CN105891133A - 测定乳制品中磷含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法。所述测定乳制品中磷含量的前处理方法包括：将装有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中进行消解处理，得到消解产物。本发明的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中磷含量。

Description

测定乳制品中磷含量的方法

技术领域

本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及测定乳制品中磷含量的方法。更具体地，本发明涉及测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法。

背景技术

磷是乳品中的主要营养成分之一，准确快速测定乳制品中磷含量对保证产品质量是非常重要的。

然而，目前测定乳制品中磷含量的方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供一种测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法能够准确测定乳制品中磷含量。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

目前，通常测定乳及乳制品中磷含量的方法为：在乳制品中添加硝酸-高氯酸并在电热板上直接加热消解，待消解液为3-5ml时冷却定容，吸取一定体积测定液，通过指示剂变化调节酸碱度，加显色剂并用分光光度计测定吸光值后计算磷含量。然而，在实际检测中，电热板加热消解乳制品是在一个较开放的空间内消解，容易带入干扰物质，进而影响检测结果。而且高氯酸加热分解产生二氧化氯、氯气等对环境产生污染，同时在消解后期实验产生的白烟如遇有机物极易产生威力强大的爆炸现象，而且实验消解耗时长，消解过程极易将周围环境中干扰元素带入。

有鉴于此，本发明的发明人经过大量实验发现，将装有乳制品和酸溶液的微波消解管在烘箱中进行消解处理，并利用分光光度法对消解产物进行检测，进而确定乳制品中磷含量。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法能够准确测定乳制品中磷含量。

为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种测定乳制品中磷含量的前处理方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将装有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中进行消解处理，得到消解产物。发明人经过大量实验发现，将乳制品与酸溶液置于微波消解管中进行消解反应，为反应提供了一个封闭环境，防止引入干扰物质而影响检测结果。此外，发明人意外地发现，将微波消解管置于烘箱中加热消解，加热过程中不会产生干扰物质，而将微波消解管置于微波消解仪中进行加热消解过程中，会产生干扰物质，需要向待反应混合物中加入屏蔽干扰的物质，例如氧化镧。但是，额外引入屏蔽干扰的物质会使检测结果偏高。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

根据本发明的实施例，上述测定乳制品中磷含量的前处理方法还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，所述消解处理是在160摄氏度下进行6～8小时。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

根据本发明的实施例，所述酸溶液为硝酸。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

根据本发明的实施例，所述微波消解管中装有所述乳制品、酸溶液及双氧水。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

根据本发明的实施例，基于0.5克所述乳制品，所述硝酸的体积为8毫升，所述双氧水的体积为2毫升。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

在本发明的第二方面，本发明提出了一种测定乳制品中磷含量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：利用前面所描述的测定乳制品中磷含量的前处理方法得到消解产物；将所述消解产物与显色剂进行反应，得到待测物；以及利用分光光度法对所述待测物进行检测，并基于检测结果确定所述乳制品中磷含量。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

在本发明的第三方面，本发明提出了一种测定乳制品中磷含量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)样品组：称取乳制品样品0.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；(2)空白组：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；(3)分别吸取0ml、2.5ml、5.0ml、7.5ml、10ml和15ml磷的标准储备液(10μg/ml)到50ml容量瓶中，在每个容量瓶中加入10ml钒钼酸铵试剂，用水定容至刻度，常温下静置15分钟后用1cm比色皿在440nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以磷的梯度浓度为横坐标，绘制标准曲线；(4)分别将样品组和空白组的消化液进行下列处理：将消化液转移至容量瓶中并定容至50ml(V)，吸取10ml(V₁)消化液于50ml容量瓶中，加10mL钒钼酸铵试剂，混合均匀，在25～30摄氏度下显色15分钟，加水定容至50mL(V₂)，得到待测空白液和待测试样液；(5)在440nm波长下，以待测空白液调零，然后测定待测试样液的吸光度，从标准曲线上查到吸光度对应的磷浓度(c)，并按照下列公式计算磷含量，

$X=\frac{c\×V\×V_2}{m\×V_1\×1000}\×100$

式中：

X----样品中磷的含量mg/100g；C------从标准曲线中查的试样溶液中磷的浓度μg/ml；V-----样品组消化后定容体积ml；V₁-----从样品组消化后定容体积中吸取的体积ml；V₂----测定吸光值时容量瓶体积ml；m-----样品组质量g。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

本发明提出了测定乳制品中磷含量的前处理方法及测定乳制品中磷含量的方法，下面将分别对其进行详细描述。

测定乳制品中磷含量的前处理方法

在本发明的第一方面，本发明提出了一种测定乳制品中磷含量的前处理方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将装有乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中进行消解处理，得到消解产物。消解处理的目的是使样品在酸溶液并在加热条件下破坏样品中的有机物或还原性物质。发明人经过大量实验发现，将乳制品与酸溶液置于微波消解管中进行消解反应，为反应提供了一个封闭环境，防止引入干扰物质而影响检测结果。此外，发明人意外地发现，将微波消解管置于烘箱中加热消解，加热过程中不会产生干扰物质，而将微波消解管置于微波消解仪中进行加热消解过程中，会产生干扰物质，需要向待反应混合物中加入屏蔽干扰的物质，例如氧化镧。但是，额外引入屏蔽干扰的物质会使检测结果偏高。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

根据本发明的实施例，消解处理是在160摄氏度下进行6～8小时。发明人经过大量实验优化上述最优消解处理条件，温度过低或时间过短，消解处理不充分，导致检测结果偏低。

根据本发明的实施例，酸溶液为硝酸。发明人经过大量实验筛选到以硝酸作为酸溶液进行消解处理，检测结果的准确性较高，且较安全。其他酸性溶液不宜使用，例如硫酸和高氯酸，使用过程容易造成危险。

根据本发明的实施例，微波消解管中装有乳制品、酸溶液及双氧水。双氧水的添加起到催化剂作用，使消解速度加快，消解时间缩短。根据本发明的一个优选实施例，微波消解管中装有0.5～1克乳制品、5～10毫升酸溶液及1～5毫升双氧水。发明人经过大量实验优化得到上述最优添加量。由于反应是在密闭环境下进行的，若乳制品的添加量过多，反应产生的气体越多，压力较大。若反应很激烈，较快地产生气体，使压力瞬间增大，就有引起爆炸的危险。

根据本发明的一个更优选实施例，基于0.5克乳制品，硝酸的体积为8毫升，双氧水的体积为2毫升。发明人经过大量实验优化得到上述最优添加量之比。若硝酸和双氧水的添加量过多，无过多的样品与之反应，造成了试剂的浪费。若硝酸和双氧水的添加量过少，将导致部分样品无法完成消解，进而导致检测结果偏低。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的前处理方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

测定乳制品中磷含量的方法

在本发明的第二方面，本发明提出了一种测定乳制品中磷含量的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：利用前面所描述的测定乳制品中磷含量的前处理方法得到消解产物；将消解产物与显色剂进行反应，得到待测物；以及利用分光光度法对待测物进行检测，并基于检测结果确定乳制品中磷含量。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

本领域技术人员能够理解的是，前面针对测定乳制品中磷含量的前处理方法所描述的特征和优点同样适用于该测定乳制品中磷含量的方法，在此不再赘述。

另外，本发明提出了另一种测定乳制品中磷含量的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1)样品组：称取乳制品样品0.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；(2)空白组：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；(3)分别吸取0ml、2.5ml、5.0ml、7.5ml、10ml和15ml磷的标准储备液(10μg/ml)到50ml容量瓶中，在每个容量瓶中加入10ml钒钼酸铵试剂，用水定容至刻度，常温下静置15分钟后用1cm比色皿在440nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以磷的梯度浓度为横坐标，绘制标准曲线；(4)分别将样品组和空白组的消化液进行下列处理：将消化液转移至容量瓶中并定容至50ml(V)，吸取10ml(V₁)消化液于50ml容量瓶中，加10mL钒钼酸铵试剂，混合均匀，在25～30摄氏度下显色15分钟，加水定容至50mL(V₂)，得到待测空白液和待测试样液；(5)在440nm波长下，以待测空白液调零，然后测定待测试样液的吸光度，从标准曲线上查到吸光度对应的磷浓度(c)，并按照下列公式计算磷含量，

$X=\frac{c\×V\×V_2}{m\×V_1\×1000}\×100,$

式中：

X----样品中磷的含量mg/100g；C------从标准曲线中查的试样溶液中磷的浓度μg/ml；V-----样品组消化后定容体积ml；V₁-----从样品组消化后定容体积中吸取的体积ml；V₂----测定吸光值时容量瓶体积ml；m-----样品组质量g。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中磷含量的方法能够准确地测定乳制品中的磷含量。

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

钒钼酸铵试剂：

A液：25g钼酸铵[(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O)]，溶于400mL水中。

B液：1.25g偏钒酸铵(NH₄VO₃)溶于300mL沸水中，冷却后加250mL硝酸，将A液缓缓倾入B液中，不断搅匀，并用水稀释至1L，贮于棕色瓶中。

实施例1

在该实施例中，按照下列方法测定乳制品中磷含量：

(1)样品组：称取乳样0.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；

(2)空白组：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；

(3)分别吸取0ml、2.5ml、5.0ml、7.5ml、10ml和15ml磷的标准储备液(10μg/ml)到50ml容量瓶中，在每个容量瓶中加入10ml钒钼酸铵试剂，用水定容至刻度，常温下静置15分钟后用1cm比色皿在440nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以磷的梯度浓度为横坐标，绘制标准曲线；

(4)分别将样品组和空白组的消化液进行下列处理：

将消化液转移至容量瓶中并定容至50ml(V)，吸取10ml(V₁)消化液于50ml容量瓶中，加10mL钒钼酸铵试剂，混合均匀，在25～30摄氏度下显色15分钟，加水定容至50mL(V₂)，得到待测空白液和待测试样液；

(5)在440nm波长下，以待测空白液调零。然后测定待测试样液的吸光度，从标准曲线上查到吸光度对应的磷浓度(c)，并按照下列公式计算磷含量，

$X=\frac{c\×V\×V_2}{m\×V_1\×1000}\×100$

式中：

X----样品中磷的含量mg/100g；

C------从标准曲线中查的试样溶液中磷的浓度μg/ml；

V-----样品组消化后定容体积ml；

V₁-----从样品组消化后定容体积中吸取的体积ml；

V₂----测定吸光值时容量瓶体积ml；

m-----样品组质量g。

对比例1

在该对比例中，按照国标GB5413.22-2010的方法测定乳制品中磷含量，检测结果如表1所示。

表1国标方法和本发明测定磷含量的方法比较

国标中要求在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5％，实施例1与对比例1的方法测得结果相对偏差均在国标要求范围内，但是实施例1的测定结果均高于对比例1的测定值，原因主要是国标测定时消解是在开放的条件下进行，测定元素会随消解蒸汽挥发损失一部分，从而导致检测结果偏低。

对比例2

在该对比例中，按照实施例1的方法测定乳制品中磷含量，区别在于，将烘箱替换成微波消解仪，即将待消解物在微波消解仪中进行消解反应。

表2测定磷含量的方法比较

由上表比对可知，实施例2与对比例2的方法测得结果相对偏差有超出国标要求范围内，实施例2测定结果均高于对比例2测定结果。

实施例2可重复性

按照实施例1的方法测定不同乳制品及各乳制品的平行样进行检测，结果如下表所示。可以看出，平行样之间的相对偏差在国标要求范围内，可重复性较好。

表2可重复性检测

实施例3

在该实施中，按照下列方法测定回收率：

(1)将乳制品与磷标准品溶液进行混合，得到加标样品；

(2)分别测定加标样品及乳制品中的磷含量，并按照公式(回收率％＝(加标样品中磷含量-乳制品中磷含量)×称样量/(磷标准品溶液中磷含量×磷标准品溶液体积))计算得到回收率。

依据GB/T27404-2008中被测组分含量＞100mg/kg时回收率范围95％-105％，由下表可知，本发明的方法测得回收率均在国标要求范围内。

表3回收率

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (6)

1.一种测定乳制品中磷含量的方法，其特征在于，包括：

(1)样品组：称取乳制品样品0.5g(m)于微波消解管，再加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；

(2)空白组：向微波消解管中加入8ml硝酸及2ml双氧水，加盖后置于160℃恒温烘箱内，保温6h，得到消化液；

(3)分别吸取0ml、2.5ml、5.0ml、7.5ml、10ml和15ml磷的标准储备液(10μg/ml)到50ml容量瓶中，在每个容量瓶中加入10ml钒钼酸铵试剂，用水定容至刻度，常温下静置15分钟后用1cm比色皿在440nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以磷的梯度浓度为横坐标，绘制标准曲线；

(4)分别将样品组和空白组的消化液进行下列处理：

将消化液转移至容量瓶中并定容至50ml(V)，吸取10ml(V₁)消化液于50ml容量瓶中，加10mL钒钼酸铵试剂，混合均匀，在25～30摄氏度下显色15分钟，加水定容至50mL(V₂)，得到待测空白液和待测试样液；

(5)在440nm波长下，以待测空白液调零，然后测定待测试样液的吸光度，从标准曲线上查到吸光度对应的磷浓度(c)，并按照下列公式计算磷含量，

$X=\frac{c\×V\×V_2}{m\×V_1\×100}\×100,$

式中：

X----样品中磷的含量mg/100g；

C------从标准曲线中查的试样溶液中磷的浓度μg/ml；

V-----样品组消化后定容体积ml；

V₁-----从样品组消化后定容体积中吸取的体积ml；

V₂----测定吸光值时容量瓶体积ml；

m-----样品组质量g。

2.一种测定乳制品中磷含量的前处理方法，其特征在于，包括：

将装有所述乳制品和酸溶液的微波消解管置于烘箱中进行消解处理，得到消解产物。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述消解处理是在160摄氏度下进行6～8小时。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述酸溶液为硝酸。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，

所述微波消解管中装有所述乳制品、酸溶液及双氧水，

优选地，

所述微波消解管中装有0.5～1克所述乳制品、5～10毫升所述酸溶液及1～5毫升所述双氧水，

更优选地，

基于0.5克所述乳制品，所述硝酸的体积为8毫升，所述双氧水的体积为2毫升。

6.一种测定乳制品中磷含量的方法，其特征在于，包括：

利用权利要求2～5任一项所述测定乳制品中磷含量的前处理方法得到消解产物；

将所述消解产物与显色剂进行反应，得到待测物；以及

利用分光光度法对所述待测物进行检测，并基于检测结果确定所述乳制品中磷含量。