CN109874598A - 一种赤芝的标准化栽培方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种赤芝的栽培方法。本发明方法包括菌种制备和出芝管理。本发明选择优良菌种,明确赤芝三级菌种培育过程中各级菌种科学的培养时间,确定出芝期间适宜的光照强度、水分、温度、CO2等技术参数,使灵芝栽培科学规范,有效提高灵芝栽培的产量和质量,提高其经济效益和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌栽培领域,具体涉及一种赤芝的标准化栽培方法。
背景技术
灵芝在中国已有2000多年的药用历史,是中华医药学宝库中的珍品。国内外诸多研究表明,灵芝的药理活性归因于其含有的多糖、三萜类、腺苷类、生物碱、甾醇和氨基酸等。现代科学研究表明,灵芝具有显著的抗癌、增强免疫力和保肝护肝等药理作用。
随着全球一体化的快速发展,对灵芝生产的要求日趋严格,灵芝产业不仅要规模化,同时必须做到生产的标准化。但是,我国灵芝生产以农户栽培为主体,规模化、标准化种植较少,并且,由于科研开发资金短缺,有关灵芝产业技术和基础研究几乎处于空白。由于缺乏标准的指导和约束,灵芝的产量和质量非常不稳定,严重影响了灵芝栽培的经济效益。
我国灵芝产业急需加强灵芝高产栽培技术研究,积极构建灵芝优质高产管理技术体系,提升灵芝产业标准化、国际化水平,满足国内和国际市场的需求,促进灵芝产业的可持续发展。
发明内容
本发明的目的是建立一种赤芝优质高产栽培精准管理技术体系,选择优良菌种,明确赤芝三级菌种培育过程中各级菌种科学的培养时间,确定出芝期间适宜的光照强度、水分、温度、CO2等技术参数,使灵芝栽培科学规范,有效提高灵芝栽培的产量和质量,提高其经济效益和社会效益。
第一方面,本发明要求保护一种赤芝的栽培方法。
本发明所提供的赤芝的栽培方法,可包括如下步骤:
(A)菌种制备,可按照如下进行:
(A1)母种制备:将待栽培赤芝的菌种接种于培养基,在22~25℃(如25℃)条件下培养至菌丝长满斜面,得到母种。
(A2)原种制备:将所述母种接种于装有培养料的菌袋,避光培养,前5~7天控制培养温度为25~26℃(促进菌丝快速封面),之后控制培养温度为22~24℃,培养至菌丝长满菌袋,得到原种。
(A3)栽培种制备:将所述原种接种于装有栽培料的菌包,避光培养,前5~7天控制培养温度为25~26℃(促进菌丝快速封面),之后控制培养温度为22~24℃,培养至菌丝长满菌包,得到栽培种。
(B)出芝管理,可按照如下进行:
(B1)菌包开口:将步骤(A3)所得装有栽培种的菌包移至大棚,5~7天(适应外界环境)后在菌包侧面或顶部开口。
进一步地,可以在菌包侧面开一个直径为1cm左右的圆口,或者去掉扎口密封盖,以促进菌蕾形成和发育。
(B2)控制栽培条件:
b1)湿度:菌包开口后放置5~7天,期间禁止喷水(等待菌丝愈合);菌蕾期控制空气湿度80%~85%,开片期控制空气湿度85%~95%,采收前3~5d停止供水。
进一步地,本发明中是通过微喷系统控制所述空气湿度的。
b2)光照:散射光,光强500~1800lux。
进一步地,夏天光照强烈,通过覆盖遮阳网避免强光照。
b3)温度:20~29℃。
b4)CO2:保持空气中CO2浓度低于0.1%。
进一步地,在上午8~10时以前,下午4时以后可开门通风换气,气温低时中午11时至下午2时可通风换气。
(B3)采收孢子粉和/或子实体。
进一步地,当菌盖边缘白色消失,边缘变红,菌盖开始木质化时采收孢子粉和/或子实体。孢子粉通过7天套袋的方式进行收集。孢子粉和子实体一定要晒干或烘干,孢子粉用60目的筛子过筛后包装好,干燥、阴凉的地方保存。
在所述(A1)中,所述培养基可为马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
所述马铃薯葡萄糖琼脂培养基的制备方法如下:马铃薯200g(制成浸出液:洗净去皮切成小块,加水煮沸20~30min(能被戳破即可),用纱布过滤,取滤液),再加入葡萄糖20g,琼脂15~20g,磷酸二氢钾3g,稍冷后补足水分至1000ml。
在所述(A2)中,所述培养料可按照包括如下步骤的方法制备得到:将木屑、麦麸、糖、生石灰和石膏按照75~80:18~23:1:0.3~0.7:0.3~0.7的干物料质量比例混合后加水,至含水量为58~60%,得到所述培养料。其中,加水后还包括闷堆2h的步骤。
在本发明的一个实施例中,所述培养料中,木屑、麦麸、糖、生石灰和石膏的干物料质量比具体为78:20:1:0.7:0.3。在本发明的另一个实施例中,所述木屑、麦麸、糖、生石灰和石膏的干物料质量比具体为78:20:1:0.5:0.5。
进一步地,所述木屑可为柳树木屑、油松木屑、果树木屑和/或落叶松木屑;所述糖可为蔗糖。
将所述栽培料装入聚丙烯塑料袋中,经压力0.1~0.11MPa、温度126℃,灭菌时间1.5~2h,待温度降至30℃以下时,在无菌条件下接入所述母种。
在所述(A3)中,所述栽培料可按照包括如下步骤的方法制备得到:将木屑、麦麸、豆粕、玉米粉、生石灰和石膏按照78~82:12~16:2~3:1:0.5~1:0.5~1的比例混合后加水,至含水量为60~65%,得到所述培养料。其中,加水后还包括闷堆2h的步骤。
在本发明的具体实施例中,所述栽培料中,木屑、麦麸、豆粕、玉米粉、生石灰和石膏的干物料质量比具体为78:16:3:1:1:1。
进一步地,所述木屑可为柳树木屑、油松木屑、果树木屑和/或落叶松木屑。
将所述栽培料装入聚丙烯塑料袋中,经压力0.1~0.11MPa、温度126℃灭菌时间2h,待冷却后接入所述原种。
在所述(A1)中,进行所述培养的时间可为15~25天(如15天)。
在所述(A2)中,将所述培养温度控制在22℃~24℃条件下时可共培养35~45天。
在所述(A3)中,将所述培养温度控制在22℃~24℃条件下时可共培养55~65天。
在所述b2)中,所述光强最好为450~950lux。
在所述b3)中,所述温度最好为25~28℃。
步骤(B)中,在所述(B3)后还包括去除芝口硬质化菌柄,再停止供水5-7d的步骤。待菌丝愈合后恢复供水,经40d左右又可采收第2潮,一般可采收3~4潮。
步骤(A)中,所述待栽培赤芝应该为菌丝生长迅速、抗逆性强、生物学效率高的优良菌株。
在本发明中,所述待栽培赤芝具体为赤芝(Ganoderma lucidum)8907菌种。赤芝(Ganoderma lucidum)8907菌种为中国林业科学研究院中国林业微生物保藏管理中心产品,保藏编号为CFCC 8907。
第二方面,本发明要求保护一种赤芝的菌种制备方法。
本发明所要求保护的赤芝的菌种制备方法包括前文中的步骤(A)。
第三方面,本发明要求保护一种赤芝的出芝管理方法。
本发明所要求保护的赤芝的出芝管理方法包括前文中的步骤(B)。
第四方面,本发明要求保护一种成套产品。
本发明所要求保护的成套产品由前文中所述培养基、所述培养料和所述栽培料组成。
第五方面,本发明还要求保护如下任一应用:
(I)前文第二方面和第三方面中所述方法在赤芝栽培中的应用;
(II)前文第四方面所述成套产品在赤芝栽培中的应用;
(III)前文第四方面所述成套产品在赤芝菌种制备中的应用。
本发明所提供的赤芝高产栽培精准管理方法,年内每批栽培种可以连续收获3~4潮芝,生物转化率达到9.5%,赤芝子实体多糖含量1.8%~2.0%,总三萜含量1.6%,具有潜在的药用价值。另外,本发明充分利用木屑等林业废弃物,可以获得高产优质的赤芝孢子粉。
本发明所提供的赤芝栽培方法为赤芝的栽培方法,本发明选择优良菌种,明确赤芝三级菌种培育过程中各级菌种合理的培养时间,有效预防菌丝退化、活性低等难题,确保了栽培种菌丝洁白、活力强,年内可以连续收获3~4潮芝。本发明通过科学实验验证,明确了赤芝出芝期间科学的光照、温度、湿度、CO2等技术参数,使灵芝栽培科学规范,为赤芝工厂化生产提供科学的技术参数,提高其经济效益和社会效益。
附图说明
图1为赤芝侧面开口生长状况。(a)为赤芝栽培空间布置图;(b)为侧面开口时菌蕾生长状况;(c)为侧面开口时子实体成熟期生长状况。
图2为赤芝顶部开口生长状况。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
赤芝(Ganoderma lucidum)8907菌种:为中国林业科学研究院中国林业微生物保藏管理中心产品,保藏编号为CFCC 8907。
实施例1、赤芝标准化栽培
一、菌种制备
1、母种制备
母种活化采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基,配方为马铃薯200g(制成浸出液:洗净去皮切成小块,加水煮沸20~30min,过滤,取滤液),再加入葡萄糖20g,琼脂20g,磷酸二氢钾3g,再加蒸馏水至1000ml。按常规方法制试管斜面,灭菌后在无菌条件下将纯化的菌种转接至试管斜面培养基中央,置于25℃条件下培养15d,待白色菌丝长满斜面后备用。
2、原种制备
(1)配方:柳树木屑、油松木屑、麦麸、蔗糖、生石灰、石膏按62︰16︰20︰1︰0.7︰0.3干物料质量比例称取。
(2)制作方法:首先将生石灰和石膏用15倍水稀释,木屑和麦麸干拌均匀,然后将生石灰水和石膏水均匀撒施到料堆里,再按照培养料︰水=1︰1.3~1.4的比例加水拌匀,含水量58%,闷堆约2h。
(3)装袋:搅拌好的培养料送至装袋机料斗,由装袋机装料,装入聚丙烯塑料袋中(规格为24cm×17cm),再自动套上套环和透气盖。
(4)灭菌和接种:采用高压灭菌,压力0.1~0.11MPa、温度126℃、灭菌时间2h。灭菌后的菌包立即运到冷却缓冲室,待温度降至30℃以下时,运至接种间,在无菌条件下接入母种,移置培养室避光培养。
(5)发菌管理:菌袋上架前冲洗培养室,每立方米空间用福尔马林10ml和高锰酸钾5g进行熏蒸消毒,24h后将菌袋移入培养室,菌袋与菌袋间距2~3cm。发菌期间采用分段变温控制法,前期5~7d温度为25℃~26℃,后期控制温度在22℃~24℃,每周定期检查菌丝生长状况,若发现长霉菌,及时清除,35d菌丝满袋后备用。
3、栽培种制备
(1)原料准备
柳树木屑、油松木屑、麦麸、豆粕、玉米粉、生石灰、石膏按62︰16︰16︰3︰1︰1︰1干物料质量比例称取。首先麦麸、豆粕和玉米粉干拌均匀,再与柳树木屑、油松木屑干拌均匀,然后将生石灰和石膏加20倍水稀释,再均匀撒施到上述料堆里,再按照培养料︰水=1︰1.3~1.4的比例加水拌匀,含水量60%,以手握不滴水为准,闷堆约2h。
(2)装袋、灭菌和接种
采用自动装袋机装料,装入丙烯塑料袋(规格为34cm×17cm),再自动套上套环和透气盖。接着高压灭菌,压力0.1~0.11MPa、温度126℃、灭菌时间2h。灭菌后的菌包立即运到冷却缓冲室,待温度降至30℃以下时,运至接种间,在无菌条件下接入原种,移置培养室避光培养。
(3)发菌管理
菌袋上架前冲洗培养室,每立方米空间用福尔马林10ml和高锰酸钾5g进行熏蒸消毒,24h后将菌袋移入培养室,菌袋与菌袋间距2~3cm。发菌期间采用分段变温控制法,前期5~7d温度为25℃~26℃,后期控制温度在22℃~24℃,每周定期检查菌丝生长状况,若发现长霉菌,及时清除,60d菌丝满袋备用。
二、出芝管理及采收
1、菌包开口
菌丝长满袋并经低温催蕾后,就可移至大棚内,放置5d,待菌包适应外界环境后,在菌包侧面开一个直径为1cm左右的圆口,菌包开口后放置5d,这期间禁止喷水,待菌丝愈合,再进行出芝管理。赤芝侧面开口生长状况见图1。
2、温湿度和光照控制
通过微喷系统自动供水,菌蕾期空气湿度80%~85%,开片期空气湿度85%~95%。出芝时保持温度25~29℃,并提供散射光和充足的氧气,子实体分化发育适宜光照强度500~1800lux,最适光照强度为450~950lux,夏天光照强烈,通过覆盖遮阳网避免强光照。在上午8~10时以前,下午4时以后开门通风换气,气温低时中午11时至下午2时通风换气,控制CO2浓度低于0.1%。
3、上架弹粉及采收
当菌盖边缘白色消失,边缘变红,菌盖开始木质化时,用湿布将菌袋抹干净,上架或放入纸箱内,可叠多层,菌盖不能相互接触或碰到别的物体,用白纸将菌袋封严,7d后揭开白纸,收集孢子粉,采子实体。孢子粉和子实体一定要晒干或烘干,孢子粉用60目的筛子过筛后包装好,干燥、阴凉的地方保存。
4、采后管理
每潮灵芝收获后,用锋利刀具挖去出芝口硬质化的菌柄,再停止供水5~7d,待菌丝愈合后恢复供水,经40d左右又可采收第2潮、3、4潮。
三、出芝情况
经测定,第1潮、第2潮、第3潮、第4潮赤芝单个子实体的平均重量为8.75g、7.01g、5.42g和3.41g,子实体多糖含量(测定方法按照NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量的测定》)分别为1.75%、1.61%、1.52%和1.35%。具体见表1。
表1赤芝子实体重量和多糖含量
实施例2、赤芝标准化栽培
一、菌种制备
1、母种制备
母种活化采用常规方法,即取1cm2左右大小的菌丝块接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基(配方见实施例1),置于人工气候箱(温度25℃,湿度80%)培养15d,待菌丝长满斜面试管后备用。
2、原种制备
果树木屑、落叶松木屑、麦麸、蔗糖、生石灰、石膏按63︰15︰20︰1︰0.5︰0.5干物料质量比例称取,先干拌,再湿拌,原辅料均匀,含水量60%,以用力握时指缝间有水但不滴出为宜。选用规格17×24×0.05cm聚丙烯专用袋,人工装袋,装料要求松散适度,用塑料颈圈加透气盖封口。采用高压灭菌,压力0.1~0.11MPa、温度126℃、灭菌时间2h,冷却后备用。
取活化好的菌丝块1cm2~1.5cm2,接种于灭菌后的原种培养基,移入已灭菌的培养室,前期5~7d温度为25℃~26℃,后期控制温度在22℃~24℃,每天通风1次,经40d左右,菌丝可长满菌包。
3、栽培种制备
果树木屑、落叶松木屑、麦麸、豆粕、玉米粉、生石灰、石膏按62︰16︰16︰3︰1︰1︰1干物料质量比例称取,混拌均匀,含水量65%。选用规格为17×35厘米的聚丙烯专用袋,每袋装干料约450克。采用高压灭菌2小时。然后接入原种,每袋原种可接栽培种15~18袋。将已接种的菌袋移入消毒好的培养室内,分层排放,菌袋与菌袋间距2~3cm。发菌期间采用分段变温控制法,前期5~7d温度为25℃~26℃,后期控制温度在22℃~24℃,每周定期检查菌丝生长状况,若发现长霉菌,及时清除,62d菌丝满袋后备用。
二、出芝管理及采收
在温室大棚内设架层,将栽培种菌包排于架层上,放置5d后,打开顶部密封盖(赤芝顶部开口生长状况见图2),然后再放置5d,待菌丝愈合。赤芝场所最适温度25~28℃,菌蕾期空气湿度80%~85%,开片期空气湿度85%~95%并提供散射光和充足的氧气。每天在上午8~10时以前,下午4时以后开门通风换气,气温低时中午11时至下午2时通风换气,空气CO2浓度不允许超过0.1%,否则会抑制菌盖的生长。
当菌盖边缘白色消失,边缘变红,菌盖开始木质化时,用湿布将菌袋抹干净,上架或放入纸箱内,可叠多层,菌盖不能相互接触或碰到别的东西,用白纸将菌袋封严,经7d套袋搜集孢子粉。
每潮灵芝孢子粉和子实体收获后,用锋利刀具挖去出芝口硬质化的菌柄,再停止供水5-7d,待菌丝愈合后恢复供水,经40d左右又可采收第2潮,可采收3~4潮。采收后的孢子粉和子实体及时低温烘干,放置干燥处保存。
三、出芝情况
生物转化率(每袋生产子实体干重与培养料干重之比)达到9.5%,第一潮子实体多糖含量为1.82%,第一潮子实体总三萜含量1.6%(多糖测定方法按照NY/T 1676-2008《食用菌中粗多糖含量的测定》;总三萜测定按照《中华人民共和国药典》2015版灵芝三萜及甾醇的测定方法)。
Claims (10)
1.一种赤芝的栽培方法,包括如下步骤:
(A)菌种制备,按照如下进行:
(A1)母种制备:将待栽培赤芝的菌种接种于培养基,在22~25℃条件下进行培养,得到母种;
(A2)原种制备:将所述母种接种于装有培养料的菌袋,避光培养,前5~7天控制培养温度为25~26℃,之后控制培养温度为22~24℃,得到原种;
(A3)栽培种制备:将所述原种接种于装有栽培料的菌包,避光培养,前5~7天控制培养温度为25~26℃,之后控制培养温度为22~24℃,得到栽培种;
(B)出芝管理,按照如下进行:
(B1)菌包开口:将步骤(A3)所得装有栽培种的菌包移至大棚,5~7天后在菌包侧面或顶部开口;
(B2)控制栽培条件:
b1)湿度:菌包开口后放置5~7天,期间禁止喷水;菌蕾期控制空气湿度80%~85%,开片期控制空气湿度85%~95%,采收前3~5d停止供水;
b2)光照:散射光,光强500~1800lux;
b3)温度:20~29℃;
b4)CO2:保持空气中CO2浓度低于0.1%;
(B3)采收孢子粉和/或子实体。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:在所述(A1)中,所述培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基;和/或
在所述(A2)中,所述培养料是按照包括如下步骤的方法制备得到的:将木屑、麦麸、糖、生石灰和石膏按照75~80:18~23:1:0.3~0.7:0.3~0.7的干物料质量比混合后加水,至含水量为58~60%,得到所述培养料;和/或
在所述(A3)中,所述栽培料是按照包括如下步骤的方法制备得到的:将木屑、麦麸、豆粕、玉米粉、生石灰和石膏按照78~82:12~16:2~3:1:0.5~1:0.5~1的干物料质量比混合后加水,至含水量为60~65%,得到所述培养料。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:在所述(A1)中,进行所述培养的时间为15~25天;和/或
在所述(A2)中,将所述培养温度控制在22℃~24℃条件下时共培养35~45天;和/或
在所述(A3)中,将所述培养温度控制在22℃~24℃条件下时共培养55~65天。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:在所述b2)中,所述光强为450~950lux;和/或
在所述b3)中,所述温度为25~28℃。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:步骤(B)中,在所述(B3)后还包括去除芝口硬质化菌柄,再停止供水5-7d的步骤。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:所述待栽培赤芝为赤芝(Ganoderma lucidum)8907菌种。
7.一种赤芝的菌种制备方法,包括权利要求1-6任一中的步骤(A)。
8.一种赤芝的出芝管理方法,包括权利要求1-6任一中的步骤(B)。
9.成套产品,由权利要求1-6任一中所述培养基、所述培养料和所述栽培料组成。
10.如下任一应用:
(I)权利要求7或8所述方法在赤芝栽培中的应用;
(II)权利要求9所述成套产品在赤芝栽培中的应用;
(III)权利要求9所述成套产品在赤芝菌种制备中的应用。
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