CN105558313A

CN105558313A - 一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN105558313A
Application number: CN201510988974.XA
Authority: CN
Inventors: 覃亮基
Original assignee: Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Guizhou Xinbang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-12-25
Filing date: 2015-12-25
Publication date: 2016-05-11

Abstract

本发明公开了一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用，按照体积比，饵料由蔬菜汁∶动物血清＝1～5∶6～10混合而成；其制备方法为：1、取动物血块搅碎，40目筛网过滤，所得滤液即动物血清；2、将蔬菜洗净沥干，切成3～5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤液即蔬菜汁；3、将动物血清和蔬菜汁按比例混合即得。本发明提供的吸血类水蛭饲养饵料，采用蔬菜汁与动物血清混合而成，可大幅度提高水蛭单位质量的抗凝血酶含量和个体重量，同时丰富了水蛭饵料营养结构，提高养殖效率，显著提高水蛭药用价值，从而提高水蛭人工养殖经济效益；其制备方法简单，原料易得，与蔬菜汁混用可减轻动物血的市场供应压力。

Description

一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用，具体属于水蛭养殖技术领域。

背景技术

水蛭养殖一般采用种蛭水旱相间大田垄沟式养殖,自然产卵孵化后集中育苗分池养殖或亲本与幼苗同池混合养殖方式,使用此两种方式养殖为仿生养殖法,操作步骤简单易于管理,但是受自然灾害影响较大,野外环境水蛭天敌多,病害防治难度较大,育苗周期长且密度小。现有吸血类水蛭养殖饵料，通常以动物血为主，尤其现有的研究成果显示以新鲜牛血清为饵料,水蛭单体增重率高，但抗凝血酶含量不高。广东、广西一带农民养殖户在生产上以牛血块为主、猪血块为辅,但是受牛血清饲喂操作复杂、鲜牛血市场供应量不足等因素约束。水蛭作为一味名贵中药材，水蛭养殖中个体增重率固然重要，提高水蛭单位质量的抗凝血酶含量对提高药用价值和增加生产产值方面意义更大。因此研发一种能同时提高水蛭单位质量的抗凝血酶含量和个体增重率的饲养饵料显得尤为必要。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种吸血类水蛭饲养饵料及其制备方法和应用，该饵料能够有效提高水蛭单位质量的抗凝血酶含量和个体重量。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由蔬菜汁∶动物血清＝1～5∶6～10混合而成。

前述吸血类水蛭饲养饵料中，动物血清为牛血清或猪血清。

前述吸血类水蛭饲养饵料中，蔬菜汁为芹菜汁、菠菜汁或野芹菜汁。

前述吸血类水蛭饲养饵料优选为由芹菜汁∶牛血清＝2∶8(体积比)混合而成。

本发明吸血类水蛭饲养饵料的制备方法，包括以下步骤：

(1)取动物血块搅碎，40目筛网过滤，所得滤液即动物血清，备用；

(2)将蔬菜洗净沥干，切成3～5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤液即蔬菜汁，备用；

(3)将动物血清和蔬菜汁按比例混合即得。

本发明吸血类水蛭饲养饵料在提高水蛭抗凝血酶活性饲养方法中的应用。

前述应用方式之一为，用所述饵料替代现用水蛭饵料按常规方法饲养水蛭，投喂饵料的时间间隔为4～6天。

前述应用方式之二为，用所述饵料替代现用水蛭饵料按常规方法饲养水蛭2个月，然后改变饲养温度至30℃，停食1个月。

为了体现本发明饵料的应用效果，发明人对其进行了试验研究和考察。

采用本发明的饵料饲养水蛭，具体包括以下步骤：(1)幼苗采集：收集孵化后的的水蛭幼苗，集中育苗20天后进行分苗处理；(2)养殖：a.养殖密度：75尾/L；b.清洗换水：每天用相同温度的洁净水清洗更换一次，同时挑出死亡水蛭；c.每4天以仿生膜为介质投喂一次，投喂之前将水蛭清洗干净滤干水后进行喂食，时间选择在上午12:00之前，进食时间控制在30min以内，30min后将水蛭和投喂容器分离，将水蛭清洗干净放回瓶中存放，清洗投喂容器，晒干备下次投喂时重复使用，水蛭进食过程中随时挑出过大的个体，以控制其单次进食量，防止胀死；(3)收获：养殖2个月后收获。

一、饵料对水蛭生长的影响试验

(一)试验目的：

通过采用不同种类的饵料养殖水蛭，记录统计水蛭采食不同饵料种类后体重及抗凝血酶活性变化情况，分析确定最适于水蛭生长的饲养饵料种类。

(二)试验内容：

1、试验设计

(1)设置牛原血、牛血清、猪原血、猪血清、芹菜汁+牛血清(2:8)、野芹菜汁+牛血清(1:9)、菠菜汁+猪血清(3:7)、芹菜汁+猪血清(4:8)、小球藻、塘角鱼十个种类，每种饵料3个重复，每个重复对应50尾1g左右健康水蛭苗。

(2)基质：水

(3)湿度：自然环境湿度

(4)密度：62.5尾/L

(5)试验周期：60天

2、试验材料

(1)试验容器：2000mL大烧杯

(2)基质用量：800mL

(3)防逃网：40目尼龙网

(4)饵料：新鲜牛原血、牛血清、猪原血、猪血清、芹菜汁+牛血清(2:8)、野芹菜汁+牛血清(1:9)、菠菜汁+猪血清(3:7)、芹菜汁+猪血清(4:8)、小球藻、塘角鱼

3、试验日常管理

(1)清洗换水：每天清水清洗一遍

(2)投喂方式：仿生膜吮吸式、直接投喂

(3)投喂频率：4天一次

(4)投喂时长：30min/次

(5)死亡统计：每天统计一次死亡水蛭数量与重量

(三)实验结果：

1、饵料对水蛭抗凝血酶活性的影响

水蛭抗凝血酶活性是通过水蛭单位质量的抗凝血酶含量来体现的，本发明采用下述方法测定水蛭单位质量的抗凝血酶含量。

1.1、溶液的配制

(1)0.2mol/L三羟基甲基氨基甲烷溶液的配制

取三羟基甲基氨基甲烷(分析纯)2.4228g，加水至100mL，即为0.2mol/L三羟基甲基氨基甲烷溶液。

(2)0.1mol/L盐酸溶液的配制

取浓盐酸9mL，加水至1000mL即为0.1mol/L盐酸溶液。

(3)三羟基甲基氨基甲烷盐酸缓冲液的制备

取0.2mol/L三羟基甲基氨基甲烷溶液25mL与0.1mol/L盐酸溶液40mL加水至100mL,充分混匀，调节pH至7.4，即得。

(4)0.5％牛纤维蛋白原(以凝固物记)溶液的配制

取牛纤维蛋白原(含凝固物59％)0.085g至10mL容量瓶中，用预先加热至37℃的三羟基甲基氨基甲烷盐酸缓冲液稀释至刻度，37℃水浴轻摇缓慢使溶(放入水浴时间不宜超过10分钟)。

(5)凝血酶溶液的配制

取含量为560U/支凝血酶1支，取其全部内容物至10mL容量瓶中，用生理盐水稀释至刻度，轻轻摇匀即为56U/mL，盛于玻璃管中。

(6)供试品溶液的配制

取水蛭粉末(3号筛)约1g，精密称定，精密加入0.9％氯化钠溶液5mL，充分搅拌，浸提30分钟，并时时振摇，3500r/min离心，离心15分钟，取上清液。

1.2、含量测定操作步骤

(1)精密量取上清液100μL，置于(10mm×75mm)试管中；

(2)精密加入含0.5％牛纤维蛋白原的三羟基甲基氨基甲烷盐酸缓冲液200μL，摇匀；

(3)将试管置于水浴锅(37±0.5℃)中(用温度计置水浴中观察测量温度)缓缓滴加每1mL含56单位U的凝血酶溶液(每分钟5μL，边滴加边轻轻摇匀)，滴加凝血酶溶液时尽量不取出试管，以使其保持在37±0.5℃温度中。当接近凝固时，5μL分次滴加，每次滴加1～2μL，边滴加边轻摇，密切观察其是否凝固(可置试管于透光处)，可用注射器针尖轻挑，看是否有丝状物产生，若有丝状物或絮状物产生可判为已凝固。每个样品置水浴中检测的时间不得超过30分钟。

(4)记录消耗凝血酶溶液的体积，按照下式计算其含量。

U = \frac{C_{1} V_{1}}{C_{2} V_{2}}

式中，U为每1g含凝血酶活性单位，U/g；C₁为凝血酶溶液的浓度，U/mL；C₂为供试品溶液的浓度，g/mL；V₁为消耗凝血酶溶液的体积，μL；V₂为供试品溶液的加入量，μL；中和一个单位的凝血酶的量，为一个抗凝血酶活性单位。

按照上述试验内容，每4天以仿生膜为介质投喂一次十种不同的饵料，2个月后测定水蛭单位质量的抗凝血酶含量；实验结果如表1所示。

表1不同饵料饲养2个月后的水蛭抗凝血酶含量测定结果

由表1可知，采用本发明的饵料进行饲养，水蛭单位质量的抗凝血酶含量显著提高。

2、饵料对水蛭增重率的影响

按照上述试验内容，每4天以仿生膜为介质投喂一次十种不同的饵料，2个月后测定水蛭的重量，并计算增重率；实验结果如表2所示。

表2不同饵料饲养水蛭的增重率

由表2可知，采用本发明的饵料进行饲养，水蛭的增重率相对于单用牛血清、猪血清而言略有降低，但变化不大。

二、投喂时间间隔对水蛭抗凝血酶活性及水蛭增重率的影响

参照上述一、(二)中试验内容，选用本发明的饵料，即以体积比芹菜汁∶牛血清＝2∶8作为饵料，投喂时间间隔分别为2d、4d、6d、8d、12d和16d，2个月后测定水蛭单位质量的抗凝血酶含量；实验结果如表3所示。

表3不同投喂时间间隔饲养2个月后的水蛭抗凝血酶含量测定结果

由表3可知，投喂时间间隔为16d时饲养的水蛭单位质量抗凝血酶含量最高。

参照上述一、(二)中试验内容，选用本发明的饵料，即以体积比芹菜汁∶牛血清＝2∶8作为饵料，投喂时间间隔分别为2d、4d、6d、8d、12d和16d，2个月后测定水蛭的重量，并计算增重率；实验结果如表4所示。

表4不同投喂时间间隔饲养水蛭的增重率

由表4可知，投喂时间间隔为4d～6d时，饲养的水蛭增重率最大。

由于水蛭的总体产量取决于水蛭单位质量的抗凝血酶含量和增重率两个因素，因而本发明以绝对产量作为指标进行方案的评价筛选，绝对产量按照下式进行计算。

绝对产量＝水蛭单位质量抗凝血酶含量*水蛭增重率/100

根据上述公式和表1-4中的试验数据，分别计算不同种类饵料和不同投喂时间间隔的绝对产量，结果如表5所示。

表5不同饵料及投喂时间间隔饲养水蛭的绝对产量

饵料种类	投喂时间间隔	绝对产量(U/g)
			牛原血	4d	1799.50
牛血清	4d	3424.32
			猪原血	4d	1650.13
猪血清	4d	3067.73
			芹菜汁混合牛血清(2:8)	4d	4244.23
野芹菜汁混合牛血清(1:9)	4d	4199.63
			菠菜汁混合猪血清(3:7)	4d	3923.20
芹菜汁混合猪血清(5:10)	4d	3827.61
			小球藻	4d	1072.52
塘角鱼	4d	1210.13
			芹菜汁混合牛血清(2:8)	2d	2127.68
芹菜汁混合牛血清(2:8)	6d	4240.80
			芹菜汁混合牛血清(2:8)	8d	3859.02
芹菜汁混合牛血清(2:8)	12d	2642.21
			芹菜汁混合牛血清(2:8)	16d	4061.13

由表5可知，以芹菜汁混合牛血清(2:8)为饵料，当投喂时间间隔为4d～6d时，水蛭的绝对产量最高。

三、本发明饵料结合控温停食养殖方法对水蛭抗凝血酶活性的影响

取本发明饵料(蔬菜汁1～5体积混合动物血清6～10体积)按照下述方法饲养水蛭，随后测定水蛭单位质量的抗凝血酶含量，结果如表6所示。

水蛭饲养方法具体为：(1)幼苗采集：收集孵化后的水蛭幼苗，集中育苗20天后进行分苗处理；(2)增重养殖：将分苗后水蛭幼苗置于22℃～34℃温度下日常饲喂2个月，快速增重；(3)控温停食：将饲养温度控制在30℃，恒温停食1个月；(4)收获。

表6

由表6可知，采用本发明的饵料，结合控温停食方法饲养的水蛭，其单位质量的抗凝血酶含量进一步提高。

本发明的有益之处在于：本发明提供的吸血类水蛭饲养饵料，采用蔬菜汁与动物血清混合而成，可大幅度提高水蛭单位质量的抗凝血酶含量和个体重量，同时丰富了水蛭饵料营养结构，提高养殖效率，显著提高水蛭药用价值，从而提高水蛭人工养殖经济效益。本发明饵料的制备方法简单，原料易得，与蔬菜汁混用可减轻动物血的市场供应压力。将本发明饵料替代传统水蛭饵料用于水蛭的人工饲养，可在确保水蛭个体增重率的前提下显著提高水蛭抗凝血酶活性，绝对产量高。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步的介绍。

实施例1

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由芹菜汁∶猪血清＝5∶10混合而成。

具体通过以下步骤制备：(1)取猪血块搅碎，40目筛网过滤，所得滤液即猪血清，备用；

(2)将芹菜洗净沥干，切成3～5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤液即芹菜汁，备用；

(3)将芹菜汁和猪血清按比例混合即得。

实施例2

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由芹菜汁∶牛血清＝2∶8混合而成。

具体通过以下步骤制备：(1)取牛血块搅碎，40目筛网过滤，所得滤液即牛血清，备用；

(3)将芹菜汁和牛血清按比例混合即得。

实施例3

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由菠菜汁∶猪血清＝3∶7混合而成。

(2)将菠菜洗净沥干，切成3～5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤液即菠菜汁，备用；

(3)将菠菜汁和猪血清按比例混合即得。

实施例4

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由野芹菜汁∶牛血清＝1∶9混合而成。

(2)将野芹菜洗净沥干，切成3～5cm的段，捣碎后，40目筛网过滤，去掉纤维，所得滤液即野芹菜汁，备用；

(3)将野芹菜汁和牛血清按比例混合即得。

实施例5

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由菠菜汁∶牛血清＝1∶6混合而成。菠菜汁和牛血清的制备分别同实施例3、实施例4，然后将二者按比例混合即得。

实施例6

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由野芹菜汁∶猪血清＝4∶7混合而成。野芹菜汁和猪血清的制备分别同实施例4、实施例3，然后将二者按比例混合即得。

实施例7

一种吸血类水蛭饲养饵料，按照体积比，由芹菜汁∶牛血清＝5∶6混合而成。其制备方法同实施例2。

本发明所述吸血类水蛭饲养饵料的应用：

实施例8：提高水蛭抗凝血酶活性的饲养方法：用实施例1～7的饵料替代现用水蛭饵料按现有技术方法(如CN102613444A、CN103404488A、CN102138546A、CN103493788A等)饲养水蛭，投喂饵料的时间间隔为4天。

实施例9：提高水蛭抗凝血酶活性的饲养方法：用实施例1～7的饵料替代现用水蛭饵料按现有技术方法(如CN102613444A、CN103404488A、CN102138546A、CN103493788A等)饲养水蛭2个月，然后将饲养温度控制在30℃，停食1个月。

实施例10：提高水蛭抗凝血酶活性的饲养方法，包括以下步骤：(1)幼苗采集：收集孵化后的水蛭幼苗，集中育苗20天后进行分苗处理；(2)增重养殖：将分苗后水蛭幼苗置于22℃～34℃温度下日常饲喂2个月，快速增重；养殖密度为75尾/L，每4天以仿生膜为介质投喂一次实施例1～7中任一种饵料；(3)控温停食：将饲养温度控制在30℃，恒温停食1个月；(4)收获。

实施例11：提高水蛭抗凝血酶活性的饲养方法，包括以下步骤：(1)幼苗采集：收集孵化后的水蛭幼苗，集中育苗20天后进行分苗处理；(2)增重养殖：将1g左右的水蛭幼苗置于34℃温度下日常饲喂2个月，快速增重；养殖密度为75尾/L，每4天以仿生膜为介质投喂一次实施例1～7中任一种饵料，投喂时间选择在上午12:00之前，投喂之前将水蛭清洗干净，滤干水后进行喂食，进食时间控制在30min以内；水蛭进食过程中随时挑出过大的个体，以控制其单次进食量，防止胀死；投喂结束后将水蛭和投喂容器分离，水蛭清洗干净放回饲养器中存放，投喂容器清洗后晒干备用；(3)控温停食：将饲养温度控制在30℃，恒温停食1个月；(4)收获。其中步骤(2)和(3)的养殖过程中还需要进行清洗换水，即每天用相同温度的洁净水清洗更换一次，同时挑出死亡水蛭。

Claims

1.一种吸血类水蛭饲养饵料，其特征在于：按照体积比，由蔬菜汁∶动物血清＝1～5∶6～10混合而成。

2.根据权利要求1所述的吸血类水蛭饲养饵料，其特征在于：所述动物血清为牛血清或猪血清。

3.根据权利要求1或2所述的吸血类水蛭饲养饵料，其特征在于：所述蔬菜汁为芹菜汁、菠菜汁或野芹菜汁。

4.根据权利要求3所述的吸血类水蛭饲养饵料，其特征在于：按照体积比，由芹菜汁∶牛血清＝2∶8混合而成。

5.如权利要求1～4任一项所述的吸血类水蛭饲养饵料的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取动物血块搅碎，40目筛网过滤，所得滤液即动物血清，备用；

(3)将动物血清和蔬菜汁按比例混合即得。

6.如权利要求1～4任一项所述的饵料在提高水蛭抗凝血酶活性饲养方法中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：用所述饵料替代现用水蛭饵料按常规方法饲养水蛭，投喂饵料的时间间隔为4～6天。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：用所述饵料替代现用水蛭饵料按常规方法饲养水蛭2个月，然后改变饲养温度至30℃，停食1个月。