CN108721167A - 一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物及其在制备化妆品中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物及其在制备化妆品中的用途。所述的防腐剂组合物由藤茶提取物以及防腐剂PE9010复配而成。其中,优选的,所述的藤茶提取物的生药量为3.13‑25mg/ml,所述的防腐剂PE9010的浓度为1v/v%。本发明从藤茶提取物(VTE)与化学防腐剂复配、抗氧剂筛选、适宜pH筛选方面开展研究,确定最佳的应用条件。将实验组方结果加入到化妆品中,按照美国化妆品、盥洗用品和香水工业协会(CTFA)的测试方法开展防腐挑战实验,为藤茶提取物在化妆品领域的应用提供有效的技术手段。
Description
技术领域
本发明涉及一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物及其在制备化妆品中的用途,本发明属于化妆品技术领域。
背景技术
化妆品因为其独特的成分,含有大量油脂及适宜的水分和pH值,容易滋生细菌。因而化妆品中必须加入一定的防腐剂防止腐坏。现阶段消费者更加崇尚绿色环保的消费理念,同时随着技术的不断发展,科技人员对于植物源抑菌物质的分离、纯化手段更加丰富。近年来,国内外立法机构不断限制对于化妆品化学防腐剂的使用种类和含量。以植物成分为防腐剂的发明专利近年也呈现不断增多的趋势。中国江南大学研究人员2011年申请的具有防腐功能的蚕叶提取物获得审批。美国哥伦比亚大学理事会在2012年申请并获取了以马齿苋、金盏花提取物复配达到抑菌目的专利。
藤茶是一种非常古老的传统中草药,为我国民间广泛使用的药食两用植物。藤茶提取物具有抑菌、抗氧化、抗炎等作用。已有研究表明藤茶提取物对多种致病菌具有抑制作用。曹敏惠等人研究表明采用乙醇超声提取法所得藤茶提取物对拟茎点霉属、茎点霉属、链格孢属、拟盘多毛孢属和刺盘孢属的抑制率可达80.9%、85.0%、68.3%、24.0%和89.6%。蒋旭东等人研究发现大孔树脂处理后的藤茶提取物对口腔变形链球菌具有抑制作用,最小抑菌浓度为3.13g/L。
植物源防腐剂的使用虽然绿色环保,但是也其自身的局限性。主要表现为:抑菌效果受到温度、pH制约,效果不稳定,抑菌广谱性、机理有待深入研究。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物及其在制备化妆品中的用途。
为了达到上述目的,本发明采用了以下技术手段:
本发明的一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物,其由藤茶提取物以及防腐剂PE9010复配而成。
其中,优选的,在所述的防腐剂组合物中,所述的藤茶提取物的生药量为3.13-25mg/ml,所述的防腐剂PE9010的浓度为1v/v%。
其中,优选的,在所述的防腐剂组合物中,所述的藤茶提取物的生药量为6.25mg/ml,所述的防腐剂PE9010的浓度为1v/v%。
其中,优选的,所述的藤茶提取物按照以下方法制备得到:将藤茶干燥后粉碎过筛,过滤掉药物杂质,加入去离子水,料液比为1:10,浸泡30min,沸水浴提取60min,4层医用纱布过滤、浓缩后,即得。
进一步的,本发明还提出了所述的防腐剂组合物在制备化妆品中的用途。
一种含有本发明所述的防腐剂组合物的膏霜,优选的,所述的膏霜中还含有抗氧化剂组合,所述的抗氧化剂由生药量为37mg/mL甘草提取物、50mg/mL黄芩提取物、37mg/mL诃子提取物、0.1w/v%BHT、0.05w/v%VE、0.05w/v%生育酚乙酸酯以及0.1w/v%VC组成。
其中,优选的,所述的膏霜的pH值为6.0。
本发明从藤茶提取物(VTE)与化学防腐剂复配、抗氧剂筛选、适宜pH筛选方面开展研究,确定最佳的应用条件。将实验组方结果加入到化妆品中,按照美国化妆品、盥洗用品和香水工业协会(CTFA)的测试方法开展防腐挑战实验(方碧娟.化妆品用防腐剂的复配及其防腐效果评价[D].上海应用技术大学,2016.),为藤茶提取物在化妆品领域的应用提供有效技术手段。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明,本发明创造的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明创造的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明创造的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改的替换均落入本发明创造的保护范围内。
实施例1含有藤茶提取物的抑菌组合物的建立
1、主要材料与仪器
大肠埃希氏菌(Escherichia coli)ATCC25922、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)ATCC6538、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC27853、白色念珠菌(Candida albicans)ATCC10231、(Aspergillus niger)ATCC16404,均由本实验室提供;藤茶,北京同仁堂药店;大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌等细菌采用营养琼脂培养基,黑曲霉和白色假丝酵母等真菌采用孟加拉红培养基,均为生化试剂,北京陆桥技术有限责任公司;营养肉汤液体培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基,胰蛋白胨大豆肉汤培养基,均为生化试剂,北京陆桥技术有限责任公司;PE9010,生化试剂,北京拜尔迪生物技术有限公司;其他试剂均为国产分析纯。AV-100超净工作台,西班牙TELSTAR公司;SHP-150生化培养箱,上海森信实验仪器有限公司;KYC-100C摇床震荡培养箱,上海福玛有限公司;4K1S超速冷冻离心机,德国sigma公司;YXQ-LS-50S11高压蒸汽灭菌锅,上海博讯实业有限公司。
2、实验方法
2.1提取工艺
藤茶提取物的制备:将藤茶干燥后粉碎过筛(30目),过滤掉药物杂质,称取粉末10g,加入去离子水,料液比为1:10,浸泡30min,沸水浴提取60min,4层医用纱布过滤,收集药液于烧杯中,浓缩体积至40mL,冷却至室温,得到生药量为250mg/mL,存放在冰箱4℃备用。
甘草提取物的制备:将甘草干燥后粉碎过筛(30目),过滤掉药物杂质,称取粉末10g,加入去离子水,料液比为1:10,浸泡30min,沸水浴提取60min,4层医用纱布过滤,收集药液于烧杯中,浓缩体积至40mL,冷却至室温,得到生药量为250mg/mL,存放在冰箱4℃备用。
黄芩提取物的制备:将黄芩根干燥后粉碎过筛(30目),过滤掉药物杂质,称取粉末10g,加入去离子水,料液比为1:10,浸泡30min,沸水浴提取60min,4层医用纱布过滤,收集药液于烧杯中,浓缩体积至40mL,冷却至室温,得到生药量为250mg/mL,存放在冰箱4℃备用。
诃子提取液的制备:将诃子的成熟果实干燥后粉碎过筛(30目),过滤掉药物杂质,称取粉末10g,加入去离子水,料液比为1:10,浸泡30min,沸水浴提取60min,4层医用纱布过滤,收集药液于烧杯中,浓缩体积至40mL,冷却至室温,得到生药量为250mg/mL,存放在冰箱4℃备用。
2.2藤茶提取物的抑菌效能测试
将处于对数生长期的E.coli和S.aureus分别接种到营养肉汤培养基中(菌悬液浓度为1×107CFU/mL),分别加入等量的不同浓度的藤茶提取物,使其终浓度分别为生药量50、25、12.5、6.25、3.2、1.6mg/mL,同时以无菌水作为空白对照组,于37℃、120r/min震荡培养24h后观察营养肉汤颜色澄清的最小稀释浓度为最小杀菌浓度(MIC)。再将试管内菌液涂布平板,观察菌体的生长情况,微生物不生长的最小稀释浓度即为MBC值。
2.3组方实验
1)最适溶剂pH的选择:
用柠檬酸-柠檬酸钠体系配置不同酸碱度的水,pH分别为5,6,7。将浓缩后的藤茶提取物(生药量为250mg/mL)用不同pH水稀释至生药量为25mg/mL。牛津杯抑菌实验根据王玲等(王玲,郭志廷,杨峰,等.中药常山散的体外抑菌作用研究[J].中国畜牧兽医.2017,44(2):594-600.)实验略作修改。利用胰蛋白胨大豆琼脂固体培养基将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌活化14h,取固体培养基上的单菌落转移至营养肉汤活化24h,营养肉汤活化后的细菌稀释至106CFU/mL,取100微升涂布固体营养琼脂培养基上。将已灭菌处理的牛津杯放置于涂菌的固体培养基上,一个培养皿上放入三个牛津杯,呈等边三角形放置,向每个牛津杯内加入200微升的稀释后的藤茶提取物。每个试样三组平行。37℃培养箱中培养24h,游标卡尺测量抑菌圈直径大小。分别在第0,7天进行抑菌实验,检验不同溶剂pH的条件下藤茶提取物的稳定性。
2)抗氧化剂的筛选:
根据文献调研筛选出不同的抗氧化剂组合,抗氧化剂组合1:0.1w/v%BHT+0.05w/v%VE+0.05w/v%生育酚乙酸酯+0.1w/v%VC。抗氧化剂组合2:37mg(生药量)/mL甘草提取物+50mg(生药量)/mL黄芩提取物+37mg(生药量)/mL诃子提取物+0.1w/v%BHT+0.05w/v%VE+0.05w/v%生育酚乙酸酯+0.1w/v%VC。将25mg(生药量)/mL的藤茶提取物与不同抗氧化剂组合复配。抑菌效能实验方法参照最适溶剂pH的选择里的牛津杯实验测试方法。分别在第0,7天进行抑菌实验以检验不同抗氧化剂的效能。
3)化学防腐剂复配:
将25mg(生药量)/mL的藤茶提取物与1v/v%的化学防腐剂PE9010复配使用,分别在第0,7天进行抑菌实验,参照最适溶剂pH的选择中牛津杯实验测试方法。
3结果与讨论
3.1藤茶提取物的抑菌效能测试结果
由表1可知,藤茶提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为6.25、6.25mg/mL,最低杀菌浓度(MBC)分别为25.0、25.0mg/mL。抑菌效能测试结果表明藤茶提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制能力相当,MIC值与MBC值相同。
表1藤茶提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC、MBC
抑菌结果(单位:mg/mL) | E.coli | S.aureus |
MIC | 6.25 | 6.25 |
MBC | 25 | 25 |
3.2组方筛选实验结果
1)最适溶剂pH的选择:
样品分别在常温、-20℃低温、45℃高温、-20℃低温与45℃高温冷热交替4种不同的环境下保存7天检验抑菌活性的稳定性。由表2和表3可知,VTE在不同pH的状态下对E.coli、S.aureus均具有抑菌性,且pH的值越小,VTE的抑菌活性越强。由表2可知,第0天时,pH=5时25mg/ml VTE对E.coli的抑菌圈直径为17.6±0.2mm,而pH=6,7时,25mg/ml VTE对E.coli的抑菌圈直径分别为16.4±0.4mm、15.8±0.3mm。在7天低温条件下时,pH=5时25mg/ml VTE对E.coli抑菌圈直径为16.7±0.2mm,而pH=6,7时其抑菌圈直径分别为15.6±0.2mm,14.5±0.2mm。而在7天高温条件下,25mg/ml VTE在pH=5,6,7时对E.coli抑菌圈直径分别为14.6±0.7mm、14.0±0.7mm、13.2±0.3mm;由表3可知,第0天时,VTE对S.aureus的抑菌圈直径在pH=5时最大,直径为17.1±0.5mm。在7天稳定性实验后,在低温与高温两种条件下,VTE在pH=5时的抑菌圈直径大于pH=6、7时,pH=6时的抑菌圈直径大于pH=7的抑菌圈直径。由此表明,VTE在pH=5的条件下对E.coli、S.aureus抑菌活性更强,7天不同条件下的稳定性实验表明,不同pH对E.coli、S.aureus抑菌效果强弱顺序为:pH=5>pH=6>pH=7>。综合人体皮肤实际pH的情况,最终确定在pH=6为膏霜的pH。
表2藤茶提取物在不同pH的条件下对E.coli的抑菌活性
表3藤茶提取物在不同pH的条件下对S.aureus的抑菌活性
2)抗氧化剂的筛选:
由表4和表5可知,藤茶提取物在与抗氧化剂组合1与抗氧化剂组合2复配后对E.coli和S.aureus同样具有抑菌活性。由表4可知,在第0天,25mg/ml VTE对E.coli的抑菌圈直径为18.1±0.8mm,而与抗氧化剂组合1、2复配后对E.coli的抑菌圈直径分别为18.6±0.5、18.8±0.6mm。第7天时,25mg/ml VTE无抗氧化剂添加时,其抑菌活性在4种不同条件下均有降低,低温状态下抑菌圈下降到15.5±0.3mm,高温环境下抑菌圈直径下降至13.6±0.4mm。相比较于对照组,VTE与抗氧化剂组合1复配后抑菌圈直径降低幅度减小,第0天时抑菌圈直径为18.6±0.5mm,第7天时低温状态下抑菌圈直径为16.4±0.3mm,高温状态下抑菌圈直径为14.7±0.2mm。由VTE与抗氧化剂组合2复配使用,抑菌活性稳定性的维持效果优于抗氧化剂组合1,第7天时,低温状态下抑菌圈直径为17.7±0.5mm,高温状态下抑菌圈直径为15.6±0.4mm;表5的实验结果可知,相比于对照组,抗氧化剂的加入使得VTE在第7天时对S.aureus的依然具有较好的抑菌活性,由降低趋势上发现抗氧化剂组合2的加入维持VTE抑菌活性的作用强于抗氧化剂组合1。综合上述结果可知,抗氧化剂组合2最应用于最终的膏霜配方中。
表4藤茶提取物与抗氧化剂组合复配对E.coli的牛津杯抑菌圈直径
表5藤茶提取物与抗氧化剂组合复配对S.aureus的牛津杯抑菌圈直径
3)化学防腐剂复配:
由表6可知,25mg/ml VTE与1w/v%PE90 10复配在第0天时对E.coli、S.aureus抑菌圈直径分别为18.5±0.5mm、18.9±0.2mm。经过7天不同状态下的保存后,常温、-20℃低温、45℃高温、-20℃低温与45℃高温冷热交替4种不同的环境下复配物对E.coli的抑菌直径分别为17.1±0.3mm、17.6±0.3mm、16.6±0.4mm、17.0±0.3mm,对S.aureus抑菌圈直径分别为17.4±0.4mm、17.9±0.6mm、16.7±0.3mm、17.6±0.5mm。7天不同条件下的稳定实验结果表明25mg/ml VTE与1v/v%PE9010复配对E.coli、S.aureus抑菌作用效果衰减变化不明显,二者复配使用可用于化妆品膏霜体系中。
表6 25mg/ml VTE与1v/v%PE9010复配对E.coli、S.aureus的抑菌圈直径
4结论
藤茶提取物对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用。组方实验表明藤茶提取物在酸性条件、抗氧化剂组合2存在时有利于抑菌活性的稳定。藤茶提取物与1v/v%PE9010复配对细菌的抑菌效果良好。
实施例2含有藤茶提取物的抑菌组合物在制备化妆品中的用途
1、膏霜的制备
考虑藤茶提取物的颜色会在实际产品中的使用中影响观感,在膏霜的制备过程中将藤茶提取物的浓度降低为6.25mg(生药量)/mL。将复配型防腐剂一起加入油相中,油相、水相分别置于恒温水洛锅加热至80℃,采用7000rpm均质水相,同时将油相组分混合均匀后缓慢倒入到水相组分中,均质3min后搅拌冷却至室温,最终形成膏霜状,调节pH值为6.0。膏霜配方如表7所示。
表7膏霜配方表
2、复配防腐体系的微生物挑战试验
利用胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA),胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)活化细菌、真菌14h,将细菌、真菌分别接种至营养琼脂培养基、孟加拉红培养基上培养24h,用已灭菌处理的生理盐水将细菌的浓度调整到1-9*109CFU/mL,采用血球计数板计数法将真菌的孢子浓度利用生理盐水调整为1-9*107CFU/mL。在实验第0天将实验菌株加入到膏霜样品中,混合均匀,使细菌终浓度为1-9*106CFU/mL,真菌样品终浓度为1-9*105CFU/mL,采用平板计数法测量第0天即初始菌浓度。将样品置于25℃的培养箱中。在第2,7,14,21,28天利用平板计数法统计菌落数。
评价标准:细菌的菌落数的减少在第2天时不低于99%(2log),第7天时不低于99.9%(3log);霉菌的菌落数的减少在第7天时不低于90%(1log),第14天时不低于99%(2log)并且在28天内活菌数要持续下降。
3、复配防腐体系在膏霜类中的微生物挑战实验结果
考虑到藤茶提取物的颜色对膏体的影响,应用于膏霜中的VTE浓度降低为6.25mg/mL(1MIC)。VTE与PE9010复配情况如表8所示。由表9可知,防腐体系1,2,3在第2天时使得菌落数量至少减少2log,其中防腐体系2即6.25mg/mL VTE+1v/v%PE9010复配在第2天时,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的菌落数检测依次为3.0*103、1.3*103、6.2*103,菌落数降低3log。第7天时,防腐体系1,2,3菌落数量下降4log以上,其中防腐体系2中大肠杆菌、绿脓杆菌的菌落数分别为1.0*101、1.9*101,下降了5log。第14、21、28天细菌菌落数不断降低;防腐体系1,2,3在第7天时白色念珠菌菌落数分别为2.7*102、6.1*102、9.7*102,黑曲霉菌落数分别为7.6*102、5.7*102、4.1*103,表明在第7天时霉菌数量下降至少3log。第14天时,防腐体系1,2,3的至少下降4log,此后菌落数不断降低。对照组由于无防腐剂的加入,在第28天菌落数量依然较多。根据评价标准可知,防腐体系1,2,3皆能通过防腐挑战实验。
表8防腐体系复配
表9膏霜中添加复合防腐剂的微生物挑战试验结果
从上述结果可以看出,当3.13mg/mL VTE+1v/v%PE9010、6.25mg/mL VTE+1v/v%PE9010、12.50mg/mL VTE加入膏霜体系中,膏体样品完全可以通过微生物挑战。
Claims (8)
1.一种含有藤茶提取物的防腐剂组合物,其特征在于,由藤茶提取物以及防腐剂PE9010复配而成。
2.如权利要求1所述的防腐剂组合物,其特征在于,所述的藤茶提取物的生药量为3.13-25mg/ml,所述的防腐剂PE9010的浓度为1v/v%。
3.如权利要求1所述的防腐剂组合物,其特征在于,所述的藤茶提取物的生药量为6.25mg/ml,所述的防腐剂PE9010的浓度为1v/v%。
4.如权利要求1所述的防腐剂组合物,其特征在于,所述的藤茶提取物按照以下方法制备得到:将藤茶干燥后粉碎过筛,用去离子水浸泡30min后沸水浴提取60min,其中料液比为1:10,过滤、浓缩后,即得。
5.权利要求1-4任一项所述的防腐剂组合物在制备化妆品中的用途。
6.一种护肤用膏霜,其特征在于,含有权利要求1-4任一项所述的防腐剂组合物。
7.如权利要求6所述的膏霜,其特征在于,所述的膏霜中还含有抗氧化剂组合,所述的抗氧化剂由生药量为37mg/mL甘草提取物、50mg/mL黄芩提取物、37mg/mL诃子提取物、0.1w/v%BHT、0.05w/v%VE、0.05w/v%生育酚乙酸酯以及0.1w/v%VC组成。
8.如权利要求6或7所述的膏霜,其特征在于,所述的膏霜的pH值为6.0。
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CN105213250A (zh) * | 2015-09-08 | 2016-01-06 | 上海应用技术学院 | 一种复配型天然抗菌剂及其制备方法和在化妆品中的应用 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
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刘胜贵等: "显齿蛇葡萄提取物体外抑菌试验的研究", 《氨基酸和生物资源》 * |
刘艳凤等: "甘草、诃子提取物复合抗氧化剂对葵花籽油抗氧化作用的研究", 《食品安全质量检测学报》 * |
崔凤玲等: "金银花提取物在护肤品中抑菌作用的研究", 《香料香精化妆品》 * |
骆宇晨: "一种新型防腐体系的效能研究", 《香料香精化妆品》 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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CN108721167B (zh) | 2021-04-30 |
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