CN109536408A - 一种复合微生物菌液及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种复合微生物菌液及其应用。所述复合微生物菌液包括苏云金芽孢杆菌S16菌液和球形赖氨酸芽孢杆菌S31菌液,配比为体积比1:1,活菌数为108 CFU/mL。本发明的复合微生物菌液能促进烟草生长,具有开发成复合微生物肥料的广阔前景。
Description
技术领域
本发明属于农业生物技术领域,具体涉及一种复合微生物菌液及其应用。
背景技术
烟草是我国主要的经济作物之一,对发展国民经济发挥了重大作用。烟草除能制成卷烟、旱烟、斗烟、雪茄烟等供人吸食外,尚有多种医疗用途。虽然许多国家或地区明文限制流通或抽吸烟草,世界卫生组织成员还签署了《烟草控制框架公约》。但作为一种历史悠久的药用植物,其医疗价值不能忽视,且可以做为模式植物进行研究。此外,烟草的高经济价值历来举世公认,在发展地方经济、增加国家财政积累方面的作用突出。在我国的河南、山东、云南、贵州等集中产烟区,种烟面积一般仅占耕地总面积的1/4,而烟草的经济收入则占整个农业收入的50%以上,被农民称为致富的“短、平、快”作物。各级政府也把烟叶生产当作发展地方经济的主要财源,视作“优势产业”、“财政支柱”,给予大力支持和配合。由于烟草具有药用价值、食用价值并具有经济价值,因此为了提高烟草产量品质,实际生产中往往加入许多促生长肥料,其中绝大多数是化学肥料,然而化肥对环境会造成极大污染,因此生物肥料基于其环境友好的特性备受青睐,近年来广泛应用于促进烟草生长中。单一菌剂存在作用机制单一、效果不稳等问题,如果将几种有益功能菌株有机地混合在一起培养,能适应较广谱的生态环境,增加混合菌株功能的多样性,并有可能产生优于单类菌培养的效果,这对复合微生物肥料的开发利用有着重要的意义。
发明内容
一种复合微生物菌液,由苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)S16菌液和球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)S31菌液混合制成;所述苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)S16于2018年10月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.16587;所述球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)S31于2018年10月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.16588;中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。
该复合微生物菌液中,所述苏云金芽孢杆菌S16菌液和球形赖氨酸芽孢杆菌S31的活菌数之比为1:1。
制备方法包括以下步骤:
(1)将苏云金芽孢杆菌S16和球形赖氨酸芽孢杆菌S31分别接种于营养液体培养基中,于37℃培养24小时;
(2)离心收集菌体,分别将菌液浓度调至108 CFU/mL;
(3)将两种菌液进行复配,得到复合微生物菌液。
步骤(1)所述营养液体培养基成分如下:蛋白胨 10 g/L,牛肉粉3 g/L,氯化钠5g/L,pH 7.0。
进一步地,将上述复合微生物菌液应用于促进烟草生长中。
本发明的有益效果:
本发明将两种不同来源的芽孢杆菌混合一起施用后,显著提高了烟草生长,比单独施加两种菌的效果更好,具有开发成复合微生物肥料的广阔前景。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
1、材料准备:将活化好的苏云金芽孢杆菌S16和球形赖氨酸芽孢杆菌S31按培养基体积1%的接种量分别接种于营养液体培养基(蛋白胨 10 g/L,牛肉粉3 g/L,氯化钠5 g/L,pH7.0)中,37℃培养24小时,离心收集菌体,将菌液浓度调至108 CFU/mL;复合菌液即为苏云金芽孢杆菌和球形赖氨酸芽孢杆菌按体积比1:1的比例进行混合。
2、实验方法:直径为15cm的塑料花盆中装入2kg的土壤,每盆施加2g氮磷钾烤烟专用复合肥作为基础肥料,移栽两株烟草幼苗,并立即均匀浇入10mL 浓度为25%-100%(v/v)的菌悬液,对照组浇入10 mL水,此后每天浇水。移苗7天后间苗,留下长势较好的那株烟草苗继续栽培。在菌液处理12周后对烟草的株高、叶片总面积和鲜重进行测定。
实施例2:烟草生物量的测定
1、烟草株高的测定
菌液处理12周后对烟草的株高进行测定,从表1中可以看出,单独施加S16、S31菌液和施加两者的复合菌液对于烟草株高生长均有促进作用,且随着菌量的增加促进作用越明显,但单独菌液的效果均不如复合菌液。
表1 复合微生物菌液对烟草株高的影响
其中,对照组NPK为只添加氮磷钾烤烟专用复合肥,不添加菌液。
2、烟草叶片总面积的测定
菌液处理12周后对烟草的叶片总面积(叶片面积约=0.75×叶片长度×最大叶片宽度)进行测定,从表2中可以看出,单独施加S16、S31菌液和施加两者的复合菌液对于烟草叶片生长均有促进作用,且随着菌量的增加促进作用越明显,但单独菌液的效果均不如复合菌液。
表2 复合微生物菌液对烟草叶片总面积的影响
其中,对照组NPK为只添加氮磷钾烤烟专用复合肥,不添加菌液。
3、烟草鲜重的测定
施加本发明的菌液12周后,对烟草的鲜重进行测试,结果见表3。
表3 复合微生物菌液对烟草鲜重的影响
其中,对照组NPK为只添加氮磷钾烤烟专用复合肥,不添加菌液。
由此可见,单独施加S16、S31菌液和施加两者的复合菌液均能明显促进烟草的生长,且随着菌量的增加效果越明显,但单独菌液的效果均不如复合菌液,说明同时浇入S16+S31复合菌液的烟草植株长势更好,在株高、叶片面积、鲜重等方面均比对照组好。
需要说明的是,上述实施例不以任何形式限制本发明,凡采用等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案,均落在本发明的保护范围内。
Claims (5)
1.一种复合微生物菌液,其特征在于:由苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)S16菌液和球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)S31菌液混合制成;所述苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)S16于2018年10月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.16587;所述球形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sphaericus)S31于2018年10月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.16588。
2.根据权利要求1所述一种复合微生物菌液,其特征在于,该复合微生物菌液中,所述苏云金芽孢杆菌S16菌液和球形赖氨酸芽孢杆菌S31的活菌数之比为1:1。
3.一种如权利要求1或2任一所述的复合微生物菌液的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将苏云金芽孢杆菌S16和球形赖氨酸芽孢杆菌S31分别接种于营养液体培养基中,于37℃培养24小时;
(2)离心收集菌体,分别将菌液浓度调至108 CFU/mL;
(3)将两种菌液进行复配,得到复合微生物菌液。
4.根据权利要求3所述一种复合微生物菌液的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述营养液体培养基成分如下:蛋白胨 10 g/L,牛肉粉3 g/L,氯化钠5 g/L,pH 7.0。
5.一种如权利要求1或2任一所述的复合微生物菌液在促进烟草生长中的应用。
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