CN107384841A - 一种对鳞翅目害虫防治的菌剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20～30份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液10～15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液5～10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5～10份、酵母菌发酵菌液5～10份。此外，本发明还提供了一种对鳞翅目害虫防治的菌剂的制备方法。本发明针对鳞翅目害虫以及各菌剂的特点，将五种微生物菌剂配合使用，其中，苏云金芽孢杆是主要的杀虫菌，而菌侧孢短芽孢杆菌、冷解糖芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌能够对苏云金芽孢杆菌起到协同增效作用，酵母菌能够对经过鳞翅目害虫危害过的叶片起到保护和修复作用。此外，本发明的菌剂使用过后无残留，无抗药性，绿色环保。

Description

一种对鳞翅目害虫防治的菌剂及其制备方法
技术领域
本发明属于杀虫剂技术领域，具体涉及一种对鳞翅目害虫防治的菌剂及其制备方法。
背景技术
虫害是造成农作物减产的重要原因之一，减少害虫的危害是增加粮食与饲料作物产量与品质的重要途径。据统计，全球粮食与饲料作物总产量每年因虫害造成的损失达14％，直接给农业生产造成的经济损失高达数千亿美元。采用喷施化学农药和生物杀虫剂等防治手段固然可以减轻害虫对农作物的为害，但是化学农药对人畜不安全，容易造成环境污染，而生物杀虫剂成本较高，防效相对较低。长期以来，大量喷施化学杀虫剂，不仅会增强害虫的抗药性，使益虫及其它生态区系遭受破坏，而且严重污染环境，提高生产成本，破坏生态平衡。因此，减少杀虫剂使用量，发展现代生物技术，已成为可持续发展农业中必须正视的问题。
微生物杀虫剂是利用微生物活体或其代谢产物来防治害虫的，它具有特异性强、防治效果好、对人畜安全、不破坏生态平衡、害虫不易产生抗药性等优点。目前的微生物杀虫剂主要包括三类：1、细菌类杀虫剂：细菌杀虫剂是应用最早的微生物杀虫剂，根据对昆虫致病性的不同，分为专性病原体、兼性病原体和潜势病原体。目前被开发成产品投入实际使用的主要有4种：苏云金芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、日本金龟子芽孢杆菌和缓病芽孢杆菌，其中苏云金芽孢杆菌是当今研究最多、应用最广的微生物杀虫剂，其功效产物为伴胞晶体蛋白和苏云金素。2、真菌类杀虫剂：真菌类杀虫剂种类繁多，目前记载的约有800多种，其中大部分是兼性或专性病原体，研究应用较多的有白僵菌、绿僵菌、拟青霉菌、轮枝菌等。但其生长和繁殖在很大程度上受外界条件的限制，在实际应用中受到环境限制。3、病毒类杀虫剂：昆虫病毒的感染途径主要有食入感染和皮肤感染，目前该类制剂正处于研发阶段，工业化生产还不成熟。
但是现有的微生物杀虫剂在实际应用过程中应用范围较为单一，菌种间的拮抗作用强，杀虫谱较窄，防效较低，在工业化应用和环境适应性、抗逆性等方面现有产品也存在诸多不足，限制了微生物制剂在农作物杀虫上的广泛应用。
发明内容
本发明提供了一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，解决了现有技术中微生物杀虫剂应用范围单一，菌种间的拮抗作用强，杀虫谱较窄以及防效较低的问题。
本发明的第一个目的是提供一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20～30份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液10～15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液5～10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5～10份、酵母菌发酵菌液5～10份。
优选的，所述对鳞翅目害虫防治的菌剂的制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液25份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5份、酵母菌发酵菌液5份。
优选的，所述苏云金芽孢杆菌发酵菌液是由苏云金芽孢杆菌纯菌株培养到形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离后得到的；所述侧孢短芽孢杆菌发酵菌液是由侧孢短芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述冷解糖芽孢杆菌发酵菌液是由冷解糖芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述蜡质芽孢杆菌发酵菌液是由蜡质芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述酵母菌发酵菌液是由酵母菌纯菌株培养到对数末期得到的。
优选的，所述对鳞翅目害虫防治的菌剂中的有效活菌数为109～1010个/克。
本发明的第二个目的是提供一种对鳞翅目害虫防治的菌剂的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1，分别制备苏云金芽孢杆菌种子液、侧孢短芽孢杆菌种子液、冷解糖芽孢杆菌种子液、蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液；
步骤2，制备苏云金芽孢杆菌发酵菌液
向苏云金芽孢杆菌培养基质中接种苏云金芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离，得到苏云金芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述苏云金芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：蛋白胨10g、玉米蛋白粉5g、葡萄糖10g、棉粕粉5g、氯化锰0.01g、氯化钴0.01g，余量为水；
步骤3，制备侧孢短芽孢杆菌发酵菌液
向侧孢短芽孢杆菌培养基质中接种侧孢短芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到侧孢短芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述侧孢短芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：豆粕粉20g、棉粕粉10g、玉米淀粉20g、石粉10g、大豆糖蜜10g、硫酸锰0.02g、磷酸氢二钾0.1g、硫酸镁0.02g、余量为水；
步骤4，制备冷解糖芽孢杆菌发酵菌液
向冷解糖芽孢杆菌培养基质中接种冷解糖芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到冷解糖芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述冷解糖芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：葡萄糖8g、玉米淀粉30g、菜粕粉40g、硫酸镁0.04g、硫酸锰0.05g、磷酸二氢钾0.2g，余量为水；
步骤5，制备蜡质芽孢杆菌发酵菌液
向蜡质芽孢杆菌培养基质中接种蜡质芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到蜡质芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述蜡质芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：马铃薯浸出粉15g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、动物粪便10g，余量为水；
步骤6，制备酵母菌发酵菌液
向酵母菌培养基质中接种酵母菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到酵母菌发酵菌液；
其中，每升所述酵母菌培养基质中包含下述组分：糊精15g、鱼粉10g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、酒石酸铵1g，余量为水；
步骤7，按以下重量份称取各组分：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20～30份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液10～15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液5～10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5～10份、酵母菌发酵菌液5～10份，将上述各组分混合均匀，即得到所述对鳞翅目害虫防治的菌剂。
优选的，所述苏云金芽孢杆菌种子液、所述侧孢短芽孢杆菌种子液、所述冷解糖芽孢杆菌种子液、所述蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液的接种量均为5～10mL种子液/kg基质。
本发明中，苏云金芽孢杆菌是一种应用广泛的绿色环保型微生物杀虫剂，其在芽孢形成期可产生具有杀虫活性的伴孢晶体，且伴孢晶体(原毒素)对鳞翅目或双翅目等多种昆虫具有毒杀活性。但是苏云金芽孢杆菌杀虫剂存在稳定性较差、残效期短、杀虫速度慢等问题，并且苏云金芽孢杆菌对鳞翅目夜蛾科害虫的毒力一般较低，而许多夜蛾又是农业生产上危害严重的害虫，上述问题影响了苏云金芽孢杆菌杀虫剂的广泛应用。
侧孢短芽孢杆菌是一种杆状的、产生内孢子的兼性厌氧细菌，能够产生特有的独木舟状伴孢体，紧紧地依附于芽孢一侧，从而使其芽孢侧生。侧孢短芽孢杆菌一般用来杀灭线虫，但是在本发明中发现，侧孢短芽孢杆菌的菌株中纯化出来的丝氨酸胞外蛋白酶对鳞翅目害虫的体壁也有一定的降解作用，具有一定的杀灭鳞翅目害虫的能力，组织病理电镜实验证实这种蛋白酶破坏了鳞翅目害虫的体壁。此外，芽孢囊内还发现了有棱角的球状伴孢体和有交叉平行带纹的伴孢体，这些结构功能有助于提高其杀虫活性。
冷解糖芽孢杆菌能够产生多种抗菌物质，包括脂肽类、肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类和核酸类等多种化合物，这些抗菌物质能抑制真菌、细菌、病毒和菌原体等的正常生长，并且冷解糖芽孢杆菌在与苏云金芽孢杆菌配合使用时，能够对玉米螟、夜蛾科害虫具有很好的杀灭作用。
蜡质芽孢杆菌是微生物源杀菌剂，主要应用于防治土壤传播的细菌性病害,如姜瘟病、茄子青枯病、辣椒青枯病等，但是蜡质芽孢杆菌能产生一种水溶性物质ZwittermicinA，该物质能够与苏云金芽孢杆菌复配，能加剧敏感昆虫中肠上皮细胞受体孔道形成，增强伴孢晶体的作用效果。
酵母菌能够产生多种催化分解酶，具有很强的发酵能力，可将各种有机质及含有营养元素的矿物质分解，产生植物生长必需的各种矿物质元素和促生长因子、抗逆因子。更重要的是，酵母菌还能够提高光合速率，增加植物对CO2的吸收，调节植物的C/N比，增强植株抗病能力，在植株经过虫害后，能够对植株进行快速修复，使植株整体长势好、叶色绿、产量高。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
现有技术中，苏云金芽孢杆菌对鳞翅目害虫的防治效果有限，其杀虫谱较窄，而侧孢短芽孢杆菌、冷解糖芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌虽然具有一定的杀虫效果，但是单独使用时对鳞翅目害虫防治的效果有限，且目前尚未发现有任何文献公开报道过将这几类菌剂单独或组合起来用于防治鳞翅目害虫。
本发明针对鳞翅目害虫以及各菌株的特点，将五种微生物菌株制成复合菌剂配合使用，其中，侧孢短芽孢杆菌、冷解糖芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌本身有一定的杀虫能力，一方面能够弥补苏云金芽孢杆菌对鳞翅目害虫的防治效果有限以及杀虫谱较窄的缺陷，另一方面能够对苏云金芽孢杆菌的杀虫能力起到协同增效作用，酵母菌能够对鳞翅目害虫危害过的叶片起到保护和修复作用，五种微生物菌株制成复合菌剂配合使用能够杀灭大部分的鳞翅目害虫。此外，本发明制备出的菌剂使用过后无残留、无抗药性、绿色环保，具有广泛的应用前景。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。
下述实施例中所用的苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌BtR05，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号CGMCC NO.2823；侧孢短芽孢杆菌为侧孢短芽孢杆菌G4菌株，购自中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO.M203045；冷解糖芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌以及酵母菌均为微生物领域常用菌株，均购自中国普通微生物菌种保藏管理中心。
实施例中苏云金芽孢杆菌种子液、侧孢短芽孢杆菌种子液、冷解糖芽孢杆菌种子液、蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液均是采用常规方法培养得到的，且下述各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液10份、酵母菌发酵菌液5份；
其中，苏云金芽孢杆菌发酵菌液是由苏云金芽孢杆菌纯菌株培养到形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离后得到的；侧孢短芽孢杆菌发酵菌液是由侧孢短芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；冷解糖芽孢杆菌发酵菌液是由冷解糖芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；蜡质芽孢杆菌发酵菌液是由蜡质芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；酵母菌发酵菌液是由酵母菌纯菌株培养到对数末期得到的。
具体按照以下步骤实施：
步骤1，分别制备苏云金芽孢杆菌种子液、侧孢短芽孢杆菌种子液、冷解糖芽孢杆菌种子液、蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液；
步骤2，制备苏云金芽孢杆菌发酵菌液
向苏云金芽孢杆菌培养基质中接种苏云金芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离，得到苏云金芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升苏云金芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：蛋白胨10g、玉米蛋白粉5g、葡萄糖10g、棉粕粉5g、氯化锰0.01g、氯化钴0.01g，余量为水；
步骤3，制备侧孢短芽孢杆菌发酵菌液
向侧孢短芽孢杆菌培养基质中接种侧孢短芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到侧孢短芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升侧孢短芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：豆粕粉20g、棉粕粉10g、玉米淀粉20g、石粉10g、大豆糖蜜10g、硫酸锰0.02g、磷酸氢二钾0.1g、硫酸镁0.02g、余量为水；
步骤4，制备冷解糖芽孢杆菌发酵菌液
向冷解糖芽孢杆菌培养基质中接种冷解糖芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到冷解糖芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升冷解糖芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：葡萄糖8g、玉米淀粉30g、菜粕粉40g、硫酸镁0.04g、硫酸锰0.05g、磷酸二氢钾0.2g，余量为水；
步骤5，制备蜡质芽孢杆菌发酵菌液
向蜡质芽孢杆菌培养基质中接种蜡质芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到蜡质芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升蜡质芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：马铃薯浸出粉15g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、动物粪便10g，余量为水；
步骤6，制备酵母菌发酵菌液
向酵母菌培养基质中接种酵母菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到酵母菌发酵菌液；
其中，每升酵母菌培养基质中包含下述组分：糊精15g、鱼粉10g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、酒石酸铵1g，余量为水；
步骤7，按以下重量份称取各组分：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液10份、酵母菌发酵菌液5份，将上述各组分充分混合均匀，即得到对鳞翅目害虫防治的菌剂。
需要说明的是，苏云金芽孢杆菌种子液、侧孢短芽孢杆菌种子液、冷解糖芽孢杆菌种子液、蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液的接种量均为5～10mL种子液/kg基质。
实施例2
一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液25份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5份、酵母菌发酵菌液5份。
制备方法同实施例1，只是将配方改为实施例2的对鳞翅目害虫防治的菌剂配方。
实施例3
一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液30份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液10份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液5份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5份、酵母菌发酵菌液10份。
制备方法同实施例1，只是将配方改为实施例3的对鳞翅目害虫防治的菌剂配方。
下面结合对鳞翅目害虫防治的菌剂的应用来对本发明的效果做进一步的说明。
由于实施例1～3制备出的菌剂用来防治鳞翅目害虫的效果相似，因此仅以实施例2中优选的菌剂防治鳞翅目害虫后测定出的性能参数作为说明。
将本发明实施例2制备出的对鳞翅目害虫防治的菌剂按照1:5000的比例稀释，作为供试药液，以稻纵卷叶螟、大螟、稻苞虫的幼虫作为供试害虫，具体试验方法为：将新鲜稻叶在供试药液中浸渍5s，自然晾干，再将供试害虫在供试药液中浸渍5s，以吸水纸吸收残留在供试害虫表面的药液，然后将供试害虫和稻叶一同放置在培养皿中，每个培养皿中放置10头供试害虫，其中稻纵卷叶螟、大螟、稻苞虫各测试50头幼虫，然后培养皿扎上纱布，放置在温度为26±1℃的人工气候培养箱中培养，于12h后检查死亡虫数，其中用毛笔拨动虫体，虫体不动即判定为死亡，每组试验重复3次，本发明中的对照试验使用的供试药液为与实施例2有效活菌数相同的苏云金芽孢杆菌菌剂，其中
死亡率(％)＝(死亡虫数/总虫数)×100％
校正死亡率(％)＝[(处理死亡率-对照死亡率)/(1-对照死亡率)]×100％，具体试验结果如下。
表1室内毒性测试数据
从表1可以看出，本发明制备出的菌剂对多种鳞翅目害虫的杀虫效果显著，其死亡率均能达到95％以上，校正死亡率基本都在80％以上，效果明显优于对照样，而且本发明制备出的菌剂使用过后无残留，无抗药性，绿色环保。
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，由于采用的步骤方法与实施例1～3相同，为了防止赘述，本发明的描述了优选的实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (6)

1.一种对鳞翅目害虫防治的菌剂，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)发酵菌液20～30份、侧孢短芽孢杆菌(Brevibacillus laterosporu)发酵菌液10～15份、冷解糖芽孢杆菌(Bacilluspsychrosaccharolyticus)发酵菌液5～10份、蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)发酵菌液5～10份、酵母菌发酵菌液5～10份。
2.根据权利要求1所述的对鳞翅目害虫防治的菌剂，其特征在于，其制备原料由以下重量份数的组分组成：苏云金芽孢杆菌发酵菌液25份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5份、酵母菌发酵菌液5份。
3.根据权利要求1或2所述的对鳞翅目害虫防治的菌剂，其特征在于，所述苏云金芽孢杆菌发酵菌液是由苏云金芽孢杆菌纯菌株培养到形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离后得到的；所述侧孢短芽孢杆菌发酵菌液是由侧孢短芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述冷解糖芽孢杆菌发酵菌液是由冷解糖芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述蜡质芽孢杆菌发酵菌液是由蜡质芽孢杆菌纯菌株培养到对数末期得到的；所述酵母菌发酵菌液是由酵母菌纯菌株培养到对数末期得到的。
4.根据权利要求1或2所述的对鳞翅目害虫防治的菌剂，其特征在于，所述对鳞翅目害虫防治的菌剂中的有效活菌数为109～1010个/克。
5.一种权利要求1所述的对鳞翅目害虫防治的菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1，分别制备苏云金芽孢杆菌种子液、侧孢短芽孢杆菌种子液、冷解糖芽孢杆菌种子液、蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液；
步骤2，制备苏云金芽孢杆菌发酵菌液
向苏云金芽孢杆菌培养基质中接种苏云金芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至形成芽孢和伴孢晶体，并且产生晶孢分离，得到苏云金芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述苏云金芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：蛋白胨10g、玉米蛋白粉5g、葡萄糖10g、棉粕粉5g、氯化锰0.01g、氯化钴0.01g，余量为水；
步骤3，制备侧孢短芽孢杆菌发酵菌液
向侧孢短芽孢杆菌培养基质中接种侧孢短芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到侧孢短芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述侧孢短芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：豆粕粉20g、棉粕粉10g、玉米淀粉20g、石粉10g、大豆糖蜜10g、硫酸锰0.02g、磷酸氢二钾0.1g、硫酸镁0.02g、余量为水；
步骤4，制备冷解糖芽孢杆菌发酵菌液
向冷解糖芽孢杆菌培养基质中接种冷解糖芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到冷解糖芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述冷解糖芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：葡萄糖8g、玉米淀粉30g、菜粕粉40g、硫酸镁0.04g、硫酸锰0.05g、磷酸二氢钾0.2g，余量为水；
步骤5，制备蜡质芽孢杆菌发酵菌液
向蜡质芽孢杆菌培养基质中接种蜡质芽孢杆菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到蜡质芽孢杆菌发酵菌液；
其中，每升所述蜡质芽孢杆菌培养基质中包含下述组分：马铃薯浸出粉15g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、动物粪便10g，余量为水；
步骤6，制备酵母菌发酵菌液
向酵母菌培养基质中接种酵母菌种子液，混合均匀，然后在28℃下以200r/min振荡速度培养至对数末期，得到酵母菌发酵菌液；
其中，每升所述酵母菌培养基质中包含下述组分：糊精15g、鱼粉10g、酵母浸出粉5g、葡萄糖20g、酒石酸铵1g，余量为水；
步骤7，按以下重量份称取各组分：苏云金芽孢杆菌发酵菌液20～30份、侧孢短芽孢杆菌发酵菌液10～15份、冷解糖芽孢杆菌发酵菌液5～10份、蜡质芽孢杆菌发酵菌液5～10份、酵母菌发酵菌液5～10份，将上述各组分混合均匀，即得到所述对鳞翅目害虫防治的菌剂。
6.根据权利要求5所述的所述的对鳞翅目害虫防治的菌剂的制备方法，其特征在于，所述苏云金芽孢杆菌种子液、所述侧孢短芽孢杆菌种子液、所述冷解糖芽孢杆菌种子液、所述蜡质芽孢杆菌种子液和酵母菌种子液的接种量均为5～10mL种子液/kg基质。
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