3抗体相竞争。两种竞争抗体表现同等程度竞争活性，结合表位一致。EC50(ch4D3)：0.336ug/ml。EC50(hum4D3)：0.326ug/ml
实施例20 7F11人源化抗体与人源化抗体与嵌合抗体的活性分析及结合表位一致性分析
参照实施例18中的操作流程，分析7F11的表位竞争活性及结合表位一致性。
附图13：7F11-humanized-biotin抗体分别与0.02～50ug/ml的ch7F11与hum7F11抗体相竞争。两种竞争抗体表现同等程度竞争活性，结合表位一致。EC50(ch7F11)：0.732ug/ml。EC50(hum7F11)：0.856ug/ml。
实施例21人源化抗体hu7F11&hu4D3的细胞结合和内吞实验
使用HEK293细胞作为阴性细胞，BXPC-3和MCF-7细胞作为阳性细胞，测试梯度浓度下的各个抗体结合与内吞情况。细胞结合测试在4℃下结合1hr，后添加常规FITC标记的荧光二抗，流式收集数据。
内吞测试使用标记有酸敏感型的小分子染料Phrodo-Red羊抗人二抗，先与各个浓度的一抗共孵育形成复合物后，再与各细胞系共孵育16hr。后取样，每个96孔板的细胞孔铺设至少10000个细胞，采用流式细胞仪收集并分析数据。统计各个浓度下的细胞在远红光通道中的平均荧光强度值，以抗体浓度为横坐标描绘内吞程度曲线。
hu7F11和Hu4D3抗体在3种细胞中的结合程度比较，BxPC-3细胞结合程度最大。hu7F11和Hu4D3抗体在3种细胞中的内吞程度比较。BxPC-3细胞内吞程度最大。
Figure BDA0003121823000000111
Figure BDA0003121823000000121
Figure BDA0003121823000000131
Figure BDA0003121823000000141
Figure BDA0003121823000000151
Figure BDA0003121823000000161
Figure BDA0003121823000000171
Figure BDA0003121823000000181
Figure BDA0003121823000000191
Figure BDA0003121823000000201
Figure BDA0003121823000000211
Figure BDA0003121823000000221
Figure BDA0003121823000000231
Figure BDA0003121823000000241
Figure BDA0003121823000000251
Figure BDA0003121823000000261
Figure BDA0003121823000000271
Figure BDA0003121823000000281
序列表
<110>四川百利药业有限责任公司、成都百利多特生物药业有限责任公司
<120> 一种抗TROP2抗体
<160> 40
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 8
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 1
Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Phe Asp
1 5
<210> 2
<211> 7
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 2
Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asn
1 5
<210> 3
<211> 11
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 3
Val Arg Gly Glu Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 4
<211> 8
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 4
Gly Tyr Thr Phe Thr Asp His Val
1 5
<210> 5
<211> 8
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 5
Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asn Ser
1 5
<210> 6
<211> 18
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 6
Ala Arg Glu Gly Tyr Gly Tyr Gly Lys Asn Gly Val Gly Tyr Ala Met
1 5 10 15
Asp Tyr
<210> 7
<211> 6
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 7
Gln Asp Ile Asn Lys Tyr
1 5
<210> 8
<211> 3
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 8
Ser Thr Ser
1
<210> 9
<211> 8
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 9
Leu Gln Tyr Asp Asp Leu Phe Thr
1 5
<210> 10
<211> 6
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 10
Gln Ser Val Ser Asn Asp
1 5
<210> 11
<211> 3
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 11
Tyr Ala Ser
1
<210> 12
<211> 9
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 12
Gln Gln Asp Tyr Ser Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 13
<211> 137
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 13
Met Gly Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Phe Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu
50 55 60
Glu Trp Ile Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asn Thr Lys Ser Asn
65 70 75 80
Glu Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser Ser Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Arg Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val
100 105 110
Tyr Phe Cys Val Arg Gly Glu Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
115 120 125
Pro Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 14
<211> 126
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 14
Met Arg Pro Ser Ile Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Phe Trp Leu His
1 5 10 15
Gly Ala Gln Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Leu Gly Gly Lys Val Thr Ile Thr Cys Lys Pro Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Asn Lys Tyr Ile Ala Trp Tyr Gln His Lys Pro Gly Lys Gly Pro
50 55 60
Arg Leu Leu Ile His Ser Thr Ser Thr Leu Gln Pro Gly Ile Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Arg Asp Tyr Ser Phe Thr Ile Ser
85 90 95
Asn Leu Glu Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp
100 105 110
Asp Leu Phe Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 15
<211> 143
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 15
Met Glu Trp Arg Ile Phe Leu Phe Ile Leu Ser Gly Thr Ala Gly Val
1 5 10 15
His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Val Val Lys Pro
20 25 30
Gly Ala Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr
35 40 45
Asp His Val Ile Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu
50 55 60
Trp Ile Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asn Ser Tyr Tyr Ser Glu
65 70 75 80
Lys Leu Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Asn Thr
85 90 95
Ala Tyr Met Gln Leu Val Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr
100 105 110
Phe Cys Ala Arg Glu Gly Tyr Gly Tyr Gly Lys Asn Gly Val Gly Tyr
115 120 125
Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 16
<211> 127
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 16
Met Lys Ser Gln Thr Gln Val Phe Val Phe Leu Leu Leu Cys Val Ser
1 5 10 15
Gly Ala His Gly Ser Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Lys Phe Leu Leu
20 25 30
Val Ser Ala Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Asn Asp Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Thr Gly Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser
85 90 95
Thr Ala Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Asp Tyr
100 105 110
Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 17
<211> 137
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 17
Met Gly Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Leu Leu Ser Val Thr Ala Gly
1 5 10 15
Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys
20 25 30
Pro Gly Ala Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe
35 40 45
Thr Ser Phe Asp Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Glu Gln Arg Leu
50 55 60
Glu Trp Met Gly Trp Ile Phe Pro Gly Asp Gly Asn Thr Lys Tyr Ser
65 70 75 80
Gln Lys Phe Gln Gly Arg Ala Thr Ile Thr Arg Asp Thr Ser Ala Ser
85 90 95
Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val
100 105 110
Tyr Tyr Cys Val Arg Gly Glu Ala Leu Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135
<210> 18
<211> 126
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 18
Met Arg Pro Ser Ile Gln Phe Leu Gly Leu Leu Leu Phe Trp Leu His
1 5 10 15
Gly Ala Gln Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser
20 25 30
Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp
35 40 45
Ile Asn Lys Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp
100 105 110
Asp Leu Phe Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 19
<211> 143
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 19
Met Glu Trp Arg Ile Phe Leu Phe Ile Leu Ser Gly Thr Ala Gly Val
1 5 10 15
His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro
20 25 30
Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr
35 40 45
Asp His Val Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu
50 55 60
Trp Met Gly Gln Ile Tyr Pro Gly Ser Asp Asn Ser Tyr Tyr Ala Gln
65 70 75 80
Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ile Asn Thr
85 90 95
Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr
100 105 110
Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Tyr Gly Tyr Gly Lys Asn Gly Val Gly Tyr
115 120 125
Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
130 135 140
<210> 20
<211> 127
<212> PRT
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 20
Met Lys Ser Gln Thr Gln Val Phe Val Phe Leu Leu Leu Cys Val Ser
1 5 10 15
Gly Ala His Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala
20 25 30
Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser
35 40 45
Val Ser Asn Asp Val Val Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro
50 55 60
Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp
65 70 75 80
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Tyr Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
85 90 95
Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Asp Tyr
100 105 110
Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
115 120 125
<210> 21
<211> 24
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 21
ggctacacct tcacaagctt tgat 24
<210> 22
<211> 21
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 22
atttttcctg gagatggtaa t 21
<210> 23
<211> 33
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 23
gtaagagggg aggccctgta ttactttgac tac 33
<210> 24
<211> 24
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 24
ggatacacat tcactgacca tgtc 24
<210> 25
<211> 24
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 25
atttatcctg gaagtgataa tagt 24
<210> 26
<211> 54
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 26
gcaagagagg gctatggtta tggaaaaaac ggagttggct atgctatgga ctac 54
<210> 27
<211> 18
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 27
caagacatta ataagtat 18
<210> 28
<211> 9
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 28
tccacatct 9
<210> 29
<211> 24
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 29
ctgcagtatg atgatctatt cacg 24
<210> 30
<211> 18
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 30
cagagtgtga gtaatgat 18
<210> 31
<211> 9
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 31
tatgcatcc 9
<210> 32
<211> 27
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 32
cagcaggatt attcctctcc gtggacg 27
<210> 33
<211> 411
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 33
atgggatgga gctgggtctt tctcttcctc ctgtcagtaa ctgcaggtgt ccactcccag 60
gttcagctgc agcagtctgg agctgaactg gtaaagcctg gggcttcagt gaagttgtcc 120
tgcaaggctt ctggctacac cttcacaagc tttgatataa actgggtgag gcagaggcct 180
gaacagggac ttgagtggat tggatggatt tttcctggag atggtaatac taagtccaat 240
gagaaattta agggcaaggc cacactgact acagacaaat cctccagcac agcctacatg 300
cagctcagca ggctgacatc tgaggactct gctgtctatt tctgtgtaag aggggaggcc 360
ctgtattact ttgactactg gggcccaggc accactctca cagtctcctc a 411
<210> 34
<211> 379
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 34
atgagaccgt ctattcagtt cctggggctc ttgttgttct ggcttcatgg tgctcagtgt 60
gacatccaga tgacacagtc tccatcctca ctgtctgcat ctctgggagg caaagtcacc 120
atcacttgca agccaagcca agacattaat aagtatatag cttggtacca acacaagcct 180
ggaaaaggtc ctaggctgct catacattcc acatctacat tacagccagg catcccatca 240
aggttcagtg gaagtgggtc tgggagagat tattccttca ccatcagcaa cctggaacct 300
gaagatattg caacttatta ttgtctgcag tatgatgatc tattcacgtt cggctcgggg 360
acaaagttgg aaataaaac 379
<210> 35
<211> 429
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 35
atggaatgga ggatctttct cttcatcctg tcaggaactg caggtgtcca ctcccaggtt 60
cagctgcagc agtctggacc tgaggtggtg aagcctgggg cttcagtgaa gatgtcctgc 120
aaggcttctg gatacacatt cactgaccat gtcataagct gggtgaagca gagaactgga 180
cagggccttg agtggattgg acagatttat cctggaagtg ataatagtta ctacagtgag 240
aagttgaagg acaaggccac actgactgca gacaaatcct ccaacacagc ctacatgcag 300
ctcgtcagcc tgacatctga ggactctgcg gtctatttct gtgcaagaga gggctatggt 360
tatggaaaaa acggagttgg ctatgctatg gactactggg gtcaaggaac ctcagtcacc 420
gtctcctca 429
<210> 36
<211> 382
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 36
atgaagtcac agacccaggt cttcgtattt ctactgctct gtgtgtctgg tgctcatggg 60
agtattgtga tgacccagac tcccaaattc ctgcttgtat cagcaggaga cagggttacc 120
ataacctgca aggccagtca gagtgtgagt aatgatgtag tttggtacca acagaagcca 180
gggcagtctc ctaaactgct gatatactat gcatccaatc gctacactgg agtccctgat 240
cgcttcaccg gcagtggata tgggacggat ttcactttca ccatcagcac tgcgcaggct 300
gaagacctgg cagtttattt ctgtcagcag gattattcct ctccgtggac gttcggtggg 360
ggcaccaagc tggaaatcaa ac 382
<210> 37
<211> 412
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 37
atgggctggt cctgggtgtt cctgttcctg ctgagcgtga ccgccggcgt gcactcccag 60
gtgcagctgg tgcagtccgg cgccgaggtg aagaagcccg gcgcctccgt gaagctgagc 120
tgtaaggcct ccggctacac cttcacctcc ttcgacatta actgggtgcg gcaggccccc 180
gagcagcgcc tggagtggat gggctggatc ttccccggcg acggcaacac caagtactcc 240
cagaagttcc agggaagagc taccatcacc agagatacat ccgcttctac agcttacatg 300
gagctgtcta gcctgagatc tgaggataca gctgtgtatt actgtgtgag aggagaggct 360
ctgtactatt ttgattattg gggccagggc accctggtga cagtgtcttc tg 412
<210> 38
<211> 379
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 38
atgagacctt ctatccagtt tctgggcctg ctgctgtttt ggctgcatgg cgcccagtgc 60
gatatccaga tgacccagtc tccatctagc ctgtccgctt ctgtgggcga tagagtgacc 120
atcacatgca gagcttctca ggatatcaat aagtatctgg cttggtatca gcagaagcct 180
ggaaaggtgc ctaagctgct gatctactct acatctaccc tgcagtctgg agtgccttct 240
agattttctg gatctggctc tggcaccgat tttacactga caatctcttc tctgcagcct 300
gaggatgtgg ctacatatta ttgtctgcag tatgatgatc tgttcacctt tggccagggc 360
accaagctgg agatcaagc 379
<210> 39
<211> 430
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 39
atggagtgga gaatctttct gtttatcctg tctggcacag ctggagtgca ttctcaggtg 60
cagctggtgc agtctggggc cgaggtgaaa aagccaggcg cttctgtgaa ggtgtcttgc 120
aaggcctccg gctacacctt caccgaccac gtgatctcct gggtgcgcca ggccaccggc 180
cagggcctgg agtggatggg ccagatctac cccggctccg acaactccta ctacgcccag 240
aagttccagg gcagggtgac tctgaccgcc gacaagtcca tcaacaccgc ctacatggag 300
ctgtcctccc tgaggtccga ggacaccgcc gtgtactact gcgccaggga gggctacggc 360
tacggcaaga acggcgtggg ctacgccatg gattattggg gccagggcac cctggtgaca 420
gtgtcttctg 430
<210> 40
<211> 382
<212> DNA
<213> 2 Ambystoma laterale x Ambystoma jeffersonianum
<400> 40
atgaagtctc agacccaggt gtttgtgttt ctgctgctgt gtgtgtctgg cgctcatggc 60
gatatcgtga tgacacagtc tcctgattct ctggccgtgt ctctgggcga aagagctaca 120
atcaactgta aggcttctca gtctgtgtct aatgatgtgg tgtggtacca gcagaagcct 180
gggcagcccc ccaagctgct gatctactac gcctccaaca ggtacaccgg cgtgcccgac 240
aggttctccg gctccggcta cggcaccgac ttcaccctga ccatctcctc cctgcaggcc 300
gaggacgtgg ccgtgtacta ctgccagcag gactactcct ccccctggac cttcggcggc 360
ggcaccaagg tggagatcaa gc 382

Claims (20)

1.一种抗TROP2的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其特征在于所述抗体由重链和轻链组成，其特征在于所述抗体由氨基酸序列SEQ ID No.13的重链和由氨基酸序列SEQ ID No.14轻链组成，或者是由氨基酸序列SEQ ID No.15的重链和由氨基酸序列SEQ ID No.16轻链组成。
2.权利要求1所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其重链衍生物序列包含SEQ ID No.17和SEQ ID No.18。
3.权利要求1所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其重链衍生物序列包含SEQ ID No.19和SEQ ID No.20。
4.权利要求1所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，与权利要求1中所述序列有95%以上同源性都应该理解为本发明的等同物，因此也是本发明的一部分。
5.权利要求1所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其所述的重链所包含的氨基酸分别由SEQ ID No.1、2和3的CDRH1、CDRH2和CDRH3组成，或者由SEQ ID No.4、5和6的CDRH1、CDRH2和CDRH3组成，所述的轻链所包含的氨基酸分别由SEQ IDNo.7、8和9的CDRL1、CDRL2和CDRL3，或者由SEQ ID No.10、11和12的CDRL1、CDRL2和CDRL3组成。
6.任何一个抗体片段或者衍生物若含有至少一个CDR，且该CDR的序列在与序列SEQ IDNo.1至SEQ ID No.12进行优化比对后，至少具有80%的同一性，或优选的85%、90%、95%或者98%同一性的，都应该理解为本发明的等同物，因此也是本发明的一部分。
7.权利要求1-3任一项所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其特征在于其是单克隆抗体或者其衍生物。
8.权利要求1所述抗体的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其特征在于是鼠源的。
9.权利要求2、3所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一，其特征在于其为权利要求1所述序列的人源化序列之一。
10.权利要求1所述抗体的编码核酸，其特征在于所述核酸编码如权利要求1-3所述的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一的核酸。
11.根据权利要求10所分离的核酸，其特征在于所述核酸包含重链的序列SEQ IDNo.21、22、23或者SEQ ID No.24、25、26，所述核酸包含轻链的序列SEQ ID No.27、28、29或者SEQ ID No.30、31、32。
12.根据权利要求11所述的核酸，其特征在于所述核酸包含SEQ ID No.33和SEQ IDNo.34,或者SEQ ID No.35和SEQ ID No.36。
13.根据权利要求10所述的核酸，其特征在于所述核酸包含SEQ ID No.37和SEQ IDNo.38,或者SEQ ID No.39和SEQ ID No.34。
14.如权利要求11-13中限定的核酸相对应的RNA核酸，或者与权利要求11-13中限定的核酸互补的核酸。
15.一种包含权利要求11-13任一项所述核酸的表达载体。
16.一种与权利要求15相关的表达宿主。
17.权利要求15所述的表达载体与权利要求15所述的表达宿主，可以产生如权利要求1-3所述的氨基酸序列。
18.权利要求1-6所述的、或通过权利要求17所述方法获得的的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一用于诊断或治疗TROP2靶点相关恶性肿瘤。
19.权利要求18所述的用途的抗体或者其Fv、scFv、Fab、F(ab’)2、Fab’、scFv-Fc片段之一偶联相关细胞毒性化合物或者放射性元素。
20.权利要求19所述的细胞毒性化合物选自烷化剂、抗代谢物、抗肿瘤药物、有丝分裂抑制剂、染色质功能抑制剂、抗血管生成剂、抗雄激素、抗雌激素或者免疫调节剂等。
CN202110678447.4A 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体 Active CN113896796B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210931407.0A CN116589587A (zh) 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010573040 2020-06-22
CN2020105730400 2020-06-22

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210931407.0A Division CN116589587A (zh) 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113896796A true CN113896796A (zh) 2022-01-07
CN113896796B CN113896796B (zh) 2022-11-01

Family

ID=79187449

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210931407.0A Pending CN116589587A (zh) 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体
CN202110678447.4A Active CN113896796B (zh) 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210931407.0A Pending CN116589587A (zh) 2020-06-22 2021-06-18 一种抗trop2抗体

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20230242665A1 (zh)
EP (1) EP4169952A1 (zh)
JP (1) JP2023530525A (zh)
KR (1) KR20230026431A (zh)
CN (2) CN116589587A (zh)
AU (1) AU2021296205A1 (zh)
BR (1) BR112022025947A2 (zh)
CA (1) CA3188014A1 (zh)
IL (1) IL299267A (zh)
MX (1) MX2022016300A (zh)
WO (1) WO2021259162A1 (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022253284A1 (zh) 2021-06-02 2022-12-08 百奥泰生物制药股份有限公司 药物偶联物及其用途
CN116789835A (zh) * 2023-05-11 2023-09-22 武汉爱博泰克生物科技有限公司 抗Trop2蛋白的单克隆抗体及其应用

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116212044A (zh) * 2021-12-03 2023-06-06 成都百利多特生物药业有限责任公司 抗人Trop2抗体-喜树碱类药物偶联物及其医药用途

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107406508A (zh) * 2014-12-04 2017-11-28 阿布鲁佐治疗诊断有限公司 人源化的抗trop‑2单克隆抗体及其应用
CN112646038A (zh) * 2019-10-11 2021-04-13 迈威(上海)生物科技股份有限公司 抗人Trop-2抗体及其应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2785382B1 (en) * 2011-12-02 2019-01-02 IBC Pharmaceuticals, Inc. Multivalent antibody complexes targeting igf-1r show potent toxicity against solid tumors
WO2014193999A2 (en) * 2013-05-28 2014-12-04 Caris Science, Inc. Biomarker methods and compositions
CA2981543A1 (en) * 2015-04-22 2016-10-27 Immunomedics, Inc. Isolation, detection, diagnosis and/or characterization of circulating trop-2-positive cancer cells
CN107446050A (zh) * 2017-08-11 2017-12-08 百奥泰生物科技(广州)有限公司 Trop2阳性疾病治疗的化合物及方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107406508A (zh) * 2014-12-04 2017-11-28 阿布鲁佐治疗诊断有限公司 人源化的抗trop‑2单克隆抗体及其应用
CN112646038A (zh) * 2019-10-11 2021-04-13 迈威(上海)生物科技股份有限公司 抗人Trop-2抗体及其应用

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022253284A1 (zh) 2021-06-02 2022-12-08 百奥泰生物制药股份有限公司 药物偶联物及其用途
CN116789835A (zh) * 2023-05-11 2023-09-22 武汉爱博泰克生物科技有限公司 抗Trop2蛋白的单克隆抗体及其应用
CN116789835B (zh) * 2023-05-11 2024-01-12 武汉爱博泰克生物科技有限公司 抗Trop2蛋白的单克隆抗体及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN113896796B (zh) 2022-11-01
AU2021296205A1 (en) 2023-02-02
MX2022016300A (es) 2023-02-09
JP2023530525A (ja) 2023-07-18
KR20230026431A (ko) 2023-02-24
CN116589587A (zh) 2023-08-15
EP4169952A1 (en) 2023-04-26
US20230242665A1 (en) 2023-08-03
BR112022025947A2 (pt) 2023-03-14
CA3188014A1 (en) 2021-12-30
WO2021259162A1 (zh) 2021-12-30
IL299267A (en) 2023-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112601762B (zh) 抗cd47抗体及其应用
CN113896796B (zh) 一种抗trop2抗体
CN111018986A (zh) 抗磷脂酰肌醇蛋白多糖-3的抗体及其应用
CN112500485B (zh) 一种抗b7-h3抗体及其应用
CN113321734A (zh) 抗cd47/抗pd-l1抗体及其应用
EP4043495A1 (en) Anti-human trop-2 antibody and application thereof
CN113651888B (zh) Il-11的抗体及其应用
EP4289862A1 (en) Anti-human b7-h3 antibody and application thereof
CN112646032A (zh) 靶向bcma的具有人猴交叉的人源化单克隆抗体
CN112390885A (zh) 一种trop2抗体及其制备方法、其偶联物和应用
CN111171155B (zh) 抗cd3和cd123双特异性抗体及其用途
CN109776677B (zh) 一种人源化抗il-13抗体及其制备方法和应用
CN115536747B (zh) 一种结合trop2的抗体及靶向trop2和cd3的双特异性抗体及其制备方法与应用
CN109053888B (zh) 一种抗人csf-1r单克隆抗体及其用途
CN112480252A (zh) 抗白细胞介素-33抗体及其制备方法和应用
CN114761434B (zh) Pd-1抗体及其制备方法与应用
WO2024067612A1 (zh) 抗密蛋白18.2的抗体
WO2023161448A1 (en) Human-like target-binding proteins
AU2021329456A1 (en) Antibody specifically bound to glycosylated CEACAM5
CN116102649A (zh) 抗cldn18.2单克隆抗体及其应用
CN117186235A (zh) 抗4-1BB/抗EGFRvⅢ的双特异抗体及其制备方法和应用
CN115677855A (zh) 抗tigit抗体
CN115515977A (zh) 针对areg的抗体及其用途
CN116023491A (zh) 抗cd26抗体及其应用
CN114380913A (zh) 一种全人源抗pd-l1抗体及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20220913

Address after: 610000 Building 1, No. 161 Baili Road, Chengdu cross strait science and Technology Industrial Development Park, Wenjiang District, Chengdu, Sichuan

Applicant after: Chengdu bailidote Biological Pharmaceutical Co.,Ltd.

Address before: 611130 Chengdu cross strait science and Technology Industry Development Park, Wenjiang District, Chengdu City, Sichuan Province

Applicant before: SICHUAN BAILI PHARM Co.,Ltd.

Applicant before: Chengdu bailidote Biological Pharmaceutical Co.,Ltd.

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant