CN105087415A - 一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,选择一组功能性强,组合效力高的真菌、放线菌、细菌的三类九个菌种,经菌种提纯复壮,单菌种扩大培养,混合液体发酵,浓缩母液菌剂二次扩大培养;在制备工艺中,所述浓缩母液菌剂在固体秸秆饲料半开放发酵器内进行了良好的排水与通气条件下完成了全部制备过程。本发明秸秆饲料生物固体添加剂对各种植物秸秆进行饲料发酵处理后,具有高效分解软化秸秆纤维的能力,可以改善适口性,提高动物消化能力,提高秸秆利用等作用;同时微生物菌剂还可降解秸秆中农药残留,化学有害物质的侵染,成为抗生素的替代产品,提高了秸秆生产饲料的安全性和卫生价值,成为农业生态形饲料添加剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂,尤其涉及一种用秸秆生产的微生物添加剂,特别涉及该种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂的制备方法。
背景技术
畜牧业发展的一个重要条件是饲料,是营养丰富的饲料,良好的饲料才能提高肉饲比例,科学的饲料配方和优化的饲料质量,是畜牧业发展的基础。所以,本发明技术核心就是将营养含量较少的农作秸秆通过微生物添加剂的处理,改变它适口性差和营养成分少的弱点,提高秸秆的利用价值。这个固体添加剂也是利用秸秆生产的。
农作物秸秆是收获作物主产品之后所剩余的副产品,如麦秸、玉米秸、大豆秸等是可利用的饲料资源。也是重要而可再生能源,是仅次于煤炭、石油和天然气的第四大能源。
由于秸秆是副产品,营养价值不高,一般含少量的碳水化合物,粗蛋白,粗脂肪等。含有细胞壁物质较多,在细胞壁中,纤维素被木质素和半纤维素包裹呢,而本质素有完整坚硬的外壳,不易被微生物降解,因此纤维素的分解受到了限制。为了提高秸秆的利用率,就需要对原料进行处理,达到降解木质素、提高秸秆利用率的目的。
由于农作物秸秆理化特性,用于饲料生产时有很多弱点,主要问题是营养缺陷,如消化率低,适口性差,营养不平衡等。造成畜禽食量低,无法满足产奶和产肉的需要。秸秆的细胞壁坚硬,提供营养有限,且缺乏必须的矿物质元素,使单胃动物一般不能利用秸秆,反刍动物对秸秆的消化率也只有20%-30%。如何提高秸秆资源的利用,是畜业生产中一个重要课题。
近年来,科学界对如何有效提高农作秸秆的利用率进行了大量的研究,常用的方法主要有物理方法,化学方法,生物方法和物理化学方法,对农作物秸秆进行加工、调制、发酵都有一定的作用。但要从安全高效标准衡量,唯独使微生物发酵的添加剂最为可靠和良好。
秸秆饲料的生物处理方法,实质上是利用微生物发酵和生物酶的作用,酶解纤维素、木质素,改变秸秆的理化性状,将难以消化吸收的大分子物质加工分解为易消化的单糖,双糖等小分子物质,从而提高了秸秆的营养价值和适口性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,克服了现有技术的缺点。
本发明所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的:
本发明基于以下原理:
针对含水量较低的农作物秸秆,这类秸秆中纤维素已经老化、粗硬、营养成分含量较低,动物适口性差,用这样失去呼吸的物料生产饲料,很难利用物料本身造成厌氧发酵的环境。由于秸秆上原有吸附的乳酸菌数量大大的减少,靠原生微生物促其饲料充分发酵的可能亦不存在,所以必须添加微生物发酵制剂,促进秸秆发酵分解转化为具有良好营养的饲料。利用添加微生物益生菌就成为唯一的最为安全、可靠的有效技术方法。将微生物菌剂在秸秆发酵前加入物料,能促进发黄干燥的秸秆纤维和木质素等有机物质在发酵过程中转化为糖类,最后发酵成为乳酸和挥发性脂肪酸,从而提高动物的营养吸收和秸秆利用率的提高。同时此微生物菌剂还具有预防疾病的作用,成为抗生素饲料的第一代替代品。
本发明提供了一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,由选自真菌、放线菌和细菌三类共9个功能性较强的菌种培养发酵制备而成,选择九个菌种,或,任意二个菌类或者任意六个菌种培养发酵制备:
真菌:(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
(3)Trichodermasp.木霉ACCC-30791←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院饲料所;编号:avcF45;分离自秸秆,用于分解纤维素;培养基:0014;培养温度25-28℃;
放线菌:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:compostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
细菌:
(6)Lactobacillussp.乳杆菌ACCC-03877←中国农业科学院饲料所;原始编号:B484;饲料用作添加剂,益生菌等;分离地点:北京市海淀区;培养基:0002;培养温度26℃;
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
(8)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-01698←中国农业科学院饲料所;原始编号:FRI2007004B241;饲料用植酸酶等的筛选;分离地点:浙江嘉兴鱼塘;培养基:0002;培养温度37℃;
(9)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-11025←中国农业科学院土肥所←山东聊城;原始编号:BHL-0201;专用于畜禽饲料添加剂;培养基:0002;培养温度30℃
本发明还提供了一种所述高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂(液体添加剂)的制备方法,包括以下步骤:
取沙土管菌种;菌种激活斜面试管菌种;培养皿平面菌种提纯复壮菌株;扩大斜面菌种;液体单菌种摇床培养;单菌体20升培养;单菌种液体100升发酵培养;三类九个菌种500升混合发酵培养;农作物秸秆饲料生物液体添加剂母液的生产;二次生产菌剂配制;农作物秸秆固体添加剂槽型隧道式发酵器的生产工艺;秸秆物料的物理处理方法及标准;固体物接上菌剂的接种;混合搅拌;机械震压;表面覆膜;自动排液;物料发酵;温度调节;湿度调节;成品打捆包装,成品袋式包装;成品库。
具体步骤:
(1)菌种的提纯复壮和纯种繁殖:首先从中国农业微生物保存中心购回已经选定的三类9个沙土管菌种,接种在试管培养基上,选择适宜生长的进行激活培养;再用培养皿平面培养,镜检菌种的纯度和活力,将附合要求的菌株进试管扩大培养;
(2)液体菌种的单菌种液体培养:将所述9个菌种的试管斜面菌种,分别进行三角瓶摇床进行液体菌液培养;
优选,为了达到一定的制备数量,采用20升发酵装置或50升不锈钢小型发酵罐,进行液体菌种的单菌液发酵培养和扩大;
(3)液体菌种的混合发酵培养:将九个菌种的菌液,同类各菌种按1∶1的菌液比例混合,分别制成同类混合菌液真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液;再将所述真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液按3∶2∶1重量份比例混合;该混合液放入500升或2000升发酵罐里的液体培养基中,进行发酵;所述混合菌液在所述液体培养基中的加入量为总重量的5%-10%;
(4)发酵产品的培养时间及最终标准控制:
所述发酵温度28℃-30℃,发酵36-48小时的,经过镜检,每毫升含菌量达到2亿时,停止加温;
(5)产品后发酵及成品包装:待温度自然下降到常温时,放入贮罐,等静放15天-20天以后装瓶,装箱进入成品库,即得所述高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂,也即农作物秸秆饲料生物浓缩母液成品;所述浓缩母液可入市销售。
由于液体在贮存,运输和使用中有很多不便,近年来在这种传统工艺方法上,增添了固体发酵工艺新技术过程,开拓了市场,减化了应用条件,促进了生产的发展。所述固体发酵也称固态发酵,是指用微生物液态发酵的浓缩液接种在固态的秸秆培养基上,进行的添加剂的固体发酵过程,来生产一种固态的秸秆饲料生物固体添加剂。
为此,本发明还提供了一种高效安全的农作物秸秆饲料固体添加剂,是由所述发酵菌剂制备而得。
本发明还提供了一种所述高效安全的农作物秸秆饲料固体添加剂的制备方法,包括以下步骤:
在所述隧道式发酵器的制备过程:
堆料:首先将没有污染霉变的农作物秸秆,粉碎成1-2公分的块状和粉状物,放入隧道槽内,厚度约1-1.3米;
接种:将经过二次激活制备的所述浓缩(浓缩母液菌剂)洒在秸秆物料上;再用走动式搅拌机将秸秆物料上下搅拌两次,使菌液与物料混合均匀,有利于发酵;再用移动式镇压机将物料震压两次,被震压的物料厚度约1米,这个厚度是根据秸秆原材料的质地和气温而灵活调整,太厚散热困难,太薄升温困难,发酵温度约25℃-55℃;
覆膜:震压后的秸秆物料上面用活动式覆膜机覆盖一层塑料薄膜,起到保湿、保温、保护物料表面不干燥、不易感染有害杂菌的功能;覆膜机还要做到薄膜四周压入料内,尽可能做到四边不透气或少透气,造成秸秆厌氧发酵的环境。
排水与通风:隧道建造时,将打孔的40#钢管顺隧道长度,在隧道地平下安装四道排水与通风管道,可排出多余的水分;在秸秆物料发酵过程中,物料温度过高时,可以通过管道送入冷风降温,在气温较低时可通入暖风提高料温促进发酵快速进行;
打包装袋:经过3-5天的发酵过程,每毫升物料含5000万菌量后,达到成品的质量标准,及时打包或装袋;最好打包的物料外包一个塑料封包,装袋时选用不透空气的塑料薄膜,这样能保证在贮藏和运输过程中物料成品不失水、不霉变、保证产品的质量和活性。
所述固体添加剂还进一步包括以下步骤,为本发明的两个发明点:
①浓缩母液二次扩大生产液的制备方法:
所述二次扩大的生产用液体菌剂,是对浓缩母液稀释后再利用的一种节约有效的创新产品和方法;由于降低生产成本和环境污染问题的需要,本创新具有重要发展意义。它是将5%-10%母液加入45℃的含10%-15%的糖蜜(糖厂工业废料)或红糖培养基,经过厌氧发酵3天或不经发酵直接应用生产均可,都表现出良好的效果,这样既节约了能源又减少了成本,有利于生态友好型产业的发展要求。
②采用隧道式半开放固体发酵器-通风与排水原理
隧道式半开放发酵装置已多有应用,但本发明进行了结构改进,特别是将排水与通风相结合,将通风与排水原理用于隧道槽下部是一个创新点。由于本发明秸秆微生物固体添加剂生产在水分含量方面技术要求很严,一般要求为50-60%之间;要求固体发酵时,培养基上没有或几乎没有游离的水,才能良好的进行发酵过程。如果没有仪器测试设备,也可采用“手握成团,落地能散”的方法操作和检验,但在大规模生产中遇到的水份过多,镇压物料后出水现象经常发生,很难以有效的解决,造成生产水平降低,物料转换为成品率很低。
通风与排水相结合的装置系统完善了隧道半开放式农作物秸秆生物固体添加剂的生产工艺,解决了难题,发展了生产,具有很强的技术优势。
本发明具有以下技术效果:
1.本发明的一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,通过筛选针对纤维素、半纤维素和木质素分解性强的微生物菌种,经扩大培养及混合发酵生产的一种微生物菌剂,可分别添加到植物性、动物性、高蛋白类及矿物性饲料里面。在制备工艺中,所述浓缩母液菌剂在固体秸秆饲料半开放发酵器内进行了良好的排水与通气条件下完成了全部制备过程。对各种植物秸秆进行饲料发酵处理后,具有高效分解软化秸秆纤维的能力,能起到促进饲料中营养成分分解、变性、融合、增效的作用;促进秸秆饲料适口性变好,提高牛羊的采食总量和消化吸收功能;同时对饲料中原有的一些有害物质进行了降解和无害处理,减少或完全取消抗生素的使用,保证了动物健康生长。
2.利用微生物生产高效安全秸秆饲料固体添加剂,是近年来各国科研工作的重要领域。由于畜禽饲喂规模化发展过程中,长期连续使用抗生素造成动物体的耐药性,使人类病原菌产生耐药性,进而影响到人类公共卫生与生命安全。所以对药物饲料、抗生素及化学添加剂进行限制,同时也促进了非药物饲料添加剂的发展。其中饲用微生物添加剂尤为突出。由于饲用微生物添加剂工业化生产质量高,无副作用,生产成本低等特点,引起饲料行业的高度重视。随着人们能源意识和环境意识的不断提高于深入,微生物饲料添加剂领域将具有广阔的发展和应用前景。
3.微生物饲料添加剂作用的大小与产品质量好坏紧密相连,微生物菌剂的性能与筛选的菌种性能的优劣有直接关系。菌种性能不仅直接关系到产品的质量,而且关系到使用效果。菌种筛选必须以预定的产品目标为标准。所以,应选用繁殖速度快;自然环境适生性强;安全性好;稳定性好;耐酸性和高胆盐环境下具有较强的定殖和黏附能力强的菌株,是高效安全秸秆饲料固体添加剂生产的决定因素。
4.在菌种配合方面,菌种相互间的存在的拮抗作用和增殖数量平衡在生产工艺中,采用温度,数量比例,PH值调控等方法来解决。
5.本发明一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法具有两个方面的功能:一是通过微生物对秸秆分解软化,改善了适口性及消化能力,提高了营养,促进了生产。二是通过微生物生态修复能力,对物料中的有害物质,化学有毒物质进行降解、转化、生成安全卫生的动物食品,同时改善胃瘤功能,生产出无害的动物肉蛋产品。开辟了减少抗生素或完全不用抗生素的绿色安全饲料生产途径。
6.本发明同时可制备两种饲料添加剂:一种是液体添加剂,一种是固体添加剂。固体添加剂生产是节能、环保的新方法。
7.所述一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,所述隧道式固体半开放发酵器的结构是:发酵器为砖混结构,永久性固定槽体,长槽型,长30米,宽3米,两边高1.5米;发酵槽底顺长度设置四根排水与通风管道;槽顶部架有走动式搅拌机,移动式震压机,活动式覆膜机各一台。基本上做到秸秆饲料生物固体添加剂生产全机械化操作。
8.所述的排水与通气系统工艺过程:是固体秸秆生物添加剂通过发酵器发酵时,水分与气体交换的过程,多余水分由排水系统排出,发酵中需要冷气和热气,由通风系统共给,通风与排水是一套系统具备了两个功能。
具体实施方法
实施例1
一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,
取9个菌种培养发酵:
真菌:(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
(3)Trichodermasp.木霉ACCC-30791←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院饲料所;编号:avcF45;分离自秸秆,用于分解纤维素;培养基:0014;培养温度25-28℃;
放线菌:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:eompostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
细菌:
(6)Lactobacillussp.乳杆菌ACCC-03877←中国农业科学院饲料所;原始编号:B484;饲料用作添加剂,益生菌等;分离地点:北京市海淀区;培养基:0002;培养温度26℃;
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
(8)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-01698←中国农业科学院饲料所;原始编号:FRI2007004B241;饲料用植酸酶等的筛选;分离地点:浙江嘉兴鱼塘;培养基:0002;培养温度37℃;
(9)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-11025←中国农业科学院土肥所←山东聊城;原始编号:BHL-0201;专用于畜禽饲料添加剂;培养基:0002;培养温度30℃
制备方法具体步骤:
(1)菌种的提纯复壮和纯种繁殖:首先从中国农业微生物保存中心购回已经选定的三类9个沙土管菌种,接入试管培养基上,进行激活培养;再用培养皿平面培养,镜检菌种的纯度和活力,将附合要求的菌株进试管扩大培养;
(2)液体菌种的单菌种液体培养:将所述9个菌种的试管斜面菌种,分别进行三角瓶摇床进行液体菌液培养;采用20升发酵装置或50升不锈钢小型发酵罐,进行液体菌种的单菌液发酵培养和扩大;
(3)液体菌种的混合发酵培养:将九个菌种的菌液,同类各菌种按1∶1的菌液比例混合,分别制成同类混合菌液真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液;再将所述真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液按3∶2∶1重量份比例混合;该混合液放入500升或2000升发酵罐里的液体培养基中,进行发酵;所述混合菌液在所述液体培养基中的加入量为总重量的5%-10%;
(4)发酵产品的培养时间及最终标准控制:
所述发酵温度28℃-30℃,发酵36-48小时的,经过镜检,每毫升含菌量达到2亿时,停止加温;
(5)产品后发酵及成品包装:待温度自然下降到常温时,放入贮罐,等静放15天-20天以后装瓶,装箱进入成品库,即得所述高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂,也即农作物秸秆饲料生物浓缩母液成品。
为此,本实施例明还提供了一种高效安全的农作物秸秆饲料固体添加剂,是由所述发酵菌剂制备而得,制备方法,包括以下步骤:
在所述隧道式发酵器的工作原理:
堆料:首先将没有污染霉变的农作物秸秆,粉碎成1-2公分的块状和粉状物,放入隧道槽内,厚度约1-1.3米;
接种:将经过二次激活制备的所述浓缩(浓缩母液菌剂)洒在秸秆物料上;再用走动式搅拌机将秸秆物料上下搅拌两次,使菌液与物料混合均匀,有利于发酵;再用移动式镇压机将物料震压两次,被震压的物料厚度约1米,发酵温度约40℃;
覆膜:震压后的秸秆物料上面用活动式覆膜机覆盖一层塑料薄膜;覆膜机还要做到薄膜四周压入料内,造成秸秆厌氧发酵的环境。
排水与通风:隧道建造时,将打孔的40#钢管顺隧道长度,在隧道地平下安装四道排水与通风管道,可排出多余的水分;在秸秆物料发酵过程中,物料温度过高时,可以通过管道送入冷风降温,在气温较低时可通入暖风提高料温促进发酵快速进行;
打包装袋:经过4天的发酵过程,每毫升物料含5000万菌量后,达到成品的质量标准,及时打包或装袋。
所述制备方法还进一步包括以下步骤,①浓缩母液二次扩大生产液的制备方法:将5%-10%母液加入45℃的含10%-15%的糖蜜或红糖培养基,经过厌氧发酵3天或直接应用均可。所述二次扩大的生产用液体菌剂,是对浓缩母液稀释后再利用的一种节约有效的创新产品和方法。
实施例2
一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,由选自真菌、放线菌5个菌种培养发酵制备:
真菌:(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
(3)Trichodermasp.木霉ACCC-30791←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院饲料所;编号:avcF45;分离自秸秆,用于分解纤维素;培养基:0014;培养温度25-28℃;
放线菌:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:compostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
制备方法:同实施例1,不同在于:
(4)发酵产品的培养时间及最终标准控制:所述发酵温度28℃,发酵48小时。
本实施例隧道式半开放固体发酵器的通风与排水技术:隧道式半开放固体发酵器的整体结构是一个创新发明。这一结构简易科学,各地农村均可就地取材,在投入不大的情况下,可以满足一切技术规范和要求。在这个综合技术组合中,管道通风与排水系统设计和应用技术创新性更强。
实施例3
一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,真菌、放线菌和细菌三类7个菌种培养发酵制备:
本发明提供了,由选自
真菌:(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
(3)Trichodermasp.木霉ACCC-30791←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院饲料所;编号:avcF45;分离自秸秆,用于分解纤维素;培养基:0014;培养温度25-28℃;
放线菌:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:compostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
细菌:
(6)Lactobacillussp.乳杆菌ACCC-03877←中国农业科学院饲料所;原始编号:B484;饲料用作添加剂,益生菌等;分离地点:北京市海淀区;培养基:0002;培养温度26℃;
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
制备方法同实施例1,不同在于:
(4)发酵产品的培养时间及最终标准控制:
所述发酵温度30℃,发酵36小时;
本实施例生物固体添加剂肉牛增重试验:
实验分三组设置:生物固体添加剂秸秆料堆放发酵料一组,生物固体添加剂一组,氨化秸秆料一组,秸秆料对照一组。30头牛每组随意10头。
试验期7天内完成驱虫,健康检查,饲料适应性观测共60天,各组饲养管理条件相同,饲用秸秆料各处理粗物料组内自由采食,每一头每天喂精料1.4千克。
实验结果:
一、进食量试验,生物固体添加剂秸秆料组平均每头采食量5.46千克,比对照组提高27.57%,氨化组每头每日进食量5.24千克,比对照提高22.42%。
二、体重增重试验,生物固体添加剂料秸秆组平均每头日增重734.2克。比对照秸秆料组提高51.16%,比氨化组秸秆提高10.71%。
三、肉饲比试验:每增重1千克体重,生物固体添加剂秸秆料组,氨化组,对照料组分别消耗料2.08千克、2.13千克、3.24千克。
实施例4
一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,由选自真菌、细菌5个菌种培养发酵制备:
真菌:(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
细菌:
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
(8)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-01698←中国农业科学院饲料所;原始编号:FRI2007004B241;饲料用植酸酶等的筛选;分离地点:浙江嘉兴鱼塘;培养基:0002;培养温度37℃;
(9)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-11025←中国农业科学院土肥所←山东聊城;原始编号:BHL-0201;专用于畜禽饲料添加剂;培养基:0002;培养温度30℃
制备方法同实施例1.
本实施例1的生物固体添加剂使用方法:首先将各种饲料草打碎成短节,具体大小不限,用温水将草料调配成“手握成团,落地能散”的湿度,再加入15%的生物固体添加剂进行充分搅拌,混合均匀。推方一米厚度,用塑料薄膜覆盖即可。拌合好的秸秆草料可直接喂养牛羊,也可隔天饲喂,一般一次配料3-4天用完,免得需要。
实施例5
一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂,放线菌和细菌6菌种培养发酵制备:
放线菌:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:compostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
细菌为:
(6)Lactobacillussp.乳杆菌ACCC-03877←中国农业科学院饲料所;原始编号:B484;饲料用作添加剂,益生菌等;分离地点:北京市海淀区;培养基:0002;培养温度26℃;
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
(8)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-01698←中国农业科学院饲料所;原始编号:FRI2007004B241;饲料用植酸酶等的筛选;分离地点:浙江嘉兴鱼塘;培养基:0002;培养温度37℃;
(9)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-11025←中国农业科学院土肥所←山东聊城;原始编号:BHL-0201;专用于畜禽饲料添加剂;培养基:0002;培养温度30℃
制备方法同实施例1。
Claims (7)
1.一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,由选自真菌、放线菌和细菌九个菌种,或,任意二个菌类或者任意六个菌种:
所述真菌为:
(1)Myceliophthorathermophila(Apinis)vanOorschot嗜热毁丝霉ACCC-30571←中国农业科学院土肥所←美国典型物培养中心ATCC48102,纤维素降解菌;培养基:0014;培养温度45-60℃;
(2)MyrotheciumroridumTodeexFries露湿漆斑菌ACCC-30481←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所AS3.3682,纤维素分解菌;培养基:0014;培养温度25-28℃;
(3)Trichodermasp.木霉ACCC-30791←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院饲料所;编号:avcF45;分离自秸秆,用于分解纤维素;培养基:0014;培养温度25-28℃;
所述放线菌为:
(4)“Streptomycesalbocyaneus”(krasil′nikovetal.)Yanetal.白蓝链霉菌Accc-40132←中国农业科学院土肥所←中国科学院微生物所=AS4.63;抑制芽孢杆菌、腐生,不利用蔗糖,淀粉水解,纤维素上生长好;培养基:0012;培养温度30℃;
(5)SaccharomonosporaglaucaGreiner-Maietal.1988青色糖单孢菌ACCC-41055←DSMZ←H.J.Kutzner,K62(Saccharomonosporaviridis);=DSM43769=IFO14831,JCM7444,NBRC14831;降解纤维素;分离源:compostedgarbage;培养基:0455;培养温度37℃;
所述细菌为:
(6)Lactobacillussp.乳杆菌ACCC-03877←中国农业科学院饲料所;原始编号:B484;饲料用作添加剂,益生菌等;分离地点:北京市海淀区;培养基:0002;培养温度26℃;
(7)Lactobacillusalimentarius(exReuter1970)Reuter1983消化乳杆菌ACCC-10173←中国农业科学院土肥所←中国农业科学院畜牧所;原始编号:农RNL-1;微生态制剂;培养基:0006;培养温度37℃;
(8)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-01698←中国农业科学院饲料所;原始编号:FRI2007004B241;饲料用植酸酶等的筛选;分离地点:浙江嘉兴鱼塘;培养基:0002;培养温度37℃;
(9)Bacillussubtilis(Ehrenberg1835)Cohn1872枯草芽孢杆菌ACCC-11025←中国农业科学院土肥所←山东聊城;原始编号:BHL-0201;专用于畜禽饲料添加剂;培养基:0002;培养温度30℃。
2.权利要求1所述的一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,包括以下步骤:取沙土管菌种;菌种激活斜面试管菌种;培养皿平面菌种提纯复壮菌株;扩大斜面菌种;液体单菌种摇床培养;单菌体小罐升培养;单菌种液体中罐发酵培养;三类九个菌种大罐混合发酵培养;农作物秸秆饲料生物液体添加剂母液的生产;二次生产菌剂配制;农作物秸秆固体添加剂槽型隧道式发酵器的生产工艺;秸秆物料的物理处理方法及标准;固体物接上菌剂的接种;混合搅拌;机械震压;表面覆膜;自动排液;物料发酵;温度调节;湿度调节;成品打捆包装即得。
3.权利要求2所述的一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,进一步包括:
(1)菌种的提纯复壮和纯种繁殖:首所述沙土管菌种,试管培养基激活培养;培养皿平面培养;镜检;菌株试管扩大培养;
(2)液体菌种的单菌种液体培养:将所述菌种的试管斜面菌种,摇床液体菌液培养;
或,采用20升发酵装置或50升不锈钢小型发酵罐,进行液体菌种的单菌液发酵培养和扩大;
(3)液体菌种的混合发酵培养:将所述菌种的菌液,同类各菌种按1∶1的菌液比例混合,分别制成同类混合菌液真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液;再将所述真菌混合菌液、放线菌混合菌液、细菌混合菌液按3∶2∶1重量份比例混合;该混合液放入发酵罐里的液体培养基中,发酵;所述混合菌液在所述液体培养基中的加入量为总重量的5%-10%
(4)发酵产品的培养时间及最终标准控制:
所述发酵温度28℃-30℃,发酵36-48小时的;镜检,每毫升含菌量达到2亿时,停止加温;
(5)产品后发酵:自然降温,贮罐,静放15天-20天,即得。
4.一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,是由权利要求1的发酵菌剂制备而得。
5.权利要求4的一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法,包括以下步骤:
在所述隧道式半开放固体发酵器中的工作原理:
A堆料:将作物秸秆,粉碎,入隧道槽内,秸秆厚度约1-1.3米;
B接种:将经过二次激活制备的所述浓缩(浓缩母液菌剂)洒在秸秆物料上;将秸秆物料上下搅拌1-3次,使菌液与物料混合均匀;将物料震压1-3次,被震压的物料厚度约1米,发酵温度25℃-55℃;
所述二次扩大培养菌剂,是采用含12%-16%糖蜜的无菌水做培养基,加入5%-10%的浓缩菌剂母液,在培养基温度保持在40℃-45℃下均匀发酵而成。
C覆膜:震压后的秸秆物料上面覆盖塑料薄膜;
D排水与通风:所述隧道槽内顺隧道长度方向设有打孔的钢管;在所述隧道地平下设有四道排水与通风管道;
E打包装袋:发酵3-5天,每毫升物料含5000万菌量后,达到成品的质量标准,打包或装袋即得所述固体添加剂。
6.权利要求5的一种高效安全的农作物秸秆饲料发酵菌剂、其固体添加剂及制备方法使用的隧道式固体半开放发酵器,包括:砖混发酵器、永久性固定槽体;所述发酵槽底顺长度设置四根排水与通风管道;
所述槽顶部设有走动式搅拌机、移动式震压机、活动式覆膜机。
7.根据权利要求6的的隧道式固体半开放发酵器,所述槽体为长槽型。
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