CN109430022A - 冰叶日中花水培种植方法及led光质配比的测定方法 - Google Patents

冰叶日中花水培种植方法及led光质配比的测定方法 Download PDF

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杨爱红
余发新
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Abstract

本发明属于植物工厂水培及无土栽培技术领域，公开了一种冰叶日中花水培种植方法及LED光质配比的测定方法，即红光：蓝光：紫外光＝20:5:1；安装3根灯管，光照强度为300μmol/(m2·s)，周期为14h/d，室内温度为20‑22℃。实验进行3次重复，每次重复设置7种光质，红光、蓝光、红光：蓝光＝4:1、红光：蓝光＝8:1、红光：蓝光：绿光＝4:1:1，红光：蓝光：紫外光＝20:5:1、白光对照；其中红光的波长为(660±10)nm、蓝光的波长为(450±10)nm、绿光的波长为(520±10)nm、紫外光的波长为(300±10)nm。对照选用18W白色荧光灯作为光源。

Description

冰叶日中花水培种植方法及LED光质配比的测定方法
技术领域
本发明属于水培及无土栽培技术领域，尤其涉及一种冰叶日中花水培种植 方法及LED光质配比的测定方法。
背景技术
目前，业内常用的现有技术是这样的：光照是植物生长和发育的基本要素 之一，对于作物的生产和品质形成具有显著影响，发光二极管 (light-emittingdiode,简称LED)是新型半导体光源，具有能发单色光、体积小、 发热少、寿命长、能效高等优点，现已成为研究光照对植物生长发育影响的理 想工具，目前LED光源在设施园艺研究和生产应用中发挥着重要作用。发光 二极管能够发出植物所需要的单色光，并且可以按照不同植物的需要将单色光 自由组合利用，提高植物对光能的利用效率。据报道，设施栽培中通过调节LED 光质和光强可以有效地提高生菜、黄瓜、芽苗菜等蔬菜的光合效率，促进蔬菜 生长，提高蔬菜品质。有关LED光照对冰叶日中花(也叫冰菜)生长发育的 影响研究还少有报道。冰叶日中花原产于非洲，最近几年开始在中国流行，但 相关研究还刚刚起步，研究的人还比较少，并且LED及植物工厂技术都是最 新发展起来的技术，因此研究较少，特别是LED对冰叶日中花的影响研究更 少冰叶日中花作为一种新型稀缺特色营养保健蔬菜，具有较高的营养价值和经 济价值。冰叶日中花是一类盐碱植物，可在海岸处生长，泡状细胞的液体中含 有盐分，因此吃起来本身就带有一些咸味。在欧洲一些地方作为蔬菜吃，现在 也传入国内。冰菜富含氨基酸、抗酸化物质等机能性高的物质。冰菜中的酸味 是天然的苹果的酸味，并且富含钠、钾、胡萝卜素等矿物质，凝聚了卷心菜、 白菜、莴苣等的特性之一，是高营养价值的蔬菜。
综上所述，现有技术存在的问题是：有关LED光照对冰菜生长发育的影 响研究还少有报道，冰菜的LED种植技术尚需探索。
解决上述技术问题的难度和意义：技术难度：用于测定不同光质配比对冰 菜生长及营养品质影响衡量指标的确定和测量，以及不同营养成分的测定和分 析；意义：对于生产上冰菜的植物工厂高品质种植以及普通种植中补光处理增 强冰菜的品质具有重要参考意义。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种冰叶日中花水培种植方法及 LED光质配比的测定方法
本发明是这样实现的，一种冰叶日中花水培种植方法，所述冰叶日中花水 培种植方法包括：红光：蓝光：紫外光＝20:5:1；安装3根灯管，光周期为14h/d， 室内温度为20-22℃。
本发明的另一目的在于提供一种冰叶日中花水培种植方法，其特征在于， 所述冰叶日中花水培种植方法使用育苗海绵进行育苗，将海绵用水湿透，种子 直接播种在育苗海绵里，避光处理2天，种子萌发，之后给予光照，当幼苗长 至两叶一心时，选择长势一致的幼苗进行水培试验；营养液使用Hogland营养 液，立体栽培，水培架分为3层，1层可种冰菜36棵，每层设置一种光源；从 移栽后15天开始，每隔10天测一次生长指标，包括茎高，叶对数，叶片长， 叶片宽，冠幅长和冠幅宽，连续测量4次，将植株收集并测量每株的鲜重和地 上种，并计算根冠比；将所收集的材料在实验室进行Vc、叶绿素a、b，总蛋 白和总糖成分的测量，每层取6个样品进行测定，取平均值，每种灯光3个重 复。
本发明的另一目的在于提供一种所述冰叶日中花水培种植的LED光质的 测定方法，所述冰叶日中花水培种植的LED光质的测定方法包括以下步骤：
步骤一，实验进行3次重复，每次重复设置7种光质，红光、蓝光、红光： 蓝光＝4:1、红光：蓝光＝8:1、红光：蓝光：绿光＝4:1:1，红光：蓝光：紫外光 ＝20:5:1、白光对照；
步骤二，对照选用18W白色荧光灯作为光源；
步骤三，每种处理的顶部安装3根灯管，光周期为14h/d，室内温度为 20-22℃。
进一步，所述Vc测定方法包括：
(1)样本前处理，取组织块0.2g—0.5g最少可到5—10mg在冰冷的PBS 中漂洗，滤纸拭干，称重，放入5ml的匀浆管中；
(2)按重量g：体积ml＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中， 冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块；
(3)匀浆的方式：手工匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物 的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次，充分研碎，制 成20％的匀浆液。
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分， 离心10-15分钟，取上清液进行测定；
(5)上清液制备：取样品0.15ml加试剂一应用液0.45ml，旋涡混匀，放 置15分钟后离心，3500—4000转/分，离心10分钟，上层清亮液体为上清液。
进一步，所述上清液中VC的测定：37℃水浴30分钟充分混匀，静置10 分钟，波长536nm，光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值；
计算公式：
VC含量(微克/毫升)＝(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值-空白OD值)* 标准品浓度(6微克/毫升)*样本前处理稀释倍数(4倍)*4。
进一步，所述叶绿素测定方法包括：
(1)取新鲜植物叶片，对于植物叶片去掉中脉，称取0.1g剪碎，蒸馏水 清洗干净；
(2)将无水乙醇和丙酮按照1:2v:v比例充分混匀为提取液待用将处理样 本中加入1ml蒸馏水，粉剂50mg，在避光条件下充分研磨后置于10ml玻璃试 管内；
(3)用提取液冲洗研钵，将洗液转移至玻璃试管，提取液定容至10ml， 在避光条件下浸提约3h，直到观察到底部残渣变白下提取完全，若不能避光则 使用锡箔纸置于玻璃试管上遮蔽光线；
(4)浸提液提取1ml与1ml玻璃比色皿，提取液调零，分别测定663和 645nm处吸光度，分别为A663和A645；
计算公式：
叶绿素a含量(mg/g鲜重)＝(12.7×A663－2.69×A645)×V提(10ml)×稀 释倍数÷m/(g)÷1000；
叶绿素b含量(mg/g鲜重)＝(22.9×A645－4.68×A663)×V提(10ml)×稀 释倍数÷m/(g)÷1000；
总叶绿素含量(mg/g鲜重)＝(20.21×A645+48.02×A663)×V提(10ml)× 稀释倍数÷m/(g)÷1000。
进一步，所述蛋白质测定方法包括：
(1)样本前处理，取组织0.2g—0.5g)最少可到5—10mg在冰冷的PBS 中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中；
(2)按重量g：体积ml＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中， 冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块；
(3)匀浆的方式：手工匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物 的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次，充分研碎，制 成20％的匀浆液；
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分， 离心10-15分钟，取上清液进行测定。
进一步，所述上清液的测定方法包括：混匀，静置10分钟，波长595nm， 光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值；
计算公式：
待测样本蛋白浓度(gprot/L)＝〖(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值 -空白OD值)〗×标准品浓度(0.563g/L)×样本测定前稀释倍数。
进一步，所述植物可溶性糖测定方法包括：称取待测样品0.1-0.2g，按照 待测样本质量g：蒸馏水ml＝1:10的比例加入蒸馏水，用匀浆器研磨成匀浆液， 倒入又改离心管中，沸水浴10min；盖紧，管盖上扎一小孔，冷却后，4000转 /分钟，常温离心10min，取上清液用蒸馏水10倍稀释，摇匀制备样本上清液 备用；
计算公式：
可溶糖含量(微克/克湿重)＝(测定OD-空白OD)/(标准OD-空白OD)*标准 品浓度(100微克/毫升)÷待测样本鲜重/(10×匀浆用蒸馏水体积ml)×样本测 定前稀释倍数。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明从生长速度及生长量来看， 8:1和20:5:1灯光处理的生长速度最快、生长量最大(图3)，其鲜重及地上重 也最大(图4)。从生长品质来看，无论是Vc含量还是可溶性蛋白及可溶性糖 含量，20:5:1均优于其他光处理(图6)，在总叶绿素含量及叶绿素a和叶绿素 b含量方面，20:5:1也表现出了优越性，只是跟其他处理比，差异不显著(图5)。 白光对照和蓝光处理的植株生长势和生长量最低，其次是全红光处理，可见， 红蓝光质同时存在更有利于冰菜的生长，而综合考虑冰菜的生长量和营养品 质，20:5:1是最适和的灯光配比，可见少量UV-B的加入更有利于冰菜中Vc、 可溶性糖及可溶性蛋白含量的提高，提高冰菜的营养品质。此结果对于生产上 冰菜的植物工厂高品质种植以及普通种植中补光处理增强冰菜的品质具有重 要参考意义。
附图说明
图1是本发明实施例提供的冰叶日中花水培种植方法流程图。
图2是本发明实施例提供的冰叶日中花水培种植方法的LED光质配比的 测定方法流程图。
图3是本发明实施例提供的不同光质配比处理下，冰菜不同生长参数的生 长曲线示意图。
图4是本发明实施例提供的不同光质配比处理下，冰菜的称重结果示意图。
图5是本发明实施例提供的不同光质配比处理下，冰菜的叶绿素含量示意 图。
图6是本发明实施例提供的不同光质配比处理下，冰菜的营养品质分析结 果示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例， 对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以 解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的冰叶日中花水培种植方法包括：红光(R)： 蓝光(B)：紫外光(UV-B)＝20:5:1；安装3根灯管，光周期为14h/d，室内温 度为20-22℃。
S101：使用育苗海绵进行育苗，将海绵用水湿透，种子直接播种在育苗海 绵里，避光处理2天，种子萌发，之后给予光照，当幼苗长至两叶一心时，选 择长势一致的幼苗进行水培试验；营养液使用Hogland营养液；
S102：立体栽培，水培架分为3层，1层可种冰菜36棵，每层设置一种光 源；从移栽后15天开始，每隔10天测一次生长指标，包括茎高，叶对数，叶 片长，叶片宽，冠幅长和冠幅宽，连续测量4次；
S103：将植株收集并测量每株的鲜重和地上种，并计算根冠比；将所收集 的材料在实验室进行Vc、叶绿素a、b，总蛋白和总糖成分的测量，每层取6 个样品进行测定，取平均值，每种灯光3个重复。
如图2所示，本发明实施例提供的冰叶日中花水培种植方法的LED光质 配比的测定方法包括以下步骤：
S201，实验进行3次重复，每次重复设置7种光质，红光(R)、蓝光(B)、 红光(R)：蓝光(B)＝＝4:1、红光(R)：蓝光(B)＝8:1、红光(R)：蓝光(B)：绿光(G) ＝4:1:1，红光(R)：蓝光(B)：紫外光(UV-B)＝20:5:1、白光对照；
S202，对照(CK)选用18W白色荧光灯(欧普)作为光源；
S203，每种处理的顶部安装3根灯管，光周期为14h/d，室内温度为20-22℃。
下面结合实验对本发明的应用效果做详细的描述。
实验材料，供试冰叶日中花种子为日本武藏野杂交种，购自重庆姜毅种子 销售有限公司。供试LED灯管由中节能晶和照明有限公司提供，每根灯管功 率为9W。以冰叶日中花为试材，在水培条件下，设置了7种光质，红光、蓝 光、红光：蓝光＝4:1、红光：蓝光＝8:1、红光：蓝光：绿光＝4:1:1(感官上似 白光)和红光：蓝光：紫外光(UV-B)＝20:5:1、白光对照，测定分析了不同光 质对冰叶日中花生长发育及营养品质的影响。
实验方法，实验于2016年3月-2018年2月在江西省科学院植物工厂内进 行，实验进行3次重复，每次重复设置7种光质，红光(R)、蓝光(B)、红光(R)： 蓝光(B)＝＝4:1、红光(R)：蓝光(B)＝8:1、红光(R)：蓝光(B)：绿光(G)＝4:1:1， 红光(R)：蓝光(B)：紫外光(UV-B)＝20:5:1、白光对照，其中红光的波长为 (660±10)nm、蓝光的波长为(450±10)nm、绿光的波长为(520±10)nm、 紫外光的波长为(300±10)nm。对照(CK)选用18W白色荧光灯(欧普)作 为光源。每种处理的顶部安装3根灯管，光周期为14h/d，室内温度为 20-22℃。
1、生长测定
在植物工厂内使用育苗海绵进行育苗，将海绵用水湿透，种子直接播种在 育苗海绵里，避光处理2天，种子萌发，之后给予光照，当幼苗长至两叶一心 时，选择长势一致的幼苗进行水培试验。营养液使用Hogland营养液，立体栽 培，水培架分为3层，1层可种冰菜36棵，每层设置一种光源。从移栽后15 天开始，每隔10天测一次生长指标，包括茎高，叶对数，叶片长，叶片宽， 冠幅长和冠幅宽，连续测量4次(达到最高生长量，之后开始进行生殖生长， 株型越来越小，叶子也越长越小，到60天左右开始开花)，将植株收集并测 量每株的鲜重和地上种，并计算其根冠比。将所收集的材料在实验室进行Vc、 叶绿素a、b，总蛋白和总糖成分的测量，每层取6个样品进行测定，取其平均 值，每种灯光3个重复。
2、VC测定方法
2.1测定原理
本法用Fe3+与还原型抗坏血酸迅速作用生成Fe2+，后者再与啡罗啉显色 反应，可以测定血浆中维生素C的含量。
试剂组成与配制试剂一贮备液
试剂一应用液配制：用时按照试剂一贮备液：双蒸水＝1:14稀释，混匀制 备。
试剂二：粉刺
试剂二应用液配制：用时一支粉刺加0.36ml冰醋酸再加水至40ml，溶解， 4℃保存。
试剂三：白色结晶粉刺
试剂三应用液配制：因较难溶解，用前2-4小时加95％无水乙醇60ml充 分溶解制备，4℃保存。
黄色贮备液0.2ml
试剂四应用液配制：用时取0.15ml试剂四贮备液加水至25ml制备，(现 用现配)。
试剂五：液体6ml
试剂六：VC标准品：粉剂6mg，每瓶内含维生素C
600微克/毫升标准品应用液的配制：将1支标准品粉剂溶于10ml试剂一 应用液中，制备。
6微克/毫升VC标准品应用液的配制：取600毫克/毫升VC标准品应用液 再用试剂一应用液100倍稀释备用，现用现配。
2.2、操作步骤
(1)样本前处理
取组织块(0.2g—0.5g)最少可到5—10mg在冰冷的PBS(PH7.4磷酸盐 缓冲液)中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
(2)按重量(g)：体积(ml)＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀 浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块。
(3)匀浆的方式：手工匀浆
左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入 套管中，上下转动研磨数十次(6-8分钟)，充分研碎，制成20％的匀浆液。
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分， 离心10-15分钟，取上清液进行测定。
(5)上清液制备：取样品0.15ml加试剂一应用液0.45ml，旋涡混匀，放 置15分钟后离心，3500—4000转/分，离心10分钟，上层清亮液体为上清液。
上清液中VC的测定：
充分混匀，37℃水浴30分钟充分混匀，静置10分钟，波长536nm，光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值。
计算公式：
VC含量(微克/毫升)＝(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值-空白OD值)* 标准品浓度(6微克/毫升)*样本前处理稀释倍数(4倍)*4；
3、叶绿素测定方法测定原理
叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm分别具有最大吸收峰，根据叶绿 素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在最大吸收波长测定其吸光度， 从而计算叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量。
仪器设备：可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、10ml玻璃试管、研钵、天 平、锡箔纸、无水乙醇、丙酮和蒸馏水。
试剂、粉剂
操作步骤：
(1)取新鲜植物叶片，对于植物叶片去掉中脉，称取0.1g剪碎，蒸馏水 清洗干净。
(2)将无水乙醇和丙酮按照1:2(v:v)比例充分混匀为提取液待用将步骤 1处理样本中加入1ml蒸馏水，少量粉剂(50mg)，在避光条件下充分研磨后 置于10ml玻璃试管内。
(3)用提取液冲洗研钵，将洗液转移至玻璃试管，提取液定容至10ml， 在避光条件下浸提约3h，直到观察到底部残渣变白下提取完全，若不能避光则 使用锡箔纸置于玻璃试管上遮蔽光线。
(4)浸提液提取1ml与1ml玻璃比色皿，提取液调零，分别测定663和 645nm处吸光度，分别为A663和A645。
计算公式：
叶绿素a含量(mg/g鲜重)＝(12.7×A663－2.69×A645)×V提(10ml)×稀 释倍数÷m/(g)÷1000；
叶绿素b含量(mg/g鲜重)＝(22.9×A645－4.68×A663)×V提(10ml)×稀 释倍数÷m/(g)÷1000；
总叶绿素含量(mg/g鲜重)＝(20.21×A645+48.02×A663)×V提(10ml)× 稀释倍数÷m/(g)÷1000；
4、蛋白质测定方法测定原理
蛋白质分子具有－NH3+基团，当棕红色的考马斯亮蓝显色剂加入蛋白标 准液或样品中时，考马斯亮蓝染料上的阴离子与蛋白－NH3+结合，使溶液变 为蓝色，通过测定吸光度可计算出蛋白含量。
试剂与配制
试剂：考马斯亮蓝贮备液；
考马斯亮蓝显色液的配制：按考马斯亮蓝贮备液:双蒸水＝1:4的比例进行配 制，按需配制，现用现配。
操作步骤：
(1)样本前处理
取组织块(0.2g—0.5g)最少可到5—10mg在冰冷的PBS(PH7.4磷酸盐 缓冲液)中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
(2)按重量(g)：体积(ml)＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀 浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块。
(3)匀浆的方式：手工匀浆
左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入 套管中，上下转动研磨数十次(6-8分钟)，充分研碎，制成20％的匀浆液。
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分， 离心10-15分钟，取上清液进行测定。
操作表：
空白管 标准管 测定管
双蒸水(ml) 0.05
0.563g/L蛋白标准品(ml) 0.05
样品(ml) 0.05
考马斯亮蓝显色液(ml) 3.0 3.0 3.0
混匀，静置10分钟，波长595nm，光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸 光度值。
计算公式：
待测样本蛋白浓度(gprot/L)＝〖(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值 -空白OD值)〗×标准品浓度(0.563g/L)×样本测定前稀释倍数；
5、植物可溶性糖测定方法试剂及配制
5.1、试剂一：粉刺；
试剂二：液体‘’
底物液的配制：在试剂一粉刺中加入5ml试剂二，充分溶解，如较难溶解， 可微热搅拌或摇晃，溶解后待用，配好的底物液4℃避光保存一周。
1mg/ml标准品贮备液0.3ml；标准品稀释液10ml
100微克/毫升标准品应用液的配制：取1mg/ml标准品贮备液0.2ml，加入
1.8ml的标准品稀释液中(即标准品贮备液∶标准品稀释液＝1∶9)，混匀， 制备成100微克/毫升的标准品应用液。浓硫酸
5.2、糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛或羟甲基糖醛，生成的糖 醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的 深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。糖类与蒽酮反应生成的有色物质， 在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色。
5.3、操作步骤
可溶性糖的提取：称取待测样品0.1-0.2g(新鲜植物叶片，擦干表面污物， 剪碎混匀)，按照待测样本质量(g)∶蒸馏水(ml)＝1∶10的比例加入蒸馏水， 用匀浆器研磨成匀浆液，倒入又改离心管中，沸水浴10min(盖紧，管盖上扎一 小孔，以平衡气压和减少水分散失)，冷却后，4000转/分钟，常温离心10min， 取上清液用蒸馏水10倍稀释，摇匀制备样本上清液备用。
操作表
注：正式实验前需先做预实验，若待测样本上清液A值(＝A测定值-A空 白管)大于1，需要将样本用蒸馏水稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。
计算公式：
可溶糖含量(微克/克湿重)＝(测定OD-空白OD)/(标准OD-空白OD)*标准 品浓度(100微克/毫升)÷待测样本鲜重/(10×匀浆用蒸馏水体积ml)×样本测 定前稀释倍数。
6、结果与分析
6.1生长势测定，如图3所示；
6.2生物量测定，如图4所示；
8:1灯光处理的鲜重及地上重最大，但与20:5:1处理的差异不显著(P＝0.306),和其他各处理的差异显著，(P<0.05)；20:5:1处理的鲜重及地上重次之，且与红、 白(对照)、蓝差异显著(P<0.05)，蓝光最低，但与白光差异不显著P>0.05)， 而与其他光处理均显著(P<0.05)根冠比的趋势与鲜重及地上重的基本相反， 对照最高，蓝光次之，两者之间以及两者与其他光处理间差异均显著(P<0.05)， 最低的是红光，且与4:1:1差异不显著(P＝0.245)，与20:5:1边缘显著(P＝0.054)， 与其他灯管处理均差异显著(P<0.05)。
6.3蔬菜品质测定
如图5、所示，叶绿素a、b及总叶绿素含量在不同灯光处理间没有显著性 差异(P>0.05)。
如图6所示，Vc含量可以看出，20:5：1灯光处理显著高于其他处理(P<0.05), 其他各处理间没有显著差异。
如图6所示，蛋白质含量20:5:1灯光处理显著高于全红、4:1、4:1:1及白 光对照(P<0.05)，全蓝光处理的蛋白质含量也比较高，仅次于20:5：1灯光 处理，且两者间差异不显著(P＝0.296),但和全红、4:1及白光对照差异显著 (P<0.05)，而8:1与全红处理的蛋白质含量边缘显著(P＝0.05)，全红处理 的蛋白质含量最低。
如图6所示，可溶性糖含量20:5:1最高，但与全红和全蓝光处理的差异不 显著(P>0.05)，显著高于其他各灯光处理(P<0.05)，其次是全蓝光和全红光处 理，两者之间差异不显著(P＝0.28)，但和其他处理间差异均显著，(P<0.05), 其他四种处理间差异不显著(P>0.05)。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发 明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明 的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述冰叶日中花水培种植方法包括：红光：蓝光：紫外光＝20:5:1光质配比，光照强度为300μmol/(m2·s)，光周期为14h/d，室内温度为20-22℃。
2.如权利要求1所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述冰叶日中花水培种植方法包括：使用育苗海绵进行育苗，将海绵用水湿透，种子直接播种在育苗海绵里，避光处理2天，种子萌发，之后给予光照，当幼苗长至两叶一心时，选择长势一致的幼苗进行水培试验；营养液使用Hogland营养液，立体栽培，水培架分为3层，1层可种冰菜36棵，每层设置一种光源；从移栽后15天开始，每隔10天测一次生长指标，包括茎高，叶对数，叶片长，叶片宽，冠幅长和冠幅宽，连续测量4次，将植株收集并测量每株的鲜重和地上种，并计算根冠比；将所收集的材料在实验室进行Vc、叶绿素a、b，总蛋白和总糖成分的测量，每层取6个样品进行测定，取平均值，每种灯光3个重复。
3.如权利要求2所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述Vc测定方法包括：
(1)样本前处理，取组织块0.2g—0.5g最少可到5—10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，称重，放入5ml的匀浆管中；
(2)按重量g：体积ml＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块；
(3)匀浆的方式：手工匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次，充分研碎，制成20％的匀浆液；
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分，离心10-15分钟，取上清液进行测定；
(5)上清液制备：取样品0.15ml加试剂一应用液0.45ml，旋涡混匀，放置15分钟后离心，3500—4000转/分，离心10分钟，上层清亮液体为上清液。
4.如权利要求3所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述上清液中VC的测定：37℃水浴30分钟充分混匀，静置10分钟，波长536nm，光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值；
计算公式：
VC含量(微克/毫升)＝(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值-空白OD值)*标准品浓度(6微克/毫升)*样本前处理稀释倍数(4倍)*4。
5.如权利要求2所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述叶绿素测定方法包括：
(1)取新鲜植物叶片，对于植物叶片去掉中脉，称取0.1g剪碎，蒸馏水清洗干净；
(2)将无水乙醇和丙酮按照1:2v:v比例充分混匀为提取液待用将处理样本中加入1ml蒸馏水，粉剂50mg，在避光条件下充分研磨后置于10ml玻璃试管内；
(3)用提取液冲洗研钵，将洗液转移至玻璃试管，提取液定容至10ml，在避光条件下浸提3h，直到观察到底部残渣变白下提取完全，若不能避光则使用锡箔纸置于玻璃试管上遮蔽光线；
(4)浸提液提取1ml与1ml玻璃比色皿，提取液调零，分别测定663和645nm处吸光度，分别为A663和A645；
计算公式：
叶绿素a含量(mg/g鲜重)＝(12.7×A663－2.69×A645)×V提(10ml)×稀释倍数÷m/(g)÷1000；
叶绿素b含量(mg/g鲜重)＝(22.9×A645－4.68×A663)×V提(10ml)×稀释倍数÷m/(g)÷1000；
总叶绿素含量(mg/g鲜重)＝(20.21×A645+48.02×A663)×V提(10ml)×稀释倍数÷m/(g)÷1000。
6.如权利要求2所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述蛋白质测定方法包括：
(1)样本前处理，取组织0.2g—0.5g)最少可到5—10mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中；
(2)按重量g：体积ml＝1:4的比例加入4倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块；
(3)匀浆的方式：手工匀浆，左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次，充分研碎，制成20％的匀浆液；
(4)将制备好的20％匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分，离心10-15分钟，取上清液进行测定。
7.如权利要求6所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述上清液的测定方法包括：混匀，静置10分钟，波长595nm，光径1cm，双蒸水调零，测定各管吸光度值；
计算公式：
待测样本蛋白浓度(gprot/L)＝〖(测定OD值-空白OD值)/(标准OD值-空白OD值)〗×标准品浓度(0.563g/L)×样本测定前稀释倍数。
8.如权利要求2所述的冰叶日中花水培种植方法，其特征在于，所述植物可溶性糖测定方法包括：称取待测样品0.1-0.2g，按照待测样本质量g：蒸馏水ml＝1:10的比例加入蒸馏水，用匀浆器研磨成匀浆液，倒入又改离心管中，沸水浴10min；盖紧，管盖上扎一小孔，冷却后，4000转/分钟，常温离心10min，取上清液用蒸馏水10倍稀释，摇匀制备样本上清液备用；
计算公式：
可溶糖含量(微克/克湿重)＝(测定OD-空白OD)/(标准OD-空白OD)*标准品浓度(100微克/毫升)÷待测样本鲜重/(10×匀浆用蒸馏水体积ml)×样本测定前稀释倍数。
9.一种如权利要求1所述冰叶日中花水培种植的LED光质配比的测定方法，其特征在于，所述冰叶日中花水培种植的LED光质配比的测定方法包括以下步骤：
步骤一，实验进行3次重复，每次重复设置7种光质，红光、蓝光、红光：蓝光＝4:1、红光：蓝光＝8:1、红光：蓝光：绿光＝4:1:1，红光：蓝光：紫外光＝20:5:1、白光对照；
步骤二，对不同光质配比处理下的冰菜生长势及生长曲线进行测定；
步骤三，对不同光质配比处理下的冰菜的生物量进行称重；
步骤四，对不同光质配比处理下冰菜的叶绿素a,叶绿素b、总叶绿素含量、维生素C，可溶性蛋白和可溶性糖的含量进行测定。
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