CN110680554B - 一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，包括手术固定板、四肢固定柱、扩张器固定柱、颈部垫高枕、手术窗扩张器、分离穿线器、颈动脉两端阻断器、穿刺器、栓线。其优点表现在：精简并规范化造模实验用具，保障实验操作更具规范性与可重复性；实验中将鼠颈部置于颈部垫高柱，利于鼠的颈动脉的曝露；手术窗扩张器可以代替弯头细镊，起到固定作用；分离穿线器可以简化上述操作，达到分离、穿线、引线同时进行；穿刺器与栓线形成“套管”结构，针线一体化，伤口小，对外渗血少，且不易误剪血管外膜及神经；不需要使用更多的手术线进行血管结扎操作，不会干扰手术视野；栓线头是类球形，利于栓线在血管中通行，并防止损伤血管壁。
Description
技术领域
本发明涉及实验用具技术领域，具体地说，是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件。
背景技术
脑卒中是一种急性脑血管疾病，是由于脑部血管突然破裂或因血管阻塞导致血液不能流入大脑而引起脑组织损伤的一组疾病，包括缺血性和出血性卒中。缺血性卒中占脑卒中总数的60％-70％，具有高发病率、高病死率、高致残率的特点。所以研究缺血性脑卒中的病因病机及探索脑卒中治疗方法有重大意义，制备相关动物模型是研究脑卒中的重要途径。
大脑中动脉阻塞(MCAO)模型是研究缺血性脑中风的经典动物模型， Koizumi等人建立了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型。该模型可保证缺血部位恒定，可进行再灌注，模拟了人类永久性及短暂性局灶性脑缺血的不同状态且不需开颅，能对缺血及再通时间进行准确控制，手术难度相对较小，大鼠死亡率和术后并发症发生低。其原理是用尼龙材料线经颈内动脉插入动物大脑中动脉，阻塞血流造成局部脑缺血。
一般模型制备的方法是：1)动物麻醉后仰卧位固定在鼠板上，剪毛后常规消毒，使用手术剪沿颈正中线作2-3厘米开口。2)用弯头细镊沿正中钝性分离筋膜及肌肉组织，暴露使支气管暴露，沿一侧胸锁乳突肌腱向下寻找颈动脉。3)用弯头止血钳小心地分离动脉鞘，分离期间不能伤及伴行颈动脉的迷走神经，否则实验动物即刻死亡。随后分离颈总、颈外、颈内动脉。4)用尼龙线结扎颈总、颈外动脉。5)使用动脉夹夹闭颈总动脉，并在颈总动脉处用眼科剪剪一小口，向颈内方向插入栓线，扎紧固定线，松开动脉夹。6)依次缝合伤口后常规消毒，实验动物应在手术后采取保暖措施，避免体温过低造成其死亡。2小时后进行再灌注。大鼠清醒后，进行行为学评分，如果出现站立不稳，左侧肢体瘫痪，提尾时向一侧转圈则说明MCAO模型建立成功。
1、目前尚无规范的、专用的MCAO模型的造模组件。目前造模中的实验用具有手术剪、细镊、弯头止血钳、细弯镊、动脉夹、粗线、细线、线栓、缝合针。工具繁多，专用性差。
2、传统造模过程中动物麻醉后仰卧位固定在鼠板上，使用手术剪在颈正中线开口。因为动脉位置较深，不易显露，手术视野狭小，不易操作。
3、传统造模过程中使用弯头细镊、手术剪钝性分离颌下腺及血管周围组织，弯头细镊、剪刀不易固定，实验过程中若误触细镊、手术剪会造成血管破裂，影响手术视野，干扰实验操作，甚至引起实验失败，提高了科研研究成本。
4、传统造模过程中使用弯头止血钳分离动脉鞘，在细弯镊配合下，使用尼龙线结扎颈总、颈外动脉。使用弯头止血钳分离动脉鞘容易伤及鼠的迷走神经，若损伤迷走神经则会影响鼠的呼吸反射而致其死亡，导致造模失败。实验中弯镊容易刺破血管，颈动脉一旦破损，往往难以止血，鼠在大量失血后休克甚至死亡，导致造模失败。同时，实验操作与实验员的操作水平和熟练程度密切相关。
5、传统造模过程中使用动脉夹夹闭颈内动脉，在颈总动脉处用眼科剪剪一小口，切口的大小直接影响拴线插入的难易程度。切口的角度和大小也较难掌握，且眼科剪易误剪外膜、血管。实验操作与实验员的操作水平和熟练程度密切相关。
6、现有实验方法中需要依次结扎颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉及栓线伤口，多次使用手术线结扎后，残留的线头较多，容易干扰手术视野。
7、现有栓线多为自制，其在稳定性方面有一定缺失，现有实验技术认为栓线的钝圆线头是避免血管壁在栓线插入血管的过程中被破坏的重要部分，我们的实验中发现，栓线固有的直径和鼠的体重匹配度才是造模成功的关键。自制栓线穿行至颈内动脉，易损伤血管壁，造成颅底出血、蛛网膜出血，导致造模失败。
综上所述，目前急需一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件。
中国专利文献：CN105326578A，公开日：2016.02.17，公开了一种脑缺血再灌注损伤动物模型的制作方法，用戊巴比妥钠将实验动物进行颈部麻醉，切开实验动物的颈部两侧皮肤，分离双侧颈总动脉和迷走神经，切断双侧颈总动脉或者在双侧颈总动脉中植入球囊导管，并在植入球囊导管中充气至球囊导管堵塞大脑中双侧颈总动脉的起始部，缺血持续2.5-3h，制得脑缺血损伤动物；切断双侧颈总动脉2h后用软管连接双侧颈总动脉并缝合，并向软管内注入血液；或者将球囊导管中的气体放出，使缺血区再次灌注血液；根据需要在不同时间内进行神经功能缺损评分，并用录像机记录。
中国专利文献：CN104983480A，公开日：2015.10.21，公开了一种大鼠颈外动脉保留置管脑缺血再灌注模型建立的方法，其方法是：游离大鼠颈外动脉血管的方向，将大鼠颈外动脉血管的方向游离到与大鼠颈内动脉血管的方向一致或平行的位置；在颈外动脉血管切开一个切口插入线栓，在大鼠颈内形成脑缺血；插入线栓形成脑缺血1-2小时之后，将线栓拔出，再置入一个可重复注射药物导管注射囊。
但是关于本发明的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件目前还未见报道。
发明内容
本发明的目的是，提供一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，所述的局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件包括手术固定板(1)、四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)、手术窗扩张器(5)、分离穿线器(6)、颈动脉两端阻断器(7)、穿刺器(8)、栓线(9)；
所述的手术固定板(1)呈长方体板状，所述手术固定板(1)的上面铰接有门齿固定装置(11)，所述手术固定板(1)的下面设有四个底座(12)；所述的底座(12)上设有防滑层(13)；
所述手术固定板(1)的前面吸附有四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)；所述的四肢固定柱(2)由底柱(21)和夹条(22)组成，所述底柱(21)的上面固定连接有两个夹条(22)；所述扩张器固定柱(3) 侧面的中部设有连接槽(31)；
所述的手术窗扩张器(5)由固定钩(51)、细弹力绳(52)、粗弹力绳 (53)、固定环(54)组成；所述的粗弹力绳(53)的两端均连接一条细弹力绳(52)；两条细弹力绳(52)中一条连接有固定钩(51)、另一条连接有固定环(54)；所述的固定环(54)套在扩张器固定柱(3)的连接槽(31)中；
所述的分离穿线器(6)由穿线分离头(61)、操作杆(62)、手柄(63) 组成；所述的操作杆(62)一端固定连接有穿线分离头(61)、另一端固定连接有手柄(63)；
所述的颈动脉两端阻断器(7)由阻断板(71)、左侧弧形连接杆(72)、右侧弧形连接杆(73)、把手(74)、弹簧(75)组成；所述左侧弧形连接杆(72)的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71)上设有软垫(76)；所述左侧弧形连接杆(72)的中部固定连接有把手(74)和轴孔(77)；所述右侧弧形连接杆(73)的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71) 上设有软垫(76)；所述右侧弧形连接杆(73)的中部固定连接有把手(74) 和轴销(78)；所述的轴销(78)安装在轴孔(77)中将左侧弧形连接杆(72) 和右侧弧形连接杆(73)铰接，所述的弹簧(75)安装在轴孔(77)中，所述的弹簧(75)一端和轴孔(77)连接、另一端和轴销(78)连接；
所述的穿刺器(8)包括穿刺针尖(81)、针梗(82)、持针把手(83)；所述的针梗(82)一端设有穿刺针尖(81)、另一端固定连接有持针把手(83)；所述的穿刺针尖(81)上设有栓线入口(84)，所述的持针把手(83)上设有栓线出口(85)；
所述的栓线(9)通过在穿刺器(8)针尖部分插入穿刺器(8)中，所述的栓线(9)头部设有类球形栓线头(91)，栓线表面设有刻度(92)。
所述的四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)的底部均具有强磁铁，用于吸附在手术固定板(1)的前面。
所述的轴销(78)和所述的轴孔(77)相吻合；所述的栓线(9)为透明状，所述的刻度(92)印刻在栓线(9)的表面。
本发明优点在于：
1、目前尚无规范的、专用的MCAO模型的造模组件。本发明专门用于线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型。简化了造模实验用具，保障实验操作更具规范性、可重复性。
2、传统造模过程中动物麻醉后仰卧位固定在鼠板上，使用手术剪沿颈正中线开口。因为动脉位置较深，不易显露，实验视野狭小，不易操作。本发明的造模组件中的手术固定板上设置颈部垫高柱，实验中将鼠颈部置于颈部垫高柱，利于暴露鼠的颈动脉显漏，同时扩大手术野，便于实验操作。
3、传统造模过程中使用弯头细镊、剪刀钝性分离，弯头细镊、剪刀不好固定，实验过程中偶尔触碰细镊、剪刀会影响手术视野，干扰实验操作。本发明的造模组件中的手术窗扩张器可以代替弯头细镊，可以固定在手术固定板上。可起到牢固的固定作用，扩大手术视野。
4、传统造模过程中使用弯头止血钳分离动脉鞘，然后在细弯镊配合下，使用尼龙线结扎颈总、颈外动脉。使用弯头止血钳分离动脉鞘容易伤及鼠的迷走神经，若损伤迷走神经则可能影响鼠的呼吸而致其死亡，导致造模失败。实验中弯镊容易破坏血管，动脉一旦破损，老鼠会失血而死，导致造模失败。同时，实验操作与实验员的操作水平和熟练程度密切相关。上述实验过程，需要先分离动脉鞘再结扎。本发明的造模组件中的分离穿线器可以简化上述操作，达到分离、穿线、引线同时进行。穿线器相比于弯镊对血管的损伤更小，可以保护血管壁，保障造模的顺利进行。
5、传统造模过程中使用动脉夹夹闭颈内动脉，在颈总动脉处用眼科剪剪一小口，切口大小直接影响栓线是否能顺利插入颈总动脉。切口的角度和大小较难掌握，且眼科剪易误剪外膜、血管。实验操作与实验员的操作水平和熟练程度密切相关。本发明的造模组件中的穿刺器与栓线形成“套管”结构，针线一体化，伤口小，对外渗血少，且不易误剪外膜，且操作简单。
6、传统实验中需要多次使用手术线结扎，线头较多，容易干扰手术过程。本发明的造模组件中通过使用阻隔器和穿刺器，不需要使用较多的手术线，不会干扰手术视野。
7、传统的造模方法将栓线插至颈总动脉，再将栓线由颈总动脉穿行至颈内动脉，这个过程易损伤血管壁，造成颅底出血，蛛网膜出血，导致造模失败。本发明的造模组件中的栓线由类球形栓线头和有刻度的栓线组成。栓线头是球形，利于栓线在血管中通行，防止损伤血管壁。
附图说明
附图1是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的结构示意图。
附图2是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术固定板结构示意图一。
附图3是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术固定板结构示意图二。
附图4是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的四肢固定柱结构示意图。
附图5是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的扩张器固定柱结构示意图。
附图6是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈部垫高枕结构示意图。
附图7是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术窗扩张器结构示意图。
附图8是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的分离穿线器结构示意图。
附图9是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈动脉两端阻断器结构示意图一。
附图10是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈动脉两端阻断器结构示意图二。
附图11是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的穿刺器结构示意图。
附图12是一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的栓线结构示意图。
具体实施方式
下面结合实施例并参照附图对本发明作进一步描述。
附图中涉及的附图标记和组成部分如下所示：
1、手术固定板
11、门齿固定装置
12、底座
13、防滑层
2、四肢固定柱
21、底柱
22、夹条
3、扩张器固定柱
31、连接槽
4、颈部垫高枕
5、手术窗扩张器
51、固定钩
52、细弹力绳
53、粗弹力绳
54、固定环
6、分离穿线器
61、穿线分离头
62、操作杆
63、手柄
7、颈动脉两端阻断器
71、阻断板
72、左侧弧形连接杆
73、右侧弧形连接杆
74、把手
75、弹簧
76、软垫
77、轴孔
78、轴销
8、穿刺器
81、穿刺针尖
82、针梗
83、持针把手
84、栓线入口
85、栓线出口
9、栓线
91、球形栓线头
92、刻度
实施例1
请参照附图1，附图1是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的结构示意图。所述的局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件包括手术固定板(1)、四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)、手术窗扩张器(5)、分离穿线器(6)、颈动脉两端阻断器(7)、穿刺器(8)、栓线(9)；
请参照附图2、3，附图2是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术固定板结构示意图一，附图3是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术固定板结构示意图二。所述的手术固定板(1) 呈长方体板状，所述手术固定板(1)的上面铰接有门齿固定装置(11)，所述手术固定板(1)的下面设有四个底座(12)；所述的底座(12)上设有防滑层(13)；
请参照附图4-6，附图4是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的四肢固定柱结构示意图，附图5是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的扩张器固定柱结构示意图，附图6是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈部垫高枕结构示意图。所述手术固定板(1)的前面吸附有四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕 (4)；所述的四肢固定柱(2)由底柱(21)和夹条(22)组成，所述底柱(21) 的上面固定连接有两个夹条(22)；所述扩张器固定柱(3)侧面的中部设有连接槽(31)；
请参照附图7，附图7是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的手术窗扩张器结构示意图。所述的手术窗扩张器(5)由固定钩(51)、细弹力绳(52)、粗弹力绳(53)、固定环(54)组成；所述的粗弹力绳(53) 的两端均连接一条细弹力绳(52)；两条细弹力绳(52)中一条连接有固定钩 (51)、另一条连接有固定环(54)；所述的固定环(54)套在扩张器固定柱 (3)的连接槽(31)中；
请参照附图8，附图8是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的分离穿线器结构示意图。所述的分离穿线器(6)由穿线分离头(61)、操作杆(62)、手柄(63)组成；所述的操作杆(62)一端固定连接有穿线分离头(61)、另一端固定连接有手柄(63)；
请参照附图9、10，附图9是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈动脉两端阻断器结构示意图一，附图10是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的颈动脉两端阻断器结构示意图二。所述的颈动脉两端阻断器(7)由阻断板(71)、左侧弧形连接杆(72)、右侧弧形连接杆(73)、把手(74)、弹簧(75)组成；所述左侧弧形连接杆(72) 的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71)上设有软垫(76)；所述左侧弧形连接杆(72)的中部固定连接有把手(74)和轴孔(77)；所述右侧弧形连接杆(73)的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71) 上设有软垫(76)；所述右侧弧形连接杆(73)的中部固定连接有把手(74) 和轴销(78)；所述的轴销(78)安装在轴孔(77)中将左侧弧形连接杆(72) 和右侧弧形连接杆(73)铰接，所述的弹簧(75)安装在轴孔(77)中，所述的弹簧(75)一端和轴孔(77)连接、另一端和轴销(78)连接；
请参照附图11，附图11是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的穿刺器结构示意图。所述的穿刺器(8)包括穿刺针尖(81)、针梗(82)、持针把手(83)；所述的针梗(82)一端设有穿刺针尖(81)、另一端固定连接有持针把手(83)；所述的穿刺针尖(81)上设有栓线入口(84)，所述的持针把手(83)上设有栓线出口(85)；
请参照附图12，附图12是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的栓塞线结构示意图。所述的栓线(9)穿在穿刺器(8)中，所述的栓线(9)头部设有球形栓线头(91)，内部设有刻度(92)。
所述的四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)的底部均具有强磁性，用于吸附在手术固定板(1)的前面。
所述的轴销(78)和所述的轴孔(77)相吻合。
所述的栓线(9)为透明状，所述的刻度(92)嵌在栓线(9)的内部。
实施例2
请参照附图1，附图1是本实施例的一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的结构示意图。
所述局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件的使用过程及方法：
动物麻醉后仰卧位固定在手术固定板(1)的前面，颈部枕在颈部垫高枕 (4)上，给大鼠颈部简单消毒，使用手术剪在颈正中线开口。
用手术窗扩张器(5)沿正中钝性分离，固定钩(51)钩住大鼠皮肤和鄂下腺，固定环(54)套在扩张器固定柱(3)的连接槽(31)中。沿右侧胸锁乳突肌腱向下寻找颈动脉。
将尼龙线穿过分离穿线器(6)上的穿线分离头(61)，手持分离穿线器 (6)上的手柄(63)，将穿线分离头(61)绕过动脉，再抽回分穿线分离头 (61)，让线头自行穿过血管。分离颈总、颈外、颈内动脉。
用尼龙线结扎颈总、颈外动脉。
手握住颈动脉两端阻断器(7)的把手(74)，用阻断板(71)夹住颈总动脉，两个阻断板(71)中间的血管可用于穿刺。将栓线(9)穿过穿刺器的栓线入口(84)，沿着针梗(82)从栓线出口(85)出来，将穿刺器(8)穿入两个阻断板(71)中间的血管。此时，栓线(9)会顺着穿刺器(8)沿着颈总动脉滑动。穿行至颈内动脉遇到阻力时，拔出穿刺器(8)，拔掉颈动脉两端阻断器(7)，结扎。
缝合伤口且2小时后进行再灌注。大鼠清醒后，进行行为学评分，如果出现站立不稳，左侧肢体瘫痪，提尾时向一侧转圈则说明MCAO模型建立成功。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.一种局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，其特征在于，所述的局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件包括手术固定板(1)、四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)、手术窗扩张器(5)、分离穿线器(6)、颈动脉两端阻断器(7)、穿刺器(8)、栓线(9)；
所述的四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)的底部均具有强磁性，用于吸附在手术固定板(1)的前面；
所述的手术固定板(1)呈长方体板状，所述手术固定板(1)的上面铰接有门齿固定装置(11)，所述手术固定板(1)的下面设有四个底座(12)；所述的底座(12)上设有防滑层(13)；
所述手术固定板(1)的前面吸附有四肢固定柱(2)、扩张器固定柱(3)、颈部垫高枕(4)；所述的四肢固定柱(2)由底柱(21)和夹条(22)组成，所述底柱(21)的上面固定连接有两个夹条(22)；所述扩张器固定柱(3)侧面的中部设有连接槽(31)；
所述的手术窗扩张器(5)由固定钩(51)、细弹力绳(52)、粗弹力绳(53)、固定环(54)组成；所述的粗弹力绳(53)的两端均连接一条细弹力绳(52)；两条细弹力绳(52)中一条连接有固定钩(51)、另一条连接有固定环(54)；所述的固定环(54)套在扩张器固定柱(3)的连接槽(31)中；
所述的分离穿线器(6)由穿线分离头(61)、操作杆(62)、手柄(63)组成；所述的操作杆(62)一端固定连接有穿线分离头(61)、另一端固定连接有手柄(63)；
所述的颈动脉两端阻断器(7)由阻断板(71)、左侧弧形连接杆(72)、右侧弧形连接杆(73)、把手(74)、弹簧(75)组成；所述左侧弧形连接杆(72)的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71)上设有软垫(76)；所述左侧弧形连接杆(72)的中部固定连接有把手(74)和轴孔(77)；所述右侧弧形连接杆(73)的两端均固定连接有阻断板(71)，所述的阻断板(71)上设有软垫(76)；所述右侧弧形连接杆(73)的中部固定连接有把手(74)和轴销(78)；所述的轴销(78)安装在轴孔(77)中将左侧弧形连接杆(72)和右侧弧形连接杆(73)铰接，所述的弹簧(75)安装在轴孔(77)中，所述的弹簧(75)一端和轴孔(77)连接、另一端和轴销(78)连接；
所述的穿刺器(8)包括穿刺针尖(81)、针梗(82)、持针把手(83)；所述的针梗(82)一端设有穿刺针尖(81)、另一端固定连接有持针把手(83)；所述的穿刺针尖(81)上设有栓线入口(84)，所述的持针把手(83)上设有栓线出口(85)；
所述的栓线(9)通过在穿刺器(8)针尖部分插入穿刺器(8)中，所述的栓线(9)头部设有类球形栓线头(91)，栓线表面设有刻度(92)。
2.根据权利要求1所述的局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，其特征在于，所述的轴销(78)和所述的轴孔(77)相吻合。
3.根据权利要求1所述的局灶性永久性脑缺血实验动物造模组件，其特征在于，所述的栓线(9)为透明状，所述的刻度(92)印刻在栓线(9)的表面。
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