CN111418752A - 钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，包括：步骤一、取果蔬物料进行第一次超高压处理；步骤二、将果蔬物料进行超高压均质处理：室温、压力值为100‑400MPa和进口温度为35‑55℃下，均质次数1‑3次；步骤三、加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，进行第二次超高压处理：室温下，以压力150‑600MPa，保压时间为10‑30min。本发明可有效地钝化果汁中PPO的活性，sPPO的活性抑制率为98％，mPPO的活性抑制率为95％。与传统热处理相比，本发明不仅有着良好的钝化效果，在保持果汁风味的同时，超高压均质技术还有利于果汁感官品质提升。
Description
技术领域
本发明属于食品加工领域，涉及一种同时钝化鲜榨果汁中溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法。
背景技术
NFC果汁(Not from concentrate，NFC)口感、风味和营养品质接近新鲜水果，符合当前人们对营养健康的新要求，也是促进果品深加工产业发展的重要产品。然而，NFC果汁加工及贮藏过程中，易发生非酶和酶促褐变，导致产品色泽、风味、营养等品质的损失。
多酚氧化酶(Polyphenol oxidase，PPO)存在于大多数植物中，是引起果汁酶促褐变的主要因素。PPO在果蔬中普遍存在游离态多酚氧化酶(sPPO)和膜结合态多酚氧化酶(mPPO)两种形态。关于酶促褐变的机理和假说有多种，目前国内外比较认同的是酚酶区域分布假说。即在植物组织细胞内sPPO是以游离态存在与细胞质中，mPPO束缚在细胞膜上，酚类底物则在液泡中；破碎、高温等胁迫条件会破坏膜系统，打破膜和底物的区域化分布，使酶和底物相互接触，发生氧化反应，引起果蔬褐变。同一种化学抑制剂对sPPO和mPPO的抑制效果也不同。
超高压(ultra hydrostatic pressure，UHP)，是将食品、生物制品等物料经过100MPa及以上的压力处理一定时间，使物料达到杀菌和内源酶钝化效果的非热加工技术，与传统的热加工方法相比更能保持食品原有的营养品质和风味。超高压技术用于处理果蔬中的PPO研究得较多，对苹果、梨、香蕉、马铃薯等果蔬中的PPO均有涉及。经过超高压技术处理过的不同果蔬中的PPO的活性变化也是不同的，在相同处理条件下的果蔬PPO活性有可能被钝化也有可能出现被激活的结果。如何降低鲜榨果汁中sPPO和mPPO是本领域一直在探索的技术问题。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种利用超高压、超高压均质技术联合化学抑制剂钝化鲜榨果汁中溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法。
为此，本发明提供的技术方案为：
钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，包括如下步骤：
步骤一、取果蔬物料进行第一次超高压处理；
步骤二、将经过所述第一次超高压处理后的果蔬物料进行超高压均质处理，所述超高压均质处理的方法为：室温、压力值为100-400MPa和进口温度为35-55℃，均质次数1-3次；
步骤三、向经过超高压均质后的果蔬汁内加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，进行第二次超高压处理，所述第二次超高压处理的方法：室温下，以压力150-6000MPa，保压时间为10-30min。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，第一次超高压处理钝化sPPO的方法为：室温下，压力值为150-550MPa，保压时间为10-20min。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，步骤三中，所述柠檬酸溶液或酒石酸溶液的浓度为0.1-10mM；加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，静置1-5min后再进行所述第二次超高压处理。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，步骤一中，先使用浓度为0.1-10mM的抗坏血酸水溶液，将果蔬物料浸泡若干分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，在所述步骤一之后，还包括：于0-4℃下，对果蔬物料进行打浆处理，添加食用水，液料比为1:2，打浆、过滤后将果蔬汁装入无菌瓶中，之后进入步骤二。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，对果蔬物料进行打浆处理后，添加藤茶水，所述腾茶水的制备方法为：取来凤藤茶，加入沸水中煮沸1-2分钟，来凤藤茶与沸水的质量比为3-5:100。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，步骤一中，先使用蓝莓叶水浸泡果蔬物料10-15分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理，所述蓝莓叶水的制备方法为：将蓝莓叶粉碎为50目以下颗粒后，按照质量比1:10加入水，121℃煮沸20分钟冷却后得到所述蓝莓叶水。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，在所述步骤一之前，还包括：
原料选择：选择成熟的新鲜果蔬品，无病虫害、果皮完整无机械损伤；
原料预处理：把上述果蔬洗净、切分成长8-10cm的块状。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，在步骤三之后，还包括：将经过所述第二次超高压处理后的果蔬汁装入无菌瓶并于0-4℃储存。
优选的是，所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法中，所述果蔬物料为桃、苹果或梨中的任意一种或几种。
本发明至少包括以下有益效果：
本发明所提供的利用超高压、超高压均质技术联合化学抑制剂钝化桃汁中溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，针对sPPO和mPPO的特点利用超高压技术和化学抑制剂先钝化sPPO，然后使用超高压均质技术促进mPPO释放并初步钝化mPPO，然后再利用超高压技术联合化学抑制剂钝化mPPO。在不经过热处理的基础上，有效的钝化了sPPO和mPPO的活性，保持了果汁原有的营养品质和风味，符合消费者健康营养的新需求。
本发明可有效地钝化果汁中PPO的活性，sPPO的活性抑制率为98％，mPPO的活性抑制率为95％。与传统热处理相比，本发明不仅有着良好的钝化效果，在保持果汁风味的同时，超高压均质技术还有利于果汁感官品质提升。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
本发明提供一种钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，包括如下步骤：
步骤一、取果蔬物料进行第一次超高压处理；
步骤二、将经过所述第一次超高压处理后的果蔬物料进行超高压均质处理，所述超高压均质处理的方法为：室温、压力值为100-400MPa和进口温度为35-55℃，均质次数1-3次；
步骤三、向经过超高压均质后的果蔬汁内加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，进行第二次超高压处理，所述第二次超高压处理的方法：室温下，以压力150-600MPa，保压时间为10-30min。
超高压均质(Ultra-High Pressure Homogenization，UHPH)，是采用60MPa以上的压力进行均质的一种非热加工技术，特别适合流体食品的连续加工。流体在处理过程中会获得高压、高速碰撞，产生压力梯度、剪切力和空穴效应等，可以增加食品的稳定性，达到均质、乳化、钝酶、杀菌以及改善食品的外观的效果。UHPH对细胞起到破坏作用，因此可以用于细胞内物质的提取。
本发明利用超高压、超高压均质技术联合化学抑制剂钝化桃汁中溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，针对sPPO和mPPO的特点利用超高压技术和化学抑制剂先钝化sPPO，然后使用超高压均质技术促进mPPO释放并初步钝化mPPO，然后再利用超高压技术联合化学抑制剂钝化mPPO。在不经过热处理的基础上，有效的钝化了sPPO和mPPO的活性，保持了果汁原有的营养品质和风味，符合消费者健康营养的新需求。
在上述方案中，作为优选，第一次超高压处理钝化sPPO的方法为：室温下，压力值为150-550MPa，保压时间为10-20min。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，步骤三中，所述柠檬酸溶液或酒石酸溶液的浓度为0.1-10mM；加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，静置1-5min后再进行所述第二次超高压处理。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，步骤一中，先使用浓度为0.1-10mM的抗坏血酸水溶液，将果蔬物料浸泡若干分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，在所述步骤一之后，还包括：于0-4℃下，对果蔬物料进行打浆处理，添加食用水，液料比为1:2，打浆、过滤后将果蔬汁装入无菌瓶中，之后进入步骤二。
在上述方案中，作为优选，对果蔬物料进行打浆处理后，添加藤茶水，所述腾茶水的制备方法为：取来凤藤茶，加入沸水中煮沸1-2分钟，来凤藤茶与沸水的质量比为3-5:100。来凤藤茶还有大量的活性物质，富含黄酮和硒元素，添加到鲜榨果蔬汁中，一方面增加了其营养成分，另一方面来凤藤茶中的活性成分有效抑制了多酚氧化酶的活性，能够有效延长NFC果汁的货架期。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，步骤一中，先使用蓝莓叶水浸泡果蔬物料10-15分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理，所述蓝莓叶水的制备方法为：将蓝莓叶粉碎为50目以下颗粒后，按照质量比1:10加入水，121℃煮沸20分钟冷却后得到所述蓝莓叶水。蓝莓叶中含有大量抑制氧化酶活性的物质，将其煮沸制成蓝莓叶水，不仅有效利用了其活性成分，而且此方法成本低，也避免了蓝莓叶的浪费，一举两得。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，在所述步骤一之前，还包括：
原料选择：选择成熟的新鲜果蔬品，无病虫害、果皮完整无机械损伤；
原料预处理：把上述果蔬洗净、切分成长8-10cm的块状。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，在步骤三之后，还包括：将经过所述第二次超高压处理后的果蔬汁装入无菌瓶并于0-4℃储存。
在本发明其中一个实施例中，作为优选，所述果蔬物料为桃、苹果或梨中的任意一种或几种。
为使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案，现提供如下的实施例进行说明：
桃：云南省丽江市采摘，品种为丽江雪桃。
打浆设备：山东九阳股份有限公司，JYL-C022E。
超高压设备：包头科发高压科技有限责任公司，HPP-600MPa。
双光束紫外分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司，TU-19。
超高压均质机：英国HOMOGENISING SYSTEMS LTD，SPCH-EP-IC-10-60。
食品级抗坏血酸购于云南洛德生物有限公司。
本发明所提供利用超高压技术钝化果汁中sPPO和mPPO的方法，具体可包括如下步骤：将在4℃冷库中预冷后的果实切分后采用抗坏血酸水溶液进行浸泡，然后对物料进行第一次超高压处理用于钝化sPPO；向物料中加适量水后进行打浆、过滤，将果汁桃汁进行超高压均质处理用于促进mPPO的释放以及初步钝化mPPO；均质后的果汁内加入柠檬酸或酒石酸溶液后，进行第二次超高压处理用于钝化mPPO。
在本发明中，上述方法中的果品可以是桃、苹果、梨等。
在上述方法中用抗坏血酸水溶液浸泡的条件为：把果实切分成长约8-10cm的块状，使用浓度为10mM的抗坏血酸水溶液，将物料浸泡1min。
在上述方法中，进行第一次超高压处理钝化sPPO的参数如下：室温下压力设定为350-550MPa，保压时间设定为10min。
在上述方法中，对物料进行打浆处理的条件如下：添加适量食用水，液料比为1:2,打浆2min，用2层120目的纱布过滤后将果汁装入无菌瓶中，以上操作均在4℃冷库中完成。
在上述方法中，对果汁进行超高压均质处理的参数如下：室温下的压力设定为200-400MPa，进口温度为35-55℃，均质次数为1-3次。
在上述方法中，超高压均质后的果汁中加入柠檬酸或酒石酸溶液，静置1-5min后进行第二次超高压处理。
在上述方法中，第二次超高压处理的参数如下：室温下压力设定为350-600MPa，保压时间设定为20min。
更加具体的，本发明所提供的一种利用超高压和超高压均质技术钝化果汁中sPPO和mPPO的方法，包括如下步骤：
(1)原料选择：选择成熟的新鲜果品，无病虫害、果皮完整无机械损伤。
(2)原料预处理：把步骤(1)的果实洗净、切分成长约8-10cm的块状。
(3)浸泡处理：把步骤(2)得到的物料放置在10mM的抗坏血酸溶液中浸泡2min。
(4)第一次超高压处理：把步骤(3)得到的物料真空包装后进行超高压处理，室温下压力设定为350-550MPa，保压时间设定为10min。
(5)打浆、过滤：把步骤(4)得到的物料添加适量食用水，液料比为1:2，打浆时间为2min，用2层120目的纱布过滤后将果汁装入无菌瓶中，以上操作均在4℃冷库中完成。
(6)超高压均质处理：把步骤(5)得到的果汁进行超高压均质处理，进料温度为常温，压力为200-400MPa，进口温度为35-55℃，均质次数为1-3次。
(7)添加化学抑制剂：把步骤(6)得到的果汁加入10mM的柠檬酸或酒石酸溶液，静置1-5min。
(8)第二次超高压处理：把步骤(7)得到的果汁进行超高压处理，室温下的压力设定为350-600MPa，保压时间设定为20min。然后装入无菌瓶4℃储存。
一、实施方案
具体方法如下：选取新鲜果品作为原料，按照下述方法处理新鲜原料。
(1)原料预处理：将新鲜果品洗净后在4℃冷库中预冷，然后切成长约8-10cm的块状。
(2)浸泡处理：把步骤(2)得到的物料放置在10mM的抗坏血酸溶液中浸泡2min。
(3)第一次超高压处理钝化sPPO：把步骤(2)得到的物料真空包装后进行超高压处理，室温下压力设定为350MPa，保压时间设定为10min。
(4)打浆、过滤：把步骤(3)得到的物料添加适量食用水打浆，液料比为1：2，时间为2min，用2层120目的纱布过滤后将果汁装入无菌瓶中，以上操作均在4℃冷库中完成。
(5)超高压处均质处理促进mPPO的释放并初步钝化mPPO：把步骤(4)得到的物料进行超高压均质处理，进料温度为常温，压力400MPa下均质1次，进口温度为35℃。
(6)添加化学抑制剂：把步骤(5)得到的果汁加入对mPPO具有特异性抑制效果的10mM柠檬酸或酒石酸溶液，静置1min。
(7)第二次超高压处理钝化mPPO：把步骤(6)得到的物料进行超高压处理，室温下的压力设定为600MPa，保压时间设定为20min。完成后装入无菌瓶4℃储存。
二、sPPO、mPPO的提取
提取方法：果品切块后加入0.05M pH 6.80的磷酸氢二钠-柠檬酸冲溶液(含有1mMEDTA，1mM PSMF)，液料比为1:2，打浆1min，使用2层120目纱布过滤，再以10000rpm/min的转速离心20min，离心温度为4℃。离心所得的上清液中含有sPPO，mPPO则存在于沉淀中。再以12000rpm/min离心20分钟后得到的上清液则为sPPO的粗提液。将第一次离心得到的沉淀用适量0.05M pH 6.8的Tris-Hcl缓冲溶液(含有1％TritonX-100)溶解搅拌1min，溶解后冷库中静置30min。然后4℃下12000rpm/min离心15min，得到的上清液则为mPPO的粗提液。
三、PPO活性的测定
用0.05M pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液配置0.2M的邻苯二酚溶液，在420nm下用2.5ml邻苯二酚溶液与0.5ml提取液混合，以每分钟吸光值变化0.001为一个活力单位。
褐变的抑制率用公式：[(A0-Ai)/A0]×100％来表示，A0表示PPO的初始酶活，Ai表示进行处理后的PPO酶活。
实施例1、不同抑制剂对PPO活性的影响
为了防止原料在打浆之前发生酶促褐变从而影响品质，以及提高超高压钝酶效果，在超高压处理前在物料中加入化学抑制剂。测定不同浓度的抗坏血酸、柠檬酸、酒石酸对PPO的抑制效果，结果如表1所示。
表1.不同浓度的化学抑制剂对sPPO和mPPO的抑制率
注：表中的不同小写字母表示组别之间的差异性明显。
从结果中可以看出浓度为10mM的抗坏血酸对sPPO的抑制率高达99.13％，但其对mPPO的抑制效果不佳；浓度为10mM的柠檬酸对mPPO的抑制率最高为86.91％，因此可用于mPPO的抑制。
实施例2、不同超高压条件对sPPO活性的影响
第一次超高压处理目的在于用于钝化sPPO，设置以下几个处理方案用于比较不同压力条件对sPPO的抑制效果：
方案A1：常温，压力150MPa，保压时间10min；
方案A2：常温，压力150MPa，保压时间20min；
方案A3：常温，压力150MPa，保压时间30min；
方案B1：常温，压力350MPa，保压时间10min；
方案B2：常温，压力350MPa，保压时间20min；
方案B3：常温，压力350MPa，保压时间30min；
方案C1：常温，压力550MPa，保压时间10min；
方案C2：常温，压力550MPa，保压时间20min；
方案C3：常温，压力550MPa，保压时间30min；
按照实施方案步骤(3)的方法对物料进行处理，结果如表2所示。
表2.不同超高压条件对sPPO抑制率的影响
从表2中可以看出，随着压力升高，超高压处理对sPPO的钝化效果增强。
实施例3、不同均质压力对PPO活性的影响
超高压均质技术用于释放mPPO，设置以下4个处理方案用于比较不同压力对mPPO的释放效果：
方案D1：常温，压力100MPa，均质1次；
方案D2：常温，压力200MPa，均质1次；
方案D3：常温，压力300MPa，均质1次；
方案D4：常温，压力400MPa，均质1次；
按照实施方案步骤(5)的方法对物料进行超高压均质处理，结果如表3所示。
表3.不同均质压力对sPPO和mPPO活性的影响
从表3的结果可以看出不同的均质压力均能使mPPO活性提高200％以上，也就是说将mPPO从细胞膜上释放出来。
实施例4、不同超高压条件对mPPO活性的影响
第二次超高压处理目的用于进一步钝化mPPO，设置以下几个处理方案用于比较不同压力对mPPO的抑制效果：
方案F1：常温，压力150MPa，保压时间10min；
方案F2：常温，压力150MPa，保压时间20min；
方案F3：常温，压力150MPa，保压时间30min；
方案G1：常温，压力350MPa，保压时间10min；
方案G2：常温，压力350MPa，保压时间20min；
方案G3：常温，压力350MPa，保压时间30min；
方案H1：常温，压力550MPa，保压时间10min；
方案H2：常温，压力550MPa，保压时间20min；
方案H3：常温，压力550MPa，保压时间30min；
按照实施方案步骤(6)的方法对物料进行超高压处理，结果如表5所示。
表5.不同超高压条件对mPPO的影响
从表5中可以看出，在以上处理条件中方案均对mPPO有一定的钝化效果。
发明效果
本发明主要根据果品中sPPO和mPPO的特性，原料经过抗坏血酸浸泡、超高压、化学抑制剂、超高压均质处理等一系列步骤，有效地钝化了果汁中sPPO和mPPO的活性，使果汁中sPPO的抑制率为98％，mPPO的抑制率为95％，本发明可为果汁的生产加工提供参考。
这里说明的模块数量和处理规模是用来简化本发明的说明的。对本发明的XX的应用、修改和变化对本领域的技术人员来说是显而易见的。
如上所述，根据本发明，利用超高压技术、超高压均质技术联合化学抑制剂钝化鲜榨果汁中溶解态多酚氧化酶(sPPO)和膜结合态多酚氧化酶(mPPO)活性的方法，将水果洗净后切块，用10mM抗坏血酸溶液浸泡，浸泡完成后对物料进行第一次超高压处理用于彻底钝化sPPO，室温下压力设定为350-550MPa，保压时间设定为10min；添加适量水打浆、过滤，将果汁进行超高压均质处理，促进mPPO的释放，进料温度为常温，压力为200-400MPa，进口温度为35-55℃，均质次数为1-3次；均质后果汁中加入10mM柠檬酸或酒石酸溶液后进行第二次超高压处理用于彻底钝化mPPO，室温下压力设定为350-600MPa，保压时间设定为20min；泄压后的桃汁4℃储存。以上方法可有效地钝化果汁中PPO的活性，sPPO的活性抑制率为98％，mPPO的活性抑制率为95％。与传统热处理相比，不仅有着良好的钝化效果，在保持果汁风味的同时，超高压均质技术还有利于果汁感官品质提升。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。
Claims (10)
1.一种钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一、取果蔬物料进行第一次超高压处理；
步骤二、将经过所述第一次超高压处理后的果蔬物料进行超高压均质处理，所述超高压均质处理的方法为：室温、压力值为100-400MPa和进口温度为35-55℃，均质次数1-3次；
步骤三、向经过超高压均质后的果蔬汁内加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，进行第二次超高压处理，所述第二次超高压处理的方法：室温下，以压力150-600MPa，保压时间为10-30min。
2.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，第一次超高压处理钝化sPPO的方法为：室温下，压力值为150-550MPa，保压时间为10-20min。
3.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，步骤三中，所述柠檬酸溶液或酒石酸溶液的浓度为0.1-10mM；加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液后，静置1-5min后再进行所述第二次超高压处理。
4.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，步骤一中，先使用浓度为0.1-10mM的抗坏血酸水溶液，将果蔬物料浸泡若干分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理。
5.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，在所述步骤一之后，还包括：于0-4℃下，对果蔬物料进行打浆处理，添加食用水，液料比为1:2，打浆、过滤后将果蔬汁装入无菌瓶中，之后进入步骤二。
6.如权利要求5所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，对果蔬物料进行打浆处理后，添加藤茶水，所述腾茶水的制备方法为：取来凤藤茶，加入沸水中煮沸1-2分钟，来凤藤茶与沸水的质量比为3-5:100。
7.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，步骤一中，先使用蓝莓叶水浸泡果蔬物料10-15分钟，之后将浸泡后的果蔬物料真空包装后进行所述第一次超高压处理，所述蓝莓叶水的制备方法为：将蓝莓叶粉碎为50目以下颗粒后，按照质量比1:10加入水，121℃煮沸20分钟冷却后得到所述蓝莓叶水。
8.如权利要求4所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，在所述步骤一之前，还包括：
原料选择：选择成熟的新鲜果蔬品，无病虫害、果皮完整无机械损伤；
原料预处理：把上述果蔬洗净、切分成长8-10cm的块状。
9.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，在步骤三之后，还包括：将经过所述第二次超高压处理后的果蔬汁装入无菌瓶并于0-4℃储存。
10.如权利要求1所述的钝化溶解态多酚氧化酶和膜结合态多酚氧化酶活性的方法，其特征在于，所述果蔬物料为桃、苹果或梨中的任意一种或几种。
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