CN113662190A - 一种缓解疲劳的保健食品及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种缓解疲劳的保健食品及其制备方法，该保健食品其的活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物60~80份、马鹿茸10~20份、淫羊藿提取物90~120份、枸杞子提取物130~160份和麦冬提取物40~60份。该保健食品药性温和，适用人群广，经动物试验验证，安全、无毒副作用，可长期服用，具有缓解体力疲劳的功能。

Description

一种缓解疲劳的保健食品及其制备方法
技术领域
本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种缓解疲劳的保健食品及其制备方法。
背景技术
随着社会经济的发展，生活节奏的加快，人们承受的工作、生活压力也越来越大，使得越来越多的人处于亚健康状态，长期遭受疲劳困扰。疲劳是现代高效快节奏生活方式下出现的一种以慢性或反复发作的极度疲劳为突出表现的状态，常伴有注意力不集中、记忆力减退、食欲不振、困倦、头晕耳鸣、胸闷气短、腰膝酸软、关节疼痛等症状，严重影响人们的生活质量和工作效率。长期处于疲劳状态下，还易引发神经系统、消化系统、循环系统等的功能紊乱，进而引发一系列疾病，危害人们的身心健康。因此，研究预防、治疗及控制疲劳的方法、产品具有重要意义。
现有“抗疲劳”“缓解体力疲劳”的保健食品种类繁多，大致类型分为：补充能量的、补充人体所需维生素和微量元素的，以及改善机体功能，促进循环系统运行，加速代谢物排出的，等类型。各种类型各有优劣，适应人群也各有不同。其中，通过改善机体功能来达到缓解疲劳的保健食品，多采用传统中药作为原料进行配伍制得，具有一定功效，但是具体功效大小因配伍组成、制剂工艺和制剂类型等不同而存在一定差异，使得功效参差不齐。尤其是一些缓解疲劳的保健酒类，采用中药材与白酒配伍制备，适用人群极为有限，且不宜长期饮用，还存在损害健康的风险。因此，需要研发了一些药性温和、功效稳定，适用人群广的缓解疲劳的保健食品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种缓解疲劳的保健食品及其制备方法，该保健食品药性温和、适用人群广，可有效帮助易疲劳者缓解体力疲劳。
本发明是通过如下技术方案实现的：
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物60~80份、马鹿茸10~20份、淫羊藿提取物90~120份、枸杞子提取物130~160份和麦冬提取物40~60份。
在本申请的一种实施例中，其包括以下重量份的组分：人参提取物70份、马鹿茸15份、淫羊藿提取物100份、枸杞子提取物150份和麦冬提取物50份。
在本申请的一种实施例中，还包括50~70份固体药学辅料，所述固体药学辅料为玉米淀粉和硬脂酸镁。
在本申请的一种实施例中，所述人参提取物的总皂苷含量大于等于8%，所述淫羊藿提取物的淫羊藿苷含量大于等于6%，所述枸杞子提取物的粗多糖含量大于等于30%，所述麦冬提取物的粗多糖含量大于等于20%。
在本申请的一种实施例中，所述人参提取物由以下方法制备得到：取人参，粉碎，加入固液质量比为1：8~10的70%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次1~2h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至3~5ml含1g人参药材；浓缩液在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述人参提取物。
在本申请的一种实施例中，所述淫羊藿提取物由以下方法制备得到：取淫羊藿，粉碎，加入固液质量比1：50~60的80%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次1~2h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至4~6ml含1g淫羊藿药材时，加入等量乙酸乙酯萃取3次，然后，在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述淫羊藿提取物。
在本申请的一种实施例中，所述枸杞子提取物由以下方法制备得到：取枸杞子，加入固液质量比1：8~10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次2~3h，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的1/4，加入4被体积的95%的乙醇，静置24h，过滤，在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述枸杞子提取物。
在本申请的一种实施例中，所述麦冬提取物由以下方法制备得到：取麦冬，粉碎，加入固液质量比1：8~10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次1~2h，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的1/4，进行喷雾干燥，制得所述麦冬提取物。
在本申请的一种实施例中，所述保健食品为散剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或片剂。
一种如以上所述的缓解疲劳的保健食品的制备方法，包括如下步骤：
步骤S1、将所述人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物分别粉碎，过80目筛，制成细粉，备用；
步骤S2、按配方称取所述步骤S1中制备的所述人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物细粉，与过80目筛后的玉米淀粉进行混合，混合30min制得混合粉；
步骤S3、将所述步骤S2中制备的所述混合粉与所述硬脂酸镁混合10min，制得总混合粉；
步骤S4、将所述步骤S3中制备的所述总混合粉灌装胶囊，制得灌装量为440mg/粒的胶囊。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明提供的缓解疲劳的保健食品中，枸杞子提取物，味甘、性平，入肝肾经，具有滋补肝肾、明目、益面色、坚筋骨的功能；淫羊藿提取物，味辛、甘，性温，入肝、肾经，可补肾助阳，提升肾阳之气；人参提取物，甘、微苦，微温，归脾、肺、心、肾经，大补元气、生津养血，气足则精固；麦冬提取物，性微寒，味甘、微苦，归心经、肺经、胃经，养阴生津、润肺清心；马鹿茸，甘，咸，温，归肾、肝经，具有壮肾阳，益精血，强筋骨的功能。全方配伍精当，具有补肝肾、益气血、滋阴补阳、祛疲益神的功效。
2、按照本发明的制备方法制备获得的产品，药性温和，物毒副作用，可长期服用，能有效缓解人体疲劳，可用于慢性疲劳综合征以及各种疲劳症状的临床治疗，也可用于日常缓解疲劳的保健保养。
3、该保健食品的组分中采用人参提取物、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物作为原料，使得产品的活性成分浓度更高，功效更易保证，且产品的品质更好控制。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明做进一步详细说明。应当理解，以下所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
本发明实施提供了一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物70份、马鹿茸15份、淫羊藿提取物100份、枸杞子提取物150份、麦冬提取物50份和固体药学辅料55份。
其中，人参提取物由以下方法制得：取人参块茎，粉碎，加入固液质量比为1：8的70%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取2 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约4ml含1g人参药材时，将浓缩液在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎，制得所需的人参提取物。
该人参提取物为黄白至浅黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为12%，总皂苷含量约为9.2%。
马鹿茸的制备方式是：马鹿茸饮片粉碎制得马鹿茸粉末，马鹿茸需经灭菌处理。
淫羊藿提取物由以下方法制得：取干淫羊藿，粉碎，过50目筛，加入固液质量比为1：50的80%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取2 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约4ml含1g淫羊藿药材时，加入等量的乙酸乙酯进行萃取，萃取3次，然后在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的淫羊藿提取物。
该淫羊藿提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为6%，淫羊藿苷的含量约为6.3%。
枸杞子提取物由以下方法制得：取净枸杞子，加入固液质量比为1:10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次3 h；2次过滤后合并滤液，加热浓缩至约原体积的1/4，待浓缩液冷却后加入约4倍体积的95%乙醇，使醇溶液的含醇量约为75%，充分混合后静置24 h；然后过滤，滤液经真空减压浓缩回收乙醇，待浓缩至一定浓度后，再在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的枸杞子提取物。
该枸杞子提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为11%，粗多糖含量约为31.5%。
麦冬提取物由以下方法制得：取净麦冬块根，粉碎，加入固液质量比为1:10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次1.5 h；2次过滤后合并滤液，浓缩至适合浓度（约为原体积的1/4时），进行喷雾干燥，制得所需的麦冬提取物。
该麦冬提取物为棕色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为10%，粗多糖约为22.7%。
该缓解疲劳的保健食品，可为各活性组分及固体药学辅料按配方混合后制得的散剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或者片剂。
具体地，该缓解疲劳的保健食品胶囊剂的制备方法为：
步骤S1、将上述制得的人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物，分别进行粉碎，过80目筛，制成均匀的细粉，备用；固体药学辅料为玉米淀粉和硬脂酸镁，其中玉米淀粉过80目筛，制成细粉备用。
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1400g、马鹿茸300g、淫羊藿提取物2000 g、枸杞子提取物3000g、麦冬提取物1000g和玉米淀粉1056g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁44g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
步骤S4，将上述步骤S3中制得的总混合粉，使用全自动胶囊填充机灌装胶囊，制得灌装量为440mg/粒的胶囊颗粒。
步骤S5、抛光除去胶囊表面的粉末，并挑选剔除不合格的胶囊颗粒。
步骤S6、装入符合标准的口服固体药用聚酯瓶，规格为30粒/瓶。
步骤S7、进行外包装，然后成品检验，检验合格后，入库。
上述步骤S1至步骤S6是在洁净度为三十万级的生产车间内完成。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.46g、粗多糖13.32 g、淫羊藿苷1.43 g。
本制备方法分别对原料进行过筛后，按配方称重进行充分混合，然后再与硬脂酸镁混合，可充分保证物料混合均匀，保证产品质量的均一。该制备方法操作简单，易于流程化控制，适于规模化生产线生产，产品质量易于控制。
实施例2
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物80份、马鹿茸20份、淫羊藿提取物90份、枸杞子提取物130份、麦冬提取物60份和固体药学辅料60份。
其中，人参提取物由以下方法制得：取人参块茎，粉碎，加入固液质量比为1：10的70%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取1.5 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约3ml含1g人参药材时，将浓缩液在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎，制得所需的人参提取物。
该人参提取物为黄白至浅黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为12%，总皂苷含量约为8.6 %。
马鹿茸的制备方式是：马鹿茸饮片粉碎制得马鹿茸粉末，马鹿茸需经灭菌处理。
淫羊藿提取物由以下方法制得：取干淫羊藿，粉碎，过50目筛，加入固液质量比为1：60的80%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取1.75 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约6 ml含1g淫羊藿药材时，加入等量的乙酸乙酯进行萃取，萃取3次，然后在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的淫羊藿提取物。
该淫羊藿提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为6%，淫羊藿苷的含量约为6.2%。
枸杞子提取物由以下方法制得：取净枸杞子，加入固液质量比为1：8的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次2.5 h；2次过滤后合并滤液，加热浓缩至约原体积的1/4，待浓缩液冷却后加入约4倍体积的95%乙醇，使醇溶液的含醇量约为75%，充分混合后静置24h；然后过滤，滤液经真空减压浓缩回收乙醇，待浓缩至一定浓度后，再在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的枸杞子提取物。
该枸杞子提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为11%，粗多糖含量约为30.8%。
麦冬提取物由以下方法制得：取净麦冬块根，粉碎，加入固液质量比为1：8的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次2 h；2次过滤后合并滤液，浓缩至适合浓度（约为原体积的1/4时），进行喷雾干燥，制得所需的麦冬提取物。
该麦冬提取物为棕色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为10%，粗多糖约为21.6%。
该缓解疲劳的保健食品，可为各活性组分及固体药学辅料按配方混合后制得的散剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或者片剂。
具体地，该缓解疲劳的保健食品胶囊剂的制备方法为：
步骤S1、将上述制得的人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物，分别进行粉碎，过80目筛，制成均匀的细粉，备用；固体药学辅料为玉米淀粉和硬脂酸镁，其中玉米淀粉过80目筛，制成细粉备用。
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1600g、马鹿茸400g、淫羊藿提取物1800 g、枸杞子提取物2600g、麦冬提取物1200g和玉米淀粉1150g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁50g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
步骤S4，将上述步骤S3中制得的总混合粉，使用全自动胶囊填充机灌装胶囊，制得灌装量为440mg/粒的胶囊颗粒。
步骤S5、抛光除去胶囊表面的粉末，并挑选剔除不合格的胶囊颗粒。
步骤S6、装入符合标准的口服固体药用聚酯瓶，规格为30粒/瓶。
步骤S7、进行外包装，然后成品检验，检验合格后，入库。
上述步骤S1至步骤S6是在洁净度为三十万级的生产车间内完成。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.56g、粗多糖12.05 g、淫羊藿苷1.27 g。
实施例3
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物60份、马鹿茸15份、淫羊藿提取物110份、枸杞子提取物160份、麦冬提取物45份和固体药学辅料50份。
其中，人参提取物由以下方法制得：取人参块茎，粉碎，加入固液质量比为1：10的70%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取2 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约4 ml含1g人参药材时，将浓缩液在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎，制得所需的人参提取物。
该人参提取物为黄白至浅黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为12%，总皂苷含量约为9.0 %。
马鹿茸的制备方式是：马鹿茸饮片粉碎制得马鹿茸粉末，马鹿茸需经灭菌处理。
淫羊藿提取物由以下方法制得：取干淫羊藿，粉碎，过50目筛，加入固液质量比为1：55的80%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次提取2 h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至约5 ml含1g淫羊藿药材时，加入等量的乙酸乙酯进行萃取，萃取3次，然后在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的淫羊藿提取物。
该淫羊藿提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为6%，淫羊藿苷的含量约为6.4%。
枸杞子提取物由以下方法制得：取净枸杞子，加入固液质量比为1：10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次2 h；2次过滤后合并滤液，加热浓缩至约原体积的1/4，待浓缩液冷却后加入约4倍体积的95%乙醇，使醇溶液的含醇量约为75%，充分混合后静置24 h；然后过滤，滤液经真空减压浓缩回收乙醇，待浓缩至一定浓度后，再在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，将干燥物粉碎制得所需的枸杞子提取物。
该枸杞子提取物为棕黄色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为11%，粗多糖含量约为30.3%。
麦冬提取物由以下方法制得：取净麦冬块根，粉碎，加入固液质量比为1：10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次1.75 h；2次过滤后合并滤液，浓缩至适合浓度（约为原体积的1/4时），进行喷雾干燥，制得所需的麦冬提取物。
该麦冬提取物为棕色粉末，滋味和气味正常，无异味；提取率约为10%，粗多糖约为21.2%。
该缓解疲劳的保健食品，可为各活性组分及固体药学辅料按配方混合后制得的散剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或者片剂。
具体地，该缓解疲劳的保健食品胶囊剂的制备方法为：
步骤S1、将上述制得的人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物，分别进行粉碎，过80目筛，制成均匀的细粉，备用；固体药学辅料为玉米淀粉和硬脂酸镁，其中玉米淀粉过80目筛，制成细粉备用。
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1200g、马鹿茸300g、淫羊藿提取物2200 g、枸杞子提取物3200g、麦冬提取物900g和玉米淀粉960g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁40g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
步骤S4，将上述步骤S3中制得的总混合粉，使用全自动胶囊填充机灌装胶囊，制得灌装量为440mg/粒的胶囊颗粒。
步骤S5、抛光除去胶囊表面的粉末，并挑选剔除不合格的胶囊颗粒。
步骤S6、装入符合标准的口服固体药用聚酯瓶，规格为30粒/瓶。
步骤S7、进行外包装，然后成品检验，检验合格后，入库。
上述步骤S1至步骤S6是在洁净度为三十万级的生产车间内完成。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.22g、粗多糖13.19 g、淫羊藿苷1.6 g。
实施例4
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物65份、马鹿茸17份、淫羊藿提取物105份、枸杞子提取物145份、麦冬提取物53份和固体药学辅料55份。
其中，人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物的制备方法及制备条件，同实施例1；
该实施例缓解疲劳的保健食品的胶囊剂的制备方法中，步骤S1、S4、S5、S6和S7，同实施例1；
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1300g、马鹿茸340g、淫羊藿提取物2100 g、枸杞子提取物2900g、麦冬提取物1060g和玉米淀粉1060g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁40g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.36g、粗多糖13.12 g、淫羊藿苷1.50 g。
实施例5
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物75份、马鹿茸13份、淫羊藿提取物97份、枸杞子提取物135份、麦冬提取物55份和固体药学辅料65份。
其中，人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物的制备方法及制备条件，同实施例1；
该实施例缓解疲劳的保健食品的胶囊剂的制备方法中，步骤S1、S4、S5、S6和S7，同实施例1；
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1500g、马鹿茸260g、淫羊藿提取物1940 g、枸杞子提取物2700g、麦冬提取物1100g和玉米淀粉1240g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁60g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.57g、粗多糖12.50 g、淫羊藿苷1.39 g。
实施例6
一种缓解疲劳的保健食品，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物78份、马鹿茸10份、淫羊藿提取物95份、枸杞子提取物152份、麦冬提取物40份和固体药学辅料65份。
其中，人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物的制备方法及制备条件，同实施例1；
该实施例缓解疲劳的保健食品的胶囊剂的制备方法中，步骤S1、S4、S5、S6和S7，同实施例1；
步骤S2、按配方重量组分配比，分别准确称取人参提取物1560g、马鹿茸200g、淫羊藿提取物1900g、枸杞子提取物3040g、麦冬提取物800g和玉米淀粉1244g，使用三维混合机混合30 min，制得混合粉。
步骤S3、按配方称取硬脂酸镁56g，与步骤S2中制得的混合粉混合10min，制得总混合粉。
经检验，本实施例中制得的保健食品，其每100g含：总皂苷1.63g、粗多糖12.95 g、淫羊藿苷1.36 g。
实施例7
安全性毒理学评价试验
一、急性经口毒性试验（最大耐受剂量法，即MTD法）
受试物为实施例1制得的胶囊剂，胶囊剂的内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为880mg/日，实验时采用蒸馏水溶解配置制成需要的浓度。
SD大鼠（由四川省中医药科学院实验动物中心提供），20只，体重180 g~220 g，雌雄各半。设10 g/kg.bw一个剂量组，称取受试物50g，蒸馏水配制至100 ml，按2 ml/100g.bw一次经口灌胃，灌胃后观察两周内死亡动物数及一般健康情况，根据最大耐受量判断受试物的急性毒性。
Figure 283199DEST_PATH_IMAGE001
该缓解疲劳的保健食品的急性经口毒性试验的结果如表1所示，受试物10 g/kg.bw剂量经口染毒后，两周内未见动物死亡，亦无明显的中毒症状或不良反应。两周试验结束后剖杀全部动物，内脏器官未见明显异常改变。
结论：该受试物对雌、雄性SD大鼠的急性经口MTD大于10 g/kg.bw，属实际无毒类。
二、遗传毒性试验
1、污染物致突变性检测试验（Ames试验）
受试物为实施例1制得的胶囊制剂，内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为880mg/日，实验时采用蒸馏水溶解配置成所需浓度。
采用经鉴定符合要求的TA97、TA98、TA100和TA102菌株，进行加与不加大鼠肝S9（由多氯联苯诱导）的标准平皿掺入试验（S9混合物用量为0.5 ml/皿）。
设五个受试物剂量：8、40、200、1000和5000 μg/皿。准确称取受试物1.0g，加蒸馏水至20ml得到最高工作浓度50 mg/ml。在超净工作台中，将该液通过0.22μm的MILLIPORE针头滤器除菌。取100 μl加入平皿为最高终浓度5000 μg/皿。其余工作浓度以最高工作浓度为基础，依次用灭菌蒸馏水5倍往下稀释获得。
设自发对照组、溶剂对照组（灭菌蒸馏水100μl/皿）和阳性对照。不加S9试验的阳性对照为2,4,7-三硝基茐酮（2,4,7-TNFone）（0.2μg/皿，适用菌株TA97、TA98）；4-硝基喹啉-N-氧化物（4-NQNO）（0.5μg/皿，适用菌株TA100）、丝裂霉素C（MMC）（0.5μg/皿，适用菌株TA102）；加S9试验的阳性对照为2-氨基茐（2-AF）（10.0μg/皿，适用菌株TA97、TA98、TA100）、1,8-二羟基蒽醌（Dan）（50.0μg/皿，适用菌株TA102）。每个试验剂量作三个平行皿，重复试验一次。
Figure DEST_PATH_IMAGE002
Figure 262657DEST_PATH_IMAGE003
该Ames试验的试验结果如表2和表3所示，无论加与不加S9的试验，自发对照组的每皿平均回变菌落数均在正常值范围内，而阳性对照组诱发的每皿平均回变菌落数均为自发对照组二倍以上，呈明显阳性反应。该受试物各剂量组的平均回变菌落数均未超过溶剂对照组的一倍，呈阴性反应。
结论：该受试物无诱导试验菌株回复突变的作用。
2、小数骨髓嗜多染红细胞微核试验
受试物为实施例1制得的缓解疲劳的保健食品胶囊剂，内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为880mg/日，实验时采用蒸馏水溶解配置成所需浓度。
KM种小鼠（由四川省中医药科学院实验动物中心提供），体重25g~30g，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。
试验设阴性对照（蒸馏水）、阳性对照（环磷酰胺40 mg/kg.bw）和2.5、5.0和10.0g/kg.bw受试物试验组（分别称取5.0g、10.0g和20.0g受试物，个加蒸馏水至40ml）。
动物分别于0小时和第24小时按2ml/100g.bw经口灌胃，末次染毒后6小时处死动物，按程序制片。
每只动物计数1000个嗜多染红细胞（PCF），观察含有微核的嗜多染红细胞数，计算微核率（‰），同时观察200个红细胞中PCE和RBC所占数目，并计算PCE/RBC比值。
Figure DEST_PATH_IMAGE004
该小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验的结果如表4所示，阳性对照组雌、雄动物的微核率均显著高于阴性对照组（P＜0.01），受试物各组的微核率与阴性对照组比较均无显著性差异（P＞0.05），提示该受试物在小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验中为阴性结果。
3、小鼠精子畸形试验
受试物为实施例1制得的缓解疲劳的保健食品胶囊剂，内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为880mg/日，实验时采用蒸馏水溶解配置成所需浓度。
SPK级KM种雄性小鼠（由四川省中医药科学院实验动物中心提供），体重25g~35g，随机分为5组，每组5只。
试验设阴性对照组，阳性对照组（环磷酰胺CP 40 mg/kg.bw）和2.5 g/kg.bw、5.0g/kg.bw和10.0 g/kg.bw三个受试物剂量组（灌胃液配制同微核试验），按2 ml/100g.bw经口灌胃动物，连续5天。于首次灌胃后35天处死动物，取双侧附睾，按标准程序制片，每只动物观察1000个完整精子，记录各类畸形精子数。
Figure 104711DEST_PATH_IMAGE005
该小鼠精子畸形试验结果如表5所示，阳性对照组的精子畸形率显著高于阴性对照组（P＜0.01），该受试物各剂量组的精子畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异（P＞0.05），提示本受试物在小鼠精子畸形试验中为阴性结果。
综上，Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验三项遗传毒性试验结果均为阴性，表明该受试物无致突变作用。
三、大鼠30天喂养试验
受试物为实施例1制得的胶囊制剂，内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为880mg/日。
断乳SD大鼠（由四川省中医药科学院实验动物中心提供），适应性喂养一周后，按体重随机分为四组，每组20只，雌雄各半。
试验设一个阴性对照组（基础饲料）和三个受试物剂量组：440 mg/kg.bw、1100mg/kg.bw和1540 mg/kg.bw（相当于人体推荐摄入量的30、75和105倍）。按动物体重的10%受试物掺入饲料拌饲。饲料配制方法：每1kg饲料中分别加入4.4g、11g和15.4g受试物，均加工为颗粒饲料，喂养30天。
每周称一次动物体重、两次给食量和剩食量，并计算摄食量。分别按周增重及周摄食量计算周食物利用率（%），同时计算总食物利用率（%）。30天后处死动物，进行血液学、血清生化学及组织病理学检查和脏器系数测定。
阴性对照组和3个剂量组动物在30天喂养期间，摄食、饮水、大小便正常，生长发育情况和一般表现良好，未观察到明显行为改变和中毒表现。
（1）对体重和食物利用率的影响
各实验组在整个试验期间的体重和食物利用率结果参见表6和表7。受试物各剂量组动物各周体重、总增重和总食物利用率经方差分析与阴性对照组比较无显著性差异（P＞0.05），表明该受试物对机体生长发育无不良影响。
Figure DEST_PATH_IMAGE006
Figure 63702DEST_PATH_IMAGE007
（2）脏器系数测定结果
如表8所示，为受试物各剂量组的重要脏器的重量和脏器系数(脏器湿重/体重×100)，由表8可见雌、雄鼠各剂量组重要脏器的重量和脏器系数与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。
Figure DEST_PATH_IMAGE008
（3）末期血液学检验结果
如表9所示，为试验末期的常规血液学指标(红细胞、血红蛋白、白细胞及分类)测定结果。受试物各剂量组雌、雄鼠的血液学测定指标与阴性对照组比较均无显著性差异（P>0.05）。
Figure RE-DEST_PATH_IMAGE009
（4）末期生化指标检验结果
如表10所示，为各试验组肝功、肾功、血脂和血糖等生化指标检测结果，雄鼠低剂量组TP较对照组轻度增高(P＜0.05)，但无剂量-反应关系，故物生物学意义；雌鼠高剂量组ALT较对照组轻度增高，但在历史对照值范围内(P＜0.05)，故无生物学意义。其余指标雌、雄鼠各剂量组指标与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。
Figure DEST_PATH_IMAGE010
（5）组织学检查结果
试验结束时对肝、肾、胃、空肠、脾脏和卵巢/睾丸等进行大体检查和组织病理学检查。大体检查未发现明显病变，因此仅选高剂量组和阴性对照组作组织学检查。
参见表11~表17所示，镜下见：对照组发现一例肾局灶性间质炎，高剂量组发现一例肾小管蛋白管型，综合分析所出现病变，应属动物的自发病变。因此，各剂量组动物脏器均未见由受试物引起的损害性改变。
Figure 825170DEST_PATH_IMAGE011
Figure DEST_PATH_IMAGE012
Figure DEST_PATH_IMAGE013
Figure 888941DEST_PATH_IMAGE014
Figure DEST_PATH_IMAGE015
Figure 525326DEST_PATH_IMAGE016
Figure DEST_PATH_IMAGE017
综上，从表6至表17各项生物学指标检查结果表明，在最高剂量为人体推荐摄入量105倍（1540mg/kg.bw）的大鼠30天喂养试验中，本受试物未引起大鼠的整体健康状况、生理生化功能和器官形态学等各重要指标的异常变化。
总结：由实施例1获得的缓解疲劳的保健食品对SD大鼠的急性经口MTD大于10 g/kg.bw，为实际无毒类。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验三项遗传毒性试验均为阴性结果，表明该受试物无致突变作用。在最高剂量为人体推荐摄入量105倍（1540 mg/kg.bw）的大鼠30天喂养试验中，未引起大鼠整体健康状况、生理生化功能和器官组织形态学各重要指标的异常变化，初步估计该受试物最大无作用剂量大于1540 mg/kg.bw。
本实施例的试验结果可有效证明该缓解疲劳的保健食品安全、无毒副作用，可长期食用。
实施例8
缓解体力疲劳功能检验
受试物为实施例1制得的胶囊制剂，内容物为棕褐色粉末，推荐成人服用量为2×440mg/人/日。
SPF级雄性ICR种小鼠（由成都达硕生物科技有限公司提供），体重18g~22g，随机分为空白对照组和三个受试物实验组。受试物剂量分别为146.7mg/kg.bw、293.3mgkg.bw、440.0g/kg.bw（分别相当于人体推荐摄入量的10、20、30倍）。
灌胃液配制：分别称取受试物胶囊剂的内容物0.74g、1.5g、2.2g，用蒸馏水稀释至100ml。空白对照组动物以蒸馏水灌胃，各实验组动物以相应剂量的受试物水溶液按20ml/kg.bw灌胃，每日一次，连续灌胃30天后，分别进行一下实验。
1、负重游泳实验
末次给予受试物30min后，将尾根部负重5%体重铅皮的小鼠置于游泳箱中游泳。箱中水深不少于30cm，水温25℃±1℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。
Figure 397467DEST_PATH_IMAGE018
如表18所示，受试物高剂量组的小鼠负重游泳时间显著长于空白对照组（P＜0.05）。
2、血乳酸测定
末次给予受试物30min后，将动物置温度为30℃的水中不负重游泳10min，并于游泳前、游泳后立即、游泳后休息20min各采眼球血20μL测定乳酸含量，并按以下公式计算血乳酸曲线下面积，以判断运动后血乳酸变化情况。
血乳酸曲线下面积=5×（游泳前血乳酸值+3×游泳后0min血乳酸值+2×游泳后休息20min血乳酸值）
Figure DEST_PATH_IMAGE019
如表19所示，该受试物各剂量组小鼠在游泳各个时间点的血乳酸含量和血乳酸曲线下面积与空白对照组间均无显著性差异（P＞0.05）。
3、血清尿素测定
末次给予受试物30min后，将小鼠置温度为30℃的水中不负重游泳90min，休息60min后采眼球血0.5mL，血凝固后取血清用二乙酰-肟法测定血清尿素氮含量。
Figure 312203DEST_PATH_IMAGE020
如表20所示，该受试物高剂量组小鼠血清尿素氮含量显著低于空白对照组（P＜0.01）。
4、肝糖原测定
于末次给予受试物后30min处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸干，迅速称取肝脏100mg，测定肝糖原含量（蒽酮法）。
Figure 535374DEST_PATH_IMAGE021
如表21所示，该受试物三个剂量组小鼠肝糖原含量均显著高于空白对照组（P＜0.01）。
综上，如表18~表21所示，本实施例的实验采用SPF级ICR小鼠，按照实施例1制备的缓解疲劳的保健食品的受试物，按人体推荐剂量的10、20、30倍以及空白对照组动物以蒸馏水连续灌胃30天，结果表明该受试物高剂量组的小鼠负重游泳时间、三个剂量组小鼠肝糖原含量均显著高于空白对照组；高剂量组小鼠血清尿素氮含量显著低于空白对照组。安评价标准判定，本受试物（实施例1制备的缓解疲劳的保健食品胶囊剂）具有缓解体力疲劳的功能。

Claims (10)

1.一种缓解疲劳的保健食品，其特征在于，其活性组分包括以下重量份的组分：人参提取物60~80份、马鹿茸10~20份、淫羊藿提取物90~120份、枸杞子提取物130~160份和麦冬提取物40~60份。
2.根据权利要求1所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，其包括以下重量份的组分：人参提取物70份、马鹿茸15份、淫羊藿提取物100份、枸杞子提取物150份和麦冬提取物50份。
3.根据权利要求1或2所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，还包括50~70份固体药学辅料，所述固体药学辅料为玉米淀粉和硬脂酸镁。
4.根据权利要求1或2所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述人参提取物的总皂苷含量大于等于8%，所述淫羊藿提取物的淫羊藿苷含量大于等于6%，所述枸杞子提取物的粗多糖含量大于等于30%，所述麦冬提取物的粗多糖含量大于等于20%。
5.根据权利要求4所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述人参提取物由以下方法制备得到：取人参，粉碎，加入固液质量比为1：8~10的70%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次1~2h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至3~5ml含1g人参药材；浓缩液在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述人参提取物。
6.根据权利要求4所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述淫羊藿提取物由以下方法制备得到：取淫羊藿，粉碎，加入固液质量比1：50~60的80%乙醇，在70~80℃条件下提取2次，每次1~2h；过滤，合并滤液，真空减压浓缩回收乙醇，浓缩至4~6ml含1g淫羊藿药材时，加入等量乙酸乙酯萃取3次，然后，在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述淫羊藿提取物。
7.根据权利要求4所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述枸杞子提取物由以下方法制备得到：取枸杞子，加入固液质量比1：8~10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次2~3h，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的1/4，加入4被体积的95%的乙醇，静置24h，过滤，在70℃、0.08MPa条件下减压干燥，粉碎，制得所述枸杞子提取物。
8.根据权利要求4所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述麦冬提取物由以下方法制备得到：取麦冬，粉碎，加入固液质量比1：8~10的蒸馏水，在95~100℃条件下提取2次，每次1~2h，过滤，合并滤液，浓缩至原体积的1/4，进行喷雾干燥，制得所述麦冬提取物。
9.根据权利要求1或2所述的缓解疲劳的保健食品，其特征在于，所述保健食品为散剂、丸剂、颗粒剂、胶囊剂或片剂。
10.一种如权利要求3所述的缓解疲劳的保健食品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1、将所述人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物分别粉碎，过80目筛，制成细粉，备用；
步骤S2、按配方称取所述步骤S1中制备的所述人参提取物、马鹿茸、淫羊藿提取物、枸杞子提取物和麦冬提取物细粉，与过80目筛后的玉米淀粉进行混合，混合30min制得混合粉；
步骤S3、将所述步骤S2中制备的所述混合粉与所述硬脂酸镁混合10min，制得总混合粉；
步骤S4、将所述步骤S3中制备的所述总混合粉灌装胶囊，制得灌装量为440mg/粒的胶囊。
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