CN107573439A - 一种提取纯化辣木多糖的工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种提取纯化辣木多糖的工艺,包括以下步骤:制取干燥的辣木叶粉,依次采用石油醚、80%的乙醇在80℃下回流提取2次,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;向滤渣加入10‑15倍量的蒸馏水在85‑90℃下回流提取3次,提取液真空抽滤,浓缩,萃取,再浓缩;浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合置于回旋振荡器中振荡15‑20min,然后离心分离,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;离心液通过活性炭脱色,浓缩,所得浓缩液加热到60‑75℃后迅速降温至38‑40℃,制得凝结的辣木多糖。本发明的提取工艺提取辣木多糖提取率高,纯度高,所提取的辣木多糖具有热可逆性,具有良好的加工和使用性能。
Description
【技术领域】
本发明属于天然产物有效成份的提取技术领域,具体涉及一种提取纯化辣木多糖的工艺。
【背景技术】
辣木属辣木科、辣木属,为多年生木本植物,是一种有独特经济价值的热带植物,主要分布于云南、广东、广西、海南、台湾等省区。辣木作为蔬菜食品药材在增进营养、食疗保健、医药养生等方面得到广泛应用,被誉为“生命之树,神奇之树”。辣木中含有的多糖可以活化细胞增强免疫力,有助于分泌胰岛素和调节血糖,有丰富的保健养生功效,长期服用对于降高血压、降高血脂、降高血糖有明显效果,还可以预防癌症预防肿瘤,增强免疫力保护心脏,还可以平衡人体皮肤色素,美容养颜。同时,辣木中含有的黄酮可以有效地抗氧化、抗自由基、消除人体活性氧;可以改善血液循环,降低胆固醇,改善心脑血管疾病的症状;在保护胃黏膜治疗胃溃疡、预防骨质疏松症、预防脂肪肝、酒精肝,提神醒脑,治疗中风、增强消化、颐养脾胃、消除疲劳、治疗和预防抑郁症等方面功效显著。随着生活水平的提高,人们对辣木的食药功效越来越重视,辣木素、辣木多糖、辣木黄酮等有效成分的提取工艺不断发展,如何提取高纯度的辣木有效成分,同时完善产品各项性能,使之实现工业化生产,对生产生活有重要的促进重要。专利申请文献“一种辣木叶多糖的制备方法及其用途(专利号:ZL201510269590.2)”,提供了一种辣木叶多糖的制备方法,采用微波-超声波协同提取,盐酸法脱蛋白,过氧化氢法脱色和AB-8型大孔吸附树脂柱分离制得辣木叶多糖。但是仍存在提取率低,不具备稳定热可逆性等问题。因此迫切需要研究出进一步提高提取率和热可逆性的方法。
【发明内容】
本发明提供的一种提取纯化辣木多糖的工艺,以解决目前辣木多糖提取纯度低、产品加工性能低、不利于工业化生产等问题。
为解决以上技术问题,本发明采用以下技术方法:
一种提取纯化辣木多糖的工艺,包括以下步骤:
(1)备料:将辣木叶干燥,粉碎,过50目筛,制得辣木叶粉;
(2)脱脂脱糖:将步骤(1)中的辣木叶粉依次采用石油醚、80%的乙醇在80℃回流提取2次,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;
(3)提取:向步骤(2)中的滤渣加入10-15倍量的无菌蒸馏水在85-90℃下回流提取3次,提取液真空抽滤,浓缩体积为45-50%得到一次浓缩液,将一次浓缩液用6-8倍体积的45-55℃的无菌蒸馏水再次进行溶解,采用无水乙醇溶剂进行萃取2-3次,层析液在0.008-0.01MPa下浓缩体积为30-35%,得到二次浓缩液;
(4)脱蛋白:将步骤(3)中的浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合均匀,置于回旋振荡器中振荡15-20min,然后放入高速离心仪中进行离心分离,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;
(5)凝结:将步骤(4)中的离心液通过活性炭脱色,脱色液浓缩体积为10-15%,所得浓缩液加热到60-75℃后迅速降温至38-40℃,制得凝结的辣木多糖。
作为优选,步骤(1)中所述壮龄期辣木叶以生产期在45-50d为宜。
作为优选,步骤(2)中石油醚、80%的乙醇的用量均为滤渣的8-10倍。
作为优选,步骤(2)中所述回流提取时长为每次2-3h。
作为优选,步骤(3)中所述回流提取采用微波加热。
作为优选,步骤(3)中所述回流提取时长为每次10-15min。
作为优选,步骤(4)中所述回旋振荡器转速为260r/min。
作为优选,步骤(4)中所述离心转速为10000r/min,离心时长为10min。
作为优选,步骤(5)中所述脱色液浓缩是在60-65℃的旋转蒸发器中减压浓缩。
作为优选,步骤(5)中所述凝结的辣木多糖是一种热可逆的低强度凝结胶体,其在加热到65-75℃时可再次完全融解。
本发明具有以下有益效果:
本发明的提取纯化辣木多糖的工艺操作过程简单,所用原料成本低,辣木多糖提取率高,纯度高,而且所提取的辣木多糖凝结后具有热可逆性,具有良好的加工和使用性能,易于实现工业化生产。
【具体实施方式】
下面结合具体实施例进行具体说明。
实施例1
一种提取纯化辣木多糖的工艺,包括以下步骤:
(1)备料:取生产期在45d的辣木叶,干燥,粉碎,过50目筛,制取辣木叶粉;
(2)脱脂脱糖:将步骤(1)中的辣木叶粉依次采用8倍量石油醚、8倍量80%的乙醇在80℃下回流提取2次,每次提取2h,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;
(3)提取:向步骤(2)中的滤渣加入10倍量的无菌蒸馏水在85℃下微波加热回流提取3次,每次提取10min,提取液真空抽滤,浓缩体积为45%得到一次浓缩液,将一次浓缩液用6倍体积的45℃的无菌蒸馏水再次进行溶解,采用无水乙醇溶剂进行萃取2次,层析液在0.008MPa下浓缩体积为30%,得到二次浓缩液;
(4)脱蛋白:将步骤(3)中的浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合均匀,置于转速为260r/min的回旋振荡器中振荡15min,然后再置于转速为10000r/min的高速离心仪中离心分离10min,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;
(5)凝结:将步骤(4)中的离心液通过活性炭脱色,脱色液在60℃的旋转蒸发器中减压浓缩体积为10%,所得浓缩液加热到60℃后迅速降温至38℃,制得凝结的辣木多糖,所述凝结的辣木多糖是一种热可逆的低强度凝结胶体,其在加热到65℃时可再次完全融解。
实施例2
(1)备料:取生产期在46d的辣木叶,干燥,粉碎,过50目筛,制取辣木叶粉;
(2)脱脂脱糖:将步骤(1)中的辣木叶粉依次采用9倍量石油醚、9倍量80%的乙醇在80℃下回流提取2次,每次提取2h,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;
(3)提取:向步骤(2)中的滤渣加入12倍量的无菌蒸馏水在88℃下微波加热回流提取3次,每次提取12min,提取液真空抽滤,浓缩体积为48%得到一次浓缩液,将一次浓缩液用7倍体积的50℃的无菌蒸馏水再次进行溶解,采用无水乙醇溶剂进行萃取2次,层析液在0.009MPa下浓缩体积为32%,得到二次浓缩液;
(4)脱蛋白:将步骤(3)中的浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合均匀,置于转速为260r/min的回旋振荡器中振荡18min,然后再置于转速为10000r/min的高速离心仪中离心分离10min,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;
(5)凝结:将步骤(4)中的离心液通过活性炭脱色,脱色液在62℃的旋转蒸发器中减压浓缩体积为12%,所得浓缩液加热到70℃后迅速降温至39℃,制得凝结的辣木多糖,所述凝结的辣木多糖是一种热可逆的低强度凝结胶体,其在加热到70℃时可再次完全融解。
实施例3
(1)备料:取生产期在50d的辣木叶,干燥,粉碎,过50目筛,制取辣木叶粉;
(2)脱脂脱糖:将步骤(1)中的辣木叶粉依次采用10倍量石油醚、10倍量80%的乙醇在80℃下回流提取2次,每次提取3h,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;
(3)提取:向步骤(2)中的滤渣加入15倍量的无菌蒸馏水在90℃下微波加热回流提取3次,每次提取15min,提取液真空抽滤,浓缩体积为50%得到一次浓缩液,将一次浓缩液用8倍体积的55℃的无菌蒸馏水再次进行溶解,采用无水乙醇溶剂进行萃取3次,层析液在0.01MPa下浓缩体积为35%,得到二次浓缩液;
(4)脱蛋白:将步骤(3)中的浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合均匀,置于转速为260r/min的回旋振荡器中振荡20min,然后再置于转速为10000r/min的高速离心仪中离心分离10min,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;
(5)凝结:将步骤(4)中的离心液通过活性炭脱色,脱色液在65℃的旋转蒸发器中减压浓缩体积为15%,所得浓缩液加热到75℃后迅速降温至40℃,制得凝结的辣木多糖,所述凝结的辣木多糖是一种热可逆的低强度凝结胶体,其在加热到75℃时可再次完全融解。
对比例1,采用“一种辣木叶多糖的制备方法及其用途(专利号:ZL201510269590.2)”的实施例1-3的方法制备辣木叶多糖。
对实施例1-3和对比例1制得的辣木多糖的成分含量进行检测,结果如下表所示。
实验项目 | 成分含量(%) |
实施例1 | 37.94 |
实施例2 | 38.86 |
实施例3 | 39.13 |
对比例1 | 28-31 |
对实施例1-3的方法制备凝结的辣木叶多糖进行热可逆性实验,结果如下表所示。
实验项目 | 完全融解温度(℃) | 热不可逆温度(℃) |
实施例1 | 65 | ≥80 |
实施例2 | 70 | ≥80 |
实施例3 | 75 | ≥80 |
综合上述表格可知,本发明的方法制得的辣木多糖成分含量在37.94%以上,高于现有技术制得的辣木多糖的成分含量,提取率高,纯度高,且产品具有热可逆性,更利于工业生产应用。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明,对于所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
Claims (10)
1.一种提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于,包括以下步骤:
(1)备料:将辣木叶干燥,粉碎,过50目筛,制取辣木叶粉;
(2)脱脂脱糖:将步骤(1)中的辣木叶粉依次采用石油醚、80%的乙醇在80℃回流提取2次,过滤,获得脱脂以及去除单糖和多聚糖的滤渣;
(3)提取:向步骤(2)中的滤渣加入10-15倍量的无菌蒸馏水在85-90℃下回流提取3次,提取液真空抽滤,浓缩体积为45-50%得到一次浓缩液,将一次浓缩液用6-8倍体积的45-55℃的无菌蒸馏水再次进行溶解,采用无水乙醇溶剂进行萃取2-3次,层析液在0.008-0.01MPa下浓缩体积为30-35%,得到二次浓缩液;
(4)脱蛋白:将步骤(3)中的浓缩液与正丁醇、氯仿按1:1:4的比例混合均匀,置于回旋振荡器中振荡15-20min,然后放入高速离心仪中进行离心分离,除去蛋白质和氯仿层,收集离心液;
(5)凝结:将步骤(4)中的离心液通过活性炭脱色,脱色液浓缩体积为10-15%,所得浓缩液加热到60-75℃后迅速降温至38-40℃,制得凝结的辣木多糖。
2.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(1)中所述壮龄期辣木叶以生产期在45-50d为宜。
3.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(2)中石油醚、80%的乙醇的用量均为滤渣的8-10倍。
4.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(2)中所述回流提取时长为每次2-3h。
5.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(3)中所述回流提取采用微波加热。
6.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(3)中所述回流提取时长为每次10-15min。
7.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(4)中所述回旋振荡器转速为260r/min。
8.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(4)中所述离心转速为10000r/min,离心时长为10min。
9.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(5)中所述脱色液浓缩是在60-65℃的旋转蒸发器中减压浓缩。
10.根据权利要求1所述的提取纯化辣木多糖的工艺,其特征在于:步骤(5)中所述凝结的辣木多糖是一种热可逆的低强度凝结胶体,其在加热到65-75℃时可再次完全融解。
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