CN105749308A - 一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及食用菌工厂化栽培技术领域。更具体地说,本发明公开了一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,包括以下步骤:在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1?2:20的比例混合后,摇匀并密封,即可起到杀灭杂菌的理想效果。与传统高温高压灭菌法相比,不仅节省了水电、时间成本,而且还降低了传统方法所带来的危险性。此外,与已报道的强酸电解水灭菌相比,此方法在杀灭杂菌同时并不抑制食用菌菌种本身的生长,提高了菌种接种效率,同时避免强酸水所含高浓度有效氯产生的刺鼻气味对车间工作人员身体健康造成不利影响。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌工厂化栽培技术领域。更具体地说,本发明涉及一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法。
背景技术
用菌因其味道鲜美、营养丰富,受到广大消费者喜爱,市场需求量也逐年呈快速上升趋势。食用菌栽培也逐渐从传统的家庭式农户栽培提升为大型工厂化栽培。食用菌工厂化栽培不仅显著提高了食用菌生产量,更具有人员操作规范化、流程标准化特点,很大程度避免因灭菌不彻底引起菌种污染并造成巨大的经济损失。目前食用菌栽培过程中,灭菌主要采用高温高压蒸汽设备,包括升温(121~126℃)、升压(0.14~0.15MPa)、灭菌30min、降温降压等步骤,整个灭菌时间长达1.0~1.5h。
微酸电解水是将低浓度电解质溶液(氯化钠溶液、稀盐酸溶液或两者混合)通过低压电解方式制成,具有pH5~6.5,有效氯浓度10~30ppm,氯离子浓度低,具有杀菌效果等显著特征。微酸电解水与强酸电解水(pH2~3)相比同样具有良好杀菌效果,但避免了强酸电解水酸度过低、有效氯浓度过高(80~150ppm)而产生腐蚀设备和带来刺鼻气味的缺陷。迄今为止,微酸电解水已经广泛应用在水产肉类保鲜,鲜切果蔬保鲜等领域。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其能够保证在灭菌彻底的前提下,较现有高温高压灭菌方法极大降低食用菌工厂化栽培灭菌环节的时间、人力和物力成本。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:
在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1-2:20的比例混合后,摇匀并密封。
优选的是,其中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养金针菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:20的比例混合后,摇匀并密封。
优选的是,其中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养平菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为3:40的比例混合后,摇匀并密封。
优选的是,其中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养香菇菌种,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:10的比例混合后,摇匀并密封。
优选的是,其中,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
优选的是,其中,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的。
优选的是,其中,微酸电解水在食用菌菌种液体培养基灭菌中的应用。
优选的是,其中,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
本发明至少包括以下有益效果:
本发明方法只需直接将一定量微酸电解水加入含食用菌菌种的液体培养基中,即可起到杀灭杂菌的理想效果。与传统高温高压灭菌法相比,不仅节省了水电、时间成本,而且还降低了传统方法所带来的危险性;
此外,与已报道的强酸电解水灭菌方法相比,本发明方法提供了合适的微酸电解水与不同食用菌培养基的应用比例,使得在杀灭杂菌同时并不抑制食用菌菌种本身的生长,提高了菌种接种效率,同时避免强酸水所含高浓度有效氯产生的刺鼻气味对车间工作人员身体健康造成不利影响。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
应当理解,本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
本发明提供了一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:
在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1-2:20的比例混合后,摇匀并密封。
一个优选方案中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养金针菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:20的比例混合后,摇匀并密封。
一个优选方案中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养平菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为3:40的比例混合后,摇匀并密封。
一个优选方案中,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养香菇菌种,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:10的比例混合后,摇匀并密封。
一个优选方案中,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
一个优选方案中,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的。
一个优选方案中,微酸电解水在食用菌菌种液体培养基灭菌中的应用。
一个优选方案中,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
下面,应用本发明方法对不同食用菌菌种液体培养基进行实际灭菌操作并抽检:
实施例1.
将配置好的金针菇菌种液体培养基按照200ml/瓶分装于500ml玻璃锥形瓶中。在无菌超净台用移液枪吸取10ml微酸电解水(pH 6.4,ACC 20.93ppm)依次注入上述锥形瓶中,摇匀,封口,即完成金针菇液体培养基的灭菌工作。
抽检上述已灭菌培养基的灭菌效果:随机抽取上述已灭菌培养基5瓶,连续稀释三个浓度,每个浓度梯度吸取1ml均匀涂布于PDA培养基,每个梯度做三个平行,置于26℃培养箱培养7d。观察结果显示,平板中并无菌落生长。
考察微酸电解水对金针菇菌丝生产的影响:将金针菇菌种分别接种于采用传统高温高压灭菌方法和本发明所述灭菌方法的菌种液体培养基中,在恒温振荡培养箱中培养8d,并定期测量菌丝体干重,监测金针菇菌丝体生长情况。检测结果见表1,结果显示微酸电解水并未对金针菇菌丝体造成抑制生长,且优于传统灭菌法。
表1.两种灭菌方法对金针菇菌丝体干重的影响
实施例2.
平菇菌种液体培养基按照200ml/瓶分装于500ml锥形瓶中。在无菌超净台用移液枪吸取15ml微酸电解水(pH 6.2,ACC 18.26ppm)依次注入上述锥形瓶中,摇匀,接入平菇母菌种,在恒温振荡培养箱培养7d。待培养结束后,用移液枪将菌种液体培养液注入固体培养基,置于栽培室培养平菇子实体。经抽检,全程无染菌现象发生。
实施例3.
黑木耳菌种液体培养基按照200ml/瓶分装于500ml锥形瓶中。在无菌超净台用移液枪吸取18ml微酸电解水(pH 5.5,ACC 15ppm)依次注入上述锥形瓶中,摇匀,接入平菇母菌种,在恒温振荡培养箱培养7d。待培养结束后,用移液枪将菌种液体培养液注入固体培养基,置于栽培室培养平菇子实体。经抽检,全程无染菌现象发生。
实施例4.
香菇菌种液体培养基按照200ml/瓶分装于500ml锥形瓶中。在无菌超净台用移液枪吸取20ml微酸电解水(pH 5,ACC 10ppm)依次注入上述锥形瓶中,摇匀,接入平菇母菌种,在恒温振荡培养箱培养7d。待培养结束后,用移液枪将菌种液体培养液注入固体培养基,置于栽培室培养平菇子实体。经抽检,全程无染菌现象发生。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (8)
1.一种食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:
在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1-2:20的比例混合后,摇匀并密封。
2.如权利要求1所述的食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养金针菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:20的比例混合后,摇匀并密封。
3.如权利要求1所述的食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养平菇菌种时,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为3:40的比例混合后,摇匀并密封。
4.如权利要求1所述的食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,包括以下步骤:当食用菌菌种液体培养基用于培养香菇菌种,在无菌环境下,将微酸电解水与食用菌菌种液体培养基按体积比为1:10的比例混合后,摇匀并密封。
5.如权利要求1所述的食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
6.如权利要求1所述的食用菌菌种液体培养基的灭菌方法,其特征在于,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的。
7.微酸电解水在食用菌菌种液体培养基灭菌中的应用。
8.如权利要求7所述的微酸电解水在食用菌菌种液体培养基灭菌中的应用,其特征在于,所述微酸电解水为将体积密度为1%的稀盐酸或者体积密度为1%的氯化钠溶液经电场电解而产生的,所述微酸电解水的pH为5.0~6.5,有效氯浓度为10~30ppm。
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