CN106119150A - 一种除磷微生物菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种除磷微生物菌剂及其制备方法和应用,该微生物菌剂中包含假单胞菌和链霉菌,假单胞菌为假单胞菌W12,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.12460,保藏日期为2016年5月17日;链霉菌为链霉菌GS14,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7095,保藏日期为2013年1月8日。该微生物菌剂通过将活化的假单胞菌或链霉菌发酵培养后混合制备得到。该除磷微生物菌剂用于强化生活污水的生物除磷。本发明提供了两种新的除磷微生物菌:假单胞菌W12和链霉菌GS14;本发明的除磷微生物菌剂应用于生活污水的处理中,不仅能够去除污水中总磷的含量;而且对总氮也具有良好的去除效果。
Description
技术领域
本发明属于生活污水处理的技术领域,具体涉及一种除磷微生物菌剂及其制备方法和应用。
背景技术
我国广大农村地区,由于使用含磷洗涤剂,致使生活污水含磷量长期超标。未经专业处理的污水排入江河湖泊,从点源扩大到面源,严重地破坏了水体,不仅影响生态景观,而且增加了饮用水的处理成本,并对那些饮用水源不达标的地区,直接损害人的健康。因此,寻求有效地去除污水中磷是十分迫切的。
污水除磷,主要有化学法和生物法,或者二者组合工艺。化学法除磷虽然效率较高,但所产生的污泥由于伴随的絮凝剂存在造成二次污染,处理成本相对昂贵;传统的生物处理工艺操作简单,但磷去除效率较低,难以满足出水要求。
发明内容
为解决现有技术中化学法除磷和传统的生物法除磷中存在的问题,本发明提供了一种除磷微生物菌剂及其制备方法和应用。
本发明提供了一种除磷微生物菌剂,所述微生物菌剂中包含假单胞菌和链霉菌。假单胞菌为假单胞菌W12,分类命名为Pseudomonas sp.,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCC No.12460,保藏日期为2016年5月17日。链霉菌为链霉菌GS14,分类命名为Streptomyces sp.,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCCNo.7095,保藏日期为2013年1月8日。
进一步的,所述菌剂中假单胞菌和链霉菌的菌体数量比为1-3:1-3。
本发明还提供了一种除磷微生物菌剂的制备方法,该方法包括以下步骤:
(1)分别挑取假单胞菌和链霉菌的分离菌株至菌种保藏培养基,划线培养后,挑取单菌落至菌种活化培养基中,振荡培养后,得到活化培养物;
(2)将假单胞菌和链霉菌的活化培养物分别接种到种子培养基中,通气培养后,得到液体种子;
(3)将假单胞菌和链霉菌的液体种子分别接种到发酵培养基中,通气培养后,得到活菌体培养物;
(4)将假单胞菌和链霉菌的活菌体培养物混合均匀后,得到所述除磷微生物菌剂。
进一步的,步骤(1)中,在28-32℃,150-200r/min摇床振荡培养22-25h,得到活化培养物。
进一步的,步骤(2)中,假单胞菌和链霉菌的活化培养物的接种量均为5-10%,在28-33℃,通气培养18-24h。
进一步的,步骤(3)中,假单胞菌和链霉菌的液体种子的接种量均为5-10%,在28-33℃,通气培养15-30h。
进一步的,步骤(2)中,假单胞菌和链霉菌的活菌体培养物以菌体数量比1-3:1-3混合均匀。
本发明又提供了一种除磷微生物菌剂的应用,所述除磷微生物菌剂用于强化生活污水的生物除磷。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:(1)提供了两种新的除磷微生物菌株:假单胞菌W12和链霉菌GS14;(2)本发明微生物菌剂中包含假单胞菌和链霉菌,该除磷微生物菌剂应用于生活污水处理中,不仅能够去除污水中总磷的含量;而且对总氮也具有良好的去除效果。本发明也是首次将假单胞菌与链霉菌组合用于污水除磷。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行详细的解释说明。
本发明所提供的除磷微生物菌株,一株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)W12是一株高效脱氮聚磷细菌,是从河道水体中分离获得,保藏于中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCCNo.12460;另一株为链霉菌(Streptomyces sp.)GS14,是从污水处理厂的活性污泥中分离获得,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号为:CGMCC No.7095;保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。
本发明的除磷微生物菌剂中包含假单胞菌和链霉菌,该假单胞菌为假单胞菌W12,该链霉菌为链霉菌GS14。该除磷微生物菌剂的制备方法包括以下步骤:
(1)培养基配制:
菌种保藏培养基(固体,1L):蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠5g、琼脂20g,加水至1L,pH 7.2。
菌种活化培养基(液体,1L):蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠5g,加水至1L,pH 7.2。
种子培养基(液体,10L):MgSO4 1.0g、KH2PO4 5.0g、NaC1 5.0g、K2HPO4 15.0g、蔗糖100g、蛋白胨50g,加水至10L,pH 7.2。
发酵培养基(液体,200L):MgSO4 20g、KH2PO4 100g、NaC1 100g、K2HPO4 300g、糖蜜12kg、(NH4)2SO4 0.8kg,加水至200L,pH 7.2。
以上培养基均在121℃灭菌10-20min。
(2)菌种活化:分别挑取假单胞菌和链霉菌的分离菌株至菌种保藏培养基中,30℃连续划线、挑单菌落培养两次后,挑取单菌落在菌种活化培养基中,在28-32℃、150-200r/min摇床振荡培养22-25h,得到活化培养物。
(3)液体种子液的制备:向装有高温灭菌的种子培养基的发酵罐中,按照5-10%的接种量分别接种假单胞菌和链霉菌的活化培养物,在30-37℃,通气培养18-24h,得到液体种子。
(4)液态发酵:向装有高温灭菌的发酵培养基中,按照5-10%的接种量分别接种假单胞菌和链霉菌的液体种子,在28-33℃,通气培养15-30h,得到活菌体培养物。
(5)菌剂制备:将步骤(4)培养好的活菌培养物按照体积比1:1混合均匀,加入甘氨酸(质量分数0.3%-2%)和甘油(质量分数0.5%-5%),灌装保藏。
该除磷微生物菌剂应用于生活污水的生物除磷。向污水处理系统中的好氧池中批次添加体积分数为0.05%-0.5%的上述除磷微生物菌剂,污水处理系统保持正常运行。
实施例1
污水来源:小区生活污水
除磷微生物中包含:假单胞菌W12、链霉菌GS14(二者等量加入到废水中,接种量:v/v,1/150,菌液/废水)
选取北京某小区生活污水,三个重复,每个重复各10L,加入除磷微生物菌剂,4天后测试其中的总磷去除率。结果如下:
实施例2
污水来源:京郊农村污水
除磷微生物中包含:假单胞菌W12、链霉菌GS14(二者等量加入到废水中,接种量:v/v,1/150,菌液/废水)
选取北京某京郊农村污水,三个重复,每个重复各10L,加入除磷微生物菌剂,4天后测试其中的总磷去除率。结果如下:
除磷微生物菌剂对所处理的农村污水的总磷和总氮均具有很好的去除率,分别达到56%和59%。
实施例3:村庄生活污水MBR工艺中的生物强化除磷
在北京市怀柔区某村庄生活污水膜生物反应器(MBR)处理系统中添加菌剂,按照生化池污水量的0.1%添加本发明的除磷菌剂,每3天补加1次,补加3次后,出水中总磷去除率显著提高。结果如下:
实施例4:曝气生物滤池工艺中的生物强化除磷
选取北京市怀柔区某村庄生活污水曝气生物滤池处理系统中添加菌剂,按照生化池污水量的0.15%添加本发明的除磷菌剂,每2天补加1次,补加3次后,出水中总磷去除率显著提高。结果如下:
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明实质内容上所作的任何修改、等同替换和简单改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种除磷微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂中包含假单胞菌和链霉菌,其中,假单胞菌为假单胞菌W12,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.12460,保藏日期为2016年5月17日;链霉菌为链霉菌GS14,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.7095,保藏日期为2013年1月8日。
2.根据权利要求1所述的除磷微生物菌剂,其特征在于,所述菌剂中假单胞菌和链霉菌的菌体数量比为1-3:1-3。
3.一种制备权利要求1所述的除磷微生物菌剂的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)分别挑取假单胞菌和链霉菌的分离菌株至菌种保藏培养基,划线培养后,挑取单菌落至菌种活化培养基中,振荡培养后,得到活化培养物;
(2)将假单胞菌和链霉菌的活化培养物分别接种到种子培养基中,通气培养后,得到液体种子;
(3)将假单胞菌和链霉菌的液体种子分别接种到发酵培养基中,通气培养后,得到活菌体培养物;
(4)将假单胞菌和链霉菌的活菌体培养物混合均匀后,得到所述除磷微生物菌剂。
4.根据权利要求3所述的除磷微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,在28-32℃,150-200r/min摇床振荡培养22-25h,得到活化培养物。
5.根据权利要求3所述的除磷微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,假单胞菌和链霉菌的活化培养物的接种量均为5-10%,在28-33℃,通气培养18-24h。
6.根据权利要求3所述的除磷微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,假单胞菌和链霉菌的液体种子的接种量均为5-10%,在28-33℃,通气培养15-30h。
7.根据权利要求3所述的除磷微生物菌剂的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,假单胞菌和链霉菌的活菌体培养物以菌体数量比1-3:1-3混合均匀。
8.权利要求1-2任一项所述的除磷微生物菌剂的应用,所述除磷微生物菌剂用于强化生活污水的生物除磷。
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