CN111121629A - 一种大豆皱叶症田间鉴定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物病害鉴定技术领域，特别涉及一种大豆皱叶症田间鉴定方法，包括：（1）选择对照材料；（2）田间种植试验；（3）统计不同皱叶症症级的大豆植株数；（4）计算大豆皱叶症病情指数；（5）明确被鉴定材料皱叶症抗性等级。本发明通过对大豆皱叶症田间发生情况调查研究，并跟踪皱叶程度强、表现稳定的对照品种，将其作为对照组来划分皱叶症症级。通过设置三组以上的实验组，分别对大豆的V6期、R2期和R5期的发病情况进行统计，计算病情指数，通过取平均值即可较为客观地评价大豆的皱叶症抗性等级；评价结果准确而直观；通过上述鉴定方法对不同大豆种质进行皱叶症抗性鉴定，可有效筛选出抗性品种，有利于大豆皱叶症的进一步研究。
Description
技术领域
本发明属于植物病害鉴定技术领域，特别涉及一种大豆皱叶症田间鉴定方法。
背景技术
近些年在广西、广东、贵州等地在大豆上发现的一种皱叶症，发生症状严重的植株叶片皱缩严重，叶尖下弯成“勾手”状，叶脉褶皱成“S”型，叶面正面有沿皱缩的叶脉有“泡状”凸起。症状严重时严重减小叶片有效叶面积，影响大豆光合作用，降低大豆产量10-20%。研究发现大豆上出现的该类型皱叶症在特定的环境区域内能稳定遗传，皱叶严重的材料用于生产可出现大面积叶片皱缩情况。目前尚未发现有关该类型皱叶症田间鉴定的方法的报道，何种原因导致的该类型的皱叶症还不清楚，生产上培育和推广应用抗皱叶症品种是当前最有有效可行的措施，选育抗皱叶症的品种必须对大豆材料皱叶症抗性进行准确鉴定。因此，建立科学合理的皱叶症抗性鉴定方法是进行大豆皱叶症抗性遗传研究、选育抗皱叶症大豆品种的基础。
发明内容
本发明的目的在于：结合前期田间对大豆皱叶症发生情况调研研究结果，提供一种大豆皱叶症田间鉴定方法，填补大豆皱叶症鉴定的空白，以利于大豆抗皱叶症品种的选育，以及大豆皱叶症的进一步研究。
为实现上述目的，本发明提供了一种大豆皱叶症田间鉴定方法，包括如下步骤：
（1）选择皱叶程度高，皱叶表现稳定的材料作为对照；
（2）田间鉴定时候在被鉴定材料一旁种植对照品种，每种鉴定材料的鉴定小区至少重复设置3个；
（3）分别在大豆的V6期、R2期和R5期划定被测大豆植株区域，包括被鉴定材料和对照，统计被测区域内不同皱叶症症级的大豆植株数；
其中，皱叶症症级划分5个症级标准：
0级：正常，观测期冠层豆叶片无皱褶状，叶片平展；
1级：较正常，观测期冠层叶片轻微皱褶但不出现“勾手”状，叶片能平展；
2级：较敏感，观测期冠层叶片皱褶明显，有轻微的“勾手”状；
3级：敏感，观测期冠层大豆叶片皱褶严重，有明显的“勾手”状；
4级：严重敏感，观测期冠层叶片皱褶十分严重，“勾手”状严重，且叶片向下弯曲已基本不能张开；
（4）根据大豆皱叶症症级标准，统计各观测时期内被测区域内大豆各症级的大豆皱叶症病情指数DI，取田间重复小区的平均值，然后取各观测时期大豆皱叶病情指数平均值D；
（5）根据皱叶症抗性级别划分标准和被鉴定材料病情指数平均值D，明确被鉴定材料皱叶症抗性等级；
根据皱叶症病情指数划定皱叶症分级标准如下：
1：高抗（HR），D=0
3：抗（R），0<D≤30
5：中抗（MR），30<D≤60
7：感（S），60<D≤90
9：高感（HS），90<D。
V6期、R2期和R5期分别为大豆的六节期、盛花期、始粒期。试验表明，V4-V5开始发病，V6进入严重，R2最严重，R5有变轻的趋势，通过取三个时期的平均值能更客户地评价皱叶症。
优选的，步骤（2）中，步骤（2）中，在被鉴定材料两边行同时种植对照品种，在被鉴定材料两个行头每行种植1-2穴对照品种。
优选的，步骤（4）中，若被鉴定材料田间小区对应对照抗性等级降低两个等级，则该组数据算丢失处理。
优选的，步骤（4）中，病情指数DI的计算公式如下：
DI=[∑(N× R)/(M× T)]× 100 式中： Σ—调查病害相对病级数值及其株数或叶数乘积的总和； N—病害某一级别的植株数或叶数，单位为株或叶； R—病害的相对病级数值； M—病害的最高病级数值； T—调查总株数或总叶数，单位为株或叶。
优选的，步骤（1）中，皱叶表现稳定的品种为：春大豆皱叶鉴定选用华春10号，夏大豆皱叶鉴定选用桂夏豆119。
优选的，步骤（2）中，种植密度为：鉴定小区内种植2行以上鉴定材料，行长300cm以上，穴距20cm，每穴2株，春大豆行宽40cm，夏大豆行宽50cm，对照品种两个边行的种植规格同被鉴定材料。
与现有的技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明通过对大豆皱叶症田间发生情况调查研究，并跟踪皱叶程度强、表现稳定的对照品种，根据对照种田间皱叶情况确定鉴定小区皱叶鉴定环境，准确把握皱叶症鉴定小区数据可靠性。通过设置三组以上的实验组，分别对大豆的V6期、R2期和R5期的发病情况进行统计，计算病情指数，通过取各时期病情指数平均值即可较为客观地评价大豆的皱叶症抗性等级；评价结果准确而直观；通过上述鉴定方法对不同品种大豆进行皱叶症抗性鉴定，可有效筛选出抗性品种，有利于大豆品种的选育及大豆皱叶症的进一步研究。
附图说明
图1是本发明对照材料的皱叶等级图。其中，1为高抗（HR），3为抗（R），5为中抗（MR），7为感（S），9为高感（HS）。
图2是根据本发明的种植结构图。
图3是本发明试验组中高感（HS）皱叶症的田间试验图。
图4是是本发明试验组高抗（HR）皱叶症的田间试验图。
具体实施方式
下面结合附图，对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。
实施例1
采集大豆皱叶症表现未定的春大豆材料10份，夏大豆材料12份，分别于2018年和2019年在田间观测各个品种大豆材料皱叶症发生的稳定性，方法步骤如下：
（3）分别在大豆的V6期、R2期和R5期划定被测大豆植株区域，统计被测区域内不同皱叶症症级的大豆植株数；
其中，皱叶症症级划分5个症级标准，参照图1：
0级：正常，观测期冠层豆叶片无皱褶状，叶片平展；
1级：较正常，观测期冠层叶片轻微皱褶但不出现“勾手”状，叶片能平展；
2级：较敏感，观测期冠层叶片皱褶明显，有轻微的“勾手”状；
3级：敏感，观测期冠层大豆叶片皱褶严重，有明显的“勾手”状；
4级：严重敏感，观测期冠层叶片皱褶十分严重，“勾手”状严重，且叶片向下弯曲已基本不能张开；
（4）根据大豆皱叶症症级标准，统计各观测时期内被测区域内大豆各症级的大豆皱叶症病情指数DI，取田间重复小区的平均值，然后取各观测时期大豆皱叶病情指数平均值；（5）根据皱叶症抗性级别划分标准和被鉴定材料病情指数，明确被鉴定材料皱叶症抗性等级；
根据皱叶症病情指数划定皱叶症分级标准如下：
1：高抗（HR），DI=0
3：抗（R），0<DI<30
5：中抗（MR），30<DI<60
7：感（S），60<DI<90
9：高感（HS），<90。
通过上述方法及统计，发现春大豆的华春10号和夏大豆的桂夏豆119，不仅皱叶程度高，而且发病稳定，因此春大豆最终选取华春10号作为对照材料，夏大豆最终选取桂夏豆119作为对照材料。各个试验材料的皱叶症病情指数见表1。
实施例2
一种大豆皱叶症田间鉴定方法，包括如下步骤：
（1）选择皱叶程度高，皱叶表现稳定的品种桂夏豆119作为夏大豆皱叶症抗性鉴定实验对照；
（2）田间鉴定时在被鉴定材料两边行同时种植一行对照种，且在每行行头种植一穴对照种，每种鉴定材料的鉴定小区至少重复3个；具体种植模式参照图2。
（3）分别在大豆的V6期、R2期和R5期划定被测大豆植株区域，包括被鉴定材料和对照，统计被测区域内不同皱叶症症级的大豆植株数；
其中，皱叶症症级划分5个症级标准：
0级：正常，观测期冠层豆叶片无皱褶状，叶片平展；
1级：较正常，观测期冠层叶片轻微皱褶但不出现“勾手”状，叶片能平展；
2级：较敏感，观测期冠层叶片皱褶明显，有轻微的“勾手”状；
3级：敏感，观测期冠层大豆叶片皱褶严重，有明显的“勾手”状；
4级：严重敏感，观测期冠层叶片皱褶十分严重，“勾手”状严重，且叶片向下弯曲已基本不能张开；
（4）根据大豆皱叶症症级标准，统计各观测时期内被测区域内大豆各症级的大豆皱叶症病情指数DI，取田间重复平均值；
（5）根据皱叶症抗性级别划分标准和被鉴定材料病情指数，明确被鉴定材料皱叶症抗性等级；
根据皱叶症病情指数划定皱叶症分级标准如下：
1：高抗（HR），DI=0
3：抗（R），0<DI<30
5：中抗（MR），30<DI<60
7：感（S），60<DI<90
9：高感（HS），<90。
2018年采用上述方法对多个大豆品种进行田间试验鉴定。试验品种选择粤夏2016-5，金百夏1号，华夏17号，桂夏1703，桂夏豆118，桂夏1702，桂夏豆117，桂夏1701，金百夏2号，粤夏2016-3，桂夏1号,桂夏豆119，华夏16号，华夏2号，华夏3号，桂1505，华夏9号，桂1605，华夏14号和华夏17号。对照材料选择桂夏豆119。每种试验材料均设置3个试验小区，每个试验小区面积10㎡，种植密度1.33万株/亩，小区内种6行大豆，行距50cm，穴距20cm，每穴留两株。对大豆的V6期、R2期和R5期分别进行不同皱叶症症级的大豆植株数统计，并计算大豆皱叶症病情指数DI，结果如表2所示。
每个小区对照材料桂夏豆119皱叶症抗性级别并没有出现低于5级的小区，没有删除的小区数据。由上表可见，各个材料田间抗性表现较为稳定，数据可靠，并鉴定出高抗（HR）皱叶症的材料3份以及感（S）皱叶症的材料5份，如图3-4所示。
综上所述，本发明通过对大豆皱叶症田间发生情况调研研究，并跟踪皱叶程度强、表现稳定的对照品种，将其作为对照组来划分皱叶症症级（划分5个症级）。通过设置三组以上的实验组，分别对大豆的V6期、R2期和R5期的发病情况进行统计，计算病情指数，通过取各时期病情指数平均值即可较为客观地评价大豆的皱叶症抗性等级；评价结果准确而直观；通过上述鉴定方法对不同品种大豆进行皱叶症抗性鉴定，可有效筛选出抗性品种，有利于大豆皱叶症的进一步研究。
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。
Claims (6)
1.一种大豆皱叶症田间鉴定方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）选择皱叶程度高，皱叶表现稳定的品种作为对照；
（2）田间鉴定时候在被鉴定材料一旁种植对照品种，每种鉴定材料的鉴定小区至少重复3个；
（3）分别在大豆的V6期、R2期和R5期划定被测大豆植株区域，包括被鉴定材料和对照，统计被测区域内不同皱叶症症级的大豆植株数；
其中，皱叶症症级划分5个症级标准：
0级：正常，观测期冠层豆叶片无皱褶状，叶片平展；
1级：较正常，观测期冠层叶片轻微皱褶但不出现“勾手”状，叶片能平展；
2级：较敏感，观测期冠层叶片皱褶明显，有轻微的“勾手”状；
3级：敏感，观测期冠层大豆叶片皱褶严重，有明显的“勾手”状；
4级：严重敏感，观测期冠层叶片皱褶十分严重，“勾手”状严重，叶片向下弯曲已基本不能张开；
（4）根据大豆皱叶症症级标准，统计各观测时期内被测区域内大豆各症级的大豆皱叶症病情指数DI，取田间重复小区的平均值，然后取各观测时期大豆皱叶病情指数平均值D；
（5）根据皱叶症抗性级别划分标准和被鉴定材料病情指数平均值D，明确被鉴定材料皱叶症抗性等级；
根据皱叶症病情指数划定皱叶症分级标准如下：
1：高抗（HR），D=0
3：抗（R），0<D≤30
5：中抗（MR），30<D≤60
7：感（S），60<D≤90
9：高感（HS），90<D。
2.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤（2）中，在被鉴定材料两边行同时种植对照品种，在被鉴定材料两个行头每行种植1-2穴对照品种。
3.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤（4）中，若被鉴定材料田间小区对应对照抗性等级降低两个等级，则该组数据算丢失处理。
4.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤（4）中，病情指数DI的计算公式如下：
DI=[∑(N× R)/(M× T)]× 100 式中：Σ—调查病害相对病级数值及其株数或叶数乘积的总和； N—病害某一级别的植株数或叶数，单位为株或叶； R—病害的相对病级数值； M—病害的最高病级数值； T—调查总株数或总叶数，单位为株或叶。
5.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤（1）中，皱叶表现稳定的品种为：春大豆选择华春10号，夏大豆选择桂夏豆119。
6.根据权利要求1所述的鉴定方法，其特征在于，步骤（2）中，种植密度为：鉴定小区内种植2行以上鉴定材料，行长300cm以上，穴距20cm，每穴2株，春大豆行宽40cm，夏大豆行宽50cm，对照品种两个边行的种植规格同被鉴定材料。
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