CN109457046A - ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用 - Google Patents

ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109457046A
CN109457046A CN201811623106.1A CN201811623106A CN109457046A CN 109457046 A CN109457046 A CN 109457046A CN 201811623106 A CN201811623106 A CN 201811623106A CN 109457046 A CN109457046 A CN 109457046A
Authority
CN
China
Prior art keywords
detection
powdery mildew
disease
primer
toothed oak
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811623106.1A
Other languages
English (en)
Inventor
刘吉平
王狗旦
孙勋勋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
South China Agricultural University
Original Assignee
South China Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by South China Agricultural University filed Critical South China Agricultural University
Priority to CN201811623106.1A priority Critical patent/CN109457046A/zh
Publication of CN109457046A publication Critical patent/CN109457046A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用，一种柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的rRNA的ITS2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明将Erysiphe alphitoides的核糖体RNA的ITS2基因应用于Erysiphe alphitoides菌的检测中，并根据其序列提供了一组检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides的特异性检测引物，该引物的特异性强，灵敏度高；并基于该引物，建立了特异性检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides的检测方法和检测试剂盒，在检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides中具有良好的应用前景。

Description

ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用
技术领域
本发明涉及植物病原检测技术领域，更具体地，涉及一种ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用。
背景技术
柞树是对壳斗科栎属植物的一种通称，我国柞林资源丰富，具有很好的经济价值。柞树其叶可以用于饲养柞蚕；木材坚固抗腐性强，在建筑上有广泛用处，还可加工制作家具，烧制木炭；橡实含淀粉较多，可用来制作橡酒、酒精、淀粉、橡油等，也可做饲料；从柞树树皮、叶片、壳斗、橡实中提取的单宁，是制革工业、印染工业和渔业上所必须的材料；栓皮的皮层较厚可作工业上的软木材料；柞木还可培养木耳、香菇和密环菌等多种食用菌。
柞树白粉病是柞树上的一个重要病害，欧洲、亚洲、美洲均有发生，我国北起吉林，南到四川有柞林的省份亦有此病发生。柞树白粉病发生时，白粉病菌侵染柞叶后，吸收叶内营养物质并使叶绿素含量下降，光合作用减弱，生理机能失常；进而使叶片外形变态，局部或全部萎缩、硬化，逐渐变为黄褐色或赤褐色半枯萎状态，早期脱落；被害柞树发育不良，易受冻害，可使幼树叶片卷曲枯焦，枝条扭曲变形、枯死，给柞树天然林的后备林分资源造成毁灭性损失。7月上旬至9月中旬是柞树白粉病的发病期，发病初期，多数在幼龄柞树的嫩叶两面散生点状白粉斑，有时在新生嫩枝上有类似症状发生白粉层逐渐增多并扩大连片，以至布满整个叶面，即病原菌的菌丝体和分生孢子；发病后期(8月下旬至9月中旬)，在白粉层中出现乳白色、黄白色、黄褐色至黑色小颗粒，是病菌的闭囊壳，多密聚群生。柞树白粉病严重的影响柞树的生长发育。
多年来对于白粉病的病原菌一直尚未有定论，直到最近发现Erysiphealphitoides是引起柞树白粉病的病原。
因此，亟需建立一种针对Erysiphe alphitoides引起的柞树白粉病病原检测和鉴定的方法。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种rRNA的ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用。
本发明的第一个目的是提供一种柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的rR NA的ITS2基因。
本发明的第二个目的是提供一对检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的引物。
本发明的第三个目的是提供所述ITS2基因或任一所述引物在检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides或制备检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒中的应用。
本发明的第四个目的是提供一种检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒
本发明的第五个目的是提供任一所述的试剂盒在检测柞树白粉病病原Erysi phealphitoides中的应用。
本发明的第六个目的是提供一种检测检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的方法。
为了实现上述目的，本发明是通过以下技术方案予以实现的：
本发明要求保护一种柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的rRNA的ITS2基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
一对检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的引物，为所述ITS2基因的引物。
优选地，所述引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示。
SEQ ID NO:2：CCCCCTCCAGTTACCTTTGT；
SEQ ID NO:3：GACTGGAGCAAGTGGGTTGT。
所述ITS2基因或任一所述引物在检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides或制备检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒中的应用，也属于本法名的保护范围。
进一步本发明要求保护一种检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒，含有所述ITS2基因的检测引物。
优选地，所述检测引物为所述引物。
优选地，还含有PCR试剂。
最优选地，一种白粉病病原Erysiphe alphitoides检测试剂盒，
组成：核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示引物，2×Taq Master Mix，ddH2O；
使用方法如下
(1)提取使用鼎国真菌DNA提取试剂盒提取待测样本DNA；
(2)以上一步提取的DNA作为模板使用核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示引物，进行PCR扩增，
PCR扩增反应体系为：2×Taq Master Mix 10μL，引物(10μM)各0.5μL，模板DNA 1μL，ddH2O补足至20μL。
PCR扩增反应的条件为：94℃5min；94℃30s，58℃30s，72℃2min，32个循环；72℃5min。
(3)PCR扩增反应产物的检测
PCR反应结束后，取5μLPCR扩增产物用1.2％的琼脂糖凝胶(EB染色)进行电泳检测，通过琼脂糖凝胶电泳，观察扩增片段的大小，
有162bp左右的扩增片段则说明待测样本含有柞树白粉病病原菌Erysiphealphitoides，否则没有柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides。
以上任一所述的试剂盒在检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用。
一种检测检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的方法，根据所述基因设计引物，进行PCR检测。
优选地，所述引物为核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示引物。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明将Erysiphe alphitoides的核糖体RNA的ITS2基因应用于Erysiphealphitoides菌的检测中，并根据其序列提供了一组检测柞树白粉病病原菌Erysiphealphitoides的特异性检测引物，该引物的特异性强，灵敏度高；并基于该引物，建立了特异性检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides的检测方法和检测试剂盒，在检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides中具有良好的应用前景。
附图说明
图1为检测特异性电泳图；M：Takara DL1000Marker；泳道1：Candida mucifera(假丝酵母)；泳道2：Cladosporium cladosporioides(支孢样支孢霉)；泳道3：Cladosporiumperangustum(细孢枝孢)；泳道4：Cladosporium oxysporum(尖孢枝孢菌)；泳道5：Nigrospora spharic(黑孢子菌)；泳道6：铰Altemaria(链菌)；泳道7：Aspergillus(曲霉)；泳道8：Phanerochaete chrysosporium(黄孢原毛平革菌)；泳道9：Cladosporiumcladosporioides(芽枝状枝孢霉)；泳道10：Beauveria bassiana(球孢白僵菌)；泳道11：Schizophyllum commune(裂褶菌)；泳道12：柞树白粉病子实体DNA；泳道13：柞树白粉病病斑DNA；泳道14：阴性对照(健康柞树DNA)；泳道15.空白对照(水)。
图2为检测灵敏度电泳图；M：500bp的Mark，泳道1：2.5ng/μl；泳道2：2.5×10-1ng/μl；泳道3：2.5×10-2ng/μl；泳道4：2.5×10-3ng/μl；泳道5：2.5×10-4ng/μl；泳道6：2.5×10- 5ng/μl；泳道7：.5×10-6ng/μl；泳道8：2.5×10-7ng/μl；泳道9：空白对照(水)。
具体实施方式
下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1白粉病病原Erysiphe alphitoides rRNA的ITS2基因的获得
1、实验方法
(1)高通量测序
在发病的柞树园随机寻找到的具有典型白粉病病斑的叶片，收集，剪取柞树叶中的病斑区域，剪下病斑材料并使用液氮充分研磨，总DNA的提取使用鼎国真菌DNA提取试剂盒，具体按照其操作说明进行，提取后的总DNA保存于-20℃；依照Illumina文库构建流程，将总DNA构建为片段大小500bp的双末端高通量测序文库；使用Illumina Hiseq2500测序仪对构建好的DNA文库进行高通量测序，共测得11.17M对测序片段，测序读长为双末端125bp，总测序数据量1.67Gb。
(2)组装微生物基因组序列
微生物序列的组装使用MetaVelvet(v1.2.01)组装软件进行。MetaVelvet(v1.2.01)初始组装的序列标签为断裂的核糖体标签，为得到完整的核糖体DNA序列，分析采用序列捕获和从头组装策略，以组装完整的核糖体DNA。选择包含目标病原菌ITS序列的核糖体DNA序列为参考序列，采用bwa(0.7.12-r1039)软件进行无错配0mismatch和无断裂0gap比对，根据比对结果从测序数据中获取双末端测序片段，进一步采用MetaVelvet(v1.2.01)组装软件对序列进行组装和延伸，经多个循环操作，获取完整的核糖体DNA序列。
序列标签注释使用blastn(2.2.31+)序列比对分析软件，组装的序列标签序列与NCBI的nt数据库进行比对，blastn比对设定期望值<1e-20，根据比对结果对序列标签进行注释。核糖体DNA序列是细菌和真菌鉴定的重要的最常用的分子标记，因此物种分类鉴定和定量以核糖体DNA为主要分子标记。根据序列标签注释结果，选择核糖体DNA序列作为微生物鉴定与定量分析依据。使用bwa(0.7.12-r1039)+samtools(v1.2)分析软件，计算测序数据中核糖体DNA片段的平均测序深度，并以此作为该物种的相对丰度值。
(3)组装完整核糖体DNA序列
MetaVelvet(v1.2.01)初始组装的序列标签为断裂的核糖体标签，为得到完整的核糖体DNA序列，分析采用序列捕获和从头组装策略，以组装完整的核糖体DNA。
(4)对比分析核糖体DNA序列
选择包含目标病原菌ITS序列的核糖体DNA序列为参考序列，采用bwa(0.7.12-r1039)软件进行无错配0mismatch和无断裂0gap比对，根据比对结果从测序数据中获取双末端测序片段，进一步采用MetaVelvet(v1.2.01)组装软件对序列进行组装和延伸，经多个循环操作，获取完整的核糖体DNA序列。
2、实验结果
本发明得到的柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides完整的核糖体RNA基因的，其中，ITS2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
实施例2一种白粉病病原Erysiphe alphitoides检测方法
一、实验方法
(1)样品采集
收集待测样本(选取在发病的柞树园随机寻找到的具有典型白粉病病斑的叶片作为阳性样品)，剪取柞树叶中的病斑区域。
(2)DNA的提取
剪下病斑材料并使用液氮充分研磨，总DNA的提取使用鼎国真菌DNA提取试剂盒，具体按照其操作说明进行，提取后的总DNA保存于-20℃。
(3)引物设计
根据是实施例中获得的柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides完整的核糖体RNA的ITS2基因的序列(其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示)，设计引物。
(4)PCR检测
通过根据扩增效率，扩增特异性，检测的灵敏度等方面的综合分析筛选出检测效果最好的引物用于白粉病病原Erysiphe alphitoides的检测，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示。
上游引物：CCCCCTCCAGTTACCTTTGT(SEQ ID NO:2)；
下游引物：GACTGGAGCAAGTGGGTTGT(SEQ ID NO:3)。
其中，PCR扩增反应体系如表1所示
表1 PCR扩增反应体系(20μL)：
PCR扩增反应的条件为：94℃5 min；94℃30 s，58℃30 s，72℃2min，32个循环；72℃5 min。
PCR反应结束后，取5μLPCR扩增产物用1.2％的琼脂糖凝胶(EB染色)进行电泳检测，通过琼脂糖凝胶电泳，回收大小对应的PCR产物片段。
将回收的片段进行Sanger测序，然后将测序结果与柞树白粉病病原菌Erysiphealphitoides的核糖体RNA的ITS2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1进行比对，由此确定叶片上是否有柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides，并可由此推测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides是否是致病菌。
二、实验结果
使用核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示对阳性样品进行PCR扩增检测，可以获得162 bp的扩增产物。经过Sanger测序，其序列与SEQ ID NO.1所述序列完全比对，可以用于检测柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides。
实施例3一种白粉病病原Erysiphe alphitoides检测试剂盒
一、组成
核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示引物，2×Taq Master Mix，ddH2O。
二、使用方法
(1)提取使用鼎国真菌DNA提取试剂盒提取待测样本DNA；
(2)以上一步提取的DNA作为模板使用核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示引物，进行PCR扩增，
PCR扩增反应体系为：2×Taq Master Mix 10μL，引物(10μM)各0.5μL，模板DNA 1μL，ddH2O补足至20μL。
PCR扩增反应的条件为：94℃5min；94℃30s，58℃30s，72℃2min，32个循环；72℃5min。
(3)PCR扩增反应产物的检测
PCR反应结束后，取5μLPCR扩增产物用1.2％的琼脂糖凝胶(EB染色)进行电泳检测，通过琼脂糖凝胶电泳，观察扩增片段的大小，
有162bp左右的扩增片段则说明待测样本含有柞树白粉病病原菌Erysiphealphitoides，否则没有柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides。
实施例4特异性检测
利用此方法检测其他病原菌，以检测本检测方法的特异性。
一、实验方法
使用实施例3的试剂盒对Candida mucifera(假丝酵母)、Cladosporiumcladosporioides(支孢样支孢霉)、Cladosporium perangustum(细孢枝孢)、Cladosporiumoxysporum(尖孢枝孢菌)、Nigrospora spharic(黑孢子菌)、铰Altemaria(链菌)、Aspergillus(曲霉)、Phanerochaete chrysosporium(黄孢原毛平革菌)、Cladosporiumcladosporioides(芽枝状枝孢霉)、Beauveria bassiana(球孢白僵菌)、Schizophyllumcommune(裂褶菌)、柞树白粉病子实体DNA进行检测。以上所有样本均为本发明实验室分离培养的真菌，且按照国际物种条形码进行了物种鉴定。
二、实验结果
结果如图1所示，只有柞树白粉病病原菌的病斑和病原子实体模板DNA扩增出目标片段，大小约为162bp，从图中看，其它菌没有相似大小的片段，且柞树白粉病病原菌所扩增的目标片段较亮，说明本检测方法特异性好。
实施例5灵敏度检测
利用此方法检测不同浓度的样本，以检测本检测方法的灵敏度。
一、实验方法
将柞树白粉病子实体DNA稀释至2.5ng/μl、2.5×10-1ng/μl、2.5×10-2ng/μl、2.5×10-3ng/μl、2.5×10-4ng/μl、2.5×10-5ng/μl、2.5×10-6ng/μl和2.5×10-7ng/μl，使用实施例3的试剂盒对其进行检测，并以谁作为空白对照。
二、实验结果
结果如图2所示，本检测方法的灵敏度可达2.5×10-3ng/μl，检测灵敏度高。
SEQ ID NO:1
GGCATGCCTGTTCGAGCGTCATAACACCCCCTCCAGTTACCTTTGTGTGGCTGCGGTGTTGGGGCTCGTCGTGATACGGCGGCCCTTAAAGACAGTGGCGGTCCCGGCGTGGGCTCTACGCGTAGTAACTTGCTTCTCGCGACAGAGTGACGACGGCGGCTTGCCAGAACAACCCACTTGCTCCAGTCACATGGATCACAGGSEQ ID NO:2：
CCCCCTCCAGTTACCTTTGT；
SEQ ID NO:3：
GACTGGAGCAAGTGGGTTGT。
序列表
<110> 华南农业大学
<120> ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 202
<212> DNA
<213> Erysiphe alphitoides
<400> 1
ggcatgcctg ttcgagcgtc ataacacccc ctccagttac ctttgtgtgg ctgcggtgtt 60
ggggctcgtc gtgatacggc ggcccttaaa gacagtggcg gtcccggcgt gggctctacg 120
cgtagtaact tgcttctcgc gacagagtga cgacggcggc ttgccagaac aacccacttg 180
ctccagtcac atggatcaca gg 202
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ccccctccag ttacctttgt 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
gactggagca agtgggttgt 20

Claims (10)

1.一种柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides 的rRNA的ITS2基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一对检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的引物，其特征在于，为权利要1所述ITS2基因的引物。
3.根据权利要求1所述的引物，其特征在于，所述引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:2～3所示。
4.权利要求1所述ITS2基因或权利要2～3任一所述引物在检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides或制备检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒中的应用。
5.一种检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述ITS2基因的检测引物。
6.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述检测引物为权利要求2所述引物。
7.根据权利要求5或6所述的试剂盒，其特征在于，还含有PCR试剂。
8.权利要求5到7任一所述的试剂盒在检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用。
9.一种检测检测柞树白粉病病原Erysiphe alphitoides的方法，其特征在于，根据权利要求1所述基因设计引物，进行PCR检测。
10.根据权利要求9所述方法，其特征在于，所述引物为权利要求2所述引物。
CN201811623106.1A 2018-12-28 2018-12-28 ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用 Pending CN109457046A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811623106.1A CN109457046A (zh) 2018-12-28 2018-12-28 ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811623106.1A CN109457046A (zh) 2018-12-28 2018-12-28 ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109457046A true CN109457046A (zh) 2019-03-12

Family

ID=65615441

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811623106.1A Pending CN109457046A (zh) 2018-12-28 2018-12-28 ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109457046A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110607380A (zh) * 2019-09-27 2019-12-24 华南农业大学 桑树植原体ltrA基因及其在桑树植原体分子检测中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106868116A (zh) * 2017-01-24 2017-06-20 华南农业大学 一种桑树病原菌高通量鉴定及种属分类方法及其应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106868116A (zh) * 2017-01-24 2017-06-20 华南农业大学 一种桑树病原菌高通量鉴定及种属分类方法及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SUSUMU TAKAMATSU等: "Phylogeny and taxonomy of the oak powdery mildew Erysiphe alphitoides sensu lato", 《MYCOLOGICAL RESEARCH》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110607380A (zh) * 2019-09-27 2019-12-24 华南农业大学 桑树植原体ltrA基因及其在桑树植原体分子检测中的应用
CN110607380B (zh) * 2019-09-27 2021-07-09 华南农业大学 桑树植原体ltrA基因及其在桑树植原体分子检测中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bruez et al. Analyses of the temporal dynamics of fungal communities colonizing the healthy wood tissues of esca leaf-symptomatic and asymptomatic vines
Ro et al. Comparative studies on the diversity of the edible mushroom Pleurotus eryngii: ITS sequence analysis, RAPD fingerprinting, and physiological characteristics
Rantsiou et al. Impact of chemical and alternative fungicides applied to grapevine cv Nebbiolo on microbial ecology and chemical-physical grape characteristics at harvest
CN106636433B (zh) 桑葚病原菌高通量鉴定及种属分类方法及其应用
Cosoveanu et al. Endophytic fungi from grapevine cultivars in Canary Islands and their activity against phytopatogenic fungi
Rathod et al. Griseofulvin producing endophytic Nigrospora oryzae from Indian Emblica officinalis Gaertn: a new report
Alam et al. Phylogenetic relationship in different commercial strains of Pleurotus nebrodensis based on ITS sequence and RAPD
Abass Identification of different fungal fruit rot pathogens of date palm (Phoenix dactylifera L.) using ITS and RAPD markers
CN107164471B (zh) 一种快速鉴别中药材僵蚕中白僵菌真伪的分子鉴定方法
Zhang et al. Draft genome sequence of Phoma arachidicola Wb2 causing peanut web blotch in China
White et al. Molecular analysis of intraspecific variation between building and ‘wild’isolates of Serpula lacrymans and their relatedness to S. himantioides
Tomé et al. Proteomic fingerprinting for the fast and accurate identification of species in the Polyporoid and Hymenochaetoid fungi clades
CN109457046A (zh) ITS2基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用
Mgbeahuruike et al. Differential expression of two hydrophobin genes (Pgh1 and Pgh2) from the biological control agent Phlebiopsis gigantea
Chakraborty et al. RAPD profile and rDNA sequence analysis of Talaromyces flavus and Trichoderma species
CN109504688A (zh) ITS1基因在检测白粉病病原Erysiphe alphitoides中的应用
Siddiquee et al. Characterization of Malaysian Trichoderma isolates using random amplified microsatellites (RAMS)
CN112779274B (zh) 桑树膏药病病原菌的核糖体rna基因及其应用
CN109486836B (zh) 柞树白粉病病原菌Erysiphe alphitoides核糖体RNA基因及应用
CN113151521B (zh) 桑树赤锈病病原菌Puccinia sp.的核糖体RNA基因及其应用
Kashangura Optimisation of the growth conditions and genetic characterisation of Pleurotus species
Savino et al. Medicinal mushrooms in Italy and their ex situ conservation through culture collection.
Tam Identification powdery mildew Erysiphe quercicola damaging on Mango in Hanoi, Vietnam
Yamashita et al. Phylogenetic analysis of Ganoderma australe complex in a Bornean tropical rainforest and implications for mechanism of coexistence of various phylogenetic types
CN105087802B (zh) 鉴定番茄抗晚疫病性状的方法及其所用分子标记和引物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190312