CN109310587A - 用于控制菌斑形成的组合物 - Google Patents

Abstract

正畸托槽促进人口腔中细菌生物膜的形成，这导致多种口腔健康问题，包括菌斑、龈炎和白斑病变。本文中公开了用于预防或抑制生物膜形成及相关疾病的方法和组合物。

Description

用于控制菌斑形成的组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求于2016年4月28日提交的美国临时专利申请No.62/329,114的优先权权益，其通过引用整体并入本文。

发明背景

1.技术领域

本公开内容涉及牙医学(dentistry)、口腔正畸学(orthodontics)和口腔药物(oral pharmaceutical)的领域。

2.背景技术

口腔含有超过700种微生物物种(人口腔微生物组数据库(Human OralMicrobiome)，在万维网homd.org上)。这些细菌黏附于多种口腔组织(例如，牙齿、口腔黏膜、舌)的表面，并形成复杂的多物种生物膜，通常也称为牙菌斑(dental plaque)。虽然这些细菌中的大多数是共生的，但是一些口腔微生物物种是导致多种口腔疾病(包括龋齿和牙周炎)的病原体(Hardie 1992，Patil 2013)。这些疾病因增强细菌生物膜形成的正畸托槽(orthodontic bracket)而加剧。

目前用于控制托槽诱导之菌斑的方法主要集中在通过机械力或再矿化试剂机械地去除菌斑以修复由菌斑积聚引起的损伤。基于刷的机械清洁是去除天然口腔组织(牙齿和牙龈二者)上的菌斑的主要方法。研究已表明这种方法无效(Boyd 1983，Costa 2007，Klukowska 2011，Laher 2003)。菌斑去除技术的其他方法包括以牙膏、漱口剂(mouthrinse)、涂剂(varnish)和凝胶形式递送的氟化物和氯己定(Baygin 2013，Santamaria2014，van der Kaaij 2015)。

目前的方法已是不充分的，并且菌斑诱导的疾病仍然是正畸患者中未解决的问题(Alexander 1991，Boke 2014，Consolaro 2013，Lucchese 2013，Tufekci 2011，vanGastel 2007，Zachrisson 1972)。需要针对正畸装置诱导的菌斑及其相关口腔疾病的新治疗。

发明概述

作为生物膜形成的第一步，细菌多糖和多肽结合配体使细菌能够附着于口腔表面。本文中公开的组合物包含阻断细菌上多糖和多肽结合配体的糖和/或氨基酸。该组合物因此预防或抑制多种口腔适应证中的菌斑形成和积聚。所述组合物可用于在具有或佩戴一种或更多种牙科矫治器(dental appliance)的个体中预防或抑制菌斑形成，所述牙科矫治器包括正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿(部分、柔性部分和全部)、整列器(aligner)、护口器(mouthguard)、夜用护板(night guard)、与牙齿接触的打鼾装置(snoring device)、牙齿防护器(dental guard)、或保持器(统称为“牙科矫治器”)。预期这些中的一种或更多种可在本文中描述的实施方案中排除。在某些实施方案中，组合物或方法可用于未佩戴牙科矫治器的患者。

在一些实施方案中，公开了用于在个体中预防或抑制菌斑形成和积聚的组合物和方法。在一些方面，公开了在具有正畸托槽的个体中预防或抑制菌斑形成的方法。在一些实施方案中，公开了在易患蛀牙(tooth decay)的个体(例如佩戴牙科矫治器的人)中预防或抑制菌斑形成的方法。在一些方面，公开了在具有天然牙齿的个体中预防或抑制菌斑形成的方法。在一些实施方案中，所述方法包括向个体的口腔局部施用包含至少一种分离的氨基酸和至少一种糖的组合物。在一些实施方案中，用于在个体中预防或抑制菌斑形成和积聚的组合物和方法包括向个体的口腔局部施用由至少一种分离的氨基酸和至少一种糖组成的组合物。在一些实施方案中，用于在个体中预防或抑制菌斑形成和积聚的组合物和方法包括向个体的口腔局部施用基本上由至少一种分离的氨基酸和至少一种糖组成的组合物。在一些方面，用于预防或抑制菌斑形成和积聚的组合物和方法不包含摩擦剂(abrasive)。在某些实施方案中，组合物由以下组成或基本上由以下组成：1)至少1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种或10种(及可从其中来源的任何范围)分离的氨基酸或氨基酸衍生物，以及2)至少1种、2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种或10种糖(或可从其中来源的任何范围)。在一个具体实施方案中，方法和组合物不含摩擦剂。在一些方面，组合物配制成用于向口腔局部施用并且基本上不被摄入。在一些方面，该组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。牙膏包括常规牙膏和婴幼儿牙膏。

在一些实施方案中，至少一种分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。在另一些实施方案中，所述至少一种分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。所述至少一种氨基酸可以是右旋(D)或左旋(L)氨基酸。在一些实施方案中，用于预防或抑制菌斑形成的组合物包含两种或更多种分离的氨基酸。在一些实施方案中，用于预防或抑制菌斑形成的组合物由两种或更多种分离的氨基酸组成或基本上由其组成。在另一些实施方案中，用于预防或抑制菌斑形成的组合物基本上由两种或更多种分离的氨基酸组成。在另一些实施方案中，用于预防或抑制菌斑形成的组合物包含三种分离的氨基酸。在一些具体的实施方案中，用于预防或抑制菌斑形成的组合物包含分离的氨基酸L-精氨酸、L-丙氨酸和L-赖氨酸。

在一些实施方案中，用于在具有或佩戴正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿、至少一个整列器、保持器或天然牙齿的个体中预防或抑制菌斑形成的组合物包含至少一种糖，包括但不限于乙酰葡糖胺、半乳糖、甘露糖和果糖。在一些实施方案中，用于在具有或佩戴正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿、至少一个整列器、保持器或天然牙齿的个体中预防或抑制菌斑形成的组合物由至少一种糖组成。在一些实施方案中，用于在具有或佩戴正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿、至少一个整列器、保持器或天然牙齿的个体中预防或抑制菌斑形成的组合物基本上由至少一种糖组成。在一些方面，该组合物不包含摩擦剂。所述至少一种糖可以是糖类似物或糖衍生物。在一些方面，组合物还包含氟化物源。在另一些方面，组合物可包含抗菌组分，包括但不限于氯己定。在一些方面，个体在施用组合物之后30分钟或更长时间内不饮水或进食。用于在个体中预防或抑制菌斑形成的组合物还可包含一种或更多种调味剂(flavoring)。

本公开内容的一些方面涉及用于鉴定抑制定植于动物口腔中的一种或更多种细菌物种的化合物的方法。动物可以是人或非人动物。在一些方面，所述方法可包括使体外口腔模型经受模拟所述一种或更多种细菌物种的体内生长条件的条件，用至少一种化合物处理体外口腔模型，测量口腔模型上的细菌物种群体的指示物(indicator)，并将经处理口腔模型上细菌物种群体的指示物与口腔模型的未经处理对照样本上的细菌物种群体的指示物进行比较。所述至少一种化合物可以是一种或更多种分离的氨基酸、一种或更多种糖，或其组合。所述至少一种化合物可由一种或更多种分离的氨基酸、一种或更多种糖或其组合组成。所述至少一种化合物可基本上由一种或更多种分离的氨基酸、一种或更多种糖或其组合组成。所述至少一种氨基酸可以是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。所述至少一种糖可以是糖类似物或糖衍生物。在另一些实施方案中，口腔模型用多种化合物处理，所述化合物选自一种或更多种分离的氨基酸、氨基酸类似物或氨基酸衍生物和一种或更多种糖、糖类似物或糖衍生物。

在一些方面，所述至少一种化合物的提供预防或抑制了所述一种或更多种细菌物种与口腔模型结合。在一些实施方案中，所述至少一种化合物的提供抑制了细菌表面上的多糖或肽结合配体。在一些方面，多种化合物的提供导致了菌斑形成的协同抑制或现存菌斑的协同减轻。在一些方面，测量经处理口腔模型上细菌物种群体的指示物包括对生物膜形成或生物膜的生长进行量化。在一些实施方案中，细菌物种群体的指示物是菌斑。在另一些实施方案中，细菌物种群体的指示物是龈炎或白斑病变(white spot lesion)。

在一些方面，口腔模型是人牙齿组织。人牙齿组织可属于任何年龄的人，例如婴幼儿、儿童、青少年、成年人或老年人。牙齿组织可以是天然牙齿组织，或牙齿组织可包含至少一个牙种植体。人牙齿组织还可包含附接于人牙齿组织的正畸托槽。口腔模型或牙齿组织还可包含至少一个整列器或保持器。在一些实施方案中，口腔模型是义齿模型。在一些方面，口腔模型是口腔黏膜。在另一些实施方案中，口腔模型是人舌组织。在另一些实施方案中，对象可以是具有牙齿的其他动物，例如狗、猫、马或易患蛀牙的其他哺乳动物。

在另一些方面，用于鉴定抑制在动物口腔中定植的一种或更多种细菌物种的化合物的方法还包括汇编(assembling)抑制一种或更多种细菌物种在人生物组织上定植的化合物的数据库，以及使用该数据库预测将抑制或预防细菌物种在人组织上生长的其他化合物的结构。

在一些特定的方面，在佩戴牙科矫治器的个体中预防或抑制菌斑形成的方法包括向个体的口腔局部施用牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂组合物，所述组合物包含氟化物源、氯己定、N-乙酰葡糖胺或其他糖，以及选自L-精氨酸、D-赖氨酸、L-赖氨酸、D-丙氨酸、L-丙氨酸和D-苏氨酸的至少一种分离的氨基酸，其中组合物基本上不被摄入。在一些实施方案中，所述牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂组合物不包含摩擦剂。在某些实施方案中，组合物包含氟化物源、氯己定、N-乙酰葡糖胺或其他糖，以及选自L-精氨酸、D-赖氨酸、L-赖氨酸、D-丙氨酸、L-丙氨酸和D-苏氨酸的1种、2种、3种、4种、5种或6种分离的氨基酸。

在一些实施方案中，组合物包含至少一种分离的氨基酸。在另一些实施方案中，组合物包含至少一种糖。在另一些实施方案中，组合物包含至少一种糖和至少一种分离的氨基酸。在另一些实施方案中，该组合物不包含摩擦剂。

在一些实施方案中，将糖、分离的氨基酸或含有至少一种或这二者的组合物施用于易发生菌斑形成的个体。在一些方面，组合物不包含摩擦剂。在一些实施方案中，个体佩戴正畸托槽，而在另一些实施方案中，个体佩戴可移除或不可移除的牙科矫治器。如果矫治器可移除，则组合物可在个体正佩戴牙科矫治器时施用，可通过首先将组合物施用至矫治器然后将其放置在个体口中来施用所述组合物，或者可在个体未佩戴牙科矫治器时施用所述组合物。在最后一种情况下，糖、分离的氨基酸或组合可在个体的口腔中具有或放置牙科矫治器24小时内施用于个体。在某些实施方案中，当不摄入食物时施用糖、分离的氨基酸或组合。

在一些实施方案中考虑不旨在摄入组合物。在某些实施方案中，组合物基本上不被摄入，这意指少于25％的放入口中的组合物不进入消化系统。在一些实施方案中，组合物在施用于个体后被咳出或吐出。在某些情况下，组合物在被咳出之前经过漱口或搅动(swich)。在另一些实施方案中，用刷、其他机械牙科装置或通过将已在牙科矫治器上具有该组合物的牙科矫治器放置在牙齿上将组合物直接施用于牙齿。在一些实施方案中考虑组合物不包含摩擦剂，例如碳酸钙。摩擦剂是在与牙齿表面摩擦接触时通过刮擦(scratching)、刨削(gouging)、凿边(chiseling)或其他机械方式在牙齿表面上引起磨损的颗粒。

如上所讨论，用于在戴有正畸托槽(外行人称为牙箍(brace))的个体中预防或抑制菌斑形成的组合物和方法可类似地用于由于其他正畸装置(例如可移除的牙科整列器(具有或不具有凸起或附件)或牙科保持器)产生相似菌斑积聚的个体。

如本文中所用，短语“治疗和/或预防”包括施用本发明的组合物、化合物或药剂以预防或延迟症状、并发症或疾病的生化指标的发生，缓解或改善症状或者阻止或抑制疾病、病症或障碍(例如，菌斑形成)的进一步发展。“治疗和/或预防”还指成功治疗或改善或预防疾病、病症或障碍的任何标志，包括任何客观或主观参数，例如减轻；缓解；减弱症状或使疾病状况对于患者更可忍受；使退化或衰退的速率减慢；或使退化的终点较少地令人衰弱。症状的治疗或改善可基于客观或主观参数；包括牙医检查的结果。因此，短语“治疗和/或预防”包括施用本公开内容的治疗剂以预防或延迟、减轻、或者预防或抑制与生物膜形成和生长相关的症状或病症的发生。

物质/分子的“治疗有效量”可根据例如个体的疾病状态、年龄、性别和体重的因素以及物质/分子在个体中引起期望反应的能力而变化。治疗有效量也是物质/分子的治疗有益作用超过任何毒性或有害作用的量。“预防有效量”是指在必要的剂量和时间段内有效实现期望预防性结果的量。通常但不是必要的是，由于预防性剂量在疾病之前或疾病的早期阶段用于对象，因此预防有效量将小于治疗有效量。

“个体”或“对象”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于家养动物(例如，牛、绵羊、猫、狗和马)、灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物(例如猴))、兔和啮齿动物(例如，小鼠和大鼠)。在某些实施方案中，个体或对象是人。

“降低或抑制”意指引起总体降低20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或更多的能力。降低或抑制可指所治疗的疾病的症状，例如细菌数量的降低。

特别考虑的是，关于本发明的一个实施方案讨论的任何限制可适用于本发明的任何其他实施方案。此外，本发明的任何组合物可用于本发明的任何方法，并且本发明的任何方法可用于产生或利用本发明的任何组合物。

权利要求中的术语“或”的使用用于意指“和/或”，除非明确指出仅指替选项或替选项是相互排斥的，尽管本公开内容支持仅指替选项和“和/或”的定义。

术语“包含”、“具有”、“包括”和“含有”是开放式连接动词。结果，“包含”、“具有”、“包括”或“含有”一个或更多个要素的本发明的方法和系统具有那些一个或更多个要素，但不限于仅具有那些一个或更多个元素。同样地，“包含”、“具有”、“包括”或“含有”一个或更多个特征的本发明的方法或系统的要素具有那些一个或更多个特征，但不限于仅具有那些一个或更多个特征。

本发明的任何方法或系统可由任何所述要素和/或特征和/或步骤组成或基本上由其组成，而不是包含/包括/含有/具有任何所述要素和/或特征和/或步骤。因此，在任何权利要求中，术语“由……组成”或“基本上由……组成”可替代上述任何开放式连接动词，以改变否则会使用开放式连接动词的给定权利要求的范围。连接词“由……组成”不包括权利要求中未指定的任何要素、步骤或成分。从属于“由所述要素或步骤组成”的权利要求的权利要求不能添加要素或步骤。当“由……组成”一词出现在权利要求主体的条款中，而不是紧接在前序部分之后时，其仅限制该条款中所述的要素；其他要素不作为整体排除在权利要求之外。连接词“基本上由……组成”将权利要求的范围限制于所要求保护的发明的特定材料或步骤“和不实质影响基本特征的那些”。在某些实施方案中，唯一的活性成分是氨基酸和糖。

在整个本申请中，术语“约”用于表明值包括用于确定该值的装置和/或方法的误差的标准差。

如本领域普通技术人员所理解的，术语“基本上”被定义为在很大程度上但不一定完全是所指定的(并且完全包括所指定的内容)。在任何公开的实施方案中，术语“基本上”可用“在所指定的[百分比]内”替代，其中百分比包括0.1％、1％、5％和10％。

如本文中所用，在说明书中，除非另有明确说明，否则没有数量同修饰的名词包括一个/种或更多个/种。如本文中所用，在权利要求书中，当与词语“包含/包括”结合使用时，没有数量词修饰的名词可意指一个/种或多于一个/种。如本文中所用，“另一个/种”可意指至少第二个/种或更多个/种。

根据以下详细描述，本发明的其他目的、特征和优点将变得明显。然而，应该理解，详细描述和特定实施例尽管表明了本发明的一些优选实施方案，但仅以举例说明的方式给出，因为从该详细描述中在本发明的精神和范围内的多种变化和修改对本领域技术人员而言将变得明显。

附图简述

图1A-1C。图1A是附着有正畸托槽的牙齿的图像。牙齿已经用菌斑显示剂(plaquedisclosing agent)染色以显示菌斑形成(牙齿上的暗色区域)。图1B是去除正畸牙箍后牙齿上的白斑病变的图像。图1C是具有正畸牙箍的患者中龈炎(即牙龈组织中的炎症)的图像。

图2A是描述托槽诱导的菌斑形成的图像。菌斑的形成涉及复杂的微生物黏附和生物膜形成，其严重依赖于细菌表面上的多肽或多糖。

图3A-3B。图3A是描述细菌生物膜形成中第一步的图。细菌表面包含分别识别牙齿表面单糖和氨基酸配体和与其结合的多肽和多肽。图3B是描述抑制生物膜形成之机制的图。施用单糖或氨基酸抑制细胞外多糖和多肽与牙齿表面结合。

图4A-4B。图4A左：羟基磷灰石(Hydroxyapatite，HA)盘。右：具有附着的正畸托槽的羟基磷灰石(HA)盘。图4B通过变性梯度凝胶分析原始唾液样品和盘上体外生长的唾液来源菌斑中的菌斑微生物组成。在盘上体外生长的唾液来源菌斑的微生物组成与原始人唾液样品几乎相同，表明该筛选测定与体内条件非常相似。

图5A-5C。图5A是比较抑制剂处理(右)和未处理(左)的具有附着的正畸托槽的HA盘的示例性体外筛选结果。盘已用菌斑显示剂染色。左侧未处理的盘包含对应于菌斑形成的暗斑。图5B是量化一系列化合物对生物膜生长之影响的条形图。图5C描述了比较化学混合物(OS-001)对托槽诱导的菌斑形成的体外效力的实验结果。

图6A-6E。图6A是描述化学混合物OS-001对生物膜形成之影响的照片。图6B是量化化学混合物OS-001对生物膜形成之影响的图。图6C是展示化学混合物OS-001对现存生物膜分离之影响的图。图6D是展示化学混合物OS-001对微生物群落的浮游生长之影响的图。图6E是描述使用人口腔角质形成细胞-16B细胞的细胞毒性测定结果的图。

发明详述

本公开内容的化合物可基于牙膏、漱口剂、涂剂、凝胶或其他载剂以约50ppm至约50,000ppm的单位剂量施用。也就是说，所述化合物可以以50、100、200、500、1,000、2,000、5,000、10,000、50,000ppm或其间的任何量施用。可将所述化合物的施用浓度调节至50ppm至50,000ppm的范围之外以获得有益的治疗终点。

本公开内容的化合物可以以下的单位剂量施用：每kg体重小于约15mg，或小于10、、2、1、0.5、0.1、0.05、0.01、0.005、0.001、0.0005、0.0001、0.00005或0.00001mg，以及每kg体重小于200纳摩尔的化合物(例如，约4.4×1016个拷贝)，或每kg体重小于1500、750、300、150、75、15、7.5、1.5、0.75、0.15、0.075、0.015、0.0075、0.0015、0.00075、0.00015纳摩尔化合物。特定的实施方案的剂量为小于2、1或0.1mg糖或分离的氨基酸/kg体重。

本公开内容化合物(氨基酸和/或糖)递送的剂量可以是每器官/组织近似约0.00001mg至约3mg，或优选每器官/组织约0.0001mg至0.001mg、每个器官/组织约0.03mg至3.0mg、每个器官/组织约0.1mg至3.0mg或每个器官/组织约0.3mg至3.0mg。剂量可以是有效治疗或预防生物膜形成及相关疾病的量。在一个实施方案中，单位剂量的施用频率低于每天一次，例如低于每2、4、8或30天一次。在另一个实施方案中，单位剂量不以频率施用(例如，不是常规频率)。例如，单位剂量可单次施用。在一个实施方案中，有效剂量与其他传统治疗方式一起施用。

在某个实施方案中，向对象施用初始剂量和一个或更多个维持剂量的组合物。维持剂量通常低于初始剂量，例如初始剂量降低一半。维持方案可包括用每天0.01mg/kg至1.4mg/kg体重的剂量治疗对象，例如每天10、1、0.1、0.01、0.001或0.00001mg/kg体重。维持剂量优选每5、10或30天施用不超过一次。此外，治疗方案可持续一段时间，该时间段将根据特定疾病的性质、其严重程度和患者的总体状况而变化。在一些优选的实施方案中，剂量可每天递送不超过一次，例如每24、36、48小时或更多小时不超过一次，例如每5或8天不超过一次。治疗后，可监测患者的病情变化，例如菌斑的减轻。如果患者对当前剂量水平没有显著响应，则可提高化合物的剂量，或者如果观察到生物膜的减轻或相关疾病(包括菌斑和龈炎)的减轻，或者如果观察到不希望的副作用，则可降低剂量。

如所期望或在特定情况下认为合适，有效剂量可以以单一剂量或两次或更多次剂量施用。在成功治疗后，可期望使患者经受维持治疗以预防疾病状态的复发，其中本发明化合物以0.01mg/kg至100mg/kg体重的维持剂量施用。(参见美国专利No.6,107,094)。

化合物的“有效量”是足以在人中有效地治疗或预防病症或调节生理状况的量。所施用的糖和/或氨基酸药剂的浓度或量将取决于对于所施用的药剂和方法所确定的参数。

某些因素可影响有效治疗对象所需的剂量，包括但不限于疾病或病症的严重程度、先前的治疗、对象的一般健康状况和/或年龄、以及存在的其他疾病。此外，用治疗有效量的本发明组合物治疗对象可包括单一治疗，或者优选地可包括一系列治疗。还应理解，用于治疗的组合物的有效剂量可在特定治疗过程中提高或降低。剂量的变化可由本文中所述的诊断测定的结果产生并通过该结果而变得明显。例如，可在施用本公开内容的化合物后监测对象。基于来自监测的信息，可施用另外量的化合物。

剂量取决于待治疗的疾病状况的严重程度和响应性，治疗过程持续数天至数月，或直至实现治愈或实现疾病状态的减轻。可根据患者体内药物积聚的测量来计算最佳给药方案。普通技术人员可容易地确定最佳剂量、给药方法和重复率。最佳剂量可根据各化合物的相对效力而变化，并且通常可基于发现在体外和体内动物模型中有效的EC50进行估计。

在一些实施方案中，组合物包含至少一种分离的氨基酸。在另一些实施方案中，组合物包含至少一种糖。在另一些实施方案中，组合物包含至少一种糖和至少一种分离的氨基酸。在一些特定的实施方案中，该组合物由以下v/v或w/w(以及可从其中来源的任何范围)的一种或更多种糖、一种或更多种分离的氨基酸、或一种或更多种糖和一种或更多种分离的氨基酸的组合构成：约、至少约、或至多约0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2.0％、2.1％、2.2％、2.3％、2.4％、2.5％、2.6％、2.7％、2.8％、2.9％、3.0％、3.1％、3.2％、3.3％、3.4％、3.5％、3.6％、3.7.3.8％、3.9％、4.0％、4.1％、4.2％、4.3％、4.4％、4.5％、4.6％、4.7％、4.8％、4.9％、5.0％、5.1％、5.2％、5.3％、5.4％、5.5％、5.6％、5.7％、5.8％、5.9％、6.0％、6.1％、6.2％、6.3％、6.4％、6.5％、6.6％、6.7％、6.8％、6.9％、7.0％、7.1％、7.2％、7.3％、7.4％、7.5％、7.6％、7.7％、7.8％、7.9％、8.0％、8.1％、8.2％、8.3％、8.4％、8.5％、8.6％、8.7％、8.8％、8.9％、9.0％、9.1％、9.2％、9.3％、9.4％、9.5％、9.6％、9.7％、9.8％、9.9％、10.0％、10.5％、11.0％、11.5％、12.0％、12.5％、13.0％、13.5％、14.0％、14.5％、15.0％、15.5％、16.0％、16.5％、17.0％、17.5％、18.0％、18.5％、19.0.19.5％、20.0％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％。或者，组合物含有以下量的糖、糖的组合、分离的氨基酸、分离的氨基酸的组合、或糖和氨基酸的组合：约、至少约、或至多约0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、10.5、11.0、11.5、12.0、12.5、13.0、13.5、14.0、14.5、15.0、15.5、16.0、16.5、17.0、17.5、18.0、18.5、19.0、19.5、20.0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、105、110、115、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195、200、205、210、215、220、225、230、235、240、245、250、255、260、265、270、275、280、285、290、295、300、305、310、315、320、325、330、335、340、345、350、355、360、365、370、375、380、385、390、395、400、410、420、425、430、440、441、450、460、470、475、480、490、500、510、520、525、530、540、550、560、570、575、580、590、600、610、620、625、630、640、650、660、670、675、680、690、700、710、720、725、730、740、750、760、770、775、780、790、800、810、820、825、830、840、850、860、870、875、880、890、900、910、920、925、930、940、950、960、970、975、980、990、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、3800、3900、4000、4100、4200、4300、4400、4500、4600、4700、4800、4900、5000、6000、7000、8000、9000、10000毫克(mg)或微克(mcg)或可从其中来源的任何范围。另外，对象可以以单一单位剂量或治疗方案以上面列出的量施用或施加于牙齿。

在含有至少一种分离的氨基酸和至少一种糖二者的组合物中，氨基酸与糖的比例可以是约1∶5、1∶4、1∶3、1∶2、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1、8∶1、9∶1、10∶1、11∶1、12∶1、13∶1、14∶1、15∶1或更多，或可从其中来源的任何范围。

药物制剂

在一个方面，本文中公开的方法可包括施用包含至少一种氨基酸和/或至少一种糖的药物组合物和制剂，其能够在具有正畸托槽的个体中预防或抑制菌斑形成。

在某些实施方案中，组合物与可药用载体一起配制。药物组合物可以以任何方式配制，并且可以以多种单位剂型施用，这取决于病症或疾病和患病程度、每位患者的一般医学状况、所得的优选施用方法等。配制和施用药物的技术细节在科学和专利文献中有详细描述，参见例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第21版，2005。

活性剂可单独施用或作为药物制剂(组合物)的组分施用。可以以任何方便的方式配制化合物用于施用以用于人或兽医学中。润湿剂、乳化剂和润滑剂(例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)，以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于组合物中。

可根据本领域已知的用于制备药物的任何方法来制备药物制剂。这样的药物可含有甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂。制剂可与适于制备的无毒可药用赋形剂混合。制剂可包含一种或更多种稀释剂、乳化剂、防腐剂、缓冲剂、赋形剂等，并且可以以液体、牙膏、涂剂、散剂、乳剂、冻干粉末剂、喷雾剂、乳膏剂、洗剂、控制释放制剂等形式提供。在一些方面，制剂不包含摩擦剂组分。

在某些实施方案中，药物化合物和制剂被冻干。包含氨基酸和/或糖的稳定冻干制剂可通过冻干包含活性成分和填充剂(例如，甘露醇、海藻糖、棉子糖或其混合物)的溶液来制备。用于制备稳定冻干制剂的方法可包括将约2.5mg/ml活性组合物、约15mg/ml填充剂、约19mg/ml NaCl和柠檬酸钠缓冲剂的pH大于5.5但小于6.5的溶液冻干。参见，例如，U.S.20040028670。

可施用制剂用于预防性和/或治疗性治疗。在某些实施方案中，对于治疗性应用，将组合物施用于具有正畸托槽的对象用于预防或治疗菌斑形成；这可称为治疗有效量。例如，在某些实施方案中，药物组合物以足以治疗菌斑形成的量施用。

适合达到此目的的药物组合物的量是治疗有效剂量。对该用途有效的剂量方案和量(即给药方案)将取决于多种因素，包括疾病或病症的阶段、疾病或病症的严重程度、患者健康的一般状态、患者的身体状况、年龄等。在计算患者的剂量方案时，还考虑施用方式。

正畸治疗在青少年和成人中很流行(AAO 2012，Christopherson EA 2009)。作为正畸治疗的一部分，托槽附着于牙釉质表面以为线材提供固定基座。牙齿表面上固定托槽的一个关键非预期副作用是将牙齿表面拓扑结构从光滑表面改变为牙齿与托槽之间新的不均匀非光滑的连接。这些非光滑连接促进了增强的微生物生物膜形成，如多个先前研究(Freitas AO 2014，Sukontapatipark W 2001)所记载并在图1A中所展示的。如上所述，通过刷洗去除光滑牙齿表面上的菌斑往往是不充分的；在这些表面上添加托槽和线材进一步妨碍了有效的口腔卫生(Boyd RL 1983，Costa MR 2007，Klukowska M 2011，Laher A2003)。因此，公知的临床事实是，大部分正进行正畸治疗的患者患有与托槽诱导的菌斑形成相关的口腔健康问题，包括白斑病变和龈炎，如图1B和1C中所示。

G.实施例

包括以下实施例以示出本发明的一些优选实施方案。本领域技术人员应理解，随后的实施例中公开的技术代表本发明人发现的在本发明实践中很好地发挥作用的技术，并因此可被认为构成实施本发明的一些优选模式。然而，根据本公开内容，本领域技术人员应理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对所公开的具体实施方案进行许多改变并仍然获得相同或相似的结果。

实施例1

科学数据

为了检查化合物对托槽诱导的菌斑形成的抑制作用，开发了体外托槽诱导的生物膜模型系统，以在结构和功能上模拟体内临床实际。使用该模型系统筛选了超过200+种氨基酸和糖单体和类似物，结果是发现了对托槽诱导的菌斑形成具有强抑制作用的数种化合物。发现这些化合物在实验室安全性测试下是安全的，并且现已配制成具有良好体外效力的原型牙膏。

实施例2

体外托槽诱导的生物膜模型系统的开发

如图4A中所示，将托槽附着于由羟基磷灰石(HA)作为基底支撑材料制成的小盘(直径13mm)。然后将这些盘装入12孔组织培养板中用于唾液来源的菌斑的生长。该系统的一个独特特征是使用由本实验室开发的新培养基(Shi-medium，Tian Y 2010)，其允许体外生长的生物膜与体内人菌斑非常相似。图5A-5C示出盘上体外生长的唾液来源的菌斑的微生物组成与原始人唾液样品几乎相同，表明这是严密模拟体内条件的高保真筛选测定。

实施例3

鉴定对托槽诱导的菌斑形成具有抑制活性的化合物

从10名志愿者中收集人唾液样品的混合池以在上面开发的模型系统上形成体外生长的菌斑。氨基酸和糖单体和类似物主要从FDA公认为安全(Generally Recognized AsSafe，GRAS)的化合物的列表中选择(http：//www.fda.gov/Food/IngredientsPackagingLabeling/GRAS/SCOGS/default.htm)。用结晶紫测定法(Sharma A2005)测定这些化学物质的抗生物膜抑制功能，如图5A中所示。还研究了具有超过10×抑制作用的化合物。数种氨基酸和糖(包括L-Arg、L-Lys、D-Lys、D-Ala、D-Thr和N-酰基-葡萄糖胺)显示出强抑制作用(图5B)。

实施例4

针对托槽诱导的菌斑形成的具有安全性和效力的配方

筛选所提供的候选化合物的列表用于进一步研究后，将各化合物以不同比例组合以产生针对托槽诱导的菌斑形成具有最大生物活性的混合物。然后将该化学混合物配制成具有保留的生物活性的混合物，如图5C中所示。另外，进行了多种体外安全性试验，包括用Ames试验(Mortelmans K 2000)的遗传毒性、对T细胞和B细胞CellTiterBlue或CellTiterGlo测定(Promega)的细胞毒性，且未发现可检出的毒性问题。如图6A-6E中所示，化学混合物(OS-001)在抑制包含数百种细菌物种的微生物群落的生物膜形成中显示出强生物活性(图6A和6B)。OS-001有效地分散已经存在的多物种生物膜(图6C)并且预防托槽诱导的菌斑形成(图5C)。该配方对细菌细胞没有细胞毒性作用(图6D)。另外，进行了多种体外安全性试验，包括用Ames试验(Mortelmans K 2000)的遗传毒性、对T细胞和B细胞CellTiterBlue或CellTiterGlo测定(Promega)的细胞毒性，未发现可检出的毒性问题(图6E)。

实施例5

安全性和效力研究

公开了两项随机、双盲、安慰剂对照研究。该研究的目的是评价施用这种新配制的牙膏在青少年对象中的安全性，并评估这种新配制的牙膏在青少年对象中减轻托槽诱导的菌斑积聚的效力。对象包括60位年龄为10至15岁的男性和女性正畸对象。第一项研究的目的是评价新配制的牙膏在青少年对象中的安全性。第二项研究的目的是评估新配制的牙膏在青少年对象中减轻菌斑积聚的效力。

实施例6

安全性研究

在开始登记对象之前进行每组4位青少年对象的分组。对于两个群组(仅安全性群组和效力群组)，对象的临床访视包括初始访视1(第0天)和随访访视(第7天和第14天)。在青少年仅安全性群组中登记的对象仅评估安全性参数。第0天、第7天和第14天的安全性监测包括生命体征、硬组织和软组织的口内评估、有针对性的体格检查、以及在研究访视和计划外电话联系期间收集不良事件。

实施例7

效力研究

公开了在10至15岁的男性和女性正畸对象中的随机、双盲、安慰剂对照的安全性和效力研究。该研究包括60位青少年对象(10至15岁)。

对于效力研究，向青少年对象施用所研究材料(本文中公开的活性化合物或其混合物)持续14天。该研究对所研究材料施用与安慰剂进行了比较。使用交互式网络响应系统(interactive web response system，IWRS)将研究对象随机分成两组(治疗组或安慰剂组)。在给予所研究材料之前，使用痕量菌斑显示液(Trace Plaque Disclosing Liquid)(DentaKit项目#：DK-R719)对符合条件的对象进行专业牙科检查、咨询和菌斑检查。根据Quigley-Hein菌斑指数(Goyal CR 2005)记录量化的菌斑评分。然后在牙科椅上对对象进行菌斑去除，并给予所研究材料(带回家的牙膏和Oral-B牙刷)，在家中每天使用两次，持续14天。为了评价抗菌斑效应，将研究对象召回诊所并分别在第7天和第14天使用相同的菌斑显示液(DentaKit项目#：DK-R719)方案检查托槽诱导的菌斑形成。

实施例8

入选标准

青少年仅安全性群组的入选标准包括在签署同意和知情同意书时10至15岁(包括端值)的男性和女性。对象是健康的，如研究者所确定的(根据需要咨询医学监测员)，基于医学和牙科病史、并发疾病、实验室结果、伴随用药、口腔评估和筛选期间有针对性的体格检查(额外地口腔、头部和颈部)。对象正在进行正畸治疗并佩戴正畸托槽。在研究期间，对象愿意避免使用非研究性洁齿剂和其他非研究性口腔护理产品。对象愿意在筛选与最终的治疗后访视(研究结束或提前终止)之间推迟择期牙科手术(elective surgery)(例如，牙齿清洁)。对象愿意并且能够遵守口腔卫生和饮食指示(不适用于青少年仅安全性群组对象)。在开始研究操作之前，对象能够理解并签署同意和/或知情同意书。对象能够与研究人员/研究中心人员进行沟通，了解并遵守研究要求，并愿意在指定时间返回进行方案指定的访视。

实施例9

排除标准

排除标准包括在所研究材料施用之前30天内的晚期牙周病和活动性龋损(通过牙科检查和标准射线照片确认)。不排除呈现有白斑的对象。另外的排除标准包括在牙科访视和/或手术前推荐使用抗生素的医疗条件(例如，人工心脏瓣膜、感染性心内膜炎病史、伴瓣膜功能障碍的心脏移植、先天性心脏病或全关节置换)、可疑或确诊病理性口腔病变、目前使用的全身性抗生素、表面口腔抗生素、或使用研究者认为可在筛查之前30天内影响研究结果的其他药物。另外的排除标准包括在所研究药物施用之前30天内参加临床试验或接受非FDA批准的治疗(取决于具体情况，不一定排除参加观察性研究)，以及研究者认为会损害正常免疫功能(例如糖尿病、类风湿性关节炎、狼疮、肝病、器官移植等)、妨碍所研究洁齿剂和口腔护理产品的使用、或妨碍遵守研究要求的能力、或危害对象的安全性或研究结果的有效性的任何病症或并发疾病的存在。

实施例10

盲法/非盲法和数据分析：

该研究以随机、双盲、安慰剂对照的方式进行。为确保盲法，活性和安慰剂材料以相同方式包装，且IWRS用于随机分配。对象对研究治疗不知情。研究者、研究工作人员/临床医生和赞助商指定的团队成员(例如，临床监测员和医学监测员)对于对象是否正在接受活性剂或安慰剂不知情，直至该研究被正式揭盲以用于数据分析目的。

该研究的对象总数为约64(对于青少年仅安全性群组，n＝≥4；对于研究，n＝60)，其具有足够的研究功效(power)。该数据提供了多次施用OS-001牙膏或安慰剂的安全性和效力信息。有两个分析集：安全性分析集和效力分析集。

安全性：总结了所有与安全性相关的干预、不良事件(adverse event，AE)和发现。对治疗紧急AE的发生率和持续时间进行了总结。所有不良事件(AE)按该事件与所研究材料的关系分类为1)无，2)不太可能，3)可能或4)很可能。所有的AE都按照良好的医疗实践进行跟踪，直至解决或完全表征为止。对所有严重的AE(serious AE，SAE)进行跟踪，直至结果已知或对象的状况已稳定。

效力：记录和分析由痕量菌斑显示液(DentaKit项目#：DK-R719)方案显示的菌斑积聚指数数据。每位对象中的第7天和第14天的数据用第0天数据进行归一化。确定在每个时间点(第0天、第7天和第14天)在活性组和安慰剂组之间利用平均值、标准差、中位数和菌斑积聚范围的描述性统计学。比较和分析第7天和第14天活性组与安慰剂组之间和个体对象之间的差异。

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Claims (143)

1.在个体中预防或抑制菌斑形成的方法，其包括：

向所述个体的口腔局部施用包含至少一种分离的氨基酸和至少一种糖的组合物；

其中所述组合物基本上不被摄入。

2.权利要求1所述的方法，其中所述个体具有或佩戴牙科矫治器。

3.权利要求1所述的方法，其中所述组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

4.权利要求1或3所述的方法，其中所述至少一种分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

5.权利要求4所述的方法，其中所述精氨酸是L-精氨酸。

6.权利要求4所述的方法，其中所述精氨酸是D-精氨酸。

7.权利要求4所述的方法，其中所述赖氨酸是D-赖氨酸。

8.权利要求4所述的方法，其中所述赖氨酸是L-赖氨酸。

9.权利要求4所述的方法，其中所述丙氨酸是D-丙氨酸。

10.权利要求4所述的方法，其中所述丙氨酸是L-丙氨酸。

11.权利要求4所述的方法，其中所述苏氨酸是D-苏氨酸。

12.权利要求4所述的方法，其中所述苏氨酸是L-苏氨酸。

13.权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述至少一种糖是糖类似物或糖衍生物。

14.权利要求1或3所述的方法，其中所述组合物还包含两种或更多种分离的氨基酸。

15.权利要求1或3所述的方法，其中所述组合物还包含三种分离的氨基酸。

16.权利要求14或15中任一项所述的方法，其中所述分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

17.权利要求15所述的方法，其中所述三种分离的氨基酸是L-精氨酸、L-丙氨酸和L-赖氨酸。

18.权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。

19.权利要求13至18中任一项所述的方法，其中所述糖类似物或糖衍生物是N-乙酰葡糖胺、半乳糖、甘露糖或果糖。

20.权利要求13至19中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含氟化物。

21.权利要求13至20中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含抗菌组分。

22.权利要求21所述的方法，其中所述抗菌组分是氯己定。

23.权利要求1所述的方法，其中所述个体在施用所述组合物之后30分钟内不饮水或进食。

24.权利要求1所述的方法，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

25.权利要求1所述的方法，其中所述组合物不包含摩擦剂。

26.权利要求25所述的方法，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

27.在个体中预防或抑制菌斑形成的方法，其包括：

向口腔局部施用包含至少一种分离的氨基酸的组合物；

其中所述组合物基本上不被摄入。

28.权利要求27所述的方法，其中所述个体具有或佩戴牙科矫治器。

29.权利要求27所述的预防或抑制菌斑形成的方法，其中所述组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

30.权利要求27或29所述的方法，其中所述至少一种分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

31.权利要求30所述的方法，其中所述精氨酸是L-精氨酸。

32.权利要求30所述的方法，其中所述精氨酸是D-精氨酸。

33.权利要求30所述的方法，其中所述赖氨酸是D-赖氨酸。

34.权利要求30所述的方法，其中所述赖氨酸是L-赖氨酸。

35.权利要求30所述的方法，其中所述丙氨酸是D-丙氨酸。

36.权利要求30所述的方法，其中所述丙氨酸是L-丙氨酸。

37.权利要求30所述的方法，其中所述苏氨酸是D-苏氨酸。

38.权利要求30所述的方法，其中所述苏氨酸是L-苏氨酸。

39.权利要求27或29所述的方法，其中所述组合物还包含两种或更多种分离的氨基酸。

40.权利要求27或29所述的方法，其中所述组合物还包含三种分离的氨基酸。

41.权利要求39或40中任一项所述的方法，其中所述分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

42.权利要求40所述的方法，其中所述三种分离的氨基酸是L-精氨酸、L-丙氨酸和L-赖氨酸。

43.权利要求27至41中任一项所述的方法，其中所述分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。

44.权利要求27至43中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含氟化物源。

45.权利要求27至44中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含抗菌组分。

46.权利要求45所述的方法，其中所述抗菌组分是氯己定。

47.权利要求27所述的方法，其中所述个体在施用所述组合物之后30分钟内不饮水或进食。

48.权利要求27所述的方法，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

49.权利要求27所述的方法，其中所述组合物不包含摩擦剂。

50.权利要求49所述的方法，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

51.在个体中预防或抑制菌斑形成的方法，其包括：

向所述个体的口腔局部施用包含至少一种糖的组合物；

其中所述组合物基本上不被摄入。

52.权利要求51所述的方法，其中所述个体具有或佩戴牙科矫治器。

53.权利要求51所述的方法，其中所述组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

54.权利要求51或53所述的方法，其中所述至少一种糖是糖类似物或糖衍生物。

55.权利要求51至54中任一项所述的方法，其中所述糖类似物或糖衍生物是N-乙酰葡糖胺、半乳糖、甘露糖或果糖。

56.权利要求51至55中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含氟化物源。

57.权利要求51至56中任一项所述的方法，其中所述组合物还包含抗菌组分。

58.权利要求57所述的方法，其中所述抗菌组分是氯己定。

59.权利要求51所述的方法，其中所述个体在施用所述组合物之后30分钟内不饮水或进食。

60.权利要求51所述的方法，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

61.权利要求51所述的方法，其中所述组合物不包含摩擦剂。

62.权利要求61所述的方法，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

63.用于在个体中预防或抑制菌斑形成的口腔组合物；

其中所述组合物包含至少一种分离的氨基酸和至少一种糖；

其中所述组合物配制成用于向口腔局部施用；并且

其中所述组合物基本上不被摄入。

64.权利要求63所述的方法，其中所述个体具有或佩戴牙科矫治器。

65.权利要求63所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

66.权利要求63或65所述的口腔组合物，其中所述至少一种分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

67.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述精氨酸是L-精氨酸。

68.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述精氨酸是D-精氨酸。

69.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述赖氨酸是D-赖氨酸。

70.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述赖氨酸是L-赖氨酸。

71.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述丙氨酸是D-丙氨酸。

72.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述丙氨酸是L-丙氨酸。

73.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述苏氨酸是D-苏氨酸。

74.权利要求66所述的口腔组合物，其中所述苏氨酸是L-苏氨酸。

75.权利要求63至73中任一项所述的口腔组合物，其中所述至少一种糖是糖类似物或糖衍生物。

76.权利要求75所述的口腔组合物，其中所述糖类似物或糖衍生物是N-乙酰葡糖胺、半乳糖、甘露糖或果糖。

77.权利要求63至76中任一项的口腔组合物，其中所述分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。

78.权利要求63至77中任一项所述的口腔组合物，所述组合物还包含两种或更多种分离的氨基酸。

79.权利要求63至77中任一项所述的口腔组合物，所述组合物还包含三种分离的氨基酸。

80.权利要求78或79中任一项所述的口腔组合物，其中所述分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

81.权利要求79所述的口腔组合物，其中所述三种分离的氨基酸是L-精氨酸、L-丙氨酸和L-赖氨酸。

82.权利要求63至80中任一项所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物还包含氟化物源。

83.权利要求63至82中任一项所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物还包含抗菌组分。

84.权利要求83所述的口腔组合物，其中所述抗菌组分是氯己定。

85.权利要求63所述的口腔组合物，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

86.权利要求63所述的口腔组合物，其中所述组合物不包含摩擦剂。

87.权利要求86所述的口腔组合物，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

88.用于在个体中预防或抑制菌斑形成的口腔组合物；

其中所述组合物包含至少一种分离的氨基酸；

其中所述组合物配制成用于向口腔局部施用；并且

其中所述组合物基本上不被摄入。

89.权利要求88所述的方法，其中所述个体具有或正佩戴正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿、至少一个整列器、保持器或天然牙齿。

90.权利要求88所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

91.权利要求88或90中任一项所述的口腔组合物，其中所述至少一种分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

92.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述精氨酸是L-精氨酸。

93.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述精氨酸是D-精氨酸。

94.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述赖氨酸是D-赖氨酸。

95.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述赖氨酸是L-赖氨酸。

96.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述丙氨酸是D-丙氨酸。

97.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述丙氨酸是L-丙氨酸。

98.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述苏氨酸是D-苏氨酸。

99.权利要求91所述的口腔组合物，其中所述苏氨酸是L-苏氨酸。

100.权利要求88至98中任一项所述的口腔组合物，其中所述分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。

101.权利要求88或90中任一项所述的口腔组合物，其中所述组合物还包含两种或更多种分离的氨基酸。

102.权利要求88或90中任一项所述的口腔组合物，其中所述组合物还包含三种分离的氨基酸。

103.权利要求101或102中任一项所述的口腔组合物，其中所述分离的氨基酸选自精氨酸、赖氨酸、丙氨酸、苏氨酸和组氨酸。

104.权利要求102所述的口腔组合物，其中所述三种分离的氨基酸是L-精氨酸、L-丙氨酸和L-赖氨酸。

105.权利要求88至103中任一项所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物还包含氟化物源。

106.权利要求88至105中任一项所述的口腔组合物，其中所述口腔组合物还包含抗菌组分。

107.权利要求107所述的口腔组合物，其中所述抗菌组分是氯己定。

108.权利要求88所述的口腔组合物，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

109.权利要求88所述的口腔组合物，其中所述组合物不包含摩擦剂。

110.权利要求109所述的口腔组合物，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

111.用于在个体中预防或抑制菌斑形成的口腔组合物；

其中所述组合物包含至少一种糖；

其中所述组合物配制成用于向口腔局部施用；并且

其中所述组合物基本上不被摄入。

112.权利要求111所述的方法，其中所述个体具有或正佩戴正畸托槽、至少一个牙种植体、义齿、至少一个整列器、保持器或天然牙齿。

113.权利要求111所述的口腔组合物，其中所述组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂。

114.权利要求111或113所述的口腔组合物，其中所述至少一种糖是糖类似物或糖衍生物。

115.权利要求114所述的口腔组合物，其中所述糖类似物或糖衍生物是N-乙酰葡糖胺、半乳糖、甘露糖或果糖。

116.权利要求111至115中任一项所述的口腔组合物，其中所述组合物还包含氟化物源。

117.权利要求111至116中任一项所述的口腔组合物，其中所述组合物还包含抗菌组分。

118.权利要求117所述的口腔组合物，其中所述抗菌组分是氯己定。

119.权利要求111所述的口腔组合物，其中所述组合物包含一种或更多种调味剂。

120.权利要求111所述的口腔组合物，其中所述组合物不包含摩擦剂。

121.权利要求120所述的口腔组合物，其中所述摩擦剂是碳酸钙。

122.用于鉴定抑制定植于动物口腔中的一种或更多种细菌物种的化合物的方法，其包括：

使体外口腔模型经受模拟所述一种或更多种细菌物种的体内生长条件的条件；

用至少一种化合物处理所述体外口腔模型；

测量口腔模型上细菌物种群体的指示物；以及

将经处理口腔模型上细菌物种群体的指示物与所述口腔模型的未经处理对照样品上细菌物种群体的指示物进行比较。

123.权利要求122所述的方法，其中所述化合物选自分离的氨基酸和糖。

124.权利要求122或81所述的方法，其中所述口腔模型是人牙齿组织。

125.权利要求124所述的方法，其中所述人牙齿组织还包含附接于所述人牙齿组织的正畸托槽。

126.权利要求124所述的方法，其中所述人牙齿组织包含至少一个牙种植体。

127.权利要求124所述的方法，其中所述人牙齿组织还包含至少一个整列器。

128.权利要求124所述的方法，其中所述人牙齿组织还包含保持器。

129.权利要求122或123中任一项所述的方法，其中所述口腔模型是义齿模型。

130.权利要求122或123中任一项所述的方法，其中所述口腔模型是口腔黏膜。

131.权利要求122或123中任一项所述的方法，其中所述口腔模型是人舌组织。

132.权利要求122至131中任一项所述的方法，其中所述至少一种化合物的提供预防或抑制了所述一种或更多种细菌物种与所述口腔模型结合。

133.权利要求122至132中任一项所述的方法，其中所述至少一种化合物的提供抑制了细菌表面上的多糖或肽结合配体。

134.权利要求122至133中任一项所述的方法，其还包括用多种化合物处理所述口腔模型。

135.权利要求134所述的方法，其中所述多种化合物包含至少一种分离的氨基酸和至少一种糖。

136.权利要求135所述的方法，其中所述至少一种分离的氨基酸是氨基酸类似物或氨基酸衍生物。

137.权利要求135所述的方法，其中所述至少一种糖是糖类似物或糖衍生物。

138.权利要求122至137中任一项所述的方法，其中测量经处理口腔模型上细菌物种群体的指示物包括对生物膜形成进行量化。

139.权利要求122至137中任一项所述的方法，其中测量经处理口腔模型上细菌物种群体的指示物包括对生物膜生长进行量化。

140.权利要求122至139中任一项所述的方法，其中所述细菌物种群体的指示物是菌斑。

141.权利要求122至139中任一项所述的方法，其中所述细菌物种群体的指示物是龈炎。

142.权利要求122至141中任一项所述的方法，其还包括汇编抑制一种或更多种细菌物种在人生物组织上定植的化合物的数据库，并使用所述数据库来预测将抑制或预防所述细菌物种在人组织上生长的其他化合物的结构。

143.在具有或佩戴牙科矫治器的个体中预防或抑制菌斑形成的方法，其包括，

向所述个体的口腔局部施用组合物，所述组合物包含氟化物源、氯己定、N-乙酰葡糖胺或其他糖，以及选自L-精氨酸、L-赖氨酸、D-赖氨酸、L-丙氨酸、D-丙氨酸和D-苏氨酸的至少一种分离的氨基酸；

其中所述组合物是牙膏、凝胶、涂剂或漱口剂；并且

其中所述组合物基本上不被摄入。