CN108379314A - 一种中药提取物提取方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及中药提取技术领域，尤其涉及一种中药提取物提取方法。将当归或黄芪粉末或当归、黄芪粉末加入至乙醇中，在60～100℃下提取1～4h后，冷却至室温，离心分离取上清液，完成一次提取；提取次数为1～4次。本发明具有提取工艺简便、提取纯度高、提取率大的优点。

Description

一种中药提取物提取方法
技术领域
本发明涉及中药提取技术领域，尤其涉及一种中药提取物提取方法。
背景技术
在现如今高速发展的社会，人们日常生活必需品——纺织品的种类性能也快速发展。基于舒适耐穿、样式等基础性能外，其附加属性如保健性、健康度等功能性也十分看重。中草药对于人体还是益处良多的，不但对于一些皮肤病有一定疗效，而且还可以帮助睡眠、气血循环、润肠通便等保健功能。因此，中草药活性成分的提取与运用对于各行各业都将是一个非常有前途的研究方向。
当归可补气活血，调经止血，润肠通便。现代科学研究表明当归中的主要有效活性成分为阿魏酸及其衍生物、挥发油和多糖等其他糖类。挥发油可降低血液粘稠度，在止痛、缓解平滑肌痉挛等方面有一定作用；阿魏酸及其衍生物具有增强前列腺素活性、抗血小板聚集、镇痛、抗紫外线辐射及抗自由基、缓解血管痉挛、等功效。阿魏酸抗氧化活性基团是苯环上的羟基，该基团通过消除自由基的方式来抑制氧化反应和自由基反应，以及与生物膜磷脂结合，产生抗动脉粥样硬化效应，保护组织被膜脂质等拮抗自由基损害。多糖广泛存在于中药材中，是众多中药材中的有效活性成分。大部分中草药都含有多糖，但其药理作用大都不同。现代科学研究发现，当归多糖具有活化的补体活性，提高人体免疫力，对人体造血系统造血有益,可去除自由基，对抗肿瘤、抗辐射损伤也有一定效果。
中药黄芪为豆科植物蒙古黄芪的根，具有益气滋补作用，可生用，也可以用作炙用。生用可排毒，可治疗一些皮肤病；炙用能益气补中；黄芪表皮水煮煎服有利尿作用。黄芪还具有增强人体免疫系统、改善心功能状态、抗氧化抗衰老、增强机体体质、抗病毒、抗癌等功能，其药效显著，应用广泛。医用黄芪注射液可以用来治疗失眠。黄芪也具有显著的降压作用。黄芪中主要的有效活性成分为皂苷、多糖、黄酮、氨基酸、微量元素。黄芪甲苷有超级黄芪多糖之称，其药理作用比黄芪其他活性成分要好，其含量也较其他成分高。黄芪甲苷具有多糖的作用，药效强度是常规黄芪多糖的2倍多。现代科学研究表明:黄芪甲苷可增强人类机体免疫力，对特异性免疫和非特异性免疫都有促进作用，从而提高机体的抗病能力。黄芪甲苷还对脑组织有一定的保护作用、促进胰岛素的分泌，明显改善受损白细胞变形能力，能激活和延长小鼠腹腔巨噬细胞的生长,增强吞噬作用。
发明内容
本发明旨在提供一种取工艺简便、提取纯度高、提取率大的中药提取物提取方法。
本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：一种中药提取物提取方法，将当归或黄芪粉末或当归、黄芪粉末加入至乙醇中，在60～100℃下提取1～4h后，冷却至室温，离心分离取上清液，完成一次提取；提取次数为1～4次。
优选地：将当归与乙醇按照物料比5～8g/mL混合，乙醇的浓度为40～80wt％，在80℃下提取1～2.5h，冷却至室温，离心分离取上清液，完成一次提取；提取次数为1～4次，进行阿魏酸的提取。
优选地：当归与乙醇物料比为6g/mL，提取时间为1.5h，提取次数为3，乙醇浓度为70wt％。
优选地：将黄芪粉末与乙醇按照物料比8～12g/mL混合，乙醇的浓度为60～80wt％，在6～80℃下提取2～4h，进行甲苷或黄酮的提取。
优选地：将黄芪粉末与乙醇按照物料比12g/mL混合，乙醇的浓度为70wt％，在70℃下提取2h，进行甲苷的提取。
优选地：将黄芪粉末与乙醇按照物料比12g/mL混合，乙醇的浓度为70wt％，在80℃下提取2h，进行黄酮的提取
本发明的优点在于：
(1)当归阿魏酸乙醇回流提取最佳工艺：称取当归粉末20g于带有温度计的三口烧瓶中，加入120mL 70％浓度的乙醇溶液，置于恒温水浴锅中，恒温80℃下加热，提取三次，每次提取1.5h，收集提取液，密封。
(2)黄芪甲苷醇提法最佳工艺：准确称量10g黄芪粉末置于250mL锥形瓶中，加入120mL 70％浓度的乙醇溶液，保鲜膜封住锥形瓶瓶口，然后将锥形瓶至于70℃恒温水浴锅中加热2h后冷却至室温，离心取上清液。
(3)黄芪黄酮醇提法最佳工艺：准确称量10g黄芪粉末置于250mL锥形瓶中，加入120mL70％浓度的乙醇溶液，保鲜膜封住锥形瓶瓶口，防止乙醇挥发，然后将锥形瓶至于80℃恒温水浴锅中加热2h后冷却至室温，离心取上清液。
附图说明
图1为阿魏酸标准曲线图。
图2为甲苷标准曲线图。
图3为黄酮标准曲线图。
图4为当归阿魏酸提取正交试验因素趋势图。
图5为阿魏酸结构式图。
图6为阿魏酸提取液质谱图。
图7为黄芪甲苷醇提法正交试验因素趋势图。
图8为黄芪黄酮醇提法正交试验因素趋势图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
选择乙醇浓度(A)、料液比(B)、提取次数(C)、提取时间(D)为考察因素，以阿魏酸的提取量为评测标准，确立各相关因素的正交设计因子A、B、C、D的水平。进行L16(4)4正交实验(表1)，采用极差分析进行数据处理，对提取条件进行优化研究，根据阿魏酸提取含量确定最佳提取参数。
表1当归阿魏酸提取优化实验正交因素水平表
称取当归粉末20g于带有温度计的三口烧瓶中，按表1中所示处方加入一定量的不同浓度的乙醇，置于恒温水浴锅中，恒温80℃下加热一定时间，按表1中所示处方提取不同次数，收集提取液。密封储存，测定阿魏酸的含量。
实施例2
选择乙醇浓度(A)、料液比(B)、提取时间(C)、提取温度(D)为正交因素，以甲苷和黄酮的提取量为评测指标，确定各正交设计因子A、B、C、D的水平。进行L9(3)4正交实验(表2)，采用极差分析进行数据处理，对提取条件进行优化研究，根据甲苷和黄酮的含量确定最佳提取参数。
表2黄芪甲苷、黄酮醇提提取优化实验正交因素水平表
称量10g黄芪粉末置于250mL锥形瓶中，按表2中所示工艺处方加入一定量、一定浓度的乙醇溶液，保鲜膜封住锥形瓶瓶口，然后将锥形瓶至于恒温水浴锅中以一定温度加热一定时间后冷却至室温，离心分离取上清液，测试甲苷和黄酮浓度。
阿魏酸标准曲线的绘制
称量密封干燥的当归提取物(其中含阿魏酸)配制浓度为0.2g/L、0.3g/L、0.4g/L、0.6g/L、0.8g/L的阿魏酸溶液。设置紫外分光光度计扫描参数为全波段扫描，选取最大吸收波长。根据所得数据，以浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标建立坐标轴，线性回归绘制曲线，得出当归阿魏酸标准曲线。如图1所示。
其线性回归方程为Y＝0.03453+0.75362X，R2＝0.9995
甲苷标准曲线的绘制
称量密封干燥的黄芪甲苷对照品配置浓度分别为7.5mg/L、15mg/L、22.5mg/L、30mg/L、37.5mg/L、45mg/L溶液，设置紫外分光光度计扫描参数为532nm定波长扫描，测定黄芪甲苷标准样吸光度，记录数据。根据所得数据，以浓度(X)为横坐标，吸光度(Y)为纵坐标建立坐标轴，线性回归绘制黄芪甲苷标准曲线，如图2所示。
其线性回归方程为：Y＝0.06327+0.0028X，R2＝0.99886
根据正交试验，以当归阿魏酸含量为评测标准，对数据进行极差分析可知，对于当归阿魏酸乙醇回流提取试验中，根据极差大小分析，各因素作用主次为A>C>D>B，即乙醇浓度>提取次数>提取时间>料液比。
由下图4可知，当乙醇浓度为70％时，当归阿魏酸提取率最大，随着乙醇浓度的增大，对有效成分提取更加充分，提取率也随之增大。料液比为1:6时，当归阿魏酸的提取率最大。随着料液比逐渐增大，提取率反而降低。当提取次数从2上升至3，阿魏酸提取率也随之增大。当提取次数为4时，提取率反而减低。并且提取时间越长，提取率也随之降低。因为多次回流提取有利于当归阿魏酸的充分提取，但长时间多次高温回流提取，阿魏酸的结构遭到破坏，所以提取率反而降低。
因此，当归阿魏酸乙醇回流提取最佳工艺为A4B2C3D2，即乙醇浓度为70℃，料液比为1:6，提取次数为3，提取时间为1.5h。
阿魏酸化学名为4-羟基-3-甲氧基肉桂酸，分子式为C10H10O4。(结构式见下图5)分子量为194。
对样品提取溶液进行质谱分析，发现在质荷比为191左右有峰值，因此可以大致确定提取溶液中含有阿魏酸。如图6所示。
根据设计的正交试验，以黄芪甲苷含量为考察标准，对数据进行极差分析可知，对于黄芪甲苷乙醇提取试验中，根据极差大小分析，各因素作用主次为A>B>C>D，即乙醇浓度>料液比>提取时间>提取温度。
由下图7可知，当乙醇浓度为70％时，黄芪甲苷提取率最大。当乙醇浓度为60％和80％时，提取率较小。随着料液比的升高，黄芪甲苷的提取率也随之升高。随着提取时间的增加，黄芪甲苷的提取率逐渐减小。是因为高温下提取时间过长，甲苷结构遭到一定破坏。当温度为70℃时，黄芪甲苷提取率最高，温度过高，甲苷结构遭到破坏，温度过低则会导致提取不充分。
因此，黄芪甲苷醇提法最佳工艺为A2B3C1D2，即提取温度为70℃，乙醇浓度为70％，料液比为1:12，提取时间为2h。
根据设计的正交试验，以黄芪黄酮含量为考察标准，对数据进行极差分析可知，对于黄芪甲苷乙醇提取试验中根据极差大小得出各因素作用主次为B>D>A>C，即料液比>提取温度>乙醇浓度>提取时间。
由图8可知，黄芪黄酮提取率在乙醇浓度为70％时较高，当乙醇浓度为60％和80％时，黄芪黄酮提取率较低。当乙醇浓度过高时，部分无机物也会被提取出来从而影响黄酮纯度。黄芪黄酮的提取率随着料液比的提高也逐步增大。黄酮易溶于有机溶剂，增大料液比，有利于黄酮的提取。提取时间为3h时，黄芪黄酮的提取率为最小，当提取时间为2h和4h时，黄芪黄酮提取率较大。是因为部分小分子量有效成分物质在2h提取出，但并不耐长时间的高温，分子结构遭到破坏，因此在3h的提取率较低，当提取超过3h时，部分大分子量的有效成分物质提取出来。提取温度升高，总黄酮逐渐被溶剂溶解浸出，因此黄芪黄酮的提取率随之升高。
综上所述，黄芪黄酮醇提法最佳工艺为A2B3C1D3。即乙醇浓度为70％，料液比为1:12，提取时间为2h，提取温度为80℃。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (6)

1.一种中药提取物提取方法，其特征在于：将当归或黄芪粉末或当归、黄芪粉末加入至乙醇中，在60～100℃下提取1～4h后，冷却至室温，离心分离取上清液，完成一次提取；提取次数为1～4次。
2.根据权利要求1所述的中药提取物提取方法，其特征在于：将当归与乙醇按照物料比5～8g/mL混合，乙醇的浓度为40～80wt％，在80℃下提取1～2.5h，冷却至室温，离心分离取上清液，完成一次提取；提取次数为1～4次，进行阿魏酸的提取。
3.根据权利要求2所述的中药提取物提取方法，其特征在于：当归与乙醇物料比为6g/mL，提取时间为1.5h，提取次数为3，乙醇浓度为70wt％。
4.根据权利要求1所述的中药提取物提取方法，其特征在于：将黄芪粉末与乙醇按照物料比8～12g/mL混合，乙醇的浓度为60～80wt％，在6～80℃下提取2～4h，进行甲苷或黄酮的提取。
5.根据权利要求4所述的中药提取物提取方法，其特征在于：将黄芪粉末与乙醇按照物料比12g/mL混合，乙醇的浓度为70wt％，在70℃下提取2h，进行甲苷的提取。
6.根据权利要求4所述的中药提取物提取方法，其特征在于：将黄芪粉末与乙醇按照物料比12g/mL混合，乙醇的浓度为70wt％，在80℃下提取2h，进行黄酮的提取。
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