CN105052891A - 解剖学内脏标本的长期保存方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：内脏冲洗干净后，将其动脉灌注并浸泡在预处理液中，0.04～0.08Mpa真空度下处理后，于常压下浸泡3～5h，其中所述预处理液包括40～50wt％的乙醇、5～8wt的甘油、3～5wt％的硝酸钾、40～55wt％的水；最后将保存液经动脉灌注进入所述内脏，并将所述内脏浸泡在保存液中，每间隔2h于0.02～0.05Mpa真空度下处理20～30min后，密封放置，其中，所述保存液包括1～5wt％的戊二醛、0.5～3wt％的ε-聚赖氨酸、1～2wt％的乳酸钠、0.5～1.5wt％的葡萄糖酸钠、2～4wt％的丙二醇及85～95wt％的水。

Description

解剖学内脏标本的长期保存方法

技术领域

本发明涉及一种解剖学内脏标本的保存方法。更具体地说，本发明涉及一种可长期维持内脏原有外观形态且于人体无刺激性的解剖学内脏标本的长期保存方法。

背景技术

人体解剖学是研究人体形态结构的一门科学，其与生理学、病理学、药理学、病原微生物学等基础医学及大多数临床医学关系密切，在解剖学中标本作为一种直观的教学工具发挥着重要的作用。

目前在解剖学标本的防腐固定保存液中，福尔马林溶液是常用的一种化学试剂，其穿透力强，对器官组织的固定硬化程度高，可有效保持标本的原有形态，并且杀菌能力强，可抑制霉菌的生长。但福尔马林溶液也有着明显的缺陷，其所固定保存的组织标本易发硬变脆，肌肉纤维易被拉断，不利于后续的解剖研究操作，而且还有强烈的刺激性，对眼结膜、呼吸道粘膜及经常接触的皮肤均有一定的损害，直接危害着解剖教学人员的身体健康。

此外，在内脏组织尤其是含气组织标本的制作过程中，内脏内部空气的残留，会使组织结构得不到彻底的固定而导致的后期组织结构变形问题，影响了对内脏组织正常形态的研究和观察。

发明内容

作为各种广泛且细致的研究和实验的结果，本发明的发明人已经发现，在解剖学内脏标本的制作过程中，间歇性的在一定真空度下进行操作处理，并在含有戊二醛和多赖氨酸的保存液中进行长期保存，可有效保持内脏轮廓结构的清晰完好，无皱缩、膨胀、发霉等问题。基于这种发现，完成了本发明。

本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是通过提供一种解剖学内脏标本的长期保存方法，提高标本的保存时间和保存质量，以维持标本的原始状态，利于后期内脏形态学和组织学的研究和观察。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其2～3倍体积的预处理液中，0.04～0.08Mpa真空度下处理10～15min后，在常压下浸泡3～5h，其中所述预处理液包括40～50wt％的乙醇、5～10wt％的乙酸、3～6wt的甘油、3～5wt％的硝酸钾、30～50wt％的水，

使用乙醇对内脏标本进行固定，乙醇组织渗透能力较强，固定迅速，但乙醇对组织有一定的收缩性，乙酸的配合使用则可有效避免这一现象，以保持组织标本外观的原有状态，在预处理液浸泡的过程中进行真空处理，用以充分排出内脏内部的空气，在负压状态下将空气替换为预处理液，保证内脏内部空间与预处理液的成分的充分接触，提高固定效果，此外硝酸钾的加入进一步提高了预处理液的渗透能力，提高了固定效果，甘油的加入则提高了内脏标本的柔韧性，降低了由于固化对内脏标本带来的硬化副作用；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，经动脉灌注保存液进入所述内脏，并将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.02～0.05Mpa真空度下处理20～30min，真空处理的总次数为2～3次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封放置，

其中，所述保存液包括1～5wt的戊二醛、0.5～2wt％的ε-ε-聚赖氨酸、1～2wt％的乳酸钠、0.5～1.5wt％的葡萄糖酸钠、2～4wt％的丙二醇及85～95wt％的水，

其中，戊二醛对内脏组织穿透能力较强，且有很好的杀菌作用，在解剖内脏标本的防腐保存方面性能优越，但其有一定的自聚现象，一般放置2个月左右，其抑菌效果即开始出现明显的下降，ε-聚赖氨酸的加入可起到协同增效的作用，其与戊二醛可发生适当的交联，明显改善体系的稳定性，

此外，戊二醛并不破坏内脏细胞膜的半透膜特性，对细胞膜的固定效果差，而ε-聚赖氨酸可以在一定程度上破坏细胞膜的稳定性，提高其渗透性，且并不改变细胞的形状，从而有利于戊二醛对细胞膜的固定作用，提高内脏标本的保存时间及其外观原始状态的维持，

此外，乳酸钠的加入可以提高ε-聚赖氨酸的抑菌效果，葡萄糖酸钠的加入可有效抑制内脏标本保存时的膨胀，丙二醇的添加可进一步提高体系的稳定性，保持标本色彩的自然状态，

此外，将内脏标本浸泡在所述保存液中后，首先在一定真空度下处理2～3次，由于内脏经预处理固定后，其内部的空隙已基本成型，所以仅需在较低的真空度0.02～0.05Mpa下，即可使内脏充分浸润在预处理液中，利于解剖内脏标本的长期保存。

优选的是，其中，所述内脏共经步骤二预处理3次，每次预处理前均更换新鲜的预处理液，以提高固定效果，利于长期保存。

优选的是，其中，所述ε-聚赖氨酸的分子量为3200～4200，优选3800～4000，当聚赖氨酸的聚合度过低，即分子量低于2500时，其与戊二醛的协同杀菌能力即发生明显下降，影响内脏标本的长期保存。

优选的是，其中，容纳所述内脏和保存液的容器置于10～15℃(优选12℃)的环境中，以维持内脏细胞结构的良好形态。

优选的是，其中，所述保存液每18～22个月进行更换一次，以保证保存的效果。

本发明至少包括以下有益效果：

(1)乙醇和乙酸配合使用对内脏标本进行预处理，组织渗透能力较强，固定迅速，内脏组织无收缩性，此外硝酸钾的加入进一步提高了预处理液的渗透能力，提高了固定效果，甘油的加入提高了内脏标本的柔韧性，降低了由于固化对内脏标本带来的硬化副作用；

(2)保存液中戊二醛和ε-聚赖氨酸配合使用，明显改善了保存体系的稳定性及抑菌效果，而且提高了单一戊二醛对细胞膜的固定作用，有效提高内脏标本的保存时间及其外观原始状态的维持；

(3)在内脏标本的制作过程中，间歇性的进行真空处理，以充分排出内脏内部的空气，在负压状态下将空气替换为预处理液或保存液，利于内脏在长期保存过程中轮廓结构完好状态的维持；

(4)本发明方法简单易行，预处理液和保存液均液无刺激性，于操作人员无害，且保存的内脏标本色泽自然，质地柔软，无霉变现象，制作得到的标本质量高。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

〈实例1〉

一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其2倍体积的预处理液中，0.04Mpa真空度下处理10min后，在常压下浸泡3h，然后更换新鲜的预处理液重复本步骤3次，其中所述预处理液包括40wt％的乙醇、8wt％的甘油、5wt％的硝酸钾、47wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.02Mpa真空度下处理20min，真空处理的总次数为2次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封，置于10℃的环境中，所述保存液每18个月进行更换一次，其中，所述保存液包括1wt％的戊二醛、0.5wt％的ε-聚赖氨酸、2wt％的乳酸钠、1.5wt％的葡萄糖酸钠、4wt％的丙二醇及91wt％的水，其中所述ε-聚赖氨酸的分子量为3200。

〈实例2〉

一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其3倍体积的预处理液中，0.08Mpa真空度下处理15min后，在常压下浸泡5h，然后更换新鲜的预处理液重复本步骤3次，其中所述预处理液包括50wt％的乙醇、5wt％的甘油、5wt％的硝酸钾、40wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.05Mpa真空度下处理30min，真空处理的总次数为3次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封，置于15℃的环境中，所述保存液每22个月进行更换一次，其中，所述保存液包括5wt％的戊二醛、3wt％的ε-聚赖氨酸、1wt％的乳酸钠、0.5wt％的葡萄糖酸钠、2wt％的丙二醇及88.5wt％的水，其中所述ε-聚赖氨酸的分子量为4200。

〈实例3〉

一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其3倍体积的预处理液中，0.05Mpa真空度下处理12min后，在常压下浸泡4h，然后更换新鲜的预处理液重复本步骤3次，其中所述预处理液包括45wt％的乙醇、7wt％的甘油、4wt％的硝酸钾、44wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.03Mpa真空度下处理25min，真空处理的总次数为3次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封，置于12℃的环境中，所述保存液每20个月进行更换一次，其中，所述保存液包括3wt％的戊二醛、2wt％的ε-聚赖氨酸、1.5wt％的乳酸钠、1wt％的葡萄糖酸钠、3wt％的丙二醇及89.5wt％的水，其中所述ε-聚赖氨酸的分子量为3900。

〈实例4〉

一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其2倍体积的预处理液中，0.07Mpa真空度下处理11min后，在常压下浸泡3.5h，然后更换新鲜的预处理液重复本步骤3次，其中所述预处理液包括40wt％的乙醇、5wt％的甘油、3wt％的硝酸钾、52wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.04Mpa真空度下处理23min，真空处理的总次数为2次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封，置于13℃的环境中，所述保存液每19个月进行更换一次，其中，所述保存液包括2wt％的戊二醛、0.7wt％的ε-聚赖氨酸、1.2wt％的乳酸钠、1.2wt％的葡萄糖酸钠、2.9wt％的丙二醇及92wt％的水，其中所述ε-聚赖氨酸的分子量为3800。

〈实例5〉

一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其2倍体积的预处理液中，0.06Mpa真空度下处理14min后，在常压下浸泡4.5h，然后更换新鲜的预处理液重复本步骤3次，其中所述预处理液包括43wt％的乙醇、7wt％的甘油、3wt％的硝酸钾、47wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.03Mpa真空度下处理28min，真空处理的总次数为2次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封，置于14℃的环境中，所述保存液每21个月进行更换一次，其中，所述保存液包括4wt％的戊二醛、2.8wt％的ε-聚赖氨酸、1.7wt％的乳酸钠、1.4wt％的葡萄糖酸钠、3.5wt％的丙二醇及86.6wt％的水，其中所述ε-聚赖氨酸的分子量为3600。

为了说明本发明的效果，发明人提供比较实验如下：

〈比较例1〉

在步骤2中，对所述内脏动脉灌注并浸泡在3倍预处理液中，在常压下浸泡5h，中间不进行真空处理，其余参数与实例2中的完全相同，工艺过程也完全相同。

〈比较例2〉

步骤3中，将保存液经动脉灌注进入所述内脏，然后将所述内脏浸泡在所述保存液中后，不进行真空处理，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封放置，其余参数与实例3中的完全相同，工艺过程也完全相同。

〈比较例3〉

步骤3中，所述保存液包括2wt％的戊二醛、1.2wt％的乳酸钠、1.2wt％的葡萄糖酸钠、2.9wt％的丙二醇及92.7wt％的水，其余参数与实例4中的完全相同，工艺过程也完全相同。

〈比较例4〉

步骤3中，所述保存液包括4wt％的戊二醛、2.8wt％的ε-聚赖氨酸、1.7wt％的乳酸钠、3.5wt％的丙二醇及88wt％的水，其余参数与实例5中的完全相同，工艺过程也完全相同。

所述解剖学标内脏本分别经上述各实施例和对比例处理后，密封保存20个月后，观察各保存液中内脏标本的状态并对保存液在430nm下的透光率进行检测，各内脏标本保存效果的比较结果见表1：

表1各实例和比较例对内脏标本保存效果的比较

从上表1能够看出，在解剖学内脏标本的制作过程中，间歇性的在一定真空度下进行处理，并在含有戊二醛和多赖氨酸的保存液中进行长期保存，可有效保持内脏轮廓结构的清晰完好，无皱缩、膨胀、发霉等问题。

比较例1与实例相比，内脏标本预处理固定时不进行真空处理，由于少许空气的残留，内脏标本内部没有得到彻底的固定，经长期保存后，内脏保本有轻微有萎缩现象；

比较例2与实例相比，内脏浸泡在所述保存液中后不进行真空处理操作，空气没有得到充分的排除，经长期保存后，内脏标本有轻微有萎缩现象，且保护液有浑浊现象，透光率下降；

比较例3与实例相比，保存液中不添加ε-聚赖氨酸，其防腐抑菌效果明显变差，经长期保存后，有明显霉变现象，保存液浑浊，透光差，且标本外观色泽加深；

比较例4与实例相比，保存液中不添加葡萄糖酸钠，内脏标本有轻微肿胀现象，标本外观色泽较原始状态偏深，这说明葡萄糖酸钠的添加在一定程度上还可以保护标本的原有色泽不被破坏。

可见，乙醇和乙酸配合使用对内脏标本进行预处理，组织渗透能力较强，固定迅速，内脏组织无收缩性，此外硝酸钾的加入进一步提高了预处理液的渗透能力，提高了固定效果，甘油的加入提高了内脏标本的柔韧性，降低了由于固化对内脏带来的硬化副作用；

此外，保存液中戊二醛和ε-聚赖氨酸配合使用，明显改善了保存体系的稳定性及抑菌效果，而且提高了单一戊二醛对细胞膜的固定作用，有效提高内脏标本的保存时间及其外观原始状态的维持；

此外，在内脏标本的制作过程中，间性的进行真空处理，以充分排出内脏内部的空气，在负压状态下将空气替换为预处理液或保存液，利于内脏在长期保存过程中轮廓结构完好状态的维持；

此外，本发明方法简单易行，预处理液和保存液均液无刺激性，于操作人员无害，且保存的内脏标本色泽自然，质地柔软，无霉变现象，标本质量高。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用。它完全可以被适用于各种适合本发明的领域。对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改。因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的具体实施方式。

Claims (7)

1.一种解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：将内脏经动脉灌水冲洗干净；

步骤2：对所述内脏动脉灌注并浸泡在其2～3倍体积的预处理液中，0.04～0.08Mpa真空度下处理10～15min后，在常压下浸泡3～5h，其中所述预处理液包括40～50wt％的乙醇、5～8wt％的甘油、3～5wt％的硝酸钾、40～55wt％的水；

步骤3：将所述预处理液用清水冲洗干净后，经动脉灌注保存液进入所述内脏，并将所述内脏浸泡在所述保存液中，每间隔2h于0.02～0.05Mpa真空度下处理20～30min，真空处理的总次数为2～3次，然后将容纳所述内脏和保存液的容器密封放置，

其中，所述保存液包括1～5wt％的戊二醛、0.5～3wt％的ε-聚赖氨酸、1～2wt％的乳酸钠、0.5～1.5wt％的葡萄糖酸钠、2～4wt％的丙二醇及85～95wt％的水。

2.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，所述内脏共经步骤二预处理3次，每次预处理前均更换新鲜的预处理液。

3.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，所述ε-聚赖氨酸的分子量为3200～4200。

4.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，所述ε-聚赖氨酸的分子量为3800～4000。

5.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，所述浸泡在所述保存液中的内脏置于10～15℃的环境中。

6.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，容纳所述内脏和保存液的容器置于12℃的环境中。

7.如权利要求1所述的解剖学内脏标本的长期保存方法，其特征在于，所述保存液每18～22个月进行更换一次。