CN108663469A - 一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法。首先将脱脂豆粕除杂，除杂后粉碎，得到豆粕粉；将豆粕粉加入溶剂中浸泡脱脂；脱脂后的豆粕粉依次进行自然干燥和烘干，得到豆粕粉样品；将豆粕粉样品进行混匀，混匀后取样进行均匀性检测；混匀后的豆粕粉样品进行再次干燥，干燥后分装，分装后样品进行辐照灭活，最后进行真空包装，包装后在‑20℃条件下保存。利用本发明制备了豆粕氨基酸成分分析标准物质，解决了现有技术中存在的关键问题，填补了国内尚无豆粕粉样氨基酸标准物质的空白，为提高我国大众健康、食品、环境等方面标准物质的研制水平奠定了基础。

Description

一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法
一、技术领域：
本发明涉及一种标准物质的制备方法，特别是涉及一种粉状豆粕氨基酸成 分分析标准物质的制备方法。
二、技术背景：
豆粕是非常优良的植物蛋白原料，富含蛋白质，氨基酸组成平衡、营养丰 富，成为饲料中最主要的蛋白质来源，同时市场上也存在着掺假豆粕，而对蛋 白质原料的品控，氨基酸分析是最可靠和最有效的手段。目前，氨基酸分析主 要方法有用氨基酸自动分析仪的国家标准方法GB/T 18246和柱前衍生反相高效 液相色谱法。根据国家标准进行相应检测，需要相应的饲料标准物质。目前， 我国有氨基酸混合溶液标准物质(编号：GBW(E)100062)，但是以豆粕作为基 体的氨基酸成分分析标准物质尚为空白。
基体标准物质是测量过程控制、方法确认、仲裁和考核验证评价的重要载 体，是保证测量结果可靠、提升实验室检测能力的重要支撑。检测饲料基体样 品时，基体效应往往是系统误差来源之一，影响结果的准确与否。应尽可能选 择用户实际检测样品相匹配的基体标准物质，减少实验室的运行成本，提高检 测结果的有效性和可靠性。豆粕中氨基酸成分分析标准物质的研制，不仅可以 作为一种标准量具，来确定样豆粕样品中氨基酸成分含量；同时，它也可以作 为一种标准样品，来检测样品前处理的方法是否合理。这对于豆粕的前处理方 法也起到了一个监督检验的作用，使得豆粕的安全检验更为合理和严谨。目前， 豆粕的前处理以及分析定值方法研究一直是研究的关键，所以迫切需要研制一 种豆粕基体氨基酸标准物质。
三、发明内容：
本发明要解决的技术问题是：为了解决目前尚无豆粕基体氨基酸标准物质 的缺陷，本发明提供一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法。
为了解决上述问题，本发明采取的技术方案是：
本发明提供一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，所述制备 方法包括以下步骤：
a、去杂：首先将脱脂豆粕进行筛选除杂；
b、粉碎：将步骤a除杂后的脱脂豆粕进行粉碎，粉碎后过筛得到细度为40～ 60目的豆粕粉；
c、脱脂：将步骤b粉碎后得到的豆粕粉完全浸润到溶剂中进行浸泡，浸泡 过程中每2～4小时充分搅拌一次，浸泡时间为12～15小时，浸泡后进行过滤， 滤掉溶剂，得到脱脂的豆粕；
d、干燥：将步骤c脱脂后得到的豆粕粉自然阴凉干燥4～6小时，自然干燥 后放入真空干燥箱中进行烘干，烘干后得到豆粕粉样品；
e、混匀：将步骤d得到的豆粕粉样品置于混合机中进行充分混合，混合时 间为2～10分钟，混合均匀后对混合机中不同部分的样品进行取样，取样后进 行均匀性检测；
f、再次干燥：将步骤e混匀后的豆粕粉样品置于干燥箱中进行干燥，干燥 至豆粕粉样品中水分含量＜1％；
g、分装：将步骤f干燥后的豆粕粉样品分装于玻璃瓶中，并盖紧螺纹盖， 封口样品规格为5g/瓶；
h、辐照灭活：将分装的样品采用60Coγ射线辐照灭活，剂量强度为7kGy～10kGy，辐照灭活时间为2小时；
i、将步骤h辐照灭活后的样品采用铝箔复合袋真空包装，包装后在-20℃条 件下保存。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤a中采用 20目的编织筛对脱脂豆粕进行筛选除杂。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤c中所述溶 剂为无水乙醚、石油醚、丙酮、正己烷、甲醇和乙醇中的任一种。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，所述溶剂为石 油醚或无水乙醚。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤d中所述 自然干燥是将脱脂后的豆粕粉平铺置于搪瓷盘中在自然环境非阳光直射条件下 进行干燥；
所述烘干时烘干温度为60～80℃，烘干时间为1～2小时。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤e中所述 混合机采用V型混合机或卧式混合机。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤e中所述 均匀性检测：抽取混合后的三个样品，参照GB/T 5918-2008《饲料产品混合均 匀度的测定》进行均匀性初步检测，再用方差分析法对检测结果进行均匀性统 计检验。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤f中所述干 燥箱为真空干燥箱或鼓风干燥箱，干燥温度为80～105℃，干燥时间为3～6小 时。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤g中所述 玻璃瓶为带螺纹口的棕色瓶。
根据上述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，步骤h中剂量 强度为7kGy。
本发明的积极有益效果：
1、利用本发明技术方案制备的豆粕基体标准物质更接近实际样品，能够保 证豆粕中氨基酸检测项目更好的量值溯源，结果更加可靠和可比，解决了基体 差异引起的检测结果差异问题，提高了量值溯源水平，为豆粕品质的判定提供 了依据。
2、利用本发明技术方案制备的豆粕基体标准物质容易获得、成本低。本发 明制备的标准物质稳定性好，可在-20℃条件下长期保存(至少一年)，具有较好 的均匀性和稳定性。
3、本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质，解决了现有技术中存在的 关键问题，填补了国内尚无豆粕粉样氨基酸标准物质的空白，为提高我国大众 健康、食品、环境等方面标准物质的研制水平奠定了基础。
4、本发明选取了豆粕作为基体，该基体标准物质蛋白质浓度含量适中，使 用方便、品质好。
5、豆粕氨基酸成分分析标准物质的研制，在企业产品质量的控制、产品标 准的制定、产品检验和认证机构的质量控制和评价、实验室认可方面都有着重 要的意义，该标准物质的研制对我国饲料工业的健康发展，提高畜产品质量起 到积极的推动作用。
四、附图说明：
图1衍生反应后的17种氨基酸混合溶液标准物质色谱图；
图2衍生试剂空白色谱图；
图3衍生反应后的本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质样品的色谱图。
五、具体实施方式：
以下结合实施例进一步阐述本发明，但并不限制本发明技术方案保护的范 围。
实施例1：
本发明粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，该制备方法的详细 步骤如下：
a、去杂：首先将市售的脱脂豆粕采用20目的编织筛进行筛选除杂；
b、粉碎：将步骤a除杂后的脱脂豆粕进行粉碎，粉碎后过筛得到细度为60 目的豆粕粉；
c、脱脂：将步骤b粉碎后得到的豆粕完全浸润到溶剂无水乙醚中进行浸泡， 浸泡时间为12小时，浸泡过程中每2个小时进行充分搅拌，浸泡后进行过滤， 滤掉溶剂无水乙醚，得到脱脂的豆粕；
d、干燥：将步骤c脱脂后得到的豆粕粉自然干燥6小时(自然干燥为：将 脱脂后的豆粕粉平铺置于搪瓷盘中在自然环境非阳光直射条件下进行干燥)，自 然干燥后放入真空干燥箱中进行烘干，烘干温度为80℃，烘干时间为2小时(烘 干时将豆粕粉平铺置于搪瓷盘中，放置到真空干燥箱进行烘干)，烘干后得到豆 粕粉样品；
e、混匀：将步骤d得到的豆粕粉样品置于V型混合机中进行充分混合，混 合时间为10分钟，混合均匀后对混合机中不同部分的样品进行取样，取样后进 行均匀性检测；
f、再次干燥：将步骤e混匀后的豆粕粉样品置于干燥箱中进行干燥，干燥 温度为80℃，干燥时间为6小时，干燥后所得豆粕粉样品中水分含量＜1％；
g、分装：将步骤f干燥后的豆粕粉样品分装于带螺纹口的玻璃瓶中，并盖 紧螺纹盖，封口样品规格为5g/瓶，共分装500瓶；
h、辐照灭活：将分装的样品采用60Coγ射线辐照灭活，剂量强度为7 kGy， 辐照灭活时间为2小时；
i、将步骤h辐照灭活后的样品采用铝箔复合袋真空包装，包装后在-20℃条 件下保存。
以下是对实施例1所得豆粕氨基酸成分分析标准物质样品的相关测试：
(一)各处理阶段豆粕样品的相关检测结果
本发明采用的原料市售脱脂豆粕和经过再次干燥(再次干燥后所得豆粕粉 样品中水分含量＜1％)后豆粕粉样品的相关成分检测结果详见表1。
表1原料市售脱脂豆粕和经过再次干燥后豆粕粉样品的相关成分检测结果
蛋白质(％) 脂肪(％) 水分(％)
市售脱脂豆粕 46.2 0.4 11.3
再次干燥后豆粕粉样品 51.5 1.1 0.9
本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法过程中，经过分装后所得 样品在辐照灭活前后的检测结果详见表2和表3。
表2经过分装后所得样品在辐照灭活前的检测结果
名称 细菌总数(个/g) 霉菌总数(个/g)
豆粕 3700000 <10
表3经过分装后所得样品在辐照灭活后的检测结果
注明：由以上数据可知，用60Coγ的剂量强度为7kGy射线辐照灭活2小时 为最佳辐照剂量。
(二)本发明制备所得豆粕氨基酸成分分析标准物质样品的检验与定值
本发明采用柱前衍生化-超高效液相色谱法进行分析测定，具体的测定条件 如下：
仪器：超高效液相色谱，配紫外-可见光检测器(Waters，美国)；
液相色谱条件：
色谱柱：AccQ-TAGTM ULTRA C18(2.1×100mm，1.7μm)；
流动相：A：AccQ·Tag洗脱液A(稀释10倍)，B：AccQ·Tag洗脱液B；
流速：0.7mL/min；
柱温：55℃；
紫外检测波长：260nm；
进样量：1μL；
按照表4中设置流动相的梯度，单次运行时间为9.5min。
表4衍生法的液相梯度表
本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质采用柱前衍生化-超高效液相色 谱法进行分析的处理过程：
1)氨基酸成分分析标准物质的前处理：
酸水解：取0.3g本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质加入到10mL、 浓度为6mol/L的盐酸溶液中，然后在110℃条件下水解22小时；水解后过滤到 50mL容量瓶中，用水定容，制得豆粕氨基酸成分分析标准物质的水解样品。
2)AccQ-Fluor衍生试剂的配制：
首先将AccQ-Fluor衍生剂粉末进行稀释，用移液器吸取1mL的乙腈加入 到衍生试剂瓶中加盖密封，AccQ-Fluor衍生剂粉末的质量为1mg，涡旋混合15 秒钟；然后在预热到55℃的烘箱内加热，以溶解所有的衍生试剂粉末，加热时 间为8分钟，得到配制的AccQ-Fluor衍生试剂。
3)17种氨基酸混合溶液标准物质和本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标 准物质样品的衍生反应：
17种氨基酸混合溶液标准物质的衍生反应(将氨基酸转化为稳定的AQC 衍生物)：将烘箱开启并恒温至55℃，取10μL17种氨基酸混合溶液标准物质注 入清洁的衍生管底部，加70μL AccQ-Fluor Buffer1硼酸缓冲液到衍生管中，涡 旋混合，最后吸取20μL上述配制的衍生试剂，在涡旋状态下加到衍生管中， 并保持涡旋混合15秒，将涡旋混合后所得衍生产物转移至衍生专用的微量进 样小瓶中，得到衍生反应的17种氨基酸混合溶液标准物质。
本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质样品的衍生反应：同上述17 种氨基酸混合溶液标准物质的衍生反应。
衍生用到的试剂均购买自Waters公司生产的AccQ-Fluor试剂包。
将上述衍生反应后的17种氨基酸混合溶液标准物质、本发明豆粕氨基酸 成分分析标准物质样品均放在55℃恒温干燥箱内加热10min，然后冷却至室温， 待测。根据上述限定的柱前衍生化-超高效液相色谱法的测定条件对衍生反应后 的17种氨基酸混合溶液标准物质、衍生试剂空白、衍生反应后的本发明豆粕 氨基酸成分分析标准物质样品分别进行了检测，得到的色谱图详见附图1-3。
附图1中衍生后17种氨基酸混合溶液标准物质的色谱图，其中包括试剂 峰在内有18个色谱峰，按照保留时间的先后顺序依次为：His，Ser，Arg，Gly， Asp，Glu，Thr，Ala，Pro，Deriv(衍生试剂峰)，Cys，Lyr，Tyr，Met，Val， Ile，Leu，Phe。
通过对照17种氨基酸混合溶液标准物质、衍生试剂空白、衍生反应后的 本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质样品的色谱图，可以确定本发明所制备的 标准物质中氨基酸的种类及其含量。
(四)对本发明所制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质的均匀性、稳定性 考察，以及定值和不确定度的分析：
1)均匀性检验：
按照国家一级标准物质技术规范(JJG 1006－1994)的要求，采用方差分 析进行均匀性试验。从本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质样品中抽取 25个样品用于均匀性检验，每个样品测定3次进行方差分析，通过组间方差和 组内方差的比较来判断各组测量值之间有无系统偏差。
通过以上均匀性检验，所得本发明样品均匀性检验结果详见表5。
表5本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质的均匀性评价结果
根据检测评价结果判定本发明制备的氨基酸成分分析标准物质样品是均匀 的。
2)稳定性考察：
长期稳定性考察是将本发明同时制备的多个样品(一批样品)，在相同的条 件下随着时间的延续进行测量。在24个月内，对本发明制备的豆粕氨基酸成分 分析标准物质进行了7次稳定性考察，分别在样品制备当天、1个月后、2个月 后、3个月后、6个月后、12个月后和24个月后对制备的标准物质随机抽取3 支，每支测3次，放置于-20℃和4℃下保存，进行长期稳定性考察。
选用直线拟合法对其稳定性进行评价。以X代表时间，以Y代表标准物质 的特性值，拟合成一条直线，则有斜率β1
截距由下式计算：
直线的标准偏差可由下式计算：
当|β1|＜t0.95,n-2·s(β1)时斜率是不显著的，判为未观测到不稳定性。
短期稳定性考察采用同步稳定性研究，是引入使得所有稳定性研究中的测 量在重复性发生，即仅进行一轮校准。本发明豆粕中氨基酸成分分析标准物质 在运输过程、实验室使用温度等条件下的稳定性，分别将标准物质在-20℃、4℃、 室温、40℃放置1天、2天、4天、7天、15天和30天，监测标准物质中氨基 酸的含量，对结果进行稳定性评价。
通过以上长期稳定性考察，所得长期稳定性考察结果详见表6和表7。
表6本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的长期稳定性评价结果(4℃)
表7本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的长期稳定性评价结果(-20℃)
长期稳定性考察结果：分析结果表明本发明标准物质在2年时间内稳定性 良好。
通过以上短期稳定性考察，所得短期稳定性考察结果详见表8和表9。
表8本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的稳定性考察结果(室温：20±5℃)
表9本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的稳定性考察结果(40℃)
短期稳定性考察结果：以上分析结果表明本发明标准物质在运输条件下30 天内是稳定的，满足实际运输要求。
4)标准物质的定值：
按照ISO导则35《标准物质/标准样品定值的一般原则和统计方法》要求， 本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质的定值方法采用多个实验室合作定 值方法。邀请了河南海瑞正检测技术有限公司、农业部农产品质量监督检验测 试中心、河南省饲料产品质量监督检验站(省兽药监察所)、河南牧经食品与饲 料检测有限公司、河南省粮油饲料产品质量监督检验中心共同定值。
参与合作定值的单位名称、使用的分析仪器及检测依据分别为：
表10定值实验室汇总表
每家参与合作定值的单位，都随机抽取本发明制备的豆粕氨基酸成分分析 标准物质11支，其中一支作为练习样品，其它10支样品进行前处理，每个处 理后的子样重复测定2次。样品的前处理均采用国家标准方法GB/T 18246-2000 中的酸处理方法。样品的测量方法均采用国家标准方法GB/T 18246-2000，各实 验室由于仪器型号不同，具体测量方法按仪器说明书操作。
根据上述实验，所得定值结果详见表11。
表11本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的各实验室平均定值数据汇总
氨基酸 实验室1 实验室2 实验室3 实验室4 实验室5 实验室6 认定值
天门冬氨酸 5.684 5.651 5.632 5.640 5.631 5.611 5.64
苏氨酸 2.007 1.983 1.864 2.096 2.023 2.103 2.01
丝氨酸 2.456 2.422 2.369 2.461 2.408 2.461 2.43
谷氨酸 9.482 9.503 9.418 9.187 9.435 9.334 9.39
甘氨酸 2.138 2.076 2.088 2.183 2.171 2.290 2.16
丙氨酸 2.145 2.160 2.111 2.221 2.240 2.322 2.20
胱氨酸 0.530 0.575 0.555 0.564 0.554 0.540 0.55
缬氨酸 2.447 2.444 2.472 2.340 2.443 2.344 2.41
蛋氨酸 0.486 0.476 0.459 0.470 0.464 0.445 0.47
异亮氨酸 2.197 2.258 2.205 2.382 2.269 2.322 2.27
亮氨酸 3.834 3.813 3.860 3.923 3.818 3.827 3.85
酪氨酸 1.708 1.689 1.630 1.521 1.602 1.732 1.65
苯丙氨酸 2.779 2.795 2.809 2.639 2.716 2.621 2.73
赖氨酸 3.276 3.371 3.346 3.248 3.285 3.136 3.28
组氨酸 1.428 1.400 1.396 1.425 1.421 1.382 1.41
精氨酸 3.651 3.790 3.719 3.539 3.649 3.657 3.67
脯氨酸 2.422 2.417 2.287 2.594 2.447 2.576 2.46
合作定值结论：由于参与合作定值的单位所提供的结果均符合要求，因此本 项目定值最终是合作定值实验室提供结果的平均值，如表11所示。
5)不确定度分析：
本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质的不确定度来源有六部分组 成：氨基酸混合溶液标准物质引入的不确定度、天平称量引入的不确定度、峰 面积比测量引入的不确定度、定值数据统计引入的不确定度、均匀性差异引入 的不确定度和稳定性引入的不确定度。不确定度分析结果详见表12和表13。
表12本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的不确定度结果
本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的合成标准不确定度乘以包含因子k＝2得到扩展不确定度。所得扩展不确定度结果详见表13。
表13本发明豆粕氨基酸成分分析标准物质的扩展不确定结果
定值结论：本发明的基体标准物质最终确定的标准值及不确定度如表13所 示。
本发明制备的豆粕氨基酸成分分析标准物质可以为饲料厂、检测机构等提 供与待测样品基体一致的标准物质，从而提高了氨基酸测定的准确性，为氨基 酸测定实验室内部质量控制提供参考品；为饲料厂质控品的定值提供参考物质。
实施例2：
本发明粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，该制备方法的详细 步骤如下：
a、去杂：首先将市售的脱脂豆粕采用20目的编织筛进行筛选除杂；
b、粉碎：将步骤a除杂后的脱脂豆粕进行粉碎，粉碎后得到细度为40目的 豆粕粉；
c、脱脂：将步骤c粉碎后得到的豆粕粉完全浸润到溶剂无水乙醚中进行浸 泡，浸泡时间为15小时，浸泡过程中每3个小时进行充分搅拌，浸泡后进行过 滤，滤掉溶剂无水乙醚，得到脱脂的豆粕粉；
d、干燥：将步骤c脱脂后得到的豆粕粉自然干燥4小时(自然干燥为：将 脱脂后的豆粕粉平铺置于搪瓷盘中在自然环境非阳光直射条件下进行干燥)，自 然干燥后放入真空干燥箱中进行烘干，烘干温度为80℃，烘干时间为1小时(烘 干时将豆粕粉平铺置于搪瓷盘中，放置到真空干燥箱进行烘干)，烘干后得到豆 粕粉样品；
e、混匀：将步骤d得到的豆粕粉样品置于V型混合机中进行充分混合，混 合时间为8分钟，混合均匀后对混合机中不同部分的样品进行取样，取样后进 行均匀性检测；
f、再次干燥：将步骤e混匀后的豆粕粉样品置于干燥箱中进行干燥，干燥 温度为105℃，干燥时间为3小时，干燥后所得豆粕粉样品中水分含量＜1％；
g、分装：将步骤f干燥后的豆粕粉样品分装于带螺纹口的玻璃瓶中，并盖 紧螺纹盖，封口样品规格为5g/瓶，共分装500瓶；
h、辐照灭活：将分装的样品采用60Coγ射线辐照灭活，剂量强度为8kGy， 辐照灭活时间为2小时；
i、将步骤h辐照灭活后的样品采用铝箔复合袋真空包装，包装后在-20℃条 件下保存。
本实施例所得产品豆粕氨基酸成分分析标准物质的相关测试同实施例1。经 测试，本实施例所得产品完全能够作为氨基酸成分标准物质进行使用。
实施例3：
本发明粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，该制备方法的详细 步骤如下：
a、去杂：首先将市售的脱脂豆粕采用20目的编织筛进行筛选除杂；
b、粉碎：将步骤a除杂后的脱脂豆粕进行粉碎，粉碎后得到细度为50目的 豆粕粉；
c、脱脂：将步骤c粉碎后得到的豆粕粉完全浸润到溶剂无水乙醚中进行浸 泡，浸泡时间为14小时，浸泡过程中每2个小时进行充分搅拌，浸泡后进行过 滤，滤掉溶剂无水乙醚，得到脱脂的豆粕粉；
d、干燥：将步骤c脱脂后得到的豆粕粉自然干燥5小时(自然干燥为：将 脱脂后的豆粕粉平铺置于搪瓷盘中在自然环境非阳光直射条件下进行干燥)，自 然干燥后放入真空干燥箱中进行烘干，烘干温度为80℃，烘干时间为1小时(烘 干时将豆粕粉平铺置于搪瓷盘中，放置到真空干燥箱进行烘干)，烘干后得到豆 粕粉样品；
e、混匀：将步骤d得到的豆粕粉样品置于V型混合机中进行充分混合，混 合时间为5分钟，混合均匀后对混合机中不同部分的样品进行取样，取样后进 行均匀性检测；
f、再次干燥：将步骤e混匀后的豆粕粉样品置于干燥箱中进行干燥，干燥 温度为90℃，干燥时间为5小时，干燥后所得豆粕粉样品中水分含量＜1％；
g、分装：将步骤f干燥后的豆粕粉样品分装于带螺纹口的玻璃瓶中，并盖 紧螺纹盖，封口样品规格为5g/瓶，共分装500瓶；
h、辐照灭活：将分装的样品采用60Coγ射线辐照灭活，剂量强度为7.5kGy， 辐照灭活时间为2小时；
i、将步骤h辐照灭活后的样品采用铝箔复合袋真空包装，包装后在-20℃条 件下保存。
本实施例所得产品豆粕氨基酸成分分析标准物质的相关测试同实施例1。经 测试，本实施例所得产品完全能够作为氨基酸成分分析标准物质进行使用。

Claims (10)

1.一种粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
a、去杂：首先将脱脂豆粕进行筛选除杂；
b、粉碎：将步骤a除杂后的脱脂豆粕进行粉碎，粉碎后过筛得到细度为40～60目的豆粕粉；
c、脱脂：将步骤b粉碎后得到的豆粕粉完全浸润到溶剂中进行浸泡，浸泡过程中每2～4小时充分搅拌一次，浸泡时间为12～15小时，浸泡后进行过滤，滤掉溶剂，得到脱脂的豆粕；
d、干燥：将步骤c脱脂后得到的豆粕粉自然阴凉干燥4～6小时，自然干燥后放入真空干燥箱中进行烘干，烘干后得到豆粕粉样品；
e、混匀：将步骤d得到的豆粕粉样品置于混合机中进行充分混合，混合时间为2～10分钟，混合均匀后对混合机中不同部分的样品进行取样，取样后进行均匀性检测；
f、再次干燥：将步骤e混匀后的豆粕粉样品置于干燥箱中进行干燥，干燥至豆粕粉样品中水分含量＜1％；
g、分装：将步骤f干燥后的豆粕粉样品分装于玻璃瓶中，并盖紧螺纹盖，封口样品规格为5g/瓶；
h、辐照灭活：将分装的样品采用60Coγ射线辐照灭活，剂量强度为7kGy～10kGy，辐照灭活时间为2小时；
i、将步骤h辐照灭活后的样品采用铝箔复合袋真空包装，包装后在-20℃条件下保存。
2.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤a中采用20目的编织筛对脱脂豆粕进行筛选除杂。
3.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤c中所述溶剂为无水乙醚、石油醚、丙酮、正己烷、甲醇和乙醇中的任一种。
4.根据权利要求3所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：所述溶剂为石油醚或无水乙醚。
5.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤d中所述自然干燥是将脱脂后的豆粕粉平铺置于搪瓷盘中在自然环境非阳光直射条件下进行干燥；
所述烘干时烘干温度为60～80℃，烘干时间为1～2小时。
6.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤e中所述混合机采用V型混合机或卧式混合机。
7.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤e中所述均匀性检测：抽取混合后的三个样品，参照GB/T5918-2008《饲料产品混合均匀度的测定》进行均匀性初步检测，再用方差分析法对检测结果进行均匀性统计检验。
8.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤f中所述干燥箱为真空干燥箱或鼓风干燥箱，干燥温度为80～105℃，干燥时间为3～6小时。
9.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤g中所述玻璃瓶为带螺纹口的棕色瓶。
10.根据权利要求1所述的粉状豆粕氨基酸成分分析标准物质的制备方法，其特征在于：步骤h中剂量强度为7kGy。
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