CN1069545C - 抗菌抗病毒药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
公开了一种抗菌抗病毒药物组合物及其制备方法。该组合物含有从黄芩根、连翘果实或连翘叶、以及需要的话,从金银花花蕾或金银花叶中提取的活性成分,和药学上常规的赋形剂。制备方法中注意除去了鞣质和溶血性皂甙,并注意保护对酸、碱不稳定的活性成分。因此,所述组合物具有纯度高、剂量小、药效好、刺激性小的优点,能制成各种剂型,方法简单,宜于工业化生产。
Description
发明领域
本发明涉及药物组合物及其制备方法。更具体地说,本发明涉及抗菌抗病毒药物组合物及其制备方法。
发明背景
现有的中成药制剂多以传统的方法制备,成品杂质多,剂量大,生物利用度低,而且不清楚有效成分是什么,更无法控制其有效成分含量及内在质量,致使我国许多历史悠久,疗效确切,使用广泛,国内知名度很高的中成药制剂得不到国际社会的认可,使用范围仅限于中国、日本及东南亚部分地区;如三九胃泰冲剂,虽然通过了美国FDA的批准,进入了美国市场,但仅是以保健食品的形式获得批准的,国际上不承认这些中成药是药品。又如,由黄芩、金银花、连翘组成、用于治疗上呼吸道感染、具有抗菌抗病毒作用的双黄连制剂,其中,双黄连粉针剂制备工艺已获中国专利,发明专利号为891036-8,但由于该以中药原材料进行粗加工制成注射剂,杂质多,纯度低,颜色深,注射疼痛,有过敏反应;而且金银花、连翘中含有溶血性皂甙和鞣质,该工艺难以将其除去;同时,由于处方中主要有效成分在酸碱条件下极不稳定,而该工艺采用酸碱处理时并未注意给予保护,致使有效成分大部分被破坏。
本发明的目的在于克服上述缺点,提供一种疗效好、剂量小、纯度高、刺激性小的抗菌抗病毒药物组合物并提供其制备方法。发明详述
本发明提供的抗菌抗病毒药物组合物含有0.02-98.18%从黄芩中提取的黄芩总甙,0.02-98.18%从连翘或连翘叶中提取的连翘总甙以及选择性地含有赋形剂。本发明的另一实施方案中,药物组合物还含有0.40-88.10%从金银花或金银花叶中提取的金银花总有机酸。
本发明的药物组合物中所用赋形剂是药学上常规的赋形剂,例如司盘85、油酸乙酯、二氯二氟甲烷,混合脂肪酸甘油酯(34型)、环糊精、糖粉、薄荷脑、冰片、硬脂酸镁、丙烯酸树脂、甜菊甙等等。本发明药物组合物可根据具体情况按常规制备技术制成各种剂型,例如气雾剂、栓剂、含片、胶囊剂、颗粒剂、水针剂、粉针剂等等。
黄芩中除含有黄芩甙外尚含有黄芩素、汉黄芩甙等黄酮类成分,由于黄芩甙含量最高且药理作用明确,故以黄芩甙为指标提取黄芩总甙,并用紫外分光光度法等常规分析方法测定含量,黄芩总甙中黄芩甙含量>70%;制备注射剂时,黄芩总甙中黄芩甙含量>86%;
连翘中除含有连翘酯甙外尚含有皂甙、鞣质、挥发油、连翘酚等成分,制备注射剂时需将溶血性皂甙、鞣质除去。由于连翘酯甙含量最高且药理作用明确,故以连翘酯甙为指标提取连翘总甙,并用紫外分光光度法等常规分析方法测定含量,连翘总甙中连翘酯甙含量应>10%;制备注射剂时连翘总甙中不含鞣质及溶血性皂甙,含连翘酯甙>25%。
金银花中除含有绿原酸外尚含有二咖啡酰奎宁酸、咖啡酸等有机酸及黄酮、皂甙、鞣质等成分,按照本发明所述的提取方法,上述成分均可提出;制备注射剂时需将鞣质及溶血性皂甙除去;由于绿原酸含量最高且为抗菌主要有效成分,故以绿原酸为指标提取金银花总有机酸,并用紫外分光光度法等常规分析方法测定含量,金银花总有机酸中绿原酸含量应>10%;制备注射剂时金银花总有机酸中不含鞣质及溶血性皂甙,含绿原酸>25%。
上述活性成分(例如黄芩总甙、连翘总甙、金银花总有机酸)与赋形剂组合即得本发明的药物组合物。
本发明的制备药物组合物的方法通过除去连翅、金银花中存在的皂甙(造成溶血的原因)和鞣质(造成疼痛的原因),可使本发明的药物组合物具有疗效好、剂量小、纯度高、刺激性小的优点。具体地说,本发明的制备方法包括下列步骤:
(ⅰ)制备活性成分:
(a)制备黄芩总甙:按常规方法从黄芩制备口服用的黄芩总甙或黄芩甙;或再将所得黄芩总甙或黄芩甙在无菌条件下用注射用水混悬,调pH7.0-8.0,过滤、浓缩、干燥;或将浓缩液倾入乙醇中使沉淀,将沉淀干燥,即得注射用黄芩总甙或黄芩甙;
(b)制备连翘总甙:
取连翘或连翘叶,按常规方法提取,浓缩后用正丁醇等有机溶剂萃取,经常规处理得口服剂气雾剂、栓剂等用连翘总甙;将上述连翘总甙用水溶解,滴加1~15%明胶液、蛋清液或其它沉淀剂使鞣质沉淀完全、静置,过滤,滤液滴加饱和的胆甾醇乙醇液或其它沉淀剂使皂甙沉淀完全,经常规处理,即得精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙;
或者,取连翘或连翘叶,按常规方法提取,提取液用聚酰胺、大孔吸附树脂、硅胶等吸附剂吸附,洗去杂质后,用水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等溶剂洗脱,即得除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙或连翘酯甙;需要的话,(ⅱ)将上述活性成分与赋形剂混合。
在本发明制备方法的另一实施方案中,上述步骤(ⅰ)中还包括:(c)制备金银花总有机酸:
取金银花或叶,按常规方法提取,浓缩后用正丁醇等有机溶剂萃取,即得口服制剂、气雾剂、栓剂用原料;上述正丁醇萃取液用碳酸氢钠-磷酸氢钠或pH7.0~8.0的缓冲液萃取,萃取液调pH5.0~7.0,滴加1~15%的明胶液、蛋清液或其它沉淀剂使鞣质沉淀完全,经常规处理,即得除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸;
或者,取金银花或叶,按常规方法提取,提取液用聚酰胺、大孔吸附树脂、硅胶等吸附剂吸附,洗去杂质后,用水、碱水、乙醇、丙酮等溶剂洗脱,即得除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸。
现通过下面的非限定性实施例进一步阐述本发明。
实施例
实施例1制备黄芩总甙
取黄芩饮片1000g,加10倍量水煎煮2次,合并煎出液,过滤,滤液待温度降至40℃时,滴加浓盐酸调pH1.0,静止使沉淀,弃去五分之四的上清液,加5倍量蒸馏水使混悬,滴加40%的氢氧化钠溶液调pH7.5,过滤,在0.1MP/cm2压力下超滤,超波膜分子量截留值为6000-20000,将超滤液用浓盐酸调pH1.0,静止过滤,沉淀用蒸馏水洗涤3次,抽滤,干燥,得黄芩总甙70g。
将上述黄芩总甙用乙醇重结晶,得黄芩甙58g。
将所述的黄芩总甙或黄芩甙在无菌条件下用注射用水混悬,调pH7.0-8.0,过滤、浓缩、干燥,或将浓缩液倾入乙醇中使沉淀,将沉淀干燥,即得注射用黄芩总甙或黄芩甙。
实施例2制备金银花总有机酸
取金银花药材或金银花叶1000g,用12倍量的60%乙醇提取2-4次,减压回收溶剂,加水制成含药材100%的水溶液,然后用等量正丁醇萃取,从萃取液回收溶剂,干燥即得金银花总有机酸76g。
从正丁醇萃取液回收溶剂至含药材量100%,用等量5%碳酸氢钠水溶液萃取3次,碱水液调pH6.0-7.0,滴加3%的明胶液使鞣质沉淀完全,静止,过滤,浓缩,干燥,即得除去鞣质及溶血性皂甙的总有机酸55g;或
取金银花药材或金银花叶1000g,用12倍量的60%乙醇提取2-4次,减压回收溶剂,用大孔吸附树脂吸附,用蒸馏水洗去杂质后,用乙醇洗脱,即得除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机85g。
将上述金银花总有机酸10g加至1000g硅胶G柱上,用甲醇∶氯仿1∶1洗脱,得到绿原酸0.2g,二咖啡酰奎宁酸0.1g。
实施例3制备连翘总甙
取连翘药材或连翘叶1000g,用10倍量的70%乙醇提取2-4次,合并提取液,减压回收溶剂,制成含药材100%的提取物水溶液,然后用等量正丁醇萃取,从萃取液回收溶剂,浓缩,干燥即得连翘总甙120g。
将上述连翘总甙用水溶解,滴加3%的明胶液使鞣质沉淀完全,静止,过滤,滤液滴加饱和的胆甾醇乙醇液使皂甙沉淀完全,过滤,滤液浓缩,干燥即得精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙95g;或
将上述连翘总甙10g用水溶解,用大孔吸附树脂800g吸附,用乙醇洗脱,即得精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙6g。将该品用等量硅胶拌匀,加于600g硅胶G柱上,用乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水5∶3∶1∶1洗脱,得连翘酯甙0.2g。
实施例4气雾剂及制备方法
黄芩总甙200g 连翘总甙220g
金银花总有机酸180g 司盘85 500g
油酸乙酯500g 二氯二氟甲烷 适量
制成1000瓶,每瓶14g
制法:按处方量将黄芩总甙、金银花总有机酸、连翘总甙粉碎,过80-120目筛,然后与司盘85、油酸乙酯混匀,研成糊状,逐渐加至胶体磨中,以1200rpm研至粒径为10nm,置容器中,加阀门,封帽,压入二氯二氟甲烷至每瓶14克,摇匀,即得气雾剂。
实施例5栓剂及制备方法
黄芩总甙180g 连翘总甙320g
金银花总有机酸250g
混合脂肪酸甘油酯(34型)750g
制成1000枚,每枚1.5g
制法:按处方量将黄芩总甙、金银花总有机酸、连翘总甙粉碎,过80-120目筛,混匀,加入已加热熔化的栓剂基质中,搅拌均匀,注入栓模中,冷却、切割、包装、即成栓剂。
实施例6含片及制备方法
黄芩总甙18g 连翘总甙24g 金银花总有机酸18g
环糊精90g 糖粉450g 薄荷脑3g
冰片1g 硬脂酸镁6g
制成1000片,每片0.6g
制法:将黄芩总甙和环糊精包裹,与连翘总甙、金银花总有机酸、糖粉混合均匀,制成颗粒,喷入薄荷脑、冰片的乙醇液,加入硬脂酸镁,混匀,压片,即得含片。
实施例7胶囊剂及制备方法
黄芩总甙18g 连翘总甙9g
金银花总有机酸200g 丙烯酸树脂 适量
制成1000粒,每粒0.25g
制法:连翘总甙、金银花总有机酸分别用干法制成颗粒,用丙烯酸树脂包薄膜衣,并分别着不同颜色,与黄芩总甙颗粒混合,装入空胶囊中即得。
实施例8颗粒剂及制备方法
黄芥总甙110g 连翘总甙190g
金银花总有机酸4g 环糊精690g
甜菊甙6g
制成1000g,每袋4g
制法:将黄芩总甙110g用690g环糊精包裹,与连翘总甙、金银花总有机酸、甜菊甙混合均匀,制成颗粒。
实施例9水针剂、粉针剂及制备方法
黄芩总甙18g 连翘总甙29g
金银花总有机酸22g
制成1000ml或100支(粉针剂)
制法:将金银花总有机酸及连翘总甙用注射用水溶解,调pH5.0-7.0,过滤,滴加3%的明胶液使鞣质沉淀完全,静置,过滤,滤液滴加饱和的胆甾醇乙醇液使皂甙沉淀完全,过滤,滤液加入黄芩总甙使混悬,用碳酸氢钠-碳酸钠液调pH6.5-7.5使溶解,经加热、冷藏、过滤、超滤等处理后,灌封,灭菌,即得注射液;或浓缩,干燥,无菌分装,即得粉针剂。
实施例10水针剂、粉针剂及制备方法
黄芩总甙 15g
除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙 21g
除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸 19g
制成100支
制法:按处方量将精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙、精制的除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸用注射用水溶解,加入黄芩总甙使混悬,滴加碳酸氢钠-碳酸钠调pH7.0-7.5使溶解,经加热、冷藏、过滤或超过滤处理后,灌封、灭菌,即得注射液;或浓缩,干燥,无菌分装,即得粉针剂。
实施例11粉针剂及制备方法
黄芩总甙 15g
除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙 21g
除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸 19g
制成100支
制法:按处方量将黄芩总甙混悬于蒸馏水中,用40%的氢氧化钠溶液调pH7.0-8.0,浓缩,干燥,或加入乙醇,使黄芩甙钠盐沉淀,滤除沉淀,干燥,粉碎,即得注射用黄芩总甙盐原料;将精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙、精制的除去鞣质及溶血性皂甙的金银花总有机酸用注射用水溶解,滴加碳酸氢钠-碳酸钠调pH7.0使溶解,经加热、冷藏、过滤或超过滤处理后,浓缩,干燥,粉碎,在无菌条件下分装于灭菌容器内,再装入无菌的注射用黄芩总甙盐,封口,即得粉针剂;
或将上述三种成分分别测定含量,在无菌条件下混合后无菌分装,封口,即得粉针剂。
实施例12水针剂、粉针剂及制备方法
黄芩甙150g 连翘酯甙200g
绿原酸150g 二咖啡酰奎宁酸25g
制成1000支
制法:按处方量将黄芩甙混悬于蒸馏水中,用40%的氢氧化钠溶液调pH7.0-8.0,浓缩,干燥,或加入乙醇,使黄芩甙钠盐沉淀,滤取沉淀,干燥,粉碎,即得注射用黄芩甙盐原料;分别将绿原酸、二咖啡酰奎宁酸及连翘酯甙用注射用水溶解,过滤,滤液滴加碳酸氢钠碱液调pH6.5-7.5,过滤,浓缩,干燥,粉碎,在无菌条件下分装于安瓿内,然后装入黄芩甙盐,封口,即得粉针剂。
实施例13口服液及制备方法
黄芩总甙200g 连翘总甙0.8g
金银花总有机酸80g 白砂糖80g
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液 适量
制成1000ml
制法:按处方量将连翘总甙、金银花总有机酸、黄芩总甙用缓冲液溶解,过滤、灌封、灭菌、即得口服液。
实施例14水针剂及制备方法
注射用黄芩总甙200g
除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙3.7g
制成1000ml
制法:将除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙用注射用水溶解,加入注射用黄芩总甙,用碳酸氢钠溶液调pH6.5-7.5,经加热,冷藏等常规处理后,灌封,灭菌,即得水针剂。
实施例15粉针剂及制备方法
注射用黄芩总甙3.7g
除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙200g
制成100支
制法:按处方量将精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙用注射用水溶解,滴加碳酸氢钠溶液调pH6.5-7.5,经常规处理后,干燥,粉碎,在无菌条件下分装于灭菌容器内,再装入注射用黄芩总甙,封口,即得粉针剂。
实施例16粉针剂及制备方法
注射用黄芩总甙 200g
除去鞣质及溶血性皂甙的连翘酯甙 300g
制成100支
制法:按处方量将精制的除去鞣质及溶血性皂甙的连翘总甙用注射用水溶解,滴加碳酸氢钠溶液调pH6.5-7.5,经常规处理后,干燥,粉碎,在无菌条件下分装于灭菌容器内,再装入注射用黄芩总甙,封口,即得粉针剂。
本发明的药物组合物经药效学试验证明,抗菌作用优于双黄连制剂,抗合胞病毒作用与双黄连制剂相似,试验结果如下:
1、抗菌作用:
试管内抗菌试验证明,本发明所述的组合物具有较强的抗菌作用,对链球菌A群、肺炎双球菌、流感杆菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌抗菌作用比双黄连制剂高1-2个稀释度。实验结果见表1、2。
表1双黄连制剂抗菌试验结果
试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
稀释度 | 1∶4 | 1∶8 | 1∶16 | 1∶32 | 1∶64 | 1∶128 | 1∶256 | 1∶512 | 1∶1024 | 0 |
葡萄球菌 | - | - | - | - | - | - | - | + | + | + |
链球菌 | - | - | - | + | + | + | + | + | + | + |
肺炎球菌 | - | - | + | + | + | + | + | + | + | + |
白喉杆菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
流感杆菌 | + | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
大肠杆菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
绿脓杆菌 | - | - | - | + | + | + | + | + | + | + |
芽孢杆菌 | - | - | - | - | - | - | + | + | + | + |
痢疾杆菌 | - | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
表2本发明药物组合物抗菌实验结果
试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
稀释度 | 1∶4 | 1∶8 | 1∶16 | 1∶32 | 1∶64 | 1∶128 | 1∶256 | 1∶512 | 1∶1024 | 0 |
葡萄球菌 | - | - | - | - | - | - | - | + | + | + |
链球菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
肺炎球菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
白喉杆菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
流感杆菌 | - | - | + | + | + | + | + | + | + | + |
大肠杆菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
绿脓杆菌 | - | - | - | - | + | + | + | + | + | + |
芽孢杆菌 | - | - | - | - | - | - | + | + | + | + |
痢疾杆菌 | - | + | + | + | + | + | + | + | + | + |
2、抗病毒作用:
用细胞组织培养法观察其抗呼吸道合胞病毒的作用,结果证明,本发明所述的药物组合物具有显著的抗病毒作用,其作用强度与双黄连制剂相似。结果见表3。
表3抗合胞病毒作用实验观察
稀释度 | 10-1 | 10-2 | 500X | 10-3 | 5仟 | X 10-4 | 5万 | X空白 | |
病变 | 双黄连制剂 | 100% | 25% | - | - | - | - | - | - |
程度 | 本发明对照组 | 100%75% | 25%75% | -75% | -50% | -50% | -25% | -- | -- |
3、含有黄芩总甙及连翘总甙,不含金银花总有机酸的药物组合物抗菌作用稍有减弱,其中对白喉杆菌、芽孢杆菌的抗菌作用与含有金银花总有机酸的药物组合物相似,对其它菌株的抗菌作用低一个稀释度;抗合胞病毒作用相近。
Claims (3)
1.一种含有黄芩总甙、连翘总甙和金银花总有机酸的抗菌抗病毒注射剂,该注射剂以22.27-98.18%的黄芩总甙,1.82-98.18%的连翘总甙和0-34.55%的金银花总有机酸作为有效成分,其中连翘总甙中连翘酯甙含量>25%。
2.根据权利要求1所述的抗病毒注射剂,该注射剂是用下列方法制得的:
a)取黄芩,按常规方法提取、精制,得到黄芩总甙;
b)取连翘或连翘叶,按常规方法提取,得到连翘总甙,将所得连翘总甙用注射用水溶解,经超滤除去鞣质和溶血性皂甙,得到精制的连翘总甙,其中连翘酯甙含量>25%;
c)需要的话,取金银花或叶,按常规方法提取,得到金银花总有机酸,将所得金银花总有机酸用注射用水溶解,经超滤除去鞣质和溶血性皂甙,得到精制的金银花总有机酸;
d)按常规方法混合得自a),b)和/或c)的产物,制得所述的注射剂。
3.制备抗菌抗病毒注射剂的方法,该注射剂含有22.27-98.18%的黄芩总甙,1.82-98.18%的连翘总甙和0-34.55%的金银花总有机酸作为有效成分,所说的方法包括下列步骤:
a)取黄芩,按常规方法提取、精制,得到黄芩总甙;
b)取连翘或连翘叶,按常规方法提取,得到连翘总甙,将所得连翘总甙用注射用水溶解,经超滤除去鞣质和溶血性皂甙,得到精制的连翘总甙,其中连翘酯甙含量>25%;
c)需要的话,取金银花或叶,按常规方法提取,得到金银花总有机酸,将所得金银花总有机酸用注射用水溶解,经超滤除去鞣质和溶血性皂甙,得到精制的金银花总有机酸;
d)按常规方法混合得自a),b)和/或c)的产物,制得所述的注射剂。
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