CN108579696A - 一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料及其制备方法和应用 - Google Patents

一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及表面增强拉曼光谱的检测技术领域，具体是一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印记材料、制备方法及其应用，其制备方法为，将茶碱作为模板分子，硝酸银为银纳米颗粒的前驱体，采用沉淀聚合的方式，合成银纳米颗粒掺杂银的分子印记材料；本发明将合成的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料与表面增强拉曼光谱相结合，分子印迹材料作为吸附剂，实现对复杂基质中的痕量目标分析物的分离，富集和检测，在合成方法上克服了已有报道的本体聚合洗脱困难、操作复杂、印迹效率低的缺点和表面分子印迹技术合成条件难控制和重复性较差的缺点；在实际应用上克服了当前分析领域对痕量分析物的分离纯化繁琐和特异性不强的缺点及存在的问题。

Description

一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料及其制备方法和 应用
技术领域
本发明涉及表面增强拉曼光谱的检测技术领域，具体地说，是一种银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料、制备方法以及联用表面增强拉曼光谱在药物分析中的应用技术。
背景技术
茶碱(theophylline)为甲基黄嘌呤类衍生物，是一种杂环类化合物，在临床上常用于支气管哮喘和咳嗽等症状的治疗，其治疗窗十分狭窄，过多剂量的茶碱能够引起神经和心血管系统紊乱，甚至引起死亡。当前，部分游资为了获得高额利润，常常在止咳平喘的中药或保健品中加入大量茶碱，过分夸大产品的疗效和降低生产成本，对购买顾客的健康和财产极大的威胁和损失，虽然短期对哮喘咳嗽等症状有明显的缓解作用，但是使用时间稍长，很容易引起其他心血管等其他并发症。因此，急需要对这种肆意添加非法化学品的现象进行严厉打击。常用的检测手段包括传统的HPLC、LC/MS、GC/MS、TLC-SERS、SPR等，但是这些方法具有耗时、成本高、前处理麻烦、对仪器操作人员要求高、需要大量有机溶剂等一种或多种缺点，在某些场合无法满足对快速、准确、简单等分析检测的要求。
分子印迹技术(molecular imprinting technology，MIT)是一种类似3D打印的仿生材料技术，利用“抗原-抗体”特异性结合的原理，将目标物作为模板分子来实现复杂体系中目标分析物的特异性识别，分离。相比于微流控技术、“抗原-抗体”、适配体技术等其他的识别方法，分子印迹聚合物(molecular imprinted polymer，MIP)具有结构预构性，特异识别性和广泛应用性。因此这项技术得到了许多研究者的广泛关注，被运用到了很多领域，比如分离，提取，药物传递，纳米传感器，催化等。表面增强拉曼光谱(Surface-enhancedRaman spectroscopy，SERS)是近年来新兴的一种快速检测技术，弱拉曼信号分子可以在金、银等贵金属表面获得巨大的信号增强，具有简便、快速等优势。因此，开始出现了MIP与SERS二者联用的技术，MIP作为前处理技术对样品中的目标分析物分离、提纯和富集，然后通过SERS进行分析物的定性或者定量研究，该联用方法简便、快速、经济，特别痕量化合物的现场快速检测。
中国专利文献CN103105386A(发明名称：一种水体及水产品中孔雀石绿的检测方法)中使用分子印迹聚合物对复杂体系中的目标分析物进行分离之后，通过加入纳米银胶或者纳米金胶的方式获得分析物的表面增强拉曼信号。但是，此方法在权利要求书的结合拉曼增强技术检测步骤中提到“取40-100ul银胶或者金胶，加入0.1-1M 10-25ul盐溶液再加入3-75ul的待测液，混匀，取30-50ul于承载凹槽，激光聚焦，拉曼光谱检测”，该步骤需要先洗脱分析物，再加入事先合成好的增强试剂，已有文献报道该方法具有过程繁琐、分析时间长、SERS信号不稳定缺点(Hu YX,Lu XN,Rapid Detection of Melamine in Tap Waterand Milk Using Conjugated“One-Step”Molecularly Imprinted Polymers-SurfaceEnhanced Raman Spectroscopic Sensor[J].J Food Sci,2016,81:1272-1280.)。为解决这些问题，不少研究者开始在改善合成方法，将金或者银纳米颗粒引入分子印迹材料，从而来获得拉曼增强信号，减少后期再加增强试剂的步骤，缩短分析时间。
中国专利文献CN106928397A(发明名称：基于分子印迹聚合物包金核壳纳米粒子的黄曲霉素B1分子SERS检测方法)中通过表面分子印迹将金纳米粒子引入分子印迹材料；中国专利文献CN103063649A(发明名称：银表面分子印迹聚合物进行表面增强拉曼散射光谱检测的方法)中通过表面分子印迹将银纳米粒子引入分子印迹材料；也有文献采用本体聚合的方法将银纳米粒子引入分子印迹材料(Liu P,Liu R,Guan G,Jiang CL,Wang SH,Zhang ZP,Surface enhanced Raman scattering sensor for theophyllinedetermination by molecular imprinting on silver nanoparticles[J].Analyst,2011,136:4152–4158.)；虽然，通过表面分子印迹技术或者本体聚合将银或者金纳米粒子引入分子印迹材料，在应用上可以不加入增强试剂，缩短了分析时间和简化分析过程，但是合成过程中表面分子印迹技术具有合成条件难控制和重复性较差等缺点，本体聚合具有洗脱困难、操作复杂、印迹效率低的缺点。
因此，目前亟需开发一种新的MIP与SERS的联用合成方法，将银或者金纳米粒子引入分子印迹材料，既能在应用上后期不加增强试剂、简化分析步骤，缩短分析时间，还能够在合成方法上简化合成步骤，获得更大的印迹效率和更稳定的SERS信号。
发明内容
本发明的目的在于提供一种合成条件易控制，特异性识别能力强，灵敏度高，适合现场快速检测的新型分子印迹材料，从而实现对复杂体系中痕量分析物的快速分离，富集和检测。
本发明基于沉淀聚合方法合成的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料未见公开专利和文献报道，而且该方法克服了操作繁琐、检测时间长等缺点，具有简单、快速、经济等优点。
本发明为了实现上述目的，采用了以下技术方案：
本发明的第一方面，提供一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，是以茶碱为模板分子，加入溶剂、功能单体、交联剂、致孔剂和硝酸银进行沉淀聚合反应，聚合后的沉淀物中加入还原剂，然后洗脱出模板分子即得银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
在本发明所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法中，所述的银纳米颗粒的前驱体为硝酸银；所述的银纳米颗粒为原位还原。
进一步的，所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，包括以下步骤：
a)单体与模板分子的预聚合：将茶碱和功能单体加入溶剂中混匀，低温搅拌，使得茶碱和单体相互作用，即得预聚合后的模板-单体复合物；
b)银离子掺杂的分子印迹材料制备：将所得的预聚合后模板-单体复合物中加入交联剂、引发剂、硝酸银混匀后，在惰性气体的保护下，通过一定的引发方式(紫外引发)，使得混合物发生聚合反应，即得银离子掺杂的分子印迹材料；
c)银纳米颗粒的还原：将所得银离子掺杂的分子印迹材料洗涤表面吸附杂质，在溶剂中加入还原剂，原位还原分子材料中的银离子，即得银纳米颗粒掺杂的未洗脱分子印迹材料；
d)模板分子的洗脱；以甲醇冰乙酸混合溶液为洗脱溶剂，方式为搅拌洗脱，数次洗脱后即得所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
进一步的，所述的步骤a中，功能单体为甲基丙烯酸。茶碱与功能单体的摩尔质量比为1：3.50～4.50，优选1：4。
进一步的，所述的步骤a中的溶剂为乙腈或者氯仿，优选乙腈。每0.26mmol的茶碱，使用溶剂38～42ml，优选40ml。
进一步的，所述的步骤b中，交联剂为二甲基丙烯酸乙二醇酯，引发剂为偶氮二异丁腈。茶碱与交联剂的摩尔质量比为1：15.00～17.00，优选1：16。茶碱与引发剂的摩尔质量比为1：0.32～0.35，优选1：0.33。茶碱与硝酸银的摩尔质量比为1：2.30～2.50，优选1：2.40。
进一步的，所述的步骤b中的聚合方式为紫外聚合，聚合温度0～4℃。
更进一步的，所述的步骤b中紫外聚合的紫外灯为4个，紫外灯为双排，每排的紫外灯的功率为8w，波长254nm。
进一步的，所述的步骤c中的还原剂为硼氢化钠；优选1mg/ml的硼氢化钠水溶液。
更进一步的，所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，包括以下步骤：
将茶碱粉末溶于乙腈溶液中，加入功能单体甲基丙烯酸预聚合30min，再加入交联剂二甲基丙烯酸乙二醇酯和引发剂偶氮二异丁腈,混匀后，再加入硝酸银，密封，氮气保护条件下，0～4℃紫外聚合12～24h，得到白色浑浊溶液，6000rmp离心5min，弃去上清液；将得到的白色沉淀用去离子反复洗涤三次，然后加入至100ml去离子水中，搅拌，然后缓慢滴加1mg/ml的0.5～1.5ml硼氢化钠水溶液，滴加完毕后，再反应15～20min，整个滴加过程在冰浴中完成，6000rmp离心5min，弃去过量的硼氢化钠水溶液；甲醇/冰乙酸(8:2)洗脱模板分子，直到紫外光谱检测不到茶碱分子，然后用去离子水洗去残留的甲醇，对粉末50～60℃真空干燥，即可得到所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料(AgNPs@MIPs颗粒)。
本发明的第二方面，提供一种如上所述的制备方法制备得到的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
本发明的第三方面，提供一种如上所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料与可拆卸过滤器、微孔滤膜、注射器组装的简易过滤分离装置。
本发明的第四方面，提供一种如上所述的简易过滤分离装置与表面增强拉曼光谱联用在药品中痕量茶碱的分离和富集、检测中的应用。
本发明的第五方面，提供一种如上所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料在制备药品中痕量茶碱的分离和富集、检测器械中的应用。
本发明的第六方面，提供一种如上所述的简易过滤分离装置与表面增强拉曼光谱联用在制备药品中痕量茶碱的分离和富集、检测器械中的应用。
本发明的第七方面，提供一种如上所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料在固相萃取中的应用。
本发明的第八方面，提供一种药品中痕量茶碱的分离和富集、检测的方法，是将如上所述的银纳米颗粒掺杂的印迹材料与可拆卸过滤器、微孔滤膜、注射器组装为类似固相萃取小柱的简易过滤分离装置，分离茶碱分子后，拆开过滤分离装置，取出微孔滤膜上吸附有茶碱分子的印迹材料，置于便携式拉曼光谱检测器下进行检测。
进一步的，所述的药品中痕量茶碱的分离和富集、检测的方法，是将可拆卸的微孔滤膜器作为固相萃取小住，注射器作为压力泵，微孔滤膜作为固相萃取吸附剂的载体，以上述银纳米颗粒掺杂的印迹材料作为柱层析的填料(如图1所示)拼装成一个简易的固相萃取小柱分离装置，用中药提取液上柱，震荡，然后用注射器推出多余提取液，用乙腈和水淋洗材料非特异性吸附的杂质，只留下特异性吸附的模板分子，拆开微孔滤膜小柱，采用便携式拉曼光谱仪进行检测。
本发明优点在于：
1、本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料的制备方法，是将茶碱作为模板分子，硝酸银为银纳米颗粒的前驱体，采用沉淀聚合的方式，合成银纳米颗粒掺杂银的分子印记材料，由于本方法基于沉淀聚合的原理，避免了现有的本体聚合方法中对聚合物的研磨过筛等繁琐操作以及表面分子印迹技术的高难度合成条件；
2、本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料，与目标体系混合后，可以特异性吸附目标分析物，能够得到目标分析物的表面增强拉曼光谱信息，不需要再加入SERS增强试剂的步骤，大大缩短了分析时间；
3、本发明将合成的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料与表面增强拉曼光谱相结合，分子印迹材料作为吸附剂，实现对复杂基质中的痕量目标分析物的分离，富集和检测，在合成方法上克服了已有报道的本体聚合洗脱困难、操作复杂、印迹效率低的缺点和表面分子印迹技术合成条件难控制和重复性较差的缺点；在实际应用上克服了当前分析领域对痕量分析物的分离纯化繁琐和特异性不强的缺点及存在的问题；
4、本发明的的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料，与可拆卸过滤器、微孔滤膜、注射器组装为类似固相萃取小柱的简易过滤分离装置时，免去了洗脱步骤，节约了分析时间，能够在检测现场与便携式的拉曼光谱仪配合，很容易实现复杂体系中痕量分析物的检测，具有普遍应用性和工业化的潜力。
附图说明
图1为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料的制备方法和固相萃取技术联用示意图；
图2为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料和银纳米颗粒掺杂的非分子印迹材料的吸附等温曲线；
图3为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料的动态吸附曲线；
图4为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料和银纳米颗粒掺杂的非分子印迹材料的拉曼增强效果示意图。
图5为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料和吸附茶碱后的拉曼增强效果示意图。
图6为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料的稳定性考察示意图。
图7为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料作为固相萃取吸附剂是对中药中茶碱吸附的检测限示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。但是本领域技术人员将会理解，下列实施仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所有试剂或仪器未注明生产厂商者，均可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
图1为本发明的纳米颗粒掺杂的分子印迹材料合成方法和类似固相萃取小柱联用示意图.
如图1所示掺杂银纳米颗粒的分子印迹材料形成以茶碱分子为模板的特定孔穴位点。
(1)试剂的前处理：在进行具体实施方式之前，需要对相关试剂进行阻聚剂的去除，包括如下步骤：
取甲基丙烯酸20ml，氮气保护下避光减压蒸馏，收集100℃馏分，避光保存。
取偶氮二异丁腈1g，置于烧杯中，用50ml的甲醇热溶解，趁热过滤，冷却结晶，然后将晶体放入真空干燥箱内干燥，备用。
取二甲基丙烯酸乙二醇酯50ml，加入50ml95％的氢氧化钠水溶液混匀，震荡后分层取下层无色部分溶液，然后加入无水氯化钙，放置48h，过滤保存4℃冰箱，备用。
(2)预聚合：将0.26mmol的茶碱粉末溶于40ml色谱级乙腈溶液中，待完全溶解后，加入1.04mmol的甲基丙烯酸溶液，4℃下震荡30min。
(3)AgNPs@MIPs的制备：在预聚合的溶液中，加入4.16mmol的二甲基丙烯酸乙二醇酯EGDMA，14mg的偶氮二异丁腈AIBN和106mg的硝酸银，超声脱气5min，通N2除氧5min，密封后，在4℃条件下，用两个双排8W的紫外灯(共4个)照射引发聚合反应24h，聚合期间不断搅拌，反应结束，冷却至室温，将反应得到的白色沉淀物用去离子水洗涤三遍，备用。
(4)NaBH4还原：采用原位还原的方法，将步骤(3)中得到的白色沉淀放入含有100ml的去离子水的烧杯中，将烧杯置于冰浴条件下，磁力剧烈搅拌，缓慢滴加1mg/ml的1mlNaBH4水溶液，滴加完毕后，反应20min，将反应完毕后的沉淀物6000rmp离心5min，弃去过量的NaBH4水溶液，去离子水洗涤三遍，离心收集到的沉淀物备用。
(5)模板分子的洗脱：将步骤(4)中得到的沉淀物加入到体积分数10％的冰乙酸甲醇溶液，磁力搅拌30min，离心去除上清液，再加入10％的冰乙酸甲醇溶液，磁力搅拌，直至上清液中检测不到茶碱分子的紫外信号，再用甲醇洗去多余的冰乙酸。置于50℃的真空干燥箱内24h，即可获得银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
(6)纳米颗粒掺杂的分子印迹材料和类似固相萃取小柱联用的应用：称取中药粉末1.0g，加入甲醇和水(1：1)5ml，混匀，超声提取5min，离心收集上清液，加入茶碱标准品5mg，完全溶解后与1g本实验制得的分子印迹材料混匀，注射器内震荡10min，经0.22um的可拆卸固相萃取柱，推出多余溶液后，用乙腈：水(1：1)5ml冲洗三遍，然后拆开固相萃取小柱，采用便携式拉曼光谱仪对微孔了滤膜上的吸附有模板分子的分子印迹材料进行检测。
对比例1
对比例1提供银纳米颗粒掺杂的非分子印迹材料(AgNPs@NIPs)的制备方法，参照实施例1，对比例中具体的制备过程除在步骤(3)中不加茶碱模板分子外，其他步骤均与实施例1相同。
为了验证本发明的有益效果，采用本发明实施例1所制备的分子印迹材料进行性能测试，步骤如下：
(1)分别称取5份5mg实施例1制备的AgNPs@MIPs，和对比例1制备的AgNPs@NIPs，分别加入到5ml的离心管中，再分别加入2ml初始浓度为0.1to 0.4mg/mL的茶碱水溶液，在恒温水浴摇床中25℃震荡30min，然后离心收集上清液，用紫外-可见光谱仪测定并计算各上清液中茶碱的浓度，检测波长为272nm，检测结果如图2所示。
由图2结果可知，随着茶碱浓度的增加，AgNPs@MIPs的吸附能力始终大于AgNPs@NIPs，并且吸附能力的差值不断扩大，说明AgNPs@MIPs对茶碱的特异性吸附能力明显好于AgNPs@NIPs，经计算后，AgNPs@MIPs和AgNPs@NIPs对茶碱的饱和吸附容量大约分别为28mg/g、9mg/g。
(2)取20mg实施例1制备的AgNPs@MIPs和20mg对比例1制备的AgNPs@NIPs，分别加入到8mg，0.2mg/ml的茶碱水溶液中，在恒温水浴摇床中25℃震荡，在1,5,10,20,30,45,60,90,120,and 180min时，取同等体积的上层清液出来，然后离心收集上清液，用紫外-可见光谱仪测定并计算各上清液中茶碱的浓度，检测波长为272nm，检测结果如图3所示，可以看出，不到20min，制备的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料即可达到吸附平衡。
(3)取5mg实施例1制备的AgNPs@MIPs和对比例1制备的AgNPs@NIPs，分别加入到5ml的离心管中，再加入2ml浓度为1mg/ml的茶碱水溶液，在恒温水浴摇床中25℃震荡30min，然后离心收集吸附有茶碱分子的AgNPs@MIPs和AgNPs@NIPs沉淀物，去离子水洗涤三遍，将其置于785nm的便携式拉曼激光仪下，积分时间5s，激光功率为100％；
图4为AgNPs@MIPs和AgNPs@NIPs吸附有同浓度茶碱分子的SERS光谱图，发现AgNPs@MIPs的信号显著强于AgNPs@NIPs。图5为AgNPs@MIPs吸附茶碱分子的SERS光谱图与茶碱分子的SERS光谱图的对比。图6为实施例1制备的AgNPs@MIPs的稳定性考察，15天之后，茶碱分子仍有较强信号，从SERS增强基地的角度来说，这个稳定性是具有很大优势的。
图7为本发明的银纳米颗粒掺杂的分子印迹材料作为固相萃取吸附剂是对中药中茶碱吸附的检测限示意图，可以发现，经过固相萃取的净化、富集之后，掺有茶碱的中药样品中的中药SERS信号消失，只剩下茶碱的SERS信号，说明本方法对茶碱具有较好的纯化富集和拉曼增强的效果。
实施作用及效果
根据本实施例的银纳米颗粒掺杂分子印迹材料的制备方法，由于是基于沉淀聚合的方法，不需要研磨和过筛，所以操作简单，可重复强，实验条件易控制。由于茶碱分子本身具有NH2，对银纳米颗粒的吸附性较强，使得银纳米颗粒与茶碱的距离变短，SERS增强的可能性变大，相比于后加入增强试剂的MIP-SERS方法而言，本方法在应用上免去了后期加入SERS基底的步骤，节约了分析时间，简化了分析过程；相比于已有报道的本体聚合或者表面分子印迹技术将金、银纳米颗粒引入分子印迹材料的MIP-SERS方法而言，本实施例首次采用沉淀聚合的方式将银纳米颗粒引发分子印迹材料，克服了本体聚合洗脱困难、操作复杂、印迹效率低的缺点和表面分子印迹技术合成条件难控制和重复性较差的缺点。当然，本发明的技术方案并不仅限于以上实施中的例子，紫外引发聚合的反应时间可以根据是否完全形成白色悬浮液为主，这个时间可以在24h的基础上延长或提前；真空干燥的时间可以在40-60℃中任意选择，应根据选择的温度适当延长或减少干燥时间，保证干燥充分；预聚合的时间原则上应为30min，但可在20-40min内任意选择。
以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

Claims (10)

1.一种银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
a)单体与模板分子的预聚合：将茶碱和功能单体加入溶剂中混匀，低温搅拌，使得茶碱和单体相互作用，即得预聚合后的模板-单体复合物；所述的功能单体为甲基丙烯酸；茶碱与功能单体的摩尔质量比为1：3.50～4.50；所述的溶剂为乙腈或者氯仿；
b)银离子掺杂的分子印迹材料制备：将所得的预聚合后模板-单体复合物中加入交联剂、引发剂、硝酸银混匀后，在惰性气体的保护下，通过紫外引发，使得混合物发生聚合反应，即得银离子掺杂的分子印迹材料；所述的交联剂为二甲基丙烯酸乙二醇酯，引发剂为偶氮二异丁腈；茶碱与交联剂的摩尔质量比为1：15.00～17.00；茶碱与引发剂的摩尔质量比为1：0.32～0.35；茶碱与硝酸银的摩尔质量比为1：2.30～2.50；
c)银纳米颗粒的还原：将所得银离子掺杂的分子印迹材料洗涤表面吸附杂质，在溶剂中加入还原剂，原位还原分子材料中的银离子，即得银纳米颗粒掺杂的未洗脱分子印迹材料；
d)模板分子的洗脱；以甲醇冰乙酸混合溶液为洗脱溶剂，方式为搅拌洗脱，数次洗脱后即得所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
2.根据权利要求1所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，其特征在于，所述的步骤b中的聚合方式为紫外聚合，聚合温度0～4℃。
3.根据权利要求1所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料的制备方法，其特征在于，所述的步骤c中的还原剂为硼氢化钠。
4.一种如权利要求1-3任一所述的制备方法制备得到的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料。
5.一种如权利要求4所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料与可拆卸过滤器、微孔滤膜、注射器组装的简易过滤分离装置。
6.一种如权利要求5所述的简易过滤分离装置与表面增强拉曼光谱联用在药品中痕量茶碱的分离和富集、检测中的应用。
7.一种如权利要求4所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料在制备药品中痕量茶碱的分离和富集、检测器械中的应用。
8.一种如权利要求5所述的简易过滤分离装置与表面增强拉曼光谱联用在制备药品中痕量茶碱的分离和富集、检测器械中的应用。
9.一种如权利要求4所述的银纳米颗粒掺杂的茶碱分子印迹材料在固相萃取中的应用。
10.一种药品中痕量茶碱的分离和富集、检测的方法，其特征在于，是将如权利要求4所述的银纳米颗粒掺杂的印迹材料与可拆卸过滤器、微孔滤膜、注射器组装为类似固相萃取小柱的简易过滤分离装置，分离茶碱分子后，拆开过滤分离装置，取出微孔滤膜上吸附有茶碱分子的印迹材料，置于便携式拉曼光谱检测器下进行检测。
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