CN111646844A - 一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法 - Google Patents

一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法，属于农业行业的微生物肥料技术领域，该新型复合酵素微生物肥料选用有机物料豆饼、草炭、秸秆粉、糖蜜液，充分混合后添加发酵型酵素菌剂进行初始发酵，发酵过程中在不同的发酵阶段添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾、微量元素及饼粕进行延续发酵，发酵完成后添加护根型酵素微生物菌粉，最后进行挤压造粒、筛分检测，最终得到合格的新型复合酵素微生物肥料。该新型复合酵素微生物肥料具有长效、速效、缓效相结合的特点，可以完全替代常规瓜果蔬菜生产所用的农家肥和化肥，消除烧根、重金属超标、土壤板结、次生盐渍化等风险，提高土壤有机质及活性菌数量，达到养根护根，促进作物生长，提升果实口感品质的效果。

Description

一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法
技术领域
本发明属于农业行业的微生物肥料技术领域，具体地说是一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法。
背景技术
随着高效经济作物的快速发展，农业面源污染越来越严重，过量盲目施用化肥是农业面源污染加重的主要原因之一。大量盲目使用化肥造成土壤严重酸化、板结、次生盐渍化，使土壤环境质量下降；化肥地表径流进入江河湖泊或随水下渗进入地下，造成水环境污染；过量化肥元素进入果蔬，降低了农产品品质，影响人类健康。使用复合微生物肥料是解决以上问题的有效措施。复合微生物肥料由复合菌及有机无机复合营养物质共同构成，可有效提高营养物质的利用率，提高作物品质，改良土壤，保护环境。目前市场上已有一些复合微生物肥料，但活菌菌量低、种类少、繁殖代谢速度慢、活性差，营养物质含量低，没有从根本上起到降低化肥用量，改良土壤，保护环境的作用。为解决上述技术问题，有机肥料生产企业也进行了一些技术研究和产品开发，但这些技术及产品存在下面三个问题：
一是有机、无机养分含量低，在不施用化肥的情况下无法满足作物生长需要。
二是产品加工工艺不成熟，在加工过程中有益微生物活性得不到保证，易出现杂菌侵入，产品品质较差。
三是由于产品中含有无机盐，微生物在产品内存活时间短，有益微生物数量会随时间增加逐渐减少，导致微生物施入土壤后难以起到促进作物生长、提高产品质量及改良土壤、培肥地力作用。
发明内容
本发明的技术任务是针对现有复合微生物肥料存在的不足，提供了一种新型复合酵素微生物肥料及其制备方法。本发明可改良土壤，提高土壤有机质及活性菌含量，促进土壤团粒结构形成，增强土壤的保水保肥及供水供肥性能，促进作物根系生长发育，并直接为作物生长提供小分子营养物质，提高大分子营养物质利用率，提高作物产量，改善作物品质。本发明适用于所有农作物，尤其在水果、蔬菜等高效经济作物上增产增收效果更佳。本发明可做基肥或追肥，是一种生产优质有机食品的生态环保肥料。
本发明的一种新型复合酵素微生物肥料，选用有机物料豆饼、草炭、秸秆粉、糖蜜液，添加发酵型酵素菌进行初始发酵，并在不同的发酵阶段合理添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾及微量元素进行延续发酵，降低元素间的拮抗作用，延后发酵时间，产生有益代谢产物及分泌物，增强肥效，创新点有以下几个方面：
1、选用有机物料进行合理配比，分阶段添加发酵型酵素微生物菌剂和护根型酵素微生物菌剂，保证肥料中的有益菌质量和数量。
2、给定了复合酵素微生物肥料生产过程中添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾及微量元素的数量、比例、时间；
3、给定了新型复合酵素微生物肥料的发酵条件和发酵方法；
4、给出了护根型酵素微生物菌剂及代谢物、分泌物的制备方法及添加工艺。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
1、本发明提供一种新型复合酵素微生物肥料，该肥料选用有机物料豆饼、草炭、秸秆粉、糖蜜液，添加发酵型酵素菌进行初始发酵，并在不同的发酵阶段合理添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾及微量元素进行延续发酵，降低元素间的拮抗作用，延后发酵时间，产生有益代谢产物及分泌物，增强肥效。
优选地，各组分按重量份配比为：豆饼3-4份、糖蜜液1.8-2.8份、秸秆粉2-3份、草炭1-1.5份，尿素0.5-1.5份，发酵型酵素菌0.1-0.2份。
2、本发明另提供一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，制备步骤如下：
1)豆饼3-4份、糖蜜液1.8-2.8份、秸秆粉2-3份、草炭1-1.5份充分混合后，添加0.5-1.5份尿素，使物料中的碳氮比控制在25：1-35：1之间，之后加水，使得混合物料水分控制在45％-65％，最后添加0.1-0.2份的发酵型酵素菌粉剂并充分混合，用开放式好氧发酵处理混合物料；
2)好氧发酵处理3-5d后，堆内温度达到45℃以上，对物料进行第一次翻堆；
3)好氧发酵处理14d后，堆内温度达到60℃以上，在物料中均匀加入1)中干物料3％-5％的磷酸二铵，并对物料进行第二次翻堆；
4)好氧发酵处理20d后，堆内温度达到65℃-70℃，在物料中添加1)中干物料20％-25％的饼粕，并对物料进行第三次翻堆；
5)好氧发酵处理30d后，堆内温度低至50℃以内，加入1)中干物料1％-3％的微量元素和8％-10％的硫酸钾，充分混合后并对物料进行第四次翻堆；
6)好氧发酵处理45d后，堆内温度降低至30℃左右且趋于稳定，颜色呈褐色，终止发酵，物料发酵完成；
7)控制物料水分含量＜20％，通过无筛网粉碎机进行粉碎处理；
8)采用干粉喷雾剂按照7)制备好的物料的5‰-10‰的比例均匀喷洒菌含量1.0*109cfu/g护根型酵素微生物菌粉，并充分混合；
9)将物料送入造粒机，挤压造粒后进行筛分，得到半成品复合微生物肥料；
10)对肥料进行检测，N+P205+K20≥20％，有机质为30％，活性有益菌≥1.0*108cfu/g，检测合格的肥料进行分装、入库。
可选地，发酵型酵素微生物菌剂由细菌类、丝状真菌类、酵母菌类、乳酸菌类四大类组成，其中细菌类为地衣芽孢杆菌，酵母菌类为酿酒酵母菌，乳酸菌类为乳酸杆菌，真菌类为木霉菌，取各自种子菌液按照体积比为7：2：7：2进行均匀混合，并接种到综合培养基中进行发酵培养。
可选地，发酵型酵素微生物菌剂具体培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞5.0*108Cfu/ml，纤维酶活＞30U/ml，蛋白酶活＞15U/ml，pH稳定在4.5-5.5，产生香甜窖香味，可视为发酵结束；将发酵好的菌液进行离心浓缩，喷雾干燥，发酵型酵素微生物菌剂制备完成。
可选地，所述护根型酵素微生物菌剂由淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌6大有益菌及其代谢产物组成，其中代谢产物包含吲哚乙酸、细胞分裂素等植物生长调节物质，嘧肽霉素等多肽类物质，氨基酸等小分子营养类物质。该生物制剂合理搭配好氧菌与厌氧菌，施入土壤后有益菌及其代谢产物共同调动和调节作物自身正常生理生化反应，激发作物自身免疫系统，促进作物生长，提高作物抗病虫害能力，改善作物品质。
可选地，所述该护根型酵素微生物菌剂的制备包括微生物活化扩繁、混合发酵和喷雾干燥制粉；
1)活化扩繁：将斜面保存的淡紫紫孢霉挑2环接种到灭菌的PDA培养基上进行活化扩繁，培养条件：温度28℃，转速160r/min、培养时间72h。将冻干管保存的巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌按1％的接种量接种到LB摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度37℃，转速为180r/min，培养时间为24h。将冻干管保存的酿酒酵母接种到YEPD摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度28℃，转速为150r/min，培养时间为48h。将冻干管保存的植物乳杆菌接种到MRS摇瓶培养基中进行活化并扩繁，培养条件为：温度35℃，静置培养时间为15h-24h。将斜面保存的链霉菌接种到高氏一号培养基进行活化扩繁，温度28℃，转速为180r/min，培养时间为24h-36h。
2)混合发酵：将淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌。酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌制备的种子液按照3：4：4：2：7：2的体积比均匀混合后，接种到培养基中进行发酵培养，培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d-10d，检测有效活菌总数＞1.0*109Cfu/ml，pH稳定在4.5-5.5，发酵结束，护根型酵素微生物菌剂制备完成。
可选地，所述发酵型酵素微生物的综合培养基、复合菌发酵的综合培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
本发明的一种新型复合酵素微生物肥料及制备方法与现有技术相比所产生的有益效果是：
1、本发明选用有机物料按合理比例进行发酵，并在不同的发酵阶段添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾及微量元素，提高了有机物料的发酵效率，确保了无机元素的有效性。
2、本发明中进行了三次翻堆，为发酵的物料供给氧气，为好氧有益菌的增殖创造条件，促使物料发酵均匀，提高酵素菌的菌种质量和数量。
3、本发明在合理条件下，二次添加有机物料饼粕，延长后续发酵时间，获得了具有促生功能的代谢物、分泌物。
4、本发明根据生物菌的功能提供了发酵型酵素微生物菌剂和护根型酵素微生物菌剂两种不同功能的生物菌剂，发酵型酵素微生物菌剂能加快有机物料发酵过程，提高发酵效果，护根型酵素微生物菌剂具有养根护根、固氮、解磷、解钾及促生功能。
5、本发明制备的肥料可以完全替代常规瓜果蔬菜生产所用的农家肥和化肥，消除烧根、重金属超标、土壤板结、次生盐渍化等风险，提高土壤有机质及活性菌数量，疏松土壤，提高土壤团粒结构，增强土壤保水保肥及供水供肥性能。
6、本发明既有有机肥的缓效、长效和改土作用，又有无机肥的速效作用，做到了长效、速效配合，可有效减少施肥次数。
7、本发明解决了使用化肥造成的土壤结构破坏及环境污染等问题。
附图说明
附图1为常规用肥应用到设施番茄上的果实产品图；
附图2为将具体实施例1应用到设施番茄的果实产品图；
附图3为常规用肥应用到生姜上的生长图；
附图4为将具体实施例2应用到生姜上的生长图；
附图5为常规用肥应用到10年树龄苹果树上的根系生长图；
附图6为将具体实施例3应用到10年树龄苹果树上的根系生长图。
具体实施方式
下面将结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
目前，潍坊市设施蔬菜生产用肥主要是大量使用农家肥及配合使用三元复合肥，由于连续多年重茬种植，设施生产三年后土壤会出现板结、次生盐渍化等土壤退化现象，导致蔬菜产量和质量都会下降。该发明提供了一种新型复合酵素微生物肥料及其制备方法，有益于解决土壤板结、土壤次生盐渍化等土壤退化问题，消除连续多年重茬种植后产生的蔬菜产品的产量和质量下降等问题，生产出保持产品原本风味的农产品。
具体实施例1：
新型复合酵素微生物肥料的制备方法如下：
(1)豆饼4份、糖蜜液2.8份、秸秆粉2份、草炭1份充分混合后，添加0.5份尿素，使物料中的碳氮比控制在25：1-35：1之间，之后加水，使得混合物料水分控制在45％-65％，最后添加0.1份的发酵酵素菌菌粉并充分混合，用开放式好氧发酵处理混合物料(若条件允许可在料堆内增加瀑气装置)；
(2)好氧发酵处理3-5d后，堆内温度达到45℃以上，对物料进行第一次翻堆；
(3)好氧发酵处理14d后，堆内温度达到60℃以上，在物料中均匀加入1)中干物料3％的磷酸二铵，并对物料进行第二次翻堆；
(4)好氧发酵处理20d后，堆内温度达到65℃-70℃，在物料中添加1)中干物料20％的饼粕，并对物料进行第三次翻堆；
(5)好氧发酵处理30d后，堆内温度低至50℃以内，加入1)中干物料1％的微量元素和10％的硫酸钾，充分混合后并对物料进行第四次翻堆；
(6)好氧发酵处理45d后，堆内温度降低至30℃左右且趋于稳定，颜色呈褐色，终止发酵，物料发酵完成；
(7)物料中水分含量<20％，通过无筛网粉碎机进行粉碎处理；
(8)采用干粉喷雾剂按照7)制备好的物料的5‰的比例均匀喷洒菌含量1.0*109cfu/g护根型酵素菌粉剂，并充分混合；
(9)将物料送入造粒机，挤压造粒后进行筛分，得到半成品复合微生物肥料。
(10)对肥料进行检测，N+P205+K20≥20％，有机质为30％，活性有益菌≥1.0*108cfu/g，检测合格的肥料进行分装、入库。
发酵型酵素生物菌剂的制备方法：
发酵型酵素微生物菌剂由细菌类、丝状真菌类、酵母菌类、乳酸菌类四大类组成，其中细菌类为地衣芽孢杆菌，酵母菌类为酿酒酵母菌，乳酸菌类为乳酸杆菌，真菌类为木霉菌，取各自种子菌液按照体积比为7：2：7：2进行均匀混合，并接种到综合培养基中进行发酵培养，具体培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞5.0*108Cfu/ml，纤维酶活＞30U/ml，蛋白酶活＞15U/ml，pH稳定在4.5-5.5，产生香甜窖香味，可视为发酵结束。将发酵好的菌液进行离心浓缩，喷雾干燥，发酵型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵的综合培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
护根型酵素生物菌剂的制备方法：
护根型酵素微生物菌剂由淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌6大有益菌及其代谢产物组成，其中代谢产物包含吲哚乙酸、细胞分裂素等植物生长调节物质，嘧肽霉素等多肽类物质，氨基酸等小分子营养类物质。该生物制剂合理搭配好氧菌与厌氧菌，施入土壤后有益菌及其代谢产物共同调动和调节作物自身正常生理生化反应，激发作物自身免疫系统，促进作物生长，提高作物抗病虫害能力，改善作物品质。
该护根型酵素微生物菌剂的制备包括微生物活化扩繁、混合发酵和喷雾干燥制粉。
1)活化扩繁：将斜面保存的淡紫紫孢霉挑2环接种到灭菌的PDA培养基上进行活化扩繁，培养条件：温度28℃，转速160r/min、培养时间72h。将冻干管保存的巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌按1％的接种量接种到LB摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度37℃，转速为180r/min，培养时间为24h。将冻干管保存的酿酒酵母接种到YEPD摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度28℃，转速为150r/min，培养时间为48h。将冻干管保存的植物乳杆菌接种到MRS摇瓶培养基中进行活化并扩繁，培养条件为：温度35℃，静置培养时间为15h。将斜面保存的链霉菌接种到高氏一号培养基进行活化扩繁，温度28℃，转速为180r/min，培养时间为36h。
2)混合发酵：将淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌。酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌制备的种子液按照3：4：4：2：7：2的体积比均匀混合后，接种到培养基中进行发酵培养，培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞1.0*109Cfu/g，pH稳定在4.5-5.5，发酵结束，护根型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
3)干燥制粉：将上述护根型酵素微生物菌剂进行干燥制成粉剂，生产产品的有益菌总含量大于1.0*109cfu/g。
结合附图1、2，将具体实施例1应用到设施番茄上，每亩基施400kg+后期追施100kg，与常规用肥(鸡粪2000kg+磷酸二铵50kg)对比，每亩增产1000kg，增产率达8％，平均节间长度缩短0.1cm，茎粗增加0.2mm，果实可溶性固形物含量增加0.6Brix，降低了设施番茄绿背果、脐腐果、畸形果、裂果、空心果及口味下降等产品质量退化现象，提高了产品质量品质。
具体实施例2
复合酵素微生物肥料的制备方法如下：
(1)豆饼3份、糖蜜液1.8份、秸秆粉3份、草炭1.2份充分混合后，添加1份尿素，使物料中的碳氮比控制在25：1-35：1之间，之后加水，使得混合物料水分控制在45％-65％，最后添加0.2份的发酵酵素菌粉剂并充分混合，用开放式好氧发酵处理混合物料(若条件允许可在料堆内增加瀑气装置)；
(2)好氧发酵处理3-5d后，堆内温度达到45℃以上，对物料进行第一次翻堆；
(3)好氧发酵处理14d后，堆内温度达到60℃以上，在物料中均匀加入1)中干物料5％的磷酸二铵，并对物料进行第二次翻堆；
(4)好氧发酵处理20d后，堆内温度达到65℃-70℃，在物料中添加1)中干物料25％的饼粕，并对物料进行第三次翻堆；
(5)好氧发酵处理30d后，堆内温度低至50℃以内，加入1)中干物料3％的微量元素和8％的硫酸钾，充分混合后并对物料进行第四次翻堆；
(6)好氧发酵处理45d后，堆内温度降低至30℃左右且趋于稳定，颜色呈褐色，终止发酵，物料发酵完成；
(7)物料中水分含量<20％，通过无筛网粉碎机进行粉碎处理；
(8)采用干粉喷雾剂按照7)制备好的物料的10‰的比例均匀喷洒菌含量1.0*109cfu/g护根型酵素菌粉剂，并充分混合；
(9)将物料送入造粒机，挤压造粒后进行筛分，得到半成品复合微生物肥料。
(10)对肥料进行检测，N+P205+K2O≥20％，有机质为30％，活性有益菌为≥1.0*108cfu/g，检测合格的肥料进行分装、入库。
发酵型酵素生物菌剂的制备方法：
发酵型酵素微生物菌剂由细菌类、丝状真菌类、酵母菌类、乳酸菌类四大类组成，其中细菌类为地衣芽孢杆菌，酵母菌类为酿酒酵母菌，乳酸菌类为乳酸杆菌，真菌类为木霉菌，取各自种子菌液按照体积比为7：2：7：2进行均匀混合，并接种到综合培养基中进行发酵培养，具体培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞5.0*108Cfu/ml，纤维酶活＞30U/ml，蛋白酶活＞15U/ml，pH稳定在4.5-5.5，产生香甜窖香味，可视为发酵结束。将发酵好的菌液进行离心浓缩，喷雾干燥，发酵型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵的综合培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
护根型酵素生物菌剂的制备方法：
护根型酵素微生物菌剂由淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌6大有益菌及其代谢产物组成，其中代谢产物包含吲哚乙酸、细胞分裂素等植物生长调节物质，嘧肽霉素等多肽类物质，氨基酸等小分子营养类物质。该生物制剂合理搭配好氧菌与厌氧菌，施入土壤后有益菌及其代谢产物共同调动和调节作物自身正常生理生化反应，激发作物自身免疫系统，促进作物生长，提高作物抗病虫害能力，改善作物品质。
该护根型酵素微生物菌剂的制备包括微生物活化扩繁、混合发酵和喷雾干燥制粉。
1)活化扩繁：将斜面保存的淡紫紫孢霉挑2环接种到灭菌的PDA培养基上进行活化扩繁，培养条件：温度28℃，转速160r/min、培养时间72h。将冻干管保存的巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌按1％的接种量接种到LB摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度37℃，转速为180r/min，培养时间为24h。将冻干管保存的酿酒酵母接种到YEPD摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度28℃，转速为150r/min，培养时间为48h。将冻干管保存的植物乳杆菌接种到MRS摇瓶培养基中进行活化并扩繁，培养条件为：温度35℃，静置培养时间为24h。将斜面保存的链霉菌接种到高氏一号培养基进行活化扩繁，温度28℃，转速为180r/min，培养时间为24h。
2)混合发酵：将淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌。酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌制备的种子液按照3：4：4：2：7：2的体积比均匀混合后，接种到培养基中进行发酵培养，培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为10d，检测有效活菌总数＞1.0*109Cfu/g，pH稳定在4.5-5.5，发酵结束，护根型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
3)干燥制粉：将上述护根型酵素微生物菌剂进行干燥制成粉剂，生产产品的有益菌总含量大于1.0*109cfu/g。
结合附图3、4，将具体实施例2应用到生姜上，每亩基施240kg，与常规用肥(18-10-17的专用复合肥360kg)对比，总肥减量33％，每亩增产600kg，增产率达8％。
具体实施例3
复合酵素微生物肥料的制备方法如下：
(1)豆饼3.5份、糖蜜液2份、秸秆粉2份、草炭1.5份充分混合后，添加1.5份尿素，使物料中的碳氮比控制在25：1-35：1之间，之后加水，使得混合物料水分控制在45％-65％，最后添加0.15份的发酵酵素菌粉剂并充分混合，用开放式好氧发酵处理混合物料(若条件允许可在料堆内增加瀑气装置)；
(2)好氧发酵处理3-5d后，堆内温度达到45℃以上，对物料进行第一次翻堆；
(3)好氧发酵处理14d后，堆内温度达到60℃以上，在物料中均匀加入1)中干物料的5％的磷酸二铵，并对物料进行第二次翻堆；
(4)好氧发酵处理20d后，堆内温度达到65℃-70℃，在物料中添加1)中干物料25％的饼粕，并对物料进行第三次翻堆；
(5)好氧发酵处理30d后，堆内温度低至50℃以内，加入1)中干物料3％的微量元素和10％的硫酸钾，充分混合后并对物料进行第四次翻堆；
(6)好氧发酵处理45d后，堆内温度降低至30℃左右且趋于稳定，颜色呈褐色，终止发酵，物料发酵完成；
(7)物料中水分含量<20％，通过无筛网粉碎机进行粉碎处理；
(8)采用干粉喷雾剂按照7)中制备好的物料5‰的比例均匀喷洒菌含量1.0*109cfu/g护根型酵素菌粉剂，并充分混合；
(9)将物料送入造粒机，挤压造粒后进行筛分，得到半成品复合微生物肥料。
(10)对肥料进行检测，N+P205+K2O≥20％，有机质为30％，活性有益菌≥1.0*108cfu/g，检测合格的肥料进行分装、入库。
发酵型酵素生物菌剂的制备方法：
发酵型酵素微生物菌剂由细菌类、丝状真菌类、酵母菌类、乳酸菌类四大类组成，其中细菌类为地衣芽孢杆菌，酵母菌类为酿酒酵母菌，乳酸菌类为乳酸杆菌，真菌类为木霉菌，取各自种子菌液按照体积比为7：2：7：2进行均匀混合，并接种到综合培养基中进行发酵培养，具体培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞5.0*108Cfu/ml，纤维酶活＞30U/ml，蛋白酶活＞15U/ml，pH稳定在4.5-5.5，产生香甜窖香味，可视为发酵结束。将发酵好的菌液进行离心浓缩，喷雾干燥，发酵型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵的综合培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
护根型酵素生物菌剂的制备方法：
护根型酵素微生物菌剂由淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌6大有益菌及其代谢产物组成，其中代谢产物包含吲哚乙酸、细胞分裂素等植物生长调节物质，嘧肽霉素等多肽类物质，氨基酸等小分子营养类物质。该生物制剂合理搭配好氧菌与厌氧菌，施入土壤后有益菌及其代谢产物共同调动和调节作物自身正常生理生化反应，激发作物自身免疫系统，促进作物生长，提高作物抗病虫害能力，改善作物品质。
该护根型酵素微生物菌剂的制备包括微生物活化扩繁、混合发酵和喷雾干燥制粉。
1)活化扩繁：将斜面保存的淡紫紫孢霉挑2环接种到灭菌的PDA培养基上进行活化扩繁，培养条件：温度28℃，转速160r/min、培养时间72h。将冻干管保存的巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌按1％的接种量接种到LB摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度37℃，转速为180r/min，培养时间为24h。将冻干管保存的酿酒酵母接种到YEPD摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度28℃，转速为150r/min，培养时间为48h。将冻干管保存的植物乳杆菌接种到MRS摇瓶培养基中进行活化并扩繁，培养条件为：温度35℃，静置培养时间为15h。将斜面保存的链霉菌接种到高氏一号培养基进行活化扩繁，温度28℃，转速为180r/min，培养时间为24h。
2)混合发酵：将淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌。酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌制备的种子液按照3：4：4：2：7：2的体积比均匀混合后，接种到培养基中进行发酵培养，培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞1.0*109Cfu/g，pH稳定在4.5-5.5，发酵结束，护根型酵素微生物菌剂制备完成。
作为本发明优选复合菌发酵培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
3)干燥制粉：将上述护根型酵素微生物菌剂进行干燥制成粉剂，生产产品的有益菌总含量大于1.0*109cfu/g。
7、应用效果试验：
将本发明中的实施例1中制备的复合酵素微生物肥料应用于潍坊市设施番茄上，按照每亩400kg基施+100kg沟施追施，对比常规施肥，结果显示：①本发明制备的复合酵素微生物肥料完全替代常规施肥方法，不需单独施用农家肥和化学肥料，消除了农家肥和化肥对产品及土壤环境的危害；②施用本发明制备的复合酵素微生物肥料产量较常规生产方法提高8.2％，增产效果极显著；③是大大降低了设施番茄绿背果、脐腐果、畸形果、裂果、空心果及口味下降等产品质量退化现象，提高了产品质量品质，产品达到有机绿色食品标准。
结合附图5、6，将具体实施例3应用到10年树龄苹果树上，秋季基施每亩40kg+常规用肥减量30％，与常规用肥(2000kg/亩有机肥)对比，增产每亩200kg，增产率6％，根系较常规施肥次生根数量增多，长度增长，果实可溶性固形物含量、糖酸比提高，较同类产品分别提高了19.0％、42.9％；维生素C、果胶、磷、铁含量分别达到1.63mg/100g、1.44g/100g、88mg/kg、1.84mg/kg，较同类产品分别分别提高了52.3％、13.4％、44.3％、36.3％，除此之外，有害重金属铅、镉均未检出，砷、铬较同类产品含量分别降低了48.5％、8.3％，农药残留含量均在限量以下，食用安全。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种新型复合酵素微生物肥料，其特征在于，该肥料选用有机物料豆饼、草炭、秸秆粉、糖蜜液，添加发酵型酵素菌进行初始发酵，并在不同的发酵阶段合理添加尿素、磷酸二铵、硫酸钾及微量元素进行延续发酵，降低元素间的拮抗作用，延后发酵时间，产生有益代谢产物及分泌物，增强肥效。
2.根据权利要求1所述的一种新型复合酵素微生物肥料，其特征在于，各组分按重量份配比为：豆饼3-4份、糖蜜液1.8-2.8份、秸秆粉2-3份、草炭1-1.5份，尿素0.5-1.5份，发酵型酵素菌0.1-0.2份。
3.如权利要求1所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，制备步骤如下：
1)豆饼3-4份、糖蜜液1.8-2.8份、秸秆粉2-3份、草炭1-1.5份充分混合后，添加0.5-1.5份尿素，使物料中的碳氮比控制在25：1-35：1之间，之后加水，使得混合物料水分控制在45％-65％，最后添加0.1-0.2份的发酵型酵素菌粉剂并充分混合，用开放式好氧发酵处理混合物料；
2)好氧发酵处理3-5d后，堆内温度达到45℃以上，对物料进行第一次翻堆；
3)好氧发酵处理14d后，堆内温度达到60℃以上，在物料中均匀加入1)中干物料3％-5％的磷酸二铵，并对物料进行第二次翻堆；
4)好氧发酵处理20d后，堆内温度达到65℃-70℃，在物料中添加1)中的干物料20％-25％的饼粕，并对物料进行第三次翻堆；
5)好氧发酵处理30d后，堆内温度低至50℃以内，加入1)中干物料1％-3％的微量元素和8％-10％的硫酸钾，充分混合后并对物料进行第四次翻堆；
6)好氧发酵处理45d后，堆内温度降低至30℃左右且趋于稳定，颜色呈褐色，终止发酵，物料发酵完成；
7)控制物料水分含量＜20％，通过无筛网粉碎机进行粉碎处理；
8)采用干粉喷雾剂按照7)制备好的物料的5‰-10‰的比例均匀喷洒菌含量1.0*109cfu/g护根型酵素微生物菌粉，并充分混合；
9)将物料送入造粒机，挤压造粒后进行筛分，得到半成品复合微生物肥料；
10)对肥料进行检测，N+P205+K2O≥20％，有机质为30％，活性有益菌≥1.0*108cfu/g，检测合格的肥料进行分装、入库。
4.根据权利要求3所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，发酵型酵素微生物菌剂由细菌类、丝状真菌类、酵母菌类、乳酸菌类四大类组成，其中细菌类为地衣芽孢杆菌，酵母菌类为酿酒酵母菌，乳酸菌类为乳酸杆菌，真菌类为木霉菌，取各自种子菌液按照一定配比混合均匀，并接种到综合培养基中进行发酵培养。
5.根据权利要求3所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，发酵型酵素微生物菌剂具体培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d，检测有效活菌总数＞5.0*108Cfu/ml，纤维酶活＞30U/ml，蛋白酶活＞15U/ml，pH稳定在4.5-5.5，产生香甜窖香味，可视为发酵结束；将发酵好的菌液进行离心浓缩，喷雾干燥，发酵型酵素微生物菌剂制备完成。
6.根据权利要求3所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述护根型酵素微生物菌剂由淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌6大有益菌及其代谢产物组成。
7.根据权利要求5所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述该护根型酵素微生物菌剂的制备包括微生物活化扩繁、混合发酵和喷雾干燥制粉；
1)活化扩繁：
将斜面保存的淡紫紫孢霉挑2环接种到灭菌的PDA培养基上进行活化扩繁，培养条件：温度28℃，转速160r/min、培养时间72h；
将冻干管保存的巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌按1％的接种量接种到LB摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度37℃，转速为180r/min，培养时间为24h；
将冻干管保存的酿酒酵母接种到YEPD摇瓶培养基中进行活化扩繁，培养条件为：温度28℃，转速为150r/min，培养时间为48h；
将冻干管保存的植物乳杆菌接种到MRS摇瓶培养基中进行活化并扩繁，培养条件为：温度35℃，静置培养时间为15h-24h；
将斜面保存的链霉菌接种到高氏一号培养基进行活化扩繁，温度28℃，转速为180r/min，培养时间为24h-36h；
2)混合发酵：
将淡紫紫孢霉、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌、链霉菌制备的种子液按照一定配比均匀混合后，接种到培养基中进行发酵培养，培养条件为：温度30℃，转速150r/min，培养时间为7d-10d，检测有效活菌总数＞1.0*109Cfu/ml，pH稳定在4.5-5.5，发酵结束，护根型酵素微生物菌剂制备完成。
8.根据权利要求4或6所述的一种新型复合酵素微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述发酵型酵素微生物的综合培养基、复合菌发酵的综合培养基，培养基成份及配比为糖蜜0.008％、蜂蜜0.2％、抗坏血酸0.1％、硫酸铵0.25％、硫酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.02％、酵母膏0.1％，其余为水。
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