CN111296335B - 实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 - Google Patents
实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111296335B CN111296335B CN202010207570.3A CN202010207570A CN111296335B CN 111296335 B CN111296335 B CN 111296335B CN 202010207570 A CN202010207570 A CN 202010207570A CN 111296335 B CN111296335 B CN 111296335B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- hydranth
- brine
- artificial seawater
- feeding
- seawater
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 241001092080 Hydrangea Species 0.000 title claims description 19
- 235000014486 Hydrangea macrophylla Nutrition 0.000 title claims description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 241001083841 Aquatica Species 0.000 title claims description 10
- 239000013535 sea water Substances 0.000 claims abstract description 79
- 241000243320 Hydrozoa Species 0.000 claims abstract description 57
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- 241000242567 Aurelia aurita Species 0.000 claims abstract description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000238426 Anostraca Species 0.000 claims description 40
- 241000238582 Artemia Species 0.000 claims description 33
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims description 22
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims description 18
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 claims description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims description 8
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 238000007667 floating Methods 0.000 claims description 4
- 238000005086 pumping Methods 0.000 claims description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 4
- 241000243251 Hydra Species 0.000 claims description 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 3
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 2
- 230000012447 hatching Effects 0.000 claims description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 2
- 238000007790 scraping Methods 0.000 claims description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 abstract description 15
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 9
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 241000243321 Cnidaria Species 0.000 description 1
- 241001235206 Farfantepenaeus brasiliensis Species 0.000 description 1
- 241001175411 Hydra sinensis Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000242583 Scyphozoa Species 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/20—Culture of aquatic animals of zooplankton, e.g. water fleas or Rotatoria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/10—Culture of aquatic animals of fish
- A01K61/17—Hatching, e.g. incubators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
- A01K61/50—Culture of aquatic animals of shellfish
- A01K61/59—Culture of aquatic animals of shellfish of crustaceans, e.g. lobsters or shrimps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K63/00—Receptacles for live fish, e.g. aquaria; Terraria
- A01K63/003—Aquaria; Terraria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K63/00—Receptacles for live fish, e.g. aquaria; Terraria
- A01K63/04—Arrangements for treating water specially adapted to receptacles for live fish
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/20—Animal feeding-stuffs from material of animal origin
- A23K10/22—Animal feeding-stuffs from material of animal origin from fish
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/80—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
- Y02A40/80—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
- Y02A40/81—Aquaculture, e.g. of fish
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Insects & Arthropods (AREA)
- Birds (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及水螅体实验室养殖技术领域，提供了实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，包括人工海水配置、饵料准备、海月水母水螅体转移、海月水母水螅体附着、海月水母水螅体喂食、人工海水更换、传代培养七个步骤。本发明选用六孔培养板或单个的培养皿作为培养器具，海月水母水螅体数量可控、可数，并且喂食、换水等操作方便易达标，同时选用控制精度更高的生化培养箱作为培养仪器，一方面解决了当前实验室饲养水缸在恒温控制、精准定量投食、水质净化等方面都难以达到实验动物饲养的标准的难题；另一方面，水螅体定量和传代培养容易，既提高了水螅体的活力又解决了传统的饲养方式无法开展水螅体相关的精确定量的科研实验的问题。
Description
技术领域
本发明属于海月水母水螅体的实验室培养领域，具体涉及一种实验室海月水母水螅体的微观饲养方法。
背景技术
水螅体是刺胞动物门生物水母生长周期中最为重要的一种世代，为无脊椎动物，多见于海水，少数种类产于淡水。海月水母水螅体由于其生物结构简单，繁殖速度快，再生能力强等特点常作为基础研究的动物模型。因此，海月水母水螅体在生物、化学、医学等科研领域是一类极具研究潜力的动物。
关于水螅体的养殖，实验室通用的饲养方式为波纹板附着+循环过滤水缸的饲养方法，但该种饲养方式较为粗犷且缺陷明显：首先，水缸在恒温控制、精准定量投食、水质净化等方面都达不到实验动物饲养的标准；其次，传统的饲养方式由于饲养缸水体过大，波纹板附着的水螅体数量众多(参见图1)等缺点，导致无法开展水螅体相关的精确定量的科研实验。
发明内容
本发明是为解决上述问题而进行的，为满足使用水螅体进行基本科研实验的需求，提供了一种同细胞培养类似的，能够在生化培养箱中进行恒定条件培养的微观环境下水螅体的饲养方法。为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：
本发明提供的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，具有如下技术特征，包括如下步骤：
S1：人工海水配置
配置盐度在2.8％～3.2％范围内的人工海水，持续泵入空气后，静置取上清液；
S2：饵料准备
将配制好的人工海水和丰年虾卵倒入虾卵孵化器中，丰年虾卵的加入量为g/L(优选10g/L)；将充气泵伸入孵化器内的人工海水液面底部充气进行供氧，并采用加热棒保持孵化器内温度高于26℃，照明条件下孵化24～48h，完成孵化；静置后，取出位于底部的孵化完成的丰年虾卤虫，并进行多次清洗去除杂质；将丰年虾卤虫和人工海水按体积比为1:3人对丰年虾卤虫进行稀释，进行投喂或保存；
S3：海月水母水螅体转移
暂停饲养缸内的海水循环，将缸内波纹板上的部分水螅体转移至盛有人工海水的实验室器皿内，并清除附着的杂质；将清洗干净的水螅体吸入干净人工海水内，进行状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的六孔细胞培养板或培养皿中，六孔细胞培养板中每孔5～10只水螅体，培养皿内放入20～30只水螅体，而后盖上盖子，记录种植日期；
S4：海月水母水螅体附着
将种植水螅体的六孔细胞培养板或培养皿置于20℃的恒温生化培养箱中，并且在附着的5～7天之内不需换水，不需喂食；种植5～7天后，观察水螅体是否已经附着在板底，若附着量偏少，按照所述步骤3重新进行加种。
观察水螅体是否已经附着在板底的判断标准如下：
若水螅体触手伸展，并且用吸管轻轻吹吸水螅体依然附着，则判定该水螅体已经附着在板底；若水螅体触手消失，用吸管吹吸时水螅体飘起，则判定水螅体未附着，
当水螅体的附着数量少于3个时，需重新进行加种。
S5：海月水母水螅体喂食
水螅体附着成功后开始正常喂食，用一次性塑料吸管吸取步骤2中的丰年虾卤虫，直接喂到水螅体的触手旁边，每只水螅体3～5只丰年虾卤虫；通过观察保证每个水螅体都可以吃到丰年虾卤虫，喂食后，将水螅体放回培养箱中，进食1.5～3h，优选2h；
S6：人工海水更换
水螅体附着后第一周的更换：吸去未进食的丰年虾卤虫，并加入干净的人工海水，加满后加盖继续放入20℃恒温生化培养箱中培养，每两天喂食一次同时换水；
水螅体附着后第二周及之后更换：将六孔细胞培养板或培养皿内的海水和剩余的丰年虾卤虫一并倒出，随后浸没入人工海水中使其充满海水，再将海水倒掉，重复多次后，加满海水，加盖后放入20℃恒温生化培养箱中培养每两天喂食一次同时换水；
S7：传代培养
水螅体快长满培养板时，将水螅体移植到新的培养板中，重复上述步骤3～6进行水螅体的传代培养。
本发明的作用与效果
首先，在本发明中的海月水母水螅体的微观饲养方法中，选用六孔培养板或单个的培养皿作为培养器具，吸入其中的海月水母水螅体数量可控、可数，并且喂食、换水等操作方便易达标，同时选用控制精度更高的生化培养箱作为培养仪器，一方面解决了当前实验室饲养水缸在恒温控制、精准定量投食、水质净化等方面都难以达到实验动物饲养的标准的难题，满足科学实验对实验动物饲养条件的要求；另一方面，六孔培养板或单个的培养皿作为培养器具中水螅体定量和传代培养容易，既提高了水螅体的活力又解决了传统的饲养方式中由于饲养缸水体过大，水螅体数量众多等缺点，导致无法开展水螅体相关的精确定量的科研实验的问题。
其次，本发明在微观环境下水螅体的饲养，所需投食的丰年虾卤虫的数量和人工海水的用量都大大减少，节约了实验成本。
第三，与传统饲养方式比较，微观环境下饲养的水螅体能够捕食到丰年虾卤虫的数量更多，个体更大，质量更好，繁殖速度更快，便于观察以及作为实验材料的获取。
因此，本发明中的海月水母水螅体的微观饲养方法，简单、精确、可控，便于在实验室进行推广，且可扩展至其他的水螅体实验室养殖上，应用前景广阔。
附图说明
图1为使用传统方法饲养的海月水母水螅体在波纹板上附着的状态图；
图2为本发明实施例中在六孔细胞培养板中饲养的海月水母水螅体的状态图，其中A和B分别为不同种植日期的海月水母水螅体的状态图；
图3为本发明实施例中在培养皿中饲养的海月水母水螅体的状态图；
图4为在体式显微镜下观察的不同饲养方式中的水螅体：A.使用传统方法饲养的水螅体；B.使用本发明在六孔细胞培养板中饲养的水螅体；C.使用本发明在培养皿中饲养的水螅体。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明进行详细描述。但下列实施例不应看作对本发明范围的限制。
本发明所用试剂和原料均可通过商业渠道购买得到，部分原料可按发明中所提示的方法制备。
实施例1六孔细胞培养板中海月水母水螅体的饲养
1、配制适宜海月水母水螅体生存的人工海水
按表1配制理论盐度为3.00％的人工海水：
表1人工海水(盐度约为3.00％)配制表
配置完成后，将充气泵打开并伸入配制好的人工海水中，为海水泵入空气，持续2h后，取出充气泵。使用盐度计测定盐度在2.8～3.2之间(约3.00％)，根据盐度高低适当添加海水素或蒸馏水，静置沉淀5min后取上清使用。
2、海月水母水螅体饵料(丰年虾卤虫)的准备
将配制好的1L人工海水和适量丰年虾卵倒入虾卵孵化器中，丰年虾卵的加入量如表2所示：
表2丰年虾卵孵化配比表(26℃)
1)将充气泵打开并伸入虾卵孵化器底部，室内温度低时将加热棒调到26-28℃浸没在海水中，外界温度高于26℃时不需要使用加热棒，将照明灯打开朝向虾卵孵化器底部，孵化24～48h后，关闭并取出加热棒和充气泵。
2)照明灯继续照射同时将虾卵孵化器静置10min，上层漂浮的颗粒为褐色的虾壳，底部沉淀的橘黄色颗粒即为孵化完成的丰年虾卤虫，关闭照明灯，打开孵化器的下阀门，使孵出的丰年虾卤虫流出，置于洁净的烧杯中，待卤虫全部流出后，关闭下阀门，从上口倒出丰年虾卤虫卵壳并将装置用清水冲洗干净。
3)第一次流出的丰年虾卤虫还是有明显卤虫卵壳残留，将装有丰年虾卤虫的烧杯填满人工海水，静置10min，卤虫卵壳漂浮，丰年虾卤虫再次沉淀，快速倾斜烧杯倒去漂浮的丰年虾卤虫卵壳。
4)剩余的丰年虾卤虫用人工海水冲洗后，静置10min，倒掉上面的水，重复3次，清洗丰年虾卵卤虫。
5)按体积比丰年虾卤虫:人工海水为1:3的比例，对丰年虾卤虫进行稀释。稀释好的丰年虾卤虫即可进行投喂，剩余的丰年虾卤虫置于4℃冰箱保存，但不能超过2天。
3、海月水母水螅体的转移
1)海月水母水螅体饲养于实验室饲养缸内的波纹板上，转移水螅体前首先将自动循环计时器调至海水循环暂停。
2)用一次性塑料吸管轻轻刮取波纹板上的水螅体，将脱落的水螅体用吸管放入盛有人工海水的烧杯中，用吸管轻轻吹打海水，清除水螅体上附着的杂质。
3)将洗净的水螅体吸入干净的装有人工海水的烧杯中，静置30min，待水螅体状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的六孔细胞培养板中，每孔5～10只，足部向下触手向上或侧向摆放在六孔细胞培养板的每个孔中，盖上盖子，盖子上贴标签记录种植日期，如图2所示，其中的A和B分别显示了不同种植日期的海月水母水螅体。
4、海月水母水螅体的附着
1)将种植水螅体的六孔细胞培养板置于20℃的恒温生化培养箱中，并且在附着的5～7天之内不需换水，不需喂食。
2)种植5～7天后，取出六孔细胞培养板观察，若水螅体触手伸展，并且用吸管轻轻吹吸水螅体依然附着，则可判定该水螅体已经附着在板底；若水螅体触手消失，用吸管吹吸时水螅体飘起，则水螅体未附着，若该孔水螅体附着的数量较多少，则可按上述步骤3和4重新加种水螅体。
5、海月水母水螅体的喂食
水螅体在六孔细胞培养板中附着成功后即可开始正常喂食。取出上述步骤2中准备好的丰年虾卤虫，用一次性塑料吸管吸取丰年虾卤虫，直接喂到水螅体的触手旁边，每只水螅体3～5只丰年虾卤虫。通过观察保证每个水螅体都可以吃到丰年虾卤虫。喂食后，将水螅体放回培养箱中，进食2h。
6、人工海水的更换：
1)水螅体附着后第一周的更换：取出六孔细胞培养板，使用一次性塑料吸管吸去未进食的丰年虾卤虫，再用塑料吸管吸取干净的人工海水加入培养板，加满后加盖继续放入20℃恒温生化培养箱中培养，每两天喂食一次同时换水。
2)水螅体附着后第二周及之后更换：取出六孔细胞培养板将孔内的海水和剩余的丰年虾卤虫一并倒出，随后将六孔细胞培养板浸入人工海水中使其充满海水，再将海水倒掉，重复两次，再将孔内充满海水，加盖后放入20℃恒温生化培养箱中培养每两天喂食一次同时换水。
7.海月水母水螅体培养板中的传代培养
水螅体快长满培养板时，需要将水螅体移植到新的培养板中，重复上述3～6步进行水螅体的传代培养。
实施例2培养皿中海月水母水螅体的饲养
本实施例2与实施例1的区别仅在于步骤3，待水螅体上附着的杂质被清除后，将洗净的水螅体吸入干净的装有人工海水的烧杯中，静置30min，待水螅体状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的培养皿中，每个培养板中20～30只，足部向下触手向上或侧向摆放在培养板中，盖上盖子，盖子上贴标签记录种植日期，如图3所示，其中的A和B分别显示了不同种植日期的海月水母水螅体。
根据本发明实施例1和2饲养的海月水母水螅体与传统饲养方式饲养的海月水母水螅体的对比如图4所示，根据图4，在本发明微观环境下饲养的水螅体能够捕食到丰年虾卤虫的数量更多，个体更大，质量更好，繁殖速度更快，便于观察以及作为实验材料的获取。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
Claims (7)
1. 一种实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1：人工海水配置
配置盐度在2.8%~3.2%范围内的人工海水，持续泵入空气后，静置取上清液；
S2：饵料准备
将配制好的人工海水和丰年虾卵倒入虾卵孵化器中，丰年虾卵的加入量为8~12g/L；向孵化器底部充气，并保持孵化器内温度高于26℃，照明条件下孵化24~48h；静置后，收集位于底部的孵化完成的丰年虾卤虫，并进行多次清洗去除杂质；采用人工海水对丰年虾卤虫进行稀释后，进行投喂或保存，
其中，取出及清洗丰年虾卤虫的方法如下：
照明灯继续照射下，将虾卵孵化器静置10 min，底部沉淀的橘黄色颗粒为孵化完成的丰年虾卤虫，关闭照明灯，打开孵化器的下阀门，使孵出的丰年虾卤虫流出，置于洁净的烧杯中，待卤虫全部流出后，关闭下阀门，从上口倒出漂浮于上层的丰年虾卤虫卵壳并将装置用清水冲洗干净，
第一次流出的丰年虾卤虫中明显带有卤虫卵壳残留，将装有丰年虾卤虫的容器填满人工海水，静置10 min，丰年虾卤虫再次沉淀，快速倾斜烧杯倒去漂浮的丰年虾卤虫卵壳；
剩余的丰年虾卤虫用人工海水冲洗后，静置10 min，而后倒掉上面的水，重复三次后得到干净的丰年虾卵卤虫；
S3：海月水母水螅体转移
暂停饲养缸内的海水循环，将缸内波纹板上的部分水螅体转移至盛有人工海水的实验室器皿内，并清除附着的杂质；将清洗干净的水螅体吸入干净人工海水内，进行状态恢复，选取触手伸展、活力良好的水螅体放入盛有人工海水的六孔细胞培养板或培养皿中，六孔细胞培养板中每孔5~10只水螅体，所述培养皿内放入20~30只水螅体，而后盖上盖子，记录种植日期；
S4：海月水母水螅体附着
将种植水螅体的六孔细胞培养板或培养皿置于20 ℃的恒温生化培养箱中，并且在附着的5 ~ 7天之内不需换水，不需喂食；种植5 ~ 7天后，观察水螅体是否已经附着在板底，若附着量偏少，按照所述步骤3重新进行加种，
观察水螅体是否已经附着在板底的判断标准如下：若水螅体触手伸展，并且用吸管轻轻吹吸水螅体依然附着，则判定该水螅体已经附着在板底；若水螅体触手消失，用吸管吹吸时水螅体飘起，则判定水螅体未附着；
S5：海月水母水螅体喂食
水螅体附着成功后开始正常喂食，用一次性塑料吸管吸取步骤2中的丰年虾卤虫，直接喂到水螅体的触手旁边，每只水螅体3~5只丰年虾卤虫；通过观察保证每个水螅体都可以吃到丰年虾卤虫，喂食后，将水螅体放回培养箱中，进食1.5~3 h；
S6：人工海水更换
水螅体附着后第一周的更换：吸去未进食的丰年虾卤虫，并加入干净的人工海水，加满后加盖继续放入20℃恒温生化培养箱中培养，每两天喂食一次同时换水；
水螅体附着后第二周及之后更换：将六孔细胞培养板或培养皿内的海水和剩余的丰年虾卤虫一并倒出，随后浸没入人工海水中使其充满海水，再将海水倒掉，重复多次后，加满海水，加盖后放入20℃恒温生化培养箱中培养每两天喂食一次同时换水；
S7：传代培养
水螅体快长满培养板时，将水螅体移植到新的培养板中，重复上述步骤3 ~ 6进行水螅体的传代培养。
2.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S1中，配置理论盐度的人工海水后，将充气泵打开并伸入配制好的人工海水中，持续泵入空气2 h，取出充气泵，使用盐度计测定盐度在2.8 ~ 3.2之间，并根据盐度高低适当添加海水素或蒸馏水，静置沉淀5 min后取上清使用。
3.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S2中，丰年虾卵的加入量为10g/L人工海水；而后将充气泵打开伸入至虾卵孵化器内，并采用加热棒对孵化器内的人工海水进行温度控制，同时将照明灯打开朝向虾卵孵化器底部，孵化完成后关闭并取出加热棒和充气泵。
4.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S2中，将干净的丰年虾卤虫和人工海水按体积比为1:3的比例，对丰年虾卤虫进行稀释，稀释好的丰年虾卤虫即可进行投喂，剩余的丰年虾卤虫置于4 ℃冰箱保存，但不能超过两天。
5.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S3中，将缸内波纹板上的部分水螅体转移至盛有人工海水的实验室器皿的操作方法如下：用一次性塑料吸管轻轻刮取波纹板上的水螅体，将脱落的水螅体用吸管放入盛有人工海水的烧杯中，并用吸管轻轻吹打海水，清除水螅体上附着的杂质，
进行状态恢复时，将清洗干净的水螅体吸入干净人工海水内，静置30min，实现水螅体状态恢复。
6.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S4中，当水螅体的附着数量少于3个时，需重新进行加种。
7.根据权利要求1所述的实验室海月水母水螅体的微观饲养方法，其特征在于：
其中，S5中，喂食后，将水螅体放回培养箱中，进食时间为2 h。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010207570.3A CN111296335B (zh) | 2020-03-23 | 2020-03-23 | 实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010207570.3A CN111296335B (zh) | 2020-03-23 | 2020-03-23 | 实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111296335A CN111296335A (zh) | 2020-06-19 |
| CN111296335B true CN111296335B (zh) | 2022-02-11 |
Family
ID=71162403
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010207570.3A Expired - Fee Related CN111296335B (zh) | 2020-03-23 | 2020-03-23 | 实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111296335B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112613239B (zh) * | 2020-11-24 | 2022-05-13 | 国家海洋局北海环境监测中心(中国海监北海区检验鉴定中心） | 一种水母灾害预警模型的构建方法 |
| CN113122492B (zh) * | 2021-03-15 | 2022-12-02 | 中国人民解放军海军军医大学 | 海月水母水螅体的单细胞分离方法 |
| CN113678956A (zh) * | 2021-07-28 | 2021-11-23 | 宁波神凤海洋世界有限公司 | 海刺类水母用混合饲料的制作方法及其投喂方法 |
| CN115104556B (zh) * | 2022-08-29 | 2023-05-02 | 太平洋海底世界博览馆有限公司 | 一种水族馆用于观赏的狮鬃水母繁殖方法 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004275028A (ja) * | 2003-03-13 | 2004-10-07 | Kansai Electric Power Co Inc:The | ポリプの除去又は増殖抑制方法 |
| CN103636547A (zh) * | 2013-12-25 | 2014-03-19 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种海月水母成熟卵子的获得方法 |
| CN104585095A (zh) * | 2015-01-20 | 2015-05-06 | 青岛龙宫海洋牧场生态修复工程有限公司 | 一种海月水母螅状体培养方法 |
| CN107926782A (zh) * | 2017-12-27 | 2018-04-20 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种实验室水螅体饲养装置及饲养方法 |
| CN109089970A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-12-28 | 扬州大学 | 一种改进的丰年虾孵化和收集方法 |
| CN109892261A (zh) * | 2017-12-11 | 2019-06-18 | 深圳市高盛生物科技发展有限公司 | 巴布亚硝水母人工养殖方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NO300002B1 (no) * | 1995-02-10 | 1997-03-17 | Charles Kaarstad | Anordning for nedsenkning og heving av oppdrettsmerder |
| US6699535B2 (en) * | 2001-10-15 | 2004-03-02 | Jeffrey D. Boschert | Reproductions of aquarium life formed from translucent memory retaining polymers and method for reproducing the same |
| TW200830991A (en) * | 2006-04-20 | 2008-08-01 | Biomor Israel Ltd | TTO-based disinfectants & anesthetics for use in aquaculture |
| CN101411320B (zh) * | 2008-11-24 | 2011-04-13 | 中国海洋大学 | 一种海蜇水螅体越年保育无性繁殖方法 |
| CN204032095U (zh) * | 2014-06-26 | 2014-12-24 | 青岛龙宫海洋牧场生态修复工程有限公司 | 一种新型水母养殖循环系统 |
-
2020
- 2020-03-23 CN CN202010207570.3A patent/CN111296335B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2004275028A (ja) * | 2003-03-13 | 2004-10-07 | Kansai Electric Power Co Inc:The | ポリプの除去又は増殖抑制方法 |
| CN103636547A (zh) * | 2013-12-25 | 2014-03-19 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 一种海月水母成熟卵子的获得方法 |
| CN104585095A (zh) * | 2015-01-20 | 2015-05-06 | 青岛龙宫海洋牧场生态修复工程有限公司 | 一种海月水母螅状体培养方法 |
| CN109892261A (zh) * | 2017-12-11 | 2019-06-18 | 深圳市高盛生物科技发展有限公司 | 巴布亚硝水母人工养殖方法 |
| CN107926782A (zh) * | 2017-12-27 | 2018-04-20 | 中国人民解放军第二军医大学 | 一种实验室水螅体饲养装置及饲养方法 |
| CN109089970A (zh) * | 2018-06-25 | 2018-12-28 | 扬州大学 | 一种改进的丰年虾孵化和收集方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 《A morphological and genetic comparison of Septifer bilocularis,》;Brian Morton etc;《Regional Studies in Marine Science》;20191231;第1-5页 * |
| 《一种饥饿和水温对海月水母碟状幼体游泳能力的影响》;付志璐等;《广西科学院学报》;20161231;第32卷(第4期);第263-266页 * |
| 《温度对海月水母横裂生殖的影响研究》;付志璐，王一兵;《水产科学》;20191130;第38卷(第6期);第791-796页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111296335A (zh) | 2020-06-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111296335B (zh) | 实验室海月水母水螅体的微观饲养方法 | |
| Ebert et al. | Elements and innovations in the cultivation of red abalone Haliotis rufescens | |
| CN102144597B (zh) | 海水鱼类沉性鱼卵孵化装置和孵化方法 | |
| Leahy | Laboratory culture of Strongylocentrotus purpuratus adults, embryos, and larvae | |
| CN111248139B (zh) | 一种高密度轮虫的培养装置及方法 | |
| CN110604085B (zh) | 一种基于聚氨酯生物膜的凡纳滨对虾高密度标苗方法 | |
| CN101904311B (zh) | 对虾类幼体孵化方法及装置 | |
| CN109566497A (zh) | 一种马氏珍珠贝种苗优化孵化培育方法 | |
| Carvalho et al. | Keeping amphioxus in the laboratory: an update on available husbandry methods | |
| CN103461224B (zh) | 刺参杂交育种中种参的选择方法 | |
| CN101664007B (zh) | 一种缢蛏杂交育种方法 | |
| CN203884437U (zh) | 南美白对虾养殖系统 | |
| CN103202249B (zh) | 一种银鲳仔稚鱼滴投培育装置及方法 | |
| CN102106322B (zh) | 卤虫封闭式培养系统及培养方法 | |
| CN105815246B (zh) | 一种墨西哥湾扇贝(雌)与华贵栉孔扇贝(雄)的杂交制种方法 | |
| CN111700007B (zh) | 锦鲤与鳙鱼亚科间远缘杂交的方法和四倍体锦鳙的应用 | |
| CN109984061B (zh) | 一种章鱼受精卵人工孵化方法 | |
| CN102792916A (zh) | 一种适用于体式显微镜下观察鱼类胚胎发育的方法及装置 | |
| CN102210272A (zh) | 一种河口型海湾海参池塘养殖方法 | |
| CN112553080A (zh) | 夏季培养硅藻的方法 | |
| CN111642428A (zh) | 一种尖裸鲤的室内水泥池高密度养殖方法及其系统 | |
| RU2541459C1 (ru) | Способ выращивания гигантской устрицы crassostrea gigas в черном море | |
| CN109691407A (zh) | 一种快速建立轮虫单个体无性繁殖种群的方法 | |
| CN221576520U (zh) | 一种水母浮浪幼虫培养观察装置 | |
| Ruangpanit | Developing hatchery techniques for sea bass (Lates calcarifer): a review |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20220211 |