CN107469082A - 一种黑磷纳米片的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗阿尔茨海默病的黑磷纳米材料，由黑磷粉末通过超声液体剥离法得到黑磷纳米片。此外，本发明还公开了所述纳米材料的制备方法及其应用。本发明中，所述的用于阿尔茨海默病治疗的黑磷纳米片，能够作为纳米捕获器有效和选择性的捕获Cu²⁺，从而减少细胞内活性氧的形成，以及保护细胞免受Cu²⁺非动态平衡相关的毒性。本发明所提供的黑磷纳米片治疗阿尔茨海默病药物可以通过光热效应提高血脑屏障通透性，克服了基于小分子化合物或多肽不能穿透血脑屏障且不稳定的缺点，提高了药效。所述的纳米材料制备方法简单，无额外的药物负载；高度的稳定性和良好的生物相容性，使其治疗阿尔茨海默病具有优良的生物安全性。

Description

一种黑磷纳米片的应用

技术领域

本发明属于医药材料制备领域；具体涉及一种黑磷纳米片应用于制备治疗阿尔茨海默病的纳米药物的应用。

背景技术

黑磷作为一种新型的层状材料，由于其晶型结构与石墨烯类似，因而被称为磷烯，在过去几年已经受到了广泛关注。它是一种蜂窝状的褶皱结构，层与层之间的范德华力比较弱，可以通过超声剥离法得到单层的纳米片。与石墨烯不同是，黑磷纳米片(BP)的能带隙与其厚度有关，大块黑磷的能带隙约为0.3eV，而单层BP纳米片的能带隙则为2.0eV。此外，由于BP纳米片具有高的电子迁移率，平面各向异性以及能吸收从紫外到整个可见光范围的波长，可广泛应用于高性能的场效应晶体管、锂离子电池、光电器件、光催化等方面。同时它也在生物医学领域显示了有趣的优势，例如BP纳米片已被用于载药、光动力治疗以及光热力治疗。

阿尔茨海默病是阿尔茨海默病(AD)是65岁以上人群中最常见的神经退行性疾病，主要临床表现为渐进性和不可逆性认知障碍与记忆丧失。随着人口老龄化增加，AD对社会和经济产生了很大影响。因此探究有效治疗AD的途径是现代医学治疗的巨大挑战和热点之一。尽管对AD做了大量研究，但其发病机制尚未完全研究透彻。越来越多研究表明氧化应激是早期阿尔茨海默病的一个关键致病因素。活性氧(ROS)能导致细胞内多种生物大分子氧化损伤，细胞内上升的氧化应激影响细胞信号通路和与AD相关的细胞过程，例如，增加Aβ的产生和老年斑的形成。目前研究表明金属不平衡也对AD和其他退行性疾病有重要影响。金属浓度升高(如铜)参与Aβ神经毒性。尤其是在生理还原条件下(如抗坏血酸(AA))，氧化还原活性的金属离子能促使ROS的形成。但是已开发的整合了金属螯合和抗氧化性能的神经保护分子，不能穿越血脑屏障(BBB)；而能跨越血脑屏障促进跨细胞途径的基于脂质体、纳米囊泡、聚合物纳米粒的纳米药物，因载药费力和制备工艺繁琐限制了他们在临床上的应用。

发明内容

本发明第一目的在于，提供一种黑磷纳米片(BP)的应用。

本发明第二目的在于，提供一种用于治疗阿尔茨海默病的药物。

本发明第三目的在于，提供一种纳米片的制备方法。

一种BP纳米片的应用，用于制备抗活性氧的药物。

本发明人通过大量研究发现，可采用BP纳米片制备用于降低组织(例如细胞，优选为脑细胞)中的活性氧含量；从而，用于制备可治疗由活性氧所导致的系列疾病的药物。

作为优选，所述的BP纳米片的应用，用于制备降低细胞内Cu²⁺含量的药物。

本发明人发现，BP纳米片可用于降低组织中的Cu²⁺含量，有助于降低Cu²⁺催化的活性氧含量。

进一步优选，将所述的BP纳米片用于制备在Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺中的至少一种与Cu²⁺的混合体系中、选择性捕获Cu²⁺的药物。

本发明人发现，所述的BP纳米片可从所述的混合离子体系中选择性地捕获Cu²⁺，从而降低还原成Cu⁺的量，从而降低氧气被Cu⁺还原成活性氧的量，在生理上表现出降低生物基质中的活性氧(过氧化氢或氧自由基)。

更进一步优选，所述的BP纳米片用于制备在Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺、Cu²⁺中混合体系中选择性捕获Cu²⁺的药物。

本发明还提供了一种BP纳米片的应用，用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。

本发明人研究发现，BP纳米片能够对人体内常见的金属离子(如Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺、Cu²⁺)选择性地捕获Cu²⁺。同时，BP纳米片也可以作为抗氧化剂，在生理条件下减少与毒性ROS形成相关的不平衡Cu²⁺的形成。而且与传统的药物分子相比，BP纳米片通过光热效应提高血脑屏障的通透性，这克服了小分子化合物或肽不稳定的缺点，提高了药效。而且，BP纳米片高度的稳定性和良好的生物相容性使其对AD治疗表现出很好的生物安全性。

作为优选，所述的BP纳米片的厚度为3～6nm，直径为200～250nm。

现有AD治疗药物制备过程复杂、药物负载率低、生物相容性差以及不能穿越血脑屏障等缺点。本发明还提供了一种用于治疗阿尔茨海默病的药物，包含黑磷纳米片。

本发明提供了所述的利用BP纳米片治疗AD的纳米药物，该BP纳米片能够选择性的调节Cu²⁺的浓度；减轻氧化应激相关的症状以及增加血脑屏障的通透性，从而为AD的治疗提供了神经保护的平台。

作为优选，所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物，还包含药学上可接受的辅料。

作为优选，所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物，包含用于制备静脉注射制剂的药学上可接受的辅料。

作为优选，本发明中，优选将所述的治疗阿尔茨海默病的药物制备成静脉注射剂。优选将所述的治疗阿尔茨海默病的药物黑磷纳米片通过静脉注射到机体(例如小鼠)内。

在使用过程中，可采用生理盐水对BP纳米片进行分散；将得到的分散溶液再通过静脉注射施药。

作为优选，所述的药物，施药剂量为5～20mgKg^-1。

本发明中，每Kg施药对象(例如小鼠)优选施加黑磷纳米片的剂量为5～20mg。

本发明还提供了一种BP纳米片的制备方法，将粉末状黑磷晶体置于包含碱、1-甲基-2吡咯烷酮的混合溶液中，冰浴条件下超声剥离；随后再经离心、洗涤、再水分散得所述的BP纳米片的分散液。

本发明人发现，超声的频率，功率以及超声时间对BP纳米片的厚度及大小具有一定的影响。在所述参数下制得的BP纳米片，分散均匀，性能更优异。

作为优选，超声的频率20～40kHz，超声功率为150～300W。

作为优选，在所述的超声频率及功率下，超声处理时间为6～12h。

混合溶液中，所述的碱为碱金属氢氧化物；混合溶液中，碱的浓度达到饱和。

作为优选，所述的碱金属氢氧化物为氢氧化钠。

为实现上述目的，本发明BP纳米片的更优选的制备方法：将粉末状黑磷晶体加入到1-甲基-2吡咯烷酮(NMP)的饱和氢氧化钠溶液中，冰浴条件下超声剥离、随后再经离心、洗涤、再水分散得所述的BP纳米片的分散液；其中，超声的频率20～40kHz，超声功率为150～300W。

本发明所述的制备方法中，所述的BP纳米片厚度约为5.5nm，直径约为200nm。

本发明制备的BP纳米片能够选择性的捕获Cu²⁺。

相对现有技术，本发明的技术方案的特色：

(1)本发明从原理上和实践上提供了一种以BP纳米片在用于制备抗活性氧的纳米药物的应用。

(2)本发明还独创性地提出，将BP纳米片应用于制备治疗AD的药物的应用。

(3)本发明中，该BP纳米片能够选择性的调节Cu²⁺的浓度；减轻氧化应激相关的症状以及增加BBB的通透性。

(4)本发明中，BP纳米片通过光热效应提高血脑屏障的通透性，这克服了小分子化合物或肽不稳定的缺点，提高了药效。而且，黑磷纳米片高度的稳定性和良好的生物相容性使其对AD治疗表现出很好的生物安全性。

(5)该材料的制备方法简单，反应条件温和、成本低，应用前景大，可进行大规模的制备。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明作进一步说明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，基于本发明的原理对本发明所做出的各种改动或修改同样落入本发明权利要求书所限定。

附图说明

图1为实施例1步骤1以及实施例2步骤2中捕获Cu²⁺前后BP纳米片的TEM图，标尺：0.2μm；(a)BP纳米片捕获Cu²⁺前的TEM图，(b)BP纳米片捕获Cu²⁺后的TEM图。

图2为实施例3步骤2中BP纳米片对不同金属离子结合能力；

图3为实施例4步骤2中BP纳米片抑制ROS产生相关的图，其中，图3的(a)部分为时间依赖的H₂O₂的浓度曲线；图3的(b)部分为不同浓度BP纳米片对H₂O₂产生的抑制，图3的(c)部分为在1.Blank，2.AA，3.Cu²⁺，4.Cu²⁺+AA，5.Cu²⁺+AA+BP处理下通过测定3-CCA的荧光强度变化对HO^·的测定；图(d)部分为在(1)AA，(2)Cu²⁺，(3)Cu²⁺+AA，(4)Cu²⁺+AA+BP处理下使用H₂DCFH-DA作为探针对细胞内ROS的测定；图3的(e)部分为BP纳米片对细胞毒性图，分别为在：1.AA，2.Cu²⁺，3.Cu²⁺+AA，4、5、6、7、为Cu²⁺+AA+BP(不同浓度)处理条件的细胞活性图。

图4为实施例5步骤1中BP纳米片在近红外光照射下提高BBB的通透性相关的图，其中，图4的(a)部分为不同浓度BP纳米片的光热效应图；图4的(b)部分为光热效应促使BP纳米片体外透过BBB的通透率图；

图4的(c)部分为BP纳米片在808nm激光照射下体外BBB穿透能力图，其中，从左至右分别为BP纳米片与808nm激光共同处理；仅BP纳米片处理；仅808nm激光处理。

图4的(d)部分BP纳米片在808nm激光照射下体内光热效应，小鼠热成像图；其中，(1)仅BP纳米片处理，(2)仅808nm激光处理，(3)BP纳米片和808nm激光共同处理。

图4的(e)部分小鼠经过处理后，使用伊文氏蓝作为BBB完整性指标的小鼠脑部图片，其中，(1)仅808nm激光处理，(2)仅BP纳米片处理，(3)BP纳米片和808nm激光共同处理。

实施例1：

步骤(1)BP纳米片的制备：

黑磷粉末样品通过超声剥离法剥离制备超薄的BP纳米片。具体过程如下：取5mg大块黑磷粉末分散在50mL饱和NaOH的N-甲基吡咯烷酮(NMP)溶液中，室温下超声12h，得棕色悬浮液，随后低速离心(4000r/min)10min，以除去未剥离的黑磷残渣，取上清液即得棕色黑磷纳米片透明液体。将所得溶液贮存于4℃冰箱中待用，使用前高速(12000r/min)离心15min，得黑磷纳米片沉淀，水洗两遍，超声分散于所需溶液中。

由图1的(a)部分可见，步骤1制得的BP纳米片为均一的纳米片。

实施例2：

步骤(1)BP纳米片的制备：同实施例1的步骤1

步骤(2)Cu含量的测定：

将10mL CuSO₄溶液(40μM)与10mL BP纳米片水溶液(20μg/mL)相混合。在不同的时间点，取2mL混合溶液用50nm滤膜过滤以除去BP纳米片。然后用原子吸收光谱仪测定滤膜中Cu的浓度，同时对经BP纳米片处理后的Cu离子溶液进行元素分析。

由图1的(b)部分可见，捕获Cu²⁺后的BP纳米片的结构与BP纳米片的结构一样。

实施例3：

步骤(1)BP纳米片的制备：同实施例1的步骤1

步骤(2)体外BP纳米片对不同金属离子结合能力实验：

实验中Ca²⁺、Mg²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺、Cu²⁺原液分别由其相对应的盐溶液CaCl₂，Mg(NO₃)₂，ZnCl₂，FeCl₃·6H₂O以及CuSO₄·5H₂O得到(各金属离子的浓度均为4μM)。将5mL BP(0.02mg/mL)纳米片水溶液与5mL金属离子原液相混合。1h后，混合物以13000rpm离心30min，随后上层液中金属离子的浓度使用ICP-MS测定。然后计算出BP纳米片对金属离子的结合能力，通过原子吸收光谱定量可得，BP纳米片对Cu²⁺的捕获能力为0.86mmol/g。

步骤(3)BP纳米片对AD患者的脑脊髓液(CSFs)中金属离子结合能力实验：

BP纳米片与CSFs相互混合1h后，通过高速离心(13000rpm)30min移去沉淀的BP纳米片，悬浮液中的金属离子使用ICP-MS测定。并通过计算得出CSFs中金属离子浓度的相对变化。测得加入BP纳米片后，CSFs中，Cu²⁺的浓度降低了43％，而其他金属离子(如Ca²⁺和Mg^{2 +})的浓度无明显的下降。

采用本发明所提供的BP纳米片捕获Cu²⁺的方法例如为：将BP纳米片加入到Cu²⁺的溶液中后，将该混合物用50nm滤膜过滤不同的时间，然后用原子吸收光谱仪测量上清液中Cu²⁺的浓度。同时，本发明人为了进一步证实了BP与Cu²⁺之间的相互作用，对BP处理后的Cu²⁺溶液进行了分析。发现捕获Cu²⁺后的BP纳米片与纯BP纳米片相比观察到明显的Cu结合能峰。俄歇谱在916.2eV的具有动能的峰值，进一步确认Cu在BP纳米片上主要以Cu⁺的形式存在。且Cu⁺与Cu²⁺的比值为9∶1，表明BP纳米片表面上的Cu元素主要以Cu⁺形式存在，且捕获Cu²⁺后的BP纳米片的结构没有改变。然后，BP纳米片对Cu²⁺的特异选择性通过加入BP纳米片前后相应的金属离子的原子吸收强度的变化进行测定。本发明人发现在这些Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Zn²⁺、Cu²⁺中BP纳米片对Cu²⁺有很高的捕获能力。本发明人以AD患者脑的CSF为模型，当加入BP纳米片后，所取人脑脊液中的Cu²⁺被捕获后浓度降低了43％，而其他离子的浓度无明显变化，表明BP纳米片对CSF中Cu²⁺具有很好的捕获能力。

实施例4：

步骤(1)BP纳米片的制备：同实施例1的步骤1

步骤(2)H₂O₂产生测定：

本发明人将实验分成以下四组：(a)AA；(b)Cu²⁺；(c)Cu²⁺+AA；(d)Cu²⁺+AA+BP。其中Cu²⁺和AA的终浓度分别为3μM和300μM。BP的浓度范围为从0.6-10μg/mL。使用缓冲溶液(20mM，pH 7.0)，混合物在室温下放置孵育1h。在孵育的过程中，H₂O₂的产生使用Amplex red试验测定，其中辣根过氧化物酶(HRP)作为催化剂。Amplex red和HRP的浓度分别为200μM和0.2U/mL，使用紫外可见吸收光谱仪测定OD₅₉₀值。然后根据标准曲线计算H₂O₂浓度。

为了检测AA的浓度，在不同时间点每次分别取出200μL的(a)，(c)和(d)。BP纳米片通过使用50nm滤膜器过滤来消除BP的干扰。根据标准曲线采用紫外-可见吸收光谱仪测定AA的含量。

为了研究BP纳米片对H₂O₂的抗氧化能力，室温下BP纳米片(浓度范围为0-20g/mL)与10μM H₂O₂相混合1h后。离心去除BP纳米片，上清液中H₂O₂的浓度使用H₂O₂检测试剂盒进行测定。

HO^·产生的测定实施步骤与H₂O₂产量测定步骤相同。使用3-CCA作为探针测定的HO^·。激发波长为395nm，使用荧光光谱测定。

以SH-SY5Y细胞为癌细胞模型，本发明所提供的BP纳米片对癌细胞的细胞内ROS产生的测定方法为：取6孔板，按每孔大约5×10⁵个细胞的密度种满6孔的SH-SY5Y细胞培育24h。随后移去培养液，加入2mL含有DCFH-DA(100μM)的培养液。培养30min后，用新鲜培养基洗三遍。随后，加入四组分别含有(a)AA；(b)Cu²⁺；(c)Cu²⁺+AA；(d)Cu²⁺+AA+BP的培养液。Cu²⁺和AA的终浓度分别为3μM和300μM。培育2h后，用培养液洗一遍然后加入赫克斯特33342染色20min。然后用PBS洗一遍，使用荧光倒置显微镜成像，并将细胞内DCFH-DA量化。

以SH-SY5Y细胞为癌细胞模型，本发明所提供的BP纳米片对癌细胞毒性的测试方法为：取96孔板，按每孔大约1×10⁵个细胞的密度种满6孔的SH-SY5Y细胞培育24h。然后吸走原培养液，然后分别加入100μL的(a)AA；(b)Cu²⁺；(c)Cu²⁺+AA；(d)Cu²⁺+AA+BP的培养液。Cu²⁺和AA的终浓度分别为3μM和300μM。BP纳米片的浓度为0-10μg/mL。同培育12h后，用PBS洗二遍，再用CCK-8试剂盒测定。

研究表明，AD患者脑内ROS的产生与Cu²⁺催化氧化AA有关。本发明人接着对BP纳米片在抑制Cu²⁺催化ROS产生的性能进行了研究。实验在没有Cu²⁺存在时，只有少数AA被氧化；当加入Cu²⁺后，AA的氧化增加，且30min内几乎所有的AA被氧化，表明Cu²⁺能有效地催化AA的氧化。但是，当加入BP纳米片后，AA的氧化不明显，表明BP纳米片能抑制由Cu²⁺催化引起的AA的氧化。

同时，还通过荧光试剂测定了H₂O₂的产生。当有AA或者Cu²⁺时，1h内只有少量H₂O₂产生；当往AA中加入Cu²⁺后，H₂O₂的浓度在1h内增加到27μM，这表明Cu²⁺能有效地催化H₂O₂的产生。然而，当加入BP纳米片后能够完全地抑制H₂O₂的产生。且H₂O₂的抑制与BP纳米片的浓度有关，5μg/mL的BP纳米片能够完全抑制H₂O₂的产生。忽略BP纳米片直接抑制H₂O₂的产生，BP纳米片抑制H₂O₂主要是通过捕获Cu²⁺来抑制Cu²⁺的氧化还原反应。

研究表明，AA和Cu²⁺同时存在时，H₂O₂能进一步与Cu²⁺通过哈伯-韦斯反应和芬顿反应产生羟基自由基(HO^·)。本发明人通过香豆素-3-羧酸(3-CCA)作为荧光探针来测定BP纳米片能抑制HO^·的产生。AA和Cu²⁺同时存在的溶液荧光强度明显强于AA和Cu²⁺单独时存在时，表明产生了大量的HO^·。然而当加入BP纳米片后只观察到少量的荧光强度变化。也就是，BP纳米片能完全抑制HO^·的产生。

由于BP纳米片能抑制HO^·和H₂O₂的产生，而ROS主要组成为HO^·和H₂O₂。本发明人进一步测定了BP纳米片对ROS的影响，且使用荧光探针检测细胞内ROS。当AA和Cu²⁺单独时存在时，细胞内ROS浓度没有增加；当细胞用AA和Cu²⁺培养时，细胞内的荧光强度显著增强了8倍，表明细胞内ROS的浓度升高了。然而，当BP纳米片加入后，细胞内ROS的浓度降低到正常细胞水平。因此，BP纳米片能够通过Cu²⁺催化氧化还原反应降低细胞内ROS的产生。

本发明人通过细胞毒性实验评估了BP纳米片的神经保护作用。AA和Cu²⁺没有明显的细胞毒性，BP纳米片当浓度为20μg/mL具有很小的细胞毒性。用AA和Cu²⁺培养细胞，几乎所有的细胞都死亡，细胞内升高的ROS使SH-SY5Y细胞的活性。而当BP纳米片加入后，细胞的活性又恢复，且当加入5μg/mL的BP纳米片，有90％的细胞存活。同时，本发明人还使用calcein-AM/PI染料分别对活/死细胞进行细胞活性染色。从荧光图可以看出，用AA和Cu²⁺培养的细胞大多数死亡；而当加入BP纳米片后，细胞活性明显升高。因此，BP纳米片能保护SH-SY5Y细胞免受由Cu²⁺的非动态平衡和高氧化还原反应引起的细胞凋亡。

实施例5：

步骤(1)BP纳米片的光热效应实验方法：

0.5mL的BP纳米片水溶液(溶度范围为0-20μg/mL)用808nm激光照射，光强度为1.0W/cm²。并用近红外热成像仪记录溶液温度的变化。

BP纳米片对体外BBB的通透性测试的方法：

体外BBB的模型构建方式为：bEnd.3细胞以每孔大约5×10⁴个细胞的密度接种于培养板的上室，使其形成致密单层。当跨膜电阻(TEER)达到150Ω cm²时，移去上室中每个孔中的培养基，加入溶解于HEPES-KRH缓冲液中的BP纳米片(20μg/mL)。随后用808nm激光(0.6W/cm²)照射该单层细胞30min，没有光照的单层细胞作为对照组。上室中BP纳米片中的浓度使用紫外可见光谱测定后根据标准曲线得出。

BP纳米片对体内外BBB的通透性测试的方法：将雄性BALB/c小鼠(6周)分成三组(每组4个)：(1)808nm激光照射组；(2)BP组；(3)BP+808nm激光照射组。所有的小鼠均通过静脉注射伊文氏蓝溶液(100μL，2wt％)。3min后，对第(2)组和第(3)组的小鼠，按5.25mg/Kg的剂量静脉注射溶于生理盐水的BP纳米片。1h后，第(1)组和第(3)组的小鼠用808nm激光(1W/cm²)照射5min，并用近红外热成像仪监测小鼠头部温度的变化。

本发明人还对线粒体电位(MMP)进行了测定来研究线粒体的功能。高MMP将导致荧光染料JC-1在正常的线粒体基质中聚集并发出橙色荧光。然而一旦线粒体被破坏，MMP下降JC-1主要以单体形式存在并发出绿色荧光。用AA或Cu²⁺单独培养细胞后，绿色荧光和红色荧光之比(G/R)与正常细胞的一致，表明AA或Cu²⁺对MMP只有一点影响；而当细胞用AA和Cu-β培养G/R增加，破坏了线粒体；当加入BP纳米片后，G/R与正常细胞的几乎相同。因此，BP纳米片的保护机制是通过降低细胞内ROS含量和维持细胞正常的MMP来抑制细胞凋亡。

本发明人发现，用808nm激光照射3min后，无BP纳米片的溶液温度只升高了3.4℃；而BP纳米片溶液的温度升高了23℃，表明BP纳米片有很强的光热效应。考虑到BP纳米片的光热效应，在近红外光下BP纳米片能提高BBB的穿透性。

本发明人接着验证了BP纳米片提高BBB穿透性的可行性。将单层bEnd.3细胞种在通透性膜上，从而模拟了体外BBB模型。通过测定BP纳米片从上室转移到下室的量来测量其通透性。经过近红外光照射后，BP纳米片从上室转移到下室的百分含量是无激光对照组的6倍，表明通过BP纳米片的光热效应提高了BBB的穿透性。同时，伊文氏蓝作为指示剂，探讨了BP纳米片在活体中BBB的穿透性。静脉注射伊文氏蓝和BP纳米片1h后，小鼠的大脑用808nm激光照射并检测头部温度变化。BP纳米片良好的光热效应使其注入后，头部的温度升高到了42.2℃，对照组大脑的温度只升高到35.3℃。为了促进BP纳米片渗透性，大脑温度保持在41-43℃范围内5min。24h后，收割小鼠大脑。伊文氏蓝染色只在注射BP纳米片且用近红外光照射处理的小鼠大脑中观察到，表明通过BP纳米片的光热效应能够提高穿越BBB的通透性。而且，激光照射对细胞的活性影响不大，也不会造成严重的大脑损伤。

Claims (10)

1.一种黑磷纳米片的应用，其特征在于，用于制备抗活性氧的药物。

2.如权利要求1所述的黑磷纳米片的应用，其特征在于，用于制备降低细胞内Cu²⁺含量的药物。

3.如权利要求2所述的黑磷纳米片的应用，其特征在于，用于制备在Ca²⁺、Mg²⁺、Fe²⁺、Fe^{3 +}、Zn²⁺中的至少一种与Cu²⁺的混合体系中、选择性捕获Cu²⁺的药物。

4.如权利要求1～3任一项黑磷纳米片的应用，其特征在于，用于制备治疗阿尔茨海默病的药物。

5.如权利要求1～4任一项所述的黑磷纳米片的应用，其特征在于，所述的黑磷纳米片的厚度为3～6nm，直径为200～250nm。

6.一种用于治疗阿尔茨海默病的药物，其特征在于，包含黑磷纳米片。

7.如权利要求6所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物，其特征在于，还包含药学上可接受的辅料。

8.如权利要求7所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物，其特征在于，包含用于制备静脉注射制剂的药学上可接受的辅料。

9.如权利要求6～8任一项所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物，其特征在于，施药剂量为5～20mgKg^-1。

10.一种权利要求1～9任一项所述的黑磷纳米片的制备方法，其特征在于，将粉末状黑磷晶体置于包含碱、1-甲基-2吡咯烷酮的混合溶液中，冰浴条件下超声剥离；随后再经离心、洗涤、再水分散得所述的BP纳米片的分散液；

超声的频率20～40kHz，超声功率为150～300W；

混合溶液中，所述的碱为碱金属氢氧化物；混合溶液中，碱的浓度达到饱和。