CN104391021A - 酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法 - Google Patents

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张志强
王翠苹
崔勇
刘飞
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孟庆涛
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Abstract

本发明公开了一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,能够低成本、高效准确的检测水体环境中酚类化合物。该检测方法包括:制备酪氨酸酶生物传感器,在玻碳电极的检测端表面沉积有聚硫堇分子,聚硫堇分子外表面偶联一层戊二醛薄膜,在戊二醛薄膜外侧键合酪氨酸酶分子;检测溶液中酚类化合物,以酪氨酸酶生物传感器作为工作电极,银/氯化银作为参比电极,铂电极作为对电极,根据酚类化合物浓度与还原电流的线性回归方程,测定待测溶液中的酚类化合物的种类和含量。本发明与传统的高效液相色谱法相比,成本低廉、操作简单、响应速度快、检测精度高、抗干扰性强。

Description

酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法

技术领域

[0001] 本发明涉及检测酚类化合物的方法,特别是一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中 酚类化合物的方法。

背景技术

[0002] 酚类化合物是环境中广泛存在的一类有机污染物,主要来自化工、医药、炼焦等工 业排放及农药降解,威胁人类用水安全。随着人们对环境安全意识的逐步提高,迫切要求快 速准确测量地表水及饮用水的安全状况。目前对于酚类有机污染物的主要测定方法有色谱 法、紫外分光光度法、流动注射分析法等。但这些方法都存在着仪器昂贵、样品预处理、操作 过程复杂、分析周期长以及对工作人员的操作水平要求高等缺点,难以实现产业化,无法满 足环境中酚类化合物的准确快速检测的要求。

[0003] 生物传感器是基于生物组分对底物进行专一的识别,通过信号传导器将产生的信 号以光、电等形式传递出来,通过信号大小定量检测底物的一项新技术。运用生物传感器来 检测环境中的有机污染物、重金属、病菌微生物具有专一性强、灵敏度高、样品量少、成本低 廉的特点,因此成为环境保护研究中的一个热点课题。

[0004] 酪氨酸酶是一种具有生物催化活性的蛋白质,在生物体外容易失去活性,在生物 传感器应用中,生物酶需要被固定在一个基板上以实现直接电子传递或者增大表面积以达 到效率放大作用。利用各种固定方法将生物敏感元件固定于基板表面并保持活性是生物传 感器发展的重要方向。目前许多酪氨酸酶传感器普遍存在的问题是制备方法复杂、成本高、 操作和存储稳定性不够高等。

[0005] 查阅相关专利文献,公开(公告)号:102854233A,公开了一种"基于修饰电极的酪 氨酸酶生物传感器及其制备方法和应用",通过在玻碳电极表面沉积纳米金粒子,之后吸附 L-赖氨酸薄膜,在L-赖氨酸薄膜上加载有序介孔碳载纳米金,最后吸附酪氨酸酶。制备过 程中所使用的纳米金材料昂贵,制备过程复杂,并且酪氨酸酶的用量为〇. 〇5mg/ μ L-0. Img/ UL,生产成本很高。公开(公告)号:102928488Α,公开了一种"酶电化学生物传感器检测 水体环境中酚类化合物的方法",利用亲水性离子液体与介孔碳制备复合材料,再将酪氨酸 酶加入到复合材料中制备酪氨酸酶工作电极。介孔碳材料的制备过程复杂,需要使用浓硫 酸,并且制备过程中需要升温750-950度,使用有机溶剂,易造成环境污染,酪氨酸酶的用 量为2. 5-20mg/mL,生产成本较高。公开(公告)号:103278541Α公开了一种"用于检测双 酚A的电化学生物传感器及其制备方法和应用",使用石墨烯/金复合物以及壳聚糖来修饰 固定酪氨酸酶电极,使用的石墨烯及金等材料价格昂贵,其中氧化石墨烯的制备过程复杂, 需要多种有机及无机试剂,并且使用酪氨酸酶的浓度为4. 5mg/mL。

发明内容

[0006] 本发明提供了一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,能够低成 本、高效准确的检测水体环境中酚类化合物。

[0007] 本发明提供的酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法包括以下内 容:

[0008] 一.酪氨酸酶生物传感器的制备

[0009] 酪氨酸酶生物传感器包括一玻碳电极,在玻碳电极的检测端表面沉积有聚硫堇分 子,聚硫堇分子外表面偶联一层戊二醛薄膜,在戊二醛薄膜外侧键合酪氨酸酶分子;

[0010] 二·检测溶液中酚类化合物

[0011] 以酪氨酸酶生物传感器作为工作电极,银/氯化银作为参比电极,钼电极作为对 电极,建立三电极系统,三电极系统与电化学工作站连接,将工作电极的检测端置于待测溶 液中,通过电化学工作站检测出待测溶液中还原电流大小,然后根据酚类化合物浓度与还 原电流的线性回归方程,测定待测溶液中的酚类化合物的种类和含量。

[0012] 所述酪氨酸酶生物传感器的制备包括以下步骤:

[0013] a.沉积聚硫堇分子膜,在一清洗好的玻碳电极的检测端表面用电化学方法沉积硫 堇分子,得到聚硫堇分子膜修饰电极,晾干备用;

[0014] b.偶联戊二醛,向步骤a中制得的硫堇修饰电极上滴加配制好的戊二醛水溶液, 通过化学偶联反应使戊二醛与玻碳电极上的硫堇共价偶联,得到戊二醛-硫堇修饰电极;

[0015] c.固定酪氨酸酶,在步骤b中制得的戊二醛-硫堇修饰电极上滴加配制好的酪氨 酸酶溶液,通过化学偶联反应使酪氨酸酶固定于修饰电极的戊二醛上,得到酪氨酸酶生物 传感器。

[0016] 所述酪氨酸酶生物传感器的制备,步骤a中,硫堇的浓度为0. lmmol/L-1. Ommol/ L,所用溶剂为Britton-Robinson缓冲溶液,包括硼酸、醋酸、磷酸和氢氧化钠,缓冲溶液 浓度为10-lOOmM,PH值为4. 0-9. 5,扫描起始电压为0. 4V,终止电压为0. 4V,最高电压为 1. IV,最低电压为-0. 4V,扫面方向负向,扫描循环为20-100次,扫描速度为100mV/S ;所述 步骤b中的戊二醛水溶液体积百分比浓度为5-25%,用量为5 μ L-10 μ L,反应时间为15分 钟-1小时;所述步骤c中酪氨酸酶浓度范围为0. lmg/mL-lmg/mL,用量为5μ L-ΙΟμ L。

[0017] 所述的测定待测溶液中的酚类化合物为苯二酚,特别是对苯二酚或邻苯二酚,待 测溶液中对苯二酚、邻苯二酚的浓度线性检测范围均为5X 10_7〜IX 10_4Μ。

[0018] 所述的根据酚类化合物浓度与还原电流的线性回归方程,测定待测溶液中的酚类 化合物的含量,电流信号变化公式为:P = Ib-Ia,式中P为酚类污染物溶液处理前后电流信 号变化量;Ia为修饰后玻碳电极在空白缓冲溶液中扫描的电流;I b为酚类污染物溶液滴加 到检测缓冲溶液后扫描的电流,对苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为:

[0019] Phq = 67. 582-5. 46141gCHQ (1)

[0020] 式⑴中,Phq为对苯二酚检测时电流信号变化值,单位为μ A ;CHQ为待测溶液中对 苯二酚的浓度值,单位为M ;以底物浓度为横坐标,所对应的电流信号变化量作为纵坐标, 作校正曲线,找出校正曲线的线性范围后,所得到相关系数R2,式(1)的相关系数为R 2 = 0. 9502,检测下限为5X KT8M ;邻苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为:

[0021] Pcc = 86. 954-7. 03861gCcc (2)

[0022] 式⑵中,Prc为邻苯二酚检测时电流信号变化值,单位为μ A 为待测溶液中邻 苯二酚的浓度值,单位为M ;式(2)的相关系数为R2 = 0.9751,检测下限为1.5 X 10_8M。

[0023] 本发明与现有技术相比,其显著的有益效果体现在:

[0024] 1.本发明的基于修饰电极的酪氨酸酶生物传感器采用了化学偶联的修饰方式,具 有较好的稳定性。首先,将硫堇溶液用电化学的方法沉积在电极表面,使玻碳表面具有伯胺 基团,然后通过戊二醛作为偶联试剂,通过化学反应固定到玻碳电极表面,化学键的形成能 够提高酶电极的操作稳定性及储存稳定性,最后通过戊二醛的另一端醛基与酪氨酸酶的伯 胺基团发生反应,将酪氨酸酶固定在玻碳电极上,因化学偶联方法提供了稳定的化学键,因 此能够维持酪氨酸酶的高活性,使酪氨酸酶生物传感器使用寿命更长,酪氨酸酶活性更高。 此外,本发明所使用的有机染料并不局限于吩噻嗪类染料,对于吖啶橙类染料同样适用,具 有很好的生物兼容性,扩大了制备电极的物质种类,电极的修饰材料更易获得。可见,本发 明的酪氨酸酶生物传感器充分集成了现有技术中的技术手段,使组合后的生物传感器实现 了各技术手段的优势互补、协同增效,大大提高了生物传感器的稳定性、重复性,提高了现 有生物传感器的检测水平。

[0025] 2.本发明的基于修饰电极的酪氨酸酶生物传感器可用于检测邻苯二酚、对苯二酚 等有机酚类污染物,由于生物传感器上酪氨酸酶的高活性,对于邻苯二酚、对苯二酚的氧化 能够起到良好的催化效果,本发明的酪氨酸酶生物传感器具有卓越的电子传导能力,使得 每次达到稳定响应电流的时间很短,因此,在可测定的浓度范围内,测定结果较理想,用于 水样测定的响应值准确,与传统的高效液相色谱法相比,成本低廉、操作简单、响应速度快、 检测精度高、抗干扰性强。

附图说明

[0026] 图1为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法中,酪氨酸酶生物传感 器的制备过程示意图。图中编号:1.玻碳电极(GC) ;2.聚硫堇分子膜(TN) ;3.戊二醛分子 (GA) ;4.酪氨酸酶(TYR)

[0027] 图2为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法的检测反应原理图。

[0028] 图3为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法制得的(TN-GA-TYR/ GC)修饰电极的扫描电镜图。

[0029] 图4为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法中检测酪氨酸酶与玻 碳电极组装过程。图中a为未修饰的玻碳电极在IOOmmol · T1PBS缓冲溶液中的循环伏安 (CV)曲线;b为酪氨酸酶修饰的玻碳电极的CV曲线,扫描速度为100mV/ S。

[0030] 图5为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法中酪氨酸酶生物传感 器检测时的PH值优化图。

[0031] 图6为酪氨酸酶修饰电极在PBS溶液中不同扫速下扫描曲线,自上到下为100、90、 80、70、60、50、30、20、10mV/s。

[0032] 图7为酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法中扫描速度与电流信 号相关曲线。

[0033] 图8为酪氨酸酶生物传感器组装过程,图中a为未修饰的玻碳电极在 IOOmmol · T1PBS缓冲溶液中的电化学阻抗谱图(EIS) ;b为硫堇修饰的玻碳电极的EIS谱 图;c为戊二醛/硫堇修饰的玻碳电极的EIS谱图;d为酪氨酸酶/戊二醛/硫堇修饰玻碳 电极的电化学阻抗谱图。

具体实施方式

[0034] 下面结合附图用实施例对本发明做进一步详细说明。

[0035] 如图1所示,酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,该方法采用基 于修饰电极的酪氨酸酶生物传感器,酪氨酸酶生物传感器包括一玻碳电极1,在玻碳电极1 的检测端表面沉积有硫堇聚合物分子膜2,硫堇聚合物分子膜2外表面吸附一层戊二醛分 子3,戊二醛分子3外层偶联酪氨酸酶4。

[0036] -.酪氨酸酶生物传感器的制备步骤

[0037] 1.直径为0. 3cm的玻碳电极用粒径分别为1 μ M、0. 3 μ M、0. 05 μ M的三氧化二铝粉 末抛光,然后在去离子水中超声清洗3次,每次2分钟;

[0038] 2.在一清洗好的玻碳电极的检测端表面用电化学方法沉积硫堇(TN)分子,具体 操作方法是:将该玻碳电极放入含有〇. lmmol/LTN的磷酸缓冲溶液中,循环伏安法扫描,初 始电位为〇. 4V,时间为50min,得到硫堇修饰电极,备用;

[0039] 3.在步骤2中制得的硫堇修饰电极的检测端滴加配置好的5%的戊二醛水溶液, 室温静置放置1小时,使硫堇与戊二醛充分反应,其扫描电镜图如图3所示。由图3可知, 戊二醛已经分布在玻碳电极的表面,验证了戊二醛/硫堇修饰电极的固定化过程;

[0040] 4.在步骤3)中制得的戊二醛/硫堇修饰电极的检测端滴加10 μ L的酪氨酸酶溶 液(0. lmg/mL),室温放置1小时,通过充分的化学偶联反应使酪氨酸酶固定于硫堇/戊二醛 修饰电极表面,得到酪氨酸酶生物传感器,其扫描电镜图如图3所示。由图3可知,酪氨酸 酶被固定在玻碳电极表面;

[0041] 5.将修饰后的玻碳电极放入0. Imol T1PBS溶液中搅拌清洗3次,每次5分钟,去 除表面吸附弱的酶分子,将该酪氨酸酶生物传感器保存于4°C条件下备用。

[0042] 二.采用酪氨酸酶生物传感器检测酚类化合物

[0043] 将酪氨酸酶生物传感器作为工作电极,银/氯化银作为参比电极,钼电极作为对 电极,建立三电极系统,将三电极系统与电化学工作站连接,对待测溶液中的对苯二酚、邻 苯二酚浓度进行检测。

[0044] 工作条件:所用的电解液为0· lmol/L的Britton-Robinson缓冲溶液(BRS),在pH =4. 0-9. 5范围内测定酪氨酸酶生物传感器对同一浓度邻苯二酚的电流响应值,优化结果 如图5所示,选定pH = 6. 5为最佳pH值,因此在此pH值下,其响应电流大且稳定。

[0045] 酪氨酸酶生物传感器的检测原理如下:酪氨酸酶催化氧化邻苯二酚成邻醌,邻醌 在电极上得到电子,又被还原成邻苯二酚,通过检测还原电流的大小来定量指示待测液中 邻苯二酚的浓度;但对苯二酚不是酪氨酸酶的直接底物,在酪氨酸酶和邻醌的作用下形成 对醌,对醌在电极上得到电子,又被还原成邻苯二酚,通过检测还原电流的大小来定量指示 待测液中对苯二酚的浓度,由于对苯二酚不是酪氨酸酶的直接底物,因此,在后面检测下限 中,邻苯二酚的检测下限更低。

[0046] 本发明检测过程的主反应式如下所示:

[0047] CC+02 - o_quinone+2H20

[0048] CC+02 - benzoquinone+2H20

[0049] o-quinone (benzoquinone) +2e+2H+ - CC (HQ)

[0050] 对苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为:

[0051] Phq = 67. 582-5. 46141gCHQ (I)

[0052] 式⑴中,Phq为对苯二酚检测时的电流变化值,单位为μ A ;CHQ为待测溶液中对苯 二酚的浓度值,单位为M ;式(1)的相关系数为R2 = 9502,检测下限为5X 10_8M。

[0053] 邻苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为:

[0054] Pcc = 86. 954-7. 03861gCcc (2)

[0055] 式⑵中,Prc邻苯二酚检测时的电流变化值,单位为μ A 为待测溶液中邻苯二 酚的浓度值,单位为M ;式(1)的相关系数为R2 = 0.9751,检测下限为1.5 X 10_8M。

[0056] 本实施例中对苯二酚、邻苯二酚的线性范围均为5X KT7〜IX 1(Γ4Μ。

[0057] 本实施例检测的是水样样品,检测结果如下表1、表2所示,该表中原水取自鞍山 城市饮用水,C 1为原水过滤后测定的对苯二酚、邻苯二酚的浓度,经过过滤后加入确定浓度 的对苯二酚、邻苯二酚,制成A、B、C、D四个水样,四个水样的配置浓度为C 2栏所示,而C3栏 为按照本实施例的检测方法和检测条件测定的浓度值。从加标回收率可以看出,本发明在 可测定的浓度范围内,加标回收率在95. 4% -103. 2 %之间,测定结果理想,相比传统的高 效液相色谱法,本发明的检测方法操作简单,且不受其它污染物的干扰。

[0058] 在上述检测方法下,对30 μ M浓度的邻苯二酚标准溶液连续进行10次平行测定, 邻苯二酚峰电流和迁移时间的相对标准偏差分别是为3. 2%和1. 5%。将电极保存在4°C环 境下,每5天检测一次活性,一个月后仍然保持初始活性的90%。

[0059] 表1酪氨酸酶生物传感器检测水中的对苯二酚

Figure CN104391021AD00081

[0061][0062] 表2酪氨酸酶生物传感器检测水中的邻苯二酚[0063]

Figure CN104391021AD00082

[0060]

Claims (5)

1. 一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,其特征是该方法包括以下 内容: 一. 酪氨酸酶生物传感器的制备 酪氨酸酶生物传感器包括一玻碳电极,在玻碳电极的检测端表面沉积有聚硫堇分子, 聚硫堇分子外表面偶联一层戊二醛薄膜,在戊二醛薄膜外侧键合酪氨酸酶分子; 二. 检测溶液中酚类化合物 以酪氨酸酶生物传感器作为工作电极,银/氯化银作为参比电极,钼电极作为对电极, 建立三电极系统,三电极系统与电化学工作站连接,将工作电极的检测端置于待测溶液中, 通过电化学工作站检测出待测溶液中还原电流大小,然后根据酚类化合物浓度与还原电流 的线性回归方程,测定待测溶液中的酚类化合物的种类和含量。
2. 根据权利要求1所述的一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,其 特征是所说的酪氨酸酶生物传感器的制备包括以下步骤: a. 沉积聚硫堇分子膜,在一清洗好的玻碳电极的检测端表面用电化学方法沉积硫堇分 子,得到聚硫堇分子膜修饰电极,晾干备用; b. 偶联戊二醛,向步骤a中制得的硫堇修饰电极上滴加配制好的戊二醛水溶液,通过 化学偶联反应使戊二醛与玻碳电极上的硫堇共价偶联,得到戊二醛-硫堇修饰电极; c. 固定酪氨酸酶,在步骤b中制得的戊二醛-硫堇修饰电极上滴加配制好的酪氨酸酶 溶液,通过化学偶联反应使酪氨酸酶固定于修饰电极的戊二醛上,得到酪氨酸酶生物传感 器。
3. 根据权利要求2所述的一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,其 特征是所述步骤a中,硫堇的浓度为0. lmmol/L-1. Ommol/L,所用溶剂为Britton-Robinson 缓冲溶液,包括硼酸、醋酸、磷酸和氢氧化钠,缓冲溶液浓度为l〇-l〇〇mM,pH值为4. 0-9. 5, 扫描起始电压为〇. 4V,终止电压为0. 4V,最高电压为1. IV,最低电压为-0. 4V,扫面方向负 向,扫描循环为20-100次,扫描速度为100mV/S ;所述步骤b中的戊二醛水溶液体积百分比 浓度为5-25%,用量为5 y L-10 y L,反应时间为15分钟-1小时;所述步骤c中酪氨酸酶浓 度范围为 〇• lmg/mL-lmg/mL,用量为 5 u L-10 u L。
4. 根据权利要求1所述的一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,其 特征是所述的测定待测溶液中的酚类化合物为苯二酚,特别是对苯二酚或邻苯二酚,对苯 二酚和邻苯二酚的浓度线性检测范围均为5X 1(T7〜1 X 1(T4M。
5. 根据权利要求1所述的一种酪氨酸酶生物传感器检测溶液中酚类化合物的方法,其 特征是所说的根据酚类化合物浓度与还原电流的线性回归方程,测定待测溶液中的酚类化 合物的含量,电流信号变化公式为:P = Ib_Ia,式中P为酚类污染物溶液处理前后电流信号 变化量;Ia为修饰后玻碳电极在空白缓冲溶液中扫描的电流;Ib为酚类污染物溶液滴加到 检测缓冲溶液后扫描的电流,对苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为: PHQ = 67. 582-5. 46141gCHQ (1) 式(1)中,PHQ为对苯二酚检测时电流信号变化值,单位为y A ;CHQ为待测溶液中对 苯二酚的浓度值,单位为M ;以底物浓度为横坐标,所对应的电流信号变化值作为纵坐标, 作校正曲线,找出校正曲线的线性范围后,所得到相关系数R2,式(1)的相关系数为R2 = 0. 9502,检测下限为5X 1(T8M ;邻苯二酚浓度与还原电流变化的线性回归方程为: Pcc = 86. 954-7. 03861gCcc (2) 式(2)中,P。。为邻苯二酚检测时电流信号变化值,单位为U A ;C。。为待测溶液中邻苯二 酚的浓度值,单位为M ;式(2)的相关系数为R2 = 0. 9751,检测下限为1. 5X 10_8M。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105866226A (zh) * 2016-06-07 2016-08-17 辽宁科技大学 一种葡萄糖氧化酶生物传感器的制备及使用方法
CN106442672A (zh) * 2016-09-19 2017-02-22 盐城工学院 一种硫酸根离子抑制型电化学生物传感器及其制备方法
CN106701728A (zh) * 2016-11-29 2017-05-24 福州大学 一种以聚丙烯腈微球为载体固定化酪氨酸酶的方法及应用
CN109946256A (zh) * 2019-04-16 2019-06-28 中国农业大学 一种酪氨酸酶光学生物传感器及其检测二硫代氨基甲酸酯类农药的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007139730A (ja) * 2005-11-23 2007-06-07 Japan Science & Technology Agency Enzyme immobilization sensor
CN101788519A (zh) * 2010-01-26 2010-07-28 湖南农业大学 一种植物样品中吲哚乙酸含量的酶传感测定方法
CN102928488A (zh) * 2011-11-24 2013-02-13 中国科学院大连化学物理研究所 酶电化学生物传感器检测水体环境中酚类化合物的方法
CN103389328A (zh) * 2013-07-24 2013-11-13 湖南大学 基于修饰电极的酪氨酸酶生物传感器及制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007139730A (ja) * 2005-11-23 2007-06-07 Japan Science & Technology Agency Enzyme immobilization sensor
CN101788519A (zh) * 2010-01-26 2010-07-28 湖南农业大学 一种植物样品中吲哚乙酸含量的酶传感测定方法
CN102928488A (zh) * 2011-11-24 2013-02-13 中国科学院大连化学物理研究所 酶电化学生物传感器检测水体环境中酚类化合物的方法
CN103389328A (zh) * 2013-07-24 2013-11-13 湖南大学 基于修饰电极的酪氨酸酶生物传感器及制备方法和应用

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHRISTINE KRANZ等: "Controlled Electrochemical Preparation of Amperometric Biosensors Based on Conducting Polymer Multilayers", 《ELECTROANALYSIS》 *
EITHNE DEMPSEY等: "Development of a biosensor for endocrine disrupting compounds based on tyrosinase entrapped within a poly(thionine) film", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 *
RU YANG等: "Electropolymerization of thionine in neutral aqueous media and H2O2 biosensor based on poly(thionine)", 《ELECTROCHIMICA ACTA》 *
张志强等: "吖啶橙诱导酪氨酸酶构筑酚类碳毡传感器", 《辽宁科技大学学报》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105866226A (zh) * 2016-06-07 2016-08-17 辽宁科技大学 一种葡萄糖氧化酶生物传感器的制备及使用方法
CN106442672A (zh) * 2016-09-19 2017-02-22 盐城工学院 一种硫酸根离子抑制型电化学生物传感器及其制备方法
CN106442672B (zh) * 2016-09-19 2018-10-26 盐城工学院 一种硫酸根离子抑制型电化学生物传感器及其制备方法
CN106701728A (zh) * 2016-11-29 2017-05-24 福州大学 一种以聚丙烯腈微球为载体固定化酪氨酸酶的方法及应用
CN106701728B (zh) * 2016-11-29 2019-09-10 福州大学 一种以聚丙烯腈微球为载体固定化酪氨酸酶的方法及应用
CN109946256A (zh) * 2019-04-16 2019-06-28 中国农业大学 一种酪氨酸酶光学生物传感器及其检测二硫代氨基甲酸酯类农药的方法

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