CN110771538B - 一种大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法 - Google Patents
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Abstract
一种大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法,涉及海水鱼类良种选育方法。1)亲本的选择与标记;2)亲本的强化培育;3)亲鱼催产孵化;4)鱼苗标准化培育。其技术路线清晰,目标明确,可操作性和通用性强,主要通过亲本的选择与标记、亲鱼催产孵化、鱼苗标准化培育等步骤实现定向交配的家系构建与培育,可以有效排除环境因素的影响,准确高效地筛选出目标性状家系。
Description
技术领域
本发明涉及海水鱼类良种选育方法,尤其是涉及一种大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法。
背景技术
大黄鱼(Larimichthyscrocea)系鲈形目(Perciformes)石首鱼科(Sciaenidae)黄鱼属(Larimichthys)重要代表性鱼类,曾经是我国东南沿海地区最重要的渔业捕捞对象之一,一度位列我国东海渔业资源的“旗舰物种”。在上个世纪70年代大黄鱼渔业资源迅速衰竭后,福建省宁德市于90年代成功实现了大黄鱼人工繁殖和养殖,大黄鱼养殖产业迅速崛起,近年来已经形成年产量近20万吨的养殖规模,位列我国海水鱼类养殖产业之首,带动了我国海水鱼类人工养殖的浪潮,成为我国“以养代捕”的典范。
以海水鱼类产量最高的大黄鱼为典型选育对象,培育具有优良经济性状的种苗、建立标准化生产技术体系、让企业实现产业化应用和推广,将极大地规范大黄鱼养殖生产、保障消费安全、促进大黄鱼产业绿色、可持续发展。大黄鱼种业标准化生产技术体系的建立将辐射带动其他海水养殖品种种业的标准生产进程,加快建设现代水产种业体系,即加快研发优良品种的培育与繁育技术体系、健全良种培育和苗种繁育产业体系。
家系选育作为选择育种的方法之一,主要通过增加育种群体内有价值的基因频率来达到提高和稳定主要经济性状的目的。作为传统选择育种技术,家系选育在水产动物优良品种选育上得到的应用较多。近年来,国内外学者已经通过建立家系,对鱼类、虾类、贝类等经济水生动物展开系统定向选育,并取得了良好进展。
发明内容
本发明的目的在于提供一种大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法。
本发明包括以下步骤:
1)亲本的选择与标记;
在步骤1)中,所述亲本的选择与标记的具体方法可为:
1.1亲本选择
在候选亲鱼群体中,以质量和体型为主要参考指标,挑选体形匀称、体质健壮、鳞片完整、无病无伤、性腺发育成熟的2龄个体作为构建家系的亲鱼;成熟雌鱼选择上下腹部均较膨大,卵巢轮廓明显,腹部朝上时,中线凹陷,用手触摸有柔软与弹性感,吸出的卵粒易分离、大小均匀的个体;成熟雄鱼选择轻压腹部有乳白色浓稠的精液流出,精液在水中呈线状,且能很快散开的个体;雌鱼体质量≥600g/尾,雄鱼体质量≥550g/尾;测量并记录鱼体形态性状;
1.2PIT标记
用4%~6%的MS-222麻醉筛选出的亲鱼,在第二背鳍基部右侧1~2cm处用专用注射器将PIT标记缓缓推入肌肉,用扫码器读出标记号并记录。
2)亲本的强化培育;
在步骤2)中,所述亲本的强化培育的具体方法可为:
2.1培育的放养密度、环境条件及养殖管理
亲本培育池池壁光滑,面积45~100m2,水深1.7~3m;放养密度为1.0~2.0kg/m3,水温按2~3℃/d的幅度升温至21~22℃;盐度23~30;每1.5~2.0㎡池底布设散气石,连续充气,溶解氧≥5mg/L;光照度500~1000lx,保持环境安静,每日换水;
2.2饲料投喂
饲料主要投喂牡蛎、鲜鱼等鲜活饵料或大黄鱼专用人工配合饲料,鲜饲料应切成亲鱼适口的块状,洗净、沥干后投喂;沙蚕等活饵料应用淡水浸泡消毒约5~10min后投喂。水温21~22℃时,鲜活饵料日投饵率为5%~7%,人工配合颗粒饲料日投饵率为1.5%~2.0%;每日投饵2次,早晨与傍晚各1次;所述饵料可包括褶皱臂尾轮虫(Brachionusplicatilis)、卤虫(Artemiaparthenogenetica)无节幼体、桡足类(Copepod)及其幼体、微颗粒人工配合饲料;所述微颗粒人工配合饲料含量标准可为:48%≤粗蛋白≤62%,8%≤粗脂肪≤12%,1.5%≤钙≤4.5%,0.8%≤总磷≤2.0%,水份≤10%。
3)亲鱼催产孵化;
在步骤3)中,所述亲鱼催产孵化的具体方法可为:
3.1催产注射
采用4%~6%的MS-222麻醉,直至亲鱼失去平衡,LRH-A3的雌鱼单位注射剂量1.0~5.0μg/kg,雄鱼单位注射剂量约为雌鱼的1/2,将麻醉后的亲鱼捞至注射台上,注射催产剂;所述催产剂可用LRH-A3(鱼用促黄体素释放激素类似物3号)等激素;所述注射可采用一次注射法或两次注射法,两次注射的时间相隔24~28h,第一次注射总剂量约20%~30%,第二次注射总剂量约70%~80%;雄鱼在雌鱼第二次注射时同时进行一次性注射。
3.2人工授精
催产后药物效应时间为8~16h,再进行干法人工受精,自胸向腹部挤压将卵产入光滑器具内;采用同样方法将雄鱼的精液射入鱼卵,搅拌混匀5~10s后倒入过滤的海水200~300ml,继续混匀5~10s;
3.3孵化
孵化密度1.5~2.5万粒/m3以下,孵化过程中,微充气,避免环境突变与阳光直接照射;检查受精卵的胚胎发育状况,在仔鱼将孵出前,停气吸除沉底的死卵与污物,并换水20%~30%。
4)鱼苗标准化培育;
在步骤4)中,所述鱼苗标准化培育的具体方法可为:
4.1仔稚鱼培育
仔稚鱼培育池即为孵化池,待鱼苗开始投喂至全长2~3cm时进行第一次数量标准化:各家系随机选取20000尾转移到海上养殖网箱继续培育;所述孵化池可采用4m×1.6m×1.3m的水泥池;所述海上养殖网箱可采用8m×4m×5m的海上半潜式网箱;所述转移到海上养殖网箱的方法可为:用塑料软管虹吸至停靠在育苗室旁的活水运输船,用活水运输船运输至海上养殖网箱;所述培育的水温以23~25℃为宜,盐度以23~30为宜,光照强度以500~1000lx为宜,溶解氧以≥5mg/L为宜。
4.2鱼苗中间培育
待步骤4.1阶段的鱼苗培育至全长7~10cm时进行第二次数量标准化:各家系随机选取5000尾转移继续培育。
4.3家系后期培育
待步骤4.2阶段的鱼苗长至100~150g鱼种时进行PIT标记和标准化养殖,期间每隔30~45天测量分析各家系子代的全长、体长及体质量,比较各家系平均值,挑选出生长快速或具有其他优良经济性状的优良家系,即完成大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法。
本发明具有以下突出优点和有益效果:
本发明技术路线清晰,目标明确,可操作性和通用性强,主要通过亲本的选择与标记、亲鱼催产孵化、鱼苗标准化培育等步骤实现定向交配的家系构建与培育,可以有效排除环境因素的影响,准确高效地筛选出目标性状家系。
具体实施方式
以下实施例将对本发明作进一步的补充。
本发明从人工养殖的大黄鱼群体中挑选性成熟的大黄鱼组成基础群体进行大黄鱼家系构建和优良家系选育试验,具体包括以下步骤:
1、大黄鱼亲本选择
1.1亲本选择
从人工养殖的大黄鱼群体中,以体质量和体型为主要参考指标,挑选体形匀称、体质健壮、鳞片完整、无病无伤、性腺发育成熟的2龄个体50对作为构建家系的亲鱼,雌鱼体质量≥600g/尾,雄鱼体质量≥550g/尾,测量并记录鱼体形态性状。
1.2PIT标记
用5%的MS-222麻醉筛选出的亲鱼,在第二背鳍基部右侧1cm处用专用注射器将PIT标记缓缓推入肌肉,用扫码器读出标记号并记录。
2、亲本的强化培育
2.1培育的放养密度、环境条件及养殖管理
亲本培育池为池壁光滑的水泥池,面积50m2,水深2.3m;亲鱼入池前,消毒、清洗培育池;放养密度为1.0kg/m3。亲鱼入池时,水温与海区水温保持一致,此后水温按2℃/d的幅度升温至22℃;盐度28;每1.5㎡池底布设散气石1个,连续充气,溶解氧≥5mg/L。光照度500lx~1000lx,保持环境安静。每日换水1次,每次换水量为100%。
2.2饲料投喂
饲料主要投喂牡蛎、鲜鱼等鲜活饵料或大黄鱼专用人工配合饲料。鲜饲料应切成亲鱼适口的块状,洗净、沥干后投喂。沙蚕等活饵料应用淡水浸泡消毒约5min后投喂。水温21~22℃时,鲜活饵料日投饵率为5%,人工配合颗粒饲料日投饵率为1.5%;每日投饵2次,早晨与傍晚各1次。
3、亲鱼催产孵化
3.1催产注射
采用5%的MS-222麻醉,直至亲鱼失去平衡。催产剂采用LRH-A3(鱼用促黄体素释放激素类似物3号),雌鱼单位注射剂量为3.0μg/kg,雄鱼单位注射剂量约为雌鱼的1/2。将麻醉后的亲鱼捞至注射台上,注射催产剂。注射部位为胸腔。采用两次注射法,注射的时间相隔约24h,即13:00~14:00,第一次注射成熟雌鱼25尾,注射剂量为总剂量的20%;即隔天13:00~14:00,第二次注射雌鱼,注射剂量为总剂量的80%。雄鱼在雌鱼第二次注射的同时进行一次性注射。
3.2人工授精
开始密切观察鱼群追逐情况和叫声情况,每15min观察一次,因大黄鱼应激性强,整个过程保持安静。检查发现鱼群追逐并发出“咕咕咕”叫声,遂开始进行干法人工受精。轻轻拭干鱼体,用毛巾包起鱼的头部和尾部,使鱼腹部朝外,自胸向腹部挤压将卵产入光滑烧杯内(1L);采用同样方法将雄鱼的精液射入鱼卵,用羽毛轻轻搅动混匀5~10s后倒入过滤的海水200~300mL,继续混匀5~10s,共授精20个全同胞家系。
在50L已编号的圆锥柱状水桶中加入过滤海水,保持充气状态。将采集到的每对亲本的受精卵倒入对应号码的水桶中,记录与之对应的亲本PIT号,保持充气10min后,停止充气并静置5min,用80目的筛绢捞网捞取浮在表层的受精卵置于孵化池中,沉于底部的为坏卵,弃用。
3.3孵化
所有孵化池在同一个车间,进行编号,号码与圆锥柱状水桶一一对应。孵化密度2万粒/m3以下。孵化过程中,微充气,避免环境突变与阳光直接照射;检查受精卵的胚胎发育状况,在仔鱼将孵出前,停气吸除沉底的死卵与污物,并换水20%~30%。根据各家系孵化率的高低,选择了12个家系进行培育,编号分别为2018-JX-1~2018-JX-12。
4、鱼苗培育
4.1仔稚鱼培育
仔稚鱼培育池即为孵化池,所有仔稚鱼培育池所在车间内保持水温、盐度、光照、溶解氧、饵料以及培育水体一致。开始投喂直至全长2~3cm,大黄鱼子稚鱼苗投喂饵料类别及投喂量如表1所示,家系构建统计表参见表2。
表1
表2
各家系随机测量60尾,全长均超过2cm,进行第一次数量标准化:各家系随机选取20000尾转移到海上养殖网箱继续培育至全长7~10cm,培育池编号与孵化池一一对应。多余的仔稚鱼并入生产中培育。
4.2鱼苗中间培育
各家系随机测量60尾,全长均超过7cm,进行第二次数量标准化:各家系随机选取5000尾转移到新换网衣的网箱中继续培育至100~150g。
4.3家系后期培育
各家系随机测量60尾,体质量均超过100g,各家系随机选取300尾进行PIT标记,然后混合在同一网箱中进行标准化养殖。期间每隔30天测量分析各家系子代的全长、体长及体质量,比较各家系平均值,挑选出生长快速或具有其他优良经济性状的优良家系作为后备亲鱼培育至性成熟。再进行新一轮的测量、配组、催产孵化、培育,直至4~5代家系选育。
4.4大黄鱼生长快速家系的筛选
大黄鱼生长至14月龄时,每个家系随机抽样50尾进行体质量、全长、体长测定。分别计算各个家系体质量、全长、体长的平均数,14月龄大黄鱼家系生物学性状测定结果如表3所示。
表3
家系编号 | 月龄(月) | N | 体长(cm) | 全长(cm) | 体重(g) |
2018-JX-1 | 14 | 50 | 15.52±3.43 | 18.30±3.90 | 67.61±22.79 |
2018-JX-2 | 14 | 50 | 14.02±1.38 | 16.74±1.58 | 63.10±20.47 |
2018-JX-3 | 14 | 50 | 20.08±2.49 | 23.21±2.67 | 162.37±47.81 |
2018-JX-4 | 14 | 50 | 19.18±2.37 | 22.18±2.60 | 162.04±54.64 |
2018-JX-5 | 14 | 50 | 14.48±2.04 | 16.99±2.24 | 81.61±28.98 |
2018-JX-6 | 14 | 50 | 15.63±3.50 | 18.31±3.77 | 93.54±46.92 |
2018-JX-7 | 14 | 50 | 15.00±1.13 | 17.72±1.29 | 61.34±13.44 |
2018-JX-8 | 14 | 50 | 15.45±2.11 | 17.98±2.29 | 69.95±27.67 |
2018-JX-9 | 14 | 50 | 14.65±1.39 | 17.41±1.53 | 62.45±21.51 |
2018-JX-10 | 14 | 50 | 16.11±1.73 | 18.76±1.92 | 75.66±24.23 |
从表3可以看出,家系2018-JX-3和2018-JX-4的生长速度显著高于其余几个家系。由此可以成功筛选出快速生长的家系2018-JX-3和2018-JX-4。
Claims (1)
1.一种大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)亲本的选择与标记;
1.1)亲本选择
在候选亲鱼群体中,以质量和体型为主要参考指标,挑选体形匀称、体质健壮、鳞片完整、无病无伤、性腺发育成熟的2龄个体作为构建家系的亲鱼;成熟雌鱼选择上下腹部均膨大,卵巢轮廓明显,腹部朝上时,中线凹陷,用手触摸有柔软与弹性感,卵粒易分离、大小均匀的个体;成熟雄鱼选择轻压腹部有乳白色浓稠的精液流出,精液在水中呈线状,且能很快散开的个体;雌鱼体质量≥600g/尾,雄鱼体质量≥550g/尾;测量并记录鱼体形态性状;
1.2)PIT标记
用4%~6%的MS-222麻醉筛选出的亲鱼,在第二背鳍基部右侧1~2cm处用专用注射器将PIT标记缓缓推入肌肉,用扫码器读出标记号并记录;
2)亲本的强化培育;
2.1)培育的放养密度、环境条件及养殖管理
亲本培育池池壁光滑,面积45~100m2,水深1.7~3m;放养密度为1.0~2.0kg/m3,水温按2~3℃/d的幅度升温至21~22℃;盐度23~30;每1.5~2.0m2池底布设散气石,连续充气,溶解氧≥5mg/L;光照度500~1000lx,保持环境安静,每日换水;
2.2)饲料投喂
饲料主要投喂鲜活饵料或大黄鱼专用人工配合饲料,所述鲜活饵料为牡蛎、鲜鱼、沙蚕活饵料,所述鲜鱼饲料应切成亲鱼适口的块状,洗净、沥干后投喂;所述沙蚕活饵料应用淡水浸泡消毒5~10min后投喂;水温21~22℃时,鲜活饵料日投饵率为5%~7%,大黄鱼专用人工配合饲料日投饵率为1.5%~2.0%;每日投饵2次,早晨与傍晚各1次;
3)亲鱼催产孵化;
3.1)催产注射
采用4%~6%的MS-222麻醉,直至亲鱼失去平衡,LRH-A3的雌鱼单位注射剂量1.0~5.0μg/kg,雄鱼单位注射剂量为雌鱼的1/2,将麻醉后的亲鱼捞至注射台上,注射催产剂;
3.2)人工授精
催产后药物效应时间为8~16h,再进行干法人工受精,自胸向腹部挤压将卵产入光滑器具内;采用同样方法将雄鱼的精液射入鱼卵,搅拌混匀5~10s后倒入过滤的海水200~300ml,继续混匀5~10s;
3.3)孵化
孵化密度1.5~2.5万粒/m3,孵化过程中,微充气,避免环境突变与阳光直接照射;检查受精卵的胚胎发育状况,在仔鱼将孵出前,停气吸除沉底的死卵与污物,并换水20%~30%;
4)鱼苗标准化培育:
4.1)仔稚鱼培育
仔稚鱼培育池即为孵化池,待鱼苗开始投喂至全长2~3cm时进行第一次数量标准化:各家系随机选取20000尾转移到海上养殖网箱继续培育;
4.2)鱼苗中间培育
待步骤4.1)阶段的鱼苗培育至全长7~10cm时进行第二次数量标准化:各家系随机选取5000尾转移继续培育;
4.3)家系后期培育
待步骤4.2)阶段的鱼苗长至100~150g鱼种时进行PIT标记和标准化养殖,期间每隔30~45天测量分析各家系子代的全长、体长及体质量,比较各家系平均值,挑选出生长快速的优良家系,即完成大黄鱼家系构建及优良家系选育的方法;
所述步骤3)中,所述催产剂采用LRH-A3激素;所述注射采用一次注射法或两次注射法,两次注射的时间相隔24~28h,第一次注射总剂量20%~30%,第二次注射总剂量70%~80%;雄鱼在雌鱼第二次注射时同时进行一次性注射;
所述步骤4)中,所述孵化池采用4m×1.6m×1.3m的水泥池;所述海上养殖网箱采用8m×4m×5m的海上半潜式网箱;所述转移到海上养殖网箱的方法为:用塑料软管虹吸至停靠在育苗室旁的活水运输船,用活水运输船运输至海上养殖网箱;所述仔稚鱼培育的水温为23~25℃,盐度为23~30,光照强度为500~1000lx,溶解氧≥5mg/L。
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