CN111035618B - 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法 - Google Patents

一种蛋白质纳米颗粒的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111035618B
CN111035618B CN202010000749.1A CN202010000749A CN111035618B CN 111035618 B CN111035618 B CN 111035618B CN 202010000749 A CN202010000749 A CN 202010000749A CN 111035618 B CN111035618 B CN 111035618B
Authority
CN
China
Prior art keywords
protein
trail
nanoparticles
solution
small molecule
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010000749.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111035618A (zh
Inventor
李峻柏
崔巍
赵洁
李伟
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Chemistry CAS
Original Assignee
Institute of Chemistry CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Chemistry CAS filed Critical Institute of Chemistry CAS
Priority to CN202010000749.1A priority Critical patent/CN111035618B/zh
Publication of CN111035618A publication Critical patent/CN111035618A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111035618B publication Critical patent/CN111035618B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/38—Albumins
    • A61K38/385—Serum albumin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/41—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
    • A61K38/42—Haemoglobins; Myoglobins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/44—Oxidoreductases (1)
    • A61K38/443—Oxidoreductases (1) acting on CH-OH groups as donors, e.g. glucose oxidase, lactate dehydrogenase (1.1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4826—Trypsin (3.4.21.4) Chymotrypsin (3.4.21.1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/488—Aspartic endopeptidases (3.4.23), e.g. pepsin, chymosin, renin, cathepsin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1658—Proteins, e.g. albumin, gelatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y111/00—Oxidoreductases acting on a peroxide as acceptor (1.11)
    • C12Y111/01—Peroxidases (1.11.1)
    • C12Y111/01006—Catalase (1.11.1.6)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21004—Trypsin (3.4.21.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/23—Aspartic endopeptidases (3.4.23)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明涉及蛋白质纳米颗粒的制备方法。本发明所述蛋白纳米颗粒，由蛋白质或多肽与小分子肽通过分子间作用力组装得到；所述小分子肽由苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸和酪氨酸中的一种至三种构成；所述蛋白质包括血红蛋白、牛血清蛋白、肿瘤坏死因子超家族。其制备方法包括如下步骤：将蛋白质或多肽和所述小分子肽混合，静置，分离，即得所述蛋白质纳米颗粒。本方法制备蛋白质纳米颗粒具有快速、简单、高效以及极大程度保持蛋白质活性等优点，为蛋白质纳米材料的制备提供了新的方案。

Description

一种蛋白质纳米颗粒的制备方法
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体涉及具有良好生物兼容性的蛋白质纳米颗粒的制备方法，尤其涉及一种通过分子间作用力组装得到的纳米复合材料的制备合成方法。
背景技术
超分子自组装是指聚合物在疏水作用力、范德华力、氢键等非共价作用力的推动下，自发地形成具有特殊结构或形貌的聚集体的过程。有别于传统分子化学，超分子组装化学为科研工作者提供了一个制备高度络合化学体系的平台，他将化学、物理、分子生物学与纳米科学综合交叉起来的重要科学前沿，也是基础研究亟待发展的领域。作为一类先进的动态、非共价的组装材料，生物活性超分子组装体已经被大量开发了出来，并广泛应用于生物医药领域。多肽和蛋白质作为人体一切细胞、组织的重要成分，已经广泛的被作为组装基元去构筑功能性的生物材料。由于以蛋白质作为构筑基元，得到的纳米结构与性质更加贴近于天然蛋白质结构，这也使的蛋白质超分子结构具有优良的生物学和物理化学性能。超分子组装构造新型的功能化有序分子结构体系或组装器件，使得在纳米层次上模拟细胞、亚细胞器的功能成为可能。并能广泛地应用于生物医学领域，特别是在发展新型的药物/基因载体、器件和生物制品方面具有明显的优势。通过纳米技术制备的纳米仿生粒子用于药物/基因载体有着明显的优势，其中包括：(1)在药物吸收利用方面，通过将药物包封于修饰的纳米载体中，能够增加生物膜透过性提高利用度；(2)建立靶向控释系统，可在载体表面修饰，某种程度上保证药物在到达治疗位点前不被降解。
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand，TRAIL)是1995年由wiley等人从心肌和外周血液淋巴细胞中发现并命名，它是肿瘤坏死因子(TNF)家族新成员。TRAIL蛋白天然表达于特定的免疫细胞Natural-killer细胞和Cytotoxic T细胞表面，并能诱导Jurkat细胞和EB病毒转化的人淋巴细胞调亡。其生理功能主要包括免疫监视以及免疫介导的肺瘤抑制。
TRAIL通过与细胞表面相应受体的胞内死亡结构域结合，从而激活细胞调亡通路，最终导致细胞调亡。经研究表明TRAIL有5种特异性受体：2个死亡受体TRAIL-R1(DR4)、TRAIL-R2(DR5)、2个诱骗受体TRAIL-R3(DcR1)、TRAIL-R4(DcR2)以及1个可溶性受体护骨素(OPG)。其中死亡受体DR4和DR5均是Ⅰ型跨膜蛋白，含有细胞内死亡结构域，可与TRAIL结合形成复合体而被激活，传导凋亡信息至细胞质内最终引起细胞凋亡；而诱骗受体DcR1、DcR2，虽与死亡受体具有一定的同源性，但二者最大的区别在于DcR1缺少跨膜成分及胞内区域而DcR2的胞内区仅有一段不完整的死亡结构域，故虽可与TRAIL结合却不能诱导细胞凋亡，表现为抑制凋亡，亦称为“诱骗”受体。大量研究表明DR4和DR5在肿瘤细胞和正常细胞中的表达水平相当，DcR1和DcR2虽在各种正常组织内广泛表达但在肿瘤细胞中却低表达甚至不表达。由于存在这种竞争性的表达差异，TRAIL能够选择性地诱导肿瘤细胞、病毒感染细胞发生凋亡，而对大多数正常细胞基本无毒害作用。因此,TRAIL已经成为许多研究的热点，并被认为是一种更为安全且极具潜力的抗肿瘤因子，极有可能成为新一代的抗肿瘤药物。
TRAIL作为蛋白药物在应用过程中存在着不稳定和半衰期过短(大约30分钟)的缺点，这意味着TRAIL难以维持在肿瘤周围的有效治疗浓度。Lim通过研究发现，将TRAIL与高分子化合物复合，得到的纳米复合体能够延长TRAIL在体内的半衰期时间，并且提高其抗肿瘤活性。Perlstein等人通过共价键将TRAIL修饰于磁性氧化铁纳米颗粒表面，发现修饰TRAIL后的纳米粒子比游离态TRAIL诱导胶质瘤和GSCs细胞凋亡的能力明显增强。以上的研究结果的产生主要归结于两点原因：一、TRAIL被包裹于纳米粒子内部或接枝在纳米粒子表面，使得整个体系对TRAIL起到保护作用，防止其被生物体内酶所降解；二、由于实体瘤的高通透性和滞留效应(EPR)效应的存在(实体瘤组织中血管丰富、血管壁间隙较宽、结构完整性差，淋巴回流缺失，造成大分子类物质和脂质颗粒具有选择性高通透性和滞留性),促进了负载TRAIL的纳米颗粒在肿瘤组织的选择性分布，增加TRAIL的药效并减少药物在正常组织中的分布。然而现有技术中通过共价键进行修饰涉及化学反应，易导致蛋白活性的降低。
发明内容
本发明的目的是提供一种蛋白质纳米颗粒。
本发明所提供的蛋白质纳米颗粒，由蛋白质或多肽与小分子肽通过分子间作用力组装得到；
所述蛋白质或多肽为功能性蛋白或多肽；
所述蛋白质具体可为水溶性蛋白分子，可为肿瘤坏死因子超家族成员(TRAIL)、血红蛋白、牛血清蛋白、人血清蛋白、胃蛋白酶、胰蛋白酶、过氧化氢酶中的一种或多种；
所述小分子肽由苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸和酪氨酸中的一种至三种构成；
所述小分子肽具体可为二苯丙氨酸；
所述小分子肽为二苯丙氨酸时，所述蛋白质或多肽的氨基酸结构中包含FF“二苯丙氨酸”序列；
所述分子间作用力包括但不局限于静电作用力、氢键、范德华力、疏水作用力、芳环堆积作用；
所述蛋白质或多肽与小分子肽的质量比可为：1-5:1；具体可为：1:1、2:1、5:2或5:1。
本发明还提供一种制备上述蛋白质纳米颗粒的方法。
本发明所提供的制备蛋白质纳米颗粒的方法，包括如下步骤：
1)配制蛋白质或多肽溶液；
2)配制小分子肽溶液；
3)将蛋白质或多肽溶液与小分子肽溶液混合；
4)静置；
5)离心去除未反应的原料，收集纳米颗粒，即得。
上述方法步骤1)中，所述蛋白质或多肽溶液中，蛋白质或多肽的浓度可为1-5mg/mL，具体可为1-3mg/mL；
所述蛋白质或多肽溶液中所用溶剂为能溶解所述蛋白质或多肽的物质；
所述蛋白质为TRAIL时，所用溶剂为磷酸盐缓冲溶液；
步骤2)中，所述小分子肽溶液中所用溶剂为能溶解所述小分子肽的物质；
所述小分子肽为二苯丙氨酸时，所用溶剂可为六氟异丙醇；
步骤3)中，所述蛋白质或多肽溶液中蛋白质或多肽与所述小分子肽溶液中的小分子肽的质量比可为1-5:1；具体可为：1:1、2:1、5:2或5:1；
混合后体系中，所述小分子肽的浓度可为1-5mg/mL,具体可为1-3mg/mL；
步骤4)中，所述静置的时间可为5-15min；
步骤5)中，所述离心的转速可为8000-12000rpm，时间可为10-20min；
所述离心可进行多次，具体可为3次。
本发明还提供一种TRAIL纳米颗粒。
本发明所提供的TRAIL纳米颗粒，由TRAIL与二苯丙氨酸通过分子间作用力组装得到。
所述TRAIL纳米颗粒通过包括如下步骤的方法制备得到：
a)配制TRAIL溶液；
b)配制二肽溶液；
c)将两种溶液迅速混合，静置；
d)进行离心分离处理，去掉未反应的原料物，收集TRAIL纳米颗粒，即得。
步骤a)中，所述溶液中TRAIL蛋白浓度可为1-5mg/mL，具体是1-3mg/mL；
步骤b)中，所述二肽具体可为二苯丙氨酸；
所述二肽溶液具体可为二苯丙氨酸的六氟异丙醇溶液；
步骤c)中，混合后体系中二肽的浓度可为1-5mg/mL，具体是1-3mg/mL；
所述静置的时间可为5-15min；
步骤d中，所述离心转速可为9000-10000rpm，时间可为10-20min。
上述蛋白质纳米颗粒在药物载体及制备治疗肿瘤的药物中的应用也属于本发明的保护范围。
所述蛋白质为TRAIL时，TRAIL纳米颗粒在制备治疗肿瘤的药物中的应用也属于本发明的保护范围。
上述应用中，所述肿瘤为癌，所述癌可为肺癌或乳腺癌。
所述肺癌具体可为大细胞肺癌。
本发明采用超分子组装技术，通过超分子作用力，制备具有药物活性的蛋白质-二肽纳米药物载体。这种以分子间相互作用为驱动力形成的纳米药物载体，避免了共价键的引入，能够在很大程度上保持蛋白药物的活性。
本发明提供的基于蛋白质的复合纳米颗粒，是本发明的发明人发展起来的新型体系，在目前期刊和文献中并未出现公开过。
附图说明
图1是不同制备条件下制备得到的纳米颗粒的扫描电镜图片，A)1:1,B)2:1,C)5:1,和D,E)5:2；
图2是不同制备条件下制备得到的纳米颗粒的粒径分布图，1:1,2:1,5:1和5:2；
图3是TRAIL蛋白纳米颗粒对H460细胞的抑制曲线。
图4是TRAIL蛋白纳米颗粒和TRAIL对MCF-7细胞的抑制活性对比。
图5是血红蛋白与二肽组装形成的纳米颗粒的扫描电镜图片。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、生物材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
按照本发明的方法，称取1mg TRAIL蛋白溶于1mL的磷酸盐缓冲溶液中；称取1mg的二苯丙氨酸溶于8μL的六氟异丙醇中。将上述两种溶液快速混合，静置10min；离心10min，转速10000rpm。吸去上层清液，清洗纳米颗粒沉淀3次。
实施例2
按照本发明的方法，称取2mg TRAIL蛋白溶于1mL的磷酸盐缓冲溶液中；称取1mg的二苯丙氨酸溶于8μL的六氟异丙醇中。将上述两种溶液快速混合，静置10min；离心10min，转速10000rpm。吸去上层清液，清洗纳米颗粒沉淀3次。
实施例3
按照本发明的方法，称取5mg TRAIL蛋白溶于1mL的磷酸盐缓冲溶液中；称取1mg的二苯丙氨酸溶于8μL的六氟异丙醇中。将上述两种溶液快速混合，静置10min；离心10min，转速10000rpm。吸去上层清液，清洗纳米颗粒沉淀3次。
实施例4
按照本发明的方法，称取5mg TRAIL蛋白溶于1mL的磷酸盐缓冲溶液中；称取2mg的二苯丙氨酸溶于8μL的六氟异丙醇中。将上述两种溶液快速混合，静置10min；离心10min，转速10000rpm。吸去上层清液，清洗纳米颗粒沉淀3次。
图1是实施例1-4中不同制备条件下制备得到的纳米颗粒的扫描电镜图片，A)1:1,B)2:1,C)5:1,和D,E)5:2；
图2为实施例1-4中不同制备条件下制备得到的纳米颗粒的粒径分布图，1:1,2:1,5:1和5:2；
由图1和2可知制备得到的纳米颗粒为球形，其直径为100-700nm。
实施例5
将实施例1中制备得到的蛋白质纳米颗粒加入到水中，配制成不同浓度的悬浮液，分别加入H460细胞在96孔板中共同培养24h，通过细胞毒性实验检测不同浓度的蛋白质纳米颗粒对H460细胞的抑制情况，得到半数抑制浓度。
图3是蛋白纳米颗粒对H460细胞的抑制曲线。
由图3可知：其半数抑制浓度在280ng/mL。
实施例6
将实施例1中制备得到的蛋白质纳米颗粒加入到水中，配制成不同浓度的悬浮液，分别加入MCF-7细胞在96孔板中共同培养24h，通过细胞毒性实验检测不同浓度的蛋白质纳米颗粒对MCF-7细胞的抑制情况，初始浓度为1mg/mL,依次稀释10x，100x，1000x。
图4是TRAIL蛋白纳米颗粒和TRAIL对MCF-7细胞的抑制活性对比。
由图4可以看出，TRAIL蛋白纳米颗粒很好地保持了TRAIL蛋白对MCF-7细胞的抑制活性。
结论
以蛋白质和肽分子为组装基元，以超分子组装技术，通过分子间作用力组装制备得到蛋白质纳米颗粒。制备得到的纳米粒子尺寸均一、分散性好，且极大程度上保持了原料蛋白的生物活性，对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。
实施例7
参照实施例1的方法，将血红蛋白与二肽(FF)组装形成纳米颗粒。对制得的血红蛋白纳米颗粒进行表征，如图5所示。
尽管本发明已经参照附图和优选实施例进行了说明，但是，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。本发明的各种更改、变化、和等同物由所附的权利要求书的内容涵盖。

Claims (7)

1.一种蛋白质纳米颗粒，由蛋白质与小分子肽通过分子间作用力组装得到；
所述蛋白质为TRAIL；所述小分子肽为二苯丙氨酸。
2.制备权利要求1所述的蛋白质纳米颗粒的方法，包括如下步骤：
1)配制蛋白质溶液；
2)配制小分子肽溶液；
3)将蛋白质溶液与小分子肽溶液混合；
4)静置；
5)离心去除未反应的原料，收集纳米颗粒，即得。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤1)中，所述蛋白质溶液中，蛋白质的浓度为1-5mg/mL；
步骤3)中，所述蛋白质溶液中蛋白质与所述小分子肽溶液中的小分子肽的质量比为1-5:1；
混合后体系中，所述小分子肽的浓度为1-5mg/mL。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：步骤4)中，所述静置的时间为5-15min；
步骤5)中，所述离心的转速为8000-12000rpm，时间为10-20min；
所述离心进行多次。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述离心的次数为3次。
6.权利要求1所述的蛋白质纳米颗粒在制备药物载体或制备治疗肿瘤的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为癌，所述癌为肺癌或乳腺癌。
CN202010000749.1A 2020-01-02 2020-01-02 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法 Active CN111035618B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010000749.1A CN111035618B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010000749.1A CN111035618B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111035618A CN111035618A (zh) 2020-04-21
CN111035618B true CN111035618B (zh) 2021-08-10

Family

ID=70243532

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010000749.1A Active CN111035618B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111035618B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104548069A (zh) * 2013-10-25 2015-04-29 四川大学 具有缓释性能的多肽-降钙素超分子聚集体及其制备方法
CN106890135A (zh) * 2017-03-07 2017-06-27 中国科学院化学研究所 一种pH响应性肽基水凝胶及其制备方法与应用
WO2017125933A1 (en) * 2016-01-21 2017-07-27 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Formation of functionalized nanoparticles by supramolecular co-assembly

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105012271B (zh) * 2015-07-06 2018-06-19 沈阳大学 一种共担载阿霉素和trail的白蛋白纳米粒靶向制剂及制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104548069A (zh) * 2013-10-25 2015-04-29 四川大学 具有缓释性能的多肽-降钙素超分子聚集体及其制备方法
WO2017125933A1 (en) * 2016-01-21 2017-07-27 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Formation of functionalized nanoparticles by supramolecular co-assembly
CN106890135A (zh) * 2017-03-07 2017-06-27 中国科学院化学研究所 一种pH响应性肽基水凝胶及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
肽类小分子自组装：分子设计、结构调控与功能化应用;谢燕燕;《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊）工程科技I辑》;20180930;第3页第1.1.1.1节，第5页第1.1.2.1节，第7页第1.1.2.2节，第9页第1.1.2.3节，第10页第1.1.2.5节，第16页第1.1.4.4-1.1.4.5节 *
自组装肽基纳米材料运载药物和基因的研究进展;唐丽丽，等;《化工学报》;20121130;第63卷(第11期);第3384-3385页第1节，第3385-3386页第2节，第3386-3387页第2.4节，第3389页第5节 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN111035618A (zh) 2020-04-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Salehiabar et al. Production of biological nanoparticles from bovine serum albumin as controlled release carrier for curcumin delivery
Zhang et al. On the chemical synthesis and drug delivery response of folate receptor-activated, polyethylene glycol-functionalized magnetite nanoparticles
CN102327230B (zh) 一种包裹紫杉烷类药物的蛋白纳米颗粒及其制备方法
US20070116768A1 (en) Sustained release preparations composed of biocompatible complex microparticles
EP1614694A1 (en) Titanium dioxide complex having molecule distinguishability
CN112048002B (zh) 一种靶向t细胞的酶敏感纳米体系及其制备方法和应用
EP3405429B1 (en) Formation of functionalized nanoparticles by supramolecular co-assembly
Wu et al. Nano-sized albumin-copolymer micelles for efficient doxorubicin delivery
CN104415338A (zh) 主动靶向型抗肿瘤药物及其制备方法
CN113599368A (zh) 一种细胞膜拮抗联合纳米酶的仿生载药纳米系统、制备方法和用途
CN116983283A (zh) 一种负载核酸及示踪剂工程化细胞外囊泡的制备方法
Cheng et al. Synthesis, characterization, and evaluation of redox-sensitive chitosan oligosaccharide nanoparticles coated with phycocyanin for drug delivery
CN114224838B (zh) 一种肿瘤微环境激活的融合膜包裹的仿生纳米递送系统及其制备方法及应用
CN105727305B (zh) 一种Legumain响应释放阿霉素缓释纳米制剂及制备方法与作为制备载体药物的应用
CN111035618B (zh) 一种蛋白质纳米颗粒的制备方法
JP2005314409A (ja) 分子識別能を有する二酸化チタン複合体を含む分散液
Narayanan et al. PTH 1-34 loaded thiolated chitosan nanoparticles for osteoporosis: oral bioavailability and anabolic effect on primary osteoblast cells
Griveau et al. Characterization and quantification of the interaction between the NFL-TBS. 40‐63 peptide and lipid nanocapsules
CN111135314A (zh) 一种用于胃癌早期诊断和治疗的纳米复合物及其制备方法
CN103120797B (zh) 还原响应的纳米药物载体、纳米药物颗粒与纳米药物颗粒制剂及其制备方法
Kolitz-Domb et al. Engineered narrow size distribution high molecular weight proteinoids, proteinoid-poly (L-lactic acid) copolymers and nano/micro-hollow particles for biomedical applications
TWI472341B (zh) 寡聚物奈米顆粒複合體釋放系統
CN111821467B (zh) 一种靶向载药颗粒及其制备方法
CN112118870A (zh) 用于治疗方法和非医学用途的具有非共价结合的靶向部分的纳米颗粒
Kuşat et al. Advanced functional polymers for biomedical applications: drug, sensor, diagnosis, and prognosis

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant