CN104297463A - 血液分析装置,血液分析方法,溶血剂及染色剂 - Google Patents

血液分析装置,血液分析方法,溶血剂及染色剂 Download PDF

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Abstract

此血液分析装置配备：样品制备部，其制备：含血液样品和溶血剂的第1测定样品，及含血液样品、与溶血剂相同的溶血剂和染色剂的第2测定样品，控制部，其基于光信息生成部生成的荧光信息和2种散射光信息，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于光信息生成部生成的荧光信息和散射光信息，将第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。

Description

血液分析装置,血液分析方法,溶血剂及染色剂
本申请是申请号200980116617.7，申请日2010、11、09的同名申请的分案申请。
【技术领域】
本发明涉及血液分析装置，血液分析方法，溶血剂及染色剂，尤其涉及对白细胞分类，检测疟疾感染红细胞的血液分析装置，血液分析方法，而且涉及此血液分析方法中用到的溶血剂及染色剂。
【背景技术】
以往，已知对白细胞分类的血液分析装置。这样的血液分析装置例如，特开2006-292738号公报中公开。此外，以往，也已知检测疟疾感染红细胞的血液分析装置。这样的血液分析装置例如，特开2006-304774号公报中公开。
上述特开2006-292738号公报中所述的血液分析装置构成为：使用白细胞分类用的专用的试剂，通过流式细胞仪(光信息生成部)测定散射光及荧光，将测定样品中的白细胞分为4类。
上述特开2006-304774号公报中所述的血液分析装置构成为：使用疟疾感染红细胞检测用的专用的试剂，通过流式细胞仪(光信息生成部)测定散射光及荧光，从而检测测定样品中的疟疾感染红细胞。
此外，近年，期望着可同时进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测的血液分析装置。
但是，由于上述特开2006-292738号公报的血液分析装置使用白细胞分类用的专用的试剂进行白细胞分类，同时上述特开2006-304774号公报的血液分析装置使用与白细胞分类用试剂组成不同的疟疾感染红细胞检测用的专用的试剂进行疟疾感染红细胞检测，虽然通过组合上述特开2006-292738号公报的血液分析装置与上述特开2006-304774号公报的血液分析装置而得到可同时进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测的血液分析装置，但为了可同时进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测，有必要分别开发组成不同的2种试剂，其结果，用户负担加重。
【发明内容】
本发明旨在解决上述课题，本发明的1个目的是提供：在减轻试剂开发所致的对用户的负担的同时可将测定样品中的白细胞分为4类，且检测疟疾感染红细胞的血液分析装置，血液分析方法，以及此血液分析方法中用到的溶血剂及染色剂。
为达到上述目的，本发明的第1方面的血液分析装置配备：制备含血液样品和溶血剂的第1测定样品，以及含血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品的样品制备部，从第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时从第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息的光信息生成部，基于光信息生成部生成的第1荧光信息和2种第1散射光信息，对第1测定样品中的白细胞进行第1分类而分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于光信息生成部生成的第2荧光信息和第2散射光信息，将第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞的控制部。
上述第1方面的血液分析装置中，优选地，样品制备部还制备含血液样品和溶血剂的第3测定样品，血液分析装置还配备从第3测定样品生成样品的电信息的电信息生成部，控制部构成为：基于电信息生成部生成的电信息，对第3测定样品中的白细胞进行第2分类而至少分类为：淋巴细胞和非淋巴细胞，同时基于第1分类及第2分类的分类结果，将测定样品中的白细胞分为至少5类：淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞。
这种情况下，优选地，还配备从第3测定样品生成样品的透射光信息或散射光信息之一的第2光信息生成部，控制部构成为：基于第2光信息生成部生成的透射光信息或散射光信息之一，取得第3测定样品中的血红蛋白浓度。
上述第1方面的血液分析装置中，优选地，第2测定样品中溶血剂的稀释倍数与第1测定样品中溶血剂的稀释倍数不同。
这种情况下，优选地，第2测定样品中溶血剂的稀释倍数小于第1测定样品中溶血剂的稀释倍数。
上述第1方面的血液分析装置中，优选地，样品制备部构成为：通过混合血液样品、指定试剂容器中收容的溶血剂及指定量的稀释液来制备第1测定样品，通过混合血液样品，指定试剂容器中收容的溶血剂，及比指定量少的量的稀释液来制备第2测定样品。
这种情况下，优选地，样品制备部构成为：通过于溶血剂和稀释液混合的状态混合血液样品来制备第2测定样品。
上述第1方面的血液分析装置中，优选地，样品制备部构成为：通过混合至少血液样品及第2试剂容器中收容的溶血剂来制备第2测定样品，所述第2试剂容器与收容有第1测定样品中用到的溶血剂的第1试剂容器不同。
这种情况下，优选地，第2试剂容器中收容的溶血剂被稀释9倍以上12倍以下。
上述第1方面的血液分析装置中，优选地，溶血剂含2种阳离子表面活性剂。
上述第1方面的血液分析装置中，染色剂也可含下式所示的荧光染料、以及非离子表面活性剂。
【化2】
本发明的第2方面的血液分析方法包括下列步骤：制备含血液样品和溶血剂的第1测定样品，以及含血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，从第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时从第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，基于从第1测定样品生成的第1荧光信息和2种第1散射光信息，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于从第2测定样品生成的第2荧光信息和第2散射光信息，将第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
本发明的第3方面的溶血剂在血液分析方法中用到，所述血液分析方法包括下列步骤：制备含血液样品和所述溶血剂的第1测定样品，以及含血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，从第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时从第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，基于从第1测定样品生成的第1荧光信息和2种第1散射光信息，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于从第2测定样品生成的第2荧光信息和第2散射光信息，将第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
本发明的第4方面的染色剂在血液分析方法中用到，所述血液分析方法包括下列步骤：制备含血液样品和溶血剂的第1测定样品，以及含血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，从第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时从第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，基于从第1测定样品生成的第1荧光信息和2种第1散射光信息，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于从第2测定样品生成的第2荧光信息和第2散射光信息，将第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
【附图说明】
【图1】显示本发明的一实施方式的血液分析装置的概略构成的正面图。
【图2】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的构成的框图。
【图3】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元的斜视图。
【图4】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元的内部结构的斜视图。
【图5】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元的内部结构的侧面图。
【图6】模式化显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元中设定的流动池的构成的斜视图。
【图7】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元中设定的WBC分类测定部的构成的概略图。
【图8】模式化显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元中设定的DC测定部的构成的斜视图。
【图9】模式化显示图1所示的一实施方式的血液分析装置的测定单元中设定的HGB测定部的构成的斜视图。
【图10】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中用到的溶血剂的组成的图。
【图11】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中用到的疟疾检测用的染色液的组成的图。
【图12】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中样品分析处理的流程图。
【图13】图1所示的一实施方式的血液分析装置中用到的第3测定样品及第4测定样品的制备步骤的说明用图。
【图14】图1所示的一实施方式的血液分析装置制备的白细胞的粒度分布图。
【图15】图1所示的一实施方式的血液分析装置制备的白细胞分类用的散点图。
【图16】图1所示的一实施方式的血液分析装置制备的白细胞分类用的散点图。
【图17】图1所示的一实施方式的血液分析装置制备的疟疾分类用的散点图。
【图18】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是2.15mM的溶血剂时的实验结果的图。
【图19】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是2.15mM的溶血剂时的实验结果的图。
【图20】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是0.62mM的溶血剂时的实验结果的图。
【图21】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是0.62mM的溶血剂时的实验结果的图。
【图22】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了图10所示的溶血剂时的实验结果的图。
【图23】显示图1所示的一实施方式的血液分析装置中，使用了图10所示的溶血剂时的实验结果的图。
【实施方式】
以下，基于图说明本发明的实施方式。
首先，参照图1～图11，对本发明的一实施方式的血液分析装置1的构成进行说明。
本实施方式的血液分析装置1，如图1所示，是血液检查中使用的装置，主要由测定单元2，数据处理单元3构成。此外，血液分析装置1例如，设置在医院或病理检查设施等的医疗机关的设施内。此外，血液分析装置1中，由测定单元2对血液样品中所含的成分进行指定测定，由数据处理单元3接收此测定数据而进行分析处理。然后，测定单元2与数据处理单元3以可互相通信数据的方式由数据传送线3a连接。再有，测定单元2与数据处理单元3也可由数据传送线3a直接连接而构成，例如，也可通过使用电话线路的专用线路，LAN或互联网等的通信网络连接。
测定单元2，图2如所示，包括：样品供给部4、WBC分类测定部5、DC测定部6、HGB测定部7、控制部8及通信部9。此外，如图3所示，测定单元2的正面右下部分设置有以可设定收容了血液样品的采血管20的方式构成的采血管设定部2a。此采血管设定部2a构成为：通过用户按下在其附近设定的按钮2b，从而将所述采血管设定部2a推到用户手前。用户可于采血管设定部2a被推出的状态设定采血管20。然后，设定完采血管20后，通过用户再度按下按钮2b，采血管设定部2a构成为回到测定单元2的内部。
测定单元2的内部，如图4及图5所示，设置有吸引测定样品的移液器21，及用于混合制备血液样品和试剂的隔室22，23(参照图5)等。移液器21形成为上下延伸的管状，其尖端锐尖。此外，移液器21连接着未图示的注射泵，构成为：通过此注射泵的运作可吸吐指定量的液体。此外，移液器21连接到移动机构，构成为：可分别在上下方向及前后方向上移动。此外，移液器21构成为：通过锐利的尖端穿刺密闭采血管20的橡胶制的帽20a来吸引采血管20中收容的血液样品。此外，移液器21构成为：吸引血液样品后，通过移动机构移动到指定位置，向隔室22及23内供给血液样品。
样品供给部4是具有隔室22及23，多个电磁泵，隔膜泵等的流体单元。隔室22设置为用于制备红细胞，血小板的测定，及血红蛋白浓度的测定中用到的测定样品。此外，隔室23设置为用于制备白细胞的测定中用到的测定样品。此外，由样品供给部4构成的流体单元连接着试剂容器。具体而言，用于收容稀释液的稀释液容器24，用于收容溶血剂100的溶血剂容器25及用于收容疟疾检测用的测定样品中用到的染色液的染色液容器26连接到流体单元。由此，可将稀释液及溶血剂100供给到隔室22，同时可将稀释液，溶血剂100及染色液供给到隔室23。
WBC分类测定部5是光学流式细胞仪，设置为通过使用了半导体激光的流式细胞术进行白细胞分类检测及疟疾感染红细胞检测(以下称为疟疾检测)。此外，WBC分类测定部5具有形成测定样品的液流的流动池51(参照图6)。流动池51由具有透光性的石英，玻璃，合成树脂等的材料构成为管状，其内部形成测定样品及鞘液(稀释液)流通的流路。此流动池51设置有内部空间比其他部分狭窄的孔口51a。此外，孔口51a的入口附近形成二重管结构，其内侧管部分形成样品喷嘴51b。此外，样品喷嘴51b的外侧的空间是鞘液(稀释液)流通的流路51c，鞘液(稀释液)流通流路51c而被导入孔口51a。如此供给到流动池51的鞘液(稀释液)以环绕从样品喷嘴51b吐出的测定样品的方式流动。然后，测定样品流由孔口51a变细，测定样品中所含的白细胞，红细胞等的粒子被鞘液(稀释液)环绕而逐个通过孔口51a。
此外，WBC分类测定部5配置为：半导体激光光源52向流动池51的孔口51a发射激光。此半导体激光光源52具有蓝紫色半导体激光元件52a，构成为可发射波长约405nm的蓝紫色激光。此外，在半导体激光光源52与流动池51之间配置有包括多个透镜的照射透镜系统53。通过此照射透镜系统53，从半导体激光光源52发射的平行光束集束到光束点。此外，从半导体激光光源52直线延伸的光轴上隔着流动池51、对着照射透镜系统53，设置有光束拦阻器54a，光束拦阻器54a构成为：遮蔽从半导体激光光源52的直射光。
此外，光束拦阻器54a的光轴再下游侧配置有光电二极管54。光电二极管54构成为：接受由流过流动池51的测定样品产生的激光的散射光。具体而言，由于沿着从半导体激光光源52直线延伸的光轴传播的光中，半导体激光光源52的直接光被光束拦阻器54a遮断，光电二极管54构成为：仅接受大概沿着光轴方向传播的散射光(以下称为前向散射光)。此外，光电二极管54构成为：对由流动池51发射的前向散射光进行光电变换，将由此生成的电信号(以下称为前向散射光信号)传送到放大器54b。然后，放大器54b构成为：放大传送的前向散射光信号而输出到控制部8。
此外，在流动池51的侧向，在对从半导体激光光源52向光电二极管54直线延伸的光轴正交的方向配置有侧向集光透镜55，此侧向集光透镜55构成为：对向通过流动池51内的血细胞照射激光时发生的侧向光(向对所述光轴交差的方向发射的光)集光。侧向集光透镜55的下游侧设置有分色镜56，分色镜56构成为：将从侧向集光透镜55发送的信号光分为散射光成分和荧光成分。分色镜56的侧向(与连接侧向集光透镜55和分色镜56的光轴方向交差的方向)设置有侧向散射光受光用的光电二极管57，分色镜56的光轴下游侧设置有光学滤光器58a及雪崩光电二极管58。此外，光电二极管57构成为：对由分色镜56分出的侧向散射光成分进行光电变换，将由此生成的电信号(以下称为侧向散射光信号)传送到放大器57a。然后，放大器57a构成为：放大传送的侧向散射光信号而输出到控制部8。
此外，雪崩光电二极管58构成为：对由光学滤光器58a选择波长后的侧向荧光成分进行光电变换，将由此生成的电信号(侧向荧光信号)传送到放大器58b。然后，放大器58b构成为：放大传送的侧向荧光信号而输出到控制部8。
DC测定部6构成为：可通过鞘流DC检测法测定红细胞数(RBC)及血小板数(PLT)。此外，DC测定部6构成为：也可通过红细胞脉冲波高值检测法，得到血细胞比容值(HCT)计算用测定数据。再有，DC测定部6也用于淋巴细胞比例计算用白细胞数(WBC)检测。此外，DC测定部6具有流动池，构成为：测定样品从隔室22被移送到此流动池。例如，进行红细胞数及血小板数的测定时，如图8所示，血液样品和稀释液在隔室22中混合制备而成的测定样品与鞘液(稀释液)一同从样品供给部4被移送到流动池。然后，流动池内形成测定样品被鞘液(稀释液)包裹的状态的液流。
HGB测定部7构成为：通过高铁血红蛋白法测定血红蛋白量(HGB)。HGB测定部7，如图9所示，具有收容稀释样品的池，构成为：测定样品从隔室22被移送到此池。然后，HGB测定部7具有照射波长约555nm的光的发光二极管，构成为：通过用从发光二极管的光照射上述池中的测定样品来测定其吸光度。再有，进行血红蛋白的测定时，在隔室22中混合血液样品、稀释液及溶血剂100而制备测定样品。
控制部8由CPU、ROM、RAM等构成，构成为：进行测定单元2的各部的运作控制。
通信部9是例如，RS-232C接口、USB接口、以太网(注册商标)接口，构成为：可与数据处理单元3之间进行数据的发送接收。
数据处理单元3，如图2所示，由配备CPU31、ROM32、RAM33、硬盘34、通信接口35、键盘及鼠标等的输入部36，及显示装置37的计算机构成。数据处理单元3的硬盘34中安装有操作系统和分析处理从测定单元2接收的测定数据的应用程序。
其中，本实施方式中，数据处理单元3的CPU31构成为：通过运行此应用程序来分析处理测定数据，计算出白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白量(HGB)、血细胞比容值(HCT)、平均红细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数(PLT)。再有，CPU31构成为：使用前向散射光信号、侧向散射光信号、侧向荧光信号来制备散点图而将白细胞分为5类：嗜中性粒细胞(Neut)、淋巴细胞、单核细胞(Mono)、嗜酸性粒细胞(EO)、嗜碱性粒细胞(BASO)。
通信接口35是例如，RS-232C接口、USB接口、以太网(注册商标)接口，构成为可与测定单元2之间进行数据的发送接收。
此外，本实施方式中溶血剂100，图10如所示，含2种阳离子表面活性剂(月桂基三甲基氯化铵；34.1mM，硬脂基三甲基氯化铵；1.7mM)，且不含标记物。此外，此溶血剂100具有将血液中的血红蛋白转化为高铁血红蛋白的性质。此外，溶血剂100为保持pH约5～约7而含磷酸缓冲液。由此，可于疟疾原虫保持在红细胞内部的状态，使后述荧光染料可透射细胞膜地，使红细胞的细胞膜部分溶解。此外，如后所述，各测定中用到的各测定样品分别与溶血剂100的稀释倍数，及血液样品的稀释倍数不同。如此通过使用2种阳离子表面活性剂，可不使用组成不同的2种以上的溶血剂而仅改变稀释倍数来将测定样品中的白细胞分为4类，且进行疟疾感染红细胞的检测。
此外，本实施方式中，染色液含有：具有图11所示化学式的结构的荧光染料(例如，Invitrogen公司的Hoechst34580)，和实质性溶解红细胞的细胞膜的非离子表面活性剂群之一。此荧光染料具体而言是DNA选择性荧光染料，优选为DNA选择性双苯甲亚胺系荧光染料。再有，DNA选择性荧光染料是指，相比RNA更强染色DNA的荧光染料，DNA选择性双苯甲亚胺系荧光染料是指，骨架为双亚胺系的荧光染料。如此，通过使用DNA选择性荧光染料，由于无核的红细胞不被染色，疟疾原虫的DNA被染色，从而可从由上述流式细胞仪得到的散点图(参照图17)容易区分内部具有疟疾原虫的疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。再有，此荧光染料可被半导体激光光源52a发射的蓝紫色激光(波长约405nm)激发。
接下来，参照图12～图17，对本发明的一实施方式的血液分析装置1中样品分析处理进行说明。
首先，血液分析装置1起动，进行应用程序等的初始化后，步骤S1中，数据处理单元3的CPU31判断是否有从用户的测定开始指示，重复此判断至有指示。然后，有测定开始指示时，步骤S2中，从数据处理单元3向测定单元2发送测定开始指示信号。
然后，步骤S21中，测定单元2的控制部8判断是否接收到测定开始指示信号，重复此判断至接收到。测定单元2一旦接收到测定开始指示信号，步骤S22中，由移液器21从采血管设定部2a中设定的采血管20吸引血液样品。
然后，步骤S23中，由样品供给部4制备出RBC/PLT测定样品(以下称为第4测定样品)。具体而言，如图13所示，从稀释液容器24指定量(例如，2.0mL)的稀释液，及由移液器21从采血管20吸引的指定量(例如，6μL)的血液样品被供给到隔室22，搅拌。由此，制备出指定量(例如，2.0mL)的第4测定样品。其后，步骤S24中，隔室22内的第4测定样品的一部分(例如，1mL)与鞘液(稀释液)一同被移送到DC测定部6，同时由DC测定部6进行第4测定样品的RBC及PLT检测。
然后，步骤S25中，由样品供给部4制备出WBC(DC检测用)·HGB测定样品(以下称为第3测定样品)。具体而言，如图13所示，指定量(例如，0.5mL)的溶血剂100从溶血剂容器25被供给到指定量(例如，1mL)的第4测定样品残留的隔室22，搅拌。即，血液样品和稀释液在隔室22中混合后，混合溶血剂100而制备出第3测定样品。由此，制备出溶血剂100被稀释3倍(溶血剂/稀释液＝1/2)，血液样品被稀释500倍的第3测定样品。此外，由此，红细胞溶血，同时血红蛋白转变为高铁血红蛋白。其后，步骤S26中，隔室22内的第3测定样品被移送到DC测定部6，进行第3测定样品的WBC测定。此外，步骤S27中，第3测定样品被移送到HGB测定部7，进行第3测定样品的HGB检测。
然后，步骤S28中，由样品供给部4制备出WBC(分类用)测定样品(以下称为第1测定样品)。具体而言，与上述第3测定样品中所含的溶血剂相同的溶血剂100被稀释25倍(溶血剂/稀释液＝1/24)的指定量(例如，1mL)的稀释溶血剂，及从采血管20吸引的指定量(例如，10μL)的血液样品被供给到隔室23，搅拌。由此，制备出血液样品被稀释100倍的第1测定样品。其后，步骤S29中，隔室23内的第1测定样品与鞘液(稀释液)一同被移送到WBC分类测定部5，同时由WBC分类测定部5进行第1测定样品的WBC检测。
其中，本实施方式中，步骤S30中，由样品供给部4制备出疟疾测定样品(以下称为第2测定样品)。具体而言，向与上述第1测定样品中所含的溶血剂相同的溶血剂100被稀释9倍(溶血剂/稀释液＝1/8)的指定量(例如，1mL)的稀释溶血剂，从采血管20吸引的指定量(例如，10μL)的血液样品，及从染色液容器26指定量(例如，10μL)的染色液被供给到隔室23，搅拌。即，隔室23中于溶血剂100和稀释液混合的状态，血液样品及染色液被混合。由此，由于溶血剂100于被稀释液稀释的状态与血液样品混合，从而可抑制血液样品与比期望浓度高的浓度的溶血剂混合。然后，制备出血液样品被稀释100倍的第2测定样品。如此，由于通过使第2测定样品中溶血剂100的稀释倍数(9倍)小于第1测定样品中溶血剂100的稀释倍数(25倍)，可适度溶血测定样品中的红细胞，可精确进行疟疾感染红细胞的检测。此外，由此，使用溶血剂容器25中收容的共通的溶血剂100，可同时制备第1测定样品及第2测定样品。其后，步骤S31中，隔室23内的第2测定样品与鞘液(稀释液)一同被移送到WBC分类测定部5，同时由WBC分类测定部5进行第2测定样品的疟疾检测。然后，步骤S32中，各检测部测定的测定数据从测定单元2被发送到数据处理单元3。
数据处理单元3在步骤S3中判断是否接收到测定单元2发送的测定数据，重复此判断至接收到。然后，一旦接收到测定数据，步骤S4中，由CPU31，基于步骤S26中测定的WBC检测得到的测定数据，计算出白细胞数(WBC)。此外，步骤S5中，由CPU31，基于WBC检测得到的测定数据，如图14所示，制备出白细胞的粒度分布图，计算出相对白细胞数(WBC)的淋巴细胞比例。再有，淋巴细胞在粒度分布图中呈现为左数第一峰(集)。
接下来，步骤S6中，由CPU31，基于步骤S29中测定的WBC分类检测得到的测定数据，将白细胞分为3类：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集，单核细胞及粒细胞(嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞之集)。具体而言，CPU31使用前向散射光信号及侧向散射光信号，如图15所示，制备散点图，由此散点图计算出淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集，单核细胞及粒细胞(嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞之集)分别对白细胞数(WBC)的比例。其中，图22中，将实际从被验者采取的血液样品，使用本实施方式中溶血剂(参照图10)测定，显示其结果得到的前向散射光信号及侧向散射光信号的散点图。如图22所示，在实际测定结果中得知，在散点图上，可将白细胞分为3类：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集，单核细胞及粒细胞(嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞之集)。
然后，步骤S7中，由CPU31，基于WBC分类检测得到的测定数据，将白细胞分为2类：嗜酸性粒细胞及非嗜酸性粒细胞。具体而言，CPU31使用前向散射光信号及侧向荧光信号，如图16所示，制备散点图，由此散点图计算出对于白细胞数(WBC)的嗜酸性粒细胞比例。此侧向荧光信号是基于被从半导体激光光源52发射的蓝紫色激光(波长约405nm)激发的白细胞的自身荧光的信号，嗜酸性粒细胞具有比白细胞的非嗜酸性粒细胞强的荧光强度。再有，CPU31也可从侧向散射光信号及侧向荧光信号的散点图计算出对于白细胞数(WBC)的嗜酸性粒细胞比例。其中，图23中，将实际从被验者采取的血液样品，使用本实施方式中溶血剂(参照图10)测定，显示其结果得到的前向散射光信号及侧向荧光信号的散点图。如图23所示，在实际测定结果中得知，在散点图上，可分类为嗜酸性粒细胞和非嗜酸性粒细胞。
其后，步骤S8中，由CPU31，通过从步骤S6计算出的粒细胞(嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞之集)比例减去步骤S7计算出的嗜酸性粒细胞比例，从而计算出对于白细胞数(WBC)的嗜中性粒细胞比例。由此，白细胞被分为4类：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞。然后，步骤S9中，由CPU31，通过从淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集的比例减去步骤S5计算出的淋巴细胞比例，从而计算出对于白细胞数(WBC)的嗜碱性粒细胞比例。由此，白细胞被分为5类：淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞。
此外，本实施方式中，步骤S10中，由CPU31，基于步骤S31中测定的疟疾检测得到的测定数据，区分疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。具体而言，CPU31使用前向散射光信号及侧向荧光信号，如图17所示，制备散点图，由此散点图，将疟疾感染红细胞从非疟疾感染红细胞区分出。更具体而言，图17的散点图中，未感染疟疾的红细胞出现在荧光强度小的区域中，而疟疾感染红细胞出现在荧光强度较大的区域。此外，白细胞，随着其尺寸及DNA量，出现在荧光强度及散射光强度均大的区域。由此，可判断有无疟疾感染。
接下来，步骤S11中，由CPU31，基于步骤S24中测定的RBC/PLT检测得到的测定数据，计算出红细胞数(RBC)、血小板数(PLT)及血细胞比容值(HCT)。
然后，步骤S12中，由CPU31，基于步骤S27中测定的HGB检测得到的测定数据，计算出血红蛋白量(HGB)。即，基于由使用了SLS血红蛋白法的HGB检测得到的吸光度，计算出血红蛋白浓度。由此，使用与将白细胞分为5类(嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞)中用到的测定样品相同的第3测定样品，可取得血红蛋白浓度。
其后，步骤S13中，从如上所述计算出的红细胞数(RBC)，血细胞比容值(HCT)及血红蛋白量(HGB)，由CPU31，计算出平均红细胞容积(MCV)，平均红细胞血红蛋白量(MCH)及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)。各值的计算式分别以下式(1)～(3)所示。
MCV＝(HCT/RBC)×1000·····(1)
上述式(1)中，MCV表示平均红细胞容积(fL)，HCT表示血细胞比容值(％)，RBC表示红细胞数(×104/μL)。
MCH＝(HGB/RBC)×1000·····(2)
上述式(2)中，MCH表示平均红细胞血红蛋白量(pg)，HGB表示血红蛋白量(g/dL)，RBC表示红细胞数(×104/μL)。
MCHC＝(HGB/HCT)×100·····(3)
上述式(3)中，MCHC表示平均红细胞血红蛋白浓度(g/dL)，HGB表示血红蛋白量(g/dL)，HCT表示血细胞比容值(％)。
然后，步骤S14中，如上所述计算出的白细胞数(WBC)，红细胞数(RBC)，血红蛋白量(HGB)，血细胞比容值(HCT)，平均红细胞容积(MCV)，平均红细胞血红蛋白量(MCH)，平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)，血小板数(PLT)的计算结果被输出到显示装置37。再有，对于白细胞数(WBC)的嗜中性粒细胞比例，淋巴细胞比例，单核细胞比例，嗜酸性粒细胞比例及嗜碱性粒细胞比例被输出到显示装置37，同时也输出疟疾检测的结果。再有，除对于白细胞数(WBC)的各血细胞比例之外，还输出基于白细胞数(WBC)及各血细胞比例计算出的嗜中性粒细胞数，淋巴细胞数，单核细胞数，嗜酸性粒细胞数及嗜碱性粒细胞数。
其后，步骤S15中，判断有无自用户的关闭指示，无指示时，移到步骤S1。有关闭指示时，血液分析装置1中样品分析处理的数据处理单元3的运作结束。此外，在测定单元2侧中，在步骤S32中将测定数据发送到数据处理单元3后，步骤S33中，判断有无自用户的关闭指示，无指示时，移到步骤S21。有关闭指示时，血液分析装置1中样品分析处理的测定单元2的运作结束。
本实施方式中，如上所述，通过设置CPU31，其基于由WBC分类测定部5从含血液样品及溶血剂100的第1测定样品生成的侧向荧光信号，前向散射光信号及侧向散射光信号，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于由WBC分类测定部5从含血液样品、与所述溶血剂100相同的溶血剂100及染色剂的第2测定样品生成的侧向荧光信号及前向散射光信号，将第2测定样品中的血细胞分类为疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞，由于可共通化用于将白细胞分为4类的溶血剂和用于检测疟疾感染红细胞的溶血剂，无需为了进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测而开发组成不同的2种试剂(溶血剂)。由此，减轻试剂开发所致的对用户的负担的同时，将测定样品中的白细胞分为4类，且可进行疟疾感染红细胞的检测。
此外，本实施方式中，通过将CPU31构成为基于由DC测定部6得到的测定数据，第3将测定样品中的白细胞分类为淋巴细胞和非淋巴细胞，同时基于此分类结果和上述白细胞的4分类的分类结果，将测定样品中的白细胞分为至少5类：淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞，使用用于进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测的与溶血剂相同的溶血剂100，由于可将白细胞分类为淋巴细胞和非淋巴细胞，无需再开发组成不同的溶血剂，即可将测定样品中的白细胞分为5类。
此外，本实施方式的血液分析方法中，如上所述，通过设置下列步骤：基于由WBC分类测定部5从含血液样品及溶血剂100的第1测定样品生成的侧向荧光信号，前向散射光信号及侧向散射光信号，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于由WBC分类测定部5从含血液样品、与所述溶血剂100相同的溶血剂100及染色剂的第2测定样品生成的侧向荧光信号及前向散射光信号，将第2测定样品中的血细胞分类为疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞，由于可共通化用于将白细胞分为4类的溶血剂和用于检测疟疾感染红细胞的溶血剂，无需为了进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测而开发组成不同的2种试剂(溶血剂)。由此，减轻试剂开发所致的对用户的负担的同时，将测定样品中的白细胞分为4类，且可进行疟疾感染红细胞的检测。
此外，通过将本实施方式的溶血剂用于血液分析方法，所述血液分析方法如上所述包括下列步骤：基于由WBC分类测定部5从含血液样品及溶血剂100的第1测定样品生成的侧向荧光信号，前向散射光信号及侧向散射光信号，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于由WBC分类测定部5从含血液样品、与所述溶血剂100相同的溶血剂100及染色剂的第2测定样品生成的侧向荧光信号及前向散射光信号，将第2测定样品中的血细胞分类为疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞，由于可共通化用于将白细胞分为4类的溶血剂和用于检测疟疾感染红细胞的溶血剂，无需为了进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测而开发组成不同的2种试剂(溶血剂)。由此，减轻试剂开发所致的对用户的负担的同时，将测定样品中的白细胞分为4类，且可进行疟疾感染红细胞的检测。
此外，通过将本实施方式的染色剂用于血液分析方法，所述血液分析方法如上所述包括下列步骤：基于由WBC分类测定部5从含血液样品及溶血剂100的第1测定样品生成的侧向荧光信号，前向散射光信号及侧向散射光信号，将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，基于由WBC分类测定部5从含血液样品、与所述溶血剂100相同的溶血剂100及染色剂的第2测定样品生成的侧向荧光信号及前向散射光信号，将第2测定样品中的血细胞分类为疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞，由于可共通化用于将白细胞分为4类的溶血剂和用于检测疟疾感染红细胞的溶血剂，无需为了进行白细胞分类及疟疾感染红细胞检测而开发组成不同的2种试剂(溶血剂)。由此，减轻试剂开发所致的对用户的负担的同时，将测定样品中的白细胞分为4类，且可进行疟疾感染红细胞的检测。
【实施例】
接下来，将由目测得到的疟疾感染率与基于上述实施方式中所述的方法(试剂使用了与上述实施方式中所述的试剂相同的试剂)得到的疟疾感染率的关系显示于下表1。再有，由目测的测定和通过上述实施方式中所述的方法的测定是对于多个血液样品，对于相同检体进行的。
【表1】
目测(％) 实施方式的方法(％)
样品1 0.01 0.01
样品2 0.03 0.03
样品3 0.08 0.06
样品4 0.17 0.13
如表1所示，由目测得到的疟疾感染率与基于上述实施方式中所述的方法得到的疟疾感染率大致一致，确认了，通过上述实施方式中所述的方法可精确检测疟疾感染红细胞。
再有，通过目测的疟疾感染率根据下式(4)计算出。
疟疾感染率(％)＝X/Y×100·····(4)
上述式(4)中，X是通过目测计数的指定数(＝Y)的红细胞中，确定感染疟疾的红细胞的数，Y是上述指定数。再有，表1中，Y对于样品1及2是约10,000，对于样品3是约20,000，对于样品4是约30,000。
此外，基于上述实施方式中所述的方法得到的疟疾感染率以下式(5)计算出。
疟疾感染率(％)＝(6)/(7)×100·····(5)
上述式(5)中，(6)是A×B/C，(7)是将相同血液样品用多项自动血细胞分析装置XE-2100(Sysmex株式会社制)测定而得到的红细胞数。再有，上述(6)的A是图17的疟疾区域内的血细胞数，B是将相同血液样品用多项自动血细胞分析装置XE-2100测定而得到的白细胞数，C是图17的白细胞区域内的血细胞数。
再有，不应限制性地认为本文公开的实施方式是全部实施方式。本发明的范围不由上述实施方式的说明确定，而由权利要求的范围确定，其应还包括与权利要求的范围意义相同的范围内的全部变体。
例如，上述实施方式中，显示了将作为收容WBC检测，HGB检测，WBC分类检测及疟疾检测中共通用到的溶血剂的1个试剂容器的溶血剂容器连接到样品供给部的例，但本发明不限于此，也可为了分别收容各检测中用到的溶血剂而将4个溶血剂容器与样品供给部连接，也可在上述4个检测中，将任意检测中用到的溶血剂收容于共通的溶血剂容器，将2个或3个溶血剂容器与样品供给部连接。此外，也可将5个以上的溶血剂容器与样品供给部连接。此时，只要将各溶血剂容器中收容的溶血剂分别预先稀释指定稀释倍数，在制备各检测中用到的测定样品时，就无需再设置将溶血剂稀释成期望稀释倍数的步骤。
此外，上述实施方式中，作为溶血剂的一例，显示了不含标记物的溶血剂，但本发明不限于此，溶血剂也可含标记物。
此外，上述实施方式中，显示了WBC检测及HGB检测中使用了与WBC分类检测中用到的溶血剂相同的溶血剂的例，但本发明不限于此，WBC检测，HGB检测及WBC分类检测中也分别可使用多样的专用的溶血剂。
此外，上述实施方式中，样品分析处理中，显示了从前到后以RBC/PLT检测，WBC检测，HGB检测，WBC分类检测及疟疾检测的顺序进行各检测处理的例，但本发明不限于此，样品分析处理中，也可以上述以外的顺序进行各检测处理。此外，样品分析处理中，白细胞分类处理，疟疾分类处理，红细胞数·血小板数计算处理，及血红蛋白量计算处理的顺序也可适宜变更。
此外，上述实施方式中显示了设置具有蓝紫色半导体激光元件半导体激光光源的例，但本发明不限于此，也可设置蓝色半导体激光元件或氩激光元件等，具有蓝紫色半导体激光元件以外的激光元件的光源。
此外，上述实施方式中，显示了将第2测定样品中溶血剂稀释9倍的构成的例，但本发明不限于此。此外，第2测定样品中溶血剂优选被稀释9倍以上12倍以下。
此外，上述实施方式中，作为溶血剂的一例，显示了含作为烷基三甲基铵盐，烷基的碳原子数为12以上18以下的阳离子表面活性剂(月桂基三甲基氯化铵；34.1mM，硬脂基三甲基氯化铵；1.7mM)的溶血剂，但本发明不限于此，只要WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂(上述实施方式中，月桂基三甲基氯化铵和硬脂基三甲基氯化铵的总计)的浓度是0.62mM以上2.15mM以下，也可为含上述以外的浓度的阳离子表面活性剂的溶血剂。再有，上述实施方式中，由于将溶血剂稀释25倍来制备了测定样品，WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度成为0.62mM时，溶血剂中阳离子表面活性剂的浓度是15.5mM，WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度成为2.15mM时，溶血剂中阳离子表面活性剂的浓度是53.75mM。此外，代替上述溶血剂，使用烷基的碳原子数为8以上10以下的阳离子表面活性剂，则在WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是2.15mM以上时也可测定。
其中，本发明的一实施方式的血液分析装置中，对变动溶血剂中阳离子表面活性剂的浓度时的实验结果进行说明。实验得到溶血剂中阳离子表面活性剂的浓度微量不同的多个实验结果，在这里，作为代表，对使用WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是2.15mM的溶血剂时，及使用了WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是0.62mM的溶血剂时的2个实验结果进行说明。
如图18及图20所示，在散点图上，可将白细胞分为3类：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集，单核细胞及粒细胞(嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞之集)。此外，如图19及图21所示，在散点图上，可分类为嗜酸性粒细胞和非嗜酸性粒细胞。此外，由这些分类结果可将白细胞分为4类：淋巴细胞和嗜碱性粒细胞之集、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞。因此认为，在WBC(分类用)测定样品中阳离子表面活性剂的浓度是0.62mM以上2.15mM以下的范围内，可将白细胞分为4类。
1.血液分析装置，其配备：
●样品制备部，其制备：
■含血液样品和溶血剂的第1测定样品，以及
■含所述血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，
●光信息生成部，其
■从所述第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时
■从所述第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，
●控制部，其
■基于所述光信息生成部生成的所述第1荧光信息和所述2种第1散射光信息，对所述第1测定样品中的白细胞进行第1分类而分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，
■基于所述光信息生成部生成的所述第2荧光信息和所述第2散射光信息，将所述第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
2.项1的血液分析装置，其中，
●所述样品制备部还制备含所述血液样品和所述溶血剂的第3测定样品，
●所述血液分析装置还配备从所述第3测定样品生成样品的电信息的电信息生成部，
●所述控制部构成为：
■基于所述电信息生成部生成的电信息，对所述第3测定样品中的白细胞进行第2分类而至少分类为：淋巴细胞和非淋巴细胞，同时
■基于所述第1分类及所述第2分类的分类结果，将所述测定样品中的白细胞分为至少5类：淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜酸性粒细胞。
3.项2的血液分析装置，
●其还配备第2光信息生成部，其从所述第3测定样品生成样品的透射光信息或散射光信息之一，
●所述控制部构成为：基于所述第2光信息生成部生成的所述透射光信息或所述散射光信息之一，取得所述第3测定样品中的血红蛋白浓度。
4.项1～3中任一项的血液分析装置，其中所述第2测定样品中所述溶血剂的稀释倍数与所述第1测定样品中所述溶血剂的稀释倍数不同。
5.项4的血液分析装置，所述第2测定样品中所述溶血剂的稀释倍数小于所述第1测定样品中所述溶血剂的稀释倍数。
6.项1的血液分析装置，其中所述样品制备部构成为：
●通过混合所述血液样品、指定试剂容器中收容的所述溶血剂及指定量的稀释液来制备所述第1测定样品，
●通过混合所述血液样品、所述指定试剂容器中收容的所述溶血剂及少于所述指定量的量的所述稀释液来制备所述第2测定样品。
7.项6的血液分析装置，其中所述样品制备部构成为：通过于所述溶血剂和所述稀释液混合的状态混合所述血液样品来制备所述第2测定样品。
8.项1的血液分析装置，其中所述样品制备部构成为：通过混合至少所述血液样品及第2试剂容器中收容的所述溶血剂来制备所述第2测定样品，所述第2试剂容器与收容有所述第1测定样品中用到的所述溶血剂的第1试剂容器不同。
9.项8的血液分析装置，其中所述第2试剂容器中收容的所述溶血剂被稀释9倍以上12倍以下。
10.项1的血液分析装置，其中所述溶血剂含2种阳离子表面活性剂。
11.项1的血液分析装置，其中所述染色剂含：
●下式所示的荧光染料：
【化1】
以及
●非离子表面活性剂。
12.血液分析方法，其包括下列步骤：
●制备：
■含血液样品和溶血剂的第1测定样品，及
■含所述血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，
●从所述第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时
●从所述第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，
●基于从所述第1测定样品生成的所述第1荧光信息和所述2种第1散射光信息，将所述将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，
●基于从所述第2测定样品生成的所述第2荧光信息和所述第2散射光信息，将所述第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
13.血液分析方法中用到的溶血剂，所述血液分析方法包括：
●制备：
■含血液样品和所述溶血剂的第1测定样品，及
■含所述血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及染色剂的第2测定样品，
●从所述第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时
●从所述第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，
●基于从所述第1测定样品生成的所述第1荧光信息和所述2种第1散射光信息，将所述将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，
●基于从所述第2测定样品生成的所述第2荧光信息和所述第2散射光信息，将所述第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。
14.血液分析方法中用到的染色剂，所述血液分析方法包括下列步骤：
●制备：
■含血液样品和溶血剂的第1测定样品，及
■含所述血液样品、与所述溶血剂相同的溶血剂及所述染色剂的第2测定样品，
●从所述第1测定样品生成第1荧光信息和至少2种第1散射光信息，同时
●从所述第2测定样品生成第2荧光信息和第2散射光信息，
●基于从所述第1测定样品生成的所述第1荧光信息和所述2种第1散射光信息，将所述将第1测定样品中的白细胞分为至少4类：单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及其他，
●基于从所述第2测定样品生成的所述第2荧光信息和所述第2散射光信息，将所述第2测定样品中的血细胞分类为：疟疾感染红细胞和非疟疾感染红细胞。

Claims (14)

1.血液分析装置，其配备：
●样品供给部，其制备：
■含血液样品、表面活性剂和稀释液的第1测定样品，以及
■含血液样品、表面活性剂、稀释液和染色液的第2测定样品，
●向上述第1测定样品和前述第2测定样品发出蓝紫色激光的半导体激光光源和、
●控制部，其
■基于向前述第1测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和侧向反射光强度对白细胞进行分类，基于向前述第2测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和荧光强度对疟疾感染红细胞进行分类，
前述第1测定样品中的表面活性剂的浓度比前述第2测定样品中的表面活性剂的浓度小。
2.权利要求1的血液分析装置，其还配备：
通过鞘流DC检测法测定红细胞数的DC测定部。
3.权利要求1或2的血液分析装置，其还配备：
通过高铁血红蛋白法测定血红蛋白量的HGB测定部。
4.权利要求1的血液分析装置，其中所述控制部基于向前述第1测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和侧向反射光强度，将白细胞分类为：淋巴细胞和嗜碱性细胞的集团、单核细胞，和粒细胞。
5.权利要求1的血液分析装置，其中所述第1测定样品中所述表面活性剂的浓度是0.62mM以上，2.15mM以下。
6.权利要求1的血液分析装置，其中所述表面活性剂是阳离子表面活性剂。
7.权利要求1的血液分析装置，其中所述染色液含有DNA选择性荧光色素。
8.权利要求1的血液分析装置，其中所述染色液含有DNA选择性双苯甲亚胺荧光色素。
9.血液分析方法，包括：
向含血液样品、表面活性剂和稀释液的第1测定样品发射蓝紫色激光，
基于向前述第1测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和侧向反射光强度对白细胞进行分类，
向血液样品、表面活性剂、稀释液和染色液的第2测定样品发射蓝紫色激光，
基于向前述第2测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和荧光强度对疟疾感染红细胞进行分类，
前述第1测定样品中的表面活性剂的浓度比前述第2测定样品中的表面活性剂的浓度小。
10.权利要求9的血液分析方法，其中基于向前述第1测定样品照射青紫色激光而得到的前向散射光强度和侧向反射光强度，将白细胞分类为：淋巴细胞和嗜碱性细胞的集团、单核细胞，和粒细胞。
11.权利要求9或10的血液分析方法，其中所述第1测定样品中所述表面活性剂的浓度是0.62mM以上，2.15mM以下。
12.权利要求9的血液分析方法，其中所述表面活性剂是阳离子表面活性剂。
13.权利要求9的血液分析方法，其中所述染色液含有DNA选择性荧光色素。
14.权利要求9的血液分析方法，其中所述染色液含有DNA选择性双苯甲亚胺荧光色素。
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