CN109596734A - 一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法 - Google Patents

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CN109596734A CN201811571435.6A CN201811571435A CN109596734A CN 109596734 A CN109596734 A CN 109596734A CN 201811571435 A CN201811571435 A CN 201811571435A CN 109596734 A CN109596734 A CN 109596734A
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Abstract

本发明公开了一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:制备对照试剂溶液的步骤、制备供试品溶液的步骤、含量测定的步骤、结果判定的步骤。该检测方法为橙色系多组分染色剂的通用检测方法,以解决不同品种的中药饮片检测方法不一,而使检测效率慢的问题。

Description

一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法
技术领域
本发明涉及一种中药质量检测技术,尤其涉及一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法。
背景技术
近年来,中药饮片染色的情况很严重。国家药监总局发布了多种中药饮片的染色检测方法,这方法多为针对单味中药饮片进行检测,如表1所示。目前,中药饮片检测橙色系列染色剂的主要有:金橙Ⅱ染色剂、金胺O染色剂、碱性橙染色剂。
表1有关于橙色系列染色剂检测的《国家食品药品监督管理总局药品检验补充检验方法和检验项目批准件》
当面临多种中药饮片同时需要检测数据时,因方法的多样性,导致前处理、和上机分析过程的复杂,检测效率慢,通用性不强。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明的目的在于提供一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法。该检测方法为橙色系多组分染色剂的通用检测方法,以解决不同品种中中药材检测方法不一,而使检测效率慢的问题。
本发明的目的采用如下技术方案实现:一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加乙醇制成混合对照品溶液,摇匀,即得;
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末,置锥形瓶中,加乙醇,振摇提取,滤过,取续滤液,即得;
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图;
结果判定的步骤:供试品色谱中,不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰;若出现保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品与相应对照试剂的色谱峰在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,供试品与相应对照试剂的吸收光谱相同,则可判定供试品中含有相应染色剂。
进一步地,在制备对照试剂溶液的步骤中,所述对照试剂溶液的配制方法如下:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
进一步地,在制备供试品溶液的步骤中,所述供试品溶液的提取过程如下:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
进一步地,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱。
进一步地,所述梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。
进一步地,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。
进一步地,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。
进一步地,在含量测定的步骤中,在含量测定的步骤中,理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000;金胺O(1)和金胺O(2)为金胺O的同分异构体。
进一步地,在结果判定的步骤中,具体判定过程如下:若供试品色谱出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金橙Ⅱ;若供试品色谱出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金胺O;若供试品色谱出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与碱性橙对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有碱性橙。
相比现有技术,本发明的有益效果在于:
《国家食品药品监督管理总局药品检验补充检验方法和检验项目批准件》对于橙色系列染色剂的检测方法批件有13个,对于多种中药饮片则需要单独进行前处理和上机分析,本方法为通用的橙色系列多组分染色剂检测方法,可同时检测多种中药饮片,以提高检测效率。同时检出限、耐用性等符合方法学验证的要求。
附图说明
图1为本发明金橙Ⅱ对照试剂的色谱图;
图2为本发明金胺O对照试剂的色谱图;
图3为本发明碱性橙对照试剂的色谱图;
图4为本发明金橙II、金胺O、碱性橙混合对照试剂的色谱图;
图5为本发明实施例1的试样色谱图;
图6为本发明实施例2的试样色谱图;
图7为本发明实施例3的试样色谱图;
图8为本发明金橙Ⅱ对照试剂的光谱图;
图9为本发明金胺O(1)对照试剂的光谱图;
图10为本发明实施例1试样的与金橙II保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
图11为本发明实施例1试样的与金胺O(1)保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
图12为本发明实施例2试样的与金橙II保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
图13为本发明实施例2试样的与金胺O(1)保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
图14为本发明实施例3试样的与金橙II保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
图15为本发明实施例3试样的与金胺O(1)保留时间相对应的色谱峰的光谱图;
其中,图1标号1为金橙Ⅱ对照试剂的色谱峰;图2标号1为金胺O(1)对照试剂的色谱峰,标号2为金胺O(2)对照试剂的色谱峰,金胺O(1)和金胺O(2)为金胺O的同分异构体;图3标号1为杂质色谱峰,标号2为碱性橙对照试剂的色谱峰;图4标号1为杂质色谱峰,标号2为金橙II对照试剂的色谱峰;标号3为金胺O(1)对照试剂的色谱峰;标号4为金胺O(2)对照试剂的色谱峰;标号5为碱性橙对照试剂的色谱峰;图5标号1-3为杂质色谱峰;图6标号1-3为杂质色谱峰;图7标号1-3为杂质色谱峰。
具体实施方式
在本发明中,若非特指,所有的份、百分比均为重量单位,所采用的设备和原料等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。
一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加乙醇制成混合对照品溶液,摇匀,即得;
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末,置锥形瓶中,加乙醇,振摇提取,滤过,取续滤液,即得;
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图;
结果判定的步骤:供试品色谱中,不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰;若出现保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品与相应对照试剂的色谱峰在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,供试品与相应对照试剂的吸收光谱相同,则可判定供试品中含有相应染色剂。
作为进一步优选方案,在制备对照试剂溶液的步骤中,所述对照试剂溶液的配制方法如下:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
作为进一步优选方案,在制备供试品溶液的步骤中,所述供试品溶液的提取过程如下:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
作为进一步优选方案,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱。
作为进一步优选方案,所述梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。
作为进一步优选方案,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。
作为进一步优选方案,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。
作为进一步优选方案,在含量测定的步骤中,理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000;金胺O(1)和金胺O(2)为金胺O的同分异构体。
作为进一步优选方案,在结果判定的步骤中,具体判定过程如下:若供试品色谱出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金橙Ⅱ;若供试品色谱出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金胺O;若供试品色谱出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与碱性橙对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有碱性橙。
下面,结合附图以及具体实施方式,对本发明做进一步描述,需要说明的是,在不相冲突的前提下,以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。
实施例1批号为180806578的延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测
该延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图,如图1-4所示,分别为金橙Ⅱ对照试剂、金胺O对照试剂、碱性橙对照试剂、混合对照试剂的色谱图;图5为本试样品的色谱图;所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱;梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000。
结果判定的步骤:
如图5所示,供试品色谱中,出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金橙Ⅱ对照试剂与供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图8、10所示,判定供试品中不含有金橙Ⅱ;
如图5所示,供试品色谱中,出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金胺O对照试剂与供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图9、11所示,判定供试品中不含有金胺O;
如图5所示,供试品色谱中,不出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
实施例2批号为180806147的延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测
该延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图,如图1-4所示,分别为金橙Ⅱ对照试剂、金胺O对照试剂、碱性橙对照试剂、混合对照试剂的色谱图;图6为本试样品的色谱图;所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱;梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000。
结果判定的步骤:
如图6所示,供试品色谱中,出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金橙Ⅱ对照试剂与供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图8、12所示,判定供试品中不含有金橙Ⅱ;
如图6所示,供试品色谱中,出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金胺O对照试剂与供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图9、13所示,判定供试品中不含有金胺O;
如图6所示,供试品色谱中,不出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
实施例3批号为180901423的延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测
该延胡索中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图,如图1-4所示,分别为金橙Ⅱ对照试剂、金胺O对照试剂、碱性橙对照试剂、混合对照试剂的色谱图;图7为本试样品的色谱图;所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱;梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000。
结果判定的步骤:
如图7所示,供试品色谱中,出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金橙Ⅱ对照试剂与供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图8、14所示,判定供试品中不含有金橙Ⅱ;
如图7所示,供试品色谱中,出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,金胺O对照试剂与供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱不一致,如图9、15所示,判定供试品中不含有金胺O;
如图7所示,供试品色谱中,不出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式,不能以此来限定本发明保护的范围,本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种中药饮片中橙色系染色剂的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
制备对照试剂溶液的步骤:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加乙醇制成混合对照品溶液,摇匀,即得;
制备供试品溶液的步骤:取待测中药饮片样品粉末,置锥形瓶中,加乙醇,振摇提取,滤过,取续滤液,即得;
含量测定的步骤:分别精密吸取对照试剂溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录液相色谱图;
结果判定的步骤:供试品色谱中,不得出现与对照试剂色谱主峰保留时间相同的色谱峰;若出现保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品与相应对照试剂的色谱峰在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,供试品与相应对照试剂的吸收光谱相同,则可判定供试品中含有相应染色剂。
2.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在制备对照试剂溶液的步骤中,所述对照试剂溶液的配制方法如下:分别精密称定金橙Ⅱ、金胺O、碱性橙对照试剂,加体积浓度为50%的乙醇,制成每1ml各含0.2mg的混合对照品溶液,摇匀,即得。
3.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在制备供试品溶液的步骤中,所述供试品溶液的提取过程如下:取待测中药饮片样品粉末2g,置锥形瓶中,加入体积浓度为50%的乙醇25ml,振摇提取5min,滤过,取续滤液,即得。
4.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以含体积浓度为0.5%的冰乙酸的0.05mol/L乙酸铵溶液为流动相B,流动相A与流动相B体积之和为100%,进行梯度洗脱。
5.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱条件如下:0-25min时,流动相A的体积为2→55%,流动相B的体积为98→45%;25-35min时,流动相A的体积为55%,流动相B的体积为45%;35-37min时,流动相A的体积为55→2%,流动相B的体积为45→98%;37-40min时,流动相A的体积为2%,流动相B的体积为98%。
6.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的检测器为二极管列阵检测器,检测波长420nm。
7.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,在含量测定的步骤中,所述液相色谱仪的柱温为20℃,流速为0.7ml/min。
8.如权利要求4所述的检测方法,其特征在于,在含量测定的步骤中,理论板数按金橙Ⅱ色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(1)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按金胺O(2)色谱峰计算应不低于5000,理论板数按碱性橙色谱峰计算应不低于5000;金胺O(1)和金胺O(2)为金胺O的同分异构体。
9.如权利要求1所述的检测方法,其特征在于,在结果判定的步骤中,具体判定过程如下:若供试品色谱出现与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金橙Ⅱ对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金橙Ⅱ对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金橙Ⅱ;若供试品色谱出现与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与金胺O对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与金胺O对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有金胺O;若供试品色谱出现与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰,则采用二极管列阵检测器比较供试品中与碱性橙对照试剂色谱保留时间相同的色谱峰的吸收光谱与碱性橙对照试剂的在260-500nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,若吸收光谱一致,则可判定供试品中含有碱性橙。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2614200C1 (ru) * 2015-12-25 2017-03-23 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" (ФГБОУ ВО "Кубанский государственный университет") Способ установления подлинности и качества зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.)
CN107831233A (zh) * 2017-11-27 2018-03-23 蒙小翠 中药制剂中多种着色剂同步检测的方法
CN108008026A (zh) * 2017-11-01 2018-05-08 广西壮族自治区食品药品检验所 一种山楂丸中13种着色剂同步检测的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2614200C1 (ru) * 2015-12-25 2017-03-23 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ "КУБАНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ" (ФГБОУ ВО "Кубанский государственный университет") Способ установления подлинности и качества зверобоя продырявленного (Hypericum perforatum L.)
CN108008026A (zh) * 2017-11-01 2018-05-08 广西壮族自治区食品药品检验所 一种山楂丸中13种着色剂同步检测的方法
CN107831233A (zh) * 2017-11-27 2018-03-23 蒙小翠 中药制剂中多种着色剂同步检测的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUOZHEN FANG ET AL.: "Simultaneous Determination of Banned Acid Orange Dyes and Basic Orange Dyes in Foodstuffs by Liquid Chromatography−Tandem Electrospray Ionization Mass Spectrometry via Negative/Positive Ion Switching Mode", 《JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》 *
何轶等: "HPLC- DAD- MS /MS 法结合谱库筛查5种中药中21种合成染料", 《中成药》 *
姜国萍: "常见染色中药的色素添加检测方法研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
朱雪妍等: "葛根芩连片中掺入染色剂的检测方法研究", 《药物分析杂志》 *
连云岚等: "HPLC-MS 法检测少腹逐瘀丸及原料药材中非法添加的7 种黄色素", 《中草药》 *

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