CN106794140A - 基于活性物质稳定溶液的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种基于两种活性成分的稳定溶液的药物组合物(两种类型)，所述两种活性成分的稳定溶液包括，低分子量透明质酸和/或一种其药学上可接受的盐作为第一活性成分，其中所述酸或盐的分子量为100kDa到400kDa或，一种类型，分子量为400kDa到2.5MDa，和，地卡索辛或一种其水溶性盐作为第二活性成分，以及一种可溶于水并在水溶液中离解成金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐形式的稳定剂，或这些盐的混合物，其中所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛或其水溶性盐形成水溶性复合物。所述稳定溶液还包括至少一种药学上可接受的添加剂。

Description

基于活性物质稳定溶液的药物组合物

技术领域

本发明属于医药领域，特别涉及具有抗炎、抗菌、再生和滋润保湿作用的并可用于治疗皮肤和器官病变的组合物，更特别地，对粘连过程具有抑制活性。

背景技术

粘连是组织的病理性融合，其由瘢痕组织的片段形成，并且出现在因手术创伤，感染，局部缺血或异物作用造成的非典型损伤灶。粘连可能为类似聚乙烯膜的组织薄带，或者厚丝带状。粘连的形成称为粘连过程。

粘连的形成由内部器官疾病，手术后，感染和创伤中发生的炎症过程所导致。虽然粘连可能发生在不同器官之间，但最常发生于肠袢，输卵管，卵巢，子宫，膀胱和心脏。

腹腔粘连是外科手术后的普遍并发症，接受盆腔器官或腹腔手术的患者中93％观察到发生粘连。从未接受手术的人群中同样有10.4％观察到发生粘连。

在大多数情况下，粘连无痛且并不引起并发症。尽管如此，60-70％的成年人小肠梗阻由粘连导致，并能促进骨盆区慢性疼痛的发展。

粘连通常开始形成于手术后的最初几天，但其可能在数月甚至数年时间内无症状出现。当瘢痕组织开始限制小肠蠕动，消化系统内食物运动变得更为复杂，将增加肠梗阻的发生概率。

在极端情况下，粘连可能形成围绕肠段的纤维带。它将限制血液供应从而导致组织萎缩。

瘢痕组织可能在结缔组织心囊(心包)中形成，从而妨碍其正常运作。各种感染，如风湿，将导致心脏瓣膜粘连并且降低其功能效率。

小骨盆发生的粘连可能形成于小骨盆器官，如子宫、卵巢、输卵管或膀胱。通常发生在手术后。盆腔器官炎性疾病以及感染后并发症(例如，性病)通常导致输卵管粘连，而卵细胞通过输卵管输送至子宫受精。输卵管粘连可能导致不孕，并且增加宫外孕的风险。

妇科手术后发生的粘连通常是完全无临床意义的，但粘连的存在可能会引起早发或迟发性并发症，包括不孕不育，盆腔疼痛，以及肠梗阻，伴随生活质量下降。这往往需要患者再度入院并接受额外更复杂的手术治疗，从而大幅增加治疗费用。

粘连形成倾向是一种个体特征。不同的因素，如饮食，慢性疾病，糖尿病，以及慢性感染过程，将削弱白细胞的功能和纤维蛋白溶解活性，并潜在加强粘连形成。同样被证明，术后粘连的发生率随着患者年龄，既往手术次数和手术治疗量的增加而提高。任何腹腔手术，即使对浆膜的损伤最小，均可能导致粘连发生，造成几乎所有组织结构的粘连。已经证实接受妇科根治手术的女性中有60-90％发生粘连。一些研究表明，至少接受一次手术治疗的女性重复接受手术的概率为5％。这类妇女在接下来十年内因粘连性疾病住院治疗的可能性较大。因此，粘连是导致20％女性患者住院的原因。

需降低术后粘连发生率是显然的。例如：在美国每年进行的腹腔和盆腔粘连手术超过440000例，从而为患者带来了额外的风险。

为找到预防粘连的有效方法，许多临床手段和抗粘连制剂已被提出来，其可防止一级和二级术后粘连的形成。预防粘连的主要方法包括对腹腔组织结构产生有限创伤的手术手段，以及减少粘连形成的抗粘连制剂。

抗粘连制剂可针对炎性过程中的不同因素(比如，感染，内毒素，渗出物)和/或粘连的形成过程(比如，血凝，纤维蛋白积累，成纤维细胞活动和增殖)。任何抗粘连制剂应专门针对粘连过程的不同因素，而不应针对正常的创伤愈合过程。

在文献中有关于以下几类抗粘连制剂对粘连过程的影响的研究描述：非甾体类抗炎药、糖皮质激素及抗组胺制剂，孕酮/雌激素制剂、抗凝血剂、溶栓制剂，抗生素。临床试验和动物实验数据表明上述抗粘连制剂不能解决术后粘连形成问题——它们的使用因为功效不足而受限，并且在某些情况下——因安全性不够(存在不必要的副作用)，存在炎症过程，可能出现导致副作用和创伤愈合迟缓的感染而受限。

因此，发明人提供了稳定溶液以及以此为基础的药物组合物，其可发挥抗粘连作用，还提供了同时具有创口愈合与消炎杀菌作用的药物组合物。可选择透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为具有抗粘作用的物质。

透明质酸(HA)是一种天然多糖，它是结缔组织胞外物质的主要成分。HA是一种具有生物相容性，无免疫原性，无毒性，天然生物吸收性物质。它在生理pH值下带负电荷，易溶于水，天然HA分子量为5000到2000万道尔顿。人体滑膜液中的HA平均分子量大约为300万道尔顿。浆膜组织中的HA针对干燥和其他类型的浆膜损伤具有一定保护作用。HA同样存在于皮肤，它参与组织再生过程。皮肤过多的紫外线暴露将引起自身炎症(“太阳晒伤”)，伴随HA在真皮细胞中合成停止以及分解速率加快。

已知一种用于预防粘连形成的名为Separacoat的制剂(由美国健赞公司制备)，其为含0.04％HA的磷酸缓冲液(Matveev N.L.，Arutyunyan D.Yu.，Vnutribryushnyespaiki-nedootsenivaemaya problema(Intraabdominal adhesions-unappreciatedproblem).-Endoskopicheskaya Khirurgiya(Endoscopic surgery).-2007.-No5.-p.60-69)。它已被用于外科手术剖解中，用以保护腹部表面免受间接手术创伤，而非在手术后，用于隔离创伤后的表面。研究已表明该制剂功效低下。根据临床试验结果，食品和药物管理局(FDA)并未批准该制剂，其生产已停止。

已知用于防止粘连的制剂Intergel(Intergel制剂，Lifecore Biomedical，Inc，Chaska，MN制备)包含5％的透明质酸铁。以往的研究已证明其可减少腹腔手术粘连的数目，严重程度和发生率，然而，在涉及肠腔剖解的外科手术中使用该制剂将导致令人无法接受的术后并发症发生比率。从2003年开始，由于患者迟发性术后疼痛的病例，该制剂已退出临床使用。

已知专利RU 2233164(于2004年7月27日公布)公开一种用于在腹腔手术中预防术后腹腔粘连发展的方法，包括基于化学改性的透明质酸膜在手术创口上的应用，即与5-氨基水杨酸发生化学键合的透明质酸。

然而，在使用基于透明质酸的制剂时，要求具有抗炎，抗菌和伤口愈合的作用，这将会大大拓宽其应用范围并促进其在炎症和创伤，尤其是在手术，阴道感染及分娩活活动等类似领域的广泛应用。为达到此目的，将基于透明质酸的制剂与具有抗炎和创口愈合作用的制剂一起联合使用。尝试开发同样具有抗炎，创口愈合作用的基于透明质酸的单一制剂已导致下述专利的产生。

RU2438697(于2012年1月10日公布)公开了具有抗炎作用的含透明质酸制剂，其为外用治疗疱疹病毒感染的复合抗病毒制剂，包括重组干扰素，透明质酸，壳聚糖酯，甘草提取液，氧化锌，利多卡因或丁卡因，聚氧化乙烯，无水羊毛脂，凡士林，甘油和蒸馏水。该制剂对黏膜和皮肤的疱疹损伤，包括生殖器疱疹，眼疱疹和癣，具有长效抗炎，麻醉，创伤愈合作用，

由专利申请RU 2003101393(于2004年6月27日公布)已知一种用于治疗黏膜炎，口腔炎和贝塞特氏综合症的药物组合物，包含作为活性成分的有效剂量的透明质酸，甘草次酸，聚乙烯吡咯烷酮并与赋形剂和辅料混合以适合局部用药，另外含有抗菌剂/消毒剂，使用由该种组合物制成的药物用于口腔粘膜，咽部和食道衬里炎症的局部治疗，特别是黏膜炎和口腔炎，以及阴道和直肠粘膜(包括，但不限于，前庭炎和贝塞特氏综合症)。

由专利申请RU2195262(于2002年12月27日公布)已知一种基于透明质酸的具有抗菌，伤口愈合和消炎作用的药物。该药物包括透明质酸，三甲卡因和聚环氧乙烷，为一种无色均匀凝胶状物质，易溶于生理盐水和水。该药物被用于治疗感染性炎性疾病，包括局部和全身性腐败炎性过程，热和化学烧伤，静脉血管的慢性营养性溃疡，皮肤辐射损伤，裂伤，磨损，以及各种原因所致创伤的治疗。

由专利申请RU 2501566(于2013年12月20日公布)已知一种用于预防由于手术介入造成瘢痕，粘连和疙瘩发生的药物组合物，包括含有序列号为SEQ ID NO：56的氨基酸序列的生物活性肽，以及高分子量透明质酸或其药学上可接受的盐。

地卡索辛(Decamethoxine)已被选择作为一种具有抗炎，抑菌和杀菌作用的物质。

地卡索辛是1，10-十亚甲基-双(N，N-二甲氧羰基甲基)氯化铵，其对革兰氏阳性和革兰氏阴性菌具有杀菌活性。该化合物对葡萄球菌，链球菌，蓝脓杆菌，荚膜细菌具有直接的杀菌作用，以及对酵母，酵母样真菌，曲霉，霉菌具有抑制作用。地卡索辛还能增强细菌的抗生素敏感性。

已知地卡索辛被用于局部和支气管治疗化脓性和真菌皮肤病(脓肿，化脓性伤口，念珠菌病等)，直肠炎，化脓性结膜炎，牙龈炎，牙周炎，扁桃体炎，中耳炎等化脓过程。它被用于肺部疾病的支气管治疗。

此外，地卡索辛被医务人员和外科手术领域作为消毒剂用于手部消毒处理，同时用于消毒缝合和手术材料，橡胶手套，医疗器械，由金属，玻璃，塑料和橡胶制成的仪器和设备，化学灭菌以及骨-肌腱移植物的保存。

地卡索辛是一种表面活性剂(SAS)，其通过破坏细胞膜完整性来发挥作用。微生物细胞膜含有的短脂肪链能被地卡索辛迅速破坏。人体细胞膜包含长脂肪链，而地卡索辛分子对其无效。

在本发明之前尚未不可能使用包含透明质酸和地卡索辛的制剂，由于地卡索辛是一种阳离子型SAS，因此无法与皂液以及阴离子化合物，特别是透明质酸溶液相容，地卡索辛因季铵基而带有正电荷，透明质酸因羧基而带有负电荷，二者在溶液中因相互作用形成水不溶性沉淀。这是无法在单一制剂中联合使用这两种物质的主要原因，而二者联合使用可有效治疗粘连发生和阴道感染，同时有效发挥创口愈合和抗炎作用。

甚至含有透明质酸的药物使用说明书经常提到与地卡索辛所属的季铵盐不可联合用药。因此，文献中尚无关于使用同时含地卡索辛和透明质酸的溶液作为治疗药物的信息。

发明内容

本发明的目的在于提供一种包含透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及地卡索辛和/或其水溶性盐(以下称为地卡索辛)的稳定溶液，其随时间的稳定性好，并可用于制备具有广泛作用的液体或软剂型制剂，以及一种制备该种稳定溶液的方法。

本发明的目的在于提供一种包含透明质酸和地卡索辛稳定溶液的具有广泛作用的新型药物组合物。

本发明的又一目的在于提供一种可作为具有治疗活性的药物的新型药物组合物，其同样具有抗炎，抗菌，再生，和滋润保湿作用。

本发明的另一目的在于增强粘连疾病的预防和治疗效率及其治疗效果，提高术后生活质量，抑制粘连形成，避免器官脱水并同时具有抗炎和创伤愈合作用。由此，创伤愈合加快，无粘连发生，且无炎性过程恶化。

本发明的另一目的在于提高阴道感染治疗效果，破坏妇科，口腔科，泌尿科，肛肠科，眼科，皮肤性病学病原菌，由此延长抗炎作用时间，还可保护粘膜以防止脱水，滋润保湿，促进其再生，减少软组织创伤病例数量，尤其是分娩妇女生殖道损伤，缩短产程，降低手术分娩发生率，以及在颈部手术中，当存在形成颈部全层瘢痕高风险的情况下。

另一目的在于提高创伤愈合效率，并同时具有杀菌，抗微生物作用。

另一目的在于扩大基于所述稳定溶液的药学可接受剂型形式的组合物范围。

上述目的之一如下实现，提供一种基于透明质酸和/或其药学上可接受的盐(以下称为HA)以及地卡索辛的稳定溶液，选择浓度和稳定剂，并提供制备该稳定溶液以及基于该稳定溶液的液体或软剂型，或无沉淀的长期稳定性剂型的药物组合物的特殊条件。此外，液体剂型溶液同时包含HA和地卡索辛，且随时间稳定性好。

研究结果意外地发现基于地卡索辛和HA的溶液可通过加入稳定剂来获得。

稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解成金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐。

稳定机制可能包括通过稳定剂的阳离子和阴离子来屏蔽透明质酸的羰基以及地卡索辛的氨基。

有效的稳定剂，特别地，为一种无机酸，有机一元-和二元羧酸的无毒或低毒的盐以及其类似物。

一些具体的稳定剂为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌。

因此，本发明的目的在于提供一种基于两种活性物质的具有治疗效果的稳定溶液，其特征在于其还包含稳定剂，透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为第一活性成分，地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性成分，稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解成金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物。

优选地，所述稳定剂是一种无机酸，有机一元-和二元羧酸的无毒或低毒的盐，或者所述盐的混合物。更优选的，所述稳定剂为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌或它们的任意混合物。

可选择地，所述稳定溶液可进一步包含其他药学上可接受的添加剂，特别的，用于保持溶液pH值在一个恒定水平，例如，有机一元-和二元羧酸，无机酸，碱，特别地，用于此处的稳定剂可包含形成一种盐的有机酸，尤其是一种选自如下系列的用于调节pH的物质：盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，醋酸铵，氨溶液，碱土金属氢氧化物，碱金属氢氧化物，碳酸钠，碳酸氢钠，磷酸钠。

优选地，各组分的含量可以如下表所示，mg/ml

所述稳定溶液还可以包含1-60mg/ml的药学上可接受的添加剂、

优选地，所述稳定溶液包含琥珀酸钠作为稳定剂，还包含琥珀酸。

优选的，所述稳定溶液包含乳酸钠作为稳定剂，还包含乳酸。

所述稳定剂还可以具有如下组成，mg/ml：

本发明的另一目的在于提供一种制备所述稳定溶液的方法，将其中一种活性物质和稳定剂溶于水，接着将第二种活性物质溶于所得溶液中混合直到完全溶解，透明质酸和/或其药学上可接受的盐和地卡索辛和/或其水溶性盐作为活性物质，稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物。

假设不稳定的地卡索辛和透明质酸在溶液中的相互作用将形成一种水不溶性沉淀物，应在该种沉淀物可能形成之前加入稳定剂。

因此，本发明的目的在于提供一种基于地卡索辛和透明质酸稳定溶液的制备方法，将HA加入预先配制的地卡索辛和稳定剂的水溶液中，或将地卡索辛加入预先配制的HA和稳定剂的水溶液中，所述稳定剂选自仅形成水溶性复合物而非水不溶性沉淀的药学上可接受的盐。

优选地，基于地卡索辛和透明质酸的稳定溶液的制备方法包括将地卡索辛溶解于稳定制剂的溶液，然后将透明质酸或其盐溶解于所得溶液，或反之亦然，将稳定剂溶解于地卡索辛溶液，然后将透明质酸或其盐溶解于所得溶液。

优选地，基于地卡索辛和透明质酸的稳定溶液的制备方法包括将透明质酸或其盐溶解于稳定剂溶液，然后将地卡索辛溶解于所得溶液，或反之亦然，将稳定剂溶解于透明质酸或其盐的溶液，然后将地卡索辛溶解于所得溶液。

优选地，在基于地卡索辛和透明质酸稳定溶液的制备方法中，通过添加酸或碱将地卡索辛和透明质酸稳定溶液的pH值调节至所需值。

优选地，在基于地卡索辛和透明质酸稳定溶液的制备方法中，将所述溶液进一步高压灭菌消毒。

基于地卡索辛和透明质酸稳定溶液的制备方法已在一个较宽的组分配比范围内被验证，特别地(每100ml溶液)：

透明质酸-从1g到50g，

地卡索辛-从0.01g到10g，

稳定剂-从1g到60g.

地卡索辛可以碱或氯化物的形式使用。

基于地卡索辛和透明质酸的稳定溶液可通过添加用于制药工业的药物辅助性成分来将其转变为所需要的剂型，从液体到软体，从而制备药物制剂。

所需剂型，特别地，包括但不限于溶液，气雾剂，混悬剂，糖浆，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，栓剂。

所述稳定溶液本身也可以为一种药物组合物。

所述稳定溶液和药物组合物可用于任何存在术后粘连风险的手术中，尤其是：

腹腔；

腱鞘；

关节；

胸膜腔；

心包腔；

脑膜；

鼓室；

睾丸被膜；

神经干。

此外，其还可以用于具有软组织接合风险的手术。比如，颈部手术，该手术存在形成颈部全层瘢痕的高风险。

所述稳定溶液以及基于此的药物组合物可防止器官之间行形成粘连，因此可防止术后粘连的发生，缓解炎症，使损伤粘膜再生，以及防止术后感染的发展。

针对抗炎目的，本发明所述稳定溶液和药物组合物可用于消灭妇科，口腔科，泌尿科，肛肠科，眼科，皮肤性病学病原菌，延长抗炎作用时间，还可保护粘膜防止脱水，滋润保湿，以及促进其再生。

本发明的另一目的在于提供一种可以解决其他问题的基于稳定溶液的药物组合物。

已观察到由于HA具有足够大的分子量范围，其表现出不同的特性。我们采用了两种2种不同类型的HA，1-分子量低于400kDa的HA，以及2-分子量为401kDa到2500000Da的HA。以下研究所述的第一种HA以及地卡索辛支配物质进入组织细胞，并提供有效的创伤愈合作用，同时具有破坏病原菌，消毒功效。

因此，另一个解决上述问题的目标，即，提高阴道感染治疗效果，以消灭妇科，口腔科，泌尿科，肛肠科，眼科，皮肤性病学致病菌，以及提供长效抗炎作用，确保粘膜保护防止脱水，滋润保湿，促进粘膜再生的附加作用，减少软组织创伤病例数，尤其是分娩妇女生殖道，缩短产程并降低手术分娩发生率，以及在颈部手术中，当存在形成颈部全层瘢痕高风险的情况下；增强创伤愈合效率，同时具有杀菌，抗微生物作用。一种基于两种活性物质稳定性溶液的药物组合物，其特征在于其包含高分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐(HMHA)作为第一活性物质，所述酸或盐的分子量为401kDa到2.5MDa，以及包含地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性物质，稳定剂，所述稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物，还包括至少一种药学上可接受的添加剂。

优选地，药物组合物包含如下配比的物质，mg/ml：

本发明还提供了一种包含分子量为401kDa到2500000Da的高分子透明质酸，地卡索辛，琥珀酸钠，琥珀酸，氯化钠和水的组合物，各组分按照以下配比，mg/ml：

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述稳定溶液包含分子量为401kDa到2500000Da的高分子量透明质酸，地卡索辛，琥珀酸钠，琥珀酸，氯化钠和水，各组分按照以下配比，mg/ml：

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述稳定溶液被用于抑制粘连过程。

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述稳定溶液被用于保护器官防止粘连形成以及防止器官脱水。

还包含至少一种有效的药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂用以将其由软剂型转变为液体剂型，所述剂型可以是气雾剂，混悬剂，浆液剂，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，外用溶液，口服溶液。

还包含至少一种选自如下系列的药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂：粘度调节剂，防腐剂和抗氧化剂，且包含一种选自如下系列的物质作为粘度调节剂：烷基纤维素衍生物，羟烷基纤维素衍生物，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，淀粉，黄原胶，瓜尔豆胶，聚丙烯酸和其盐，甲基丙烯酸酯的共聚物，聚环氧乙烷，聚环氧丙烷，甲壳质衍生物，淀粉，果胶，海藻酸，环糊精，琼脂，以及卡拉胶；且包含一种选自如下系列的物质作为防腐剂：劳拉氯铵，苯扎氯铵，苯度氯铵，氯化十六烷基吡啶，溴化十六烷基三甲铵，度米芬，苯甲醇，氯丁醇，邻甲酚，氯甲酚，苯酚，苯乙醇、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯，以及包含一种选自如下系列的物质作为抗氧化剂：焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，硫酸钠，硫代硫酸钠，以及抗坏血酸。

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为401kDa到2500000Da的高分子量透明质酸作为一种活性成分，地卡索辛，乳酸钠，乳酸和水，包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为401kDa到2500000Da的透明质酸作为一种活性成分，地卡索辛，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

此外，根据本发明技术方案，优选地，药物组合物被用于抑制粘连。

本发明的第四个目的在于提供一种基于两种活性物质稳定溶液的药物组合物，其特征在于所述两种活性物质稳定溶液包含低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为第一活性物质，所述酸或盐的分子量可以为100kDa到400kDa，包含地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性物质，稳定剂，所述稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物，还包括至少一种药学上可接受的添加剂。包含如下配比的组分，mg/ml：

此外，所述稳定剂是一种无机酸，有机一元羧酸或二元羧酸的无毒或低毒的盐，或者所述盐的混合物，可以为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌，或它们的任意混合物。

所述低分子量透明质酸的药学上可接受的盐可以为透明质酸钠。

此外，包含pH调节剂或缓冲液作为药学上可接受的添加剂，尤其是磷酸盐缓冲液，或柠檬酸盐缓冲液，或醋酸盐缓冲液，或琥珀酸盐缓冲液，或Tris盐酸缓冲液，或马来酸盐缓冲液，且包含如下系列的一种物质作为pH调节剂，盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，醋酸铵，氨溶液，碱土金属氢氧化物，碱金属氢氧化物，碳酸钠，碳酸氢钠，以及磷酸钠。

其中一个实施方式为一种药物组合物，其包含琥珀酸钠作为稳定剂，以及包含琥珀酸作为pH调节剂。

另一个实施方式为一种药物组合物，其包含乳酸钠作为稳定剂，以及包含乳酸作为pH调节剂。

该种组合可被用于抑制粘连过程，保护器官防止粘连形成以及愈合创伤，并同时具有抗炎作用。

进一步地，可以包含至少一种有效的药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂用于将其由软剂型转变为液体剂型，所述剂型可以为气雾剂，混悬剂，浆液剂，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，外用溶液，口服溶液。

本发明药物组合物可以包含选自如下系列的至少一种药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂：粘度调节剂，防腐剂和抗氧化剂，包含一种选自如下系列的物质作为粘度调节剂：烷基纤维素衍生物，羟烷基纤维素衍生物，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，淀粉，黄原胶，瓜尔豆胶，聚丙烯酸和其盐，甲基丙烯酸酯的共聚物，聚环氧乙烷，聚环氧丙烷，甲壳质衍生物，淀粉，果胶，海藻酸，环糊精，琼脂，以及卡拉胶；包含一种选自如下系列的物质作为防腐剂：劳拉氯铵，苯扎氯铵，苯度氯铵，氯化十六烷基吡啶，溴化十六烷基三甲铵，度米芬，苯甲醇，氯丁醇，邻甲酚，氯甲酚，苯酚，苯乙醇、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯；包含一种选自如下系列的物质作为抗氧化剂：焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，亚硫酸钠，硫代硫酸钠，以及抗坏血酸。

其中一个实施方式为一种药物组合物，剂型为凝胶剂型，其包含分子量为100kDa到400kDa的低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

组合物的另一个实施方式为一种具有如下组成的制剂，mg/ml：

凝胶剂型的药物组合物还可以具有以下组成，mg/ml：

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述组合物被用于抑制粘连过程。

此外，根据本发明技术方案，优选地，所述组合物被用于加速创伤愈合。

本发明技术方案的说明

由上可知地卡索辛由于季铵基而带有正电荷，而透明质酸由于羰基而带有负电荷，因此二者在溶液中相互作用形成一种水不溶性沉淀。作为研究结果，意外地发现可通过引入稳定剂而得到两种活性成分的溶液，比如地卡索辛和透明质酸和/或其药学上可接受的盐。向包含地卡索辛和透明质酸和/或其药学上可接受的盐的溶液中加入稳定剂可防止溶液中形成沉淀。

稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解成金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或这些盐的混合物。药学上可接受的盐为无毒或低毒的盐。特别地，它们可以是这些酸的盐：无机酸(例如，盐酸，硫酸，和硝酸)，有机一元-和二元羧酸(例如，琥珀酸，醋酸，和乳酸)。稳定机制可能在于通过稳定剂的阳离子和阴离子来分别屏蔽透明质酸的羰基以及地卡索辛的氨基。

有效的稳定剂，特别地，是一种无机酸，有机一元-和二元羧酸的无毒或低毒的盐，比如，氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌。根据本发明技术方案，所述盐可被用于制备任何形式——结晶和水溶液形式的基于透明质酸和/或其药学上可接受的盐的稳定溶液(以下简称为稳定溶液)。

根据本发明技术方案，透明质酸和/或其药学上可接受的盐可用于所述稳定溶液中。透明质酸钠，透明质酸钾，透明质酸锌可作为透明质酸的盐——根据本发明，所述透明质酸的药学上可接受的盐优选为透明质酸钠。透明质酸的盐，与透明质酸类似，可刺激组织的再生过程，同时还能发挥一定的抗微生物活性(尤其是透明质酸锌，其对葡萄球菌，链球菌和大肠杆菌表现出一定活性)。透明质酸和透明质酸盐刺激组织再生过程的能力存在几种不同的创伤愈合机制——它们刺激吞噬作用，激活粒细胞和巨噬细胞，促进清洁伤口，清除局部产生的坏死细胞，增加透明质酸浓度，为细胞参与创伤愈合过程创造基础，诱导细胞比如上皮细胞和成纤维细胞的增殖，加强成纤维细胞和内皮细胞向组织损伤区域的迁移，反过来为组织再生过程创造最佳条件。

根据给出的技术方案，稳定溶液还可包括至少一种药学上可接受的添加剂。通常情况下，pH调节剂或缓冲液被用作药学上可接受的添加剂。pH调节剂或缓冲液被用于制备具有所需pH值的稳定溶液。

pH调节剂是一种添加至稳定溶液以获得所需pH值的物质或物质的混合物。采用如下系列的物质作为pH调节剂，盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，醋酸铵，氨溶液，碱土金属氢氧化物，碱金属氢氧化物，碳酸钠，碳酸氢钠，以及磷酸钠。本发明技术方案可使用的作为pH调节剂的物质并不受限于上述所列物质。

缓冲液是在改变溶液某些参数(组分浓度，温度，等)时可将溶液pH值保持(稳定)在某一特定值的物质或物质的混合物。任何文献或现有技术所述的缓冲液均可被使用，特别地，比如磷酸盐缓冲液，柠檬酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液，琥珀酸盐缓冲液，Tris盐酸缓冲液，马来酸盐缓冲液。本发明技术方案可使用的作为缓冲液的物质并不受限于上述所列物质。

根据给出的技术方案，可在稳定溶液基础上制备药物组合物(制剂)，通过添加制药工业普遍使用的药物辅助性成分获得所需剂型的药物组合物。

所需剂型，特别地，包括但不限于溶液，气雾剂，混悬剂，浆液剂，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，外用溶液，口服溶液。

剂型为药物制剂提供了易于使用的状态(例如，聚合态，几何形状)。

为聚合态时，剂型分为气态，液态，软体和固体。

气体或混合气体，气雾剂属于气态剂型。

气雾剂是一种具有气态分散介质和固体或液体分散相的分散体系。含有液体分散相的气雾剂也被称为喷雾剂。气雾剂最重要的性质是固体或气体颗粒在喷雾后保持悬浮在分散介质中的能力。

溶液，浸剂，煎剂，酊剂，提取剂，乳液，混悬液，混合液，饱和溶液，浆液剂，以及滴剂属于液态剂型。

溶液是一种通过将固体物质完全溶解于溶剂或混合液体制备得到的液态剂型。一般而言，溶液不应含有悬浮颗粒和沉淀。溶液分为外用溶液，内服溶液和注射溶液。

浸剂和煎剂是药用植物原料的水提取物。其可迅速失去活性，有因此需在病患者服用现配少量(使用3-4天)。

酊剂是一种液体，透明，或多或少着色的醇，含水醇或醇-醚的植物原料药物提取物。

提取剂是通过使用溶剂制备的从植物原料中获得的浓缩制剂，不同于酊剂具有高的药物浓度。

乳剂是由两种互不相容的液体组成的分散体系，其中一种以液滴形式分散于另一种液体中。乳液通过将一种液体分散在另一种液体中来制备，比如，水包油。

混悬液是由存在液体中的固体微细颗粒组成的分散体系。混悬液通过将固体物质分散于液体中来制备。

混合液通过将某些药物组分与水，乙醇，以及其他溶剂混合制成。其可以是透明，浑浊，甚至包含沉淀，且需要在使用前震荡。

饱和溶液是气体饱和的液体。

糖浆是含有蔗糖的药物浓缩液剂型。

滴剂是供内部外部使用并以滴计量的液态剂型。对于滴剂来说，可以采用溶液，混悬液和乳剂。

软剂型包括软膏剂，糊剂，搽剂，栓剂，乳膏和凝胶剂。

软膏剂为具有柔软度的剂型，供外部使用。软膏剂通过将不同的药物成分与称为软膏基质的成型剂混合来制得。使用石油精炼产品(凡士林，石蜡等)，动物脂肪和植物油作为软膏基质。

糊剂是软膏剂的变化形式，含有含量不低于25％的粉末状物质(面团状)，因此其具有良好的吸附和干燥性能。

搽剂(也称为液体药膏)为稠状液体或凝胶形式的均匀混合物，在体温下融化。采用植物油和动物脂肪作为搽剂基质。

栓剂是软剂型。其在室温下具有固态性，并可在体温下融化。有直肠栓剂，阴道栓剂和棍棒。栓剂最合适的基质是可可油。

霜剂是局部给药的软剂型(有时也被称为软性药膏)，其包括两-或多相分散体系，通常为很稠密的水包油或油包水类型的乳液。相比于软膏剂，霜剂具有更低的稠度，虽然与软膏剂相似，包含药物成分，油，脂肪和其他组分。

凝胶剂为局部给药的软剂型，是具有液体分散介质和特殊分散相——胶凝剂(形成三维网状空间结构的物质)的单-，两-或多相分散体系。凝胶剂是一种特殊类型的软膏剂，其通常以聚合物载体为基础制得，且由于稠度其可保持形状，具有弹性和可塑性。

为得到所需剂型的药物组合物，可使用任何现有已知药物辅助性成分。根据本发明技术方案，一般来说，药物组合物可以包含至少一种如下系列的药物辅助性成分，粘度调节剂，防腐剂和抗氧化剂。这些药物组合物的辅助性成分的作用已在文献中被描述，对本领域技术人员来说为现有技术。

可采用一种如下系列的化合物作为粘度调节剂，比如：烷基纤维素衍生物，羟烷基纤维素衍生物，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，淀粉，黄原胶，瓜尔豆胶，聚丙烯酸和其盐，甲基丙烯酸酯的共聚物，聚环氧乙烷，聚环氧丙烷，甲壳质衍生物，淀粉，果胶，海藻酸，环糊精，琼脂，以及卡拉胶。本发明技术方案可使用的作为粘度调节剂的物质并不受限于上述所列物质。

可采用一种如下系列的化合物作为防腐剂，比如劳拉氯铵，苯扎氯铵，苯度氯铵，氯化十六烷基吡啶，溴化十六烷基三甲铵，度米芬，苯甲醇，氯丁醇，邻甲酚，氯甲酚，苯酚，苯乙醇、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯。本发明技术方案可使用的作为防腐剂的物质并不受限于上述所列物质。

可采用一种如下系列的化合物作为抗氧化剂，比如焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，亚硫酸钠，硫代硫酸钠，以及抗坏血酸。本发明技术方案可使用的作为抗氧化剂的物质并不受限于上述所列物质。

本发明第一个技术方案的实施方式之一为一种具有如下组分配比的稳定水溶液，mg/ml：

本发明第三个技术方案的另一个实施方式为一种具有如下组分配比的水凝胶剂型的药物组合物，mg/ml：

本发明第四个技术方案的实施方式之一为一种具有如下组分配比的稳定水溶液，mg/ml：

本发明第四个技术方案的另一优选实施方式为一种有如下组分配比的水凝胶剂型的药物组合物，mg/ml：

所述稳定性溶液和基于该稳定溶液的药物组合物可被用于存在术后粘连发生风险的任何器官的手术中，尤其是如下器官或器官部分：

-腹腔；

-腱鞘；

-关节；

-胸膜腔；

-心包腔；

-脑膜；

-鼓室；

-睾丸被膜；

-神经干；

-输卵管；

-卵巢；

-子宫；

-膀胱。

此外，其可被用于其他存在软组织接合风险的器官手术中。例如，在颈部手术中，当存在形成颈部全层瘢痕的高风险时。

所述稳定溶液和基于该稳定溶液的药物组合物可预防器官之间形成粘连，因而可预防术后粘连过程的发展，缓解炎症，再生受损粘膜以及预防术后感染发生。

针对抗炎作用，本发明稳定溶液和药物组合物可被用于破坏妇科，口腔科，泌尿科，肛肠科，眼科，皮肤性病学病原菌，延长抗炎作用时间，还可保护粘膜防止脱水，滋润保湿，以及促进其再生。

具体实施方式

在一个较大组分配比范围内对基于地卡索辛和高分子量透明质酸稳定溶液的制备方法进行了试验，特别地(每1000ml溶液)：

考虑到地卡索辛和高分子量透明质酸在溶液中的相互作用将形成一种水不溶性沉淀物，很显然应在地卡索辛或透明质酸之一前加入稳定剂。

分子量为401kDa到2500000Da的透明质酸由于其较大的分子量而无法渗入细胞，但观察到其可形成一层器官包膜，从而阻止粘连形成并防止器官脱水。由于地卡索辛和/或其盐的添加，同时还实现了抗炎和创伤愈合效果。其结果是，创伤愈合加快，无粘连形成和炎性过程的恶化，将进一步通过实施例来说明。该种活性物质的结合可在器官表面形成一层包膜，并可同时发挥上述所有作用。

分子量为100kDa到400kDa的透明质酸可渗入细胞，因此其可对细胞再生和创伤愈合发挥更为直接的作用，并联合地卡索辛而增加了抗菌和抗炎特性。即使分子量不大，这种低分子量透明质酸也能在器官上形成一层膜，但对粘连过程作用较小，在以下实施例中将阐述不同的作用范围。

具体实施例

以下所述为本发明具体实施方式的举例。

实施例1

稳定溶液和基于该溶液的药物组合物的制备

将800ml蒸馏水加入烧瓶内。将16g琥珀酸钠，50mg琥珀酸，1.2克氯化钠按顺序加入烧瓶并在磁力搅拌器(600rpm)上混合5-10min直到各成分完全溶解。然后，在不断搅拌条件下将200mg地卡索辛加入溶液直到完全溶解，加入融高分子透明质酸(401kDa-2500000Da)并在磁力搅拌器搅拌至高分子量透明质酸完全水化(溶解)。

随后，所获溶液的pH，如果需要，用琥珀酸调节至7.3，最后用纯净水将制备溶液定容至1000ml。

实施例2

稳定溶液的制备

重复实施例1步骤，除了用透明质酸钠替代高分子透明质酸。

实施例3

基于稳定溶液的药物组合物凝胶制剂的制备

将800ml蒸馏水加入烧瓶内。将200mg地卡索辛，1.42g乳酸钠，360mg乳酸，30g甘油按顺序加入烧瓶并在磁力搅拌器(600rpm)上混合5-10min直到各成分完全溶解。然后，在不断搅拌条件下将5g高分子量透明质酸(401kDa-2500000Da)加入溶液并于磁力搅拌器上搅拌直至透明质酸完全水化(溶解)。向溶液加入30g羟丙基甲基纤维素，用纯净水将混合溶液体积定容至1000ml并混合。如果需要，添加乳酸或乳酸钠将溶液pH值调节至7.315。

在一个较大组分配比范围内对基于地卡索辛和低分子透明质酸稳定溶液的制备方法进行了试验，特别地(每1000ml溶液)：

低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐	从1g到50g
		地卡索辛	从0.01g到10g
稳定剂	从1g到60g
		水	定容至1000ml

假设溶液中的地卡索辛和低分子量透明质酸在相互作用的过程中，将形成一种不溶于水的沉淀物，很显然应在地卡索辛或透明质酸之前将稳定剂加入水中。

实施例4

基于稳定溶液的药物组合物的制备

将800ml纯化蒸馏水倒入烧瓶。将16g琥珀酸钠，50mg丁二酸，和1.2g氯化依次加入烧瓶，在磁力搅拌器(600rpm)上混合5-10min直到各成分完全溶解。随后，在不断搅拌条件下将200g地卡索辛加入溶液直至完全溶解。加入5g低分子量透明质酸(从100kDa到400kDa)并在磁力搅拌器上混合直至透明质酸完全水化(溶解)。如果需要，用琥珀酸将溶液pH调节至7.3，然后用纯净水将制备溶液定容至1000ml。

实施例5

基于稳定溶液的药物组合物的制备

重复实施例4，除了用透明质酸钠替代低分子量透明质酸。

实施例6

基于稳定溶液的药物组合物凝胶制剂的制备

将800ml纯化蒸馏水倒入烧瓶。将200mg地卡索辛，1.42g乳酸钠，360mg乳酸，和30g甘油依次加入烧瓶并在磁力搅拌器(600rpm)上混合5-10min直到各成分完全溶解。随后，在不断搅拌条件下将5g低分子量透明质酸(从100kDa到400kDa)加入溶液，并在磁力搅拌器上混合直至完全透明质酸完全水化(溶解)。将30g羟丙基甲基纤维素加入到该溶液中，然后在搅拌条件下用纯净水将混合溶液定容至1000ml。如果需要，添加乳酸或乳酸钠将溶液pH值调节至7.315。

实施例7制备稳定溶液

将800ml纯化蒸馏水倒入烧瓶，在磁力搅拌器(600rpm)不断搅拌5-10min的条件下加200mg地卡索辛和1.42g乳酸钠直至各成分完全溶解。随后，在不断搅拌条件下加入5g低分子透明质酸(从100kDa到400kDa)并在磁力搅拌器上混合直至透明质酸完全水化(溶解)。

为制备药物组合物，依次加入360mg乳酸和30g甘油并在磁力搅拌器(600rpm)上混合5-10min直至各成分完全溶解。将30g羟丙基甲基纤维素加入该溶液，然后在不断搅拌条件下用纯净水将混合溶液定容至1000ml。

为确定根据本发明技术方案制备的稳定溶液和药物组合物的性质，比如稳定溶液的稳定性，稳定溶液和基于该溶液的药物组合物的抗菌活性，已针对药物组合物对粘连发展的活性以及药物组合物对创口愈合的效果进行了研究，结果如下所述。

在研究过程中，实施例2和实施例4制备的稳定溶液在恒室温条件下储存两年，并在一定时间间隔检查稳定溶液中存在/不存在沉淀物，稳定溶液中透明质酸钠含量，以及稳定溶液的pH值。研究结果如表1所示。

表1

由表1可知，制备的稳定溶液在于室温储存的两年中不改变性质。

采用标准纸盘分析法对实施例2和实施例4制备的稳定溶液进行抗菌活性研究。研究结果如表2所示。

表2

已对本发明技术方案制备的药物组合物(实施例2和实施例4所示药物组合物制剂)针对处于腹部手术干预并造成机械性损伤(伴随肠浆膜层结扎和划伤的肠系膜缝合)和化学性损伤(在肠浆膜层使用Altabor片剂粉末和碘溶液以激发粘连过程)条件下的大鼠腹腔粘连发展的影响进行了研究。

在试验中使用了66只体重180-200g的白色远交系大鼠，并被随机分配至以下指定试验组：

——病理学对照1；

——结扎+药物组合物(HMHA，LMHA)；

——病理学对照2；

——划伤+药物组合物(HMHA，LMHA)；

——病理学对照3；

——Altabor片剂粉末+药物组合物(HMHA，LMHA)；

——病理学对照4；

——碘溶液+药物组合物(HMHA，LMHA)。

在四个试验动物组中，创伤因素为机械性－－在两个试验组中创伤由结扎造成(用丝线缝合十二肠肠系膜)，而在两个试验组中创伤由划伤造成(用手术针头在阑尾浆膜层划10条纵向划痕直至出现“血珠”)。

在四个试验动物组中，创伤因素为化学性——在两个试验组中创伤由在脾脏面使用Altabor片剂粉末(30mg)造成，而在两个试验组中创伤由在阑尾上使用碘酒溶液造成。

表3列出了试验动物组名称，影响每个试验组粘连形成过程的因素，创伤因子，以及每个实验组的动物数量。

表3

随机分组后，动物在进行剂量50mg/kg硫喷妥钠的腹腔注射麻醉的情况下接受腹腔手术。中线开腹手术后，根据随机化原则，按以下方法之一对试验组动物的腹腔器官造成损伤：

1)用丝线缝合部分十二肠肠系膜；

2)阑尾浆膜层划伤(用手术针头在阑尾浆膜层划10条纵向划痕直至出现“血珠”)；

3)在脾脏面撒Altabor片剂粉末(30mg)；

4)在阑尾浆膜上施用5％的碘酒溶液。

对试验组动物的相应器官造成损伤后，向腹腔加入5ml药物组合物。在此之后，缝合试验动物腹腔。观察动物14天。用存活率，外观评估，以及体重动态来评价动物状态。第14天，将动物从试验中移除，在过量麻醉下打开腹腔，进行宏观学观察，确定粘连的存在，并对处理区域的器官和组织状态进行评分。此后，分离出粘连范围内的器官复合体组织块，称重并在10％的福尔马林溶液中固定以进行形态学研究。粘连组织随后用酒精脱水并用火棉胶-石蜡包埋。切片用苏木精和伊红，王吉松氏(Van Gieson)苦味酸酸性品红染色法进行染色。采用显微镜Granum进行微观学研究。用数码摄像机Granum DSM310拍摄显微图像。运用Toup View程序对图像进行计算机处理。

为了对处理区域的器官和组织的状态进行评分，采用以下标准：

十二指肠肠系膜部分：

0-无变化；

0.5-缝线处有白色浸润；

1-缝线处有白色浸润+与毗邻大肠袢形成点状丝状(成束带形式)粘连；

2-缝线处有白色浸润+与毗邻大肠袢形成面(广泛性接触)粘连；

3-缝线处有白色浸润+与毗邻大肠袢形成面粘连+与肝尾叶和/或与胃脾韧带邻近的胰腺形成粘连。

阑尾浆膜：

0-无变化；

1-阑尾尖表面有轻度白色增厚；

2-阑尾尖表面有中度白色增厚；

3-阑尾尖表面有明显白色增厚+阑尾体部与毗邻小肠袢形成面粘连。

脾被膜

0-无变化；

1-在器官膈面有轻度孤立状白色增厚；

2-器官膈面有分散状白色增厚；

3-器官膈面有分散状白色增厚；

4-器官膈面和外表面有分散状白色增厚+器官脏面(其胃区域)与毗邻胰腺尾部粘连。

运用单因子方差分析的参数和非参数检验——Kruskal-Wallis和Mann-Whitney检验，以及Fisher角度变换进行统计学处理。

对药物组合物针对因部分十二指肠肠系膜丝线缝合造成机械性创伤后的大鼠腹腔粘连发展的影响性研究已表明如下结果。

因丝线缝合造成部分十二指肠肠系膜机械性损伤后，如表4中的大鼠体重动态所示，在对照组和测试组动物身上并未观察到营养过程和全身状态的明显障碍。

表4

由大鼠腹腔粘连过程发展的宏观研究结果证明，因丝线缝合造成病理学对照1组动物的部分十二指肠肠系膜机械性损伤后观察到100％的动物(6/6)存在粘连过程的发展。在结扎+药物组合物试验组，与病理学对照1组相比，HMHA药物组合物有效地将粘连动物数量减少83.3％(1/6)，LMHA药物组合物减少50％，由表5数据可知。

所列数据表明LMHA药物组合物同样可以促进粘连形成的减少，虽然不如含HMHA的药物组合物的效果那样有说服力。而HMHA药物组合物对粘连形成的效果相当显著。

表5

注意：*-值偏差，采用Fisher角度变换评估，值与病理学对照1组显著相关，p＜0.05。

表6所示的粘连过程显著性分数评估证明HMHA和LMHA药物组合物的显著抗粘连活性，相对于病理学对照1组，HMHA药物组合物将粘连过程评分值显著降低至其0.24倍，LMHA药物组合物降低至其0.56倍。

表6

试验组	试验组动物数目	粘连过程显著性，分数
			病理学对照1	6	2.33±0.21
结扎+HMHA药物组合物	6	0.56±0.06*
			结扎+LMHA药物组合物	6	1.3±0.04

注意：*-值偏差，Mann-Whitney方法评估，值与病理学对照1组显著相关，p＜0.05。

用丝线缝合十二指肠肠系膜的大鼠器官组织复合体重量的确定(表7)同样表明与病理学对照1组相比，HMHA药物组合物将器官组织块复合体重量显著降低至其0.63倍，LMHA药物组合物降低至其0.83倍，同时提示HMHA药物组合物具有显著的抗粘连活性。

表7

试验组	器官复合体重量，g
		病理学对照1	1.04±0.10
结扎+HMHA药物组合物	0.67±0.05*
		结扎+LMHA药物组合物	0.87±0.05

注意：*-值偏差，Newman-Keuls方法评估，值与病理学对照1组显著相关，p＜0.05。

对位于十二指肠肠系膜缝合处的器官组织复合体的宏观学研究表明在病理学对照1组中有66.7％的大鼠可清楚看到缝线处有白色浸润且与毗邻大肠袢形成面粘连，且33.3％的动物同时存在与肝尾叶粘连的现象。

在结扎+HMHA药物组合物处理组，83.3％的动物在缝合区域观察到微小变化，特征是缝线处有白色增厚。仅有一只大鼠(16.7％或1/6)的增厚伴有与毗邻大肠袢形成单个点状丝状粘连。

在病理学对照1组动物中，在缝合区域以及残余缝合线周围波纹处形成大小不同的纤维组织灶，此处可观察到异物巨细胞(巨噬细胞)。一般来说，在肠系膜附近区域未出现炎症反应。在同一区域常形成一个整体的粘连复合体，包括粘连的小肠和大肠袢，有时也为肝叶，以及肝脏和胰腺小的粘连区。这种粘连的特点为已定位明确，伴随明显的嗜品红胶原纤维束，以及具有更松散结构的大致纵向排列的颗粒型胶原原纤维。在粘连组织紧邻肠壁浆膜处到处可见异物巨细胞。在肠道肌膜可观察到营养不良和肌纤维破坏，胶原纤维渗入肌肉组织形式的病理学变化。66.7％的动物的创口处有纤维蛋白块沉积，网膜和毗邻大肠袢之间有丝状粘连和面粘连(2分)。同时也注意到33.3％的动物存在与肝尾叶被膜的粘连(3分)。

在结扎+HMHA药物组合物试验组动物中，在处理区域，确认存在与病理学对照1试验组相比小很多的带包膜的异物肉芽肿，周围存在纤维组织斑块的未断缝合线片段，由足够薄的成熟结缔组织包膜所包围。在绝大多数大鼠的缝合区域未发现肠袢粘连，仅观察到某些位置分隔网膜脂肪组织瓣的松散纤维结缔组织层的“粗糙化”。仅在一只大鼠身上发现肠袢间存在轻微粘连。

针对因划伤造成阑尾浆膜机械性损伤后的大鼠腹腔粘连发展的影响研究给出如下结果。

由大鼠体重动态可知－－表8数据所示，由划伤造成阑尾浆膜机械性损伤后的试验组动物中未发现营养过程和全身整体功能状态明显受扰。

表8

由划伤造成阑尾浆膜机械性损伤后的大鼠腹腔粘连发展的宏观学研究结果已被确立，来自病理学对照2组的动物100％(6/6)观察到有粘连过程发展。在划伤+药物组合物试验组，与病理学对照2相比，HMHA药物组合物能有效将发生粘连的动物数量降低至16.7％(1/6)而LMHA药物组合物——降低50％(3/6)，如表9数据所示。

表9

注意：*-值偏差，Fisher角度变换评估，值与病理学对照2组显著相关，p＜0.05。

表10所示的粘连过程显著性分值评估证明HMHA药物组合物具有显著的抗粘连效果，与病理学对照2相比，分数显著降低至其0.31倍，而LMHA药物组合物的抗粘连效果与对照组2相比降低至其0.60倍。

表10

试验组	试验组动物数量	粘连过程显著性，分数
			病理学对照2	6	2.00±0，00
划伤+HMHA药物组合物	6	0.63+0.26*
			划伤+LMHA药物组合物	6	1.2±0.00

注意：*-值偏差，Mann-Whitney方法评估，值与病理学对照2组值显著相关，p＜0.05。

在划伤所致部分阑尾浆膜机械性损伤的大鼠身上分离出的器官复合体重量(参见表11)同样表明，与病理学对照2相比，HMHA药物组合物能有效促进器官复合体重量减轻至其0.67倍，而LMHA药物组合减轻至其0.83倍，同时提示HMHA药物组合物具有明显抗粘连效果。

表11

试验组	器官复合体重量，g
		病理学对照2	0.99±0.08
划伤+HMHA药物组合物	0.67±0.05*
		划伤+LMHA药物组合物	0.8±0.05

注意：*-值偏差，Newman-Keuls方法评估，值与病理学对照2组显著相关，p＜0.05。

划伤所致部分阑尾浆膜机械性损伤区域的器官复合体宏观性研究表明病理学对照2的大鼠100％(6/6)被发现在阑尾尖存在中度白色增厚，并在阑尾体和上覆小肠袢之间存在孤立的点状丝状粘连。

在划伤+HMHA药物组合物组，50％的大鼠其处理区域组织未发现有明显变化。33.3％的动物可观察到在阑尾尖端有轻度白色增厚，此外，在一个动物身上(16.7％)还存与毗邻小肠袢之间的孤立点状丝状粘连。

由划伤所致部分阑尾浆膜机械性损伤后的大鼠腹腔粘连过程发展的形态学研究表明病理学对照2组的阑尾尖端浆膜表面观察到有中等大的纤维蛋白团，其不仅通过与肌膜紧密接触，还通过取代部分肌纤维进行破坏。纤维蛋白沉积物通常具有松散细丝状，嗜品红特性，被各种细胞填充。在阑尾体，明显地，创伤和炎症对粘膜下层和肌层造成影响的痕迹保留在直接机械损伤区域。在某些位置，外观未变的网膜紧靠阑尾体浆膜，在某些位置其“渗透”入肌纤维，并在不同位置转化为具有成熟外观的粘连同时延伸至毗邻小肠袢。因此，阑尾表面划伤后将存在更为不明显的粘连发展——2分。所有大鼠身上，除了纤维蛋白块沉积，还观察到阑尾表面存在与相应小肠袢的点状丝状粘连。

在划伤+HMHA药物组合物组，50％的大鼠阑尾尖端表面未出现纤维增厚。未发生变化的网膜，松散地靠近阑尾体。在33.3％的动物身上发现阑尾尖端浆膜上有中度纤维增厚。某些地方的结缔组织变粗糙，但未观察到有与小肠袢之间的粘连形成，且仅在16.7％(1/6)的大鼠身上发现有与小肠袢之间的孤立的点状粘连。粘连的胶原纤维与病理学对照2组的动物相比更为不成熟，未观察到肌膜完整性受到破坏。

因此，在阑尾表面划伤后经腹腔内施加HMHA药物组合物可阻止50％动物身上的粘连发展，并在33.3％动物身上减轻了粘连发展过程。药物组合物在形态学上减少了处理区域内的纤维蛋白块量沉积量，同时减少了粘连量，减轻了粘连的蔓延，防止粘连组织的加速成熟。

药物组合物对由Altabor片粉末造成的脾脏面和被膜损伤的大鼠腹腔粘连发展的影响研究结果如下。

由大鼠体重动态——参见表12所示数据，由Altabor片粉末造成脾脏面和被膜化学性损伤后未观察到试验组动物身上存在明显的营养过程和全身状态受扰。

表12

作为大鼠腹腔粘连过程发展的宏观学研究结果，已证实Altabor片粉末造成脾脏面和被膜损伤后，观察到病理学对照3组中100％的动物(6/6)存在粘连过程的发展。在Altabor片粉末+药物组合物试验组，与病理学对照3组相比，HMHA药物组合物将存在粘连的动物数量有效降低83.3％(1/6)，而LMHA药物组合物——降低50％，由表13数据可知。

表13

注意：*-值偏差，Fisher角度变换评估，值与病理学对照3组值显著相关，p＜0.05。

由表14所示的粘连过程显著性分数评估证明了HMHA药物组合物显著的抗粘连效果，与病理学对照3相比，可将分数显著降低至其0.43倍，以及LMHA药物组合的抗粘连活性——降低至其0.67倍。

表14

试验组	试验组动物数量	粘连过程显著性，分数
			病理学对照3	6	4.00±0.00
Altabor片粉末+HMHA药物组合物	6	1.71±0.64*
			Altabor片粉末+LMHA药物组合物	6	2.65±0.5

注意：*-值偏差，Mann-Whitney方法评估，值与病理学对照3组值显著相关，p＜0.05。

由Altabor片粉末引起的脾脏面和被膜化学性创伤后的大鼠身上分离的器官复合体的重量(参见表15)同样证明了与病理学对照3相比，HMHA药物组合物可有效促进器官复合体重量减轻至其0.59倍，而LMHA药物组合物为0.79倍，这同样提示了HMHA药物组合物更为显著的抗粘连活性。

表15

试验组	器官复合体重量，g
		病理学对照3	1.77±0.10
Altabor片粉末+HMHA药物组合物	1.05±0.06*
		Altabor片粉末+LMHA药物组合物	1.4±0.05

注意：*-值偏差，Newman-Keuls方法评估，值与病理学对照3组显著相关，p＜0.05。

由Altabor片粉末引起的脾脏面和被膜损伤区域内的器官复合体宏观学研究表明病理学对照3组中100％大鼠(6/6)的变化特征为膈面上蔓延器官大部分表面有白色沉积物。这些变化还伴随脾脏面(其胃区)与毗邻胰腺尾部之间存在面粘连。

在Altabor片粉末+HMHA药物组合物组中33.3％的大鼠未发现有明显变化。16.7％的大鼠器官膈面上分布有白色增厚，33.3％的大鼠器官脏面分布有白色增厚。仅有16.7％的大鼠脾膈面分布有白色增厚并伴有脏面胃区和毗邻胰腺尾部之间轻度粘连。

因Altabor片粉末引起脾膈面和被膜损伤后的大鼠腹腔粘连过程发展的形态学研究证明，病理学对照3组大鼠器官膈面被膜的厚度由于胶原纤维的增生而急剧增厚。在某些位置同样观察凸出被膜的增厚的脾小梁。在许多情况下，在增厚被膜上可观察到足够大的炎性灶。在所有动物身上都能观察到脾脏面和胰腺周围细胞组织之间存在面粘连。这些粘连的组织基础以重新排列的胶原纤维形成的庞大网络为代表。在某些位置可在纤维之间观察到彼此分离的异物巨细胞。王吉松氏(Van Gieson)苦味酸酸性品红染色法表明位于被膜和粘连的胶原纤维均足够成熟，且明显嗜品红。在许多动物身上发现有连合形成——网膜和胰腺尾部周围细胞组织之间区域的粘连。它们是夹杂着随机排列的胶原纤维的足够大的致密细胞组织区域。在腺体实质内，可观察到炎症现象。由此可见施加异物——Altabor片粉末——在脾脏面发生了严重的粘连。在100％情况下，发生致密纤维蛋白块的沉积，其与膈面被膜结合，以及在部分网膜和脾脏面之间，胰腺细胞组织和肝尾叶被膜之间存在致密面粘连——4分。

在Altabor片粉末+HMHA药物组合物组，33.3％的大鼠其脾膈面被膜保持不变或变化可忽略不计——在一些位置，可观察到稍有增厚的被膜上有纤维素纤维，彼此分离的异物巨细胞。器官脏面保持完整。在其他动物身上观察到膈面被膜有中度不同增厚。此处包覆的胶原纤维与病理学对照3相比略欠致密。在脏面观察到存在与胰腺周围细胞组织的粘连，与对照组相反，粘连基础以不太成熟的纤细松散的纤维组织为代表。

对药物组合物针对由碘酒溶液引起阑尾化学性损伤后的大鼠腹腔粘连发展的影响研究结果如下。

由大鼠体重动态——参见表16所示数据可知，在5％的碘酒溶液造成阑尾化学性损伤后，未观察到试验组动物的营养代谢过程和全身功能状态的明显受扰。

表16

大鼠腹腔粘连过程发展的宏观学研究结果已证明由碘酒溶液造成阑尾损伤后，可观察到病理学对照4组中100％的动物(6/6)存在粘连过程的发展。

在碘溶液+药物组合物试验组中，与病理学对照3组相比，HMHA药物组合物可将发生粘连的动物数量有效减少50％(3/6)，而LMHA药物组合物——减少33％(4/6)——由表17数据可知。

表17

注意：*-值偏差，采用Fisher角度变换评估，值与病理学对照4组值显著相关，p＜0.05。

表18所示的粘连过程显著性分数评估证实了HMHA药物组合物显著的抗粘连活性，与病理学对照4组相比，将分数显著降低至其0.67倍，以及LMHA药物组合物的抗粘连活性——降低至其0.83倍。

表18

试验组	试验组动物数量	粘连过程显著性，分数
			病理学对照4	6	3.00±0.00
碘溶液+HMHA药物组合物	6	2.00±0.44*
			碘溶液+LMHA药物组合物	6	2.5±0.25

注意：*-值偏差，Mann-Whitney方法评估，值与病理学对照4组值显著相关，p＜0.05。

由碘酒造成阑尾损伤后的大鼠身上分离的器官复合体重量(参见表19)同样证明与病理学对照4相比，HMHA药物组合物促进器官复合体重量有效减轻至其0.59倍，而LMHA药物组合物——减轻至其0.77倍，同时提示HMHA药物组合物具有更为显著的抗粘连活性。

表19

试验组	器官复合体重量，g
		病理学对照组4	1.64±0.08
碘溶液+HMHA药物组合物	0.99±0.06*
		碘溶液+LMHA药物组合物	1.25±0.05

注意：*-值偏差，Newman-Keuls方法评估，值与病理学对照4组显著相关，p＜0.05。

针对碘酒溶液造成的阑尾损伤区域内的器官复合体的宏观研究表明在病理学对照4组中，在100％的大鼠(6/6)身上观察到在阑尾尖端有明显的白色增厚，以及在阑尾体部和毗邻小肠袢之间存在面粘连。

碘溶液+HMHA药物组合物组的大鼠有33.3％未观察到表面有变化，16.7％的动物阑尾尖端有中度白色增厚，并伴有与毗邻小肠袢之间的点状丝状粘连。50％的大鼠观察到其阑尾尖端有显著的白色增厚且与小肠袢之间存在面粘连。

针对由碘酒溶液造成阑尾损伤后的大鼠腹腔粘连过程发展的形态学研究表明在病理学对照4组所有大鼠阑尾尖端均观察到不同显著程度的弱嗜品红性纤维状或网状堆积形式并伴随大量细胞单元的纤维沉积物。在阑尾肌层观察到营养不良性区域。可见网膜“焊接”至阑尾体部区域。在一些区域这些粘连具有明显的纤维特性。同样在网膜和毗邻盲肠的小肠袢之间发现了相似的粘连。观察到在结合区域存在明显的肌纤维解体，粘连结缔组织生长入肠道的肌纤维。使用碘酒溶液对阑尾表面造成化学性损伤后发生了显著的粘连过程——在所有大鼠阑尾尖端存在纤维增厚沉积，并伴有阑尾体与毗邻小肠袢之间有面粘连发生——3分。

在碘溶液+HMHA药物组合物组，仅在33.3％的大鼠阑尾尖端和阑尾体发现有轻度纤维沉积。在肌层未被破坏。在50％大鼠的阑尾尖端发现有大量纤维沉积，其网膜“焊接”至阑尾体部。有时它们具有成熟纤维的特性，尽管如此阑尾肌层几乎完好无损。同样发现了与相应小肠袢之间存在粘连。在粘连某些位置发生了肌纤维崩解，但粘连结缔组织未侵入肠肌纤维。粘连组织不及病理学对照4组成熟。

因此，由建立在四种腹腔粘连过程模型(丝线缝合十二指肠肠系膜，阑尾划伤，在脾脏面施用Altabor片粉末，以及在阑尾上施用5％的碘酒溶液)的研究结果可证明，HMHA药物组合物表现出显著的抗粘连效果，减少粘连发生数量，减少沉积在手术部位的纤维蛋白块的量，以及防止粘连结缔组织的加速成熟。

本发明药物组合物表现出广泛的治疗活性，具有抗炎，抗菌，再生和滋润作用，尤其可作为加速创伤愈合的制剂。为调查实施例3和实施例6所制备的药物组合物的治疗活性，对药物组合物在三种创伤模型——化学性烧伤，热伤，以及“全层皮肤创伤”中对创伤愈合的影响进行了研究。

在用20％的KOH溶液引起化学性烧伤创伤的大鼠模型身上进行了药物组合物创伤愈合效应的研究。施用KOH在损伤部位造成主动发展的充血现象，然后部分皮肤被干燥的痂皮覆盖(结痂)，逐渐分离并脱落。从第二天开始进行处理，每天向测试组动物的所有创面施用0.4g药物组合物。创伤未处理的大鼠组作为对照组。定期测定每个动物组的创伤面积，并对创面处组织进行组织学研究。创伤愈合过程发生于痂下，包括将创伤边缘融合在一起，创面尺寸缩小以及愈合。

在对照组，50％的动物在第16天仍存在小部分未愈合的创口。在经过创伤处理的测试组动物中，皮肤再生过程进程大大加快且在第11天已经可以观察到痂皮分离，在第17天观察到创伤愈合。创伤平均愈合时间(上皮形成)在对照组总计为23.5天，在测试组为16.4天。

创面组织的组织学研究表明化学性皮肤烧伤中可观察到明显的炎性过程图像。在对照组中第5天血管发生扩张并充满红细胞，痂下发生显著出血和组织水肿，明显的白细胞浸润。在试验第13天，炎性反应变得不太明显。在试验第18天，炎性反应迹象消失，并观察到上皮形成。

在使用HMHA和LMHA药物组合物处理创口的试验组中，观察到基于LMHA的组合物具有更大的创口愈合作用——在试验第5天，炎性过程较对照组动物不明显。邻近组织充血不明显，无出血现象，肉芽组织出现在创面缺损处，在边缘处形成上皮层。在第10-12天，新的上皮层已经覆盖形成的取代创面缺损的结缔组织区域。所得结果证实了使用基于LMHA的药物组合物治疗化学性烧伤创口的功效，以及加速创伤愈合过程的作用。

利用由局部(大约300mm²的创面)250℃高温作用造成热伤的大鼠模型对基于HMHA和LMHA的药物组合物的创伤愈合效果进行了研究。动物的处理和监测按照实例1所述进行。高温作用造成了大鼠背部皮肤的三度烧伤，伴有化脓性炎症现象和坏死组织分界，并观察到所有表皮层的脱落。剩下的深部真皮层肿胀，水肿波及皮下组织。一夜之间在坏色和存活组织之间的边界形成棕色痂。烧伤创面的组织学图像以炎性反应迹象为特征。

在对照组动物中，直到第15天痂皮干燥并分离，第20天有炎症存在迹象。上皮细胞自皮肤残余的上皮端和残余的表皮生发层生长于肉芽组织上，使得创口仅在第26天愈合。

在试验组，基于LMHA的药物组合物较HMHA表现出更强的活性，基于LMHA的药物组合物可活化创伤愈合过程——直到第7天痂皮干燥并分离，上皮形成过程在第16天已完成，在第22天创面已覆盖毛发。所得结果证实了使用药物组合物在治疗热伤性创伤中的功效，以及加速创伤愈合过程的作用。

在“全层皮肤创伤”模型中对药物组合物的创伤愈合效果进行了研究，通过在己烯醛全身麻醉条件下在大鼠前肩胛区剥离一块面积大约200mm²的皮瓣获得该模型。动物的处理和监测如实例1所述进行。创面的组织学图像以化脓性炎性反应为特征。

在对照组动物身上，肉芽组织仅在试验开始后第12天开始形成，并逐渐填充创面缺损。在第21天观察到上皮面形成，而完全愈合发生在第27天。

在使用基于LHMA和HMHA的药物组合物的试验组中，基于LHMA的药物组合物表现出更强的活性，试验第12天在动物中观察到上皮面形成。直到第17天创伤完全愈合。所得结果证实了使用药物组合物在治疗皮肤机械性创伤中的功效，以及加速创伤愈合过程的作用。

因此由三种模型的研究结果可证明基于LMHA的药物组合物在不同原因所致创伤的加速愈合过程中表现出显著的活性。

为研究药物组合物对粘连发展的作用，以及药物组合物对创伤愈合的影响，在患者身上进行了研究。

85名患者参与了该项研究。将所有纳入研究的患者分为4个临床组。每组再指定两个使用HMHA和LMHA药物组合物的亚组，为研究包含不同分子量透明质酸的药物组合物的效果，相应亚组再进一步细分为3个亚组。亚组之间在定量组成，性别，年龄和进行的手术操作类型上进行比较。

表20检查患者的性别分布

表21检查患者的年龄分布

第一组包括38名计划行剖腹探查以及器官切除术的患者(表22)。

表22第一组进行的手术操作

所有患者均进行了粘连形的成术后超声诊断。

从表23.1和23.2的数据比较可知与使用不同分子量透明质酸溶液的对照组相比，小肠袢与中间瘢痕的粘连在施用编号1-6制剂的主试验组中减少了20-25％。

表23.1第一组(对照组)患者脏器滑动幅度

表23.2第一组(主试验组)患者脏器滑动幅度

注意.*-P＜0.01与对照组相比。

比较制剂1-3和制剂4-6的效果可知，制剂4-6大幅降低了粘连形成的可能性，即降低20-25％。

然而，该种评估，尽管确信无疑其优势为非侵入式，但无法确定腹腔各部分粘连过程的发生率以及粘连的宏观特征。

将48名接受二期剖腹结直肠手术且间隔超过2个月的患者归为第二组(表24)。

表24第二组进行的手术操作

在复发性干预中根据腹膜13个区域的调查问卷对所有患者进行了粘连过程发展的术中诊断。

一般外科手术中粘连过程评估计划(回答)

表25.1一般外科手术中13个区域中每个区域的粘连发展计分

注意.*-无粘连-计分0

表25.2.在一般外科手术中13个区域中每个区域的粘连发展计分

注意.*-无粘连-计分0

从上述表25.1和25.2可知，使用药物组合物(制剂1-6)可将粘连的形成降低76％。

第三组包括48名因输卵管不孕不育症接受子宫附件腹腔镜手术的患者。

表26第三组进行的手术操作

根据AFS评分系统(美国生育协会)在原始腹腔镜手术过程中对粘连过程进行评估。同样根据AFS评分系统在二次腹腔镜检查或后穹窿镜检查中对二次粘连形成进行评估。

美国生育协会的分类(1979)根据粘连损伤灶的数量和大小将该疾病分为四个严重程度等级(American Fertility Society.Classification of endometriosis//Fertil.Steril.-1979，Vol.32，N 5-6，633-634)：

I.存在1-5处粘连——评定为轻度级别

II.6-15——中度级别

III.15-30——重度级别

IV.超过30处粘连被评定为广泛性子宫内膜异位症

基于该分类，粘连发展范围等级的分数评定系统(表27)于1985年发表。

表27

表28.1.一般外科手术中13个区域中每个区域的粘连发展计分(组3对照)

注意.*-无粘连-计分0

表28.2一般外科手术中13个区域中每个区域的粘连发展计分(组3主试验组)

注意.*-无粘连-计分0

根据AFS评分标准，从表28.1和28.2数据可知，小骨盆内粘连发展范围的严重程度因分别使用制剂1-6而平均降低76％。

妇科患者的经阴道超声扫描(TVUS)结果显示无：1)卵巢边界模糊，其被定义为超过3/4程度的卵巢轮廓欠清楚；2)子宫和附件卵巢，其在腹部触诊可扪及；3)卵巢到传感器的距离增加超过11mm，其在腹部触诊可扪及。

24名患者参与了制剂1-6对创伤愈合的影响研究。患者具有不同的浅表损伤(创口底部为肌肉组织)。患者被分为12组，每组2人，分别施用制剂1-6以及不同分子量的透明质酸。

在施用制剂1-6后第一天，创口宏观边界中度浸润，肿胀，创口周围覆盖皮肤的充血情况未改善，表面创口缺损覆盖纤维素膜；有中等量的浆液脓性渗出物。第二天，创口缺损尺寸平均缩小30％，创口边缘浸润依然存在，有微量浆液性渗出物；创口底部出现松软的肉芽。第3-4天，炎性症状缓解，主动肉芽化开始。

表30创伤愈合率

由表30可知，由于组合物中的地卡索辛，制剂1-6可促进早期创伤愈合，因此可为表面创口消毒以及为上皮化创造条件以加快恢复速度。

对HA+地卡索辛药物组合物同样进行了研究。

在HA与地卡索辛的药物组合物对急性阴道感染的效果和耐受性的比较研究中，90名女性参与(45名诊断有细菌性阴道炎，45名诊断有阴道念珠菌病)。50名患者施用HA与地卡索辛的药物组合物(5ml，每日1-2次)，25名患者——0.5％的HA与醋酸氯己定的药物组合物(2.5g/天)，以及15名患者——2％的HA与甲硝唑的药物组合物，每天一次。研究持续时间为4周。

对于细菌性阴道炎，在90％的施用HA与地卡索辛药物组合物的患者身上观察到了临床治疗效果，相比之下，施用HA与醋酸氯己定药物组合物的患者组为75％；同样在施用HA与地卡索辛的药物组合物的情况下注意到阴道pH值在研究长达3周的时间内显著降低(在醋酸氯己定情况下——长达4周)。针对阴道念珠菌病，在85％的施用HA与地卡索辛药物组合物的患者身上观察到了临床治疗效果，相比之下，施用HA与醋酸氯己定药物组合物的女性患者组为80％。

HA与地卡索辛药物组合物的研究中未显示有严重的副作用。在绝大多数(90％)患者身上，药物组合物的耐受性被评估为“非常好”。

因此，针对细菌性阴道炎和阴道念珠菌病，HA与地卡索辛的药物组合物已表现出作用，疗程短，与标准技术手段效率相当。

为调查HA与地卡索辛的药物组合物作为药物使用的生物黏附能力，进行了以下研究：

对120名妇女的分娩过程进行了分析。主试验组(第一组)包括60名在分娩过程中使用HA与地卡索辛以及透明质酸的药物组合物的患者。对照组(第二组)包括60名在分娩过程中不使用所述凝胶的患者。

主试验组分娩妇女的平均年龄为28岁，在对照组——29岁。结果发现主试验组中为第一分娩的人数总计为30人(50％)，对照组——32人(53.3％)。

主试验组中第二次分娩的人数为25人(41.6％)，以及20人(33.3％)——在对照组。

主试验组中第三次或更多次分娩的人数为5人(8.3％)，对照组为8人(13.3％)。

产道软组织损伤的病例中有20名(33.3％)患者来自主试验组，有15名(25％)来自对照组；宫颈裂伤的病例中有5名(8.3％)妇女来自主试验组，有5名(8.3％)来自对照组；以及会阴创伤——分别为12名(20％)和10名(16.6％)产妇。

主试验组和对照组的所有妇女均在分娩第一时期被送往产科。在整个分娩过程中对胎儿状态和子宫收缩活动进行了监测。

在每次阴道检查期间施用HA与地卡索辛的药物组合物，从第一次给药开始：将5ml凝胶均匀涂布在阴道产道。在破羊水或人工破膜后15-30分钟再次施用凝胶。

结果：

分析表明，阴道创伤发生在主试验组的5名(8.3％)妇女和对照组的10名(16.6％)妇女身上。宫颈裂伤在第一组发现3名(5％)患者，在对照组发现15名(25％)。主试验组产妇(巨大胎儿)中有2例(3.3％)以及对照组(巨大胎儿威胁旧伤疤导致会阴撕裂中有3例(5％)进行了会阴切开术。

疼痛被评定为轻微的产妇在主试验组为35人(58.3％)，在对照组为15人(25％)；评定为中度——在主试验组为36人(60％)，在对照组为32人(53.3％)。第二组女性患者中有5人(8.3％)主诉有显著疼痛。在主试验组分娩中无主诉显著疼痛。

因此，在分娩过程中施用HA与地卡索辛的药物组合物可减少生殖道软组织损伤病例数量，缩短劳力时间以及减少手术分娩发生率。除此之外，在对照组所有患者身上观察到疼痛症状减轻，妇女主观感觉分娩过程疼痛大幅缓解。

药物组合物的优势：

药物组合物显示了有效的生物黏附性能和高亲水能力。药物组合物的这些性能是通过存在于药物组合物中的透明质酸来实现的(HA能结合并保留水，其一个分子可与一千个水分子结合)。

其结果是，该药物组合物可在阴道产道内形成低粘度生物黏附膜，从而减少产道与婴儿之间可能导致分娩过程并发症的摩擦。这种膜可保持皮肤的天然湿度，但不会影响气体交换。

透明质酸的另一主要优势之一是HA为我们身体天然成分的事实，因此与皮肤完全兼容，不会引起过敏反应和造成刺激。

表31 HA与地卡索辛的药物组合物的抗微生物活性比较

″-″无活性；

″+″低活性；

″++″良好活性；

″+++″高活性

结论：作为比较研究的结果，HA与地卡索辛的药物组合物对厌氧菌显示出杀菌作用，对原生动物显示出抑制作用。其对大多数引起细菌性阴道炎的微生物菌株有积极效果：阴道嗜血杆菌，拟杆菌属，动弯杆菌属，消化链球菌属。

为调查分析药物组合物，采用了很多现有研究手段，虽然说明书中仅提到部分，其用于证明所提出目标的实现而不以任何方式限制本发明技术方案。

由研究可得，基于透明质酸和/或其药物上可接受的盐与地卡索辛和/或其水溶性盐的稳定性溶液的药物组合物能有效预防粘连形成，并具有创伤愈合和杀菌作用。

HMHA和地卡索辛的药物组合物比LMHA在更大程度上旨在预防粘连，而LMHA针对身体不同部位的感染更为有效。因此，在某些情况下，这两种组合物可分开单独使用，另外，它们还可以联合使用，因为这两种组合物的有效结合可包括该制剂的所有作用，从阴道感染，分娩，手术治疗到预防粘连形成。

由上可得本发明技术效果为包含地卡索辛和透明质酸或其药学上可接受的盐的稳定溶液的制备，其溶液不发生沉淀，并显示出抗炎，杀菌，再生和滋润保湿效果，尤其对粘连过程的抑制显示出治疗活性，以及基于该稳定溶液的药学上可接受剂量形式的具有治疗功效的药物组合物的制备，特别地，对加快不同原因所致创伤的愈合过程有显著的治疗效果，同时拓宽了具有抑制粘连过程和加快不同原因所致创伤愈合过程治疗效果的药物的范围。

上述具体实施方式阐述了本发明技术方案但并不限定其范围。

Claims (57)

1.一种基于两种活性成分的具有治疗效果的稳定溶液，其特征在于其还包含稳定剂，透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为第一活性物质，地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性物质，稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解成金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物。

2.根据权利要求1所述的稳定溶液，其特征在于所述稳定剂是一种无机酸，有机一元-和二元羧酸的无毒或低毒的盐，或者所述盐的混合物。

3.根据权利要求2所述的稳定溶液，其特征在于所述稳定剂为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌或它们的任意混合物。

4.根据权利要求1所述的稳定溶液，其特征在于包含透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，稳定剂和水，按照如下配比，mg/ml：

5.根据权利要求1-3任一项所述的稳定溶液，其特征在其包含透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，稳定剂和水，还包括至少一种药学上可接受的添加剂，按照如下配比，mg/ml：

6.根据权利要求5所述的稳定溶液，其特征在于其包含一种药学上可接受的添加剂用以保持溶液pH值在一个恒定水平。

7.根据权利要求6所述的稳定溶液，其特征在于其包含琥珀酸钠作为稳定剂以及琥珀酸作为保持溶液pH值在一个恒定水平的试剂。

8.根据权利要求6所述的稳定溶液，其特征在于其包含乳酸钠作为稳定剂以及乳酸作为保持溶液pH值在一个恒定水平的试剂。

9.根据权利要求5-7任一项所述的稳定溶液，其特征在于其为一种包含透明质酸和/或其药学上可接受的盐，琥珀酸钠，琥珀酸，氯化钠，地卡索辛和/或其水溶性盐，以及水，按照如下配比，mg/ml：

10.一种制备权利要求1所述的稳定溶液的方法，其特征在于将其中一种活性物质和稳定剂溶于水，接着将第二种活性物质溶于所得溶液中混合直到完全溶解，透明质酸和/或其药学上可接受的盐和地卡索辛和/或其水溶性盐作为活性物质，稳定剂为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于将所述稳定剂溶于水，接着溶解地卡索辛和/或其水溶性盐，然后将透明质酸和/或其药学上可接受的盐溶解于所得溶液中。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于将地卡索辛和/或其水溶性盐溶于水，接着溶解稳定剂，然后将透明质酸和/或其药学上可接受的盐溶解于所得溶液中。

13.根据权利要求10所述的方法，其特征在于将稳定剂溶于水，接着溶解透明质酸和/或其药学上可接受的盐，然后将地卡索辛和/或其水溶性盐溶解于所得溶液中。

14.根据权利要求10所述的方法，其特征在于将透明质酸和/或其药学上可接受的盐溶于水，接着溶解稳定剂，然后将地卡索辛和/或其水溶性盐溶解于所得溶液中。

15.根据权利要求10-14任一项所述的方法，其特征在于通过添加酸或碱将该pH-稳定溶液进一步调节至所需值。

16.根据权利要求10-15任一项所述的方法，其特征在于将所述稳定溶液进一步高压灭菌消毒。

17.根据权利要求10所述的方法，其特征在于其各组分按照以下配比使用，mg/ml：

18.基于两种活性物质的稳定溶液的药物组合物，其特征在于其包含高分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为第一活性物质，所述酸或盐的分子量为401kDa到2.5MDa，以及包含地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性物质，稳定剂，其为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物，还包括至少一种药学上可接受的添加剂。

19.根据权利要求18所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含以下配比的组分，mg/ml：

20.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于所述稳定剂为一种无机酸，有机一元或二元羧酸的无毒或低毒的盐，或者所述盐的混合物。

21.根据权利要求20所述的药物组合物，其特征在于所述稳定剂为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌，或它们的任意混合物。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其特征在于所述高分子量透明质酸的药学上可接受的盐为透明质酸钠。

23.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含pH调节剂或缓冲液作为药学上可接受的添加剂。

24.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于所述缓冲液包含磷酸盐缓冲液，或柠檬酸盐缓冲液，或醋酸盐缓冲液，或琥珀酸盐缓冲液，或Tris盐酸缓冲液，或马来酸盐缓冲液。

25.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含如下系列之一的物质作为pH调节剂，盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，醋酸铵，氨溶液，碱土金属氢氧化物，碱金属氢氧化物，碳酸钠，碳酸氢钠，以及磷酸钠。

26.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含琥珀酸钠作为稳定剂，以及包含琥珀酸作为pH调节剂。

27.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含乳酸钠作为稳定剂，以及包含乳酸作为溶液的pH调节剂。

28.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于所述组合物被用于抑制粘连过程。

29.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于所述组合物被用于保护器官防止粘连形成以及防止器官脱水，并同时具有抗炎作用。

30.根据权利要求19所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含至少一种有效的药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂用于将其由软剂型转变为液态剂型。

31.根据权利要求30所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为气雾剂，混悬剂，糖浆，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，外用溶液，口服溶液。

32.根据权利要求30所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含选自如下系列的至少一种药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂，粘度调节剂，防腐剂和抗氧化剂。

33.根据权利要求32所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为粘度调节剂：烷基纤维素衍生物，羟烷基纤维素衍生物，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，淀粉，黄原胶，瓜尔豆胶，聚丙烯酸和其盐，甲基丙烯酸酯的共聚物，聚环氧乙烷，聚环氧丙烷，甲壳质衍生物，淀粉，果胶，海藻酸，环糊精，琼脂，卡拉胶。

34.根据权利要求32所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为防腐剂：劳拉氯铵，苯扎氯铵，苯度氯铵，氯化十六烷基吡啶，溴化十六烷基三甲铵，度米芬，苯甲醇，氯丁醇，邻甲酚，氯甲酚，苯酚，苯乙醇、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯。

35.根据权利要求32所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为抗氧化剂，焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，硫酸钠，硫代硫酸钠，以及抗坏血酸。

36.根据权利要求31所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为401kDa到2500000Da的高分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

37.根据权利要求31所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为401kDa到2500000Da的高分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素组作为辅助性药物成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

38.基于两种活性物质稳定溶液的药物组合物，其特征在于所述两种活性物质稳定溶液包含低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐作为第一活性物质，所述酸或盐的分子量可以为100kDa到400kDa，包含地卡索辛和/或其水溶性盐作为第二活性物质，稳定剂，其为一种可溶于水并在水溶液中离解为金属阳离子和酸性残基阴离子的药学上可接受的盐，或者这些盐的混合物，所述稳定剂能够同时与透明质酸和/或其药学上可接受的盐以及与地卡索辛和/或其水溶性盐形成水溶性复合物，还包括至少一种药学上可接受的添加剂。

39.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含如下配比的组分，mg/ml：

40.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述稳定剂是一种无机酸，有机一元羧酸或二元羧酸的无毒或低毒的盐，或者所述盐的混合物。

41.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述稳定剂为氯化钠，琥珀酸钠，乳酸钠，氯化锌，硫酸锌，或它们的任意混合物。

42.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述低分子量透明质酸的药学上可接受的盐为透明质酸钠。

43.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种pH调节剂或缓冲液作为药学上可接受的添加剂。

44.根据权利要求43所述的药物组合物，其特征在于所述缓冲液包含磷酸盐缓冲液，或柠檬酸盐缓冲液，或醋酸盐缓冲液，或琥珀酸盐缓冲液，或Tris盐酸缓冲液，或马来酸盐缓冲液。

45.根据权利要求43所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含如下系列之一的物质作为pH调节剂，盐酸，硫酸，硝酸，磷酸，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，马来酸，富马酸，酒石酸，柠檬酸，抗坏血酸，醋酸铵，氨溶液，碱土金属氢氧化物，碱金属氢氧化物，碳酸钠，碳酸氢钠，以及磷酸钠。

46.根据权利要求43所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含琥珀酸钠作为稳定剂，以及包含琥珀酸作为pH调节剂。

47.根据权利要求43所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含乳酸钠作为稳定剂，以及包含乳酸作为pH调节剂。

48.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述组合物被用于抑制粘连过程。

49.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述组合物被用于保护器官防止粘连形成以及防止器官脱水，并同时具有抗炎作用。

50.根据权利要求38所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含至少一种有效的药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂用于将其由软剂型转变为液态剂型。

51.根据权利要求50所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为气雾剂，混悬剂，糖浆，滴剂，注射溶液，霜剂，凝胶，软膏，糊剂，搽剂，外用溶液，口服溶液。

52.根据权利要求50所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含选自如下系列的至少一种药物辅助性成分作为药学上可接受的添加剂：粘度调节剂，防腐剂和抗氧化剂。

53.根据权利要求52所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为粘度调节剂：烷基纤维素衍生物，羟烷基纤维素衍生物，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，淀粉，黄原胶，瓜尔豆胶，聚丙烯酸和其盐，甲基丙烯酸酯的共聚物，聚环氧乙烷，聚环氧丙烷，甲壳质衍生物，淀粉，果胶，海藻酸，环糊精，琼脂，以及卡拉胶。

54.根据权利要求52所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为防腐剂：劳拉氯铵，苯扎氯铵，苯度氯铵，氯化十六烷基吡啶，溴化十六烷基三甲铵，度米芬，苯甲醇，氯丁醇，邻甲酚，氯甲酚，苯酚，苯乙醇、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、对氨基苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯。

55.根据权利要求52所述的药物组合物，其特征在于所述组合物包含一种选自如下系列的物质作为抗氧化剂：焦亚硫酸钠，亚硫酸氢钠，亚硫酸钠，硫代硫酸钠，以及抗坏血酸。

56.根据权利要求51所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为100kDa到400kDa的低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：

57.根据权利要求51所述的药物组合物，其特征在于所述剂型为凝胶剂型，其包含分子量为100kDa到400kDa的低分子量透明质酸和/或其药学上可接受的盐，地卡索辛和/或其水溶性盐，乳酸钠，乳酸和水，以及包含甘油和羟丙基甲基纤维素作为药物辅助性成分，各组分按照以下配比，mg/ml：