CN109234447A - 一种鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的方法及专用ssr引物 - Google Patents
一种鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的方法及专用ssr引物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物技术领域,本发明公开了一种鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的方法及专用SSR引物。本发明提供的抗大豆胞囊线虫4号小种鉴定的SSR标记由Satt533、Satt504组成。本发明通过对来自国内外抗、感大豆资源进行实验验证,本发明的鉴定方法操作简单、经济高效,结果稳定可靠。相比病土鉴定法具有省时省力、不受季节限制的优点,具有较好的应用前景,更好地服务于生产实践中大豆抗胞囊线虫4号小种的鉴定和评价。因此,本发明SSR标记组合及抗大豆胞囊线虫4号小种鉴定方法在大豆抗胞囊线虫4号小种资源筛选和品种选育等方面将有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的方法及专用SSR引物。
背景技术
大豆胞囊线虫病(Soybean Cyst Nematode,SCN)是大豆生产上毁灭性病害之一,病原物为大豆胞囊线虫(Heterodera glycines Ichinohe)。我国大豆胞囊线虫有1、2、3、4、5、6、7、14 号等8个生理小种,其中4号小种致病力最强,主要分布在黄淮大豆产区。该病一般会造成产量损失为5-10%,严重发生地块减产可达30%以上,甚至颗粒无收,经济损失严重。据估计全世界每年由于大豆胞囊线虫病危害而造成的经济损失在16.2亿美元以上。目前我国的受害面积在2000万亩以上,估计减产数百万吨,经济损失达几十亿元左右。
选育抗病品种是解决大豆胞囊线虫病最经济有效的措施。但目前生产上尚无抗胞囊线虫4号小种大豆品种,主要原因是大豆胞囊线虫4号小种是所有胞囊线虫小种中致病性最强的小种,而且其抗性是受多基因控制的数量性状,推广良种与抗病资源的杂交后代中只有少数资源抗病。另外,大豆胞囊线虫鉴定是在根系上进行,需要挖出根系根据根系上线虫胞囊的多少来确定该单株是否抗病,鉴定过程繁琐,工作量大,即使发现抗病单株,也可能会因为移栽不当而将抗病资源丢失。因此,急需开发可有效检测抗病单株的抗病分子标记用于大豆抗胞囊线虫4号小种鉴定,辅助选育抗病品种。
SSR(Simple Sequence Repeats)标记是近年来发展起来的一种以特异引物PCR为基础的分子标记技术,也称为微卫星DNA,是一类由1~6个核苷酸为重复单位组成的串联重复序列。每个SSR两侧的序列一般是相对保守的单拷贝序列。微卫星中重复单位的数目存在高度变异,造成多个位点的多态性。因此,SSR标记在不同的种甚至不同个体间的多态性。与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以孟德尔方式遗传,呈共显性。
目前,大豆分子标记开发技术已经成熟,已有研究人员开发出针对大豆胞囊线虫1、3号生理小种的SSR分子标记。本课题组自李莹研究员开始,四十余年来一直从事大豆抗胞囊线虫4号生理小种研究。现已筛选并保存有灰皮支黑豆等20份抗病资源,以及典型的感病资源。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种用于鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的SSR引物组合。
本发明所提供的用于鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的SSR引物组合为Satt533 和Satt504。
所述Satt533的一条引物序列如SEQ ID NO. 1所示,另一条引物序列如SEQ IDNO. 2所示;所述Satt504的一条引物序列如SEQ ID NO. 3所示,另一条引物序列如SEQ IDNO. 4所示。
上述引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源、在辅助鉴定大豆胞囊线虫4号小种抗源中的应用也属于本发明的保护范围。
本发明另一个目的是提供一种辅助鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种抗病资源中的应用。
本发明所提供的辅助鉴定大豆胞囊线虫4号小种抗病资源的方法,包括如下步骤:
分别用上述引物组合中的每对引物对待测大豆单株基因组DNA进行PCR扩增,获得PCR扩增产物,对所述PCR扩增产物进行检测,根据如下方法确认所述待测大豆单株为大豆胞囊线虫4号小种抗病资源还是感病资源:
A、若所述引物组合中的每对引物所对应的PCR扩增产物均含有抗病特征带,则认为所述待测大豆单株为抗病单株;
B、若所述引物组合中只要有其中一个或一个以上引物所对应的PCR扩增产物不含有抗病特征带,则认为所述待测大豆单株为感病单株。
所述抗病特征带为Satt533为269 bp的DNA;Satt504为159 bp的DNA片段。
上述鉴定方法中,所述PCR扩增体系为10×PCR buffer(含Mg2+)0.1µl/µl,dNTPmixture 0.2mmol/L,Taq酶 0.05 U/µl,SSR标记两条引物的浓度分别为0.5µmol/L,基因组DNA的浓度为5 ng/µl。
上述的方法中PCR反应程序为95℃变性5min;95℃变性30s,合适的退火温度退火30s,72℃延伸45s,30个循环;72℃延伸10min。
上述方法中引物Satt533进行PCR扩增的退火温度为55℃;所述引物Satt504进行PCR扩增的退火温度为58℃。
上述方法中,所述PCR扩增产物进行检测的方法为测序或非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
上述方法在抗大豆胞囊线虫4号小种资源筛选或抗大豆胞囊线虫4号小种品种选育中应用也属于本发明的保护范围。
本发明利用8个抗病资源和8个感病资源为模板DNA,扩增了已合成的1000对SSR标记,发现有2对标记可将抗、感资源区分开。经过对200份资源扩增验证,这2个标记单独鉴定的准确率达不到100%,但组合起来,准确率可达到100%。
本发明通过对来自国内外抗、感大豆资源进行实验验证,本发明的鉴定方法操作简单、经济高效,结果稳定可靠。相比病土鉴定法具有省时省力、不受季节限制的优点,具有较好的应用前景,更好地服务于生产实践中大豆抗胞囊线虫4号小种的鉴定和评价。因此,本发明SSR标记组合及抗大豆胞囊线虫4号小种鉴定方法在大豆抗胞囊线虫4号小种资源筛选和品种选育等方面将有广阔的应用前景。
附图说明
图1为16个资源即8个高抗资源和8个高感资源进行SSR引物筛选电泳图;图2为Satt533标记对75份资源的扩增图谱;图3为Satt 504标记对75份资源的扩增图谱;图4为Satt533标记对99份资源的的扩增图谱;图5为Satt 504标记对99份资源的扩增图谱。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
下述实施例中所用的耗材、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。
如下各个实例中,用标记进行PCR扩增和检测的步骤如下:
大豆育苗。随机选10粒待鉴定资源的种子,要求种子饱满、无破损粒。播种于装有沙土的发芽盒中,播种深度2厘米。然后置于30℃左右的培养箱中,黑暗培养。大约1周后取单株幼嫩叶片。
大豆基因组DNA提取。将取得的叶片约0.5 g装入预先装有1粒钢珠的2ml离心管。用高速匀浆机快速磨样,采用基因组DNA提取试剂盒(天根)提取每个样品的基因组DNA。
PCR扩增和产物检测。PCR扩增体系见表1。所有试剂均购自于TaKaRa公司。
表1.:PCR反应体系
PCR反应程序:95℃预变性5min;95℃变性30s,合适的退火温度退火30s,72℃延伸45s,30个循环;72℃延伸10min。
由于每对引物有其最适的退火温度,因此,在扩增程序中退火温度是根据不同引物的最适退火温度而定,其余程序不变。
PCR扩增产物的检测:采用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,然后银染显色。
如下各个实例中,大豆抗胞囊线虫4号小种鉴定方法的步骤如下:采用人工接种鉴定法(DB 14/ T1613-2018)鉴定供试资源的抗病性。目前已利用该方法对我国大豆种质资源8000余份资源进行了抗大豆胞囊线虫4号小种鉴定,是行业内通用的方法。具体操作流程如下:
试验在温室中进行。温室温度保持在25℃~30℃,含水量控制在50%~60%。
A、将待鉴定的种质在育苗盘中育苗。
B、将出苗后子叶展开、根系发达、健壮一致的植株移栽到装有灭菌沙土的塑钵中,每钵2株,三次重复。每30个资源设1个感病对照。
C、提前在病土中种植感病品种,在胞囊显盛期,将根系上的胞囊冲洗下来,制备成浓度为400个/ml的卵悬浮液。待鉴定资源在移栽后3天接种卵悬浮液5mL。
D、待感病对照白色胞囊突破根系表皮时即可调查。将待调查植株根系上的土轻轻抖掉或用水冲洗干净、晾干,统计其根上的胞囊数。
E、根据大豆对胞囊线虫4号小种抗性级别划分标准(见表2),对大豆资源抗、感进行评价。
表2:大豆对胞囊线虫4号小种抗性级别划分标准
实施例1:抗大豆胞囊线虫4号小种SSR标记筛选
一、单个标记的筛选
首先用16个资源(8个高抗资源和8个高感资源)进行SSR引物筛选(图1)。从1000对SSR引物中筛选出抗、感资源间差异明显易于辨认的有多态性的引物13对。用这13对引物作为候选引物。
用75份资源(10份抗病资源和66份感病资源)对这13对引物进行PCR扩增进一步复筛。通过分析电泳条带,发现有2个标记可有效区分抗、感资源。每个标记在抗病资源间带型一致,但在感病资源中有少数资源的带型与抗病资源一致。将R记为抗病带型,其余条带记为S,为感病带型。图2-图3为2个标记对75份资源的扩增图谱。
Satt533进行扩增得到的抗病特征条带大小为R1(269 bp),其余不同条带记为S1。
Satt504进行扩增得到的抗病特征条带大小为R2(159 bp),其余不同条带记为S2。
各个标记的引物序列如下:
Satt533 :GAACAGGTAGCAGTAAGTAATG(SEQ ID NO. 1);TCGTTTTGCTTTGTAGAACA(SEQ IDNO. 2)。
Satt504:GCGCATGTGCAACTTGAAAAACA(SEQ ID NO. 3);TCGTTGGTTGACCCAATGTCATC(SEQ ID NO. 4)。
将分子标记鉴定结果与人工接种抗病鉴定结果相比对,若人工接种鉴定结果为抗性的资源扩增出的特征带R,人工接种鉴定结果为感病的资源扩增出的特征带S,则认为两种鉴定结果相符,表3为人工接种抗病鉴定结果与分子标记鉴定结果的比对。2个标记的鉴定结果与人工接种鉴定相符程度在96.000%—93.333%之间。由于标记Satt533引物特异性较差,个别资源未能扩增出条带而无法判断抗感,因此,相符率为96.000%;引物satt504在感病资源中扩增出抗病特征条带,相符率为93.333%。这两个引物的分子鉴定结果与人工接种鉴定结果相符率均未达到100%。表3中所记载的76份资源均来自于山西省种质库。
表3:76份大豆种质资源抗大豆胞囊线虫4号小种鉴定结果
二、标记组合法鉴定大豆对胞囊线虫4号小种的抗性
由于单标记鉴定结果的相符率达不到100%,因此采用标记组合法鉴定大豆对胞囊线虫4号小种的抗性。标记组合包含两种方式,一是多重PCR,将两对以上引物放在同一反应体系中进行PCR扩增;另一种是每个引物单独进行PCR扩增,然后将两对引物的扩增产物混合电泳检测,或每个引物单独PCR扩增后单独进行电泳检测。本实验中由于这2个引物扩增片段大小接近,故采用每个引物单独扩增,单独电泳检测,统计带型后,组合结果进行评价大豆对胞囊线虫4号小种的抗性。
资源:表3中75份资源。标记组合:Satt533和Satt504。
方法:以上述表3资源的DNA为模板进行PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。按照标记组合判断标准,确认每个资源的抗病性。
标记组合及判断标准如下:
Satt533和Satt504:扩增产物经检测同时有R1和R2特征带而无S1和S2带,判断为抗病资源;有S1或S2或同时有S1和S2,判断为感病资源。
结果:标记组合与人工接种鉴定的比对结果见表4。
表4:各标记组合法鉴定大豆对胞囊线虫4号小种抗性的结果
实施例2:用标记组合进行大豆抗胞囊线虫4号小种鉴定:本实施例中使用106份资源,由山西种质库提供。两标记组合:Satt533、Satt504。
方法:以资源基因组DNA为模板进行PCR扩增和扩增产物检测。按Satt533、Satt504两标记组合的单株判断标准,确认该资源为抗病还是感病资源。
判断标准为:扩增产物经检测同时有R1和R2特征带而无S1和S2带,判断为抗病资源;有S1或S2或同时有S1和S2,判断为感病资源。
结果:检测图谱如图4-图5所示。106份资源的标记组合鉴定结果及人工接种鉴定结果见表5,结果表明,106份资源的分子鉴定结果和人工接种鉴定结果符合率达100%。
表5:标记组合鉴定法和人工接种鉴定法的比较结果
序列表
<110> 山西省农业科学院农作物品种资源研究所
<120> 一种鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的方法及专用SSR引物
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gaacaggtag cagtaagtaa tg 22
<210> 2
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
tcgttttgct tgtagaaca 19
<210> 3
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
gcgcatgtgc aacttgaaaa aca 23
<210> 4
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
tcgttggttg acccaatgtc atc 23
Claims (9)
1.一种用于鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的SSR引物组合,其特征在于:该SSR引物组合为Satt533 和Satt504。
2.根据权利要求1所述的一种用于鉴定抗大豆胞囊线虫4号小种大豆资源的SSR引物组合,其特征在于:所述Satt533的一条引物序列如SEQ ID NO. 1所示,另一条引物序列如SEQID NO. 2所示;所述Satt504的一条引物序列如SEQ ID NO. 3所示,另一条引物序列如SEQID NO. 4所示。
3.一种用于鉴定大豆胞囊线虫4号小种抗病资源的SSR引物组合,其特征在于:该SSR引物组合为Satt533 和Satt504。
4.权利要求1所述引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源中应用。
5.根据权利要求4所述的引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源中应用,其特征在于:辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源的方法,具体包括如下步骤:
用所述的引物组合中的每对引物对待测大豆单株基因组DNA进行PCR扩增,得到PCR扩增产物,对所述PCR扩增产物进行检测,根据如下方法确认所述待测大豆单株对抗大豆胞囊线虫4号小种是抗病资源还是感病资源:
A、若所述引物组合中的每对引物所对应的PCR产物均含有抗病特征带,则认为所述待测大豆单株为抗病单株;
B、若所述引物组合中有其中一个引物或一个以上引物所对应的PCR产物不含有抗病特征带,则认为所述待测大豆单株为感病单株;
所述抗病特征带为:Satt533为269 bp的DNA;Satt504为159 bp的DNA。
6.根据权利要求5所述的引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源中应用,其特征在于:所述PCR扩增产物进行检测的方法为测序或非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。
7.根据权利要求5所述的引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源中应用,其特征在于:所述PCR扩增体系为10×PCR含Mg2+buffer 0.1µl/µl,dNTP mixture 0.2mmol/L,Taq酶 0.05 U/µl,SSR标记两条引物的浓度分别为0.5µmol/L,基因组DNA的浓度为5 ng/µl;PCR反应程序为95℃变性5min;95℃变性30s,退火温度退火30s,72℃延伸45s,30个循环;72℃延伸10min。
8.根据权利要求7所述的引物组合在辅助鉴定抗胞囊线虫4号小种大豆资源中应用,其特征在于:所述引物Satt533进行PCR扩增的退火温度为55℃;所述引物Satt504进行PCR扩增的退火温度为58℃。
9.权利要求5中所述方法在抗大豆胞囊线虫4号小种资源筛选或抗大豆胞囊线虫4号小种品种选育中应用。
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---|---|
CN (1) | CN109234447B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111471783A (zh) * | 2019-01-23 | 2020-07-31 | 东北农业大学 | 一种与大豆抗胞囊线虫病抗性位点连锁的分子标记的筛选方法、分子标记、引物及应用 |
CN113678792A (zh) * | 2021-09-24 | 2021-11-23 | 河南省农业科学院 | 一种强致病力大豆胞囊线虫4号生理小种、x12和ly1的简易鉴定方法及应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110083234A1 (en) * | 2009-10-02 | 2011-04-07 | Nguyen Henry T | Quantitative Trait Loci Associated With Soybean Cyst Nematode Resistance And Methods Of Their Use |
CN103347382A (zh) * | 2010-11-05 | 2013-10-09 | 农业基因遗传学有限公司 | 与scn抗性连锁的大豆标志物 |
WO2016068975A1 (en) * | 2014-10-31 | 2016-05-06 | Avon Products, Inc. | Topical compositions and methods of use thereof |
CN106148491A (zh) * | 2015-04-01 | 2016-11-23 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 大豆胞囊线虫抗性相关Map-5147SNP标记的芯片检测方法及应用 |
CN107345256A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-11-14 | 山西省农业科学院农作物品种资源研究所 | 一种基于转录组测序开发山黧豆est‑ssr引物组及方法和应用 |
-
2018
- 2018-11-26 CN CN201811417103.2A patent/CN109234447B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110083234A1 (en) * | 2009-10-02 | 2011-04-07 | Nguyen Henry T | Quantitative Trait Loci Associated With Soybean Cyst Nematode Resistance And Methods Of Their Use |
CN103347382A (zh) * | 2010-11-05 | 2013-10-09 | 农业基因遗传学有限公司 | 与scn抗性连锁的大豆标志物 |
WO2016068975A1 (en) * | 2014-10-31 | 2016-05-06 | Avon Products, Inc. | Topical compositions and methods of use thereof |
CN106148491A (zh) * | 2015-04-01 | 2016-11-23 | 中国农业科学院作物科学研究所 | 大豆胞囊线虫抗性相关Map-5147SNP标记的芯片检测方法及应用 |
CN107345256A (zh) * | 2017-08-22 | 2017-11-14 | 山西省农业科学院农作物品种资源研究所 | 一种基于转录组测序开发山黧豆est‑ssr引物组及方法和应用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
P. B. CREGAN 等: ""An Integrated Genetic Linkage Map of the Soybean Genome"", 《CROP SCI.》 * |
QIJIAN SONG 等: ""Abundance of SSR Motifs and Development of Candidate Polymorphic SSR Markers (BARCSOYSSR_1.0) in Soybean"", 《CROP SCIENCE》 * |
张海平 等: ""大豆抗胞囊线虫4号生理小种SSR标记筛选及优异种质鉴定"", 《大豆科学》 * |
袁翠平 等: ""大豆抗胞囊线虫4号生理小种新品系SSR标记分析"", 《作物学报》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111471783A (zh) * | 2019-01-23 | 2020-07-31 | 东北农业大学 | 一种与大豆抗胞囊线虫病抗性位点连锁的分子标记的筛选方法、分子标记、引物及应用 |
CN113678792A (zh) * | 2021-09-24 | 2021-11-23 | 河南省农业科学院 | 一种强致病力大豆胞囊线虫4号生理小种、x12和ly1的简易鉴定方法及应用 |
CN113678792B (zh) * | 2021-09-24 | 2023-03-14 | 河南省农业科学院 | 一种强致病力大豆胞囊线虫4号生理小种、x12和ly1的简易鉴定方法及应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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CN109234447B (zh) | 2021-06-11 |
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