CN109475594A - 用于成像ido1酶的放射性配体 - Google Patents

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J.A.巴洛格
A.黄
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Abstract

本发明涉及放射性标记的IDO1抑制剂或其药学上可接受的盐，其可用于哺乳动物中的IDO酶的定量成像。

Description

用于成像IDO1酶的放射性配体
相关申请的交叉引用
本申请要求2016年7月19日提交的美国临时申请序列号62/364,020的优先权，其整体内容通过引用并入本文。
发明领域
本发明涉及新颖的放射性标记的IDO1抑制剂及其在哺乳动物中标记和诊断成像IDO酶的用途。
发明背景
正电子发射型断层摄影术(PET)是一种非侵入性成像技术，可以提供有关活对象中生物过程的功能信息。对体内分子事件进行成像和监测的能力对于深入了解活生物体内的生物化学和生理过程具有重要价值。这反过来对于开发用于治疗疾病，早期检测疾病和新药设计的新方法是必不可少的。PET依赖于用正电子发射放射性同位素标记的分子的设计和合成。这些分子被称为放射性示踪剂或放射性配体。对于PET成像，最常用的正电子发射(PET)放射性核素是11C、18F、15O 和13N，所有这些都是回旋加速器产生的，并且分别具有20、110、2和10分钟的半衰期。在用正电子发射放射性核素进行放射性标记后，通常通过静脉内(i.v.)注射将这些PET放射性配体施用于哺乳动物。一旦进入体内，当放射性配体衰变时，它会发射出一个正电子，其会移动一小段距离直到它与电子结合。然后发生称为湮灭事件的事件，其产生两个共线光子，每个能量为511keV。使用能够检测从放射性配体发射的伽马辐射的PET成像扫描仪，平面和断层扫描图像显示放射性示踪剂随时间变化的分布。PET放射性配体提供有关靶标结合和受体和酶的剂量依赖性结合位点占据的有用体内信息。
吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO；还称为IDO1)是在免疫调节中起作用的IFN-γ靶基因。IDO1为氧化还原酶并且为在色氨酸至N-甲酰基-犬尿氨酸的转化中催化第一步骤且为限速步骤的两种酶中的一种。其以在若干细胞群体(包括免疫细胞、内皮细胞及纤维母细胞)中发现的41kD单体形式存在。IDO1在物种之间相对非常保守，小鼠与人类在氨基酸水平方面共享63%序列一致性。来源于其晶体结构及定点诱变的数据显示底物结合及底物与铁结合的双加氧酶之间的关系为活性所必需。已经鉴定IDO1的与IDO共享44%氨基酸序列同源性的类似物(IDO2)，但其功能与IDO1在很大程度上不同。(参见例如Serafini P,等人, Semin.Cancer Biol., 16(1):53-65 (2006年2月)和Ball, H.J.等人, Gene, 396(1):203-213(2007年7月1日))。
IDO1在免疫调节中发挥主要作用，且其免疫抑制功能以若干方式显示。重要地，IDO1在T细胞水平上调节免疫性，且在IDO1与细胞因子产生之间存在关系。此外，肿瘤通过上调IDO1频繁地操控免疫功能。因此，调节IDO1可对多种疾病、病症和病状具有治疗效果。
在IDO1与癌症之间存在病理生理学联系。免疫体内平衡的破坏与肿瘤生长及发展密切相关，且在肿瘤微环境中产生IDO1似乎帮助肿瘤生长及转移。此外，IDO1活性水平增加与多种不同肿瘤相关(Brandacher, G.等人, Clin. Cancer Res., 12(4):1144-1151(2006年2月15日))。
治疗癌症通常需要手术切除，随后进行化学疗法及放射疗法。由于肿瘤细胞通过使原发性肿瘤生长再生并且通常更重要地通过播种远端转移来基本上逃脱的能力，标准治疗方案显示高可变程度的长期成功。治疗癌症及癌症相关疾病、病症和病状的最近进展包括使用将免疫疗法与更传统的化学疗法及放射疗法结合的联合疗法。在大多数情形下，与传统化学疗法相比，免疫疗法与较少毒性相关，因为其利用患者自身的免疫系统来鉴别及消除肿瘤细胞。
除癌症以外，IDO1还已经尤其牵涉免疫抑制、慢性感染及自身免疫疾病或病症(例如类风湿性关节炎)。因此，通过抑制IDO1活性来抑制色氨酸降解具有极大的治疗价值。此外，当T细胞被妊娠、恶性疾病或病毒(例如HIV)遏制时，IDO1的抑制剂可用于增强T细胞活化。尽管其作用未被很好地定义，IDO1抑制剂还可用于治疗患有神经或神经精神疾病或病症(例如抑郁)的患者。
使用对IDO1具有高亲和力的特定PET放射性配体与支持成像技术相结合可以提供围绕IDO1抑制剂在表达IDO1的组织(例如肺、肠和免疫系统的树突细胞)中的靶标结合和剂量/占据关系的临床演化方法。本文所述的发明涉及放射性标记的IDO1抑制剂，其可用于体外和体内的探索和诊断成像应用，以及用于使用放射性标记和未标记的IDO1抑制剂的竞争研究。
公开概述
本发明部分地基于以下理解：放射性标记的IDO1抑制剂可用于检测和/或定量和/或成像IDO1酶和/或IDO1表达和/或化合物占据哺乳动物物种组织中IDO1酶的结合位点的亲和力。已经发现放射性标记的IDO1抑制剂，当施用于哺乳动物物种时，在IDO1酶上的活性位点积聚或占据IDO1酶上的活性位点并且可以通过成像技术检测，从而提供IDO1蛋白存在的有价值的诊断标记、化合物占据IDO1酶的活性位点的亲和力以及IDO1抑制剂的临床评价和剂量选择。此外，本文公开的放射性标记的IDO1抑制剂可以用作研究工具以经由未标记的药物和放射性标记的药物之间竞争结合酶来研究未标记的IDO1抑制剂与IDO1酶的体内相互作用。这些类型的研究可用于确定IDO1酶活性位点占据与未标记IDO1抑制剂的剂量之间的关系，以及用于研究各种剂量的未标记IDO1抑制剂阻断酶的持续时间。
作为临床工具，放射性标记的IDO1抑制剂可用于帮助定义IDO1抑制剂的临床有效剂量。在动物实验中，放射性标记的IDO1抑制剂可用于提供用于在供临床开发选择的潜在候选药物之间进行选择的有用信息。放射性标记的IDO1抑制剂也可用于研究活组织中IDO1酶的区域分布和浓度。它们可用于研究IDO1酶浓度的疾病或药理学相关变化。
根据本发明，提供了以下式I的化合物:
包括其药学上可接受的盐和立体异构体，例如:
。
根据本发明的一个实施方案，提供了药物组合物，其包含诊断有效量的式I的放射性标记的化合物以及用于该化合物的药学上可接受的载体。
本发明还提供了用于体内成像已知IDO1表达的哺乳动物组织以检测癌细胞的方法，这样的方法包括以下步骤：
(a) 给对象施用如本文所述的式I的放射性标记的化合物；和
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)扫描来成像所述放射性标记的化合物的体内分布。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于扫描非放射性标记的化合物以确定其对占据哺乳动物组织中IDO1酶活性位点的亲和力的方法，所述方法包括以下步骤：
(a) 给对象施用式I的放射性标记的化合物；
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)成像已知IDO1表达的体内组织以确定放射性标记的化合物的基线摄取；
(c) 给对象施用非放射性标记的化合物；
(d) 给对象施用第二剂量的式I的放射性标记的化合物；
(e) 成像式I的放射性标记的化合物在表达IDO1酶的组织中的体内分布；
(f) 将来自在表达IDO1的组织内的基线PET扫描数据的信号与施用非放射性标记的化合物后在表达IDO1酶的组织内复取的PET扫描数据的信号进行比较。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于监测正在用IDO1抑制剂治疗的癌症患者的治疗的方法，所述方法包括以下步骤：
(a) 给患者施用式I的放射性标记的化合物，
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)获得表达IDO1的患者组织的图像；和
(c) 检测所述放射性标记的IDO1抑制剂占据IDO1酶的活性位点的程度。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于组织成像的方法，所述方法包括以下步骤：使含有IDO1酶的组织与如本文中所述的式I的放射性标记的化合物接触，并使用正电子发射型断层摄影术(PET)成像检测所述放射性标记的化合物，其中所述检测可以在体外或体内进行。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于诊断对象中疾病存在的方法，所述方法包括：
(a) 给对象施用式I的放射性标记的化合物，该化合物与疾病存在相关的IDO1酶结合；和
(b) 获得对象的至少一部分的放射性图像以检测放射性标记的化合物的存在或不存在；其中高于背景的放射性标记的化合物的存在和位置指示疾病的存在或不存在。
根据本发明的一个实施方案，提供了用于量化患病细胞或组织的方法，所述方法包括：
(a) 给具有患病细胞或组织的对象施用式I的放射性标记的化合物，该化合物与位于患病细胞或组织内的IDO1酶结合；和
(b) 检测患病细胞或组织中的放射性标记的化合物的放射性发射，其中患病细胞或组织中的放射性发射的水平和分布是患病细胞或组织的定量量度。
附图简述
图1是使用Synthera合成单元和定制纯化系统自动合成[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的示意图。
图2是放射性示踪剂摄取条形图，其显示以下内容：A)在用媒介物(n=10)或非放射性的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺; 6 mg/kg (n=12)、60 mg/kg (n=12)和150 mg/kg (n=11)处理4-5天后M109肿瘤中的示踪剂摄取。与媒介物相比，施用(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺产生剂量依赖性的示踪剂的置换。虚线代表肌肉组织中的平均示踪剂摄取。B)在用媒介物(n=10)或非放射性的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺; 6 mg/kg (n=12)、60 mg/kg (n=12)和150 mg/kg (n=11) 治疗4-5天后肌肉参比组织中的示踪剂摄取。施用(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺对肌肉组织中的摄取没有影响。C)与成像结果一致，用媒介物(n=7)或非放射性的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺; 6 mg/kg (n=7)、60 mg/kg (n=8)和150 mg/kg (n=8)治疗5-6天产生了以犬尿氨酸/色氨酸的比率测量的犬尿氨酸途径的剂量依赖性的抑制。D)用6 mg/kg(n=7)、60 mg/kg (n=8)或150 mg/kg (n=8)的非放射性的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺治疗5-6天产生了(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的血清浓度的剂量依赖性的增加。
图3是放射性示踪剂摄取条形图，其显示在用媒介物(n=4)或非放射性的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺; 6 mg/kg (n=4)、60 mg/kg(n=4)和150 mg/kg (n=4)治疗之前(BL, 实心条)和之后(治疗, 有条纹的条) M109肿瘤中的示踪剂摄取。在施用治疗之前(基线)，示踪剂摄取在各组之间没有差异。治疗后，媒介物组中的示踪剂摄取没有变化，但施用(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺产生了示踪剂的剂量依赖性置换。虚线代表肌肉参比组织中的平均示踪剂摄取。
图4是放射性示踪剂摄取条形图，其显示与具有低IDO1表达的CT26肿瘤(n = 10)相比，具有高IDO1表达的M109肿瘤(n = 10)中的示踪剂摄取增加。
图5 是生成的用18F-(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺成像的食蟹猴的MRI和PET图像。获得总共五个连续的全身图像以评估随时间变化的示踪剂动力学和生物分布。示踪剂在预期的清除器官如肝脏和胆囊中累积，而在剩余的身体中观察到很少甚至没有背景。
发明详述
在本发明的第一个实施方案中，提供了下式I的化合物或其药学上可接受的盐；
。
式I的立体异构体也包括在本发明的范围内，并包括例如以下：
。
式I的化合物是放射性标记的IDO1抑制剂，其可用作具有IDO1酶亲和力的正电子发射分子。
根据本发明的一个实施方案，本公开提供了用于成像IDO1酶的诊断组合物，其包括放射性标记的IDO1抑制剂和药学上可接受的载体。在另一个实施方案中，本公开提供了已知IDO1表达的哺乳动物组织的放射自显影方法，其包括以下步骤：给患者施用放射性标记的IDO1抑制剂，通过正电子发射型断层摄影术获得组织的图像，以及检测组织中的放射性标记的化合物以确定IDO1靶标结合和IDO1酶的活性位点占据。
当用适当的放射性核素标记时，放射性标记的IDO1抑制剂可能用于各种体外和/或体内成像应用，包括诊断成像、基础研究和放射治疗应用。可能的诊断成像和放射治疗应用的具体实例包括确定IDO1酶的位置、相对活性和/或定量；IDO1抑制剂的放射免疫测定；和放射自显影以确定患者或其器官或组织样品中IDO1酶的分布。
特别地，本发明的放射性标记的IDO1抑制剂可用于活人和实验动物的肺、肠和免疫系统的树突细胞或其它器官中的IDO1酶的正电子发射型断层摄影术(PET)成像。本发明的放射性标记的IDO1抑制剂可用作研究工具以通过未标记的药物与放射性标记的化合物之间竞争结合酶来研究未标记的IDO1抑制剂与IDO1酶的体内相互作用。这些类型的研究可用于确定IDO1酶占据与未标记的IDO1抑制剂剂量之间的关系，以及用于研究各种剂量的未标记的IDO1抑制剂阻断酶的持续时间。作为临床工具，放射性标记的IDO1抑制剂可用于帮助确定未标记的IDO1抑制剂的临床有效剂量。在动物实验中，放射性标记的IDO1抑制剂可用于提供用于在供临床开发选择的潜在候选药物之间进行选择的有用信息。IDO1抑制剂还可用于研究肺、肠和免疫系统的树突细胞以及其它表达IDO1的组织和活体实验动物的其它器官以及组织样品中IDO1的区域分布和浓度。放射性标记的IDO1抑制剂也可用于研究IDO1酶浓度的疾病或药理学相关变化。
例如，正电子发射型断层摄影术(PET)示踪剂如本发明的放射性标记的IDO1抑制剂可以与当前可用的PET技术一起使用以获得以下信息：候选IDO1抑制剂的酶结合位点占据水平与患者中的临床效力之间的关系；在开始长期临床研究之前，IDO1抑制剂的临床试验的剂量选择；结构新型的IDO1抑制剂的比较效力；研究用IDO1抑制剂治疗临床靶点期间IDO1抑制剂对体内转运蛋白亲和力和密度的影响；在癌症或其它IDO1介导的疾病的有效和无效治疗期间IDO1的密度和分布的变化。
本发明的放射性标记的IDO1抑制剂可用于成像IDO1酶或用于与IDO1表达相关的多种病症的诊断成像。
对于本发明化合物作为探索性或诊断性成像剂的用途，放射性标记的化合物可以根据标准药学实践单独在药物组合物中或优选与药学上可接受的载体或稀释剂、任选地与已知的辅助剂如明矾组合在药物组合物中来施用于哺乳动物，优选人。这些组合物可以口服或胃肠外施用，包括静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下、直肠和局部施用途径。优选地，施用是静脉内的。所述抑制剂是用短寿命的正电子发射放射性核素标记的放射性示踪剂，因此通常在合成不到一小时内通过静脉内注射施用。这是必要的，因为所涉及的放射性核素的半衰期短。
未标记的IDO1抑制剂的合适剂量水平为每天1mg至1500mg，优选25mg至800mg。当将本发明的放射性标记的IDO1抑制剂施用于人类对象时，成像所需的量通常由处方医师确定，剂量通常根据放射性核素的发射量而变化。然而，在大多数情况下，有效量是足以产生约1-5mCi范围内的发射的化合物的量。
在一个示例性应用中，取决于对象体重，以注射到患者体内的0.5-20mCi的总放射性的量进行施用。上限通过放射性标记的分子在啮齿动物或非人灵长类动物中的剂量测定来设定。
当对临床中的患者进行PET成像研究时，可以使用以下说明性程序。在实验当天之前的某个时间，患者用未标记的IDO1抑制剂预先给药，并且禁食至少12小时，允许随意摄取水。将20G两英寸静脉导管插入对侧尺静脉用于放射性示踪剂施用。通常安排PET示踪剂的施用时间以与血液中IDO1抑制剂浓度的最大值(Tmax)或最小值(Tmin)的时间一致。
将患者置于PET摄影机中，并通过静脉导管施用示踪剂剂量的放射性标记的IDO1抑制剂例如实施例5A(<20mCi)的PET示踪剂。在整个PET扫描中以适当的时间间隔采集动脉或静脉血样，以分析和定量血浆中未代谢的PET示踪剂的分数。获取图像直到120分钟。在注射放射性示踪剂的10分钟内，并且在成像期结束时，获得1ml血液样品用于测定可能在PET示踪剂之前施用的任何未标记的IDO1抑制剂的血浆浓度。
通过图像重建获得断层摄影图像。为了确定放射性示踪剂的分布，在重建图像上绘制感兴趣的区域(ROI)，包括但不限于肺、肠和免疫系统的树突细胞以及其它表达IDO1的组织或其它器官。在这些区域中随时间推移的放射性示踪剂摄取用于产生在所检查的各种给药范例下在没有任何干预或存在未标记的IDO1抑制剂时获得的时间活性曲线(TAC)。数据表示为放射性/单位时间/单位体积(μCi/cc/mCi注射剂量)。使用本领域公知的各种方法处理TAC数据以产生定量参数，例如结合电位(BP)或分布容积(VT)，其与未占据的IDO1结合位点的密度成比例。然后，在不同给药范例的IDO1抑制剂存在下，与未给药状态的BP或VT相比，通过平衡分析，基于BP或VT的变化计算IDO1酶的抑制。通过将上述数据相对于IDO1抑制剂的剂量(浓度)作图来产生抑制曲线。然后基于可通过阻断药物在Emax、Tmax或Tmin下实现的PET放射性配体的VT或BP的最大降低以及在各种给药范例中与未给药状态的BP或VT相比在IDO1抑制剂存在下其非特异性分布容积(V ND)和BP的变化来计算IDO1的抑制。通过曲线拟合剂量-速率/抑制曲线获得ID 50值。
本发明还涉及用于患者中IDO1结合位点的诊断成像的方法，其包括将放射性标记的IDO1抑制剂与药物载体或赋形剂组合的步骤。
定义
除非另有说明，否则本申请包括说明书和权利要求书中使用的以下术语具有下面给出的定义。必须注意，如说明书和所附权利要求书中所使用的，单数形式“一种”、“一个”和“该”包括复数指示物，除非上下文另有明确说明。除非另有说明，否则采用质谱、NMR、HPLC、蛋白质化学、生物化学、重组DNA技术和药理学的常规方法。在本申请中，除非另有说明，否则“或”或“和”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括”以及其他形式(例如“包括(include)”、“包括(includes)”和“包括(included)”)的使用不是限制性的。这里使用的章节标题仅用于组织目的，不应解释为限制所描述的主题。
如本文所用，关于制剂、组合物或成分的术语“可接受的”是指对所治疗的对象的一般健康没有持久的有害影响。
如本文所用，术语“抑制剂”是指诸如化合物的分子，其结合酶上的特定结合位点并触发细胞中的应答。
如本文所用，术语“共同施用”等意图包括向单个患者施用所选择的治疗剂，并且旨在包括其中药剂通过相同或不同施用途径在相同或不同的时间施用的治疗方案。
如本文所用的术语“组合物”旨在涵盖包含特定量的特定成分的产品，以及由特定量的特定成分的组合直接或间接产生的任何产品。与药物组合物有关的这样的术语旨在包括含有活性成分和构成载体的惰性成分的产品，以及由组合、络合或聚集任何两种或更多种成分、或由解离一种或多种成分、或由一种或多种成分的其它类型的反应或相互作用直接或间接产生的任何产品。因此，本发明的药物组合物包括通过混合本发明化合物和药学上可接受的载体制备的任何组合物。“药学上可接受的”是指载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其他成分相容并且对其接受者无害。术语“施用(administration of)”和/或“施用(administering a)”化合物应理解为意指向患者提供本发明化合物或本发明化合物的前药。
如本文所用，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足够量的所施用的药剂或化合物，其将在一定程度上缓解所治疗的疾病或病状的一种或多种症状。结果可以是减少和/或减轻疾病的征兆、症状或原因，或生物系统的任何其他期望的改变。例如，治疗用途的“有效量”是提供疾病症状的临床显著减少所需的包含本文公开的化合物的组合物的量。可以使用诸如剂量递增研究的技术来确定任何个体病例中的适当的“有效”量。
如本文所用，术语“诊断有效”是指根据本发明的成像组合物的量，其足以实现如研究人员或临床医生所寻求的将用于成像组织的成像剂集中于对象中的期望效果。构成诊断有效量的本发明的成像组合物的量可以由本领域普通技术人员根据他们自己的知识、本领域已知的方法和本公开内容常规确定。
术语“对象”或“患者”包括哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于人、黑猩猩、猿、猴、牛、马、绵羊、山羊、猪、兔、狗、猫、啮齿动物、大鼠、小鼠豚鼠等。在一个实施方案中，哺乳动物是人。
本文所用的术语“治疗(treat，treating或treatment)”包括缓和、减轻或改善疾病或病状的至少一种症状，预防其他症状，抑制疾病或病状，例如阻止疾病或病状的发展，缓解疾病或病状，引起疾病或病状消退，缓解由疾病或病状引起的状况，或预防性和/或治疗性地终止疾病或病状的症状。
本文所述的化合物可具有不对称中心。含有不对称取代原子的这类化合物可以以光学活性或外消旋形式分离。本领域熟知如何制备光学活性形式，例如通过拆分外消旋形式或通过从光学活性原料合成。烯烃、C=N双键等的许多几何异构体也可以存在于本文所述的化合物中，并且所有这些稳定的异构体都包括在本发明中。描述了所公开化合物的顺式和反式几何异构体，并且可以作为异构体的混合物或作为独立的异构形式分离。除非特别指出特定的立体化学或异构形式，否则意图包括结构的所有手性、非对映异构、外消旋形式和所有几何异构形式。
短语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断范围内适合用于与人类和动物的组织接触而没有过量的毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症、与合理的利益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中通过制备其酸或碱盐来修饰母体化合物。
术语药学上可接受的“盐”和“盐类”可以指与无机和有机碱形成的碱性盐。这些盐包括铵盐；碱金属盐如锂盐、钠盐和钾盐；碱土金属盐如钙盐和镁盐；与有机碱形成的盐如胺类盐(如二环己胺盐、苄星（benzathine）、N-甲基-D-葡糖胺和哈胺盐)；和与氨基酸如精氨酸、赖氨酸等的盐；和两性离子即所谓的“内盐”。优选无毒的药学上可接受的盐，但是其他盐也可用于例如分离或纯化产物。
术语药学上可接受的“盐”和“盐类”还包括酸加成盐。这些盐例如与以下酸形成：与强无机酸，例如矿酸，例如硫酸、磷酸或氢卤酸如HCl或HBr；与强有机羧酸，例如未取代或被例如卤素取代的1-4个碳原子的链烷羧酸，例如乙酸，例如饱和或不饱和的二羧酸，例如草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、邻苯二甲酸或对苯二甲酸，例如羟基羧酸，例如抗坏血酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸，例如氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸或赖氨酸或精氨酸)，或苯甲酸；或与有机磺酸，例如未取代或例如被卤素取代的(C1-C4)烷基或芳基磺酸，例如甲磺酸或对甲苯磺酸。
药学上可接受的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，这些盐可以通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的量的适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备；通常，优选非水介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。合适的盐的列表见于Remington's Pharmaceutical Sciences, 第17版, 第1418页, Mack Publishing Company, Easton, PA (1985)，其公开内容据此通过引用并入。
在整个说明书中，本领域技术人员可以选择基团及其取代基，以提供稳定的部分和化合物以及可用作药学上可接受的化合物的化合物和/或可用于制备药学上可接受的化合物的中间体化合物。
实施例
本发明的化合物的合成显示在以下实施例中。
HPLC条件:
方法A: Waters Acquity SDS使用以下方法: 2%至98%溶剂B的线性梯度经1.6 min；在220 nm处 UV可视化；柱: BEH C18 2.1 mm x 50 mm；1.7 um颗粒(加热至温度50℃)；流速:1 ml/min；流动相A: 100%水, 0.05% TFA；流动相B: 100% 乙腈, 0.05% TFA。
方法B: 柱: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-μm颗粒；流动相A: 5:95 乙腈:含有10mM乙酸铵的水；流动相B: 95:5 乙腈:含有10mM乙酸铵的水；温度:50℃；梯度: 0-100% B经3分钟，然后在100％B保持0.75分钟；流速: 1.00 mL/min；检测:在220nm处的UV。
实施例
[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S, 4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
实施例1A.
(+/-)-顺式和反式-N-(4-氯苯基)-2-(4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
制备1A. 2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基)丙酸乙酯
向在0℃冷却的NaH (0.307 g, 7.68 mmol)于THF (8 mL)中的混悬液中缓慢地加入2-(二乙氧基磷酰基)丙酸乙酯(1.830 g, 7.68 mmol)。30 min后，加入1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-酮(1 g, 6.40 mmol)。将所得混合物在0℃搅拌2h，然后温热至室温过夜。将混合物用水淬灭，并减压除去THF。将残余物溶于EtOAc中，用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过ISCO (EtOAc/Hex 0-30%)纯化粗物质。浓缩含有产物的级分，得到制备1A (1.2 g,78%收率)，为淡黄色油状物。
制备1B. 2-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-基)丙酸乙酯
将制备1A (500 mg, 2.081 mmol) (307A)和10%钯/碳(25mg, 0.024 mmol)于EtOAc(5 mL) 中的混悬液在Parr振荡器中在45psi下氢化6小时。过滤催化剂，浓缩滤液，得到制备1B (450mg, 89%收率)，为淡色油状物。
制备1C. 2-(4-氧代环己基)丙酸乙酯
向制备1B (450 mg, 1.857 mmol)于THF (5 mL) 中的溶液中加入1M氯化氢(水溶液)(0.929 mL, 3.71 mmol)。将混合物加热至50℃保持6小时。浓缩反应混合物。将残余物溶于EtOAc中，用水(2X)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。将粗物质用ISCO (EtOAc/Hex 0-30%)纯化。浓缩含有产物的级分，得到制备1C (290 mg, 79%收率)，为澄清的油状物。
制备1D. 2-(4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯
将制备1C (200 mg, 1.01 mmol)(307C)和2,6-二叔丁基-4-甲基吡啶(238 mg, 1.16mmol)溶于干燥DCM (10 ml)中。向反应混合物中滴加三氟甲磺酸酐(0.186 mL, 1.11mmol)并搅拌2小时。过滤混悬液。将滤液用DCM稀释，用1N HCl(2X)、饱和碳酸氢钠水溶液、水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到制备1D (320 mg, 96%收率)，为棕色油状物。
制备1E. 2-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯
向制备1D (300 mg, 0.908 mmol) (307D)于DMSO (5 mL) 中的溶液中加入4,4,4ʹ,4ʹ,5,5,5ʹ,5ʹ-八甲基-2,2ʹ-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷) (230 mg, 0.908 mmol)和乙酸钾(267 mg, 2.72 mmol)。在将混合物用N2脱气10 min后，加入PdCl2(dppf) (19.9 mg,0.027 mmol)。将混合物在80℃加热过夜。将混合物在EtOAc和水之间分配。将有机相浓缩并通过ISCO纯化。浓缩含有产物的级分，得到制备1E (168 mg, 60%收率)，为棕色油状物。
制备1F. 2-(4-(6-硝基喹啉-4-基)环己-3-烯-1-基)丙酸乙酯
向350mL密封管中加入4-氯-6-硝基喹啉(2 g，9.59 mmol)、制备1E(3.04 g，9.88mmol)、Na2CO3(4.06 g，38.4 mmol)和Pd(Ph3P)4(0.554 g，0.479 mmol)于二噁烷(89 mL)和水(29.6 mL)中的混合物。将反应在100℃加热过夜。将反应用水淬灭并用EtOAc稀释。分离各层。用EtOAc(3X)萃取水相。合并有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。通过硅胶色谱法使用ISCO机器(80 g柱，60 mL/min，0-45％EtOAc/己烷，经19分钟，tr =14min)纯化粗物质，得到制备1F(2.955 g，8.34 mmol，87％收率)，为黄色残余物。ESI MS(M+H)+ = 355.2。HPLC峰tr = 0.98 分钟。HPLC条件: A。
制备1G. 2-(4-(6-氨基喹啉-4-基)环己基)丙酸乙酯
向制备1F (0.455 g, 1.284 mmol)于MeOH (6.42 ml) 中的溶液中加入甲酸铵(0.405g, 6.42 mmol)，随后加入Pd/C (0.037 g, 0.347 mmol)。将反应在70℃下加热1小时。将反应物通过硅藻土过滤，且滤饼用CH2Cl2洗涤。浓缩滤液。将粗物质溶于EtOAc中并用饱和NaHCO3水溶液(2X)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到制备1G(379 mg，90％)，为棕色残余物。NMR显示1.8:1 dr的纯目标产物。ESI MS (M+H)+ = 327.3。HPLC峰tr = 0.71分钟。HPLC条件: A。
制备1H. 2-(4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酸乙酯
将制备1G (0.379 g, 1.161 mmol)和HCl水溶液 (0.59 mL)于水(2.1 mL)中的溶液冷却至0℃，然后加入亚硝酸钠(0.096 g, 1.393 mmol)于水(2.1 mL)中的溶液。在固体完全溶解后，将碘化钾(0.289 g, 1.742 mmol) 于水(2.1 mL)中的溶液滴加到上述溶液中。添加后，将混合物在室温下搅拌30分钟，然后在70℃下加热1小时。冷却后，通过缓慢加入Na2S2O3溶液(1.81 mL)中和溶液，然后用CH2Cl2 (2X)萃取。将有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到棕色残余物。将粗物质溶于最少量的CH2Cl2中并进行色谱分离。通过硅胶色谱法使用ISCO机器(40g柱，40 mL/min，0-55％EtOAc/己烷，经15分钟，tr = 10.5 min)纯化粗物质，得到制备1H (92.7 mg, 0.212 mmol, 18.26 %收率)，为黄色残余物。ESI MS(M+H)+ = 438.1。HPLC峰tr = 0.89 分钟。HPLC条件: A。
实施例 1A. (+/-)-顺式和反式-N-(4-氯苯基)-2-(4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
在0℃向4-氯苯胺(0.464 g, 3.64 mmol)于THF (2.8 mL) 中的溶液中加入异丙基氯化镁的溶液(1.820 mL，3.64 mmol)。将所得溶液温热至室温并搅拌5分钟，然后滴加制备1H(0.796 g，1.820 mmol)/THF(4.8 mL)。将反应在70℃下加热2小时，然后冷却至室温。加入另外的异丙基氯化镁(1.820 mL，3.64 mmol)。将反应再加热2小时。用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应并用EtOAc稀释。分离各层。用EtOAc(3X)萃取水相。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过硅胶色谱法使用ISCO机器(80g柱，60 mL/min，0-65％EtOAc/己烷，经35分钟，tr = 27 min)纯化粗物质，得到(+/-)-顺式-实施例1 (455 mg，0.702 mmol，39％收率)和(+/-)-反式-实施例1(111 mg，12％)。反式非对映异构体首先洗脱，然后是顺式非对映异构体。ESI MS (M+H)+ = 519.1。HPLC峰tr = 0.92 分钟。HPLC条件: A。
实施例 2
N-(4-氯苯基)-2-(4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
拆分约65.1 mg的非对映异构的和外消旋的实施例1。异构体混合物通过制备型SFC在以下条件下纯化：柱：OJ-H，25×3 cm ID，5-μm颗粒；流动相A：80/20 CO2 /MeOH；检测器波长：220 nm；流速：150 mL/min。将级分(“峰-1” tr = 4.64分钟，“峰-2”tr = 5.35分钟，“峰-3”tr = 6.43分钟)收集在MeOH中。基于制备型SFC色谱图，峰1和2的立体异构纯度估计大于95％。峰3通过制备型SFC在以下条件下再次纯化，得到异构体3和4：柱：Lux-Cellulose，25×3 cm ID，5-μm颗粒；流动相A：75/25 CO2/MeOH；检测器波长：220 nm；流速：180 mL/min。将级分(“峰-1” tr = 7.63分钟和“峰-2”tr = 8.6分钟)收集在MeOH中。基于制备型SFC色谱图，估计级分的立体异构纯度大于95％。通过制备型LC/MS进一步纯化每种非对映异构体或对映异构体：
首先洗脱的异构体: 通过制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质: 柱: XBridge C18,19 x 200 mm, 5-μm 颗粒; 流动相A: 5:95 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 流动相B: 95:5 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 梯度: 50-100% B经20分钟，然后在100% B保持5分钟;流速: 20 mL/min。将含有目标产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，得到异构体1 (14.5mg, 12%)。ESI MS (M+H)+ = 519.2。HPLC峰tr = 2.530 分钟。纯度 = 92%。HPLC条件: B。未确定绝对立体化学。
第二洗脱的异构体: 通过制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质: 柱: XBridgeC18, 19 x 200 mm, 5-μm 颗粒; 流动相A: 5:95 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 流动相B: 95:5 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 梯度: 50-100% B经20分钟，然后在100% B保持5分钟; 流速: 20 mL/min。将含有目标产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，得到异构体2(8.1 mg, 7.3%)。ESI MS (M+H)+ = 519.1。HPLC峰tr = 2.470 分钟。纯度 = 100%。HPLC条件: B。未确定绝对立体化学。
第三洗脱的异构体: 通过制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质: 柱: XBridgeC18, 19 x 200 mm, 5-μm 颗粒; 流动相A: 5:95 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 流动相B: 95:5 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 梯度: 50-100% B经20分钟，然后在100% B保持5分钟; 流速: 20 mL/min。将含有目标产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，得到异构体3(13.7 mg, 12%)。ESI MS (M+H)+ = 519.1。HPLC峰tr = 2.481 分钟。纯度 = 97%。HPLC条件: B。未确定绝对立体化学。
第四洗脱的异构体: 通过制备型LC/MS用以下条件纯化粗物质: 柱: XBridgeC18, 19 x 200 mm, 5-μm 颗粒; 流动相A: 5:95 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 流动相B: 95:5 乙腈: 含有10-mM乙酸铵的水; 梯度: 50-100% B经20分钟，然后在100% B保持5分钟; 流速: 20 mL/min。将含有目标产物的级分合并并通过离心蒸发干燥，得到异构体4(7.5 mg, 6.7%)。ESI MS (M+H)+ = 518.9。HPLC峰tr = 2.361 分钟。纯度 = 99%。HPLC条件: B。未确定绝对立体化学。
实施例3
(4-((1S,4S)-4-((R)-1-((4-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)二苯基锍三氟甲磺酸盐
制备3A. (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-(苯基硫基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
将三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(7.9 mg，0.0086 mmol)和(氧基双(2,1-亚苯基))双(二苯基膦)(14 mg，0.026 mmol)于甲苯(1.5mL)中的溶液在环境温度下搅拌并通过将低氮气流鼓泡通过溶液5分钟脱气。向该溶液中加入Part X (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1s,4S)-4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(90 mg，0.17 mmol)并将溶液用氮气脱气另外3分钟。加入苯硫酚(0.20 mL，0.21 mmol)和叔丁醇钾(23.4 mg，0.208 mmol)，将溶液在100℃加热2小时。将得到的混合物通过0.2μm尼龙膜盘过滤，并加载到4克硅胶柱上以使用ISCOCombiFlash配套快速系统进行纯化。在254nm监测UV检测，该纯化的流速为15 mL/min。使用的正相溶剂是：溶剂A：己烷，溶剂B：乙酸乙酯。使用线性梯度：0分钟-25分钟0％B至90％B，纯化的产物在17至24分钟之间洗脱。减压蒸发合并的产物级分，得到目标产物(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-(苯基硫基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺，为黄色固体(中间体2)(80 mg，0.16 mmol)。LCMS m/z (M+H,) 理论: 501.17, 502.17, 503.17, 504.17，实测:501.34, 502.30, 503.32, 504.34。
(4-((1S,4S)-4-((R)-1-((4-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)二苯基锍三氟甲磺酸盐
在10mL反应管中加入来自制备3A的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-(苯基硫基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(80 mg，0.16 mmol)于氯苯(1.5 mL)中的溶液。向该溶液中加入三氟甲磺酸(0.028 mL，0.32 mmol)、二苯基碘鎓三氟甲磺酸盐(172 mg，0.399 mmol)和苯甲酸铜(24.4 mg，0.080 mmol)，并将管密封。将搅拌的混合物在125℃下加热1小时。减压浓缩后，将所得残余物溶于乙腈(2mL)中，并进行反相半制备HPLC纯化。纯化条件使用18 mL/min的流速，使用LUNA C18 21.1×250mm 5μ LC柱，溶剂A：0.1％三氟乙酸水溶液，溶剂B：0.1％三氟乙酸的乙腈溶液，UV检测在254nm监测。使用梯度：0分钟-12分钟，15％B至95％B，纯化的产物在11.5分钟洗脱。减压蒸发合并的产物级分，将得到的残余物溶于二氯甲烷(20mL)中。依次用1N氢氧化钠水溶液、饱和三氟甲磺酸钠水溶液(5 mL)和水(15 mL)洗涤该溶液。有机层经无水硫酸镁干燥。减压除去溶剂，得到目标产物(4-((1S,4S)-4-((R)-1-((4-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)二苯基锍三氟甲磺酸盐，为黄褐色固体(73 mg, 0.090 mmol)。
实施例4
(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
制备4A. (4-((1S,4s)-4-((R-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)硼酸
将来自实施例2的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-碘喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(55 mg，0.106 mmol)溶解在乙醇(5 mL)中。加入四羟基硼(38 mg，0.424 mmol，4当量)、2-(二环己基膦基)-2',4',6'-三异丙基联苯(20.2 mg，0.042 mmol，0.4当量)、乙酸钾(52mg，0.530, 5当量)和氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯))钯(II)。将反应混合物脱气5分钟，密封，并加热至55℃保持2小时。浓缩混合物并重新溶解在乙腈/0.1%TFA中用于制备型HPLC。在Luna C18(2)柱上纯化，用20至90％乙腈/0.1%TFA洗脱，收集并合并纯级分并冷冻干燥后，得到22.4mg 的(4-((1S,4s)-4-((R-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)硼酸(1A)，为白色固体。LC/ms 计算(M+436, 437, 439)，实测 (M+ 436.5, 437.5, 439.4)。
(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1s,4S)-4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
将(4-((1S,4S)-4-((R-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)硼酸 (4A)(22.2 mg, 0.051 mmol)溶解于7 mL二氯甲烷中。加入2,3 二甲基丁烷-2,3二醇(7.8 mg,1.25当量)连同12分子筛。将反应在室温搅拌过夜。将反应过滤并将滤器用二氯甲烷(2 mL)洗涤。浓缩得到20.4 mg的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1s,4S)-4-(6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)喹啉-4-基)环己基)丙酰胺。
实施例 5
[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺
实施例 5A. [18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(经由实施例3)
[18F]-氟化物水溶液 (2.0 ml, 28.7 GBq/775 mCi)购自Hackensack, NJ 的Siemens’ PETNET Solutions并直接转移至在位于Wallingford, CT的BMS处的定制遥控合成单元内的QMA Sep-Pak [Sep-Pak light QMA 柱(Waters part #186004540)在使用前先后用5ml 8.4% 碳酸氢钠溶液、5 ml无菌水和5 ml乙腈预调节]。该转移完成后，通过加入225 mL 水溶液(含有30 mM 碳酸氢钾(4.5 mg, 0.045 mmol)和30 mM 4,7,13,16,21,24-六氧杂-1,10-二氮杂双环[8.8.8]二十六烷 (17.0 mg, 0.045 mmol))和1.275 mL乙腈的混合物，从QMA Sep-Pak释放[18F]氟化物水溶液。在温和的氮气流下，在100℃和真空下蒸发溶剂。用1ml份的乙腈重复共沸干燥两次，得到无水K.2.2.2/K18F络合物。完成该过程后，将穴状配体在完全真空下进一步干燥20分钟时间。将(4-((1S,4S)-4-((R)-1-((4-氯苯基)氨基)-1-氧代丙-2-基)环己基)喹啉-6-基)二苯基锍三氟甲磺酸盐 (2.1 mg, 2.8 µmol)溶解于无水DMSO (1 mL)并加入至干燥的穴状配体。将该溶液在110℃加热15分钟。在这之后，粗反应混合物用7 ml的无菌水和1 mL的乙腈稀释。将整个内容物递送至Sep-Pak tC18(400 mg的tC18, 0.8 mL体积, Waters part # WAT036810)。Sep-Pak用无菌水(2 mL)冲洗以除去未反应的氟化物，然后用2 mL乙腈从Sep-Pak洗脱产物。乙腈用无菌水(2 mL)稀释并充分混合。将溶液转移至HPLC 的注射回路并通过反相HPLC纯化(HPLC柱: Agilent ZorbaxSB-C18, 250x10 mm, 5。溶剂A: 含0.05% TFA的水。溶剂B: 含0.05% TFA的乙腈。条件:60% A, 0-15 min; 60-0% A, 15-25 min; 0% A, 25-30 min。流速4 mL/min。UV 232 nm。使用Gamma ram用于放射化学检测。)。[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S, 4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在色谱图中的18.1 min 处收集约1 min时间。将该产物收集到含有25ml无菌水的50 ml烧瓶中并将整个内容物递送至Sep-Pack light C18柱(130 mg的C18,0.3 mL体积, Waters part # WAT023501)。将Sep-Pak用1 mL无菌水冲洗并用0.5 mL无水乙醇释放产物。将 [18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的乙醇溶液通过反相HPLC分析(柱: Agilent Zorbax SB-C18, 250x4.6 mm. 5。溶剂A: 含0.05% TFA的水。溶剂B: 含0.05% TFA的乙腈。条件: 58% A, 0-15 min; 58-0% A,15-25 min; 0% A, 25-30 min。流速 1 mL/min。UV 232 nm。将Gamma ram用于放射化学检测，保留时间13.2 min，放射化学纯度为100%。标记的产物与(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的真正标准品共同洗脱。手性纯度通过反相HPLC分析(柱: Daicel ChiralCel OD-RH, 150x4.6 mm. 5。溶剂A: 水。溶剂B: 乙腈。条件:40% A, 0-13 min; 40-20% A, 13-14 min; 20% A, 14-16 min; 20-40% A 16-17 min;40% A 17-20 min。流速 1 mL/min。UV 232 nm。Gamma ram用于放射化学检测，保留时间7.7min，手性放射化学纯度为100%。当与(R,S)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的真正标准品共同注射时，标记的物质仅给出一个峰。在合成的最后分离的总活性为4.78 mCi (176.9 MBq)且比活性为7.15 mCi/nmol。
实施例 5B. [18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(经由实施例 4)
使用商业Synthera合成模块(IBA)和定制HPLC系统进行自动合成。[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的自动合成使用盒型IBA Synthera合成模块进行，所述模块具有用于反应的适当组装的积分流体处理器套件。随后转移到定制的自动化系统进行HPLC纯化和重新配制。积分流体处理器(IFP)套件和定制系统装载有用于该合成的合适前体并总结在表1中，该系统的示意图显示在图1中。纯化在Varian HPLC单元上进行，注射回路的填充由稳定的氮气流控制。
将[18F]氟化物水溶液 (2.0 ml, 59.2 GBq/ 1.6 Ci)递送至已经预调节的Sep-Pak light 46 mg QMA。在完成转移后，通过将洗脱混合物(来自“V1”)加入至反应器中，从QMA Sep-Pak释放[18F] 氟化物水溶液。将溶剂在温和氮气流和真空下蒸发。然后将前体(来自“V2”)的溶液加入至干燥的氟化物-18并在110℃加热30 分钟。在将其用2.5 mL 蒸馏水和1.5 mL乙腈 (来自“V4”)稀释后，接着转移至中间体小瓶中(至“HPLC前”)。
然后将混合物加载到5mL样品注射回路上，然后加载到半制备HPLC柱上。将40％乙腈在0.1％三氟乙酸水溶液中的混合物以4.0mL/分钟的速率冲洗通过该柱，压力1850 PSI，UV 220nm。将从22至24分钟的产物分离到含有30mL蒸馏水的稀释烧瓶中。将全部内容物转移至C18固相萃取小柱，将其预先活化，然后用1mL乙醇(来自“V5”)释放到4mL盐水的产物小瓶中，以产生20％乙醇的盐水溶液用于注射。31.2 mCi (1.15 GBq)的[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺。
通过反相HPLC分析该产物，并通过共注射(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的非放射性参照标准物、放射化学纯度、化学纯度和比活性进行化学鉴定。在16分钟时与非放射性参照标准物共洗脱的分离产物是99％放射化学和95％化学纯，比活性为0.38GBq/nmol(10.47mCi/nmol)。通过手性HPLC分析产物：通过共注射非放射性参照标准物(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(10min)和(S)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(11.5 min)测定化学纯度。分离的产物与10分钟时的非放射性参照标准物共洗脱，ee：> 99.5％。
实施例6. 在表达IDO1的异种移植小鼠模型中用[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺体内PET 成像
测试[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺以证实其作为IDO1 PET放射性配体的性质。使用M109小鼠肿瘤模型的PET 成像测试[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的特异性和对IDO1酶的靶向作用。M109肿瘤模型由鼠肺癌细胞系产生并表达高水平的IDO1。通过在BALB/c小鼠的右肩上皮下植入1×106个M109细胞来产生异种移植肿瘤模型。植入后，在研究开始前让肿瘤生长5天。将植入M109异种移植物的45只小鼠分成4组。在第1组中，12只动物接受6 mg/kg(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=12)，在第2组中，12只动物接受60 mg/kg (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=12)，在第3组中，11只动物接受150 mg/kg (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=11)并且在第4组中，10只动物接受盐水媒介物(n = 10)。基于已知的药理学作用建立给药和治疗，并且每天一次PO施用治疗4或5天。所有动物在治疗后接受PET扫描，最后一剂(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺或媒介物在PET成像前2小时施用。将150 µCi的乙醇在含有[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的注射用无菌盐水中的10%溶液在PET成像前1小时i.v.注射，以允许示踪剂在肿瘤中分布和摄取。通过从注射前注射器中的总测量剂量中减去注射后注射器中残留物的衰变校正活性来计算精确注射剂量。对于PET成像，将小鼠用异氟烷麻醉并置于具有4只动物容量的定制动物保持器中。用加热垫维持体温，并在成像期间用1.5％异氟烷维持麻醉。PET成像在专用的microPET® F120TM扫描仪和F220TM 扫描仪(Siemens Preclinical Solutions, Knoxville, TN)上进行。使用57Co源进行10分钟透射扫描以用于最终PET图像的衰减校正，然后进行10分钟静态发射扫描。在PET成像之前或之后，在图像分析期间进行CT扫描(X-SPECT，Gamma Medica)或MRI扫描(Bruker)用于解剖定位。使用最大后验(MAP)算法重建PET图像，使用收集的透射图像进行衰减校正。使用图像分析软件AMIDE进行图像分析。PET图像与其相应的CT或MRI图像共同登记，并且使用CT或MRI图像作为解剖学指导手动地在肿瘤边界和肌肉周围绘制感兴趣的区域(ROI)。从ROI体积和衰减校正至发射扫描起始的计算注射活性获得结果量度百分比注射剂量/g组织(％ID/g)。将来自(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺治疗组的肿瘤中的示踪剂摄取与媒介物组和肌肉组织的示踪剂摄取进行比较。肌肉组织用作参考区域以评估非特异性结合，因为该组织中的IDO1表达很小。与媒介物组相比，在成像之前用(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(6-150 mg/kg)治疗的第1-3组中，产生示踪剂摄取的剂量依赖性降低(图2A)。在肌肉参比组织中，治疗对示踪剂没有影响，这与IDO1在这些组织中不表达一致(图2B)。在动物的子集中(媒介物; n=7, 6 mg/kg;n=7, 60 mg/kg; n=8, 150 mg/kg; n=8)，收集肿瘤和血清用于测量血清和肿瘤内的(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的药物水平、色氨酸和犬尿氨酸。对于这些研究，小鼠在成像后的那天接受了额外一剂(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺或媒介物。在最后一剂(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺后7小时，将小鼠安乐死，收集肿瘤和血清并针对标记物进行处理。如图2A中所示，M109肿瘤内的示踪剂信号和(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的浓度之间存在关联。由于(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的血清浓度(图2D)随着施用剂量的增加而增加，肿瘤内的%ID/g以剂量依赖性的方式降低。犬尿氨酸途径的抑制(如肿瘤内犬尿氨酸/色氨酸的比率(Kyn/Trp)所测量的)示于图2C。与媒介物组相比，在用(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺处理的组内的肿瘤中观察到犬尿氨酸/色氨酸比率的剂量依赖性降低，并遵循与从PET成像数据测量的％ID/g相同的趋势。这些结果提供了[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在体内对IDO1的特异性和靶向性的证据，以及证明了[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺作为该靶标的PET放射性配体的用途。我们证明了(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在表达IDO1的M109肿瘤中以剂量依赖性的方式置换示踪剂。此外，我们的成像结果与肿瘤中的剂量依赖性PD效应和血清中的PK相关，从而证实了[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在体内的特异性和靶标结合。
实施例 7
在基线时和在用IDO1抑制剂治疗后在表达IDO1的异种移植小鼠模型中用[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺体内PET 成像
在基线时和在用IDO1抑制剂(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺治疗后，在M109小鼠肿瘤模型内测试[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺。M109肿瘤模型由鼠肺癌细胞系产生并表达高水平的IDO1。通过在BALB/c小鼠的右肩上皮下植入1×106个M109细胞来产生异种移植肿瘤模型。植入后，在研究开始前让肿瘤生长5天。将植入M109异种移植物的16只小鼠分成4组。在第1组中，4只动物接受6 mg/kg (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=12)，在第2组中，4只动物接受60 mg/kg (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=12)，在第3组中，4只动物接受150 mg/kg (R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(n=11)并且在第4组中，4只动物接受盐水媒介物(n = 10)。基于已知的药理学作用建立给药和治疗，并且每天一次PO施用治疗4或5天。所有小鼠都进行了2次单独的PET扫描。第一次是治疗开始前的基线PET扫描，第二次是使用IDO1抑制剂或媒介物进行的治疗后扫描。每天一次PO施用治疗，持续5天，在治疗后PET扫描前2小时施用最后一剂。将150 µCi的乙醇在含有[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的注射用无菌盐水中的10%溶液在PET成像前1小时i.v.注射，以允许示踪剂在肿瘤中分布和摄取。通过从注射前注射器中的总测量剂量中减去注射后注射器中残留物的衰变校正活性来计算精确注射剂量。对于PET成像，将小鼠用异氟烷麻醉并置于具有4只动物容量的定制动物保持器中。用加热垫维持体温，并在成像期间用1.5％异氟烷维持麻醉。PET成像在专用的microPET® F120TM扫描仪和F220TM 扫描仪(Siemens Preclinical Solutions, Knoxville, TN)上进行。使用57Co源进行10分钟透射扫描以用于最终PET图像的衰减校正，然后进行10分钟静态发射扫描。在PET成像之前或之后，在图像分析期间进行CT扫描(X-SPECT，Gamma Medica)或MRI扫描(Bruker)用于解剖定位。使用最大后验(MAP)算法重建PET图像，使用收集的透射图像进行衰减校正。使用图像分析软件AMIDE进行图像分析。PET图像与其相应的CT或MRI图像共同登记，并且使用CT或MRI图像作为解剖学指导手动地在肿瘤边界和肌肉周围绘制感兴趣的区域(ROI)。从ROI体积和衰减校正至发射扫描起始的计算注射活性获得结果量度百分比注射剂量/g组织(％ID/g)。将来自(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺治疗组的肿瘤中的示踪剂摄取与媒介物组和肌肉组织的示踪剂摄取进行比较。肌肉组织用作参考区域以评估非特异性结合，因为该组织中的IDO1表达很小。在任何组之间在M109肿瘤中在基线时的示踪剂摄取没有差异。如图3所示，与媒介物组相比，在(R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺(6-150 mg/kg)治疗组中观察到示踪剂摄取的剂量依赖性降低。在媒介物组中示踪剂摄取在基线和治疗后成像之间没有变化。肌肉参比组织中的示踪剂摄取不受治疗影响，并且对于任何组，基线和治疗后之间没有差异。结合起来，这些结果证实[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在体内靶向IDO1，以及证明基线治疗后研究设计在临床上用于评估药物暴露/体内靶标占据与治疗药物功效之间的相关性的可行性。
实施例8
在高和低IDO1表达肿瘤模型中的示踪剂摄取比较
为了比较区分IDO1表达水平之间的差异的能力，我们对携带CT26肿瘤的另一种小鼠模型进行了成像。CT26肿瘤模型由鼠结肠直肠癌细胞系产生，并且表达比M109模型低水平的IDO1。通过在BALB/c小鼠的右肩上皮下植入1×106个CT26细胞来产生异种移植肿瘤模型。植入后，在研究开始前让肿瘤生长7天。小鼠在成像前接受媒介物剂量5天，并且完全如实施例6中所述进行给药和成像，以确保M109和CT26研究具有可比性。如图4中所示，与CT26小鼠异种移植肿瘤中的％ID/g相比，在M109小鼠异种移植肿瘤中观察到更高的％ID/g，与IDO1在这些模型中的各自表达水平一致。
实施例9
在非人灵长类动物中的生物分布
在食蟹猴中进行PET成像研究以评估[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺在非人灵长类动物中的生物分布和背景信号。在研究期间，通过0.02mg/kg阿托品和5mg/kg Telazol、0.01mg/kg丁丙诺啡的混合物麻醉雄性食蟹猴(3.5kg)并用1-2％异氟烷维持。使用外部循环水床将体温维持在~37℃，以防止成像过程中的体温过低。给猴子插入喉管并插入隐静脉导管以允许放射性示踪剂注射。将1.2 mCi的10%乙醇/含有[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的注射用无菌盐水i.v.注射，并将猴子置于定制的动物保持器中，所述保持器与MRI 和PET扫描仪(F220TM扫描仪, Siemens Preclinical Solutions, Knoxville, TN) 兼容。将猴子置于MRI扫描仪中进行解剖成像。获得三个高分辨率MRI轴位图像，从头部开始到后腿结束全身覆盖。在MRI之后，将猴子转移到PET扫描仪。PET系统中的轴向视场为7.6cm。由于这种限制，在7个不同的床位置上获得图像以覆盖全身，床之间重叠1.5cm。在发射成像之前，针对每个床位置获取10分钟的透射图像以用于最终PET图像的衰减校正。在收集最终透射图像之后，立即将床返回到位置1，并且在第一次发射扫描开始的同时通过隐静脉导管注射放射性示踪剂。对于发射，获得总共5次全身扫描，使用每个床位置的5分钟发射采集。使用具有衰减校正的MAP算法重建图像。使用内部开发的拼接软件工具将床位置拼接在一起以获得全身图像，并且使用AMIDE软件共同登记PET和MRI图像。目视检查最终图像以记录高示踪剂累积的区域并评估生物分布和背景信号。示踪剂累积在肝脏和胆囊中，与预期的排泄途径一致。没有其他的区域显示出[18F](R)-N-(4-氯苯基)-2-((1S,4S)-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的显著累积并且背景信号极小，如图5中所示。该结果表明在非人灵长类动物中检测到低背景信号，并且在IDO1表达在肿瘤微环境中增加用于人类成像的情况下应当产生高信噪比。

Claims (11)

1.具有下式 I的放射性标记的化合物：
或其药学上可接受的盐。
2.权利要求1的放射性标记的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
。
3.药物组合物，其包含诊断有效量的权利要求2的放射性标记的化合物以及用于该化合物的药学上可接受的载体。
4.体内成像已知IDO1表达的哺乳动物组织以检测癌细胞的方法，所述方法包括以下步骤：
(a) 给对象施用权利要求2的放射性标记的化合物；和
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)扫描来成像所述放射性标记的化合物的体内分布。
5.用于扫描非放射性标记的化合物以确定其对占据哺乳动物组织中IDO1酶结合位点的亲和力的方法，所述方法包括以下步骤：
(a) 给对象施用权利要求2的放射性标记的化合物；
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)成像已知IDO1表达的体内组织以确定放射性标记的化合物的基线摄取；
(c) 给所述对象施用非放射性标记的化合物；
(d) 给所述对象施用第二剂量的权利要求2的放射性标记的化合物；
(e) 成像权利要求2的放射性标记的化合物在表达IDO1酶的组织中的体内分布；
(f) 将来自在表达IDO1的组织内的基线PET扫描数据的信号与施用非放射性标记的化合物后在表达IDO1酶的组织内复取的PET扫描数据的信号进行比较。
6.用于监测正在用IDO1抑制剂治疗的癌症患者的治疗的方法，所述方法包括以下步骤：
(a) 给患者施用权利要求2的放射性标记的化合物；
(b) 通过正电子发射型断层摄影术(PET)获得表达IDO1酶的患者组织的图像；和
(c) 检测所述放射性标记的IDO1抑制剂占据IDO1酶的结合位点的程度。
7.用于组织成像的方法，所述方法包括以下步骤：使含有IDO1酶的组织与权利要求2的放射性标记的化合物接触并使用正电子发射型断层摄影术(PET)成像检测所述放射性标记的化合物。
8.权利要求7的方法，其中所述化合物在体外检测。
9.权利要求7的方法，其中所述化合物在体内检测。
10.用于诊断对象中的疾病存在的方法，所述方法包括
(a) 给需要诊断的对象施用权利要求2的放射性标记的化合物，该化合物与疾病存在相关的IDO1酶结合；和
(b) 获得对象的至少一部分的放射性图像以检测放射性标记的化合物的存在或不存在；其中高于背景的放射性标记的化合物的存在和位置指示疾病的存在或不存在。
11.用于量化对象中的患病细胞或组织的方法，所述方法包括
(a) 给具有患病细胞或组织的对象施用权利要求2的放射性标记的化合物，该化合物与位于患病细胞或组织内的IDO1酶结合；和
(b) 检测患病细胞或组织中的放射性标记的化合物的放射性发射，其中患病细胞或组织中的放射性发射的水平和分布是患病细胞或组织的定量量度。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111417626A (zh) * 2017-12-05 2020-07-14 葛兰素史克知识产权开发有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的调节剂
CN111655264A (zh) * 2017-06-30 2020-09-11 百时美施贵宝公司 经取代的喹啉基环己基丙酰胺化合物和改进的其制备方法
WO2021136464A1 (en) * 2020-01-02 2021-07-08 Hutchison Medipharma Limited Novel amide compounds and uses thereof

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109843322A (zh) * 2016-08-26 2019-06-04 百时美施贵宝公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂及其使用方法
CN111165024A (zh) 2017-11-21 2020-05-15 Oppo广东移动通信有限公司 传输信息的方法、网络设备和终端设备
CN110357813A (zh) * 2018-04-09 2019-10-22 信达生物制药(苏州)有限公司 一种新型吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101182359A (zh) * 2007-11-09 2008-05-21 中山大学 人吲哚胺2,3-双加氧酶多克隆抗体及其制备方法和应用
WO2016040458A2 (en) * 2014-09-09 2016-03-17 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Pet probes of radiofluorinated carboximidamides for ido-targeted imaging
WO2016073770A1 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2011223883B2 (en) * 2010-03-01 2015-10-08 Cavion, Inc. Cancer diagnosis and imaging

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101182359A (zh) * 2007-11-09 2008-05-21 中山大学 人吲哚胺2,3-双加氧酶多克隆抗体及其制备方法和应用
WO2016040458A2 (en) * 2014-09-09 2016-03-17 H. Lee Moffitt Cancer Center And Research Institute, Inc. Pet probes of radiofluorinated carboximidamides for ido-targeted imaging
WO2016073770A1 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
孔令雷等: "IDO抑制剂的研究进展", 《中国药物化学杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111655264A (zh) * 2017-06-30 2020-09-11 百时美施贵宝公司 经取代的喹啉基环己基丙酰胺化合物和改进的其制备方法
CN111655264B (zh) * 2017-06-30 2023-08-15 百时美施贵宝公司 经取代的喹啉基环己基丙酰胺化合物和改进的其制备方法
CN111417626A (zh) * 2017-12-05 2020-07-14 葛兰素史克知识产权开发有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶的调节剂
WO2021136464A1 (en) * 2020-01-02 2021-07-08 Hutchison Medipharma Limited Novel amide compounds and uses thereof

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