CN104940950B - 一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,属于生物医药领域。所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物的结构为A‑B‑C‑D,其中,A为光动力学治疗光敏剂,B为含正电荷的细胞穿膜肽片段,C为基质金属蛋白酶特异性识别多肽片段,D为含负电荷的多肽片段。本发明公开的多肽光敏剂键合物可以显著提高光动力学治疗光敏剂在生理条件下的稳定性,极大的减少光动力学治疗光敏剂的毒副作用。本发明可以显著提高光动力学治疗光敏剂跨越细胞膜的特性,提高了光敏剂对肿瘤靶向的特性。本发明可以实现光敏剂在血液中的循环,从而使治疗药物在肿瘤区域有效富集,实现肿瘤的有效抑制,对于肿瘤的诊断成像和靶向治疗具有重要意义和广泛应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物医药领域,具体涉及一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物。
背景技术
癌症是威胁人类健康的重大疾病之一。癌症的靶向治疗可以极大的提高药物利用率,提高治疗效果,降低药物毒副作用。因此,癌症的靶向治疗成为近年来医疗和学术研究领域的热点课题。光动力学治疗是一种安全和非侵入性的肿瘤治疗方式,在光敏剂和氧的存在下,通过一定波长的光激发,光敏剂能将激发态的能量传递给氧而形成具有强氧化性的单线态氧或活性自由基,进而对生物大分子氧化,破坏其生理作用,导致细胞坏死或者凋亡,从而实现肿瘤治疗的目的。光动力学治疗已经被广泛应用到膀胱癌、食道癌、皮肤癌、老年性黄斑变性等癌症疾病的治疗。直至2009年,FDA认证的光动力学治疗药物有
为了提高光动力学治疗的效率,在过去的研究过程中,研究重点放在提高光动力学治疗药物的溶解性,设计合成新的光动力学治疗药物分子,提高光动力学治疗光敏剂能量转换效率,增加光敏剂吸收光对组织的穿透性。但是,随着光动力学治疗的应用发现,光动力学治疗效率的进一步提高仍然被局限,首先是因为光敏剂在生理环境中的稳定性和溶解性差,导致光敏剂的聚集,从而使其产生单线态氧的量子产率急剧降低,并且导致极大的暗毒性。其次是光敏剂通过能量转移产生的活性自由基具有极大的反应活性,而在复杂的生理环境条件下具有较短的扩散距离,其中重要的1O2在生理环境条件下的半衰期为<40ns,扩散距离为<20nm,导致具有强氧化性的自由基不能有效的和目标分子作用,从而导致治疗效率的降低。同时,传统而有效的光动力学治疗光敏剂缺乏肿瘤治疗的选择性,从而对正常组织和器官产生极大的毒副作用,甚至导致治疗的失败。因此,通过分子或者载体设计,改变光敏剂的物化性质,提高光敏剂的溶解性和肿瘤靶向特性,降低光敏剂的暗毒性,增强光敏剂的跨膜特性,将进一步提高对肿瘤的光动力学治疗的效果。
多肽是一类由特定的氨基酸按照一定序列组合而成的具有良好生物相容性和特殊生理活性的物质,被广泛应用到肿瘤靶向、分子识别、酶检测等领域。其中,富含精氨酸序列的细胞穿膜肽可以有效的实现药物的跨膜运输,已经被广泛应用到基因、化疗药物、放疗药物向细胞内的运载。但是,此类穿膜肽由于富含正电荷,导致其在血液循环过程中与血液中富含的蛋白作用和吸附,导致严重的毒副作用,因此难以在生物体中实现对小分子的跨膜运输。同时,细胞穿膜肽对细胞没有特异性的识别作用,从而导致正常细胞的大量摄取,从而导致对细胞的破坏和杀伤没有选择性。因此,设计和合成可以应用到生物体中的,同时具有肿瘤靶向和跨膜运输的药物载体对提高肿瘤治疗效果具有极大的意义。
基质金属蛋白酶是一种细胞外基质酶,通过降解细胞外基质蛋白,导致肿瘤的侵入和转移。因此,基质金属蛋白酶被广泛应用到肿瘤的诊断和治疗靶向,从而实现对肿瘤的早期检测和特异性治疗。而传统的药物载体都是通过利用基质金属蛋白酶对多肽的特异性识别和切断作用,实现对载体药物分子的控释,而施放的小分子通常通过扩散的方式实现跨膜运输,因此不能有效的实现在细胞内的富集。因此,设计和合成具有肿瘤特异性靶向,并且可以促进释放载体分子有效的跨膜运输将极大的有利于肿瘤的抑制和治疗。
发明内容
为解决现有技术的缺点与不足,本发明的目的在于提供一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物。
本发明的目的通过下述技术方案实现:
一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其结构如下式所示:
A-B-C-D
式中,A为光动力学治疗光敏剂,B为含正电荷的细胞穿膜肽片段,C为基质金属蛋白酶特异性识别多肽片段,D为含负电荷的多肽片段。
所述的光动力学治疗光敏剂优选为酞菁类光敏剂或卟啉类光敏剂。
所述的含正电荷的细胞穿膜肽片段优选为如下多肽片段中的一种:精氨酸-赖氨酸-赖氨酸-精氨酸-精氨酸-谷氨酰胺-精氨酸-精氨酸-精氨酸,[精氨酸]n(n=6~12,n为整数)。
所述的基质金属蛋白酶特异性识别多肽片段优选为如下多肽片段中的一种:脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-缬氨酸-精氨酸,脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-亮氨酸-丙氨酸-甘氨酸,脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-半胱氨酸-丙氨酸-甘氨酸,甘氨酸-脯氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-缬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-赖氨酸-甘氨酸-谷氨酸-谷氨酰胺。
所述的含负电荷的多肽片段优选为如下多肽片段中的一种:[天冬氨酸]n(n=6~12,n为整数),[谷氨酸]n(n=6~12,n为整数),[天冬氨酸]n-[谷氨酸]m(n=0~12,m=0~12,n为整数);或为主要包含天冬氨酸或谷氨酸的多肽片段。
所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物中B和C通过1~3个甘氨酸连接。
所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物的制备方法,采用多肽固相合成的方法。
本发明的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物对于基质金属蛋白酶过度表达的肿瘤区域具有良好的靶向治疗作用。肿瘤靶向是通过肿瘤区域基质金属蛋白酶识别和切断其特异性识别多肽从而改变多肽光敏剂键合物的穿膜特性来实现。含正电荷的细胞穿膜肽片段和含负电荷的多肽片段在分子内能通过静电吸附作用形成稳定的复合物。本发明的多肽光敏剂键合物可以实现血液循环,并且采用具有良好的组织穿透性的600nm~800nm激光进行治疗,可以广泛的应用于肿瘤的诊断成像、肿瘤治疗的药物传递。
本发明具有如下优点和效果:1)整个合成过程采用固相多肽合成技术,制备方法简单,提纯过程简便。2)通过引入多肽片段,可以显著改善光动力学治疗光敏剂的溶解性和生理条件下的稳定性,降低光敏剂的暗毒性。3)肿瘤区域基质金属蛋白特异性识别多肽的引入,可以实现肿瘤区域光动力学治疗光敏剂的靶向富集。4)含正电荷的穿膜肽片段可以有效提高光敏剂的穿膜效率,实现光敏剂的跨膜运载。5)带负电荷的多肽片段可以有效提高整个分子在血液循环中的稳定性,减少循环过程中与蛋白的非特异性吸附导致的毒性,提高光敏剂肿瘤靶向运输的能力。6)通过在特定时间的一定强度的光照,该光敏剂键合物相较于单独的光敏剂本身具有更好的体内肿瘤抑制效果。7)光敏剂通过血液循环在肿瘤区域有一定的富集之后,通过一定时间一定强度的光照,可以实现肿瘤的有效抑制。8)该多肽光敏剂键合物可以被广泛应用到肿瘤的早期诊断,药物分子的肿瘤靶向运输,肿瘤的选择性治疗,具有广泛的实用性价值。
附图说明
图1是流式细胞术定量分析HT 1080细胞对于光敏剂(原卟啉)和光敏剂键合物的内吞效果图,图中PpIX-A-和PpIX-A+分别为含原卟啉(PpIX)荧光低于和高于104的细胞百分数。
图2是HT 1080细胞中光诱导多肽光敏剂键合物产生的单线态氧氧化二氯荧光素二甲酯单线态氧探针导致的荧光恢复的激光共聚焦显微图。
图3是光敏剂和光敏剂键合物对于HT 1080细胞的暗毒性和光毒性结果图,其中左图为暗毒性,右图为光毒性。
图4是光敏剂和光敏剂键合物对于SCC-7细胞的暗毒性和光毒性结果图,其中左图为暗毒性,右图为光毒性。
图5是HT 1080肿瘤体积在光动力学治疗期间的变化图。
图6是光动力学治疗后HT 1080肿瘤的质量统计图。
图7是SCC-7肿瘤体积在光动力学治疗期间的变化图。
图8是光动力学治疗后SCC-7肿瘤的质量统计图。
具体实施方式
以下实施例用于进一步说明本发明的内容,但不应理解为对本发明的限制,在不背离本发明精神和实质的情况下,对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换均属于本发明的范围。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1
含正电荷的多肽光敏剂键合物(原卟啉-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-甘氨酸-脯氨酸-亮氨酸,LPGR9-PpIX)的合成:
(1)往装有10mL重蒸过的N,N-二甲基甲酰胺的反应器中加入0.5g 2-氯-三苯甲基氯树脂(1.05mmol/g),待2-氯-三苯甲基氯树脂在N,N-二甲基甲酰胺中溶胀2h后抽除N,N-二甲基甲酰胺。
(2)将FMOC保护的亮氨酸(树脂活性位点的4倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(氨基酸的4倍当量)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中,再加到反应器中室温反应2h将亮氨酸键合到树脂上,抽除溶剂,N,N-二甲基甲酰胺洗涤2~4次。
(3)将甲醇/N,N-二甲基甲酰胺/N,N-二异丙基乙胺按照1:7:2(V/V/V)的比例配制溶液10mL加入反应器中,室温反应1h将树脂上未反应的活性位点封端,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(4)往反应器中加入20%(V/V)哌啶/N,N-二甲基甲酰胺(即哌啶与N,N-二甲基甲酰胺体积比为2:8)溶液10mL,室温反应15min后,抽除溶剂;重复加入哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液进行反应以切落FMOC保护基,反应结束后,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(5)将FMOC保护的氨基酸(脯氨酸)(树脂活性位点的4倍当量)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(树脂活性位点的4.8倍当量)、1-羟基苯并三氮唑(树脂活性位点的4.8倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(树脂活性位点的8倍当量)溶于N,N-二甲基甲酰胺中,加入反应器中室温反应2h将脯氨酸键合上去,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(6)其他的氨基酸按照步骤(4)(5)逐一键合上去。
(7)将原卟啉(PpIX)(树脂活性位点的3倍当量)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(树脂活性位点的3.6倍当量)、1-羟基苯并三氮唑(树脂活性位点的3.6倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(树脂活性位点的6倍当量)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入反应器中室温反应12h将原卟啉键合上去,抽除溶剂,依次用N,N-二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂2~4次。
(8)往反应器中加入由如下体积百分含量的组分组成的溶液于室温下作用2h以切落2-氯-三苯甲基氯树脂上的多肽键合物及侧基:83%三氟乙酸、4.6%水、4.6%苯甲硫醚、2.1%乙二硫醇、5.7%苯酚。
(9)收集切落液,旋蒸,真空干燥得到LPGR9-PpIX,于-20℃避光保存。
实施例2
含正电荷的[精氨酸]9多肽(细胞穿膜肽)、负电荷的[谷氨酸]8多肽和基质金属蛋白酶特异性识别多肽脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-亮氨酸-丙氨酸-甘氨酸的光敏剂键合物(原卟啉-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-精氨酸-甘氨酸-脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-亮氨酸-丙氨酸-甘氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸-谷氨酸,U-PpIX)的合成:
(1)往装有10mL重蒸过的N,N-二甲基甲酰胺的反应器中加入0.5g 2-氯-三苯甲基氯树脂(1.05mmol/g),待2-氯-三苯甲基氯树脂在N,N-二甲基甲酰胺中溶胀2h后抽除N,N-二甲基甲酰胺。
(2)第一个氨基酸键合到树脂上:将FMOC保护的谷氨酸(树脂活性位点的4倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(氨基酸的4倍当量)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入反应器中室温反应2h将谷氨酸键合到树脂上,抽除溶剂,N,N-二甲基甲酰胺洗涤2~4次。
(3)将甲醇/N,N-二甲基甲酰胺/N,N-二异丙基乙胺按照1:7:2(V/V/V)的比例配制溶液10mL加入反应器中,室温反应1h将树脂上未反应的活性位点封端,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(4)往反应器中加入20%(V/V)哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液10mL,室温反应15min后,抽除溶剂;重复加入哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液进行反应以切落FMOC保护基,反应结束后,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(5)将FMOC保护的氨基酸(谷氨酸)(树脂活性位点的4倍当量)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(树脂活性位点的4.8倍当量)、1-羟基苯并三氮唑(树脂活性位点的4.8倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(树脂活性位点的8倍当量)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入反应器中室温反应2h将谷氨酸键合上去,抽除溶剂,用N,N-二甲基甲酰胺洗涤树脂2~4次。
(6)其他的氨基酸按照步骤(4)(5)逐一键合上去。
(7)将原卟啉(PpIX)(树脂活性位点的3倍当量)、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(树脂活性位点的3.6倍当量)、1-羟基苯并三氮唑(树脂活性位点的3.6倍当量)、N,N-二异丙基乙胺(树脂活性位点的6倍当量)溶于10mL N,N-二甲基甲酰胺中,加入反应器中室温反应12h将原卟啉键合上去,抽除溶剂,依次用N,N-二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂2~4次。
(8)往反应器中加入由如下体积百分含量的组分组成的溶液于室温下作用2h以切落2-氯-三苯甲基氯树脂上的多肽键合物及侧基:83%三氟乙酸、4.6%水、4.6%苯甲硫醚、2.1%乙二硫醇、5.7%苯酚。
(10)收集切落液,旋蒸,真空干燥得到U-PpIX,于-20℃避光保存。
U-PpIX被基质金属蛋白酶识别切断后的产物与实施例1中的LPGR9-PpIX相同。
实施例3
人纤维肉瘤(HT 1080)细胞以1×105个细胞/孔的密度接种在6孔板中,37℃条件下在1mL RPMI-1640培养基中培养。24h后,分别在6孔板各孔中加入1mL溶解在培养基中的相当于10mg/L PpIX浓度当量的PpIX、LPGR9-PpIX、U-PpIX,同时设空白对照(加入1mL培养基)。内吞1h结束后,分别用PBS将孔中的PpIX、LPGR9-PpIX或U-PpIX洗涤干净,然后用0.25%的胰蛋白酶消化1min。低速离心,用PBS洗涤细胞三次,最后将细胞重新分散在0.3mLPBS中,用流式细胞仪对细胞中内吞的PpIX或者PpIX键合物进行测量,Flowjo 7.6软件对细胞中内吞的PpIX或者PpIX键合物进行量化分析。
结果见图1:含有正电荷多肽的LPGR9-PpIX键合物能够增强原卟啉在HT 1080细胞中的内吞;而对于具有基质金属蛋白酶过度表达的HT 1080细胞,U-PpIX能够增加原卟啉在细胞中的内吞,但又弱于LPGR9-PpIX在细胞中的内吞,证明U-PpIX引入的负电荷多肽能够一定程度上抑制含细胞穿膜肽的光敏剂在细胞中的非特异性内吞。
实施例4
HT 1080细胞接种在共聚焦小皿中,加入1mL溶解在RPMI-1640培养基中相当于10mg/LPpIX浓度当量的U-PpIX。37℃共培养1h后,吸出培养基并且用培养基将细胞洗涤干净,将0.5μM的二氯荧光素二甲酯(DCFH-DA)单线态氧荧光探针1μL溶解在1mL培养基中,与细胞共培养1h。用PBS将细胞洗涤三次后加入新的培养基,用激光共聚焦显微镜观察光照前细胞内的荧光,然后用白光照射细胞15min,再观测细胞光照后的荧光变化。
结果见图2:与U-PpIX共培养后,没有继续与二氯荧光素二甲酯共培养的细胞和继续与二氯荧光素二甲酯共培养但是没有经过光照的细胞都没有绿色荧光的增强,但是即与U-PpIX共培养,又与二氯荧光素二甲酯共培养,并且引入光激发光敏剂产生单线态氧,细胞呈现很强的绿色荧光。
实施例5
HT 1080细胞以6000个细胞/孔的密度接种在96孔板中,用100μL培养基培养24h。然后,将用培养基配制的PpIX、LPGR9-PpIX和U-PpIX浓度梯度溶液100μL加入到各孔中。培养2h后,吸出培养基,加入200μL新的培养基。避光培养24h后,吸出培养基,加入200μL新的培养基,同时加入20μL 5mg/mL的MTT(MTT溶解在PBS缓冲液中)。共培养4h后,吸出培养基,加入150μL二甲亚砜(DMSO)。酶标仪测量每个孔中570nm处的吸光值,计算细胞存活率,进而得到各材料对HT 1080细胞的暗毒性。而光毒性的测量方法为,在吞噬材料2h后,吸出培养基,加入新的培养基过后,白光照射细胞1h,避光培养23h,然后按照暗毒性相同的方法处理得到各材料对HT 1080细胞的光毒性。
结果见图3:原卟啉对细胞具有较强的暗毒性,而引入多肽片段后,不论是LPGR9还是E8GALGLPGR9(U-PpIX的多肽片段序列)都可以降低原卟啉对于细胞的暗毒性。而对于光毒性,U-PpIX的光毒性低于同浓度下LPGR9-PpIX的光毒性,是由于U-PpIX内吞程度较LPGR9-PpIX低的原因,此结果与实施例3中的结果相符合;而PpIX光毒性较强的原因是受到它较强暗毒性和光毒性同时作用的影响。
实施例6
鳞状上皮癌(SCC-7)细胞以6000个细胞/孔的密度接种在96孔板中,用100μL DMEM培养基培养24h。然后,将用培养基配制的PpIX、LPGR9-PpIX和U-PpIX浓度梯度溶液100μL加入到各孔中。培养2h后,吸出培养基,加入200μL新的培养基。避光培养24h后,吸出培养基,加入200μL新的培养基,同时加入20μL 5mg/mL的MTT。共培养4h后,吸出培养基,加入150μLDMSO。酶标仪测量每个孔中570nm处的吸光值,计算细胞存活率,进而得到各材料对SCC-7细胞的暗毒性。而光毒性的测量方法为,在吞噬材料2h后,吸出培养基,加入新的培养基过后,白光照射细胞1h,避光培养23h,然后按照暗毒性相同的方法处理得到各材料对SCC-7细胞的光毒性。结果见图4,其原因与HT 1080细胞相同。
实施例7
4~5周裸鼠(BALB/c-nu)在大腿外侧皮下注射100μL(PBS)含细胞个数为1×106的HT 1080细胞悬液造瘤,当肿瘤体积长到约100mm2时,将裸鼠随机分为四组。PBS和PpIX、LPGR9-PpIX、U-PpIX分别为对照组和实验组,其中,向每只裸鼠每次瘤内注射100μL用PBS溶解的相当于包含125μg PpIX当量材料的溶液。瘤内注射两小时过后,用660nm He-Ne激光照射肿瘤,每只每次10min。每只小鼠每三天治疗(注射、激光照射)一次,期间每天测量肿瘤体积,肿瘤体积按照V=W2×L/2公式计算,其中W为较短的肿瘤宽度,L为较长的肿瘤宽度,通过相对肿瘤体积(V/V0,V为实时肿瘤体积,V0为治疗前肿瘤体积)来反映肿瘤体积的变化情况。结果见图5:U-PpIX和LPGR9-PpIX对于肿瘤具有较好的抑制作用,12天治疗结束时,肿瘤得到有效的抑制,PpIX对于肿瘤同样有一定的抑制作用,但是相较于U-PpIX和LPGR9-PpIX,抑制作用较弱,肿瘤并没有完全被消除。
12天光动力学治疗过后,将对照组和实验组裸鼠处死,并将肿瘤剥离,称量相对应的肿瘤质量。结果见图6:经过治疗后,U-PpIX和LPGR9-PpIX组的平均肿瘤质量较PpIX低,表明U-PpIX和LPGR9-PpIX具有良好的治疗效果,此结果肿瘤体积相符合。
实施例8
4~5周裸鼠(BALB/c-nu)在大腿外侧皮下注射100μL(PBS)含细胞个数为1×106的SCC-7细胞悬液造瘤,当肿瘤体积长到约100mm2时,将裸鼠随机分为四组。PBS和U-PpIX不光照、U-PpIX光照分别为对照组和实验组。其中,向每只裸鼠每次尾静脉注射100μL用PBS溶解的相当于包含62.5μg PpIX当量材料的溶液。尾静脉注射两小时过后,用660nm He-Ne激光照射肿瘤,每只每次10min。每只小鼠每两天治疗一次,期间每天测量肿瘤体积,通过相对肿瘤体积来反映肿瘤体积的变化情况(同实施例7)。结果如图7所示:尾静脉注射U-PpIX但是不经过光照的小鼠肿瘤体积与空白组没有区别,肿瘤没有得到明显的抑制。而尾静脉注射U-PpIX但是经过光照的小鼠肿瘤体积得到有效的抑制,证明肿瘤的抑制是由于光敏剂及光照同时作用的条件下产生。同时,也证明了U-PpIX能够有效的靶向肿瘤区域,而通过对肿瘤区域的光照,可以实现对肿瘤的特异性治疗。
12天光动力学治疗过后,将对照组和实验组裸鼠处死,并将肿瘤剥离,称量相对应的肿瘤质量,结果如图8所示:U-PpIX光照组的平均肿瘤质量较U-PpIX不光照的低,体现出U-PpIX与光照作用下的治疗效果,此结果与肿瘤体积相符合。
Claims (6)
1.一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其特征在于:结构如下式所示:
A-B-C-D
式中,A为光动力学治疗光敏剂,B为含正电荷的细胞穿膜肽片段,C为基质金属蛋白酶特异性识别多肽片段,D为含负电荷的多肽片段;所述的光动力学治疗光敏剂为卟啉类光敏剂。
2.根据权利要求1所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其特征在于:所述的含正电荷的细胞穿膜肽片段为如下多肽片段中的一种:精氨酸-赖氨酸-赖氨酸-精氨酸-精氨酸-谷氨酰胺-精氨酸-精氨酸-精氨酸,[精氨酸]6-12。
3.根据权利要求1所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其特征在于:所述的基质金属蛋白酶特异性识别多肽片段为如下多肽片段中的一种:脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-缬氨酸-精氨酸,脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-亮氨酸-丙氨酸-甘氨酸,脯氨酸-亮氨酸-甘氨酸-半胱氨酸-丙氨酸-甘氨酸,甘氨酸-脯氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-缬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-赖氨酸-甘氨酸-谷氨酸-谷氨酰胺。
4.根据权利要求1所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其特征在于:所述的含负电荷的多肽片段为如下多肽片段中的一种:[天冬氨酸]6-12,[谷氨酸]6-12,[天冬氨酸]0-12-[谷氨酸]0-12;或为主要包含天冬氨酸或谷氨酸的多肽片段。
5.根据权利要求1所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,其特征在于:B和C通过1~3个甘氨酸连接。
6.根据权利要求1-5任一项所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键合物制备方法,其特征在于:为多肽固相合成法。
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