CN113795236A - 齿根管填充材料组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了包含锂盐的根管填充材料组合物,其比常规的根管填充材料组合物具有更好的治愈促进作用。优选(1)还包含氢氧化钙的组合物。(2)含有高级脂肪酸和松香的糊剂A与含有氧化镁和植物油的糊剂B的组合物,其中糊剂A和/或糊剂B包含锂盐。(3)合并糊剂A和糊剂B的组合物,其通过捏和而固化,其中A剂和/或B剂包含锂盐,A剂和/或B剂包含玻璃粉末,玻璃粉末包含相对于玻璃粉末总重量总计为50‑100重量%的氧化钙和二氧化硅,玻璃粉末中氧化钙和二氧化硅的重量比(氧化钙:二氧化硅)为6:4至3:7。
Description
技术领域
本发明涉及一种齿根管填充材料组合物。
背景技术
牙齿的根管内有包含神经和血管的牙髓。当由于深龋齿、牙冠折裂等引起牙髓感染或发炎并置之不理时,在根管的根尖处可能形成脓肿,炎症可在根尖周组织中扩散,牙龈会肿胀,或者在有些情况下会出现全身症状,如淋巴结肿大和发烧。因此,当牙髓感染或发炎时,根据需要去除牙髓,然后对根管内部消毒,并用根管充填材料封闭牙髓腔以阻断对根尖周组织的刺激。
常规根管消毒剂含有诸如福尔马林、低聚甲醛、对氯酚、愈创木酚、丁子香酚、氧化锌和氢氧化钙之类的活性成分。
福尔马林和低聚甲醛导致蛋白质硬化性坏死,从而起到保护内部组织的作用,并且还具有非常强的杀菌作用或消毒作用。对氯苯酚、愈创木酚和丁子香酚具有消毒作用和强镇痛作用。氧化锌具有消毒作用和消炎作用。然而,这些成分没有促进根管-根尖周组织治愈的作用。
相反,氢氧化钙具有消毒作用和镇痛作用,并且被认为具有促进根管-根尖周组织治愈的作用。因此,在欧洲和美国,氢氧化钙已被普遍用作感染根管治疗药的有效成分,而在日本,已开发了含氢氧化钙的牙科治疗用制剂并加以改良。
下面详细描述氢氧化钙在牙科治疗用制剂中的应用进展。氢氧化钙是白色粉末,氢氧化钙水溶液的pH为12.6,是强碱性的,因此具有强消毒作用。氢氧化钙还具有促进牙釉质、牙质和牙骨质的硬组织形成作用,因此已包含在盖髓术材料、活髓切断术材料、根管充填材料和类似的材料中(dental outlook(齿界展望,72(1),63-74,1988;The Journal ofJapan Endodontic Association(日本齿内疗法学会志),16(1),47-51,1995;TheJapanese Journal of Pediatric Dentistry(日本小儿齿科学杂志),26(3),611-620,1988)。
氢氧化钙也被广泛用于根管不成熟的牙齿的根尖封闭、穿孔部位的封闭和类似用途(The Journal of Japan Endodontic Association(日本齿内疗法学会志),14(2),89-95,1993;The Journal of Japan Endodontic Association(日本齿内疗法学会志),16(1),70-73,1995;The Japanese Journal of Pediatric Dentistry(日本小儿齿科学杂志),24(3),459-467,1986)。
氢氧化钙也被积极用作感染根管治疗期间的短期消毒剂(临时根管充填材料)(The Japanese Journal of Conservative Dentistry(日本齿科储存学杂志),34(3),986-992,1991;International Endodontic Journal,24,119-125,1991)。
含氢氧化钙的根管治疗药被认为组织刺激性较小,并且具有由于强碱性而来的杀菌作用、软组织溶解作用、镇痛作用、治愈促进作用、渗出液停止作用、牙根吸收抑制作用、硬组织形成诱导作用等。如上所述,氢氧化钙不仅是杀菌剂,而且被认为是改善根管-根尖周组织治愈的药剂。
含氢氧化钙的根管充填材料具有优良的杀菌作用和促进根管-根尖周组织治愈作用,是有用的,但不足以提供难治性牙髓炎或根尖性牙周炎的治愈促进作用,例如,由于难以清除的细菌感染或由于细菌侵入根管周围病变或根尖部病变而阻碍治愈的难治性牙髓炎或根尖性牙周炎。因此,需要能够促进难治性牙髓炎或根尖性牙周炎治愈的根管充填材料。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:JP 3473879 B
专利文献2:JP 4614376 B
专利文献3:JP 5827086 B
发明内容
发明要解决的问题
本发明的目的是提供一种根管充填材料组合物,其具有比常规根管充填材料组合物更高的治愈促进作用。
解决问题的手段
本发明的发明人为了解决上述问题进行了反复研究,发现包含锂盐的根管充填材料组合物促进牙髓干细胞向成骨细胞分化,以激活或刺激根尖病变内的骨代谢并激活或刺激免疫应答。本发明的发明人进一步发现,所述根管充填材料组合物因此具有优异的根管-根尖周组织治愈促进作用,并有效促进常规根管充填材料无法治愈的难治性牙髓炎和根尖性牙周炎的治愈。
本发明是基于上述发现完成的,并提供了下述的根管充填材料组合物。
[1]根管充填材料组合物,其包含锂盐。
[2]根据[1]所述的根管充填材料组合物,其中锂盐的浓度相对于组合物总量为0.0001重量%至20重量%。
[3]根据[1]或[2]所述的根管充填材料组合物,其还包含钙化合物。
[4]根据[3]所述的根管充填材料组合物,其中钙化合物的浓度相对于组合物总量为2重量%至70重量%。
[5]根据[1]至[4]中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含水。
[6]根据[5]所述的根管充填材料组合物,其中以重量比计,水的含量是锂盐的1至2倍。
[7]根据[1]至[6]中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含多元醇。
[8]根据[7]所述的根管充填材料组合物,其中多元醇的浓度是相对于组合物总量的1重量%至90重量%。
[9]根据[1]至[8]中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含粒度为1nm至1μm的氧化铝超细粒子和/或粒度为1nm至1μm的氧化钛超细粒子。
[10]根据[9]所述的根管充填材料组合物,其中所述氧化铝超细粒子和/或氧化钛超细粒子的总含量相对于组合物总量为0.1重量%至20重量%。
[11]根据[1]或[2]所述的根管充填材料组合物,其中所述根管充填材料组合物是含有松香的糊剂A与含有氧化镁和植物油的糊剂B的组合,并且糊剂A和糊剂B之一或二者包含锂盐。
[12]根据[1]或[2]所述的根管充填材料组合物,其中所述根管充填材料组合物是糊剂A和糊剂B的组合并通过混合糊剂A和糊剂B而硬化,糊剂A和糊剂B之一或二者包含锂盐,糊剂A和糊剂B之一或二者包含玻璃粉末,所述玻璃粉末含有总量相对于玻璃粉末总量为50重量%至100重量%的氧化钙和二氧化硅,并且在玻璃粉末中,氧化钙与二氧化硅的重量比(氧化钙:二氧化硅)为6:4至3:7。
[13]根据[12]所述的根管充填材料组合物,其中所述玻璃粉末的含量相对于糊剂A和糊剂B总量为20重量%以上且相对于糊剂A和糊剂B各自的总量为70重量%以下。
[14]根据[12]或[13]所述的根管充填材料组合物,其中所述糊剂A还包含至少一种选自由丁子香酚、愈创木酚、高级脂肪酸、聚丙烯酸或其盐、和磷酸组成的组中的组分,所述糊剂B还包含至少一种选自由氧化钙、氧化镁、氧化锶、氧化锌、磷酸钙和铝硅酸盐玻璃组成的组中的组分。
[15]根据[1]至[14]中任一项所述的根管充填材料组合物,其用于在根管和/或根尖周组织的病变中免疫刺激。
[16]根据[1]至[14]中任一项所述的根管充填材料组合物,其用于在根管和/或根尖周组织的病变中诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化。
[17]锂盐在制造根管充填材料组合物中的用途。
[18]含锂盐的组合物在制造根管充填材料中的用途。
[19]锂盐在根管充填材料组合物中的用途。
[20]含锂盐的组合物在根管充填材料中的用途。
[21]治疗感染根管和/或感染根尖周组织的方法,所述方法包括用有效量的锂盐填充有感染根管和/或感染根尖周组织的患者的根管,以治疗感染根管和/或感染根尖周组织。
[22]治疗感染根管和/或感染根尖周组织的方法,所述方法包括用含有效量的锂盐的组合物填充有感染根管和/或感染根尖周组织的患者的根管,以治疗感染根管和/或感染根尖周组织。
[23]锂盐在制造根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激剂中的用途。
[24]含锂盐的组合物在制造根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激剂中的用途。
[25]锂盐在根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激剂中的用途。
[26]含锂盐的组合物在根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激剂中的用途。
[27]在根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激剂中使用的锂盐。
[28]根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激方法,所述方法包括用有效量的锂盐填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管,以免疫刺激根管和/或根尖周组织的病变。
[29]根管和/或根尖周组织病变的免疫刺激方法,所述方法包括用有效量的含锂盐的组合物填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管,以免疫刺激根管和/或根尖周组织的病变。
[30]锂盐在制造根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化诱导剂中的用途。
[31]含锂盐的组合物在制造根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化诱导剂中的用途。
[32]锂盐在根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化诱导剂中的用途。
[33]含锂盐的组合物在根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化诱导剂中的用途。
[34]在根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化诱导剂中使用的锂盐
[35]诱导根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞分化的方法,所述方法包括用有效量的锂盐填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管,以诱导根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化。
[36]诱导根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞分化的方法,所述方法包括用有效量的含锂盐的组合物填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管,以诱导根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞的分化。
发明的效果
例如由于难以从牙髓清除的细菌感染或由于细菌侵入根管周围病变或根尖部病变而阻碍治愈的难治性牙髓炎或根尖性牙周炎,即便用被认为具有治愈促进作用的含氢氧化钙的根管充填材料也难以治愈。
相反,本发明的根管充填材料组合物包含锂盐,从而促进或诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化,并增加白细胞以刺激免疫。基于这些活性,本发明的根管充填材料组合物即使在难治性牙髓炎或根尖性牙周炎中也能抑制牙髓中或根尖周围的诸如脓疱之类的病变的炎症,并有效促进治愈。
当本发明的根管充填材料组合物除锂盐外还包含氢氧化钙时,所述组合物具有源自于氢氧化钙的优异的杀菌作用和抗炎症作用,并且显著或协同改善根管-根尖牙周组织的治愈促进作用。
本发明的发明人发现,当将包含锂盐的根管充填材料组合物填充到根管内时,在有些情况下锂盐溶出不充分。在这种情况下,需要含有更多量的锂盐,这会增加价格或会限制制剂。
相反,除锂盐和氢氧化钙之外还包含水和多元醇的根管充填材料组合物在根管内充填后容易溶出锂盐,包含少量锂盐的根管充填材料组合物就可以提供根管-根尖周组织的治愈促进作用。
包含氢氧化钙的根管充填材料组合物在储存时,氢氧化钙可能沉淀分离,并且当使用时,所述组合物可能主要仅溶出液体组分,或者氢氧化钙可能在注射器中固化,且该糊剂可能难以排出。相反,包含锂盐、氢氧化钙、水和多元醇的根管充填材料组合物可以抑制储存期间的这种固液分离。
本发明的发明人还发现,当向包含锂盐的根管充填材料组合物添加氢氧化钙时,制备后的糊剂可能变硬或变干,这样的制剂难以抓住在根管糊剂螺旋形输送器上或难以从注射器容器等中顺利排出并且难以应用。相比之下,当本发明的根管充填材料组合物是包含锂盐、氢氧化钙、水和多元醇的组合物,且含有的水以重量比例计是锂盐的1至2倍时,所述组合物具有适当的稠度,该糊剂不硬化并且不易干燥。因此,所述组合物可以顺利地从注射器容器等排出并且操作性优异。所述组合物不易干燥,因此所述组合物的容器或包装无需特殊设计,所述组合物容易产品化。
如上所述,根据本发明的发明人的研究,包含锂盐的根管充填材料组合物在所述根管充填材料组合物充填到根管中后可能无法充分溶出锂盐。当双糊剂型根管充填材料组合物包含含高级脂肪酸和松香的糊剂A以及含氧化镁和植物油的糊剂B的组合,并且糊剂A和糊剂B之一或二者含有锂盐时,糊剂A和糊剂B的混合物在根管内充填后容易溶出锂盐,所述包含少量锂盐的根管充填材料组合物可以提供优异的根管-根尖周组织治愈促进作用。
当根管充填材料组合物包含含高级脂肪酸和松香的糊剂A以及含氧化镁和植物油的糊剂B的组合,并且糊剂A和糊剂B之一或二者含有锂盐时,所述根管充填材料组合物具有适当的稠度,因此具有高操作性。例如,所述组合物容易填充到根管中并且容易抓住在诸如根管糊剂螺旋形输送器和牙胶尖之类的器械上。优异的操作性包括高拉丝性质。
如果硬化时间过短,则所述糊剂在混合期间硬化,而硬化的糊剂难以流入根管。如果硬化时间过长,则会在根尖中被周围的渗出液或血液污染并降低根尖部的封闭性能。所述组合的组合物具有适当的硬化时间。
所述组合的组合物具有令人满意的储存稳定性,并抑制储存期间的固液分离。
当根管充填材料组合物包含糊剂A和糊剂B的组合并通过混合糊剂A和糊剂B而硬化,糊剂A和糊剂B之一或二者包含玻璃粉末,所述玻璃粉末含有总量为相对于玻璃粉末总量的50至100重量%的氧化钙和二氧化硅,玻璃粉末中氧化钙与二氧化硅的重量比(氧化钙:二氧化硅)为6:4至3:7,并且糊剂A和糊剂B之一或二者包含锂盐时,锂盐在糊剂A和糊剂B的混合物充填在根管内后容易溶出,并且所述包含少量锂盐的根管充填材料组合物可以提供根管-根尖牙周组织的治愈促进作用。
所述包含玻璃粉末和锂盐的根管充填材料组合物具有适当的稠度,因此操作性高。例如,所述组合物容易填充到根管中并且容易抓住在诸如根管糊剂螺旋形输送器和牙胶尖之类的器械上。优异的操作性包括高拉丝性质。所述组合物也具有适当的硬化时间。所述组合物具有令人满意的储存稳定性,并且抑制储存期间的固液分离。
所述包含玻璃粉末和锂盐的根管充填材料组合物在活体内形成属于P63/m空间群的晶相,如羟磷灰石,或形成类骨晶体。占活体内硬组织的大部分的骨和牙齿含有羟磷灰石作为主要成分。所述根管充填材料组合物从其表面生成与牙齿主要成分结构相同的类骨晶体,然后填充在充填物与牙质之间形成的小间隙,并可以通过所述晶体使牙质和骨组织一体化。特别地,该性质对于填充难以封闭的牙根管具有有益效果,例如无根尖牙齿包括乳牙和未成熟恒牙、在感染根管治疗中没有形成根尖座的牙齿、以及根尖无法通过根尖切除术大开口的牙齿。因此,即使在临床上不能实现完全封闭的病例中,所述组合物也能提供与牙质和骨组织的紧密接触以产生令人满意的封闭性能以及诱导硬组织。
当所述根管充填材料组合物中包含玻璃粉末和锂盐、所述糊剂A包含选自丁子香酚、愈创木酚、高级脂肪酸、聚丙烯酸和磷酸中的一种以上组分作为赋予硬化性质的组分、并且所述糊剂B包含选自氧化钙、氧化镁、氧化锶、氧化锌、磷酸钙和铝硅酸盐玻璃中的一种以上组分作为赋予硬化性质的组分时,进一步改善了稠度、操作性、硬化时间、储存稳定性、和类骨晶体的形成诱导性。
附图说明
图1各自是将实施例18或比较例1中的根管充填材料组合物填充到大鼠的有病变的根尖孔内后4周的左下颌第一磨牙的X射线微CT图像。
图2是显示将实施例5和比较例1的各根管充填材料组合物填充到大鼠的病变根尖孔内后病变体积随时间变化的图。
图3是显示将实施例3和比较例1的各根管充填材料组合物填充到大鼠的病变根尖孔内后病变体积随时间变化的图。
图4是显示将实施例1至3和比较例1的各根管充填材料组合物填充到大鼠的病变根尖孔内后病变体积随时间变化的图。
图5是如下制备的组织病理切片图像:将实施例18和比较例1的各根管充填材料组合物填充于小鼠的病变根尖孔内;4周后制备根尖病变的组织切片并进行原位杂交。箭头指示Colla1或Runx2阳性细胞。
图6是如下制备的图像:将实施例18和比较例1的各根管填充材料组合物填充在小鼠的病变根尖孔内;4周后,对根尖病变的组织切片进行B细胞上细胞表面标志物的免疫荧光染色。
具体实施方式
现在将详细描述本发明。
本发明的根管充填材料组合物
本发明的根管充填材料组合物是包含锂盐的根管充填材料组合物。
根管充填材料也称为例如根管充填用封闭剂、根管内药物、孔洞充填剂、或穿孔修复材料。
(锂盐)
锂盐可以是任何无机酸盐和有机酸盐。所述无机酸盐的例子包括盐酸盐、碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐和硝酸盐。所述有机酸盐的例子包括聚羧酸盐,如乳清酸盐(也称为“乳清酸(orotate)”或“尿嘧啶6-羧酸”)、柠檬酸盐、富马酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐和丙二酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、乙酸盐、丁酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、甲磺酸盐、甲苯磺酸盐(toluenesulfonate)、甲苯磺酸盐(tosylate)和萘二磺酸盐。
具体而言,优选无机酸盐,更优选盐酸盐和碳酸盐。
锂盐可以单独使用或以其两种以上的组合使用。
相对于组合物的总量,锂盐的浓度可以是例如0.0001重量%以上、0.001重量%以上、或0.005重量%以上,并优选0.01重量%以上,更优选0.05重量%以上,更加优选0.1重量%以上。含有上述范围内浓度的锂盐的组合物可以充分促进牙髓炎或根尖性牙周炎的治愈。相对于组合物的总量,锂盐的浓度优选是20重量%以下,更优选15重量%以下,更加优选12重量%以下,愈加优选10重量%以下,并进一步优选6重量%以下。包含上述范围内浓度的锂盐的组合物不会引起锂中毒症状,例如食欲不振和呕吐。
(用途)
当本发明的根管充填材料组合物填充在根管或根尖周组织的病变部位中时,所述组合物诱导牙髓干细胞向成骨细胞的分化并增加白细胞以激活免疫。因此,本发明的根管充填材料组合物可以用作诱导成骨细胞分化(具体而言,诱导根管和/或根尖周组织的病变部位的成骨细胞分化)的组合物、增加白细胞(具体而言,增加根尖和/或根尖周组织的病变部位的白细胞)的组合物、和免疫刺激(具体而言,在根尖和/或根尖周组织的病变部位的免疫刺激)组合物。
本发明的根管充填材料组合物对成骨细胞的分化是通过促进Colla1表达或促进Runx2表达来诱导的,因此本发明的根管充填材料组合物可以用作促进Colla1表达的组合物(具体而言,促进根管和/或根尖周组织病变部位的Colla1表达的组合物)或作为促进Runx2表达的组合物(具体而言,促进根管和/或根尖周组织病变部位的Runx2表达的组合物)。
如上所述,牙髓炎和根尖性牙周炎涉及细菌感染。因此,本发明包括治疗感染根管和/或感染根尖周组织的方法,所述方法包括用含锂盐的组合物以足以治疗感染根管和/或感染根尖周组织的量来填充有感染根管和/或感染根尖周组织的患者的根管。
本发明还包括在根管和/或根尖周组织的病变中的免疫刺激方法,所述方法包括用含锂盐的组合物以足以在根管和/或根尖周组织中进行免疫刺激的量来填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管。
本发明还包括诱导根管和/或根尖周组织的病变中牙髓干细胞向成骨细胞分化的方法,所述方法包括用含锂盐的组合物以足以诱导根管和/或根尖周组织病变中牙髓干细胞向成骨细胞分化的量来填充有根管和/或根尖周组织病变的患者的根管。
所述含锂盐的组合物足以治疗感染根管和/或感染根尖周组织的剂量或充填量取决于牙齿的类型或根管的形状,可以使用约0.01至0.03mL含有上述浓度的锂盐的组合物。所述含锂盐的组合物足以在根管和/或根尖周组织的病变中进行免疫刺激或诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化的剂量或充填量与上述基本相同。
所述患者可以是非人类动物或人类,特别优选是人类。
(锂盐的溶出性)
本发明的根管充填材料组合物,根据实施例的“从根尖孔的锂溶出试验”中的方法确定,在浸渍液中的每日绝对锂量优选为0.02μg以上,更优选0.05μg以上,更加优选0.1μg以上。所述量可以是1μg以上。所述量优选5mg以下,更优选1mg以下,更加优选0.1mg以下。所述量可以是10μg以下。
本发明的根管充填材料组合物的第一实施方式
(钙化合物)
在第一实施方式中,本发明的根管充填材料组合物还可以包含钙化合物。
钙化合物的例子包括氢氧化钙、碳酸钙、硫酸钙、氯化钙、乙酸钙、氧化钙、磷酸三钙、磷酸一氢钙、磷酸二氢钙和焦磷酸二氢钙。具体而言,优选氢氧化钙和碳酸钙,更优选氢氧化钙。
钙化合物可以单独使用或以其两种以上的组合使用。
在所述含钙化合物(特别是氢氧化钙)的组合物中,相对于组合物的总量,钙化合物(特别是氢氧化钙)的浓度优选为2重量%以上,更优选5重量%以上,更加优选10重量%以上,愈加优选20重量%以上。当含有上述范围内的浓度的氢氧化钙时,所述组合物充分提供药效,特别是氢氧化钙的药效。相对于组合物的总量,钙化合物(特别是氢氧化钙)的浓度优选为70重量%以下,更优选50重量%以下,更加优选40重量%以下。当含有上述范围内的浓度的钙化合物时,所述组合物的硬度适中,即使从注射器容器中也可以容易地排出。
(水)
第一实施方式中的本发明根管充填材料组合物还可以包含水。
在所述含水的组合物中,水的浓度优选是锂盐浓度(重量%)的1倍以上,更优选1.1倍以上,更加优选1.2倍以上,愈加优选1.3倍以上。当含有上述范围内的浓度的水时,所述糊剂不硬。水的浓度优选是锂盐浓度(重量%)的2倍以下,更优选1.8倍以下,更加优选1.7倍以下,愈加优选1.6倍以下。含水比例过高的组合物容易干燥,而含水比例在上述范围内的组合物防止了在储存期间干燥。
相对于组合物的总量,水的浓度优选为0.001重量%以上,更优选0.005重量%以上,更加优选0.01重量%以上,愈加优选0.1重量%以上,进一步优选1重量%以上。所述浓度优选70重量%以下,更优选50重量%以下,更加优选40重量%以下,愈加优选30重量%以下,进一步优选25重量%以下。
(多元醇)
第一实施方式中的本发明根管充填材料组合物还可以包含多元醇。
添加多元醇是为了将钙化合物制成糊状制剂。多元醇的例子包括二元醇如丙二醇、聚丙二醇和聚乙二醇,和三元醇如甘油。具体而言,优选丙二醇、聚乙二醇和甘油。
聚丙二醇优选聚合度为100至1,000,更优选200至600,更加优选300至400。
聚乙二醇优选聚合度为100至1,000,更优选200至600,更加优选300至400。
多元醇可以单独使用或以其两种以上的组合使用。“其两种以上”除了含有两种以上化合物类型不同的多元醇的情况外,还包括例如,含有两种以上聚合度不同的聚丙二醇的情况以及含有两种以上聚合度不同的聚乙二醇的情况。
在所述含有多元醇的组合物中,相对于组合物的总量,多元醇的浓度优选为1重量%以上,更优选5重量%以上,更加优选10重量%以上,愈加优选20重量%以上,进一步优选30重量%以上。相对于组合物的总量,多元醇的浓度优选为90重量%以下,更优选70重量%以下,更加优选60重量%以下,愈加优选50重量%以下。含有浓度在上述范围内的多元醇的组合物可制成易于处理的粘稠的糊状制剂。
(氧化铝/氧化钛的超细粒子)
第一实施方式中的本发明根管充填材料组合物还可以包含粒度为1nm至1μm的氧化铝超细粒子和/或粒度为1nm至1μm的氧化钛超细粒子。
当储存在容器中时,包含钙化合物(特别是氢氧化钙)的根管充填材料组合物可能会分离成钙化合物(特别是氢氧化钙)和液体组分,并且可能难以从容器例如注射器容器中推出。当本发明的组合物包含上述氧化铝超细粒子和/或氧化钛超细粒子时,抑制了在所述组合物储存期间的固液分离。
所述超细粒子的粒度为1nm以上并且粒度可以为5nm以上或10nm以上。所述超细粒子的粒度为1μm以下并且粒度可以为500nm以下、300nm以下、50nm以下、或20nm以下。当所述超细粒子的粒度在上述范围内时,可以充分抑制钙化合物(特别是氢氧化钙)与液体组分之间的分离。
在本发明中,超细粒子的粒度是一次粒子的平均粒度,并通过在透射电子显微镜下的观察来确定。
在所述含有氧化铝超细粒子和/或氧化钛超细粒子的组合物中,相对于组合物的总量,所述超细粒子的总浓度可以是,例如,0.1重量%以上,优选0.5重量%以上,更优选1重量%以上,更加优选2重量%以上。当含有上述范围内的浓度的超细粒子时,充分实现了增稠效果,并抑制了固液分离。相对于组合物的总量,所述超细粒子的总浓度可以是,例如,20重量%以下,优选10重量%以下,更优选5重量%以下,更加优选4重量%以下。当含有上述范围内的浓度的超细粒子时,所述组合物的硬度适中,容易从注射器容器排出。
(其它组分)
第一实施方式中的本发明根管充填材料组合物还可以包含软膏基质,如液体石蜡、矿脂、油(诸如橄榄油、花生油的植物油)、蜡、树脂和糖浆,以及增稠剂,如纤维素和酯胶,以控制糊剂的稠度。当所述组合物包含软膏基质时,优选组合使用表面活性剂。
第一实施方式中的本发明根管充填材料组合物可包含X射线造影剂或不透射线的介质如硫酸钡、氧化锆、次硝酸铋、三氧化铋、碳酸铋、氧化锌和碘仿。根据JIS-T6522[齿科根管封闭材料(Dental root canal sealing materials)],对根管充填材料组合物要求的X射线对比度或不透明度要求是“厚度为3mm以上的铝板”,并随所使用的X射线造影剂或不透射线的介质的类型而异。例如,相对于组合物的总量,含有的硫酸钡的含量为10重量%以上。
另外,只要不损害本发明的效果,所述组合物可以包含根管充填材料中可使用的组分,例如抗微生物剂。
可以单独使用或以其两种以上的组合使用其它组分(除锂盐、钙化合物、水、多元醇、氧化铝超细粒子和氧化钛超细粒子之外的组分)。
(稠度)
第一实施方式中本发明的根管充填材料组合物优选稠度(铺展平均值)为25-50mm,更优选25-40mm,其中稠度如下确定:将75μL的组合物夹入玻璃板之间;在其上施加2.5kg的荷重7分钟;并测量与铺展的糊剂接触的平行切线之间的最大距离和最小距离。当稠度在上述范围内时,更有效地抑制了组合物在储存期间的固液分离,并且组合物具有适合于应用的流动性。
(制备方法)
第一实施方式的本发明根管充填材料组合物可以通过将液体组分(例如,包括水和多元醇)和固体组分(包括锂盐和例如钙化合物)混合并捏和来制备。
(使用方法)
第一实施方式的本发明根管充填材料组合物,例如,可以装入注射器容器中,然后可以将18至25号钝针与该注射器容器相连,并可以将组合物充填到根管中。
为了从根管取出组合物,可以使用5至20重量%(特别是约10重量%)的次氯酸和1至5重量%(特别是约3重量%)的过氧化氢水来交替洗涤组合物,或可以施行使用净化水和超声工作尖的超声波清洗来去除组合物。当本发明的根管充填材料组合物包含氧化铝超细粒子和/或氧化钛超细粒子时,所述糊剂在充填后的数天至数周间不会硬化,因此可以容易地去除。
第二实施方式的本发明根管充填材料组合物
在第二实施方式中,本发明的根管充填材料组合物是含有高级脂肪酸和松香的糊剂A与含有氧化镁和植物油的糊剂B的组合物,并且糊剂A和糊剂B之一或二者包含锂盐。所述组合物在将糊剂A和糊剂B混合后使用。
(锂盐)
锂盐包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中。锂盐优选仅包含在糊剂B中,这可以防止因与糊剂A中的高级脂肪酸或松香进行皂化反应而硬化。
如上所述,锂盐的浓度优选是相对于组合物的总量的0.0001至20重量%,在第二实施方式中,“组合物的总量”是糊剂A和糊剂B混合后的总量。
(高级脂肪酸)
糊剂A中的高级脂肪酸当与糊剂B中的氧化镁接触时发生皂化反应,结果,使作为封闭剂的混合糊剂硬化。所述高级脂肪酸优选碳数为15以上以便不散发刺激性气味,并且优选在室温附近时为液体,因为使糊剂A易制成糊剂。所述高级脂肪酸可以是任何饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。更优选碳数为15以上且在室温附近时为液体的高级脂肪酸。在饱和脂肪酸中,特别优选具有支碳链的饱和脂肪酸,例如异硬脂酸。在不饱和脂肪酸中,可以特别优选使用亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸、鰶鱼酸、棕榈油酸等。
相对于糊剂A的总量,高级脂肪酸的含量可以为20至50质量%,优选为30至40质量%。如果含有的高级脂肪酸含量过低,则硬化时间延长,根尖孔外的渗出液或血液可能会污染根管内壁,或根尖封闭性能可能劣化。另外,液体组分的减少增加了糊剂A本身的粘度,使所述糊剂在使用时稠度过高且难以使用。如果含有的高级脂肪酸含量过高,则硬化时间过短,致使糊剂在根管充填操作期间固化,糊剂难以送入根管内,或操作余裕时间可能缩短。
(松香)
糊剂A中的松香是由属于松属的各种植物的分泌物中去除精油制成的固体树脂,并且没有特别限制,可以使用牙科领域中常规使用的任何松香。松香通常由90%的树脂酸和10%的中性物质构成。树脂酸包含的主要组分(约90%)为通过加热被异构化的松香酸,松香含有的其它组分为海松酸和异海松酸且几乎不含精油。来自法国的松香含有高含量的海松酸。还包括通过氢化这些松香的不饱和键部分制备的松香。
松香当与氧化镁接触时也发生皂化反应,这促进了混合的糊剂的硬化反应。
相对于糊剂A的总量,松香的含量可以为40至80质量%,优选为50至70质量%。如果含有的松香含量过低,则硬化时间延长,根尖孔外的渗出液或血液可导致污染,从而降低根尖部的封闭性能。如果含有的松香含量过高,则糊剂在使用时的稠度过高,可能难以送入根管。
(氧化镁)
糊剂B中的氧化镁当与高级脂肪酸和松香接触时立即发生皂化反应,使混合物硬化。因此硬化时间受氧化镁含量的影响。如果含有的氧化镁含量过低,则硬化反应变慢。如果含有的氧化镁含量过高,则硬化反应变快,使混合物难以充填到根管内。适合于最佳硬化时间(约10至30分钟)的氧化镁含量随组合物中含有的其它组分的种类或含量而异,并且是例如,相对于糊剂B总量的5至30质量%,特别优选10至20质量%。
(植物油)
糊剂B中的植物油可以是要作为糊剂中的基材的任何天然组分,例子包括橄榄油、花生油、菜籽油、豆油、红花油、棉籽油、玉米油和月见草油等的植物油。甘油与亚油酸、油酸、亚麻酸、棕榈酸、异硬脂酸等的高级脂肪酸的酯化合物也以高含量包含在植物油中,因此也包含在本发明的植物油中。
通过混合糊剂A和糊剂B制备的糊剂优选具有适度高的稠度并且具有所述糊剂不会在根管内流动的稠度。如果含有的植物油含量过低,则在使用时糊剂的稠度过高,使所述糊剂难以送入根管内,或难以制备糊剂B。如果含有的植物油含量过高,则组合物在使用时的稠度过低且难以操作。相对于糊剂B的总量,满足理想糊剂稠度的植物油含量可以为10至40质量%,特别优选为15至30质量%。
(其它组分)
第二实施方式的本发明根管充填材料组合物中可以含有的其它组分与第一实施方式基本相同。除了第一实施方式中列出的“其它组分”外,还可以含有丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇、甘油等多元醇作为增稠剂。也可以含有水。
X射线造影剂或不透射线的介质可以包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中,并且优选包含在糊剂B中以防止组合物的固液分离。至于X射线造影剂或不透射线的介质的含量,例如,硫酸钡的浓度可以是相对于糊剂A和糊剂B混合后组合物总量的10重量%以上。
当为了控制糊剂A和糊剂B的粘度而使用软膏基剂或增稠剂时,可以将软膏基剂或增稠剂包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中。植物油包含在糊剂B中,也可以包含在糊剂A中以控制粘度。
在第二实施方式的本发明根管充填材料组合物中,除了第一实施方式中的“其它组分”外,为了控制粘度,糊剂A和糊剂B之一或二者还可以含有粒度为1nm至1μm的二氧化硅超细粒子。
当含有所述超细粒子时,其含量可以为相对于糊剂A和糊剂B各自的总量的0.1重量%以上,优选为1重量%以上,更优选为2重量%以上。相对于糊剂A和糊剂B各自的总量,含量优选为10重量%以下,更优选8重量%以下,更加优选5重量%以下。当含量在上述范围内时,充分获得增稠效果,并且抑制固液分离。
第二实施方式的本发明根管充填材料组合物可以含有丁子香酚,但优选不含丁子香酚。
第二实施方式的本发明根管充填材料组合物优选不含氧化钙、氢氧化钙或氢氧化镁。如果含有这样的组分,则会立即进行与脂肪酸或松香的皂化(硬化)反应,因此在所述糊剂混合时开始硬化,并且混合操作或充填操作可能会困难。如果糊剂B中含有这样的组分,则与植物油的皂化反应进行,并且在储存中糊剂B在诸如注射器的容器内可能固化(硬化)。
在本发明中,“不含”某些组分包括含有该组分不可避免的量的情况。
在第二实施方式的本发明根管充填材料组合物中,糊剂A与糊剂B的组合重量比(糊剂A:糊剂B)优选为1:0.5至1.5,更优选1:0.8至1.2,特别优选为1:1。
(制备方法)
第二实施方式的本发明根管充填材料组合物的糊剂A和糊剂B各自可以通过将液体组分和固体组分混合并捏和来制备。
(容器)
糊剂A和糊剂B可储存在分别的容器中,或可以分别储存在具有两个储存部分的单包装型容器的相应储存部分中。
具有两个储存部分的单包装型容器的例子包括各具有两个室的容器。在容器中,所述两个室由分隔壁隔开,糊剂A和糊剂B充填在各自的室内,使用时通过打破分隔壁混合。在另一种容器中,每个储存部分具有排出口或作为排出口的部分,在使用时糊剂A和糊剂B从各自的排出口排出并混合。后一种容器的例子包括双注射器容器,通过单次推动可以从其中以预期的比率推出荷载的糊剂A和糊剂B,以及在排出口处具有混合尖端的双注射器容器,通过单次推动可以从其中将糊剂A和糊剂B的预期比率的混合物充填到根管内。
(使用方法)
根据第二实施方式的本发明根管充填材料组合物,可以将糊剂A和糊剂B混合并充填到例如根管内。充填后,氧化镁与高级脂肪酸和松香发生皂化反应,组合物在约5分钟至2小时(优选约10分钟至30分钟)内硬化。
第三实施方式的本发明根管充填材料组合物
在第三实施方式中,本发明的根管充填材料组合物是糊剂A和糊剂B的组合并且通过混合糊剂A和糊剂B而硬化的根管充填材料组合物。糊剂A和糊剂B之一或二者包含锂盐,糊剂A和糊剂B之一或二者包含玻璃粉末。玻璃粉末含有氧化钙和二氧化硅,其总量为相对于玻璃粉末总量的50至100重量%,并且在玻璃粉末中,氧化钙与二氧化硅的重量比(氧化钙:二氧化硅)为6:4至3:7。
(锂盐)
锂盐包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中。特别是当糊剂A含有后述的赋予硬化性质的组分(具体而言,高级脂肪酸、聚丙烯酸或其盐、和/或磷酸)时,锂盐优选仅包含在糊剂B中以防止因与糊剂A中的组分进行皂化反应而硬化。
如上所述,锂盐的浓度优选是相对于组合物的总量的0.0001至20重量%,“组合物的总量”是糊剂A和糊剂B混合后的总量并且是糊剂A和糊剂B的合计量。
(玻璃粉末)
在本发明的根管充填材料组合物中,糊剂A和糊剂B之一或二者含有具有上述特定组成的粉末玻璃作为填料。含有较多量粉末玻璃的组合物具有较高的析出类骨晶体的性能和较高的封闭性能。因此,相对于糊剂A和糊剂B的合计量,粉末玻璃的含量优选为20重量%以上,并且可以为30重量%以上或40质量%以上。
含有过多量的粉末玻璃的组合物在使用时可能具有较低的硬化性或较差的操作性。因此,当粉末玻璃包含在糊剂A和糊剂B之一中时或当粉末玻璃包含在糊剂A和糊剂B二者中时,粉末玻璃的含量优选相对于每种糊剂为70重量%以下并且可以为60重量%以下或50重量%以下。
已经有许多研究和专利将粉末玻璃与无机材料如生物陶瓷、可生物降解聚合物、有机树脂或类似材料混合,以改善所生成的复合材料的操作性或硬化体的强度,并且在活体内从玻璃表面形成磷灰石样晶体以及该晶体与骨或牙齿结合是已知的。这样的性质被称为“生物活性”,已经检查和研究了多种具有生物活性的玻璃配方。作为组成成分和配方,氧化钙和二氧化硅以氧化钙:二氧化硅的重量比为6:4至3:7,按50至100质量%包含在内。另外,含有的碱金属氧化物可以为0至40重量%,含有的磷酸可以为0至10重量%。也可以含有氧化镧等的X射线造影组分。
粉末玻璃可以按常规方法制备或可以是市售产品。
(糊剂A的赋予硬化性质的组分)
糊剂A可以包含赋予硬化性质的组分,以便通过混合糊剂A和糊剂B来促进硬化。所述组分的例子包括丁子香酚、愈创木酚、高级脂肪酸、聚丙烯酸或其盐、和磷酸。高级脂肪酸的优选例子与第二实施方式的本发明根管充填材料组合物相同。赋予硬化性质的组分可以单独使用或以其两种以上的组合使用。
所述赋予硬化性质的组分的含量通过与作为填料含有的粉末玻璃的含量的关系来决定。即,要求该含量是要使所述糊剂的混合物硬化的含量并且是适合于使所述粉末玻璃提供析出类骨晶体的功能并维持令人满意的封闭性能的含量。从这个观点来看,所述赋予硬化性质的组分的含量优选是相对于糊剂A的总量的5重量%以上,更优选10重量%以上,更加优选20重量%以上,愈加优选40重量%以上。糊剂A可不含粉末玻璃,因此糊剂A可以含有占糊剂A总量的100重量%的赋予硬化性质的组分。
(糊剂B的赋予硬化性质的组分)
糊剂B可以包含赋予硬化性质的组分以通过混合糊剂A和糊剂B来促进硬化。所述组分的例子包括氧化钙、氧化镁、氧化锶、氧化锌、磷酸钙和铝硅酸盐玻璃。赋予硬化性质的组分可以单独使用或以其两种以上的组合使用。
这样的组分的含量通过与糊剂B中作为填料含有的粉末玻璃的含量的关系来决定。所述赋予硬化性质的组分的含量优选是相对于糊剂B的总量的5重量%以上,更优选10重量%以上,更加优选20重量%以上,愈加优选40重量%以上。糊剂B可不含粉末玻璃,因此糊剂B可以含有占糊剂B总量的100重量%的赋予硬化性质的组分。
铝硅酸盐玻璃与上述粉末玻璃不同,不具有在活体内形成类骨晶体的功能。然而,在牙科领域中已知,铝硅酸盐玻璃是一种可硬化材料,在与聚丙烯酸或磷酸混合时硬化,并且可以选为通过混合来赋予硬化性质的组分。
(其它组分)
第三实施方式的本发明根管充填材料组合物中可以含有的其它组分与第一实施方式基本相同。除了第一实施方式中列出的“其它组分”外,还可以含有丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇、甘油等多元醇作为增稠剂。也可以含有水。
X射线造影剂或不透射线的介质可以包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中,并且优选包含在糊剂B中以防止组合物的固液分离。至于X射线造影剂或不透射线的介质的含量,例如,硫酸钡的浓度可以是相对于糊剂A和糊剂B混合后组合物总量的10重量%以上。
当为了控制糊剂A和糊剂B的粘度而使用软膏基剂或增稠剂时,可以将软膏基剂或增稠剂包含在糊剂A和糊剂B之一或二者中。
在第三实施方式的本发明根管充填材料组合物中,除了第一实施方式中的“其它组分”外,为了控制粘度,糊剂A和糊剂B之一或二者还可以含有粒度为1nm至1μm的二氧化硅超细粒子。
当含有所述超细粒子时,其含量可以为相对于糊剂A和糊剂B各自的总量的0.1重量%以上,优选为1重量%以上,更优选为2重量%以上。含量优选为10重量%以下,更优选8重量%以下,更加优选5重量%以下。当含量在上述范围内时,充分获得增稠效果,并且抑制固液分离。
在第三实施方式的本发明根管充填材料组合物中,糊剂A与糊剂B的组合重量比(糊剂A:糊剂B)优选为1:0.5至1.5,更优选1:0.8至1.2,特别优选1:1。
(制备方法)
第三实施方式的本发明根管充填材料组合物的糊剂A和糊剂B各自可以通过将液体组分和固体组分混合并捏和来制备。
(容器)
装入糊剂A和糊剂B的容器与第二实施方式中的相同。
(使用方法)
根据第三实施方式的本发明根管充填材料组合物,可以将糊剂A和糊剂B混合并充填到例如根管内。充填后,所述组合物在约5分钟至3小时内硬化。
本发明的根管充填材料组合物至少包含锂盐,并且可以是除上述例示的第一至第三实施方式以外的任何组合物。
实施例
以下将参考实施例对本发明作进一步详细说明,但本发明不限于此。
(1)根管充填材料组合物的制备
作为本发明的第一实施方式,通过将预先混合的液体组分和预先混合的固体组分混合并在瓷研钵中捏和,制备各自具有表1至4所示配方的糊状根管充填材料组合物。
作为本发明的第二和第三实施方式,通过在瓷研钵中捏合所有相应的组分来制备各自具有表5所示配方的糊剂A和各自具有表6所示配方的糊剂B。表6中粉末玻璃的配方在表7中显示。
表1 (单位:重量%)
表2 (单位:重量%)
表3 (单位:重量%)
表4 (单位:重量%)
表5 (单位:重量%)
糊剂A的组分 | 配方1 | 配方2 |
异硬脂酸 | 40.0 | 39.0 |
次碳酸铋 | 56.0 | - |
二氧化硅超细粒子 | 4.0 | - |
松香 | - | 54.0 |
酯胶 | - | 5.0 |
苯甲酸 | - | 2.0 |
表6 (单位:重量%)
表7 (单位:重量%)
粉末玻璃 | 配方1 | 配方2 |
CaO | 52.0 | 54.0 |
SiO<sub>2</sub> | 38.0 | 36.0 |
P<sub>2</sub>O<sub>5</sub> | 10.0 | 10.0 |
CaO/SiO<sub>2</sub>比 | 1.37 | 1.50 |
表8
(2)评价方法
作为表1至4所示的组合物,将1mL的所述糊剂装入塑料注射器容器中。具有表5所示配方的糊剂A和具有表6所示配方的糊剂B以表8所示的组合等量使用并混合。各产物进行以下试验。
<对根尖病变的治愈促进效果>
根据以下程序,使用每组4只大鼠,考察实施例1至3、5、18和比较例1的根管充填材料组合物各自的根尖病变治愈促进效果。
1.将10周龄雄性Wister大鼠在全身麻醉下用圆钻(#1/2)切开下颌第一磨牙的咬合面,露出牙髓。
2.用K锉(#10),穿透根尖。通过将穿透的根尖暴露于口腔,在4周后形成根尖病变。
3.牙髓暴露4周后,将大鼠施行全身麻醉,用电动的根管长度测量仪在橡皮障隔离下对暴露牙髓的下颌第一磨牙设定工作长度。
4.在用次氯酸钠溶液洗涤的同时,用K锉(#15和#20)扩大根管。
5.用次氯酸钠水溶液结合超声振动进行根管冲洗,并用纸尖干燥根管。
6.在根管内充填作为试验样品的根管充填材料,并通过施加超声波振动使其到达根尖。
7.充填复合树脂以封闭牙髓腔。
8.为防止被测牙齿断裂,拔除上颌第一磨牙。
9.将试验样品施加到根管中后的一周、两周、三周和四周,记录X射线微CT图像,测量根尖病变体积。
<根尖周病变控制机制的阐述>
除用小鼠代替大鼠外,进行与<对根尖病变的治愈促进效果>中相同的程序,并制备根尖病变的组织切片。作为应用于根管的根管充填材料组合物,使用实施例18和比较例1的组合物。
进行原位杂交以鉴定促进牙髓干细胞向成牙质细胞的分化是根尖病变治愈促进的因素。
具体而言,将石蜡切片脱蜡后,用0.01M PBS洗涤切片,然后用4%PFA固定10分钟,再用PBS洗涤。将所述切片与1μg/mL蛋白酶K(Takara Bio)反应5分钟,并用4%PFA进行后固定。用含0.25%乙酸酐的0.1M三乙醇胺对切片进行乙酰化处理,并用0.01M PBS洗涤。切片与cRNA探针(Axin2:Addgene#21277,NM_015732,nt1774-2787,Col1a1:NM_007742,nt29553415,Runx2:AF010284,nt922_1746)在55℃下预杂交1小时,并将其在5倍浓度的柠檬酸钠溶液(5-SSC)中静置20分钟。切片在70℃下与0.2-SSC反应20分钟,并在0.2-SSC中静置5分钟以及在马来酸缓冲液(MBA)中静置5分钟。然后将切片用含有5%山羊血清的封闭溶液(Vector Laboratories,美国加利福尼亚)封闭2小时。将切片与碱性磷酸酶(AP)标记的抗洋地黄毒苷抗体(1:5000)(Roche,瑞士巴塞尔(Basel))在4℃下反应24小时,然后用含有0.1%Tween 20的MBA洗涤,并用含有0.1%Tween 20的去离子蒸馏水洗涤。将切片与作为底物的BM Purple AP(Roche)在室温下反应6小时,然后用PBS洗涤,接着用50%甘油/PBS封片,并在光学显微镜下观察。
另外,进行对B细胞上细胞表面标志物的免疫荧光染色,以鉴定免疫应答的激活,该激活也促进了根尖病变的治愈。
具体而言,将石蜡切片脱蜡后,用tris缓冲盐水(TBS)洗涤切片,然后在柠檬酸缓冲液中在100℃下反应10分钟,并在室温下静置30分钟。用含10%山羊血清(10%山羊血清/TBS)的封闭溶液将切片封闭1小时,然后在室温下与一抗反应过夜。CD45R(Abcam)作为一抗,以1:50的抗体浓度进行实验。与一抗反应后,用TBS洗涤切片,然后与1:500的Alexa488-山羊抗大鼠TgG(Invitrogen,美国加利福尼亚)在室温下反应2小时,并洗涤。将切片与1:1000的DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)(Sigma)反应15分钟。反应结束后,洗涤切片并用50%甘油封片。在荧光显微镜(Axioskop 2plus:Carl Zeiss,德国阿伦(Aalen))下观察染色的组织切片。
<从根尖孔的锂溶出试验>
将根管模型(END1001-30#20,NISSIN)扩大,形成孔尺寸为0.6mm并且根管容积为0.03mL的根管。将表1至4所示的每种组合物约0.05g充填到根管中。作为表8所示的组合组合物,使用等量的糊剂A和糊剂B并混合,然后将所述混合物装入塑料注射器中,并将约0.05g的所述混合物充填到根管内。各标本的根管上部用透明胶带密封。将各标本放入塑料容器中,然后添加10mL净化水浸没根尖,并整体在37℃恒温器内静置。各标本保存7天后,收集浸渍液,放入蒸发皿中,在110℃静置1小时30分钟进行浓缩。将铂丝的尖端浸入浓缩液中,然后轻轻拉起,放入无色火焰中。当通过钴玻璃观察火焰颜色时,将产生红色火焰的组合物评价为合格(○),将不产生红色火焰的组合物评价为不合格(×)。
对于实施例1、3、5、24、26的组合物,通过ICP-AES测量浸渍液中的锂溶出量,并计算从根尖溶出的锂的1日绝对量(g)。锂的1日溶出量为0.014μg以上的组合物被评价为合格(○),锂的1日溶出量不在0.014μg以上的组合物被评价为不合格(×)。
<稠度>
对于表1至4所示的组合物,将75μL的所述糊剂夹入玻璃板(厚度为5mm,70×70mm)之间,然后施加2.5kg的载荷7分钟,测量与铺展的糊剂接触的平行切线之间的最大距离和最小距离。稠度(铺展平均值)为25至50mm的组合物(由于实施例16的稠度约为50mm,因此上限有所增加)被评价为合格(○),而稠度(铺展平均值)不是25至50mm的组合物被评价为不合格(×)。
对于表8所示的组合组合物,参考JIS-T6522-牙科用根管封闭材料(JIS-T6522-Dental root canal sealing materials)中规定的试验方法进行试验。即,将糊剂A和糊剂B等量使用并混合,3分钟后,将相当于0.05mL的量的混合物夹入玻璃板之间。在23℃和50%相对湿度的环境中,施加120g重量(含玻璃板重量)7分钟,测量铺展样品的直径。糊剂稠度为20至35mm的组合物被评价为合格(○),而糊剂稠度不为20至35mm的组合物被评价为不合格(×)。
<膜厚度(JIS-T6522)>
作为糊剂硬度的指标,使用JIS-T6522-牙科用根管封闭材料(JIS-T6522-Dentalroot canal sealing materials)中规定的试验方法作为参考。对于表1至4所示的组合物,将约0.07g的所述糊剂夹入玻璃板(厚度5mm以上,接触表面积200±25mm2)之间,使用小型台式精密通用试验仪施加150±3N的负荷7分钟。对于表8所示的组合组合物,等体积使用糊剂A和糊剂B并混合,然后将约0.07g的混合物夹入玻璃板之间,混合开始3分钟后,使用小型台式精密通用试验仪施加150±3N的负荷7分钟。测量两块玻璃板和糊剂膜的总厚度,从没有任何糊剂膜的厚度计算厚度差(膜厚度)。膜厚度50μm以下的组合物被评价为合格(○),膜厚度超过50μm的组合物被评价为不合格(×)。
<硬化时间(JIS-T6522)>
表1至4中所示的组合物不硬化,因此未进行测试。对于表8所示的组合组合物,参考JIS-T6522-牙科用根管封闭材料(JIS-T6522-Dental root canal sealing materials)中规定的试验方法进行测试。即,等量使用糊剂A和糊剂B并混合,并将所述混合物装入直径φ10mm、高2mm的模具中。混合后2分钟起,将模具置于37℃和相对湿度95%以上的环境中,以预定的时间间隔检查直径φ2mm的100g维卡针是否畅通。硬化时间为6小时以下的组合物被评价为合格(○),硬化时间不在6小时以下的组合物被评价为不合格(×)。
<操作性>
对于表1至4所示的组合物,将约0.1g的所述糊剂置于混合纸垫上,在室内(室温23±1℃,相对湿度50±5%)放置10分钟,目视观察糊剂是否能抓住在根管糊剂螺旋形输送器上。能够被抓住的组合物被评价为合格(○),不能被抓住的组合被评价为不合格(×)。
对于表8所示的组合组合物,等量使用糊剂A和糊剂B并混合,然后用抹刀将混合物拉起,目视观察混合物的拉丝。产生拉丝的组合物被评价为合格(○),不产生拉丝的组合物被评价为不合格(×)。
<从注射器容器推出试验>
对于表1至4所示的组合物,将1mL的所述糊剂装填在塑料注射器容器中,装载3天后,将21号钝针装在塑料注射器容器的尖端。使用小型台式精密通用试验仪,以20mm/min的十字头速度将注射器位移至10mm,观察糊剂是否容易从注射器容器中排出。抵抗值在40N以下的组合物被评价为合格(○),抵抗值超过40N的组合物被评价为不合格(×)。
<糊剂稳定性试验>
将表1至4所示组合物和表6所示组合物(糊剂B)各约1g放入2mL玻璃螺纹管中,在室温下放置一周,观察组合物是否分离。没有分离的组合物被评价为合格(○),分离的组合物被评价为不合格(×)。
(3)结果
结果示于表1至4、表8、图1至3。
如表1所示,实施例1至5中的组合物的锂盐浓度不同,并且各组合物在根管模型的根尖孔中溶出锂盐。各组合物都具有从注射器容器直接施加到根管内的适当稠度,并且具有令人满意的膜厚度、从注射器容器的推出性质、和操作性。即使当各组合物在室温下储存一周,也没有观察到分离。
在表2中的实施例6至11中,水/锂盐的比率变化。
实施例8至10的每种组合物均容易从根尖孔溶出锂盐,具有从注射器容器直接施加到根管内的适当的稠度,并且具有令人满意的膜厚度、从注射器容器的推出性质、和操作性。即使当各组合物在室温下储存一周时,也没有观察到分离。实施例6的组合物相对于锂盐含有的水量少,因此硬,从注射器容器中推出稍难,但可以实用。实施例7的组合物稠度差,但能够形成薄膜,容易从注射器推出,不分离,可以实用。实施例11的组合物稠度差,当放置10分钟时变成油灰状物质,但在迅速操作时可以实用。
表3中实施例12的组合物与实施例2的相同,只是将实施例2的组合物中的碳酸锂改为氯化锂。不管盐的种类如何,所述组合物在锂盐从根尖孔的溶出性、稠度、膜厚度、从注射器容器的推出抵抗性、操作性和分离的所有试验中,均给出了良好的性能。
在表3的实施例13至16中,多元醇的浓度变化。
实施例13至16的组合物在锂盐从根尖孔的溶出性、稠度、从注射器容器的推出抵抗性和操作性上给出了基本令人满意的结果。即使当各组合物在室温下储存一周时,也没有观察到分离。实施例13和14的具有低多元醇浓度的组合物产生的膜厚度稍大,并放置10分钟后变成油灰状物质,但在迅速操作时可以实用。
表3中实施例17的组合物与实施例5的相同,只是将实施例5的组合物中的氢氧化钙改为碳酸钙。即使不含氢氧化钙时,该组合物对根尖病变也具有治愈促进效果,并且从根管模型的根尖孔中溶出锂。该组合物具有从注射器容器直接施加到根管内的适当稠度,并且具有令人满意的膜厚度、从注射器容器的推出性质、和操作性。即使当该组合物在室温下储存一周时,也没有观察到分离。
表4中实施例19和20的组合物与实施例8的相同,只是将实施例8的组合物中的聚乙二醇分别改为丙二醇和甘油。不管多元醇的种类如何,所述组合物在锂盐从根尖孔的溶出性、稠度、膜厚度、从注射器容器的推出抵抗性、操作性和分离的所有试验中,均给出了良好的性能。
表4中实施例21的组合物含有大量的氧化铝超细粒子,而实施例22的组合物不含氧化铝超细粒子。不管氧化铝超细粒子的含量如何,所述组合物在锂盐从根尖孔的溶出性、稠度、膜厚度、从注射器容器的推出抵抗性、操作性和分离的所有试验中,均给出了良好的性能。
表4中实施例23的组合物不含水,因此硬,并且稍微难以从注射器容器中推出。
表4中实施例24的组合物产生厚膜,当放置10分钟时变成油灰状物质,但在迅速操作时可以实用。
如表8所示,实施例25至29的组合物,其中组合使用作为糊剂A的组合物A1和A2以及作为糊剂B的组合物B1至B5,具有适合根管内充填的稠度和膜厚度,具有良好的硬化性和操作性,并且在根管模型内充填时从根尖孔中溶出锂。未观察到储存后的分离。
在观察到从根尖孔溶出锂的实施例1、2、3、5和18中,在根尖病变治愈促进效果的评价中观察到病变体积缩小。
图1显示了在施加实施例18的含锂盐但不含氢氧化钙的组合物和比较例1的不含锂盐的组合物后4周,左下颌第一磨牙的X射线微CT图像。在实施例18中,显示根尖附近的根尖病变的不透射线的图像缩小,这表明骨恢复,而在比较例1中,根尖附近的不透射线的图像仍然大。换句话说,在含有锂盐的实施例18中,观察到病变体积减小效果。
图2至4显示了将试验组合物施加于根管后病变体积随时间的变化。如图2所示,在碳酸锂浓度为12.0重量%的实施例5中,在两周或更长时间后病变体积显著减小。在图3中,将碳酸锂浓度为1.0重量%的实施例3与比较例1进行比较。与图2中的结果一样,在实施例3中,与比较例1相比,在三周或更长时间后病变体积显著减小。如图4所示,在碳酸锂浓度为0.01至1.0重量%的实施例1至3中,与不含锂盐的比较例1相比,在三周或更长时间后病变体积显著减小。即使在0.01%的极低锂盐浓度下,也能充分达到病变体积减小的效果。该病变缩小效果不会显著受到锂盐浓度的影响。
图5显示了如下制备的组织病理切片图像:将实施例18和比较例1的各根管充填材料组合物填充于小鼠的病变根尖孔内;4周后对根尖病变的组织切片进行原位杂交。箭头指示Colla1或Runx2阳性细胞。在实施例18中,观察到箭头指示的Colla1或Runx2阳性细胞数量增加。Runx2是成骨细胞特异性的转录因子,调节多能间充质细胞向成骨细胞的分化。成骨细胞产生I型胶原蛋白,它是骨基质中的主要成分。Colla1(I型胶原蛋白αI)是I型胶原蛋白中的一种。因此结果表明,实施例18的根管充填材料组合物诱导根尖周围的间充质干细胞(牙髓干细胞)向成骨细胞分化以促进成骨,这可归因于含有锂盐。
图6显示了如下制备的组织病理切片图像:将实施例18和比较例1的各根管填充材料组合物填充在小鼠的病变根尖孔内;4周后,对根尖病变的组织切片进行B细胞上细胞表面标志物的免疫荧光染色。在实施例18中,CD45R阳性(红色)细胞的数量与比较例1相比增加。CD45R是在所有白细胞上表达最丰富的造血标志物,并且以细胞特异性模式表达多种同工型。在小鼠中,CD45R/B220同工型在主要从祖B细胞到活化的B细胞的所有阶段,均在B细胞上以各种水平表达。因此结果表明,实施例18的根管充填材料组合物促进白细胞产生来刺激免疫应答,这可归因于含有锂盐。
表1中比较例1的组合物与实施例3的相同,不同之处在于不含碳酸锂(1重量%),但相应增加了氢氧化钙的量(1重量%)。
比较例1的组合物在稠度、膜厚度、从注射器容器的推出抵抗性、操作性和分离的所有试验中均给出良好的性能,但没有提供根尖病变治愈促进效果,并且没有从根管模型的根尖孔中溶出锂。
工业可应用性
本发明的根管充填材料组合物包含锂盐,因此可以有效促进难治性牙髓炎或根尖性牙周炎的治愈,与常规的根管充填材料组合物有很大不同。
Claims (16)
1.根管充填材料组合物,其包含锂盐。
2.根据权利要求1所述的根管充填材料组合物,其中所述锂盐的浓度相对于组合物总量为0.0001重量%至20重量%。
3.根据权利要求1或2所述的根管充填材料组合物,其还包含钙化合物。
4.根据权利要求3所述的根管充填材料组合物,其中所述钙化合物的浓度相对于组合物总量为2重量%至70重量%。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含水。
6.根据权利要求5所述的根管充填材料组合物,其中以重量比计,水的含量是锂盐的1至2倍。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含多元醇。
8.根据权利要求7所述的根管充填材料组合物,其中所述多元醇的浓度相对于组合物总量为1重量%至90重量%。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的根管充填材料组合物,其还包含粒度为1nm至1μm的氧化铝超细粒子和/或粒度为1nm至1μm的氧化钛超细粒子。
10.根据权利要求9所述的根管充填材料组合物,其中所述氧化铝超细粒子和/或氧化钛超细粒子的总含量相对于组合物总量为0.1重量%至20重量%。
11.根据权利要求1或2所述的根管充填材料组合物,其中所述根管充填材料组合物是含有高级脂肪酸和松香的糊剂A与含有氧化镁和植物油的糊剂B的组合,并且所述糊剂A和所述糊剂B之一或二者包含锂盐。
12.根据权利要求1或2所述的根管充填材料组合物,其中所述根管充填材料组合物是糊剂A和糊剂B的组合并通过混合糊剂A和糊剂B而硬化,所述糊剂A和所述糊剂B之一或二者包含锂盐,所述糊剂A和所述糊剂B之一或二者包含玻璃粉末,所述玻璃粉末含有相对于玻璃粉末总量总计为50重量%至100重量%的氧化钙和二氧化硅,并且在所述玻璃粉末中,氧化钙与二氧化硅的重量比即氧化钙:二氧化硅为6:4至3:7。
13.根据权利要求12所述的根管充填材料组合物,其中所述玻璃粉末的含量相对于糊剂A和糊剂B的总量为20重量%以上且相对于糊剂A和糊剂B各自的总量为70重量%以下。
14.根据权利要求12或13所述的根管充填材料组合物,其中所述糊剂A还包含至少一种选自由丁子香酚、愈创木酚、高级脂肪酸、聚丙烯酸或其盐、和磷酸组成的组中的组分,并且所述糊剂B还包含至少一种选自由氧化钙、氧化镁、氧化锶、氧化锌、磷酸钙和铝硅酸盐玻璃组成的组中的组分。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的根管充填材料组合物,其用于在根管和/或根尖周组织的病变中免疫刺激。
16.根据权利要求1至14中任一项所述的根管充填材料组合物,其用于在根管和/或根尖周组织的病变中诱导牙髓干细胞向成骨细胞分化。
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