CN107019682A

CN107019682A - 一种尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺

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Publication number: CN107019682A
Application number: CN201710247597.3A
Authority: CN
Inventors: 周建平; 丁杨; 姜孟劳
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2017-04-13
Filing date: 2017-04-13
Publication date: 2017-08-08
Anticipated expiration: 2037-04-13
Also published as: CN107019682B

Abstract

本发明属于药物制剂领域，公开了一种尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺。所述的脂质纳米粒采用乳化蒸发法联用高压均质法，将药物包封于脂质载体中形成稳定、均匀的胶体溶液。发明制备的脂质纳米粒粒径较小，分散度高，稳定性好，可长效缓慢地释放药物，改善药物的体内吸收。所述的制备工艺简便、成本低，无有机溶剂残留、生物毒性低，易实现工业化生产。

Description

一种尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺

技术领域

本发明属于药物制剂领域，公开了一种尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺。

背景技术

尼莫地平为第二代1，4-二氢吡啶类钙离子拮抗剂，极难溶于水，脂溶性很强。临床上主要应用于治疗缺血性脑血管疾病、蛛网膜下腔出血引起的脑血管痉挛、突发性耳聋、偏头痛等症。此外，尼莫地平对中枢神经系统的保护作用已有不少的研究报道，如有促进记忆的作用，能用于防治老年性痴呆症(AD)。

尼莫地平临床应用广泛，但其为水难溶性药物，溶解度小和较强的肝首过作用使其生物利用度很低(仅为2.7％～27.9％)，且其生物半衰期(0.5～1.0h)短，需频繁用药，不仅使用不方便，而且可使血药浓度出现“峰谷”现象，引起毒副作用。这些缺陷也使尼莫地平的给药面临很多问题，因此提高尼莫地平的溶出度，制备具有较高生物利用度的尼莫地平制剂具有一定的临床意义。

由于尼莫地平为难溶性药物，临床上所用的尼莫地平注射液(商品名为尼膜同)均使用较高浓度的乙醇以增加药物的溶解度达到药用浓度，因此导致尼莫地平注射液临床使用时具有较大的局限性：首先，给药时需要使用特殊的三通输液器与葡萄糖或生理盐水同时滴注；其次，尼莫地平注射液必须以1～2mg/h的速度慢速滴注，否则病人无法耐受其副作用，即10mg药物所需滴注时间一般需至少5h；再次，尼莫地平注射液在与葡萄糖或生理盐水混合滴注过程中易出现析晶现象，导致用药安全性降低且长期使用该制剂会对病人血管产生严重的刺激作用并增加静脉炎症的风险。

鉴于尼莫地平注射液上述局限性，为使尼莫地平更好地发挥临床疗效，降低药物的副作用，将其包载进脂质制备成脂质纳米粒是一种很可行的解决方案。脂质纳米粒是采用天然或合成的类脂作为载体材料制成的，药物被包裹或镶嵌在脂质基质当中，主要包括固体脂质纳米粒和纳米结构脂质载体。纳米结构脂质载体(Nanostructured LipidCarriers，NLC)是在固体脂质纳米粒(Solid Lipid Nanoparticles，SLN)的基础上发展的第二代脂质纳米粒子，NLC是以一定比例的液态脂质或液态混合脂质代替了SLN中的固体脂质而制备的新型固体脂质纳米粒。脂质纳米粒作为新型给药系统具有以下优点：脂质载体材料生物可降解，无生物毒性，具有良好的生物相容性；制备工艺简单易行，适用于工业化生产；制备过程中不使用有毒聚合物、单体等，无有毒残留物；药物释放可以达到缓释、控释目的。

CN1418626A公开的尼莫地平纳米脂质体制备技术所制备的脂质体，尽管有着较好的安全性、生物相容性及跨膜性，但其稳定性不是很好，药物易泄漏，用该方法制备的脂质体的粒径也偏大。CN102552156B公开的尼莫地平固体脂质纳米粒具有高效、低毒、稳定等优点，但其含药量较低，导致给药剂量和给药次数增加，而且产品的制备流程繁复，不利于工业化生产。CN100486577C公开的尼莫地平脂质纳米粒组合物具有长效、低毒、稳定等优点，但仅仅选用磷脂作为载体成分，导致载药量较低，而且水化时间较长，降低了生产效率。CN103494820A公开的一种尼莫地平纳米粒实现了多种药物的共载，一定程度上提高了尼莫地平的血药浓度，但高分子材料载体不容易实现扩大生产，且容易产生一定的生物毒性。

发明内容

发明目的：为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于研制和提供一种可以采用工业化生产的尼莫地平脂质纳米粒制剂。该制剂粒径小且可控，分布均一，包封率高，稳定性好，控释和长效地释放药物，安全性高，毒副作用小，制备工艺简单，易实现扩大生产。

技术方案：为了达到上述目的，针对药物的理化性质和生物膜透过性，选择合适的脂质材料和乳化剂，研究固态脂质与液态脂质之间、药物与脂质材料/乳化剂之间的最佳配比和最佳用量，采用合理的方法将药物包裹于脂质核中。

本发明的技术方案中提供了一种尼莫地平脂质纳米粒的组分配比：尼莫地平为0.5mg/mL～5mg/mL，固态脂质为0.5％～10％(w/v)，液态脂质为0.5％～5％(w/v)，固液脂质比例为50～100∶0～50，乳化剂为1％～10％(w/v)，纯水适量。

其中所述固态脂质材料为硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、棕榈酸、棕榈酸甘油酯、十六烷基棕榈酸酯、鲸蜡醇十六酸酯、三月桂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三油酸甘油酯中的一种或几种。

其中所述液态脂质材料为油酸、油酸乙酯、中链甘油三酯、双癸酸丙二醇酯、肉豆蔻酸异丙酯、辛酸三甘油酯、辛酸癸酸三甘油酯、辛酸癸酸亚油酸三甘酯中的一种或几种。

其中所述乳化剂为聚乙二醇15羟基硬脂酸酯、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯、天然大豆卵磷脂、吐温80、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种。

作为优选，本发明的技术方案中提供了一种尼莫地平脂质纳米粒的组分配比：尼莫地平为0.5mg/mL～5mg/mL，双硬脂酸甘油酯为0.5％～10％(w/v)，双癸酸丙二醇酯为0.5％～5％(w/v)，双硬脂酸甘油酯：双癸酸丙二醇酯为50～100∶0～50，吐温80为1％～10％(w/v)，纯水适量。

作为进一步优选，本发明的技术方案中提供了一种尼莫地平脂质纳米粒的组分配比：尼莫地平为2.7mg/mL，双硬脂酸甘油酯为7％(w/v)，双癸酸丙二醇酯为3％(w/v)，双硬脂酸甘油酯：双癸酸丙二醇酯为7∶3，吐温80为4.5％(w/v)，纯水为30mL。

本发明技术方案中所述制备方法为乳化蒸发-高压均质法，具体包括以下步骤：

(1)取处方量的尼莫地平溶于适量有机溶剂，再与处方量的固液混合脂质混合，加热至70～90℃，搅拌至熔融状态，待有机溶剂完全挥发，形成油相备用；

(2)将处方量的乳化剂溶于适量纯水中，加热至70～90℃，搅拌均匀，形成水相备用；

(3)将熔融态的油相缓慢滴加至同温度的水相中，在10000～15000r/min高速下剪切，剪切乳化5～10min，得到初乳；

(4)将初乳迅速转移至用热水浴预热过的高压均质机料斗中，在800～1200Bar的压力下乳匀6～10次后，将其室温冷却，即得粒径在50～100nm的尼莫地平脂质纳米粒。

另一方面，本发明技术方案中所述的尼莫地平脂质纳米粒在制备用于治疗蛛网膜下腔出血后引发脑血管痉挛、缺血性神经障碍高血压、偏头痛等病症的药物组合物中的用途。

另一方面，本发明技术方案中所述的尼莫地平脂质纳米粒适用于口服给药、静脉注射、透皮给药等多种给药途径。

本发明提供的一种尼莫地平脂质纳米粒采用具有生理相容性和生物可降解性的脂质作为载体材料，且避免了有机溶剂残留，不会引起细胞毒性问题，具有可靠的安全性；尼莫地平均匀分布在脂质纳米粒中，通过脂质材料的溶蚀缓慢释放药物，避免了药物突释现象；同时药物通过脂质纳米粒包裹，不仅提高了药物的稳定性，而且避免了与血管直接接触，降低了毒副作用；采用上述方法制得的尼莫地平脂质纳米粒，活性成分分布均匀，具有良好的均一性，有助于实现药物的长效和控释。

附图说明

图1为尼莫地平脂质纳米粒的TEM电镜图

图2为尼莫地平脂质纳米粒的DSC分析图

图3为尼莫地平脂质纳米粒的体外释放曲线图

具体实施方式

下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

处方组成：

制备工艺：

(1)将处方量的双硬脂酸甘油酯与双癸酸丙二醇酯混合脂质按照一定质量比例置于80℃水浴条件下熔融，备用；

(2)在80℃水浴条件下，将处方量的尼莫地平溶于适量乙醇，再缓慢加到熔融好的混合脂质中，然后加热挥干溶剂形成油相，备用；

(3)将处方量的吐温80在80℃水浴条件下均匀分散于适量纯水中，形成水相，备用；

(4)将步骤(2)中的油相加入到步骤(3)中的水相中，同时高速剪切一段时间形成初乳；

(5)将步骤(4)中得到的初乳迅速加入高压均质机循环若干次，冷却至室温，即得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液。

所得尼莫地平脂质纳米粒的粒径为79.8nm，尼莫地平浓度为2.7mg/mL，包封率为90.8％。在TEM电镜下观察到类球形或球状纳米粒，粒子之间无粘连聚集，粒径大小与激光粒径仪测定的结果相一致，如图1。

实施例2

处方组成：

制备工艺：

(1)将处方量的双硬脂酸甘油酯置于80℃水浴条件下熔融，备用；

(2)在80℃水浴条件下，将处方量的尼莫地平溶于适量乙醇，再缓慢加到熔融好的固态脂质中，然后加热挥干溶剂形成油相，备用；

(5)将步骤(4)中得到的初乳加入高压均质机循环若干次，冷却至室温，即得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液。

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为210.7nm，尼莫地平浓度为1mg/mL，包封率为33.8％。

实施例3

处方组成：

制备工艺：

(1)将处方量的单硬脂酸甘油酯与双癸酸丙二醇酯混合脂质按照一定质量比例置于80℃水浴条件下熔融，备用；

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为120.4nm，尼莫地平浓度为1.8mg/mL，包封率为60.4％。

实施例4

处方组成：

制备工艺：

(1)将处方量的单硬脂酸甘油酯与中链甘油三酯混合脂质按照一定质量比例置于80℃水浴条件下熔融，备用；

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为140.8nm，尼莫地平浓度为1.2mg/mL，包封率为40.3％。

实施例5

处方组成：

制备工艺：

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为76.6nm，尼莫地平浓度为1.8mg/mL，包封率为89.8％。

实施例6

处方组成：

制备工艺：

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为68.9nm，尼莫地平浓度为1.6mg/mL，包封率为53.4％。

实施例7

处方组成：

制备工艺：

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为93.2nm，尼莫地平浓度为2.2mg/mL，包封率为73.3％。

实施例8

处方组成：

制备工艺：

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为88.7nm，尼莫地平浓度为2.4mg/mL，包封率为80.1％。

实施例9

处方组成：

制备工艺：

(1)将处方量的双硬脂酸甘油酯与双癸酸丙二醇酯混合脂质按照一定质量比例置于70℃水浴条件下熔融，备用；

(2)在70℃水浴条件下，将处方量的尼莫地平溶于适量乙醇，再缓慢加到熔融好的混合脂质中，然后加热挥干溶剂形成油相，备用；

(3)将处方量的吐温80在70℃水浴条件下均匀分散于适量纯水中，形成水相，备用；

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为99.8nm，尼莫地平浓度为2.1mg/mL，包封率为70.0％。

实施例10

处方组成：

制备工艺：

(4)将步骤(2)中的油相加入到步骤(3)中的水相中，同时在12000rpm高速下剪切5min形成初乳；

所得尼莫地平脂质纳米粒的粒径为120.4nm，尼莫地平浓度为1.8mg/mL，包封率为60.3％。

实施例11

处方组成：

制备工艺：

(4)将步骤(2)中的油相加入到步骤(3)中的水相中，同时在15000rpm高速下剪切3min形成初乳；

所得尼莫地平脂质纳米粒的粒径为87.4nm，尼莫地平浓度为2.6mg/mL，包封率为86.7％。

实施例12

处方组成：

制备工艺：

(5)将步骤(4)中得到的初乳迅速加入高压均质机中，在800Bar压力下循环6次，冷却至室温，即得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液。

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为110.4nm，尼莫地平浓度为2mg/mL，包封率为66.7％。

实施例13

处方组成：

制备工艺：

(5)将步骤(4)中得到的初乳迅速加入高压均质机中，在1000Bar压力下循环4次，冷却至室温，即得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液。

所得尼莫地平脂质纳米粒胶体分散液的粒径为84.2nm，尼莫地平浓度为2.5mg/mL，包封率为83.2％。

实施例14

采用差示扫描量热分析法(DSC法)对实施例1中的尼莫地平脂质纳米粒晶型与原料药尼莫地平及其物理混合物的晶型进行对比。其中，物理混合物的制备：称取处方量的原料药尼莫地平和空白脂质载体冻干粉末置于研钵中研磨混匀即得。分别取3mg尼莫地平原料药、物理混合物、尼莫地平脂质纳米粒冻干粉末于坩埚中，以10℃/min的速度升温，升温范围：40～200℃，并以空白铝坩埚作为空白对照，于氮气流保护下测定DSC曲线。其中，图2中的(A)、(B)、(C)分别为原料药尼莫地平、物理混合物与尼莫地平脂质纳米粒的DSC曲线。结果表明，(A)中出现了124.9℃的尼莫地平特征吸收峰，与文献报道结果一致；(B)中出现了123.8℃的尼莫地平特征吸收峰和50.9℃的混合脂质吸收峰，说明药物与脂质并未相互作用，保持了各自的晶型结构；而(C)中尼莫地平的特征吸收峰完全消失，仅出现40.3℃和54.7℃两个吸收峰，推测为脂质完全包载药物时其吸收峰发生了分离，说明脂质纳米粒中固液脂质形成的晶格不完整，产生晶格缺陷或者以无定型存在，使得药物以结晶或不定型分散于混合脂质中，即药物已被脂质成功包载。

实施例15

体外释放介质选择：

取过量尼莫地平置于西林瓶中，分别加入纯水及不同浓度的吐温80溶液(浓度为0.1％、0.3％、0.5％、0.7％、0.9％)中，密封后置于恒温振荡培养箱中，37℃恒温下以100rpm匀速振荡48h，取样品液10000rpm离心5min，吸取上清液适量，按照HPLC法进行检测。一般释放介质的体积为药物饱和溶液所需介质体积的3～7倍，从而达到漏槽条件。根据平衡溶解度实验结果表1可知，0.5％吐温80即可满足漏槽条件，故选择0.5％吐温80作为体外释放介质。

表1在不同溶出介质中尼莫地平的溶解度

体外释放研究方法：

取实施例1中的尼莫地平脂质纳米粒(相当于3mg尼莫地平)密封于透析袋(相对分子质量8000～14000)中，量取适量pH 7.4、6.8、5.5PBS(含0.5％吐温80)溶出介质各3份，置于恒温(37±0.5)℃的溶出介质中，转速100r/min，于0.5、1、1.5、2、4、6、8、10、12h取样3mL，同时迅速补充等量同温的新鲜介质。样品经0.22μm的有机微孔滤膜过滤，续滤液经HPLC法测定，通过标准曲线计算药物的累计释放百分数，结果如图3。尼莫地平脂质纳米粒在不同pH环境下释放出来的游离药物都非常有限，24h内仅释放15％的药物，可以起到良好的缓释作用。

Claims

1.一种尼莫地平脂质纳米粒，其特征在于，所述纳米粒载体为脂质材料或类脂材料，包括固态脂质和液态脂质，固态脂质和液态脂质的质量配比为50～100∶0～50。

2.一种尼莫地平脂质纳米粒，其特征在于，所述尼莫地平脂质纳米粒粒径为50～100nm，含药量为0.5～5mg/mL。

3.根据权利要求1～2所述的脂质纳米粒，其特征在于，所述固态脂质材料为硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、双硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、棕榈酸、棕榈酸甘油酯、十六烷基棕榈酸酯、鲸蜡醇十六酸酯、三月桂酸甘油酯、三棕榈酸甘油酯、三硬脂酸甘油酯、三肉豆蔻酸甘油酯、三油酸甘油酯中的一种或几种，固态脂质用量为0.5％～10％(w/v)。

4.根据权利要求1～2所述的脂质纳米粒，其特征在于，所述液态脂质材料为油酸、油酸乙酯、中链甘油三酯、双癸酸丙二醇酯、肉豆蔻酸异丙酯、辛酸三甘油酯、辛酸癸酸三甘油酯、辛酸癸酸亚油酸三甘酯中的一种或几种，液态脂质用量为0.5％～5％(w/v)。

5.根据权利要求1～2所述的脂质纳米粒，其特征在于，所述乳化剂为聚乙二醇15羟基硬脂酸酯、泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯、天然大豆卵磷脂、吐温80、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油中的一种或几种，乳化剂用量为1％～10％(w/v)。

6.根据权利要求1～5所述的脂质纳米粒制备工艺，其特征在于，采用乳化蒸发-高压均质法来制备，具体包括以下步骤：

7.权利要求1～6所述尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺的应用，其特征在于，所述尼莫地平脂质纳米粒在制备用于治疗蛛网膜下腔出血后引发脑血管痉挛、缺血性神经障碍高血压、偏头痛、阿尔茨海默症等病症的药物组合物中的用途。

8.权利要求1～6所述尼莫地平脂质纳米粒及其制备工艺的应用，其特征在于，所述尼莫地平脂质纳米粒适用于口服给药、静脉注射、透皮给药等多种给药途径。