CN105594767B - 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法 - Google Patents

一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105594767B
CN105594767B CN201610128083.1A CN201610128083A CN105594767B CN 105594767 B CN105594767 B CN 105594767B CN 201610128083 A CN201610128083 A CN 201610128083A CN 105594767 B CN105594767 B CN 105594767B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
bacterium solution
bacterium
herbicide
streptomyces
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610128083.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105594767A (zh
Inventor
王禹博
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Liaoning Hei Bio Technology Co., Ltd.
Original Assignee
ANSHAN HERUI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ANSHAN HERUI BIOTECHNOLOGY Co Ltd filed Critical ANSHAN HERUI BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201610128083.1A priority Critical patent/CN105594767B/zh
Publication of CN105594767A publication Critical patent/CN105594767A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105594767B publication Critical patent/CN105594767B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/40—Liliopsida [monocotyledons]
    • A01N65/42—Aloeaceae [Aloe family] or Liliaceae [Lily family], e.g. aloe, veratrum, onion, garlic or chives

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：药用植物：狼毒5～25份、孜然5～25份、大蒜5～25份、独活5～25份、蛇床子5～25份，复合菌剂：淡紫灰链霉菌的菌液5～20份、弗氏链霉菌的菌液5～20份、绿色链霉菌的菌液5～20份、浅灰链霉菌的菌液5～20份、链格菌的菌液5～20份、灰葡萄孢菌的菌液5～20份及弯孢菌的菌液5～20份。它是一种高效、低毒、对环境友好，不易产生抗性的生物多控除草剂,尤其对水田中的水稗草、莎草、千金子、和浮萍杀抑效果显著。

Description

一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物农药技术领域，特别是用于水田的一种液态复合生物多控除草剂及其制备方法。
背景技术
水田杂草是在水稻特定的生长环境中，直接或间接干扰水稻生产的植物。它对水稻生产造成的危害主要表现在与水稻争光、争营养造成减产,杂草种子与稻谷混杂，可降低稻谷质量、传播病虫害、妨碍农事操作、增加生产费用和劳动力成本。防除方法有栽培防除、耕作防除、生物防除和化学防除。在过去的一个多世纪以来，化学防除所用的化学除草剂已经有效地用于水田杂草的控制中。然而，由于化学除草剂的大量应用，许多严重的问题诸如土壤和水质的下降，除草剂的残留，水源污染，以及抗或耐性杂草的出现等问题日趋严重，尤其生产有机水稻不能使用化学除草剂。随着全球环保意识的提高，具有高效除草活性和环境安全性的生物除草剂的研究备受科研工作者的青睐，而且世界各国正在大力提倡“绿色农业”、“生态农业”，由于绿色农业在防治病虫草害中不用高度农药或少用化学农药，有机农业不用化学农药，因此，加强生物除草剂的研究与开发是可持续农业发展的需要。尤其随着近年来人民群众环保意识的提高、对食品安全和低碳生活的关注，国家对农业可持续发展和积极构建生态农业文明的要求，降低化学除草剂使用的呼声日益高涨。
生物除草剂在产品形式和应用技术上与化学除草剂有类似之处，主要区别是生物除草剂大多都是活的生物产品或具有除草活性的微生物代谢产物、天然植物提取液。目前生物除草剂多是利用真菌，而利用放线菌产生的抗生物质防除杂草的成功事例较少，尤其是利用真菌、放线菌及天然植物提取物复配的生物除草剂，目前国内还极少有研究和应用的报道。
利用真菌发展的生物除草剂也称为真菌除草剂，真菌除草剂的应用基于植物病理学的流行病学原理，是以病原菌为手段使杂草感染病害而抑制杂草生长，达到控制杂草的目的。利用病害防治杂草的历史最早可以追溯到17世纪，当时美国、澳大利亚和欧洲利用分胞柄锈菌防治小麦田中的主要杂草灯芯粉苞苣取得了成功。我国在1963年，山东农业科学院植保所开发研制了“鲁保一号”，有效成分为胶孢炭疽菌菟丝子专化型，用于防除大豆菟丝子；陈勇等人已经筛选出对水稗草致病性强、对水稻安全的尖角突脐孢菌；1999年，黄世文等从稻田自然感病的稗草标样中，分离得到稗草生防菌株99-10。
将放线菌在发酵过程中所产生的，具有抑制某些杂草的生物活性的次生代谢产物，加工成可以直接使用的形态，这就是农用抗生素除草剂。迄今为止，开发最成功的除草抗生素是日本明治制果公司于1980年利用吸水链霉菌(Streptomuces hygroscopicus)开发的除草农用抗生素双丙氨膦。用于非耕地和果园茎叶，处理防除一年生和多年生的禾本科杂草和阔叶杂草。我国1994年，王世梅等分离得到的一株链霉菌株，其发酵产物对水稗草、狗尾草及马唐有毒杀活性；1998年，黄世文分离得到一株淡紫灰吸水链霉菌，其发酵液对水稗草有抑制作用。
植物作为活性物质的自然宝库，分泌的代谢活性物质多达40万种。我国地域辽阔，自然资源丰富，为生物源除草剂的研究提供了便利条件。当前，自然界已发掘出30多个科的植物多达百种拥有除草作用的自然产物，利用植物中活性物质开发天然除草剂，通过植物间异株克生作用控制杂草已受到人们的广泛关注。
目前,有关生物除草剂类的专利文献有：CN201010199842公开了一种生物除草复配剂及其制备方法，它是采用分生孢子与化学除草剂复配，一方面减少了孢子的用量，降低了使用生物防治成本，而且与单用孢子比，复配中化学除草剂起到了增效作用,另一方面降低了化学除草剂的污染；CN201310367156.9公开了一种复配生物除草剂及其使用方法，为生物除草剂和有机酸复配应用技术,它采用复配生物除草剂与有机酸的复配比例，相容性好，有机酸对生物除草剂均具有增效作用，且环境友好；CN200610155473.4公开了一种生物除草剂及其制备方法，属于利用微生物防除农田杂草的技术领域，该除草剂以弯孢霉(Curvularia Boedijn)Mds0404菌株CGMCCNO.1827为菌种，以防除马唐为主，兼除狗尾草、稗草、牛筋草等杂草，具有对农作物安全，尤其是对单子叶作物安全，具有适应性广，成本低廉，无污染等特点；CN201410411913.2公开了一种含壬酸的生物源增效复配除草剂及其制备方法，制得的该生物源增效复配除草剂以桉叶油和壬酸为主要活性成分，加入助剂复配而成，制剂形态是乳油剂、微乳剂和水乳剂，它对禾本科杂草和阔叶杂草有较高的田间防除效果，在有机作物上具有极大应用推广价值，是新型的生物源除草剂产品；CN200810204211.1公开了一种生物源除草剂及其制备方法与应用。该除草剂的有效成分为壬酸，源于动植物中，如动物脂肪、柏、野漆树、天竹葵、油茶籽、油菜籽等，具有速效性和广谱性，可有效防除各种阔叶杂草和禾本科杂草。
尽管如此，仍需要研制更高效、低毒、对环境友好，不易产生抗性的新型生物除草剂。
发明内容
本发明的目的是提供一种液态复合生物多控水田除草剂。
本发明的另一个目的是提供一种液态复合生物多控水田除草剂的制备方法。
本发明使用的复合微生物菌剂是中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC 2012年版的菌种目录中公开的菌种，编号和菌株名是：
菌种编号为CGMCC4.0201的淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulaesubsp.lavendulae)，菌种编号为CGMCC4.0420的弗氏链霉菌(Streptomycesroseoflavus)，菌种编号为CGMCC4.0448的绿色链霉菌(Streptomyces viridis)，菌种编号为CGMCC4.1391的浅灰链霉菌(Streptomyces griseolus)，菌种编号为CGMCC3.1015的链格菌(Alternaria alternata)，菌种编号为CGMCC3.3789的灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)，菌种编号为CGMCC3.1477的弯孢菌(Curvularia sp.)。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒5～25份、孜然5～25份、大蒜5～25份、独活5～25份、蛇床子5～25份，
复合菌剂：淡紫灰链霉菌的菌液5～20份、弗氏链霉菌的菌液5～20份、绿色链霉菌的菌液5～20份、浅灰链霉菌的菌液5～20份、链格菌的菌液5～20份、灰葡萄孢菌的菌液5～20份及弯孢菌的菌液5～20份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7～20份、孜然7～20份、大蒜7～20份、独活7～20份、蛇床子7～20份，
复合菌剂：淡紫灰链霉菌的菌液5～15份、弗氏链霉菌的菌液5～15份、绿色链霉菌的菌液5～15份、浅灰链霉菌的菌液5～15份、链格菌的菌液5～15份、灰葡萄孢菌的菌液5～15份及弯孢菌的菌液5～15份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒10份、孜然10份、独活10份、大蒜10份、蛇床子10份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液5份、弗氏链霉菌菌液5份、绿色链霉菌菌液5份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液10份、灰葡萄孢菌菌液10份、弯孢菌菌液10份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒20份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液6份、浅灰链霉菌菌液6份、链格菌液6份、灰葡萄孢菌菌液6份、弯孢菌菌液6份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然20份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液5份、弯孢菌菌液5份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活20份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液10份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜20份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液15份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
按照本发明所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子20份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液15份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
一种制备所述的液态复合生物多控水田除草剂的方法，其特征在于如下步骤：
A、药用植物提取物的制备：
a、按照称取药用植物原料狼毒、孜然、蛇床子和独活总计20～40公斤计算，加水200升，小火煮沸，100℃回流提取24小时，滤过，残渣中继续加水200升，100℃回流提取24小时，滤过，将两次提取液合并，减压浓缩至20～40升，经121℃灭菌20分钟，备用；
b、按照称取药用植物原料大蒜5公斤计算，用机械设备剪成蒜泥，加入50升蒸馏水，水浴50℃下酶解4小时，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩至5升，置于4℃温度下保存，备用；
B、复合菌剂的制备：
制备所述淡紫灰链霉菌菌液、弗氏链霉菌菌液、绿色链霉菌菌液或浅灰链霉菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取高氏一号合成液体培养基，接入一种上述微生物的斜面培养物，27～28℃条件下在摇床上振荡培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，27～28℃条件下培养4～5天，待长出菌落后，挑取大菌落在同样的固体平板培养基上划线，挑选单菌落转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取高氏一号合成液体培养基，接入一级斜面菌种，于27～28℃下培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取高氏一号合成液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.2～7.4、温度27～28℃，发酵4～5天，即得，可作为生产菌液备用；
制备所述链格菌菌液、灰葡萄孢菌菌液或弯孢菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取PDA液体培养基，接入一种上述微生物的斜面培养物，25～28℃条件下在摇床上振荡培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，25～28℃条件下培养3～5天，转速为60～120转/分，待长出粗壮菌丝后，挑取粗壮菌丝在同样的固体平板培养基上划线，挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取PDA液体培养基，接入一级斜面菌种，于25～28℃下培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取PDA液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.0～7.2、温度25～28℃发酵3～5天，即得，作为生产菌液备用；
按照如上所述复合菌剂的原料重量份配比，将上述B步骤生产的各种菌液混合，制成复合菌剂，经检验，使含总有效活菌数达2亿个/毫升，每一种有效菌的数量不得少于2000万个/毫升以上，符合国家标准GB-20287-2006，即得；
C、液态复合生物多控水田除草剂的制备：
按照如上所述各种原料组分的重量份配比，将上述步骤生产的各种药用植物提取物及复合菌剂混合均匀，即得。
本发明使用的微生物菌种及天然植物提取液具有的除草作用如下：
淡紫灰链霉菌是一种利用其发酵产生的次生代谢产物的一种抗生素除草剂，对水田中水稗草、千金子、浮萍具有一定的抑制作用。
弗氏链霉菌是一种利用其发酵产生的次生代谢产物的一种抗生素除草剂，对水田中水稗草、莎草具有一定的抑制作用。
绿色链霉菌是利用其发酵产生的次生代谢产物的一种抗生素除草剂，对水田中的水稗草、浮萍具有一定的抑制作用。
浅灰链霉菌是利用其发酵产生的次生代谢产物的一种抗生素除草剂，最好将括号内的红字部分删掉,对水田中的鹅头稗草、千金子、莎草具有一定的抑制作用。
链格菌是利用其发酵产生的次生代谢产物的一种抗生素除草剂，对水田中的水稗草、鹅头稗草、千金子、莎草、浮萍具有一定的抑制作用。
灰葡萄孢菌是一种真菌除草剂，对某些单子叶和双子叶植物有很强的抑制或杀除作用。
弯孢菌是一种真菌除草剂，对水稗草、莎草、千金子、马唐有很好的致病性，但不浸染水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、花生等。
狼毒、孜然是天然植物，其提取液具有很好的活性，对水稗草具有一定的抑制作用。
独活、蛇床子是天然植物，其提取液具有很好的活性，对莎草具有一定的抑制作用。
大蒜是天然植物，其提取液具有很好的活性，对千金子具有一定的抑制作用。
本发明的一种液态复合生物多控水田除草剂是将各种菌液按所述原料比例混配制备，能很好地保持复合菌剂中的各菌群数量比例相对稳定。复合菌剂与依靠自然环境进行分解的微生物菌群及与未经单独培养而混配的菌群相比，采用单独培养后，再混配在一起的菌群，由于可以根据实际需要选择合理的配比，能充分地发挥菌剂中各菌群自身的生物特性与相互协同作用，所以，用其进行生物处理的适用范围非常广泛。
本发明的液态复合生物多控水田除草剂是一种高效、低毒、对环境友好，不易产生抗性的生物多控除草剂,尤其对水田中的水稗草、莎草、千金子和浮萍杀抑效果显著。
具体实施方式
以下各实施例仅用于对本发明进行解释说明，并不构成对权利要求范围的限定，本领域技术人员根据说明书内容可以想到的其它替代手段，均应在本发明权利要求的保护范围之内。
本发明实施例采用的微生物菌种，选择中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC2012年版的菌种目录中公开的菌种。
其编号和菌株名是：CGMCC4.0201的淡紫灰链霉菌(Streptomyces lavendulaesubsp.lavendulae)，菌种编号为CGMCC4.0420的弗氏链霉菌(Streptomycesroseoflavus)，菌种编号为CGMCC4.0448的绿色链霉菌(Streptomyces viridis)，菌种编号为CGMCC4.1391的浅灰链霉菌(Streptomyces griseolus)，菌种编号为CGMCC3.1015的链格菌(Alternaria alternata)，菌种编号为CGMCC3.3789的灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)，菌种编号为CGMCC3.1477的弯孢菌(Curvularia sp.)。
实施例的制备方法为如下步骤：
A、药用植物提取物的制备：
a、按照称取药用植物原料狼毒、孜然、蛇床子和独活总计20～40公斤计算，加水200升，小火煮沸，100℃回流提取24小时，滤过，残渣中继续加水200升，100℃回流提取24小时，滤过，将两次提取液合并，减压浓缩至20～40升，经121℃灭菌20分钟，备用；
b、按照称取药用植物原料大蒜5公斤计算，用机械设备剪成蒜泥，加入50升蒸馏水，水浴50℃下酶解4小时，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩至5升，置于4℃温度下保存，备用；
B、复合菌剂的制备：
制备所述淡紫灰链霉菌菌液、弗氏链霉菌菌液、绿色链霉菌菌液或浅灰链霉菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取高氏一号合成液体培养基，接入一种上述微生物的斜面培养物，27～28℃条件下在摇床上振荡培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，27～28℃条件下培养4～5天，待长出菌落后，挑取大菌落在同样的固体平板培养基上划线，挑选单菌落转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取高氏一号合成液体培养基，接入一级斜面菌种，于27～28℃下培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取高氏一号合成液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.2～7.4、温度27～28℃，发酵4～5天，即得，可作为生产菌液备用；
制备所述链格菌菌液、灰葡萄孢菌菌液或弯孢菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取PDA液体培养基，接入一种上述微生物的斜面培养物，25～28℃条件下在摇床上振荡培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，25～28℃条件下培养3～5天，转速为60～120转/分，待长出粗壮菌丝后，挑取粗壮菌丝在同样的固体平板培养基上划线，挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取PDA液体培养基，接入一级斜面菌种，于25～28℃下培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取PDA液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.0～7.2、温度25～28℃发酵3～5天，即得，作为生产菌液备用；
按照实施例所述复合菌剂的原料重量份配比，将上述B步骤生产的各种菌液混合，制成复合菌剂，经检验，使含总有效活菌数达2亿个/毫升，每一种有效菌的数量不得少于2000万个/毫升以上，符合国家标准GB-20287-2006，即得；
C、液态复合生物多控水田除草剂的制备：
按照实施例所述各种原料组分的重量份配比，将上述步骤生产的各种药用植物提取物及复合菌剂混合均匀，即得。
实施例1：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒10份、孜然10份、独活10份、大蒜10份、蛇床子10份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液5份、弗氏链霉菌菌液5份、绿色链霉菌菌液5份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液10份、灰葡萄孢菌菌液10份、弯孢菌菌液10份。
实施例2：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒20份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液6份、浅灰链霉菌菌液6份、链格菌液6份、灰葡萄孢菌菌液6份、弯孢菌菌液6份。
实施例3：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然20份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液5份、弯孢菌菌液5份。
实施例4：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活20份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液10份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
实施例5：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜20份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液15份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
实施例6：由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子20份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液15份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
本发明实施例所述的液态复合生物多控水田除草剂使用方法：
按照1：50～100倍稀释液喷洒土壤，每亩地每次使500～1000mL。喷洒时期可在育苗、定植期前，每隔3～5天喷洒一次，连续使用2～3次。
本发明实施例1～6的液态复合生物多控水田除草剂，试验证明对环境友好，不易产生抗性，用于水稻、玉米及小麦的田间对比试验，对水稗草、莎草、千金子、马唐、野燕麦、浮萍等具有较好杀抑作用,尤其对水田中的水稗草、莎草和千金子杀抑效果显著。
本发明的液态复合生物多控水田除草剂，经过水田试验结果：
对4种杂草种子萌发的抑制率分别为：鹅头稗76.4％、水稗草90.0％、莎草94.5％、千金子100％。
对4种杂草幼根和幼芽生长抑制率分别为：鹅头稗幼根84.7％、幼芽73.4％；水稗草幼根100％、幼芽75.3％；莎草幼根100％、幼芽94.4％；千金子幼根100％、幼芽100％。
本发明的药用植物和复合菌剂复配与单用的化学除草剂比较，更具有增效作用。
表1实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对水稗草的抑制率：
表2实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对鹅头稗的抑制率：
表3实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对莎草的抑制率：
表4实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对千金子的抑制率：
表5实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对鹅头稗幼根和幼芽的抑制率：
表6实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对水稗草幼根和幼芽的抑制率：
表7实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对莎草幼根和幼芽的抑制率：
表8实施例的药用植物和复合菌剂单用与复配对千金子幼根和幼芽的抑制率：
本发明实施例1～6的液态复合生物多控水田除草剂的产品保质期为6～12个月。

Claims (9)

1.一种液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒5～25份、孜然5～25份、大蒜5～25份、独活5～25份、蛇床子5～25份，
复合菌剂：淡紫灰链霉菌的菌液5～20份、弗氏链霉菌的菌液5～20份、绿色链霉菌的菌液5～20份、浅灰链霉菌的菌液5～20份、链格菌的菌液5～20份、灰葡萄孢菌的菌液5～20份及弯孢菌的菌液5～20份。
2.根据权利要求1所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7～20份、孜然7～20份、大蒜7～20份、独活7～20份、蛇床子7～20份，
复合菌剂：淡紫灰链霉菌的菌液5～15份、弗氏链霉菌的菌液5～15份、绿色链霉菌的菌液5～15份、浅灰链霉菌的菌液5～15份、链格菌的菌液5～15份、灰葡萄孢菌的菌液5～15份及弯孢菌的菌液5～15份。
3.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒10份、孜然10份、独活10份、大蒜10份、蛇床子10份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液5份、弗氏链霉菌菌液5份、绿色链霉菌菌液5份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液10份、灰葡萄孢菌菌液10份、弯孢菌菌液10份。
4.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒20份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液6份、浅灰链霉菌菌液6份、链格菌液6份、灰葡萄孢菌菌液6份、弯孢菌菌液6份。
5.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然20份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液5份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液5份、弯孢菌菌液5份。
6.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活20份、大蒜7.5份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液10份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液10份、链格菌液5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
7.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜20份、蛇床子7.5份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液15份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液10份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
8.根据权利要求1或2所述的液态复合生物多控水田除草剂，其特征在于，它是由如下重量份配比的原料组成：
药用植物：狼毒7.5份、孜然7.5份、独活7.5份、大蒜7.5份、蛇床子20份；
复合菌剂：淡紫灰链霉菌菌液10份、弗氏链霉菌菌液15份、绿色链霉菌菌液15份、浅灰链霉菌菌液7.5份、链格菌液7.5份、灰葡萄孢菌菌液7.5份、弯孢菌菌液7.5份。
9.一种权利要求1～8所述的液态复合生物多控水田除草剂的制备方法，其特征在于如下步骤：
A、药用植物提取物的制备：
a、按照称取药用植物原料狼毒、孜然、蛇床子和独活总计20～40公斤计算，加水200升，小火煮沸，100℃回流提取24小时，滤过，残渣中继续加水200升，100℃回流提取24小时，滤过，将两次提取液合并，减压浓缩至20～40升，经121℃灭菌20分钟，备用；
b、按照称取药用植物原料大蒜5公斤计算，用机械设备剪成蒜泥，加入50升蒸馏水，水浴50℃下酶解4小时，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩至5升，置于4℃温度下保存，备用；
B、复合菌剂的制备：
制备所述淡紫灰链霉菌菌液、弗氏链霉菌菌液、绿色链霉菌菌液或浅灰链霉菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取高氏一号合成液体培养基，接入淡紫灰链霉菌菌液、弗氏链霉菌菌液、绿色链霉菌菌液或浅灰链霉菌菌液的斜面培养物，27～28℃条件下在摇床上振荡培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，27～28℃条件下培养4～5天，待长出菌落后，挑取大菌落在同样的固体平板培养基上划线，挑选单菌落转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取高氏一号合成液体培养基，接入一级斜面菌种，于27～28℃下培养96～120小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取高氏一号合成液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.2～7.4、温度27～28℃，发酵4～5天，即得，可作为生产菌液备用；
制备所述链格菌菌液、灰葡萄孢菌菌液或弯孢菌菌液的发酵方法：
a、斜面菌种活化培养：取PDA液体培养基，接入链格菌菌液、灰葡萄孢菌菌液或弯孢菌菌液的斜面培养物，25～28℃条件下在摇床上振荡培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，然后转接到相同的培养基中培养，照此方法连续转接3～5次，将获得的培养液稀释后涂布到平板固体培养基上，25～28℃条件下培养3～5天，转速为60～120转/分，待长出粗壮菌丝后，挑取粗壮菌丝在同样的固体平板培养基上划线，挑选粗壮菌丝转接到固体斜面培养基，培养得到驯化菌株，保存备用；
b、二级摇瓶菌种培养：取PDA液体培养基，接入一级斜面菌种，于25～28℃下培养48～72小时，搅拌转速为60～120转/分，得二级摇瓶种子液；根据生产规模，进一步采用种子罐进行种子的放大培养；
c、微生物菌液的发酵生产：取PDA液体培养基，接入上述制备的发酵种子液，于pH7.0～7.2、温度25～28℃发酵3～5天，即得，作为生产菌液备用；
按照权利要求1～8所述复合菌剂的原料重量份配比，将上述B步骤生产的各种菌液混合，制成复合菌剂，经检验，使含总有效活菌数达2亿个/毫升，每一种有效菌的数量不得少于2000万个/毫升，符合国家标准GB-20287-2006，即得；
C、液态复合生物多控水田除草剂的制备：
按照权利要求1～8所述各种原料组分的重量份配比，将上述步骤生产的药用植物提取物及复合菌剂混合均匀，即得。
CN201610128083.1A 2016-03-07 2016-03-07 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法 Active CN105594767B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610128083.1A CN105594767B (zh) 2016-03-07 2016-03-07 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610128083.1A CN105594767B (zh) 2016-03-07 2016-03-07 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105594767A CN105594767A (zh) 2016-05-25
CN105594767B true CN105594767B (zh) 2018-02-09

Family

ID=55975580

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610128083.1A Active CN105594767B (zh) 2016-03-07 2016-03-07 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105594767B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105941487A (zh) * 2016-05-18 2016-09-21 杭州富阳飞博科技有限公司 一种利用微生物制备的生物除草制剂
CN106417391A (zh) * 2016-09-21 2017-02-22 杭州富阳佳畅机械有限公司 直播稻田去除自生麦苗的生物制剂的制备方法
CN106417392A (zh) * 2016-09-21 2017-02-22 杭州富阳佳畅机械有限公司 一种环保复合除草剂及其应用
CN106417393A (zh) * 2016-09-21 2017-02-22 杭州富阳佳畅机械有限公司 一种环保复合除草剂的制备方法
CN106417390A (zh) * 2016-09-21 2017-02-22 杭州富阳佳畅机械有限公司 用于稻田的生物除草剂
CN114097500B (zh) * 2021-11-22 2022-09-23 晋中学院 一种谷子种植除草方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102792973B (zh) * 2012-07-28 2014-04-09 崔瑞珍 复配杀菌剂及其制备方法
CN104663730A (zh) * 2013-11-29 2015-06-03 大连三科生物工程有限公司 水生植物用微生物除草剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN105594767A (zh) 2016-05-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105594767B (zh) 一种液态复合生物多控水田除草剂及其制备方法
CN104542727B (zh) 一种液态复合生物多控杀虫剂及其制备方法
CN102776130B (zh) 一株金龟子绿僵菌及其应用
CN105831175B (zh) 一种液态复合生物多控杀菌剂及其制备方法与应用
CN101671210B (zh) 一种淡紫拟青霉生物肥药的制备方法
CN105316243B (zh) 一种农业根结线虫复合生防菌剂的制备方法及其应用
CN102719382B (zh) 解淀粉芽孢杆菌株b-1619及其在防治茄科蔬菜土传病害中的应用
CN102442849A (zh) 一种利用秸秆制备的防病生物有机肥及其制备方法
CN102177921B (zh) 一种复合生防制剂及其制备方法和应用
CN105039167B (zh) 一种球孢白僵菌dsxj‑07及其应用
CN102021122B (zh) 一种高效杀虫真菌及其用途
CN101225368A (zh) 一株生防放线菌-淀粉酶产色链霉菌d
CN108384734A (zh) 一种防治烟草根茎类病害的生防菌剂及其制备方法
CN101935627B (zh) 一种辛酰溴苯腈降解菌及其生产的菌剂
CN105695346B (zh) 一株毒杀植物寄生线虫的菌核青霉及其制备方法和应用
CN103087947A (zh) 一株假黄色单胞菌zkb4-4及其应用
CN104560740B (zh) 一株防治油茶象幼虫的金龟子绿僵菌及其应用
CN109169712A (zh) 一种复合生防菌剂及其制备方法和应用
CN101444230B (zh) 一种茅苍术接种剂生产方法
CN108424182A (zh) 一种沼液浓缩液在防治番茄根结线虫病上的应用
CN102648714B (zh) 液体发酵制备生物农药的方法
CN101798564B (zh) 氯嘧磺隆降解菌和基于该菌的土壤生物修复菌剂及应用
CN101818124B (zh) 一株具提高大豆对除草剂抗性的寡养单胞菌及其制备方法和应用
KR100976037B1 (ko) 살균·살충제로써 항진균 활성을 가지는 세균 Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｙｘａ ＫＣ０２８ 및 식물 추출물의 용도
CN103865805A (zh) 发酵黑曲霉抑制烟草青枯病菌的用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 114041 Liaoning, Anshan, Qianshan District, Tun Town, Tun Tun Village

Patentee after: Liaoning Hei Bio Technology Co., Ltd.

Address before: 114041 Liaoning, Anshan, Qianshan District, Tun Town, Tun Tun Village

Patentee before: ANSHAN HERUI BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

CP01 Change in the name or title of a patent holder