CN107202870A - 一种蒙脱石药效的体外评价方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种药效评价方法,具体讲,涉及一种蒙脱石药效的体外评价方法。本发明提出了一种蒙脱石吸附效果的体外评价的方法,本发明通过测定蒙脱石在一定浓度下对菌液中细菌的吸附后,残余在菌液中的细菌数,通过吸附率公式计算得到蒙脱石的吸附率,用于进行蒙脱石对细菌吸附作用的评价。本发明通过将吸附温度控制在35℃~40℃,从而模拟人体温度;将吸附时间控制在15分钟~24小时,从而模拟了在腹泻和正常条件下,蒙脱石在肠道的停留时间,从而最大限度的模拟了人体状态。
Description
技术领域
本发明涉及一种药效评价方法,具体讲,涉及一种蒙脱石药效的体外评价方法。
背景技术
蒙脱石(montmorillonite)又名微晶高岭石或胶岭石,是一种硅铝酸盐,其主要成分为八面体蒙脱石微粒,因其最初发现于法国的蒙脱城而命名。由于其特殊的内部结构,带有不饱和的负电荷以及强烈的阳离子产换能力,对进入人体的细菌具有吸附和固定的作用。临床上用作治疗腹泻和消化道溃疡的药物。
由于蒙脱石的来源为天然矿物,会受到产地的影响,因此,需要对其药效进行评价。蒙脱石的在用于止泻药物中的药效评价方法一般采用将蒙脱石与菌液直接混合的方法进行,然而该方法存在精度不足的缺陷,不能对蒙脱石的药效进行区别化评价。
鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的发明目的在于提出一种蒙脱石药效的体外评价方法。
为了完成本发明的目的,采用的技术方案为:
本发明涉及一种蒙脱石药效的体外评价方法,至少包括以下步骤:
1、一种蒙脱石药效的体外评价方法,其特征在于,至少包括以下步骤:
步骤1、将蒙脱石待测样品3~12g与含有吸附物的液体混合,在35℃~40℃条件下振摇处理15分钟~24小时;处理结束后,静置至分层,取上清,测定上清中的吸附物的含量;获得实验组吸附后含量;
其中,所述蒙脱石待测样品与所述含有吸附物的液体的配比为每克蒙脱石待测样品加入到10~80ml的所述含有吸附物的液体中;
步骤2、取所述含有吸附物的液体,采用与步骤1相同的方法测定上清中的吸附物的含量,获得对照组吸附后含量;
步骤3、根据式I计算吸附率,
吸附率(%)=〔1-(实验组吸附后含量/对照组吸附后含量)〕×100%
(式I)
采用所述吸附率评价所述蒙脱石待测样品的药效。
可选的,所述吸附物选自微生物、微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物。
可选的,所述微生物选自细菌、病毒或霉菌;
所述细菌优选引起腹泻的细菌,更优选大肠杆菌、霍乱弧菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、苏云金芽胞杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌或伤寒沙门菌;
所述病毒优选引起腹泻的病毒,更优选轮状病毒;
所述微生物毒素选自黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、寄生曲霉素、展青霉素、原毒素蛋白或轮状病毒胆盐,更优选黄曲霉毒素。
可选的,所述可溶性气体、所述有机磷农药、所述有机酸、所述有机碱和所述含金属离子的化合物选自引起中毒和/或腹泻的物质;
所述可溶性气体O2、CO2、N2、NH3,更优选CO2、NH3;
所述有机碱优选硫酸士的宁、三氯六氨合钴;
所述含金属离子的化合物中的金属离子优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子、锌离子、钴离子,更优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子。
可选的,当所述吸附物选自微生物时,所述含有吸附物的液体为含有所述微生物的培养液;
当所述吸附物选自微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物时,所述含有吸附物的液体为含有所述吸附物的水或溶液。
可选的,所述含有吸附物的液体的pH值为6.5~7.0。
可选的,当所述吸附物选自细菌时,所述含有吸附物的液体中所述细菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自病毒时,所述含有吸附物的液体中所述病毒的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自霉菌时,所述含有吸附物的液体中所述霉菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自微生物毒素时,所述含有吸附物的液体中所述微生物毒素的浓度为10μg/kg~100μg/kg;
当所述吸附物选自可溶性气体时,所述含有吸附物的液体中所述可溶性气体CO2的浓度为0.5g/L~1.45g/L,NH3的浓度为0.3g/L~0.7081g/L;
当所述吸附物选自剧毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述高毒有机磷农药的浓度为2~20mg/kg;
当所述吸附物选自高毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述高毒有机磷农药的浓度为10mg/kg~100mg/kg;
当所述吸附物选自中毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述中毒有机磷农药的浓度为100mg/kg~1000mg/kg;
当所述吸附物选自低毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述低毒有机磷农药的浓度为1000mg/kg~5000mg/kg;
当所述吸附物选自有机碱时,所述含有吸附物的液体中所述有机碱的浓度为0.2mg/ml~1mg/ml;
当所述吸附物选自含金属离子的化合物时,所述含有吸附物的液体中所述含金属离子的化合物的浓度为20~100ppm。
可选的,所述振摇处理时振摇的频率为10~120次/分钟,优选为20~90次/分钟。
可选的,在静置至分层的过程中,加入助沉剂;
所述助沉剂优选聚乙二醇、山梨醇、十二烷基硫酸钠或非抑菌性表面活性剂,所述非抑菌性表面活性剂优选吐温80或卵磷脂。
可选的,每克蒙脱石待测样品加入到50~80ml的所述含有吸附物的液体中,以模拟胃肠道内的状态。
本发明的技术方案至少具有以下有益的效果:
本发明提出了一种蒙脱石吸附效果的体外评价的方法,本发明通过测定蒙脱石在一定浓度下对含有吸附物的液体的进行吸附后、残余在液体中的吸附物的含量,通过吸附率(%)公式计算得到蒙脱石的吸附率,从而进行蒙脱石对吸附物吸附作用的评价。
本发明可测定蒙脱石针对各种吸附物的吸附情况,由于蒙脱石主要用于治疗腹泻和/或中毒等病症,因此吸附物可选自引起腹泻和/或中毒物质。
本发明通过将吸附温度控制在35℃~40℃,从而模拟人体温度;将吸附时间控制在15分钟~24小时,从而模拟了在腹泻和正常条件下,蒙脱石在肠道的停留时间,从而最大限度的模拟了人体状态。因此,本发明的方法可代替临床实验,经实验验证,其吸附效果与临床实验结果呈正相关。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
本发明实施例提出一种蒙脱石药效的体外评价方法,至少包括以下步骤:
步骤1、将蒙脱石待测样品3~12g与含有吸附物的液体混合,在35℃~40℃条件下振摇处理15分钟~24小时;处理结束后,静置至分层,取上清,测定上清中的吸附物的含量;获得实验组吸附后含量;
其中,蒙脱石待测样品与含有吸附物的液体的配比为每克蒙脱石待测样品加入到10~80ml的含有吸附物的液体中;
步骤2、取含有吸附物的液体,采用与步骤1相同的方法测定上清中的吸附物的含量,获得对照组吸附后含量;
步骤3、根据式I计算吸附率,
吸附率(%)=〔1-(实验组吸附后含量/对照组吸附后含量)〕×100%
(式I)
采用吸附率评价蒙脱石待测样品的药效。
进一步优选的,在步骤1中,蒙脱石待测样品加入3g、6g、9g或12g。
进一步优选的,在步骤1中,本发明通过将吸附温度控制在36℃~39℃,更优选36.5℃~38.5℃,从而模拟人体温度。
进一步优选的,在步骤1中,本发明通过将吸附时间控制在15分钟~24小时,从而模拟了在腹泻和正常条件下,蒙脱石在肠道的停留时间,从而最大限度的模拟了人体状态。
进一步优选的,在步骤2中,采用与步骤1中浓度相同的含有吸附物的液体进行测定;
或者,在步骤2中,采用与步骤1中浓度不同的含有吸附物的液体进行测定,最后折算成同一浓度进行计算吸附率。
在本发明实施例中,吸附物选自微生物、微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物。
微生物选自细菌、病毒或霉菌。
具体的,细菌可选自引起腹泻的细菌,例如大肠杆菌、霍乱弧菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、苏云金芽胞杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌或伤寒沙门菌,并不限于此。
具体的,病毒优选引起腹泻的病毒,例如轮状病毒,并不限于此。
具体的,微生物毒素对人体由毒有害的物质,具体可选自黄曲霉毒素、原毒素蛋白或轮状病毒胆盐,并不限于此。
进一步可选的,可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱和含金属离子的化合物选自引起中毒和/或腹泻的物质;
可溶性气体O2、CO2、N2、NH3,更优选CO2、NH3;
有机碱优选硫酸士的宁、三氯六氨合钴;
含金属离子的化合物中的金属离子优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子、锌离子、钴离子,更优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子。
当吸附物选自微生物时,含有吸附物的液体为含有微生物的培养液;
当吸附物选自微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物时,含有吸附物的液体为含有吸附物的水或溶液;溶液可选自缓冲溶液。
例如,当吸附物选自有机碱、含金属化合物、有机磷农药、可溶性气体时,含有吸附物的液体为含有该吸附物的水或硝酸溶液;当吸附物选自细菌、病毒及代谢毒素时,含有吸附物的液体为含有该吸附物的缓冲液,例如,缓冲液可选自pH7.0的磷酸盐缓冲液。
在本发明中,为了更好的模拟肠道中吸附物的含量,对含有吸附物的液体中的吸附物的含量进行了进一步的研究,研究发现:
当吸附物选自细菌时,含有吸附物的液体中细菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当吸附物选自病毒时,含有吸附物的液体中病毒的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当吸附物选自霉菌时,含有吸附物的液体中霉菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当吸附物选自微生物毒素时,含有吸附物的液体中微生物毒素的浓度为10μg/kg~100μg/kg;
当吸附物选自可溶性气体时,含有吸附物的液体中可溶性气体CO2的浓度为0.5g/L~1.45g/L,NH3的浓度为0.3g/L~0.7081g/L;
当吸附物选自剧毒有机磷农药时,含有吸附物的液体中的高毒有机磷农药的浓度为2mg/kg~20mg/kg;
当吸附物选自高毒有机磷农药时,含有吸附物的液体中的高毒有机磷农药的浓度为10mg/kg~100mg/kg;
当吸附物选自中毒有机磷农药时,含有吸附物的液体中的中毒有机磷农药的浓度为100mg/kg~1000mg/kg;
当吸附物选自低毒有机磷农药时,含有吸附物的液体中的低毒有机磷农药的浓度为1000mg/kg~5000mg/kg;
当吸附物选自含金属离子的化合物时,含有吸附物的液体中含金属离子的化合物的浓度为20ppm~100ppm。
具体的,对硫磷(1605)在液体中的浓度为3.5mg/kg~15mg/kg;
内吸磷(1059)在液体中的浓度为4mg/kg~10mg/kg;
甲拌磷(3911)在液体中的浓度为2.1mg/kg~3.7mg/kg;
乙拌磷在液体中的浓度为4mg/kg~8mg/kg;
硫特普在液体中的浓度为5mg/kg~10mg/kg;
磷胺在液体中的浓度为7.5mg/kg~10mg/kg;
敌敌畏在液体中的浓度为50mg/kg~100mg/kg;;
甲基对硫磷(甲基1065)在液体中的浓度为14mg/kg~42mg/kg;
甲基内吸磷(甲基1059,4044)在液体中的浓度为80mg/kg~130mg/kg;
敌百虫在液体中的浓度为450mg/kg~500mg/kg;
乐果在液体中的浓度为230mg/kg~450mg/kg;
二溴磷在液体中的浓度为400mg/kg~800mg/kg;
杀螟松(杀螟硫磷)在液体中的浓度为250mg/kg~500mg/kg;
马拉硫磷(4049,马拉松)在液体中的浓度为1500mg/kg~2500mg/kg。
优选的,含有吸附物的液体的pH值为6.5~7.0,pH值更优选为6.8~7.0,从而更加准确的模拟了肠道中的pH值情况。
为了更加准确的模拟肠道的蠕动情况,振摇培养时振摇的频率为10~120次/分钟,优选为20~90次/分钟;更优选为30~60次/分钟,进一步优选为45~60次/分钟。
在静置至分层的过程中,为了加速沉降,使蒙脱石快速、充分沉淀,可加入助沉剂;助沉剂优选聚乙二醇、山梨醇、十二烷基硫酸钠或非抑菌性表面活性剂,非抑菌性表面活性剂优选吐温80或卵磷脂。
为了更加准确的模拟胃肠道内的状态,每克蒙脱石待测样品加入到50~80ml的含有吸附物的液体中;优选的,每克蒙脱石待测样品加入60~70ml的含有吸附物的液体中。
由于细菌是引发腹泻的主要原因之一,下面针对细菌进一步说明本发明。
在本发明实施例中,细菌更优选乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌。含有细菌的液体具体采用含有细菌的培养液,可采用氯化钠-蛋白胨缓冲液。
为了更加准确的评价蒙脱石待测样品的针对不同种类细菌的吸附情况,采用上述三种细菌同时进行检测。
同时,为了更加全面的评价蒙脱石待测样品的吸附情况,将菌液稀释为不同的浓度,进行检测。不同浓度的菌液的浓度之比为5~10倍。
可选的,采用菌落培养法计算实验组存活菌数和对照组存活菌数。也可采用细胞计数法进行计数。菌落培养法的优势为便于观察,不需要复杂的设备。
下面通过实施例进一步解释本发明,应理解,下述实施例仅对本发明做进一步的解释和说明,并不对本发明的内容构成限制。
实施例1
实验准备:配制pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,以及乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌菌悬液待用。
(1)菌液制备:
接种大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨琼脂斜面培养基中,33℃培养24小时。取上述培养物加入适量的0.9%无菌氯化钠溶液将琼脂表面的培养物洗脱,无菌操作将上述洗脱物转移至无菌试管内,加入适量的0.9%无菌氯化钠溶液并采用比浊法制成每1ml含菌数为105cfu的菌悬液。
(2)培养基适用性检查:
取上述制备好的乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌适宜稀释级的菌悬液各0.1ml(不大于100cfu/0.1ml),分别接种至胰酪大豆胨琼脂培养基平板上,每株试验菌平行制备2个平板,至33℃,培养3天,计数;同时,用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。经试验,结果证明被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%,且菌落形态大小与对照培养基菌落一致,上述培养基适用性检查符合规定。
药效评价实验:
实验组:取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液50ml,加入供试品蒙脱石3g;共制备6份,分为3组,每组分别加入乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌菌悬液;每组2为两份;每份分别加入稀释比例为1:1、稀释比例1:10菌悬液;其中,稀释比例为1:1的菌悬液中1ml含菌数为105cfu,稀释比例为1:10的菌悬液中1ml含菌数为104cfu,使供试液中每1ml含菌量分别为103/cfu、102/cfu。加菌封盖后立即将供试瓶置于37℃恒温水浴中,恒温振摇,振摇的频率为55次/分钟。振摇15min、60min、60min后,恒温静止至分层,在上述3瓶供试瓶上清液中间部各吸取含菌供试液1ml,加至9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中梯度稀释至适宜浓度后,分别测定存活菌数。存活菌数的测定方法为:加入胰酪大豆胨琼脂培养基,待凝固后,33℃培养3天,逐日观察结果。
对照组:量取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液50ml共3份,每份中加入与试验组相同的菌悬液后,其他操作步骤同实验组,测定上述制备好的菌液组中每毫升的活菌数。
计算式1计算吸附率:
根据公式:吸附率(%)=〔1-(蒙脱石样品存活菌落数/菌落对照组存活菌落数)〕×100%。
吸附率实验结果如表1所示:
表1:
计算吸附率如表2所示:
表2:
采用表2所示的吸附率进行蒙脱石药效的评价。
将蒙脱石标准品按照体内药效的实验结果分为一等品、二等品和三等品,按照待测样品相同的实验条件进行实验,吸附率范围如表3所示:
表3
将表2的数据与表3对比,待测样本的吸附率与一等品最为接近,因此该待测样品为一等品。
实施例2
实验准备:配制pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液,以及乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌菌悬液待用。
(1)菌液制备:
接种大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨琼脂斜面培养基中,33℃培养24小时。取上述培养物加入适量的0.9%无菌氯化钠溶液将琼脂表面的培养物洗脱,无菌操作将上述洗脱物转移至无菌试管内,加入适量的0.9%无菌氯化钠溶液并采用比浊法制成每1ml含菌数为105cfu的菌悬液。
(2)培养基适用性检查:
取上述制备好的乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌适宜稀释级的菌悬液各0.1ml(不大于100cfu/0.1ml),分别接种至胰酪大豆胨琼脂培养基平板上,每株试验菌平行制备2个平板,至33℃,培养3天,计数;同时,用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。经试验,结果证明被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%,且菌落形态大小与对照培养基菌落一致,上述培养基适用性检查符合规定。
药效评价实验:
实验组:取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液200ml,加入供试品蒙脱石3g;共制备6份,分为3组,每组分别加入乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌菌悬液;每组2为两份;每份分别加入稀释比例为1:1、稀释比例1:10菌悬液;其中,稀释比例为1:1的菌悬液中1ml含菌数为105cfu,稀释比例为1:10的菌悬液中1ml含菌数为104cfu,使供试液中每1ml含菌量分别为103/cfu、102/cfu。加菌封盖后立即将供试瓶置于37℃恒温水浴中,恒温振摇,振摇的频率为55次/分钟。振摇15min、60min、60min后,恒温静止至分层,在上述3瓶供试瓶上清液中间部各吸取含菌供试液1ml,加至9ml 0.9%无菌氯化钠溶液中梯度稀释至适宜浓度后,分别测定存活菌数。存活菌数的测定方法为:加入胰酪大豆胨琼脂培养基,待凝固后,33℃培养3天,逐日观察结果。
对照组:量取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液50ml共3份,每份中加入与试验组相同的菌悬液后,其他操作步骤同实验组,测定上述制备好的菌液组中每毫升的活菌数。
计算式1计算吸附率:
吸附率(%)=〔1-(蒙脱石样品存活菌落数/菌落对照组存活菌落数)〕×100%式1
吸附实验结果如表4所示:
表4:
计算吸附率如表5所示:
表5:
将表5的数据与表3对比,待测样本的吸附率与一等品最为接近,因此该待测样本为一等品。
基于上述实施例的方法,可设置具体实施对病毒、霉菌、微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物进行吸附率测定,限于篇幅不再赘述。
本发明虽然以较佳实施例公开如上,但并不是用来限定权利要求,任何本领域技术人员在不脱离本发明构思的前提下,都可以做出若干可能的变动和修改,因此本发明的保护范围应当以本发明权利要求所界定的范围准。
Claims (10)
1.一种蒙脱石药效的体外评价方法,其特征在于,至少包括以下步骤:
步骤1、将蒙脱石待测样品3~12g与含有吸附物的液体混合,在35℃~40℃条件下振摇处理15分钟~24小时;处理结束后,静置至分层,取上清,测定上清中的吸附物的含量;获得实验组吸附后含量;
其中,所述蒙脱石待测样品与所述含有吸附物的液体的配比为每克蒙脱石待测样品加入到10~80ml的所述含有吸附物的液体中;
步骤2、取所述含有吸附物的液体,采用与步骤1相同的方法测定上清中的吸附物的含量,获得对照组吸附后含量;
步骤3、根据式I计算吸附率,
吸附率(%)=〔1-(实验组吸附后含量/对照组吸附后含量)〕×100%
(式I)
采用所述吸附率评价所述蒙脱石待测样品的药效。
2.根据权利要求1所述的体外评价方法,其特征在于,所述吸附物选自微生物、微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物。
3.根据权利要求2所述的体外评价方法,其特征在于,
所述微生物选自细菌、病毒或霉菌;
所述细菌优选引起腹泻的细菌,更优选大肠杆菌、霍乱弧菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、苏云金芽胞杆菌、两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜水气单胞菌、铜绿假单胞菌、副溶血弧菌或伤寒沙门菌;
所述病毒优选引起腹泻的病毒,更优选轮状病毒;
所述微生物毒素选自黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、寄生曲霉素、展青霉素、原毒素蛋白或轮状病毒胆盐,更优选黄曲霉毒素。
4.根据权利要求2所述的体外评价方法,其特征在于,所述可溶性气体、所述有机磷农药、所述有机酸和所述有机碱所述含金属离子的化合物选自引起中毒和/或腹泻的物质;
所述可溶性气体O2、CO2、N2、NH3,更优选CO2、NH3;
所述有机碱优选硫酸士的宁、三氯六氨合钴;
所述含金属离子的化合物中的金属离子优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子、锌离子、钴离子,更优选铬离子、镉离子、铜离子、铅离子。
5.根据权利要求2所述的体外评价方法,其特征在于,当所述吸附物选自微生物时,所述含有吸附物的液体为含有所述微生物的培养液;
当所述吸附物选自微生物毒素、可溶性气体、有机磷农药、有机酸、有机碱或含金属离子的化合物时,所述含有吸附物的液体为含有所述吸附物的水或溶液。
6.根据权利要求1所述的体外评价方法,其特征在于,所述含有吸附物的液体的pH值为6.5~7.0。
7.根据权利要求3所述的体外评价方法,其特征在于,
当所述吸附物选自细菌时,所述含有吸附物的液体中所述细菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自病毒时,所述含有吸附物的液体中所述病毒的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自霉菌时,所述含有吸附物的液体中所述霉菌的浓度为102cfu/ml~104cfu/ml;
当所述吸附物选自微生物毒素时,所述含有吸附物的液体中所述微生物毒素的浓度为10μg/kg~100μg/kg;
当所述吸附物选自可溶性气体时,所述含有吸附物的液体中所述可溶性气体CO2的浓度为0.5g/L~1.45g/L,NH3的浓度为0.3g/L~0.7081g/L;
当所述吸附物选自剧毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述高毒有机磷农药的浓度为2mg/kg~20mg/kg;
当所述吸附物选自高毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述高毒有机磷农药的浓度为10mg/kg~100mg/kg;
当所述吸附物选自中毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述中毒有机磷农药的浓度为100mg/kg~1000mg/kg;
当所述吸附物选自低毒有机磷农药时,所述含有吸附物的液体中所述低毒有机磷农药的浓度为1000mg/kg~5000mg/kg;
当所述吸附物选自有机碱时,所述含有吸附物的液体中所述有机碱的浓度为0.2mg/ml~1mg/ml;
当所述吸附物选自含金属离子的化合物时,所述含有吸附物的液体中所述含金属离子的化合物的浓度为20ppm~100ppm。
8.根据权利要求1所述的体外评价方法,其特征在于,所述振摇处理时振摇的频率为10~120次/分钟,优选为20~90次/分钟。
9.根据权利要求1所述的体外评价方法,其特征在于,在静置至分层的过程中,加入助沉剂;所述助沉剂优选聚乙二醇、山梨醇、十二烷基硫酸钠或非抑菌性表面活性剂,所述非抑菌性表面活性剂优选吐温80或卵磷脂。
10.根据权利要求1所述的体外评价方法,其特征在于,每克蒙脱石待测样品加入到50~80ml的所述含有吸附物的液体中,以模拟胃肠道内的状态。
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