CN111670847B - 一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，涉及水产养殖技术领域；利用北方海域秋季和春季水温特点结合室内育苗车间和室外土池培育大规格日本海神蛤苗种，在每年10月份采集日本海神蛤亲贝，通过投喂人工浓缩饵料培育幼虫，水泥池底采苗和池塘沉水网框中间育成等一系列创新式方法，规模化培育大规格日本海神蛤苗种，可有效提高底播养殖的成活率，降低人工培育成本。秋季人工苗种培育时间比春季延长5个月，苗种壳长规格比春季人工培育苗种提高70.0％以上，室内苗种成活率比春季提高50.0％以上。
Description
技术领域
本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及一种日本海神蛤苗种室内人工繁育方法。
背景技术
日本海神蛤(Panopea japonica)是象拔蚌的一种，成体壳长一般为8～15cm，鲜重200～600g，分布于我国黄海北部、朝鲜半岛和日本北海道海域，喜栖息于潮间带至50米的泥沙底，埋栖深度为30～40cm。目前，我国土著日本海神蛤资源几近枯竭，主要依靠朝鲜进口，其水管略带金黄、肉质堪比加拿大温哥华出产的高端BC象拔蚌(高雅海神蛤P.abtupta)，具有个体大、生长快、出肉率高、肉质鲜美、营养丰富等优点，深受广大消费者的青睐，市场价格为80～130元/kg，具有极高的经济价值。此外，日本海神蛤的牛磺酸含量高，每100g水管干样品中牛磺酸含量为2.97g，约是菲律宾蛤仔、文蛤、牡蛎等贝类的5～9倍，深受消费者喜爱，市场潜力巨大。
随着市场需求的增大以及人工育苗的紧迫，国内外学者于20世纪70年代，相继开展了海神蛤性腺发育、饵料种类、遗传多样性分析等研究。但是目前，有关日本海神蛤室内人工苗种繁育技术研究国内外均未见报道。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，开展日本海神蛤秋季室内大规模大规格人工苗种繁育及室外池塘中间培育技术研究，为我国日本海神蛤大规模大规格苗种繁育及高效养殖提供科学依据。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，包括以下步骤：(1)每年阳历10月份在黄渤海北部采捕日本海神蛤作为亲贝，经阴干流水刺激后产卵、排精，经授精后得受精卵；
(2)所述受精卵经36～40h孵化成D形幼虫，将所述D形幼虫进行培养，至34～60日龄时得足面盘幼虫；所述培养时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)；
(3)将所述足面盘幼虫在水泥池底培育成稚贝，所述水泥池底培育时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)；
(4)当所述稚贝生长为壳长5～10mm时，将所述稚贝转移至铺有细砂的具盖网框中，沉于室外池塘底部进行39d中间育成，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤大规格苗种。
优选的，步骤(1)所述阴干流水刺激前，还包括将所述亲贝进行4～10d的室内暂养；
所述室内暂养时的水温为18～20℃，盐度28～33，持续充气保持水中溶解氧为4mg/L以上。
优选的，步骤(2)所述受精卵孵化密度为30～50个/mL。
优选的，步骤(2)所述孵化和培养的水温均为13.2～17.4℃，pH值均为7.5～8.0，盐度均为28～33。
优选的，步骤(2)所述培养时每日投饵3～4次，日投喂量为500～1500cells/mL，每次投喂的浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)，投喂比例为2:1；
浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)细胞数量分别为10亿cells//mL和40亿cells//mL。
优选的，所述培养的密度为3～4个/mL。
优选的，步骤(3)所述水泥池底培育的水温为12.8～14℃，培育密度由3～5万粒/m2逐渐疏散至1万粒/m2。
优选的，所述水泥池底培育时每日投饵3～4次，日投喂量为1000～3000cells/mL。
优选的，步骤(4)所述具盖网框的长为48.5cm，宽为36cm，高为15cm；每个所述具盖网框中放入2000个所述稚贝。
优选的，每个所述具盖网框内的细砂铺设厚度为3～5cm。
本发明提供了一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，利用北方海域秋季和春季水温特点结合在室内育苗车间和室外土池培育大规格日本海神蛤苗种，具体的说是在每年10月份采集日本海神蛤亲贝，通过投喂人工浓缩饵料培育幼虫，水泥池底采苗和池塘沉水网框中间育成等一系列创新式方法，大规模培育大规格日本海神蛤苗种，可有效提高底播养殖的成活率。本发明所述方法将日本日本海神蛤室内有效人工苗种繁育时间由原来的3个月延长至7个月，培育的苗种规格相比现有技术提高了70.0％以上，室内苗种成活率相比现有技术提高了50.0％。本发明所述方法操作简单、易于推广、实用性强、成本低，苗种规格大，可有效规避夏季高温期致使苗种死亡的风险。
附图说明
图1为池塘沉水式中间培育网框图；
图2为日本海神蛤秋季繁育幼虫壳长及壳高生长曲线；
图3为日本海神蛤秋季苗种繁育稚贝壳长及壳高生长曲线；
图4为日本海神蛤受精率(FR)、孵化率(HR)、幼虫存活率(LS)、变态率秋季繁育(MR)及稚贝存活率(JS)柱状图。
具体实施方式
本发明提供了一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，包括以下步骤：(1)每年阳历10月份在黄渤海北部采捕日本海神蛤作为亲贝，经阴干流水刺激后产卵、排精，经授精后得受精卵；
(2)所述受精卵经36～40h孵化成D形幼虫，将所述D形幼虫进行培养，至34～60日龄时得足面盘幼虫；所述培养时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)；
(3)将所述足面盘幼虫在水泥池底培育成稚贝，所述水泥池底培育时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)；
(4)当所述稚贝生长为壳长5～10mm时，将所述稚贝转移至铺有细砂的具盖网框中，沉于室外池塘底部进行39d中间育成，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤大规格苗种。
本发明每年阳历10月份在黄渤海北部采捕日本海神蛤作为亲贝，经阴干流水刺激后产卵、排精，经授精后得受精卵。本发明优选壳长10cm以上壳形规整、无损伤、水管收缩有力的日本海神蛤作为亲贝，将亲贝在水泥池中进行4～10d的室内暂养。本发明在所述室内暂养期间，自然水温为18～20℃，盐度28～33，持续充气，溶解氧保持4mg/L以上。本发明在进行所述室内暂养时，所述亲本的密度优选为1个/m3。本发明所述亲本的室内暂养时，优选还包括每日投饵3～4次，日投饵量为8×103cells/mL～1×104cells/mL；所述投饵的饵料优选为使用生物膜抽滤法浓缩的硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)，且经过所述浓缩后的缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)的细胞数量优选为10亿cells//mL。本发明在所述亲贝的室内暂养期内每天全量换水一次。
本发明对经过室内暂养的亲本进行阴干流水刺激，促进亲贝产卵、排精，并进行授精。本发明对所述阴干流水刺激以及授精的方法并没有特殊限定，利用本领域的常规方法即可。
得受精卵后，本发明将所述受精卵经36～40h孵化成D形幼虫，将所述D形幼虫进行培养，至34～60日龄时得足面盘幼虫；所述培养时投喂使用生物膜抽滤法浓缩的硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和小球藻(Chlorella sp)。本发明所述受精卵的孵化密度优选为30～50个/mL。本发明所述孵化时的水温优选为14～18.2℃，pH值优选为7.5～8.0，盐度优选为28～33。本发明在所述孵化过程中持续充气，使水中溶氧量优选达到4mg/L。
本发明对孵化后得到的D形幼虫进行培养，至34～60日龄时得足面盘幼虫。本发明优选在水泥池中进行培养，所述培养时的水温优选为13.2～17.4℃，pH值优选为7.5～8.0，盐度优选为28～33。本发明在所述培养时优选每日投饵3～4次，日投喂量优选为500～1500cells/mL。本发明所述培养的密度优选为3～4个/mL。本发明在培养阶段，室内自然水温由17.4℃逐渐降为13.2℃，幼虫的壳长日生长为5～8μm，壳高日生长为2～4μm，在20～29日龄幼虫生长较为缓慢，不同个体生长速度差异较大，幼虫存活率为(70.6±5.46)％。本发明进行投饵时，其中所述浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)的质量比优选为2:1；且所述浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschiaclosterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)细胞数量优选分别为10亿cells//mL、40亿cells//mL。本发明在进行所述投饵时，优选每天依水中残余饵料情况适当增减，每天半量换水一次。
得足面盘幼虫后，本发明将所述足面盘幼虫水泥池底培育成稚贝，所述水泥池底培育时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)。在本发明中，足面盘幼虫直接附着在水泥池底部，水深1.5～2m不铺设沙泥等附着基。本发明所述水泥池底培育的水温优选为12.8～14℃，培育密度由3～5万粒/m2逐渐疏散至1万粒/m2。本发明在所述稚贝的培育阶段，饵料为浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorellasp)，且投喂的细胞数量比为2:1，每日投饵3～4次，投喂量增加至1000～3000cells/mL。本发明利用水泥池底培育稚贝，64日龄发育至单水管稚贝，97日龄发育至双水管稚贝。
得稚贝后，本发明当所述稚贝生长为壳长5～10mm时，将所述稚贝转移至铺有细砂的具盖网框中，沉于室外池塘底部进行39d中间育成，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤大规格苗种。本发明所述具盖网框的长优选为48.5cm，宽优选为36cm，高优选为15cm；每个所述具盖网框中放入2000个所述稚贝。本发明所述网框的四周优选留有直径为5mm的网眼以增加透水性，网框上加盖以防除敌害。本发明每个所述具盖网框内的细砂铺设厚度优选为3～5cm，保证稚贝可以正常潜沙，且减小稚贝之间互相摩擦，挤压。本发明所述室外池塘相对海区环境稳定，饵料充足，在池塘底部进行中间育成，让日本海神蛤稚贝生长到2～3cm的大规格苗种后进入海区环境，可以提高苗种海区底播的成活率。
下面结合实施例对本发明提供的一种日本海神蛤苗种室内人工繁育方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1、亲贝暂养、催产及孵化
于2019年10月上旬，选择壳长10cm以上壳形规整、无损伤、水管收缩有力的日本海神蛤作为亲贝，将亲贝由朝鲜罗津市运往大连石城岛育苗场，在30m3水泥池中进行暂养。亲贝培育期间，室内自然水温为18～20℃，盐度28～33，密度1个/m3，持续充气保持水中溶解氧为4mg/L以上。饵料为浓缩硅藻小新月菱形藻Nitzschia closterium，每日投饵3～4次，日投饵量为8×103cells/mL～1×104cells/mL，投饵次数和投饵量依每日观察幼虫摄食情况而定。每天全量换水一次。
使用显微镜观察到10月中旬日本海神蛤性腺已发育至成熟期，经4～10天室内暂养，亲贝自然产卵，亲贝排精产卵持续2h～6h。受精卵孵化密度为30～50个/mL，室内自然水温为17～18℃，盐度28～33，持续充气保持水中溶解氧为4mg/L以上。
2、幼虫培育
受精卵经36～40h孵化为D形幼虫，在30m3水泥池中进行幼虫培育。室内自然培育水温由17.4℃逐步降温至13.2℃，pH为7.5～8.0，盐度为38～33。饵料为浓缩硅藻小新月菱形藻Nitzschia closterium和浓缩小球藻Chlorella sp，每次投喂的浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)投喂比例为2:1，浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)细胞数量分别为1亿cells//mL和2亿cells//mL。幼虫阶段，每日投饵3～4次，投喂量为500～1500cells/mL。在幼虫培育阶段幼虫壳长及壳高生长曲线如图2所示，室内自然水温由17.4℃逐渐降为13.2℃，幼虫的壳长日生长为5～8μm，壳高日生长为2～4μm，在20～29日龄幼虫生长较为缓慢，不同个体生长速度差异较大，幼虫存活率为(70.6±5.46)％(图4)。
3、附着变态
D形幼虫经过32日培育逐渐出足发育为足面盘幼虫，并逐渐附着变态，变态率为(59.2±3.35)％。足面盘幼虫直接附着在水泥池底部，不铺设沙泥等附着基。稚贝阶段，饵料中浓缩硅藻小新月菱形藻Nitzschia closterium和浓缩小球藻(Chlorella sp)的细胞数量比为2:1，每日投饵3～4次，投喂量增加至1000～3000cells/mL。
4、稚贝培育
日本海神蛤稚贝前期密度为3～5万粒/m2，随着稚贝的生长将稚贝密度逐渐疏散为1万粒/m2。日本海神蛤稚贝室内培育水温为12.8～14.0℃，稚贝生长曲线如图3所示，壳长日生长为18～55μm，壳高日生长为9～31μm，64日龄后发育为单水管稚贝，平均壳长×壳高为(581.70±83.35)μm×(466.00±54.76)μm。97日龄发育至双水管稚贝，平均壳长×壳高为(1286.50±137.45)μm×(997.75±84.06)μm。经过148日的培育，日本海神蛤平均壳长×壳高可达到(2879.46±474.41)μm×(2016.49±323.50)μm，稚贝存活率为(70.4±2.30)％(如图3和图4)。经过194日的室内培育，日本海神蛤平均壳长达到5.85mm，本次日本海神蛤秋季苗种繁育试验共150水体，出苗量为100万粒，单位水体苗种产量为6666粒。
5、沉降式网框池塘中间育成
当日本海神蛤稚贝生长为壳长5～10mm时，将稚贝出库转移至铺有细砂的网框(图1)中，网框长、宽、高的规格分别为48.5cm×36cm×15cm，网框四周留有直径为5mm的网眼以增加透水性，网框上加盖以防除敌害。每个网框中放入2000个日本海神蛤稚贝。将网框沉降至池塘底部，进行中间育成。经39日室外池塘中间培育，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤大规格苗种。
本发明提供了一种日本海神蛤苗种室内人工繁育方法，经过194日的室内培育，可获得平均壳长规格为5.85mm的苗种达100万粒，经39日室外池塘中间培育，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤大规格苗种。
通过比对5月和10月的日本海神蛤人工繁殖发现日本海神蛤在我国北方海域规模化苗种繁育的关键因素是安全度夏。在我国北方海域8月份自然海水水温达到22℃以上时，日本海神蛤稚贝出现活力下降，存活率逐渐降低等现象，因此应在夏季高温期来临前完成日本海神蛤苗种规模化生产，将培育的大规格苗种在适宜海区进行底播养殖。本发明根据日本海神蛤繁殖生物学特点，发现秋季10月上旬进行日本海神蛤规模化苗种繁育可培育出适于底播养殖的大规格苗种，苗种培育成本较低。在我国北方海域日本海神蛤苗种于5月下旬培育至8月高温季节来临前，平均壳长可生长至(4.94±0.93)mm，此时苗种无法在室内车间或室外池塘安全度夏，这种规格苗种在8月份进行海区底播养殖存活率低，增加了养殖风险。另外从苗种繁育成本分析，由于我国北方5月下旬大洋海水温较低(10℃～13℃)，需使用升温海水(18.6℃～19℃)进行日本海神蛤苗种培育，随着自然水温逐渐升高可改为常温海水，因此在5月进行日本海神蛤规模化苗种繁育成本也较高。相比之下，在我国北方海域10月上旬自然水温约为18～20℃，正是日本海神蛤繁殖的适宜水温，苗种经过常温培育后，可在北方室内车间低温环境越冬，秋季人工苗种培育时间比春季延长5个月，虽然在10月自然水温培育比5月利用升温海水培育日本海神蛤幼虫生长发育缓慢(表1)，但能够节约人工培育成本。在每年10月份采集日本海神蛤亲贝，通过投喂人工浓缩饵料培育幼虫，苗种壳长规格比春季人工培育的苗种提高70.0％以上，室内苗种成活率比春季提高50.0％以上(图4)，可有效提高底播养殖的成活率。
表1日本海神蛤春季及秋季繁育生长发育时间及规格比较(样本数，n＝30)
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.一种日本海神蛤秋季大规格苗种人工培育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)每年阳历10月份在黄渤海北部采捕日本海神蛤作为亲贝，经阴干流水刺激后产卵、排精，经授精后得受精卵；
(2)所述受精卵经36～40h孵化成D形幼虫，对所述D形幼虫进行培养，至34～60日龄时得足面盘幼虫；所述培养时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)；所述孵化和培养的水温均为由17.4℃逐渐降为13.2℃，pH值均为7.5～8.0，盐度均为28～33；
所述培养时每日投饵3～4次，日投喂量为500～1500cells/mL，每次投喂时浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)和浓缩小球藻(Chlorella sp)投喂质量比为2:1；
所述浓缩硅藻小新月菱形藻和浓缩小球藻细胞数量分别为10亿cells//mL和40亿cells/mL；
所述培养的密度为3～4个/mL；
(3)将所述足面盘幼虫在水泥池底培育成稚贝，所述水泥池底培育时投喂浓缩硅藻小新月菱形藻(Nitzschia closterium)；所述水泥池底培育时每日投饵3～4次，日投喂量为1000～3000cells/mL；
所述水泥池底培育的水温为12.8～14℃，培育密度由3～5万粒/m2逐渐疏散至1万粒/m2；
(4)当所述稚贝生长至壳长5～10mm时，将所述稚贝转移至铺有细砂的具盖网框中，沉于室外池塘底部进行39d中间育成，获得平均壳长为1～2cm的日本海神蛤苗种；所述具盖网框的长为48.5cm，宽为36cm，高为15cm；每个所述具盖网框中放入2000个所述稚贝；每个所述具盖网框内的细砂铺设厚度为3～5cm。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)所述阴干流水刺激前，还包括将所述亲贝进行4～10d的室内暂养；
所述室内暂养时的水温为18～20℃，盐度28～33，持续充气保持水中溶解氧为4mg/L以上。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(2)所述受精卵的孵化密度为30～50个/mL。
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