CN104894209B - 口含烟制品安全性比较检测的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种口含烟制品安全性比较检测的方法,是将制备好的口含烟样品和传统卷烟样品,以烟碱含量为剂量设定划分指标,进行安全性指标检测,其中对不同待测口含烟制品的样品的制备方法进行了限定。本发明提供的口含烟制品安全性比较检测的方法,能合理、有效、可行地得出口含烟制品产品是否满足低风险要求。对不同类型口含烟制品的样品制备,根据制品使用时间结合正常人口腔唾液分泌量,选取不同体积的溶剂浸泡样品,选取37摄氏度为萃取温度,依据风险最大化原则浸泡24h,所得样品能合理、有效的反映样品的使用的真实情况。且该方法简便、易操作,能快速得出结论。

Description

口含烟制品安全性比较检测的方法
技术领域
[0001] 本发明涉及口含烟制品安全性比较检测的方法,属于烟草及烟草制品安全性生物 学评价技术领域。
背景技术
[0002] 烟草监管立法的日趋严格以及吸烟与健康研究的深入,导致了烟草公司寻求风险 更低、无环境烟气的新型烟草制品。口含烟制品避免了传统卷烟制品燃烧所产生的复杂混 合物所带来的危害,现阶段已成为国外烟草公司从传统卷烟制品转向的新方向之一。根据 产品的组分及形态特点,口含烟制品分为传统含烟叶原料的Snus型口含烟制品和不含烟叶 原料的新型口含烟制品(如烟草含片)。开发新制品的重要目的之一是在满足消费者需求的 同时尽可能的降低卷烟消费的潜在风险。
[0003] 传统卷烟制品是以卷烟烟气总粒相物作为目标样品进行检测,并以卷烟烟气总粒 相物浓度作为检测剂量划分标准(国家烟草专卖局_GB/T 19609-2004卷烟用常规分析用吸 烟机测定总粒相物和焦油[S].)。粒相物是卷烟在抽吸过程中烟气中低挥发性成分随着温 度的急剧下降而达到饱和点开始冷凝,以碳质燃烧时形成的微小碳粒、有机物的微小碎片、 灰分、离子化的分子组成的离子为冷凝核,凝结成的颗粒。
[0004] 口含烟制品的使用方式与传统卷烟吸入式不同,口含烟制品直接经口使用,使用 过程中不燃烧无烟气,不产生卷烟烟气总粒相物,目前尚未有统一的口含烟检测样品的制 备标准。因此,对口含烟制品与传统卷烟制品的安全性进行比较检测,以此判断产品是否满 足低风险的要求,是十分必要的。故研发口含烟制品安全性比较检测的方法,可以直观地通 过将口含烟制品与传统卷烟制品的安全性进行比较检测,而该比较检测的关键在于合理可 行地制备口含烟制品的检测样品以及对检测剂量进行划分。
发明内容
[0005] 为正确合理评估口含烟制品的安全性,本发明提供一种口含烟制品安全性比较检 测的方法,用于口含烟制品与传统卷烟制品安全性比较检测,正确合理评估口含烟制品的 安全性。
[0006] 本发明通过下列技术方案实现:一种口含烟制品安全性比较检测的方法,其特征 在于:将制备好的口含烟样品和传统卷烟样品,以烟碱含量为剂量设定划分指标,进行安全 性指标检测,其中:
[0007] 所述待测口含烟制品的样品是经过下列步骤制得:
[0008] 对于含烟叶原料的Snus型口含烟制品:准确称取1.0g待测口含烟制品,加入30mL 无血清培养基,于37°C下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行初滤除 渣处理,再用〇. 45wn有机滤膜过滤除菌,得到待测液样品;
[0009] 或者,对于不含烟叶原料的口含烟制品:准确称取1 • 0g待测口含烟制品,加入10mL 无血清培养基,于37°C下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行初滤除 渣处理,再用0 • 45WI1有机滤膜过滤除菌,得到待测液样品。
[0010]所述传统卷烟制品的样品是按照GB/T 19609-2004的标准方法制得。
[0011] 所述安全性指标包括细胞毒性指标、体外微核指标、细菌回复突变率指标和细胞 凋亡指标等体外毒性指标。
[0012] 本发明综合考虑不同类型口含型烟草制品口腔含服(含化)时间,以及正常成年人 口腔唾液分泌量等因素,以及分析口含烟制品与传统卷烟制品使用方式、使用时间、暴露途 径、正常成年人口腔唾液分泌量,制定了不同类型口含烟制品样品前处理条件,尽可能模拟 口含烟制品的真实使用状态。除此之外,对不同类型烟草制品通用检测剂量划分指标进行 了筛选研究,考虑到无论是传统卷烟制品还是口含烟制品,烟碱都是其重要的特征物质,是 烟草消费生理满足的重要成分,以烟碱量作为不同类型烟草制品通用检测剂量划分指标, 使口含烟制品与传统卷烟制品安全性比较测试具有可比性。
[0013] 本发明方法与现有技术方法相比,优点在于:本发明提供的口含烟制品安全性比 较检测的方法,能合理、有效、可行地得出口含烟制品产品是否满足低风险要求。对不同类 型口含烟制品的样品制备,根据制品使用时间结合正常人口腔唾液分泌量,选取不同体积 的溶剂浸泡样品,选取37摄氏度为萃取温度,依据风险最大化原则浸泡24h,所得样品能合 理、有效的反映样品的使用的真实情况。且该方法简便、易操作,能快速得出结论。
附图说明
[0014] 图1为实施例1的细胞早期凋亡率检测结果。
具体实施方式
[0015] 下面将结合具体实例对本发明做详细描述,但并不限制本发明。
[0016] 实施例1
[0017] 对口含烟制品骆驼(Camel)品牌薄荷口味Snus产品、新型口含烟制品烟碱含片与 传统卷烟样品肯塔基标准测试用卷烟3R4F,进行细胞早期凋亡率的安全性比较检测。
[0018] (1)对于口含烟制品骆驼(Camel)品牌薄荷口味Snus产品,即含烟叶原料的Snus型 口含烟制品,其待测口含烟制品的样品按下列步骤制备:准确称取1.〇g待测口含烟制品,加I 入30mL无血清培养基,于37°C下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行 初滤除渣处理,再用〇. 45wii有机滤膜过滤除菌,得到待测液样品;
[0019] 对于新型口含烟制品烟碱含片,即不含烟叶原料的口含烟制品,其待测口含烟制 品的样品按下列步骤制备:准确称取1.〇g待测口含烟制品,加入l〇mL无血清培养基,于37°C 下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行初滤除渣处理,再用0 • 45wn有 机滤膜过滤除菌,得到待测液样品;
[0020] 对于传统卷烟样品肯塔基标准测试用卷烟3R4F,其待测卷烟样品按照GB/T 19609-2004的标准方法制得。
[0021] (2)将步骤(1)制备好的两种口含烟待测液样品和传统卷烟待样品,以烟碱含量为 剂量设定划分指标,设置4个非零剂量,即:20lig/mL、40tig/mL、60lig/mL、80lig/mL;按常规方 法对人口腔粘膜成纤维细胞h〇MF细胞进行细胞早期凋亡率检测。
[0022] 检测结果详见图1,由图1结果可以看出,以本发明方法给出了口含烟制品样品前 处理方法以及以烟碱为通用检测剂量划分指标,在相同烟碱浓度下,口含烟制品骆驼 (Camel)品牌薄荷口味Snus产品、新型口含烟制品烟碱含片对细胞早期凋亡率的影响显著 低于肯塔基准测试用卷烟3R4F。检测过程中采用细胞对照组所得结果说明本次试验体系正 常,检测数据有效。

Claims (3)

1. 一种口含烟制品安全性比较检测的方法,其特征在于:将制备好的口含烟样品和 传统卷烟样品,以烟碱含量为剂量设定划分指标,进行安全性指标检测,其中: 所述待测口含烟制品的样品是经过下列步骤制得: 对于含烟叶原料的Snus型口含烟制品:准确称取l.Og待测口含烟制品,加入30mL 无血清培养基,于37°C下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行初滤 除渣处理,再用0.45mi有机滤膜过滤除菌,得到待测液样品; 或者,对于不含烟叶原料的口含烟制品:准确称取l.Og待测口含烟制品,加入l〇mL 无血清培养基,于37°C下恒温水浴锅中静置24h进行萃取,萃取后先用定性滤纸进行初 滤除渣处理,再用0.45M1有机滤膜过滤除菌,得到待测液样品; 所述安全性指标包括细胞毒性指标、体外微核指标、细菌回复突变率指标和细胞凋亡 指标。
2. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述传统卷烟制品的样品是按照GB/ T19609-2004的标准方法制得。
3. 根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述安全性指标检测是将制备好的两种 口含烟待测液样品和传统卷烟待样品,以烟碱含量为剂量设定划分指标,设置4个非零剂 量,S卩:20ug/mL、40yg/mL、60tig/mL、80ug/inL ;按常规方法对人口腔粘膜成纤维细胞hOMF 细胞进行细胞早期凋亡率检测。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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