CN111772050A - 大鼠高尿酸血症模型饲料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于本发明属于实验动物技术领域，具体涉及大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，精确称取基础饲料、0.15％‑0.2％质量比的腺嘌呤进行混合，加入玉米油进行搅拌，在冷却桶中进行降温处理后，加入水分搅拌混合，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料；进行低温烘干水分，获得大鼠高尿酸血症模型饲料。本发明还提供了大鼠高尿酸血症模型饲料及其应用。本发明提供的大鼠高尿酸血症模型不造成肾脏严重器质性损伤，成功复制与人类高尿酸血症病发病机制相类似的动物模型，为后续的药物观察治疗动物实验研究提供了基础。本发明仅通过单纯的饲料喂养大鼠，无需采用灌胃手段，符合动物伦理，即可获得大鼠高尿酸血症模型，从而为人类相关疾病研究提供理论基础。
Description
技术领域
本发明属于实验动物技术领域，具体涉及大鼠高尿酸血症模型饲料及其制备方法和应用。
背景技术
目前人们对尿酸盐在体内的代谢已经有了较全面的认识，在痛风的遗传学研究方面也取得了一些进展。生物体血尿酸水平主要受肾转运系统的调节。痛风是由于嘌呤代谢紊乱，导致血尿酸增高和\或肾脏排泄尿酸减少，从而引起尿酸盐在组织沉积的疾病，其自然病程分为无症状高尿酸血症、急性痛风性关节炎、间歇期痛风、慢性痛风石性痛风四个阶段，偶尔也会出现痛风性肾病。约10％的高尿酸血症患者会自然发展为痛风。
目前用于高尿酸血症治疗研究的动物模型中，氧嗪酸钾作为抑制尿酸产生的化学诱导剂建立的高尿酸血症模型，以其灵敏简便、重复性好，在国际上被普遍采用。此外，也有研究者用尿酸和酵母膏成功诱导动物高尿酸血症模型的报道。高尿酸血症引起的肾实质损害有两种类型一种称为尿酸盐肾病，第二种是尿酸性肾病。腺嘌呤在剂量为300ppm灌胃给药时，大鼠肾脏损害十分严重，整个肾脏呈白色，重量约为正常肾脏的一倍大小，肾组织结构完全破坏，根本无逆转的可能，无法观察药物疗。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明提供了大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，目的是为了解决现有技术中腺嘌呤在剂量为300ppm灌胃给药时，大鼠肾脏损害十分严重，整个肾脏呈白色，重量约为正常肾脏的一倍大小，肾组织结构完全破坏，根本无逆转的可能，无法观察药物疗的技术问题。本发明还提供了大鼠高尿酸血症模型饲料及其应用。
本发明提供的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，具体技术方案如下：
大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，包括如下步骤：
S1，精确称取基础饲料、0.15％-0.2％质量比的腺嘌呤进行混合，获得混合粉料；
S2，步骤S1中的混合粉料加入玉米油进行搅拌，获得油料混合物；
S3，步骤S2中的油料混合物放置在冷却桶中进行降温处理后，加入水分搅拌混合，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料；
S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温烘干水分，获得大鼠高尿酸血症模型饲料，所述大鼠高尿酸血症模型饲料中钙的含量为0.6％，磷的含量为0.9％。
在某些实施方式中，步骤S1中，所述基础饲料按质量百分比计包括19.57％酪蛋白、0.29％DL-蛋氨酸、14.68％玉米淀粉、48.93％蔗糖、4.89％纤维素、3.42％复合矿物质、0.27％磷酸氢钙、1.88％磷酸二氢钾、0.98％复合维生素和0.20％酒石酸氢胆碱。
在某些实施方式中，步骤S2中，按质量比计，所述玉米油为4.89％。
在某些实施方式中，步骤S3中，所述油料混合物放置在冷却桶中降至室温，所述软颗粒饲料的粒径10-15mm。
在某些实施方式中，步骤S4中，所述烘干的温度为26摄氏度，时间为48小时。
本发明还提供了根据上述方法制备的大鼠高尿酸血症模型饲料。
本发明提供了大鼠高尿酸血症模型饲料的应用，连续给wistar大鼠或SD大鼠饲喂上述的大鼠高尿酸血症模型饲料14天-21天，自由饮水，饲喂后的大鼠血尿酸为正常饮食的大鼠血尿酸的3-4倍，即大鼠高尿酸血症模型构建完成。
本发明具有以下有益效果：本发明提供的方法制备的大鼠高尿酸血症模型饲料喂养大鼠16-21天，可以发现大鼠的尿酸明显升高并出现慢性肾功能衰竭，不造成肾脏严重器质性损伤，成功复制与人类高尿酸血症病发病机制相类似的动物模型，为后续的药物观察治疗动物实验研究提供了基础。此外，本发明仅通过单纯的饲料喂养大鼠，无需采用灌胃手段，符合动物伦理，即可获得大鼠高尿酸血症模型，模拟人类高尿酸血症的各种症状，从而为人类相关疾病研究提供理论基础。
附图说明
图1是本发明提供的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法的流程图；
图2是实施例1对照组与实施例组的大鼠血液指标和尿液指标的对比图；
图3是实施例1对照组与实施例组的大鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)的对比图；
图4是实施例1对照组与实施例组的大鼠肝肾质量及系数对比图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明进一步详细说明。
实施例1
本实施例提供的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，具体技术方案如下：
如图1所示，大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，包括如下步骤：
S1，精确称如表1所示的原料，按质量比计，19.57％酪蛋白、0.29％DL-蛋氨酸、14.68％玉米淀粉、48.93％蔗糖、4.89％纤维素、3.42％复合矿物质、0.27％磷酸氢钙、1.88％磷酸二氢钾、0.98％复合维生素、0.20％酒石酸氢胆碱和0.15％-0.2％质量比的腺嘌呤进行混合，获得混合粉料；
S2，步骤S1中的混合粉料加入质量比4.89％的玉米油进行搅拌，获得油料混合物；
S3，步骤S2中的油料混合物放置在冷却桶中进行降温，降至室温后，加入水分搅拌混合，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料，软颗粒饲料的粒径为10-15mm；
S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温烘干水分，烘干的温度26摄氏度，时间为48小时获得大鼠高尿酸血症模型饲料，所述大鼠高尿酸血症模型饲料中钙的含量为0.6％，磷的含量为0.9％。
表1为本实施例提供的大鼠高尿酸血症模型饲料的称量原料
| 重量 | 热量 | |
| 酪蛋白 | 200 | 800 |
| DL-蛋氨酸 | 3 | 12 |
| 玉米淀粉 | 150 | 600 |
| 蔗糖 | 500 | 2000 |
| 纤维素 | 50 | 0 |
| 玉米油 | 50 | 450 |
| 复合矿物质 | 35 | 0 |
| 磷酸氢钙 | 2.71 | 0 |
| 磷酸二氢钾 | 19.24 | 0 |
| 腺嘌呤 | 1.54-2.05 | 0 |
| 复合维生素 | 10 | 40 |
| 酒石酸氢胆碱 | 2 | 0 |
| 合计 | 1023.49-1024 | 3902 |
本实施例还提供利用上述方法制备的大鼠高尿酸血症模型饲料。
wistar大鼠或SD大鼠共40只，周龄6周龄以下，体重150±20g，动物室为清洁级，室内温度控制在(25±2)℃之间，相对湿度为50％-70％，自然光照，避免噪音及其它干扰，自由进食和饮水。将大鼠随机均分为2组，即对照组和实施例组(模型组)，连续饲喂14天，检测两组大鼠的血清尿酸(BUA)、肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)浓度、血清氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平，观察大鼠尿液中尿肌酐(UCr)、尿素氮(UUN)、24h尿量(24h UV)、24h尿酸排泄量(24h UUA)，和肝肾质量及系数。
如图2-4所示，实施例组大鼠血清尿酸、24h尿量、24h尿酸排泄量、血清肌酐、血清尿素氮、血清总胆固醇、血清甘油三酯、低血清密度脂蛋白均显著高于对照组大鼠，实施例组大鼠的尿液中尿肌酐和尿液尿素氮显著低于对照组的大鼠，说明实施例的大鼠构建高尿酸血症模型已经完成。实施例组的大鼠的肝肾质量及系数均高于对照组大鼠，说明实施例组的大鼠已经出现慢性肾功能损伤。此外实施例组的大鼠的SCr的数值只是达到250μmol/L，BUN数值只是达到40mmol/L，虽然均高于对照组大鼠，但是仍然为慢性肾功能障碍，并没有造成不可逆的肾脏严重器质性损伤，利用后续药物的改善和实验性研究。
上述仅本发明较佳可行实施例，并非是对本发明的限制，本发明也并不限于上述举例，本技术领域的技术人员，在本发明的实质范围内，所作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。
Claims (7)
1.大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1，精确称取基础饲料、0.15％-0.2％质量比的腺嘌呤进行混合，获得混合粉料；
S2，步骤S1中的混合粉料加入玉米油进行搅拌，获得油料混合物；
S3，步骤S2中的油料混合物放置在冷却桶中进行降温处理后，加入水分搅拌混合，通过制粒机进行制粒，获得软颗粒饲料；
S4，将步骤S3中的软颗粒饲料进行低温烘干水分，获得大鼠高尿酸血症模型饲料，所述大鼠高尿酸血症模型饲料中钙的含量为0.6％，磷的含量为0.9％。
2.根据权利要求1所述的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述基础饲料按质量百分比计包括19.57％酪蛋白、0.29％DL-蛋氨酸、14.68％玉米淀粉、48.93％蔗糖、4.89％纤维素、3.42％复合矿物质、0.27％磷酸氢钙、1.88％磷酸二氢钾、0.98％复合维生素和0.20％酒石酸氢胆碱。
3.根据权利要求1所述的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，其特征在于，步骤S2中，按质量比计，所述玉米油为4.89％。
4.根据权利要求1所述的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，其特征在于，步骤S3中，所述油料混合物放置在冷却桶中降至室温，所述软颗粒饲料的粒径为10-15mm。
5.根据权利要求1所述的大鼠高尿酸血症模型饲料的制备方法，其特征在于，步骤S4中，所述烘干的温度为26摄氏度，时间为48小时。
6.大鼠高尿酸血症模型饲料，其特征在于，根据权利要求1-5任一项所述的方法制备的大鼠高尿酸血症模型饲料。
7.大鼠高尿酸血症模型饲料的应用，用于构建大鼠高尿酸血症模型，其特征在于，连续给wistar大鼠或SD大鼠饲喂权利要求6所述的大鼠高尿酸血症模型饲料14-21天，自由饮水，饲喂后的大鼠血尿酸为正常饮食的大鼠血尿酸的3-4倍，即大鼠高尿酸血症模型构建完成。
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