CN110248948B - 墨蝶呤及其盐的多晶型物 - Google Patents

Abstract

公开了选自多晶型物A、B、C、D、E、F和G的墨蝶呤游离碱的晶形及其组合，以及墨蝶呤的盐的结晶多晶型物。还公开了含有一种或更多种这样的多晶型物的药物组合物和制备这样的多晶型物的方法。墨蝶呤可用于治疗与低细胞内BH4水平相关的多种疾病，例如苯丙酮尿症。

Description

墨蝶呤及其盐的多晶型物

发明背景

墨蝶呤是四氢生物蝶呤(BH4)的天然存在的前体，BH4是关键细胞内酶(包括但不局限于苯丙氨酸羟化酶(PAH)(Kaufman，1958)、络氨酸羟化酶(TH)(Nagatsu等人，1964)、色氨酸羟化酶(TPH)(Ichiyama等人，1970)、一氧化氮合酶(NOS)(Kwon等人，1989)、(Mayer等人，1991)和烷基甘油单加氧酶(AGMO)(Tietz等人，1964))的天然存在的必需辅因子。有利于BH4积聚的墨蝶呤快速转化成BH4经在BH4合成的补救途径中的两步还原发生(Sawabe，2008)。BH4的合成形式(例如，盐酸沙丙蝶呤)被用作与高血浆苯丙氨酸相关的疾病如苯丙酮尿症(PKU)的治疗剂。PKU是主要由PAH基因突变引起的新陈代谢先天性障碍。BH4还被作为与PKU和其它疾病相关的各种中枢神经症状的治疗剂测试，但展示有限的效果，大概由于BH4不能有效地穿越血脑屏障(Klaiman等人，2013；Grant等人，2015)。

最新研究已经表明：与BH4相比，外周给药的墨蝶呤具有更大的跨膜渗透性并因而能更容易地进入肝、肾和脑细胞。已报道：经四氢生物蝶呤-补救途径，墨蝶呤在细胞内快速地转化成BH4，由此提高肝、肾和脑BH4水平(Sawabe，2008)。因此，墨蝶呤可用作与细胞内BH4水平低或与各种BH4依赖性代谢途径的功能异常相关的疾病的有用治疗剂。

本文中墨蝶呤是S-对映体并且具有式(I)：

已知墨蝶呤在溶液中具有有限的稳定性。此外，固体墨蝶呤的某些形式在氧化条件甚至在室温下和在光存在下降解。从而，对墨蝶呤的稳定固态形式存在未满足的需求。

发明简述

本发明提供墨蝶呤游离碱的固体形式，其中所述固体形式包括墨蝶呤游离碱的无定形形式、墨蝶呤游离碱的单一多晶型物形式、墨蝶呤游离碱的多晶型物形式的混合物、墨蝶呤的盐或墨蝶呤的盐的混合物、或其组合，条件是该固体形式不是形式A或形式E墨碟呤游离碱的纯多晶型物。

本发明还提供了墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式，或其混合物。例如，本发明提供了墨蝶呤盐酸盐的结晶多晶型物形式。

现在已出乎意料地发现：在一定条件下，形成墨蝶呤游离碱及酸盐的新晶形，其具有有利的应用和性质。本发明因此提供用于制备各种多晶型物的方法。

本发明还提供包含这些多晶型物中的一种或更多种的药物组合物。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在8.4°±0.5、16.9°±0.5或25.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在8.4°±0.5、16.9°±0.5和25.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在14.9°±0.5或34.1°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在8.4°±0.5、14.9°±0.5、16.9°±0.5、25.4°±0.5和34.1°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形具有如图1中所示的X-射线粉末衍射谱。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约195℃开始吸热。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在5.7°±0.5、7.8°±0.5或25.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在5.7°±0.5、7.8°±0.5和25.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在9.1°±0.5、11.5°±0.5、15.3°±0.5、16.0°±0.5、20.1°±0.5或26.6°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在5.7°±0.5、7.8°±0.5、9.1°±0.5、11.5°±0.5、15.3°±0.5、16.0°±0.5、20.1°±0.5、25.4°±0.5和26.6°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形具有如图2中所示的X-射线粉末衍射谱。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约58℃、102℃、130℃、156.5℃或168℃开始吸热。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约58℃、102℃、130℃、156.5℃和168℃开始吸热。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在8.9°±0.5、10.3°±0.5或26.0°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在8.9°±0.5、10.3°±0.5和26.0°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在10.9°±0.5、17.8°±0.5、24.9°±0.5、26.7°±0.5、26.8°±0.5或28.3°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在8.9°±0.5、10.3°±0.5、10.9°±0.5、17.8°±0.5、24.9°±0.5、26.0°±0.5、26.7°±0.5、26.8°±0.5和28.3°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形具有如图3中所示的X-射线粉末衍射谱。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约43℃、66℃或233℃开始吸热。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约43℃、66℃和233℃开始吸热。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在9.7°±0.5、10.2°±0.5或11.3°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在9.7°±0.5、10.2°±0.5和11.3°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在14.0°±0.5、14.6°±0.5、19.9°±0.5、22.2°±0.5、25.3°±0.5或32.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。在一些实施方案中，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，墨蝶呤的晶形在9.7°±0.5、10.2°±0.5、11.3°±0.5、14.0°±0.5、14.6°±0.5、19.9°±0.5、22.2°±0.5、25.3°±0.5和32.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形具有如图4中所示的X-射线粉末衍射谱。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约113℃或196℃开始吸热。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约113℃和196℃开始吸热。

在一个方面，本发明的特征在于包含任一前述的墨蝶呤的晶形或其组合的组合物。在所述组合物的一些实施方案中，权利要求1至27中任一项的墨蝶呤的晶形以所述组合物的至少90重量％的量存在。

在一个方面，本发明的特征在于包含任一前述的墨蝶呤的晶形的药物组合物。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形被配制成尺寸在50μm和250μm之间(例如尺寸小于100μm)的颗粒。

在一个方面，本发明的特征在于制备墨蝶呤的晶形的方法，其包括制备墨蝶呤的第一晶形在水、丙酮/水、异丙醇/乙酸异丙酯或四氢呋喃/正己烷中的浆料，从该浆料分离固体和干燥该固体。在一些实施方案中，将墨蝶呤的第一晶形的浆料在25-75℃搅拌6-72小时。在一些实施方案中，在20-30℃干燥固体6-24小时。在一些实施方案中，在40-60℃干燥固体5-10小时。在一些实施方案中，在大气压下干燥固体。在一些实施方案中，在真空下干燥固体。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的盐。在一些实施方案中，所述墨蝶呤盐是甲磺酸盐、烟酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、磷酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、乙醇酸盐、乙酸盐、硫酸盐或盐酸盐。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤的盐的晶形，其中墨蝶呤的盐的晶形是：

(a)墨蝶呤甲磺酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.8°±0.5、23.5°±0.5和/或29.0°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(b)墨蝶呤甲磺酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在21.7°±0.5、26.0°±0.5和/或28.9°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(c)墨蝶呤烟酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在9.5°±0.5、9.9°±0.5和/或24.5°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(d)墨蝶呤对甲苯磺酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在6.5°±0.5、15.1°±0.5和/或23.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(e)墨蝶呤苯磺酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在6.5°±0.5、14.8°±0.5和/或19.6°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(f)墨蝶呤磷酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在16.6°±0.5、22.2°±0.5和/或25.6°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(g)墨蝶呤丙二酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在6.9°±0.5、22.7°±0.5和/或23.8°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(h)墨蝶呤酒石酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.3°±0.5、14.2°±0.5和/或21.8°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(i)墨蝶呤龙胆酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.1°±0.5、8.7°±0.5和/或26.7°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(j)墨蝶呤富马酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在11.3°±0.5、24.0°±0.5和/或28.2°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(k)墨蝶呤乙醇酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.6°±0.5、10.7°±0.5和/或24.0°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(l)墨蝶呤乙酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在6.2°±0.5、12.0°±0.5和/或18.1°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；

(m)墨蝶呤硫酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在5.1°±0.5、7.8°±0.5和/或23.0°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰；或

(n)墨蝶呤硫酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.8°±0.5、8.8°±0.5和/或24.1°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一个方面，本发明的特征在于墨蝶呤盐酸盐的晶形，如通过用Cu KαX-射线照射通过X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算的，其在7.8°±0.5、12.9°±0.5和/或26.2°±0.5的衍射角2θ(°)处具有至少一个峰。

在一个方面，本发明的特征在于包含任一前述的墨蝶呤的盐的晶形的组合物。在一些实施方案中，所述墨蝶呤的盐的晶形以至少90重量％存在。

在一个方面，本发明的特征在于包含任一前述的墨蝶呤的盐的晶形和药学上可接受的载体的药物组合物。在一些实施方案中，墨蝶呤的晶形被配制成尺寸小于100μm的颗粒。

在另一方面，本发明的特征在于治疗需要其的患者中的BH4相关病症的方法，所述方法包括给予患者有效量的任一前述的墨蝶呤的晶形或药物组合物。在一些实施方案中，BH4-相关病症是与细胞内BH4水平低相关或与各种BH4依赖性代谢途径功能异常相关的疾病，包括但不限于原发性四氢生物蝶呤缺乏症、GTPCH缺乏症、6-丙酮酰基-四氢蝶呤合成酶(PTPS)缺乏症、DHPR缺乏症、墨蝶呤还原酶缺乏症、多巴胺反应性肌张力障碍、Segawa综合征、络氨酸羟化酶缺乏症、苯丙酮尿症、DNAJC12缺乏症、帕金森病、帕金森病导致的抑郁症、帕金森患者中的冲动行为、重度抑郁症、孤独症谱、ADHD、精神分裂症、双相型障碍、脑缺血、不宁腿综合症、强迫症、焦虑症、阿尔茨海默病中的攻击行为、脑血管病、胃轻瘫、蛛网膜下出血后痉挛、心肌炎、冠状动脉痉挛、心脏肥大、动脉硬化、高血压、血栓症、传染病、内毒素休克、肝硬化、肥厚性幽门狭窄、胃粘膜损伤、肺动脉高血压、肾功能障碍、阳痿和低血糖症。因此，可将根据本发明的墨蝶呤的各种形式以有效量给予患者以获得疾病或功能异常的治疗或改善。

在另一方面，本发明的特征在于提高有需要的受试者中的BH4、血清素和/或多巴胺水平(例如，至少5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％、300％、400％、500％、1000％或更多)的方法，所述方法包括给予患者有效量的任一前述的墨蝶呤的晶形或药物组合物。

在另一方面，本发明的特征在于降低有需要的受试者中的苯丙氨酸水平(例如，至少5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％、300％、400％、500％、1000％或更多)的方法，所述方法包括给予患者有效量的任一前述的墨蝶呤的晶形或药物组合物。

在另一方面，本发明的特征在于提高受试者中的苯丙氨酸羟化酶、络氨酸羟化酶、色氨酸羟化酶、一氧化氮合成酶和/或烷基甘油单加氧酶活性(例如，至少55％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、200％、300％、400％、500％、1000％或更多)的方法，所述方法包括给予患者有效量的任一前述的墨蝶呤的晶形或药物组合物。

在另一方面，本发明的特征在于治疗有需要的受试者中的苯丙酮尿症的方法，所述方法包括给予患者有效量的任一前述的墨蝶呤的晶形或药物组合物。

定义

在本申请中，除非从上下文另外清楚地看出，(i)术语“一”可理解为意指“至少一”；(ii)术语“或”可理解为意指“和/或”；(iii)术语“包含”和“包括”可理解为涵盖列出的组分或步骤，不管单独出现还是与一种或更多种另外的组分或步骤一起出现；和(iv)如本领域普通技术人员会理解的，术语“约”和“大约”可理解为允许标准偏差；和(v)在提供范围时，包括端点。

如本文中所用的，术语“给药”是指将组合物(例如，如本文中所述的化合物或包含化合物的制剂)给予受试者或身体。给药至动物受试者(例如，人)可通过任何合适途径。例如，在一些实施方案中，给药可通过支气管(包括通过支气管滴注)、颊、肠内、皮间(interdermal)、动脉内、皮内、胃内、脊髓内、肌肉内、鼻内、腹膜内、鞘内、静脉内、心室内、粘膜、鼻、口腔、直肠、皮下、舌下、局部、气管(包括通过气管内滴注)、经皮、阴道和玻璃体。

如本文中所用的，术语“BH4相关病症”是指可从BH4水平的调节(例如，抑制)获得治疗益处的任何疾病或病症，例如，苯丙酮尿症。

“确定蛋白质水平”意指通过本领域中已知的方法直接或间接检测蛋白质或编码蛋白质的mRNA。“直接确定”意味着进行一种方法(例如，在样品上进行分析或测试或“分析样品”，如同本文中定义了该术语)以获得物理实体或值。“间接确定”是指从另一方或来源(例如，直接获得物理实体或值的第三方实验室)获得物理实体或值。测定蛋白质水平的方法通常包括但不具有限于蛋白质印迹法、免疫印迹法、酶联免疫吸附测定(ELISA)、放射免疫分析(RIA)、免疫沉淀法、免疫荧光法、表面等离子共振法、化学发光法、荧光偏振法、磷光法、免疫组织化学分析、基质辅助激光解析/电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱法、液相色谱(LC)-质谱法、微细胞计量术、显微镜法、荧光激活细胞分选法(FACS)和流式细胞术以及基于蛋白性质(包括但不局限于酶活性或与其它蛋白伴侣的相互作用)的分析。测定mRNA水平的方法是本领域中已知的。

化合物的“有效量”可根据诸如疾病状态、个体的年龄、性别和体重以及化合物诱导希望的响应的能力的因素而变化。治疗有效量包括其中化合物的治疗有益效果比化合物的任何毒性或有害效果更重要的量。治疗有效量还包括足够赋予益处例如临床益处的量。

“提高苯丙氨酸羟化酶的活性”意指提高与苯丙氨酸羟化酶相关的活性水平或相关的下游效果。提高苯丙氨酸羟化酶活性的非限定性实例是降低苯丙氨酸水平。可使用本领域中已知的任何方法测定苯丙氨酸羟化酶的活性水平。

“水平”意指与参照物比较，蛋白质或编码蛋白质的mRNA的水平。如本文中所定义的，参照物可为任何可用的参照物。蛋白质的“降低的水平”或“提高的水平”意指与参照物相比，蛋白质水平的降低或提高(例如，约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％、约100％、约150％、约200％、约300％、约400％、约500％或更多的降低或提高；与参照物相比，大于约10％、约15％、约20％、约50％、约75％、约100％或约200％的降低或提高；小于约0.01倍、约0.02倍、约0.1倍、约0.3倍、约0.5倍、约0.8倍或更少的降低或提高；或大于约1.2倍、约1.4倍、约1.5倍、约1.8倍、约2.0倍、约3.0倍、约3.5倍、约4.5倍、约5.0倍、约10倍、约15倍、约20倍、约30倍、约40倍、约50倍、约100倍、约1000倍或更多的提高)。蛋白质水平可以质量/体积(例如，g/dL、mg/mL、μg/mL、ng/mL)或相对于样品中的全部蛋白或mRNA的百分比表示。

如本文中所用的，术语“药物组合物”表示包含与药学上可接受的赋形剂一起配制的本文中描述的化合物并且政府管理机构许可作为用于治疗哺乳动物中的疾病的治疗方案的部分制造或销售的组合物。可配制药物组合物例如用于以单位剂型口服给药(例如，片剂、胶囊、胶囊形片剂、软明胶胶囊、混悬剂、溶液或糖浆)；用于局部给药(例如，作为乳膏剂、凝胶、洗剂或软膏)；用于静脉内给药(例如，作为不含颗粒栓并且在适合于静脉内使用的溶剂体系中的无菌溶液)；或以采取任何其它药学上可接受的制剂的形式。

如本文中所用的“药学上可接受的赋形剂”是指不同于本文中描述的化合物并在患者内具有基本上无毒性和无炎症性性质的任何成分(例如，能够使活性化合物悬浮或溶解的载体)。赋形剂可包括例如：防粘剂、抗氧化剂、粘合剂、涂布剂、压缩助剂、崩解剂、染料(着色剂)、软化剂、乳化剂、填料(稀释剂)、成膜剂或包衣、调味剂、香料、助流剂(流动增强剂)、润滑剂、防腐剂、印刷油墨、吸附剂、悬浮或分散剂、甜味剂和水合的水。示例性赋形剂包括但不限于：抗坏血酸、丁基化羟基甲苯(BHT)、碳酸钙、磷酸(氢)钙、硬脂酸钙、胶态二氧化硅、交联羧甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、柠檬酸、交联聚维酮、半胱氨酸、乙基纤维素、明胶、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乳糖、硬脂酸镁、麦芽糖醇、甘露醇、蛋氨酸、甲基纤维素、羟苯甲酸甲酯、微晶纤维素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚维酮、预胶化淀粉、羟苯甲酸丙酯、棕榈酸视黄酯、虫胶、二氧化硅、羧甲基纤维素钠、柠檬酸钠、淀粉甘醇酸钠、山梨糖醇、淀粉(玉米)、硬脂酸、蔗糖、滑石、二氧化钛、维生素A、维生素E、维生素C和木糖醇。

如本文中所用的，术语“药学上可接受的盐”意指式(I)的化合物的任何药学上可接受的盐。例如，任何本文中描述的化合物的药学上可接受的盐包括在合理医学判断范围内、适合用于与人和动物的组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应并且与合理利弊比相称的那些。药学上可接受的盐是本领域中熟知的。例如，药学上可接受的盐描述于Berge等人.，J.Pharmaceutical Sciences 66:1-19,1977和Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,(P.H.Stahl和C.G.Wermuth编辑)，Wiley-VCH,2008中。所述盐可在本文中描述的化合物的最终分离和纯化期间原位制备或单独通过使游离碱基团与合适的有机酸反应制备。

本发明的化合物可具有可电离基团从而能够制备成药学上可接受的盐。这些盐可为涉及无机或有机酸的酸加成盐，或所述盐(在本发明化合物的酸形式的情况下)可由无机或有机碱制备。通常地，化合物制备成或作为药学上可接受的盐使用，所述药学上可接受的盐制备成药学上可接受的酸或碱的加成产物。适合的药学上可接受的酸和碱和合适的盐的制备方法是本领域中熟知的。盐可由药学上可接受的无毒酸和碱(包括无机和有机酸和碱)制备。

代表性的酸加成盐包括乙酸盐、己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天(门)冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚糖酸盐、己酸盐、氢溴酸盐、氢氯酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、巴莫酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、十一烷酸盐和戊酸盐。代表性碱或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙和镁以及非毒性铵、季铵和胺阳离子，包括但不局限于铵、四甲基铵、四乙基铵、甲基胺、二甲基胺、三甲基胺、三乙基胺和以及乙基胺。

“参照物”意指用于比较蛋白质或mRNA水平的任何可用参照物。该参照物可为用于比较目的的任何样品、标准、标准曲线或水平。所述参照物可为正常参照样品或参照标准或水平。“参照样品”可为例如对照物，例如预定阴性对照值如“正常对照”或从同一受试者取得的在先样品；来自从正常健康受试者的样品，如正常细胞或正常组织；来自没有疾病的受试者的样品(例如，细胞或组织)；来自被诊断有疾病但还没有用本发明的化合物治疗的受试者的样品；来自已通过本发明的化合物治疗的受试者的样品；或者已知正常浓度的纯化蛋白(例如，本文中描述的任一种)的样品。“参照标准或水平”意指从参照样品获得值或数字。“正常对照值”是指示非疾病状态的预定值，例如，在健康对照受试者中预期的值。典型地，正常对照值表示为范围(“在X和Y之间”)、高阈值(“不高于X”)或低阈值(“不低于X”)。对于特定生物标记具有在正常对照值范围内的测定值的受试者通常称为对于该生物标记“在正常限度内”。正常参照标准或水平可为从不具有疾病或病症(例如，癌症)的正常受试者获得的值或数字；已用本发明的化合物治疗的受试者。在优选实施方案中，参照样品、标准或水平通过以下标准中的至少一种与样品受试者样品匹配：年龄、体重、性别、疾病阶段和整体健康。在正常参照范围内的纯化蛋白质(例如，本文中描述的任一种)水平的标准曲线也可用作参照物。

如本文中所用的，术语“受试者”或“患者”是指例如为实验、诊断、预防和/或治疗目的可向其给予根据本发明的组合物的任何有机体。典型的受试者包括任何动物(例如，哺乳动物如小鼠、大鼠、兔子、非人灵长类动物和人)。受试者可寻求或需要治疗、要求治疗、正接受治疗、将来接受治疗，或者可为受到针对特定疾病或状况受过专业训练者照顾的人或动物。

如本文中所用的，术语“治疗”(treat、treated或treating)意指治疗性治疗和预防性(prophylactic或preventative)措施两者，其中目的是防止或减慢(减轻)不期望的生理状况、病症或疾病，或获得有利或希望的临床结果。有利或期望的临床结果包括但不局限于症状的减轻；状况、病症或疾病程度的减小；状况、病症或疾病的稳定(即，不恶化)状态；状况、病症或疾病发作的延迟或进展的减慢；状况、病症或疾病状态的改善或减轻(不管部分还是全部)，不管可检测或不可检测的；至少一种可测物理参数(不必是患者可辨别的)的改善；或者状况、病症或疾病的增强或改善。治疗包括诱导临床上重要响应而没有过量水平的副作用。治疗还包括与如果不接受治疗的预期存活相比，延长存活。

除非另外定义，本文中所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文中描述了用于本公开的方法和材料；也可使用本领域中已知的其它合适方法和材料。所述材料、方法和实例仅为示例性的而非用于限定。本文中提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献通过引用其全文而结合。在有冲突的情况下，本说明书(包括定义)起决定作用。

下面的描述阐述本发明的一个或更多个实施方案的细节。本发明的其它特征、目的和优点将从说明书和权利要求书显而易见。

附图的几个视图的简述

图1显示墨蝶呤游离碱的晶形B的X-射线衍射图。

图2显示墨蝶呤游离碱的晶形C的X-射线衍射图。

图3显示墨蝶呤游离碱的晶形D的X-射线衍射图。

图4显示墨蝶呤游离碱的晶形F的X-射线衍射图。

图5显示墨蝶呤游离碱的晶形G的X-射线衍射图。

图6显示墨蝶呤的晶形1盐酸盐的和该盐酸盐制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图7显示墨蝶呤的晶形1甲磺酸盐、晶形2甲磺酸盐、晶形3甲磺酸盐和所述甲磺酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图8显示墨蝶呤的结晶烟酸盐、烟酸和该烟酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图9显示墨蝶呤的结晶对甲苯磺酸盐、对甲苯磺酸和该对甲苯磺酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图10显示墨蝶呤的结晶苯磺酸盐、苯磺酸和该苯磺酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图11显示墨蝶呤的结晶磷酸盐和该磷酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图12显示墨蝶呤的结晶丙二酸盐、丙二酸和该丙二酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图13显示墨蝶呤的结晶L-酒石酸盐、L-酒石酸和该L-酒石酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图14显示墨蝶呤的结晶龙胆酸盐、龙胆酸和该龙胆酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图15显示墨蝶呤的结晶富马酸盐、富马酸和该富马酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图16显示墨蝶呤的结晶乙醇酸盐、乙醇酸和该乙醇酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图17显示墨蝶呤的结晶乙酸盐和该乙酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图18显示墨蝶呤晶形1硫酸盐、墨蝶呤晶形2硫酸盐和所述硫酸盐的制备中所用的起始墨蝶呤游离碱的X-射线衍射图的重叠。

图19显示研磨和筛选过程之前和之后墨蝶呤形式A的晶形的X-射线衍射图的重叠并证实了其对研磨和筛选的物理形式稳定性。

图20显示了研磨和筛选过程之前和之后的墨蝶呤形式F的晶形的X-射线衍射图的重叠加并证实了其对研磨和筛选的稳定性。

图21显示了研磨和筛选过程之前和之后的墨蝶呤形式D的晶形以及作为参考物的墨蝶呤形式D和形式F的X-射线衍射图的重叠。该图显示了形式D对研磨和筛选的潜在不稳定性。

图22显示了墨蝶呤游离碱的晶形E的X-射线衍射图。

发明详述

本发明提供了墨蝶呤的固体形式，其中所述固体形式包括墨蝶呤的无定形形式、结晶多晶型物形式、无定形和/或结晶多晶型物形式的混合物、盐或其组合，条件是固体形式的墨蝶呤不是纯多晶型物形式A和/或纯多晶型物形式E。

在一个实施方案中，在所述墨蝶呤的固体形式中，所述混合物包括墨蝶呤的结晶多晶型物形式B、C、D、F和G中的至少一种。

在一个实施方案中，所述固体形式包括选自多晶型物形式B、C、D、F和G中的至少一种结晶墨蝶呤游离碱和结晶多晶型物A或E或结晶多晶型物A和E两者。

墨蝶呤游离碱的多晶型物以及墨蝶呤的盐的多晶型物可被用于研究固态材料的任何合适方法表征。在一个实施方案中，多晶型物通过X-射线粉末衍射法(XRD)表征。XRD峰位置表示为2θ°。在X-射线图中，折射角2θ画在水平轴(x-轴)上而相对峰强度(背景校正的峰强度)画在垂直轴(y-轴)上。在相当于PANalytical Empyrean X-射线粉末衍射仪的仪器上或使用相当于PANalytical Empyrean X-射线粉末衍射仪的仪器测定X-射线粉末衍射图，所述仪器具有Cu Kα辐射源(Kα1辐射，波长λ＝1.54060埃，Kα2辐射，波长1.544426埃；Kα2/Kα1强度比：0.50)。膜上的峰的光密度与光强度成正比。使用峰扫描仪来扫描膜。

当其涉及整个申请中列出的任何X-射线粉末衍射峰时，“约”指以“度”表示的2θ值±0.1，特别地±0.05，更特别地±0.02。

在一个实施方案中，墨蝶呤的结晶多晶型物形式B的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约8.4、约16.9和约25.4°处具有表示为2θ的峰。

在一个特别实施方案中，墨蝶呤的结晶多晶型物形式B的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约8.4、约14.9、约16.9、约25.4和约34.1°处具有表示为2θ的峰。

在一个实施方案中，墨蝶呤的结晶多晶型物形式C的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约5.7、约7.8和约25.4°处具有表示为2θ的峰。

在一个特别实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式C的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约5.7、约7.8、约9.1、约11.5、约15.3、约16.0、约20.1、约25.4和约26.6°处具有表示为2θ的峰。

在一个实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式D的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约8.9、约10.3和约26.0°处具有表示为2θ的峰。

在一个特别实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式D的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约8.9、约10.3、约10.9、约17.8、约24.9、约26.0、约26.7、约26.8和约28.3°处具有表示为2θ的峰。

在一个实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式F的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约9.7、约10.2和约11.3°处具有表示为2θ的峰。

在一个特别实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式F的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图，所述图至少在约9.7、约10.2、约11.3、约14.0、约14.6、约19.9、约22.2、约25.3和约32.4°处具有表示为2θ的峰。

在一个实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式G的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约10.0、约10.6和约25.7°处具有表示为2θ的峰。

在一个特别实施方案中，结晶墨蝶呤多晶型物形式G的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约10.0、约10.6、约11.2、约15.3、约15.9、约22.8、约24.4、约25.0、约25.7和约26.6°处具有表示为2θ的峰。

在一个实施方案中，所述固体形式包括选自多晶型物形式B、C、D、F和G的至少一种晶体墨蝶呤游离碱；选自多晶型物形式B、C和D的至少一种晶体墨蝶呤游离碱；选自多晶型物形式B、C和F的至少一种晶体墨蝶呤游离碱；选自多晶型物形式D、F和G的至少一种晶体墨蝶呤游离碱；以及所述多晶型物形式的任何两元、三元或四元组合。上述固体形式可进一步包括多晶型物A和/或E。

在一个实施方案中，多晶型物形式B、C、D或G或其组合以所述固体形式的至少90重量％的量存在于所述固体形式中。

在某些实施方案中，结晶墨蝶呤游离碱以至少70重量％或更多、至少80重量％或更多、优选至少90重量％或更多存在，基于所述墨蝶呤游离碱的重量。

墨蝶呤游离碱的晶形A的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约4.7°、约7.4°、约9.5°、约11.3°、约15.6°、约26.2°和约27.2°处具有表示为2θ的峰。

图19显示墨蝶呤游离碱的形式A的X-射线衍射图。在约7.4°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。晶形A的特征在于至少约4.7°、约7.4°、约9.5°、约11.3°、约15.6°、约26.2°和约27.2°的2θ峰位置。在墨蝶呤游离碱的晶形A的基本上纯的材料中，在如表1中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表1

位置[2θ°]	相对强度
		4.7	47.76
7.4	100.00
		9.5	33.54
11.3	19.31
		12.4	8.49
13.4	3.60
		14.2	8.24
15.6	15.08
		16.4	11.97
17.6	8.35
		18.4	5.03
19.8	9.18
		21.5	5.44
24.4	5.56
		26.2	35.37
27.2	19.11
		28.9	5.93

墨蝶呤游离碱的晶形B的特征在于在至少约8.4、约16.9和约25.4的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图1显示墨蝶呤游离碱的晶形B的X-射线衍射图。在约8.4°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。晶形B的特征在于在至少约8.4°、约14.9°、约16.9°、约25.4°和约34.1°的折射角2θ处的折射。在墨蝶呤游离碱的晶形B的基本上纯的材料中，在如表2中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表2

位置[2θ°]	相对强度
		8.4	100.00
14.9	2.34
		16.9	10.70
25.4	84.90
		34.1	3.00

墨蝶呤游离碱的晶形C的特征在于至少在约5.7°、约7.8°和约25.4°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图2显示墨蝶呤游离碱的晶形C的X-射线衍射图。在至少约7.8°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。晶形C的特征在于在至少约5.7°、约7.8°、约9.1°、约11.5°、约15.3°、约16.0°、约20.1°、约25.4°和约26.6°的折射角2θ处的折射。在墨蝶呤游离碱的形式C的基本上纯的材料中，在如表3中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表3

墨蝶呤游离碱的晶形D的特征在于至少在约8.9°、约10.3°和约26.0°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图3显示墨蝶呤游离碱的晶形D的X-射线衍射图。在至少约8.9°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。晶形D的特征在于在至少约8.9°、约10.3°、约10.9°、约17.8°、约24.9°、约26.0°、约26.7°、约26.8°和约28.3°的折射角2θ处的折射。在墨蝶呤游离碱的形式D的基本上纯的材料中，在如表4中所列的折射角2θ处观察到峰。

表4

墨蝶呤游离碱的晶形E的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约6.0°、约10.6°、约12.1°、约15.9°、约20.8°和约24.6°处具有表示为2θ的峰。

图22显示了墨蝶呤游离碱的形式E的X-射线衍射图。在折射角2θ为至少约6.0°处观察到X-射线衍射图中最强的峰。晶形E的特征在于在至少约6.0°、约10.6°、约12.1°、约15.9°、约20.9°和约24.6°的折射角2θ处的折射。在墨蝶呤游离碱的晶形E的基本上纯的材料中，在如表5中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表5

墨蝶呤游离碱的晶形F的特征在于在至少约9.7°、约10.2°和约11.3°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图4显示墨蝶呤游离碱的F形式的X-射线衍射图。在至少约10.2°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。F形式的特征在于在至少约9.7°、约10.2°、约11.3°、约14.0°、约14.6°、约19.9°、约22.2°、约25.3°和约32.4°的折射角2θ处的折射。在基本上纯的墨蝶呤游离碱的F形式中，在如表6中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表6

位置[2θ°]	相对强度
		9.7	98.27
10.2	100.00
		11.3	22.47
14.0	5.01
		14.6	12.36
19.9	5.63
		21.1	3.72
22.2	5.37
		22.7	4.04
24.5	2.99
		25.3	17.65
27.2	3.10
		32.4	5.29
36.7	2.72

墨蝶呤游离碱的晶形G的特征在于在至少约10.0°、约10.6°和约25.7°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图5显示在120℃下获得的墨蝶呤游离碱的晶形G的X-射线衍射图。在至少约10.0°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。更广泛地，G-晶形的特征在于在至少约10.0°、约10.6°、约11.2°、约15.3°、约15.9°、约22.8°、约24.4°、约25.0°、约25.7°和约26.6°的折射角2θ处的折射。在墨蝶呤游离碱的G-晶形的基本上纯的材料中，在如表7中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表7

位置[2θ°]	相对强度
		5.3	8.30
6.9	4.54
		10.0	100.00
10.6	69.64
		11.2	6.59
13.5	7.52
		15.3	26.59
15.9	26.43
		16.0	23.41
16.9	4.28
		18.6	13.02
19.3	11.90
		20.1	7.22
20.8	11.01
		22.8	16.77
23.5	19.60
		24.4	41.45
25.0	23.99
		25.7	65.40
26.6	39.64
		27.6	13.04
28.7	6.55
		30.8	14.76
32.2	9.63
		33.7	5.16
37.5	5.80

在描述墨蝶呤游离碱的晶形A展现基本上如图19中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图19中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，或者此外，墨蝶呤游离碱的晶形A的特征在于在82.8℃和179.8℃处显示吸热峰的DSC曲线。

在描述墨蝶呤游离碱的晶形B展现基本上如图1中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图1中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，或者此外，墨蝶呤游离碱的晶形B的特征在于在195.2℃处显示熔融现象(melting event)的DSC曲线。

在优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的晶形B显示图1中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形B显示图1中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图1中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图1中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

在描述墨蝶呤游离碱的晶形C展现基本上如图2中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图2中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，墨蝶呤游离碱的晶形C的特征在于在58.3℃、101.8℃、129.8℃、156.5℃和168.3℃处显示五个吸热峰的DSC曲线。

在一个优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的晶形C显示图2中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形C显示图2中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图2中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图2中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

在描述墨蝶呤游离碱的结晶晶形D展现基本上如图3中的X-射线衍射图谱的上下文中，术语“基本上”意味着至少图3中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，墨蝶呤游离碱的晶形D的特征在于在42.7℃、66.3℃和232.9℃处显示三个吸热峰的DSC曲线。

在一个优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的晶形D显示图3中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形D显示图3中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图3中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图3中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

在描述墨蝶呤游离碱的晶形E显示基本上如图22中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”表示至少图22中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，该墨蝶呤游离碱的晶形E的特征在于在112.9℃和195.8℃处显示两个吸热峰的DSC曲线。

在描述墨蝶呤游离碱的晶形F展现基本上如图4中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图4中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，墨蝶呤游离碱的晶形F的特征在于在71.6℃和233.4℃处显示两个吸热峰的DSC曲线。

在一个优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的晶形F显示图4中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形F显示图4中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图4中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图4中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

在描述墨蝶呤游离碱的晶形G展现基本上如图5中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图5中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

在一个优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的晶形G显示图5中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形G显示图5中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图5中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图5中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

本发明还提供墨蝶呤盐酸盐的晶形。

在一个实施方案中，该结晶盐酸盐的特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.8°、约12.9°和约26.2°处具有表示为2θ的峰。

本发明还提供墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式。在某些实施方案中，本发明提供墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式，其中所述盐是墨蝶呤与硫酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、丙二酸、酒石酸(例如L-酒石酸)、磷酸、龙胆酸、富马酸、乙醇酸、乙酸或烟酸的盐。

在特别的实施方案中，该结晶多晶型物盐选自：

晶形1甲磺酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.8°、约23.5°和约29.0°处具有表示为2θ的峰；

晶形2甲磺酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.9°、约23.4°和约28.9°处具有表示为2θ的峰；

晶形3甲磺酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约21.7°、约26.0°和约28.9°处具有表示为2θ的峰；

结晶烟酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约9.5°、约9.9°和约24.5°处具有表示为2θ的峰；

结晶对甲苯磺酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约6.5°、约15.1°和约23.4°处具有表示为2θ的峰；

结晶苯磺酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约6.5°、约14.8°和约19.6°处具有表示为2θ的峰；

结晶磷酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约16.6°、约22.2°和约25.6°处具有表示为2θ的峰；

结晶丙二酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约6.9°、约22.7°和约23.8°处具有表示为2θ的峰；

结晶酒石酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.3°、约14.2°和约21.8°处具有表示为2θ的峰；

结晶龙胆酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.1°、约8.7°和约26.7°处具有表示为2θ的峰；

结晶富马酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图在约11.3°、约24.0°和约28.2°处具有表示为2θ的峰；

结晶乙醇酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.6°、约10.7°和约24.0°处具有表示为2θ的峰；

结晶乙酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约6.2°、约12.0°和约18.1°处具有表示为2θ的峰；

晶形1硫酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约5.1°、约7.8°和约23.0°处具有表示为2θ的峰；和

晶形2硫酸盐，其特征在于通过用Cu KαX-射线照射获得的X-射线粉末衍射图至少在约7.8°、约8.8°和约24.1°处具有表示为2θ的峰。

墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐特征在于至少在约7.8°、约12.9°和约26.2°的衍射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图6显示墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐的X-射线衍射图。在至少约7.8°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐的基本上纯的材料中，在如表8中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表8

墨蝶呤游离碱的晶形1甲磺酸盐的特征在于至少在约7.8°、约23.5°和约29.0°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图17显示墨蝶呤游离碱的晶形1甲磺酸盐的X-射线衍射图。在至少约23.5°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的晶形1甲磺酸盐的基本上纯的材料中，在如表9中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表9

墨蝶呤游离碱的晶形2甲磺酸盐的特征在于至少在约7.9°、约23.4°和约28.9°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图7显示墨蝶呤游离碱的晶形2甲磺酸盐的X-射线衍射图。在至少约23.5°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的晶形2甲磺酸盐的基本上纯的材料中，在如表10中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表10

位置[2θ°]	相对强度
		7.9	100.00
11.0	21.32
		12.1	22.02
13.5	79.87
		15.7	11.87
17.8	9.81
		19.7	10.93
21.3	26.79
		23.4	96.13
24.1	24.88
		24.3	22.10
25.5	9.45
		26.0	11.27
27.6	7.63
		28.9	95.64
31.2	4.39
		36.1	6.65

墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐的特征在于至少在约21.7°、约26.0°和约28.9°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图7显示墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐的X-射线衍射图。在至少约26.0°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐的基本上纯的材料中，在如表11中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表11

位置[2θ°]	相对强度
		8.2	47.29
10.8	56.14
		12.6	16.34
13.2	15.90
		14.0	24.39
15.0	12.03
		15.9	16.20
18.2	22.97
		20.1	25.53
20.5	14.97
		21.3	22.70
21.7	71.48
		22.2	11.40
23.6	46.37
		24.8	44.00
25.5	9.08
		26.1	100.00
27.3	3.52
		28.9	68.42
31.2	4.49
		32.1	6.48
34.8	5.95
		35.6	1.67
39.1	2.91

墨蝶呤游离碱的结晶烟酸盐的特征在于至少在约9.5°、约9.9°和约24.5°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图8显示墨蝶呤游离碱的结晶烟酸盐的X-射线衍射图。在至少约24.5°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图谱的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶烟酸盐的基本上纯的材料中，在如表12中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表12

位置[2θ°]	相对强度
		9.5	10.29
9.9	53.95
		11.5	9.31
12.0	11.76
		14.7	14.20
15.9	17.61
		17.5	7.53
19.0	5.37
		20.8	5.88
21.3	6.12
		21.7	7.20
23.2	34.05
		24.5	100.00
25.2	12.90
		28.0	8.51
31.1	5.39
		32.3	4.52
33.4	8.02
		35.1	5.05

墨蝶呤游离碱的结晶对甲苯磺酸盐的特征在于至少在约6.5°、约15.1°和约23.4°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图9显示墨蝶呤游离碱的结晶对甲苯磺酸盐的X-射线衍射图。在至少约6.5°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的对甲苯磺酸盐的基本上纯的材料中，在如表13中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表13

墨蝶呤游离碱的结晶苯磺酸盐的特征在于至少在约6.5°、约14.8°和约19.6°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图10显示墨蝶呤游离碱的结晶苯磺酸盐的X-射线衍射图。在至少约6.5°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的苯磺酸盐的基本上纯的材料中，在如表14中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表14

/>

墨蝶呤游离碱的结晶磷酸盐的特征在于至少在约16.6°、约22.2°和约25.6°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图11显示墨蝶呤游离碱的结晶磷酸盐的X-射线衍射图。在至少约25.6°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶磷酸盐的基本上纯的材料中，在如表15中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表15

位置[2θ°]	相对强度
		5.5	4.41
8.1	1.21
		8.9	2.21
10.3	1.79
		10.8	5.80
15.3	1.84
		16.6	8.35
17.7	1.95
		20.3	1.40
21.2	1.61
		22.2	9.77
23.1	1.74
		25.6	100.00
30.8	6.31
		31.1	4.85
33.5	0.73
		36.0	1.70

墨蝶呤游离碱的结晶丙二酸盐的特征在于至少在约6.9°、约22.7°和约23.8°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图12显示墨蝶呤游离碱的结晶丙二酸盐的X-射线衍射图。在至少约6.9°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶丙二酸盐的基本上纯的材料中，在如表16中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表16

位置[2θ°]	相对强度
		6.9	100.00
8.4	13.11
		10.6	7.62
16.4	5.63
		17.8	9.73
19.3	8.96
		20.1	9.99
22.2	10.50
		22.7	20.52
23.8	34.02
		24.5	5.82
25.5	24.50
		26.6	4.00
27.3	6.96
		29.8	5.38
33.1	12.08

墨蝶呤游离碱的结晶L-酒石酸盐的特征在于至少在约7.3°、约14.2°和约21.8°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图13显示墨蝶呤游离碱的结晶L-酒石酸盐的X-射线衍射图。在至少约6.9°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶L-酒石酸盐的基本上纯的材料中，在如表17中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表17

墨蝶呤游离碱的结晶龙胆酸盐的特征在于至少在约7.1°、约8.7°和约26.7°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图14显示墨蝶呤游离碱的结晶龙胆酸盐的X-射线衍射图。在至少约7.1°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶龙胆酸盐的基本上纯的材料中，在如表18中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表18

墨蝶呤游离碱的结晶富马酸盐的特征在于至少在约11.3°、约24.0°和约28.2°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图15显示墨蝶呤游离碱的结晶富马酸盐的X-射线衍射图。在至少约24.0°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶富马酸盐的基本上纯的材料中，在如表19中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表19

位置[2θ°]	相对强度
		6.1	6.43
7.7	5.40
		11.4	53.62
11.9	33.37
		14.2	8.03
16.5	6.70
		18.3	13.86
19.0	6.68
		20.7	10.02
21.3	7.02
		22.8	24.68
24.0	100.00
		28.3	33.26
32.7	6.35
		36.0	3.28
38.5	6.02

墨蝶呤游离碱的结晶乙醇酸盐的特征在于至少在约7.6°、约10.7°和约24.0°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图16显示墨蝶呤游离碱的结晶乙醇酸盐的X-射线衍射图。在至少约7.6°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶乙醇酸盐的基本上纯的材料中，在如表20中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表20

位置[2θ°]	相对强度
		4.8	6.23
7.6	100.00
		10.3	68.06
10.7	70.69
		15.3	36.51
18.2	24.25
		18.7	27.26
19.9	2.66
		21.2	17.11
24.0	96.62
		24.4	18.44
28.8	47.57
		30.3	7.43
32.5	4.42
		33.3	7.49
34.3	5.21
		36.3	7.37

墨蝶呤游离碱的结晶乙酸盐的特征在于至少在约6.2°、约12.0°和约18.1°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图17显示墨蝶呤游离碱的结晶乙酸盐的X-射线衍射图。在至少约6.2°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的结晶乙酸盐的基本上纯的材料中，在如表21中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表21

位置[2θ°]	相对强度
		6.2	100.00
10.2	23.29
		12.0	71.59
18.1	31.27
		21.1	20.29
24.2	14.92
		25.2	23.03
27.3	13.30
		29.1	12.95

墨蝶呤游离碱的晶形1硫酸盐的特征在于至少在约5.1°、约7.8°和约23.0°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图18显示墨蝶呤游离碱的晶形1硫酸盐的X-射线衍射图。在至少约5.1°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的晶形1硫酸盐的基本上纯的材料中，在如表22中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表22

/>

墨蝶呤游离碱的晶形2硫酸盐的特征在于至少在约7.8°、约8.8°和约24.1°的折射角2θ处观察到的X-射线衍射图中的峰。

图18显示墨蝶呤游离碱的晶形2硫酸盐的X-射线衍射图。在至少约8.8°的折射角2θ处观察到X-射线衍射图中的最高强度峰。在墨蝶呤游离碱的晶形2硫酸盐的基本上纯的材料中，在如表23中所列的折射角2θ处可观察到峰。

表23

位置[2θ°]	相对强度
		5.0	4.71
7.9	72.24
		8.8	100.00
14.5	19.26
		15.7	59.40
16.1	8.69
		17.2	14.82
17.7	10.89
		19.3	9.92
20.2	9.60
		23.7	15.38
24.2	43.88
		25.0	11.44
26.8	16.81
		28.7	16.07
29.4	13.84
		31.3	17.14
31.7	7.26
		35.7	5.75

在描述墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐展现基本上如图6中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图6中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰必须存在。

替代地，墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐的特征在于在225.9℃处显示吸热峰的DSC曲线。

在一个优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐显示图6中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐显示图6中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图6中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其显示与图6中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图谱。

在墨蝶呤游离碱的结晶盐形式(如晶形1甲磺酸盐、晶形2甲磺酸盐、晶形3甲磺酸盐、结晶烟酸盐、结晶对甲苯磺酸盐、结晶苯磺酸盐、结晶磷酸盐、结晶丙二酸盐、结晶L-酒石酸盐、结晶龙胆酸盐、结晶富马酸盐、结晶乙醇酸盐、结晶乙酸盐、晶形1硫酸盐和晶形2硫酸盐)分别展示如基本上如图7-18中的X-射线衍射图的上下文中，术语“基本上”意味着至少图7-18中描绘的图的主峰，即与该图中的最高强度峰相比相对峰强度大于20％、尤其大于30％的那些峰，必须存在。

在优选实施方案中，基本上纯的墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐显示图6中所示的X-射线衍射图。

在另一优选实施方案中，墨蝶呤游离碱的晶形1甲磺酸盐、晶形2甲磺酸盐、晶形3甲磺酸盐、结晶烟酸盐、结晶对甲苯磺酸盐、结晶苯磺酸盐、结晶磷酸盐、结晶丙二酸盐、结晶L-酒石酸盐、结晶龙胆酸盐、结晶富马酸盐、结晶乙醇酸盐、结晶乙酸盐、晶形1硫酸盐和晶形2硫酸盐显示图7-18中显示的类型的X-射线衍射图，其中各峰的相对峰强度与图7-18中显示的图中的相对峰强度偏差不超过10％，尤其分别显示与图7-18中所示的X-射线衍射图相同的X-射线衍射图。

替代地，墨蝶呤游离碱的晶形1甲磺酸盐的特征在于在186.0℃和229.1℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的晶形2甲磺酸盐的特征在于在75.5℃、182.6℃和234.9℃处显示三个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐的特征在于在195.1℃和240.1℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶烟酸盐的特征在于在221.9℃处显示吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶对甲苯磺酸盐的特征在于在77.2℃、202.4℃和260.2℃处显示三个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶苯磺酸盐的特征在于在202.3℃和265.5℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶磷酸盐的特征在于在125.9℃、152.1℃和157.6℃处显示三个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶丙二酸盐的特征在于在115.8℃处显示熔融现象的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶L-酒石酸盐的特征在于在97.2℃和160.6℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶龙胆酸盐的特征在于在70.5℃、128.2℃和184.7℃处显示三个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶富马酸盐的特征在于在114.3℃和229.7℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶乙醇酸盐的特征在于在133.9℃和147.7℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；

墨蝶呤游离碱的结晶乙酸盐的特征在于在146.1℃和175.4℃处显示两个吸热峰的DSC曲线；和

墨蝶呤游离碱的晶形1硫酸盐的特征在于在94.5℃、158.3℃和209.9℃处显示三个吸热峰的DSC曲线。

在任一上述实施方案中，结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可作为无水物(例如，不具有任何结合水或溶剂或水化或溶剂化)或作为水合物、部分水合物(例如，半水合物、倍半水合物等)、作为二水合物、三水合物或类似物出现，其中晶形结合水合的水或与墨蝶呤的晶形或其盐缔合的溶剂分子。在一个实施方案中，结晶墨蝶呤形式B作为无水物出现。在一个实施方案中，结晶墨蝶呤形式C作为一水合物或作为倍半水合物出现。在一个实施方案中，结晶墨蝶呤形式D作为一水合物或作为倍半水合物出现。在一个实施方案中，结晶墨蝶呤形式F作为一水合物或作为半水合物出现。在一个实施方案中，结晶墨蝶呤形式G作为无水物出现。

在一个实施方案中，本发明提供制备墨蝶呤的晶形D的方法。所述方法包括制备墨蝶呤在液体中的浆料，其中所述液体为水、丙酮/水、异丙醇/乙酸异丙酯或四氢呋喃/正己烷，和从所述浆料分离墨蝶呤形式D。优选地，所述液体为水。墨蝶呤形式D可使用任何合适的分离方法例如通过离心或通过过滤分离。优选地，墨蝶呤形式D通过过滤分离。典型地，墨蝶呤形式D可进一步通过在室温下干燥从溶剂(例如，水)中释放出来。

在一个实施方案中，本发明提供制备墨蝶呤的晶形F的方法。所述方法包括制备墨蝶呤在溶剂中的浆料，其中所述溶剂为水、丙酮/水、异丙醇/乙酸异丙酯或四氢呋喃/正己烷，和从所述浆料分离墨蝶呤形式D。优选地，所述溶剂为水。墨蝶呤形式D可使用任何合适的分离方法例如通过离心或通过过滤分离。优选地，墨蝶呤形式D通过过滤分离。然后将墨蝶呤形式D转化成形式F，典型地，通过加热至40-60℃，保持0.5-10小时。可在大气压或在真空下加热。优选，在真空下加热。

墨蝶呤可用作用于与细胞内BH4水平低相关或与各种BH4依赖性代谢途径功能异常相关的疾病的有用治疗剂，所述疾病包括但不限于原发性四氢生物蝶呤缺乏症、GTPCH缺乏症、6-丙酮酰基-四氢蝶呤合成酶(PTPS)缺乏症、DHPR缺乏症、墨蝶呤还原酶缺乏症、多巴胺反应性肌张力障碍、Segawa综合征、络氨酸羟化酶缺乏症、苯丙酮尿症、DNAJC12缺乏症、帕金森病、帕金森病导致的抑郁症、帕金森患者中的冲动行为、重度抑郁症、孤独症谱、ADHD、精神分裂症、双相型障碍、脑缺血、不宁腿综合症、强迫症、焦虑症、阿尔茨海默病中的攻击行为、脑血管病、蛛网膜下出血后痉挛、心肌炎、冠状动脉痉挛、心脏肥大、动脉硬化、高血压、血栓症、传染病、内毒素休克、肝硬化、肥厚性幽门狭窄、胃粘膜损伤、肺动脉高血压、肾功能障碍、阳痿和低血糖症。因此，可将根据本发明的墨蝶呤的各种形式以有效量给予患者以获得疾病、病症或状况的治疗或改善。

本发明还提供包含如上所述的结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式和药学上可接受的载体的药物组合物。本发明提供包含药学上可接受的载体和有效量例如治疗有效量(包括预防有效量)的一种或更多种本发明的前述化合物或其盐的药物组合物。

药学上可接受的载体可为常用的那些中的任一种并且仅受化学-物理考虑如溶解性或缺少与化合物的反应性的限制和给药途径的限制。本领域技术人员将理解：除了下述药物组合物；本发明的化合物可配制成包合络合物如环糊精包合络合物或脂质体。

本文中描述的药学上可接受的载体例如载体(vehicle)、佐剂、赋形剂或稀释剂是本领域技术人员熟知的且公众容易获得。优选药学上可接受的载体为对活性化合物呈化学惰性且在使用条件下无有害副作用或毒性的那种。

载体的选择部分取决于具体活性剂以及用于给予组合物的具体方法。因此，存在大量本发明的药物组合物的合适制剂。用于口服、喷雾、肠胃外、皮下、静脉内、动脉内、肌肉内、腹膜内、鞘内、直肠和阴道给药的以下制剂仅仅是示例性的并且是非限制性的。

结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可用于制备液体制剂，如呈溶液、悬浮液或乳液形式。适合于口服给药的制剂可由(a)胶囊、囊剂(sachet)、片剂、锭剂和糖锭剂，各自包含预定量的活性成分(作为固体或颗粒)；(b)散剂；(c)液体溶液，如有效量的化合物溶解在稀释剂如水、盐水或橙汁中；(d)在合适液体中的悬浮液；和(e)合适乳液剂组成。优选固体口服剂型，如胶囊形式、片剂形式和散剂形式。胶囊形式可为普通硬或软壳明胶类型的，包含例如表面活性剂、润滑剂和惰性填料如乳糖、蔗糖、磷酸钙和玉米淀粉。片剂形式可包含乳糖、蔗糖、甘露糖、玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸、微晶纤维素、阿拉伯树胶、明胶、瓜尔胶、胶态二氧化硅、交联羧甲基纤维素钠、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酸以及其它赋形剂、着色剂、稀释剂、缓冲剂、崩解剂、润湿剂、防腐剂、调味剂和药理学上相容的载体中的一种或更多种。锭剂形式可包含在调味剂(通常蔗糖和阿拉伯树胶或黄芪胶)中的活性成分以及在惰性基料如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯树胶中包含活性成分的锭剂、除了活性成分以外包含本领域中已知的那些载体的乳液剂、凝胶等。

适合于口服和/或肠胃外给药的制剂包括含水和非含水的等渗无菌注射溶液(其可包含抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使制剂与预期的接受者的血液等渗的溶质)和含水和非含水的无菌悬浮液(其可包括悬浮剂、增溶剂、增稠剂、稳定剂和防腐剂)。所述化合物可以在药物载体(如无菌液体或液体混合物包括水、盐水、含水葡萄糖和相关糖溶液、醇如乙醇、苄醇或十六醇、二醇如丙二醇或聚乙二醇以及其它聚乙烯醇、甘油缩酮如2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲醇、醚如聚(乙二醇)400、油、脂肪酸、脂肪酸酯或甘油酯、或乙酰化的脂肪酸甘油酯)中的生理学上可接受稀释剂中给药，加入或不加入药学上可接受的表面活性剂如皂或洗涤剂、悬浮剂如果胶、卡波姆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲基纤维素、或乳化剂和其它药物佐剂。

可用于肠胃外制剂的油包括矿油、动物油、植物油或合成油。油的具体实例包括花生油、大豆油、芝麻油、棉籽油、玉米油、橄榄油、矿脂油和矿物油。用于肠胃外制剂的合适脂肪酸包括油酸、硬脂酸和异硬脂酸。油酸乙酯和肉豆蔻酸异丙酯是合适脂肪酸酯的实例。用于肠胃外制剂的合适皂包括脂肪碱金属、铵和三乙醇胺盐，并且合适的洗涤剂包括(a)阳离子洗涤剂如二甲基二烷基卤化铵和烷基吡啶卤化物，(b)阴离子洗涤剂如烷基、芳基和烯烃磺酸盐，烷基、烯烃、醚和单甘油硫酸酯以及磺基琥珀酸盐，(c)非离子洗涤剂如脂肪胺氧化物、脂肪酸链烷醇酰胺和聚氧乙烯-聚丙烯共聚物，(d)两性洗涤剂如烷基-β-氨基丙酸盐和2-烷基-咪唑峰(imidazopeak)季铵盐，及(3)其混合物。

肠胃外制剂将通常在溶液中包含按重量计约0.5％至约25％结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式。合适的防腐剂和缓冲剂可用于这类制剂。为了使注射位置处的刺激最小化或消除注射位置处的刺激，这类组合物可包含一种或更多种亲水-亲油平衡(HLB)为约12至约17的非离子表面活性剂。这类制剂中表面活性剂的量的范围为约5重量％至约15重量％。合适的表面活性剂包括聚乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯如脱水山梨糖醇单油酸酯和环氧乙烷与疏水碱的高分子量加合物、通过氧化丙烷与丙二醇的缩合形成的高分子量加合物。肠胃外制剂可在单位剂量或多剂量密封容器如安瓿和小瓶中呈现并可储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅要求就在使用前加入注射用无菌液体载体例如水。临时的注射溶液和悬浮液可由前面描述的类型的无菌散剂、颗粒剂和片剂制备。

本发明的结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可制成可注射制剂。对可注射组合物的有效药物载体的要求是本领域普通技术人员熟知的。参见Pharmaceutics and Pharmacy Practice,J.B.Lippincott Co.,Philadelphia,Pa.,Banker和Chalmers编辑，第238-250页(1982)，和ASHP Handbookon InjectableDrugs,Toissel,第4版，第622-630页(1986)。

局部制剂(包括可用于经皮药物释放的那些)是本领域技术人员熟知的并且适合于本发明施用于皮肤的情况。局部施用的组合物通常呈液体、霜剂、糊剂、洗剂和凝胶的形式。局部给药包括施用至口腔粘膜，其包括口腔、口腔上皮、上腭、牙龈和鼻粘膜。在一些实施方案中，所述组合物包含至少一种结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式和合适的载体(vehicle或carrier)。它还可包含其它组分如抗刺激剂。载体可为液体、固体或半固体。在一些实施方案中，所述组合物为水溶液。或者，所述组合物可为各种组分的分散液、乳液、凝胶、洗液或霜载体。在一个实施方案中，主要载体为水或基本上中性或已经使其基本上中性的生物相容性溶剂。液体载体可包括其它材料如具有本领域中已知的各种乳化剂或分散剂的缓冲剂、醇、甘油和矿物油，以获得所需的pH、稠度和粘度。可能所述组合物可被制备成固体如粉末或颗粒。所述固体可直接施用或在使用之前溶解于水或生物相容性溶剂以形成基本上中性或已经使其基本上中性和然后可施用到目标位置的溶液。在本发明的一些实施方案中，用于局部施用至皮肤的载体可包括水、缓冲溶液、各种醇、二醇如甘油、脂质材料如脂肪酸、矿物油、磷酸甘油、胶原蛋白、明胶和硅氧烷基材料。

本发明的化合物，单独或与其它合适组分的组合，可制备成将通过吸入给药的气溶胶制剂。这些气溶胶制剂可放入加压的可接受推进剂如二氯二氟甲烷、丙烷和氮等中。它们还可配制成如在喷雾器或雾化器中的用于无压制剂的药物。

另外地，本发明的结晶体墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可通过与各种基质如乳化基质或水溶性基质混合制备成栓剂。适合于阴道给药的制剂可作为除了活性成分以外包含本领域中已知合适的这类载体的阴道栓剂、止血栓、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾配方呈现。

结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可以任何合适的剂量使用。合适的剂量和给药方案可通过常规范围研究技术确定。通常，以较小剂量(其比最佳剂量小)开始治疗。之后，以小增量提高剂量直到达到在该环境下的最佳效果。为了方便，如果需要可将总日剂量分开并在那天分成几份给药。以合适剂量并通过某些化合物的合适给药，本发明提供广泛的响应。通常地，剂量在约0.001至约1000mg/kg被治疗的患者的体重/天的范围内。例如，在一些实施方案中，结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可以每天约100mg/kg至约300mg/kg、约120mg/kg至约280mg/kg、约140mg/kg至约260mg/kg、约150mg/kg至约250mg/kg、约160mg/kg至约240mg/kg受试者体重、一日一次或更多次给药以获得希望的治疗效果。

在一些实施方案中，结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式可配制成单位固体口服剂型如胶囊或片剂。在这些实施方案中，各单位固体口服剂型包含任何合适量的结晶墨蝶呤游离碱或墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式。例如，各固体口服剂型可包含约10mg、约20mg、约30mg、约40mg、约50mg、约60mg、约70mg、约80mg、约90mg、约100mg、约125mg、约150mg、约175mg、约200mg、约225mg、约250mg、约275mg、约300mg、约325mg、约350mg、约375mg、约400mg、约425mg、约450mg、约475mg、约500mg、约525mg、约550mg、约575mg、约600mg、约625mg、约650mg、约675mg、约700mg、约725mg、约750mg、约775mg、约800mg、约825mg、约850mg、约875mg、约900mg、约925mg、约950mg、约975mg、约1000mg、约2000mg、约3000mg、约4000mg、约5000mg等。

以下实施例进一步例示本发明，但当然不应解释为以任何方式限制其范围。

缩写：MeOH-甲醇；DMSO-二甲基亚砜；EtOAc-乙酸乙酯；DMAc-二甲基乙酰胺；THF-四氢呋喃；NMP-N-甲基吡咯烷酮。

对于X-射线粉末衍射分析，使用PANalytical Empyrean X-射线粉末衍射仪。参数如下：

XRD参数

使用来自TA Instruments的TA Q200/Q2000 DSC进行DSC。所用参数如下：

参数	DSC
		方法	斜坡
样品盘	铝，有波纹的
		温度	25℃–希望的温度
加热速率	10℃/min
		吹扫气体	N2

实施例

尽管本文中已经说明并描述本发明的某些特征，本领域普通技术人员现在将想到许多改进、替代、改变和等同物。因此，应理解随附的权利要求意欲覆盖所有这种落入本发明真实精神的改进和改变。同样，提供以下实施例以教导本发明的各个方面。这些实施例代表本发明各方面的个体实施方案并且本领域技术人员将认识到可产生其它实施例以同样地教导本发明的各方面。

实施例1

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形B。

将73.2mg起始材料墨蝶呤称重到20-mL玻璃小瓶中。加入2.5mL N-甲基吡咯烷酮(NMP)以溶解起始材料。将溶液过滤到新的小瓶中。逐步加入17mL乙腈(ACN)，同时在RT下以～1000rpm的速率搅拌样品。在RT下搅拌悬浮液2小时。通过离心分离所得沉淀物并在RT下真空干燥3小时以获得墨蝶呤游离碱的晶形B。

实施例2

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形C。

将100.4mg起始材料墨蝶呤称重到20-mL玻璃小瓶中。加入2mL ACN以形成悬浮液，在50℃下以～1000rpm的速率对其进行搅拌。通过离心2分钟以通过0.25μm孔径离心过滤器来分离所得固体并在RT下干燥约12小时以获得墨蝶呤游离碱的晶形C。

实施例3

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形D。

将200.1mg起始材料墨蝶呤称重到20-mL玻璃小瓶中。加入5mL H₂O以形成悬浮液，在50℃下以～1000rpm的速率对其进行搅拌。通过离心2分钟以通过0.25μm孔径离心过滤器来分离所得固体。将收集的固体的一半在RT、在大气压下干燥约12小时以获得墨蝶呤游离碱的晶形D。

实施例4

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形F。将从实施例3收集的固体的另一半在50℃下真空干燥0.5小时以获得墨蝶呤游离碱的晶形F。

实施例5

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形G。通过在N₂流下将如实施例4中制备的晶形F的样品加热至120℃来制备墨蝶呤游离碱的晶形G。

实施例6

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐。

将120.4mg墨蝶呤游离碱称重到20-mL玻璃小瓶中。加入0.8mL丙酮/H₂O(9:1，v/v)和42μL浓HCl(37.5％)，将所得悬浮液在RT下以～1000rpm的速率搅拌5天。通过真空过滤分离所得固体并在RT下真空干燥3小时。

将以上获得的固体分散在3mL丙酮/H₂O(9:1，v/v)中。加入5.5μL浓HCl(37.5％)并将悬浮液在RT下以～1000rpm的速率搅拌6天，然后，通过真空过滤分离固体并在RT下真空干燥过夜以获得墨蝶呤游离碱的结晶盐酸盐。

实施例7

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐。

将51.7mg甲磺酸称重到20-mL玻璃小瓶中。将5mL MeOH加入到该小瓶中。将120.7mg墨蝶呤游离碱称重到该小瓶中。将所得悬浮液在RT下以～1000rpm的速率搅拌5天，然后将20μL甲磺酸加入该小瓶中。在RT下将所得混合物以～1000rpm的速率搅拌1天。通过真空过滤分离固体并在RT下真空干燥过夜。将干燥的固体分散于3mL MeOH中并在RT下以～1000rpm的速率搅拌1天。通过真空过滤分离固体并在RT下真空干燥过夜以获得墨蝶呤游离碱的晶形3甲磺酸盐。

实施例8

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的晶体烟酸盐的制备。

119.5mg游离碱称重到20-mL玻璃小瓶中。将10mL MeOH加入到该小瓶中。将100.1mg烟酸称重到该小瓶中。在RT下将所得悬浮液以～1000rpm的速率搅拌7小时，然后通过真空过滤分离所得固体并在RT下真空干燥3小时以获得墨蝶呤游离碱的结晶烟酸盐。

实施例9

本实施例展示根据本发明的一个实施方案制备墨蝶呤游离碱的结晶盐形式。

通过将等摩尔量的起始材料和H₂SO₄在丙酮/H₂O(9:1，v/v)中制浆获得晶形1硫酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和H₂SO₄在THF/DMAc(9:1，v/v)中制浆获得晶形2硫酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和对甲苯磺酸在甲醇中制浆获得结晶对甲苯磺酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和甲磺酸在甲醇中制浆获得晶形1甲磺酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和甲磺酸在丙酮/H₂O(9:1，v/v)中制浆获得晶形2甲磺酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和苯磺酸在甲醇中制浆获得结晶苯磺酸盐。

通过将等摩尔量的起始材料和H₃PO₄在丙酮/H₂O(9:1，v/v)中制浆获得结晶磷酸盐。

通过将起始材料和丙二酸(酸/游离碱的摩尔比为约5:1)在丙酮/H₂O(9:1,v/v)中制浆获得结晶丙二酸盐。

通过将起始材料和龙胆酸(酸/游离碱的摩尔比为约4:1)在丙酮/H₂O(9:1，v/v)中制浆获得结晶L-酒石酸盐。

通过将起始材料和L-酒石酸(酸/游离碱的摩尔比为约5:1)在丙酮/H₂O(9:1,v/v)中制浆获得结晶龙胆酸盐。

通过将起始材料和富马酸(酸/游离碱的摩尔比为约5:1)在丙酮/H₂O(9:1,v/v)中制浆获得结晶富马酸盐。

通过将起始材料和乙醇酸(酸/游离碱的摩尔比为约4:1)在丙酮/H₂O(9:1,v/v)中制浆获得结晶乙醇酸盐。

通过将起始材料和乙酸(酸/游离碱的摩尔比为约5:1)在丙酮/H₂O(9:1,v/v)中制浆获得结晶乙酸盐。

实施例10

本实施例展示本文中所述的墨蝶呤游离碱的结晶多晶型物A、B、C、D、E、F和G和墨蝶呤的盐的结晶多晶型物形式的制备中使用的起始墨蝶呤的表征。

墨蝶呤游离碱的样品由商业获得。DSC显示在82.8℃和179.8℃的两个吸热峰。墨蝶呤样品包含平均粒径大于100μm的粒子。在研磨以减小粒径使得其通过140目筛之前和之后确定XRD图。研磨之前和之后的XRD图都显示于图19中。墨蝶呤游离碱的这种多晶型物在本文中称为形式A。

实施例11

本实施例展示在室温(RT)、35℃和50℃的温度下在墨蝶呤起始材料(形式A)、结晶多晶型物形式D和结晶多晶型物形式F上进行的稳定性研究的结果。

通过HPLC确定初始样品的纯度并发现为如下：形式A＝99.3面积％，形式F＝99.7面积％，形式D＝99.1面积％，其中面积％指与所有峰下的总面积相比的墨蝶呤峰的曲线下的面积。

在不同温度下将形式A和F样品放在具有硅胶的室中以除去水(测定相对湿度为～10％RH)。在不同温度下，将形式D样品放在具有水的室中(估计相对湿度为～100％RH)。

获得在各温度下储存的形式A/F/D样品中的每一个的HPLC纯度和XRD图。1周和4周储存后的结果分别列于表22和23中。

表24.储存1周后

表25.储存4周后

如从表24和25中所列结果显而易见的，如通过XPD所观察到的，没有样品展现显著的晶体结构变化。如通过HPLC所确定的，形式A展现显著较低的稳定性。在50℃下储存4周后，与初始纯度相比，通过HPLC峰面积％所测定的形式A的纯度为89.1％。与初始纯度相比，形式F和D的纯度分别为99.1％和98.5％。

实施例12

本实施例展示墨蝶呤游离碱的多晶型物D和F储存后的稳定性。

将墨蝶呤游离碱多晶型物形式D、F和A的样品在室温(RT)、35℃和50℃储存。以1周和4周的间隔通过HPLC分析样品。HPLC参数如下：

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墨蝶呤游离碱的多晶型物A、F和D的结果在表26-28中列出。

表26：多晶型物A

表27：多晶型物F

表28：多晶型物D

*-相对停留时间

如从表26-28中列出的结果显而易见的，墨蝶呤游离碱的多晶型物D和F展现比多晶型物A明显提高的稳定性。在50℃/10％RH(相对湿度)储存4周后，多晶型物A中墨蝶呤的量从99.33％降低至88.49％。在50℃/100％RH储存4周后，多晶型物D中墨蝶呤的量从99.14％降低至97.65％。在50℃/10％RH储存4周后，多晶型物F中墨蝶呤的量从99.74％降低至98.85％。

实施例13

本实施例展示墨蝶呤游离碱的晶形E的制备。

将100.6mg起始材料称重到3-mL玻璃小瓶中。加入1mL MeOH以形成悬浮液。在RT下以～1000rpm的速率搅拌样品。3天后通过离心分离所得固体并在RT下干燥过夜。

其它实施方案

在描述本发明的上下文中(特别是以下权利要求书的上下文中)术语“一(“a”和“an”)”和“所述(the)”和“至少一)”以及类似指代的使用将解释为覆盖单数和复数两者，除非本文中另外指出或与上下文明显矛盾。后面跟着一个或更多个项目的清单的术语“至少一”(例如“A和B中的至少一种”)的使用将解释为表示选自所列项目的一个项目(A或B)或所列项目的两种或更多种的任意组合(A和B)，除非本文中另外指出或与上下文明显矛盾。术语“包括”、“具有”、“包括”和“包含”将解释为开放式术语(即，意指“包括但不限于”)，除非另外指出。本文中提及值的范围仅打算用作个别提及落入该范围内的各独立值的简写方法，除非本文中另外指出，并且将各独立值结合到说明书中，如同其在本文中单独列出。本文中描述的所有方法可以以任何合适的顺序进行，除非本文中另外指出或以其他方式与上下文明显矛盾。本文中提供的任何和全部实例或示例性语言(例如，“如”)的使用仅意在更好地阐明本发明且不对本发明的范围进行限定，除非另外提出。说明书中的语言都不应解释为指出任何未要求保护的要素对本发明的实施是必要的。

本文中描述了本发明的优选实施方案，包括发明人已知的实施本发明的最佳方式。对于本领域普通技术人员而言，在阅读前面的描述之后，那些优选实施方案的变化可变得显而易见。发明人预期技术人员视情况采用此类变化，并且发明人计划以与本文中具体描述的不同的方式来实施本发明。因此，如适用的法律所允许的，本发明包括本文随附的权利要求中描述的主题的所有改进和等同内容。此外，其所有可能变化中的上述要素的任何组合被本发明涵盖，除非本文中另外指出或以其他方式与上下文明显矛盾。

Claims (18)

1.墨蝶呤游离碱的晶形F，其在9.7°±0.5、10.2°±0.5、11.3°±0.5、14.0°±0.5、14.6°±0.5、19.9°±0.5、22.2°±0.5、25.3°±0.5和32.4°±0.5的衍射角2θ(°)处具有峰，其通过用Cu KαX-射线照射的X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算。

2.权利要求1的墨蝶呤游离碱的晶形F，其具有如图4中所示的X-射线粉末衍射谱。

3.权利要求1或2的墨蝶呤游离碱的晶形F，其在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约72℃或233℃处吸热。

4.权利要求1或2的墨蝶呤游离碱的晶形F，其在示差扫描量热法(DSC)曲线中在约72℃和233℃处吸热。

5.组合物，其包含权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F。

6.权利要求5的组合物，其中墨蝶呤游离碱的晶形F以组合物的至少90重量％的量存在。

7.药物组合物，其包含权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F和药学上可接受的载体。

8.权利要求7的药物组合物，其中墨蝶呤游离碱的晶形F被配制为尺寸小于100μm的颗粒。

9.制备权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F的方法，包括制备墨蝶呤在水、丙酮/水、异丙醇/乙酸异丙酯或四氢呋喃/正己烷中的浆液，分离墨蝶呤游离碱的晶形D并干燥所述晶形D以制备所述墨蝶呤游离碱的晶形F，其中所述墨蝶呤游离碱的晶形D在8.9°±0.5、10.3°±0.5、10.9°±0.5、17.8°±0.5、24.9°±0.5、26.0°±0.5、26.7°±0.5、26.8°±0.5和28.3°±0.5的衍射角2θ(°)处具有峰，其通过用Cu KαX-射线照射的X-射线衍射法测定或由X-射线衍射法计算。

10.权利要求9的方法，其中将所述墨蝶呤的浆液在25-75^oC下搅拌6-72小时。

11.权利要求9或10的方法，其中将所述晶形D在20-30^oC下干燥6-24小时。

12.权利要求9或10的方法，其中将所述晶形D在40-60^oC下干燥5-10小时。

13.权利要求9或10的方法，其中将所述晶形D在大气压下干燥。

14.权利要求9或10的方法，其中将所述晶形D在真空下干燥。

15.权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F或权利要求7或8的药物组合物用于制造治疗BH4相关病症的药剂的用途，其中所述BH4相关病症是原发性四氢生物蝶呤缺乏症、GTPCH缺乏症、6-丙酮酰基-四氢蝶呤合成酶(PTPS)缺乏症、DHPR缺乏症、墨蝶呤还原酶缺乏症、多巴胺反应性肌张力障碍、Segawa综合征、络氨酸羟化酶缺乏症、苯丙酮尿症、DNAJC12缺乏症、帕金森病、帕金森病导致的抑郁症、重度抑郁症、孤独症谱、ADHD、精神分裂症、双相型障碍、脑缺血、不宁腿综合症、强迫症、焦虑症、脑血管病、胃轻瘫、蛛网膜下出血后痉挛、心肌炎、冠状动脉痉挛、心脏肥大、动脉硬化、高血压、血栓症、传染病、内毒素休克、肝硬化、肥厚性幽门狭窄、胃粘膜损伤、肺动脉高血压、肾功能障碍、阳痿或低血糖症。

16.权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F或权利要求7或8的药物组合物用于制造在有需要的受试者中增加BH4水平、降低苯丙氨酸水平、增加苯丙氨酸羟化酶活性、增加血清素水平、增加色氨酸羟化酶活性、增加多巴胺水平、增加酪氨酸羟化酶活性、增加一氧化氮合酶活性或增加烷基甘油单加氧酶活性的药剂的用途。

17.制备液体制剂的方法，包括将权利要求1至4中任一项的墨蝶呤游离碱的晶形F分散在液体中。

18.权利要求17的方法，其中所述液体制剂是悬浮剂。