CN110301641A - 一种辅助保护胃黏膜的保健食品 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种辅助保护胃黏膜的保健食品,所述保健食品的有效成分由以下重量份数的各原料药组成:人参3‑9份、黄芪7‑30份、赤芍6‑12份、肉桂1‑5份、浙贝母5‑10份、炙甘草2‑10份。本发明还提供其制备方法。本发明的保健食品对人体气血阴阳俱虚之证有很好的辅助治疗作用,尤其对胃黏膜受损有保护作用。本发明所有的原料均为药食同源和可用于保健食品的物品,可长期服用,无明显毒副作用。具有很好的临床应用价值,值得进一步深入研究及推广。
Description
技术领域
本发明涉及一种辅助保护胃黏膜的保健食品。
背景技术
近年来,随着社会压力的增大,由于工作及饮食的关系,人们长期熬夜、饮酒、吸烟,饮用浓茶、咖啡,不按时进食,以及产生紧张、焦虑等情绪,身体亚健康状态越来越严重。而这些状态对身体最为普遍影响便是消化系统出现问题,胃在人体消化吸收过程中十分关键,各种食物均需经过胃的研磨作用,胃黏膜是胃重要的保护屏障,胃黏膜薄弱,极易受到伤害。处于高压生活的人们胃黏膜受损,易患胃溃疡,他们会出现隐痛、钝痛、胀痛、烧灼样痛,多次反复疼痛严重影响工作和生活、目前市场上针对此状况的药物以化药为主,重治不重疗,存在反复发作,治标不治本的问题,而中药以养护为主,重疗养,治标且治本。因此,研发一种能够辅助保护胃黏膜损伤的中药保健食品具有重要意义。
胃黏膜防御机制是一个多角度、多层次、多性质的复杂体系,主要分为四级。第一级防御是黏液-碳酸氢盐-磷脂屏障,第二级则是由粘膜上皮细胞构成的胃黏膜屏障,第三级防御依靠粘膜微循环,粘膜免疫系统则构成了第四级防御。此外,还有胃黏膜的自我修复、胃黏膜血流等其他防御。
乙醇作为一种有机小分子,极易透过生物膜。乙醇进入机体后,大部分经肝脏代谢,少部分经胃黏膜扩散吸收。乙醇在胃内经酶代谢后,转化为乙醛,极有可能引起乙醛介导的局部毒性,已有乙醛导致胃肠道癌症的相关报道。
乙醇有强烈的粘膜刺激性,会破坏胃黏膜屏障,使其极易遭到各种消化酶、胃酸等物质的侵蚀。尤其当胃黏膜免疫系统遭到破坏后,免疫紊乱,使前列腺素、一氧化氮、肽类等炎症介质的含量发生改变,引起炎症反应。乙醇代谢产物乙醛,不仅可能介导局部毒性,还会在黄嘌呤氧化酶的作用下,进一步转化为氧自由基,损伤胃黏膜。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题,本发明提供了一种辅助保护胃黏膜的保健食品。
本发明保健食品处方是由甘肃省享受国务院特殊津贴的名老中医王道坤先生,根据近四十年临床经验总结拟定的,由黄芪、人参、赤芍、浙贝母、肉桂和甘草(炙)等药味组成。实践证明“理阳气当甘药补中”,的确是经验之谈。同时,又经实验研究,证明有提高溃疡愈合质量的作用。
黄芪对胃黏膜损伤的保护
中药黄芪在《神农本草经》中为上品,《本草备要》记载:“益元气,温三焦,壮脾胃。”药理学研究表明黄芪有抗病毒、增强免疫、改善心肌缺血和抗胃溃疡作用等功能。
人参对胃黏膜损伤的保护
中药人参由人参栽培品的干燥根和根茎经蒸制而成,《中国药典》2015版称其可大补元气,复脉固脱。百草之王的人参最早追溯到《神农本草经》,为上品。《名医别录》中曰:“疗肠胃中冷,心腹鼓痛。”药理学研究结果显示,人参能调节神经、心血管及内分泌系统,提高心、脑活动能力和免疫等功能。
其他药味对胃黏膜损伤的保护
中药赤芍可清热凉血,散瘀止痛。《本草纲目》云:“赤散邪,散血中之滞”。赤芍主要成分为赤芍总苷,现代药学研究表明,赤芍总苷能清除自由基、减少耐药基因表达、调节机体免疫、抗血小板凝聚等药理功效。其中,黄芪多糖、黄芪总皂苷与赤芍总苷配伍,能有效抑制血小板凝聚。
肉桂有散寒止痛,温通经脉之效,为现代常用健胃药。《神农本草经》:“主百病……为诸药先聘通使,久服通神,轻身不老。”《本草纲目》则曰:“宜导百药,久服,神仙,不老。”
中药浙贝在中医临床常与海螵蛸配伍,治疗消化性溃疡、慢性胃炎。
炙甘草为甘草蜜炮制品,归胃经,能补脾和胃,升降沉浮,调和诸药,有国老之号。
随着酒精消费的逐年增长,乙醇所致的胃溃疡疾病已经成为一个严重的医学问题。本发明提供一种能辅助保护胃黏膜的保健食品,尤其是减弱乙醇所致的胃黏膜受损。
本发明提供一种辅助保护胃黏膜的保健食品,所述保健食品的有效成分由以下重量份数的各原料药组成:人参3-9份、黄芪7-30份、赤芍6-12份、肉桂1-5份、浙贝母5-10份、炙甘草2-10份。
作为优选,所述保健食品的有效成分由以下重量份数的各原料药组成:人参5份、黄芪7.5份、赤芍12份、肉桂5份、浙贝母5份、炙甘草3份。
作为优选,所述保健食品还包括药学上可接受的辅料。
作为优选,所述保健食品为液体制剂、粉末颗粒剂或片剂。
本发明还提供上述辅助保护胃黏膜的保健食品的制备方法,按重量配比混合,共加入12-16倍量水煎煮,煎煮分为1-3次,每次1-2h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
作为优选,按重量配比混合,加入16倍量水煎煮3次,3次分别加入混合物6倍、6倍和4倍的水,每次1h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
本发明还提供上述辅助保护胃黏膜的保健食品在制备减弱乙醇所致胃溃疡的食品中的应用。
本发明的保健食品的功用为:
补气温中,缓急止痛,护膜愈溃,杜绝复发。
适用人群:溃疡病反复发作不愈者。证见脘腹隐痛,春秋发作,喜温喜按,不思饮食,兼见自汉盗汗,心悸气短,微恶风寒。脉虚大无力。
方解:本方在敦煌医方大阳旦汤基础上,结合临床经验和现代最新科研成果加减而成。大阳旦汤原文云:“治凡病自汗出不止,气息慑慑,身劳力怯,恶风凉,腹中拘急,不欲饮食,皆宜此方。若脉虚大者,为更切证也。”
本方对人体气血阴阳俱虚之证有很好的辅助治疗作用,尤其对胃黏膜受损有保护作用。
卫气虚弱,不能固密,故见自汗盗汗,微恶风寒;中焦阳虚,无以温煦,则里急腹痛,喜温喜按;阳气亏虚,纳运无力,而见不思饮食;气血不足,心脉亏虚,失于濡养、充盈,则呈心悸气短、脉虚大无力之候。
本方中,人参味甘性温,大补元气,生津安神,元气是健康之本,临床常用于脾胃虚弱,消渴、惊悸失眠和一切气血津液不足之症为君药。生黄芪甘温,生用固表止汗,利尿退肿,痈疽不溃或久溃不敛,为外科良药。为一般气虚血亏之补药。参芪均为补气之主药,补益元气,人参为优,温升之性,黄芪为大。二者相伍补元气而升清阳;肉桂辛热,散寒温中,回阳通脉,为治脾胃受寒,中阳不振,脘腹冷痛吐泻的要药。共为臣药。因这样的人群,每每胃脘隐痛,经久不愈,病邪入络,故选性凉又能通络之赤芍。贝母,清热开郁,解毒散结;二者可防人参黄芪之过于温燥,共为佐药。甘草(炙)甘温益气,补益中焦之气,又能调和诸药,謂之使药。全方共凑修复胃黏膜,杜绝溃疡病反复发作的功效。
本品对于脾胃虚弱,元气不足者,均可服用,不必拘泥于溃疡病患者。因为人体以阳气为本,经云:“阳气者,若天与日,失其所则折寿而不彰。”明代张景岳说:“天之大宝,只此一丸红日,人之大宝,只此一息真阳。”如此而已。
本发明的保健食品对人体气血阴阳俱虚之证有很好的辅助治疗作用,尤其对胃黏膜受损有保护作用。本发明所有的原料均为药食同源和可用于保健食品的物品,可长期服用,无明显毒副作用。具有很好的临床应用价值,值得进一步深入研究及推广。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解,并且构成说明书的一部分,与本发明的实施例一起用于解释本发明,并不构成对本发明的限制。在附图中:
图1为药物保护乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤形态肉眼观察结果。
图2为药物保护乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤形态镜下观察结果。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明,但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法,如无特殊说明,均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料,如无特殊说明,均为市售。
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参3-9g、黄芪7-30g、赤芍6-12g、肉桂1-5g、浙贝母5-10g、甘草(炙)2-10g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比混合,采用12-16倍量水煎煮1-3次,每次1-2h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
根据处方和提取工艺,加入在药学上可接受的载体,在物理形态制成液体制剂、粉末、颗粒剂和其他固体制剂,比如片剂。
每次服用剂量应含人参1-3g、黄芪3-10g、赤芍1-4g、肉桂0.5-2g、浙贝母1-3g、甘草(炙)0.5-2g。
实施例1
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参5g、黄芪7.5g、赤芍12g、肉桂5g、浙贝母5g、炙甘草3g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用16倍量水煎煮3次(分别为6倍/6倍/4倍),每次1h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
实施例2
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参9g、黄芪30g、赤芍12g、肉桂5g、浙贝母10g、甘草(炙)10g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用12倍量水煎煮3次(5倍/4倍/3倍),每次1.5h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
实施例3
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参3g、黄芪9g、赤芍6g、肉桂1g、浙贝母5g、甘草(炙)2g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用14倍量水煎煮2次(7倍/7倍),每次2h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
实施例4
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参6g、黄芪15g、赤芍10g、肉桂3g、浙贝母8g、甘草(炙)6g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用16倍量水煎煮3次(6倍/6倍/4倍),每次1h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
实施例5
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参4g、黄芪25g、赤芍9g、肉桂4g、浙贝母6g、甘草(炙)3g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用12倍量水煎煮1次,煎煮2h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
实施例6
本发明的辅助保护胃黏膜的保健食品每剂配比如下:人参7g、黄芪20g、赤芍8g、肉桂2g、浙贝母7g、甘草(炙)4g。
上述保健食品提取工艺的制备方法为:按重量配比,采用16倍量水煎煮2次(8倍/8倍/4倍),每次1h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
中药汤剂的药效受到煎药过程诸多因素的影响,包括煎煮器具、煎煮火候、煎煮用水、煎煮次数、煎煮时间等。因此,本发明第一部分目的在于利用正交试验,以加水总倍量、提取时间、提取次数为因素,以人参总皂苷含量、出膏率和综合评分为指标,优选出本处方药材的最佳水提工艺。
第二部分则进行动物学试验,对肉眼和镜下的粘膜损伤评分,旨在观察本处方对大鼠胃黏膜形态学的影响,探究本保健食品复方对无水乙醇导致大鼠急性胃黏膜损伤的辅助保护作用。
本发明拟通过正交试验,阐明加水总倍量、提取时间、提取次数三个因素对黄芪、人参保健食品复方的影响,优选出本复方的最佳提取工艺。拟进行本保健食品复方对无水乙醇导致的大鼠急性胃黏膜损伤药效学研究,为进一步研究该处方药物的辅助保护作用机制提供理论基础。
一、正交试验优选最佳水提工艺
中药汤剂在水煎过程容易受到诸多因素的影响,包括药材浸泡时间、加水量、煎煮时长、煎药次数、煎煮火候、煎煮器具以及药材质量等。根据文献资料,在药材煎煮之前浸泡0.5h(至药材表面不再有气泡),大火煮开后改文火使持续微沸。
本发明实验确定以加水总倍量、提取时间、提取次数为主要影响因素水平,以人参总皂苷含量和出膏率为主要考察指标,并进行多指标综合评分分析,采用L9(34)正交表进行试验,优选黄芪、人参中药复方最佳水提工艺,并进行方法学考察。
1仪器与试剂
1.1仪器
日本岛津UV-1700型紫外-可见分光光度计;Metter Toledo分析天平(ME55,梅特勒-托利多上海公司);Sartorius分析天平(TE124S,北京赛多利斯公司),Sartorius电子天平(SQP,北京赛多利斯公司)。
1.2试剂
对照品人参皂苷Re(批号110754-201827)购自中国药品生物制品检定所,药材样品购自甘肃兰州,其他试剂均为分析纯。
2方法
2.1水提取工艺流程
按实施例1的处方量称取各味药材,按表1、表2、表3进行试验,各组药材煎煮前均浸泡0.5h至药材表面不再有气泡。煎煮完成,趁热过滤,合并滤液,浓缩,水浴蒸干后,干燥至恒重,精密称定,得干物质重量,按下式计算水提物收率(即出膏率):
出膏率(%)=干物质重量/处方药材总重量×100%。
表1水提取因素水平
表2溶媒倍量分配
溶媒总倍量 | 提取1次 | 提取2次 | 提取3次 |
12倍 | 12倍 | 6倍/6倍 | 5倍/4倍/3倍 |
14倍 | 14倍 | 7倍/7倍 | 5倍/5倍/4倍 |
16倍 | 16倍 | 8倍/8倍 | 6倍/6倍/4倍 |
2.2对照品溶液制备
精密取人参皂苷Re对照品5.10mg,于5ml容量瓶中,加无水甲醇适量使溶,并稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3供试品溶液制备
取供试品(即干浸膏固体)适量(相当于人参原药材1g),精密称定,用中性滤纸包好,置于索氏提取器中,加入100ml石油醚,微沸回流提取1.5h,弃去石油醚液,药包挥干石油醚,再置于另一索氏提取器中,加入70ml无水甲醇浸泡14h,次日加入30ml无水甲醇微沸回流提取4.5h,水浴蒸干。30ml蒸馏水溶解蒸干后的提取物,置于分液漏斗中,用正丁醇溶液(水饱和)35ml分4次(体积比10:10:8:7)萃取。合并正丁醇层,氨试液洗涤两次,每次15ml。弃去下层溶剂,取上层溶剂蒸干,加无水甲醇使溶,转移至10ml容量瓶,稀释至刻度,摇匀,即得。
2.4含量测定方法
精密取50-100μL待测样品溶液,置于具塞刻度试管,挥干甲醇后,加入8%香草醛乙醇试液0.5ml,72%硫酸试液5ml,充分振荡摇匀后于60℃恒温水浴保温10min,立即用冰水浴冷却10min,摇匀。以试剂做空白,于544nm波长下测定吸光度值。
2.5统计方法
应用SPSS 25.0统计学软件进行数据统计分析,实验结果以均数表示,若方差齐,运用一般线性比较的单变量多因素方差分析,组间比较采用LSD法。
3正交试验结果
正交试验结果如表3,分别对人参总皂苷含量、出膏率和多指标综合评分三个考察指标进行方差分析,结果见表4、5、6。
表3混合水煎提取工艺正交试验
注:综合评分=Re含量/最大指标×0.6×100+出膏率/最大指标×0.4×100。
表4人参总皂苷方差分析表
方差来源 | SS | f | MS | F | P |
A | 165.815 | 2 | 82.907 | 9.199 | |
B | 19.700 | 2 | 9.850 | 1.093 | |
C | 5.304 | 2 | 2.652 | 0.294 | |
D(误差) | 18.026 | 2 | 9.013 |
注:F0.05(2,2)=19.00;F0.01(2,2)=99.00;P<0.05:有显著性差异(表2.5、2.6同)。
表5出膏率方差分析表
方差来源 | SS | f | MS | F | P |
A | 128.808 | 2 | 64.404 | 497.670 | <0.05 |
B | 5.761 | 2 | 2.880 | 22.257 | <0.05 |
C | 0.282 | 2 | 0.141 | 1.090 | |
D(误差) | 0.259 | 2 | 0.129 |
表6综合评分方差分析表
方差来源 | SS | f | MS | F | P |
A | 2283.749 | 2 | 1141.874 | 26.257 | <0.05 |
B | 197.197 | 2 | 98.599 | 2.267 | |
C | 23.418 | 2 | 11.709 | 0.269 | |
D(误差) | 86.978 | 2 | 43.489 |
根据文献资料,参照各指标的最大值将数据进行归一化,赋予不同权重。人参总皂苷为保健食品复方君药人参的主要有效成分,将其作为主要指标;考虑复方整体性,将出膏率作为另一指标。将人参总皂苷的权重设为0.6,出膏率的权重设为0.4,综合评分=总皂苷含量/最大指标×0.6×100+出膏率/最大指标×0.4×100,即M=0.6X×100/26.79+0.4Y×100/23.43。
根据表3正交试验结果直观分析,极差RA>RB>RC,即在所选因素水平范围内,各因素影响大小为加水总倍量(A)>提取时间(B)>提取次数(C);各因素不同水平影响次序为:A3>A2>A1,B1>B2>B3,C3>C2>C1。直观分析最佳提取工艺为A3B1C3,即16倍量水煎煮3次,每次1h。
根据表4、5、6,对人参总皂苷含量、出膏率、综合评分三个指标进行方差分析,单从总皂苷含量看,三个因素对提取工艺均无显著性影响;从出膏率和综合评分看,加水总倍量(A)对本发明保健食品复方提取工艺的影响具有显著性差异(P<0.05)。出膏率的方差分析结果亦表明,提取时间(B)对该复方水煎提取工艺有显著性影响(P<0.05)。
综合分析以上各因素的影响,最终确定的最佳水煎提取工艺为A3B1C3,即16倍量水煎煮3次,每次1h。
4方法学考察
4.1标准曲线的制备
精密取人参皂苷Re对照品0.0255mg、0.051mg、0.102mg、0.153mg、0.204mg、0.306mg,置于磨口带塞刻度试管,水浴蒸干甲醇后,按2.4中方法显色,测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标,人参皂苷Re质量为横坐标进行线性回归,回归方程为Y=2.9385X+0.0467,r=0.9992。结果表明人参皂苷Re在0.0255mg~0.306mg范围内有良好的线性关系。
4.2重复性试验
精密取表3中4号干燥样品(干浸膏固体)6份,按“2.3”中的方法提取人参皂苷,按“2.4”中方法测定吸光度,如表7所示,计算人参总皂苷含量RSD值为1.94%,表明本实验所用方法重复性良好。
4.3稳定性试验
精密取表3中4号供试品溶液50μL,按“2.4”中方法显色,于0h、2h、4h、6h、8h、10h、12h时测定其吸光度,结果显示人参总皂苷含量RSD值为1.81%,表明样品溶液在12h内的稳定性良好。
4.4精密度试验
精密吸取浓度为1.02mg/mL人参皂苷Re对照品溶液150μL,按“2.4”中方法,重复测定6次,人参总皂苷含量RSD值为0.23%,结果显示仪器日内精密度良好。每天同一时间测定,连续测定6天,人参总皂苷含量RSD值为0.55%,结果表明仪器日间精密度良好。
4.5加样回收试验
精密称取相当于人参药材1g的4号浸膏固体9份,分为3组,按样品:对照品质量比为1:0.8、1:1、1:1.2的比例,加入适量浓度为1.02mg/mL的对照品溶液,按照“2.3”中方法制备供试品溶液,按照“2.4”中方法测定吸光度,如表8所示,计算回收率的RSD值为1.54%,表明该方法准确度良好。
表7重复性试验结果(n=6)
表8加样回收试验(n=3×3)
二、大鼠乙醇型胃黏膜损伤的药效学研究
研究发现,摄入过量乙醇极易引起机体消化系统的各种病理损伤,其中,胃黏膜损伤导致的胃溃疡最为常见。乙醇对胃黏膜的损伤随乙醇浓度的升高而加剧,高浓度可导致胃黏膜的急性损伤。因此,本发明实验选用无水乙醇来构造大鼠急性胃黏膜损伤模型。
本实验拟通过构造大鼠急性胃黏膜损伤无水乙醇模型,生理解剖取出完整胃黏膜,分别在肉眼下和光镜下对胃黏膜的形态进行观察和测量评分,来探究本发明保健食品对胃黏膜的辅助保护作用。
1材料
1.1动物
SD健康大鼠45只,雄性,由兰州大学实验动物中心提供。
1.2器材及试剂
AIRAJ电子数显卡尺(鲁匠工具公司),显微镜,苏木精,伊红染液,无水乙醇、多聚甲醛、苦味酸等其他试剂均为分析纯。
1.3药物煎煮及配制
取实施例1的处方药材适量,按表3中7号试验方法提取浓缩成浸膏。按人体推荐剂量的5倍、2.5倍、1倍设置高、中、低三个剂量组。正常成人每日推荐的处方药材总量为37.5g/Kg(体重按60Kg计),则高、中、低三个剂量组每只大鼠每日推荐的处方药材总量分别为3.75g/Kg、11.25g/Kg、18.75g/Kg(大鼠体重按250g计)。按所需药材量称取浸膏,加水溶解配成药液备用。
2方法
2.1分组
SD雄性大鼠随机分成5组,每组9只,即对照组(空白)、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。
2.2给药
所有SD大鼠适应性饲养一周后开始给药。对照组和模型组给予配药用水,受试剂量组按“1.3”药物煎煮及配制中的药量给药。每三天测量一次体重,调整给水量和给药量,连续给药30天。
2.3造模
全部动物禁药禁食不禁水24h,除空白组外,其他各组大鼠给予无水乙醇1.0mL/只,1h后处死,露出完整胃体,结扎幽门和贲门,灌注适量4%多聚甲醛,在4%多聚甲醛液中固定20min后,沿胃大弯剪开,洗净后展开,用游标卡尺测量出血带的长、宽,按国家保健食品标准《对胃黏膜损伤有辅助保护功能检验方法》规定,如表9所示,进行评分。
2.4切片
将每只动物损伤最严重部位剪下,置于4%多聚甲醛溶液中,常规制片,HE染色(制片染色由甘肃华普生物科技有限公司完成),镜检观察胃黏膜正横切面粘膜全层充血、出血及上皮细胞变性坏死情况。按国家保健食品标准《对胃黏膜损伤有辅助保护功能检验方法》中的评价方法,如表10所示,进行评分。
表9急性酒精损伤肉眼观察评分标准
损伤程度 | 1分 | 2分 | 3分 | 4分 |
出血点 | 1个 | —— | —— | —— |
出血带长度 | 1-5nm | 6-10nm | 10-15nm | >15nm |
出血带宽度 | 1-2nm | >2nm |
注:总积分=出血点分值+长度分值+(宽度分值×2)。
表10急性胃黏膜损伤镜下评分标准
病变 | 1分 | 2分 | 3分 | 4分 | 5分 |
充血 | <1/5 | 1/5-2/5 | 2/5-3/5 | 3/5-4/5 | 上皮全层 |
出血 | <1/5 | 1/5-2/5 | 2/5-3/5 | 3/5-4/5 | 上皮全层 |
上皮细胞变性坏死 | <1/5 | 1/5-2/5 | 2/5-3/5 | 3/5-4/5 | 上皮全层 |
注:病变总积分=充血积分+出血积分×2+上皮细胞变性坏死×3。
2.5统计方法
应用SPSS52.0统计学软件进行数据统计分析,结果以均数±标准差的形式表示若方差齐,采用分析,组间比较运用LSD法;若方差不齐,釆用秩和检验。
3结果
3.1形态学分析
图1为药物保护乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤形态肉眼观察结果。
如图1所示,对照组大鼠胃黏膜光滑完整,呈浅红色,无充血、出血或粘膜破损情况;模型组胃黏膜显紫红色,有块状、带状大面积充血,粘膜溃烂,偶见沟状坏死;低剂量组较模型组色浅,有点状、带状小面积充血,少溃烂坏死;中剂量组较低剂量组色浅,散在点、线状出血;高剂量组胃黏膜呈浅红色,少见点线状出血。
图2为药物保护乙醇诱导大鼠胃黏膜损伤形态镜下观察结果。
如图2所示,HE染色切片镜检,对照组大鼠胃黏膜结构完整,细胞排列紧密有序,腺体清晰;模型组胃黏膜上皮细胞大量坏死,细胞排列紊乱,红细胞渗出呈大片深红色;各剂量组较模型组比,红细胞渗出少,上皮层损伤程度降低,低剂量组仍可见局部红细胞大量外渗;中剂量组上皮细胞局部脱落,充血、出血少见;高剂量组粘膜上皮细胞较少脱落,少见红细胞渗出。
3.2评分分析
如表11-13所示,与模型组相比,各受试剂量组均能降低急性酒精损伤积分指数,表现胃黏膜辅助保护作用。低剂量组对损伤的抑制率较低,辅助保护作用不显著,高剂量组表现出良好的损伤抑制作用,剂量与辅助保护作用表现出一定的量效关系。
表11急性酒精损伤肉眼观察评分记录表(n=9)
组别 | 出血点积分 | 长度积分 | 宽度积分 | 总积分 |
对照组 | 0 | 0 | 0 | 0 |
模型组 | 65 | 164 | 102 | 433 |
低剂量 | 93 | 147 | 95 | 430 |
中剂量 | 89 | 118 | 53 | 313 |
高剂量 | 46 | 64 | 26 | 162 |
表12急性酒精损伤肉眼观察评分分析表(n=9)
组别 | 损伤总积分 | 损伤发生率(%) | 损伤积分指数 | 损伤抑制率(%) |
空白组 | 0 | - | 0 | - |
模型组 | 433 | 100 | 48.11 | 0.00 |
低剂量 | 430 | 100 | 47.78 | 0.69 |
中剂量 | 313 | 100 | 34.78 | 27.71 |
高剂量 | 162 | 100 | 18 | 62.59 |
表13急性酒精损伤镜下观察评分记录表(n=9)
组别 | 充血积分 | 出血积分 | 上皮细胞坏死积分 | 病变总积分 |
对照组 | 10 | 12 | 9 | 61 |
模型组 | 28 | 31 | 34 | 192 |
低剂量 | 22 | 28 | 22 | 144 |
中剂量 | 12 | 17 | 16 | 94 |
高剂量 | 11 | 12 | 10 | 65 |
表14急性酒精损伤观察评分综合分析表(n=9)
项目 | 肉眼观察评分 | 病理切片评分 |
空白组 | 0±0 | 6.78±1.20 |
模型组 | 48.11±25.67<sup>##</sup> | 21.33±4.69<sup>##</sup> |
低剂量 | 47.78±16.98 | 16.33±5.96<sup>**</sup> |
中剂量 | 34.78±17.73 | 10.88±3.77<sup>**</sup> |
高剂量 | 18.00±12.52<sup>**</sup> | 7.22±1.92<sup>**</sup> |
如表14所示,肉眼观察下,模型组损伤积分为(48.11±25.67),与模型组比较,各受试剂量组评分均低于模型组,高剂量组最低,为(18.00±12.52),与模型组差异有统计学意义(P<0.01)。光镜下,模型组病变积分为(21.33±4.69),与模型组比较,各受试剂量组评分均低于模型组,与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。
4结论与展望
4.1主要结论
本发明实验首先对本发明的保健食品处方的最佳水煎提取工艺进行探究。以加水总倍量、提取时间、提取次数三个因素水平设计正交试验,紫外-分光光度法测定君药人参的主要成分人参总皂苷含量,以人参总皂苷含量、出膏率及加权评分考察实验结果。极差分析、方差分析和综合评分分析表明,在所选因素水平范围内,加水总倍量的影响最显著;出膏率方差分析显示,在所选因素水平范围内,提取时间有显著性影响。综合分析结果显示,方案A3B1C3,即加16倍量水提取3次,每次1h,为本保健食品处方最佳水提工艺。
本发明还研究了本发明保健食品处方对大鼠乙醇型急性胃黏膜损伤的辅助保护作用。构造乙醇型大鼠胃黏膜损伤模型,分别在肉眼和镜下观察胃黏膜形态,并按照国家保健食品标准《对胃黏膜损伤有辅助保护功能检验方法》中的评价方法进行评分,结果显示,本发明保健食品各剂量组均可辅助保护胃黏膜,减弱乙醇对大鼠胃黏膜的刺激和损伤,且剂量与保护作用之间存在一定的量效关系,其中高剂量组辅助保护作用最为显著。
4.2研究展望
通过实验证实,本发明保健食品处方确有胃黏膜辅助保护作用,但药物对胃黏膜的保护机制等尚不明确,需要进一步地深入研究。此外,在本实验过程中发现,处方药物剂量与保护作用之间存在量效关系,但对机体安全的最适剂量尚不清晰,也有待下一步的深入研究。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种辅助保护胃黏膜的保健食品,其特征在于:所述保健食品的有效成分由以下重量份数的各原料药组成:人参3-9份、黄芪7-30份、赤芍6-12份、肉桂1-5份、浙贝母5-10份、炙甘草2-10份。
2.根据权利要求1所述的辅助保护胃黏膜的保健食品,其特征在于:所述保健食品的有效成分由以下重量份数的各原料药组成:人参5份、黄芪7.5份、赤芍12份、肉桂5份、浙贝母5份、炙甘草3份。
3.根据权利要求1所述的辅助保护胃黏膜的保健食品,其特征在于:所述保健食品还包括药学上可接受的辅料。
4.根据权利要求1所述的辅助保护胃黏膜的保健食品,其特征在于:所述保健食品为液体制剂、粉末颗粒剂或片剂。
5.权利要求1-4任一项所述的辅助保护胃黏膜的保健食品的制备方法,其特征在于:按重量配比混合,共加入12-16倍量水煎煮,煎煮分为1-3次,每次1-2h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:按重量配比混合,加入16倍量水煎煮3次,3次分别加入混合物6倍、6倍和4倍的水,每次1h,得到中药提取液,浓缩至稠膏。
7.权利要求1-4任一项所述的辅助保护胃黏膜的保健食品在制备减弱乙醇所致胃溃疡的食品中的应用。
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20191008 |
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