CN109329040A - 一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，属于水产养殖领域。所述方法包括获得浒苔单细胞幼苗，浒苔幼苗接种和日常管理；所述获得浒苔单细胞幼苗：通过酶液酶解浒苔，分离酶解液获得浒苔原生质体，培养浒苔原生质体进一步分裂、分化获得浒苔单细胞幼苗；浒苔单细胞幼苗主枝长超过1cm时即可接种到凡纳滨对虾工厂化养殖水体中。本发明通过合理控制浒苔密度，及浒苔的水下部分体积，使浒苔在养殖池的网箱或塑料筐中正常生长；从而吸收养殖水体中的氨氮，调控水质，同时为养殖的凡纳滨对虾提供部分饵料，节约水源，减少对环境的污染，具有较好的生态效益；与微藻调控相比，浒苔易于调控与收获，不存在二次污染，而且具有较好的经济效益。

Description

一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法
技术领域
本发明属于水产养殖领域。具体地说，是一种利用大型海藻-浒苔降低对虾工厂化养殖池氨氮和亚硝态氮等浓度，减少换水量的生态高效的养殖技术。
背景技术
近年来，对虾工厂化养殖取得了巨大的成功(Ge等,2016)，然而，伴随着对虾养殖业集约化的发展，环境污染问题日益引起人们的关注(Read和Fernandes,2003)。养殖废水中的氨氮，亚硝态氮等无机盐不仅引起环境污染，而且胁迫对虾的生长(Chen和Kou,1992)，甚至直接造成对虾的大量死亡(孙国铭等,2002)。氨氮的控制是对虾工厂化养殖水处理的核心问题(Holl等,2011)。目前，对虾工厂化养殖过程中，降低氨氮的途径主要包括交换部分新水(李玉全等,2007)，微生物净化(Holl等,2011)和藻类净化(Ge等,2016)等。大量交换水，不仅消耗水资源，同时也增加了病原传播的机会。通过微生物将水体中危害较大的氨氮转化为对对虾危害较小的硝酸盐氮，实现了养殖工厂化过程中的零换水或者少量换水。然而，高浓度硝酸盐氮也会影响对虾生长和存活(Furtado等,2015；Kuhn等,2010)，另外，如果硝酸盐氮不能从水体中去除而直接排放，也会污染周围水域。养殖水体中接种微藻也可以降低水体中氨氮等有害废物。但是，浮游微藻个体体积小，很难从水体中分离，衰败也容易造成二次污染。因此，如何降低养殖水体中氨氮等有害废物，控制对虾养殖对周围水域环境的污染，是当前对虾工厂网养殖需要解决的关键问题。
大型海藻生长快速，生物量大，能够快速吸收养殖水体中的N、P等废物，而且具有较高的经济利用价值，可以作为养殖废水的“生物净化器”。对虾工厂化养殖水体温度一般较高(25-32℃)，且光照时间短、光照强度弱、水体浑浊、透明度低。因此，江蓠、石莼等常见大型海藻难以存活。
浒苔是常见的大型海藻，具有适应能力强和生长速度快的特点。自然海区浒苔过度繁殖，便可能造成绿潮灾害，也影响景观。但实际上，浒苔含有多种活性物质和丰富的蛋白质，是一种可食用、可作药用的大型海藻(郑恒睿和李荣贵,2014)。有研究表明，浒苔可以作为水产动物的饵料添加剂或者直接被水产动物摄食。因此，在对虾工厂化养殖水体中混养浒苔，不仅可以净化养殖水体，而且可以增加部分收入。
中国沿海广泛分布的浒苔往往难以耐受超过25℃的水温，而且要求生活水体透明度较高。因此，筛选能够适应对虾工厂化养殖水体环境的大型海藻并使其在养殖池存活是净化水质的关键难题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，本方法通过在凡纳滨对虾工厂化养殖水体中混养浒苔降低养殖水体中氨氮、亚硝态氮等有害废物的含量，利用生态调节手段调节水质，减少养殖换水量，保护环境，从而实现生态高效的凡纳滨对虾工厂化养殖。
本发明是通过如下技术方案来实现的:
一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，包括浒苔幼苗的培养，养殖池浒苔接种和日常管理；
所述浒苔是一种耐高温的浒苔品种，拉丁文名称为Ulva prolifera，其生长的适宜温度为22.5-31.5℃，最适生长温度为22.5-28.5℃；
所述浒苔幼苗的培养：浒苔单细胞幼苗主枝长接近0.1cm时即可分养到1m3大小左右的水槽中进行培养；培养条件为：VSE培养液，温度18-25℃，光强3000-5000lx，光周期为12D:12L；培养过程中为避免浒苔沉淀，向水槽底部充气，确保充气量不低于养殖水体的0.5％；
所述的养殖池浒苔接种：浒苔单细胞幼苗主枝长超过1cm时即可接种到凡纳滨对虾工厂化养殖水体中；浒苔单细胞幼苗接种量800g/m3养殖水体，所述接种量为浒苔质量与水体体积比，浒苔接种于放置在养殖池中的网箱或者塑料框中；
进一步，所述的网箱或者塑料框悬浮于养殖池水体表面。网箱或者塑料框水下部分不超过养殖水深的1/5，网箱或者塑料框水下部分的表面积为养殖水体总面积的35％-45％，网箱或者塑料框网目范围为25-36目。
所述的日常管理主要包括控制光照、调整凡纳滨对虾放养密度及饲养、排污、浒苔的清洗和浒苔的收获；
所述的控制光照为白天光照强度范围为1000-8000lx；
所述的调整凡纳滨对虾放养密度及饲养：凡纳滨对虾后期放养密度为400-600ind/m3，养殖前期和中期凡纳滨对虾放养密度大于500ind/m3；根据凡纳滨对虾大小及摄食情况，增加或者减少饵料投喂量；
所述的排污是指养殖前中期，每天排污量为养殖总水体的3％-5％；养殖后期每天排污量为养殖总水体的10％，排污后加注新水。
所述浒苔的清洗是指每天早晚定时将网箱或者塑料框从养殖水中取出，利用新水冲洗网箱或者塑料框及浒苔中的残饵、粪便等固体颗粒，清洗后将网箱或者塑料框放回养殖池；
所述浒苔的收获是指每3-5d分别称量各网箱或者塑料框中浒苔质量，使浒苔的混养密度维持在700-900g/m3养殖水体；收获的浒苔，直接作为饵料投放到对虾养殖水体中；也可以作为饵料添加剂拌料投喂。
本发明与现有技术相比的有益效果：
本发明与对虾工厂化养殖换水模式相比，节约水源，减少对环境的污染，具有较好的生态效益；与微藻调控相比，浒苔易于调控与收获，不存在二次污染，而且具有较好的经济效益。
具体实施方式：
如无特殊说明，本发明的实施例中所采用的原材料均为本领域常见的原料，实施例中所采用的方法，均为本领域的常规方法。
实施例1
一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，包括浒苔单细胞幼苗的繁育，浒苔幼苗的培养，浒苔接种和日常管理。
所述浒苔是耐高温的浒苔品种，拉丁文名称为Ulva prolifera，其生长的适宜温度为22.5-31.5℃；
所述浒苔单细胞幼苗的培育，主要培育生长均一、不携带有害微生物的浒苔单细胞幼苗。可以选取耐高温、适宜生长温度25-28℃不携带有害微生物的新鲜浒苔，经灭菌海水反复冲洗干净后，在灭菌海水中预培养24-48h，培养条件为：VSE培养液，温度18-25℃，光强3000-5000lx，光周期为12D:12L。然后通过2％CellulaseOnozuk R-10和2％MacrozymeR-10配制的酶液酶解预培养后的浒苔，分离酶解液获得原生质体，原生质体经5-6d培养即可形成单细胞幼苗。原生质体的培养可根据所需要浒苔幼苗的量而选择在500-5000ml的锥形瓶中进行。培养期间，每6h摇动锥形瓶。如不需要接种，可将单细胞幼苗连同培养液置于4℃冰箱内。
所述的浒苔幼苗的培养：浒苔单细胞幼苗主枝长接近0.1cm时即可分养到1m3大小左右的水槽中进行培养。培养条件为：VSE培养液，温度18-25℃，光强50-70umol/(m2.s)，光周期为12D:12L。培养过程中为避免浒苔沉淀，向水槽底部通过气石充气，确保充气量不低于养殖水体的0.5％。单细胞幼苗继续培养至主枝长超过1cm，即可接种。
所述的浒苔接种是指：凡纳滨对虾放养前1-2d，将浒苔单细胞幼苗接种于养殖水体中，接种时应选取健康浒苔单细胞幼苗，接种量为800g/m3(浒苔质量与水体体积比)。为便于浒苔收获和清洗，浒苔接种于网箱中。网箱网目范围为30目。网箱悬浮于养殖水体表面，网箱水下部分为养殖水深的1/5，网箱水下部分表面积应为养殖水体总面积的40％。
所述的日常管理主要包括：养殖车间顶棚透明，白天光照强度范围为1000-8000lx，白天阴雨天气时，加开LED灯，水面光强不低于1000lx。凡纳滨对虾后期放养密度为400-600尾/m3，养殖前期和中期可适当加大对虾放养密度。本实施例的放养密度为700尾/m3。根据对虾摄食情况，合理投喂配合饲料，投喂饲料1h后排污，养殖前期及中期日排污量不超过养殖水体的5％，养殖后期日排污量为养殖水体的10％左右。每天早(06:00)、晚(18:00)定时将网箱从水中取出，利用清水冲洗网箱及浒苔中的残饵、粪便等固体颗粒。清洗后浒苔和网箱放回养殖水体。根据凡纳滨对虾大小及摄食情况，增加或者减少饵料投喂量。每3-5d分别称量各网箱中浒苔质量，使浒苔的混养密度维持在800g/m3左右。收获的浒苔或者其活性物质直接作为饵料投放到对虾养殖水体中；也可以作为饵料添加剂拌料投喂，收获的浒苔也可他用。
青岛卓越海洋集团有限公司凡纳滨对虾工厂化养殖车间进行(2016年9-10月，共35d)。凡纳滨对虾放养密度为500尾/m3，体重为(3.45±0.13)g，浒苔主枝长1.2-1.5cm，接种密度为800g/m3。实验用养殖池为15个PVC桶(r＝0.25m,h＝1.00m)，浒苔接种于网箱(30.0cm×25.0cm×20.0cm)中，网箱悬浮于水面中央，其中，纱网目数为20目。水温为28.5℃，溶解氧不低于5mg/L。按照上述方法操作。实验组日换水量为总水体的5％-10％。以不接种浒苔PVC桶为对照组，对照组放虾密度及规格同实验组，日换水量为总水体的50％。
结果表明，日换水量10％条件下，水体中氨氮浓度可控制在2.47mg/L左右而日换水量50％条件下养殖结束时氨氮浓度达4.20mg/L。日换水量10％条件下，对虾平均末体重达9.73g，生长速度达1.26g/周，成活率达87.56％，饵料系数为1.84，实验组每千克对虾用水量为1032.64L/kg，比对照组节水达78.05％。另外，实验组浒苔累积质量平均达454.94g。

Claims (7)

1.一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述方法包括浒苔幼苗的培养，养殖池浒苔接种和日常管理；
所述浒苔是一种耐高温的浒苔品种，拉丁文名称为Ulva prolifera，其生长的适宜温度为22.5-31.5℃，最适生长温度为22.5-28.5℃；
所述浒苔幼苗的培养：浒苔单细胞幼苗主枝长接近0.1cm时分养到1m3大小左右的水槽中进行培养；培养条件为：VSE培养液，温度18-25℃，光强3000-5000lx，光周期为12D:12L；培养过程中为避免浒苔沉淀，向水槽底部充气，确保充气量不低于养殖水体的0.5％；
所述的养殖池浒苔接种：浒苔单细胞幼苗主枝长超过1cm时即可接种到凡纳滨对虾工厂化养殖水体中；浒苔单细胞幼苗接种量800g/m3养殖水体，所述接种量为浒苔质量与水体体积比，浒苔接种于放置在养殖池中的网箱或者塑料框中；
所述的日常管理主要包括控制光照、调整凡纳滨对虾放养密度及饲养、排污、浒苔的清洗和浒苔的收获。
2.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述的控制光照为白天光照强度范围为1000-8000lx。
3.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述的调整凡纳滨对虾放养密度及饲养：凡纳滨对虾后期放养密度为400-600ind/m3，养殖前期和中期凡纳滨对虾放养密度大于500ind/m3；根据凡纳滨对虾大小及摄食情况，增加或者减少饵料投喂量。
4.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述的排污是指养殖前中期，每天排污量为养殖总水体的3％-5％；养殖后期每天排污量为养殖总水体的10％，排污后加注新水。
5.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述的网箱或者塑料框悬浮于养殖池水体表面；网箱或者塑料框水下部分不超过养殖水深的1/5，网箱或者塑料框水下部分的表面积为养殖水体总面积的35％-45％，网箱或者塑料框网目范围为25-36目。
6.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述浒苔的清洗是指每天早晚定时将网箱或者塑料框从养殖水中取出，利用新水冲洗网箱或者塑料框及浒苔中的包括残饵、粪便在内的固体颗粒，清洗后将网箱或者塑料框放回养殖池。
7.根据权利要求1所述的一种凡纳滨对虾工厂化养殖的氨氮生物转化方法，其特征在于所述浒苔的收获是指每3-5d分别称量各网箱或者塑料框中浒苔质量，使浒苔的混养密度维持在700-900g/m3养殖水体；收获的浒苔，直接作为饵料投放到对虾养殖水体中；或作为饵料添加剂拌料投喂。
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RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190215

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