CN104195101B - 一种毛囊单位保存培养液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为5μg/mL~15μg/mL,氢化可的松的浓度为0.2μg/mL~0.6μg/mL,庆大霉素的浓度为30U/mL~50U/mL,人血清白蛋白的浓度为5μg/mL~15μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.1μg/mL~0.3μg/mL。本发明的保存培养液提高了毛囊单位的成活率,有利于毛囊的持续、稳定生长延长,并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用,效果良好,明显优于传统培养液。
Description
技术领域
本发明属于人体毛发移植技术领域,具体涉及一种毛囊单位保存培养液。
背景技术
毛发移植术中毛囊单位移植术被临床广泛应用治疗各种原因的秃发。相对于其他方法,该技术可以获得最佳的美学效果。目前毛发移植术过程中存在毛囊分离浪费、因毛囊分离而对手术时间的限制等技术瓶颈。面对秃发较多的患者时,需要在最短的手术时间内显微分离大量的毛囊单位,且分离出的毛囊单位也会因有时间限制而加大损伤。由此导致手术时间延长,后期局麻效果也越来越差,患者常因无法忍受而放弃手术。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足,提供一种毛囊单位保存培养液。该保存培养液提高了毛囊单位的成活率,有利于毛囊的持续、稳定生长延长,并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用,效果良好,明显优于传统培养液。
为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为5μg/mL~15μg/mL,氢化可的松的浓度为0.2μg/mL~0.6μg/mL,庆大霉素的浓度为30U/mL~50U/mL,人血清白蛋白的浓度为5μg/mL~15μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.1μg/mL~0.3μg/mL。
上述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述保存培养液中胰岛素的浓度为8μg/mL~12μg/mL,氢化可的松的浓度为0.3μg/mL~0.5μg/mL,庆大霉素的浓度为35U/mL~45U/mL,人血清白蛋白的浓度为8μg/mL~12μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.15μg/mL~0.25μg/mL。
上述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述保存培养液中胰岛素的浓度为10μg/mL,氢化可的松的浓度为0.4μg/mL,庆大霉素的浓度为40U/mL,人血清白蛋白的浓度为10μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.2μg/mL。
上述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述DMEM培养液为高糖型DMEM培养液。
本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、本发明的保存培养液能够很好的保存培养毛囊单位,提高了毛囊单位的成活率,有利于毛囊的持续、稳定生长延长,并对局部受损毛囊的增值再生具有促进作用,效果良好,明显优于传统培养液。
2、采用本发明的保存培养液保存培养毛囊单位,毛囊单位的生长速度明显加快,平均生长天数延长至14天以上,最终生长长度可达2.339±0.224mm以上,减小了由于保存带来的毛囊单位的损伤,避免了由此导致的手术时间延长,大大减轻了患者的痛苦。
下面通过实施例对本发明的技术方案作进一步的详细描述。
具体实施方式
实施例1
本实施例的毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为5μg/mL,氢化可的松的浓度为0.2μg/mL,庆大霉素的浓度为50U/mL,人血清白蛋白的浓度为15μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.1μg/mL。
本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法为:在无菌操作台上,将胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、人血清白蛋白和表皮生长因子加入DMEM培养液中,混合均匀后置于4℃下储存备用。
实施例2
本实施例的毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为15μg/mL,氢化可的松的浓度为0.6μg/mL,庆大霉素的浓度为30U/mL,人血清白蛋白的浓度为5μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.3μg/mL。
本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
实施例3
本实施例的毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为10μg/mL,氢化可的松的浓度为0.4μg/mL,庆大霉素的浓度为40U/mL,人血清白蛋白的浓度为10μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.2μg/mL。
本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
实施例4
本实施例的毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为12μg/mL,氢化可的松的浓度为0.5μg/mL,庆大霉素的浓度为45U/mL,人血清白蛋白的浓度为12μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.25μg/mL。
本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
实施例5
本实施例的毛囊单位保存培养液,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、高糖型DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为8μg/mL,氢化可的松的浓度为0.3μg/mL,庆大霉素的浓度为35U/mL,人血清白蛋白的浓度为8μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.15μg/mL。
本实施例的毛囊单位保存培养液的制备方法与实施例1相同。
对比例1
本对比例的毛囊单位保存培养液由胰岛素、氢化可的松和高糖型DMEM培养液组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为10μg/mL,氢化可的松的浓度为0.4μg/mL;制备方法与实施例1相同。
对比例2
本对比例的毛囊单位保存培养液由胰岛素、氢化可的松、人血清白蛋白和高糖型DMEM培养液组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为10μg/mL,氢化可的松的浓度为0.4μg/mL,人血清白蛋白的浓度为10μg/mL;制备方法与实施例1相同。
对比例3
本对比例的毛囊单位保存培养液为传统的WilliamsE培养基,WilliamsE培养基(Gibco)加谷氨酰胺2mmol/L,Hepes2mmol/L,氢化可的松10ng/mL,牛胰岛素(Sigma)10μg/mL,转铁蛋白(Sigma)10μg/mL,亚硒酸钠10ng/mL,青霉素100U/mL,链霉素100μg/mL;制备方法与实施例1相同。
分别采用本发明实施例1~5以及对比例1~3的毛囊单位保存培养液保存毛囊单位,方法为:毛囊单位来源于8~36岁不同年龄的男女患者,无菌环境下,在倒置显微镜下选取结构完整的生长期毛囊单位,将毛囊单位小心转移至72孔板内,每孔l根,然后向每孔加储存备用的保存培养液0.25mL,置于37℃,5%CO2培养箱中悬浮培养,每3d换液1次,每次换液50%左右。
观测指标:毛囊的生长速度及可生长天数:每天在装有目镜测微尺的倒置显微镜下测量毛囊的长度直至毛囊不再延长,记录下毛囊的可生长天数和最终生长长度,并计算出前5天的生长速度。
生长速度只统计第1天即有明显生长(≥0.1mm)的毛囊单位,其它均视为非生长期毛囊或有严重损伤的毛囊。结果见表1。
表1不同保存培养液中毛囊单位的生长情况
从表1中可以明显看出,采用本发明的保存培养液,毛囊单位的生长速度明显加快,平均生长天数延长至14天以上,最终生长长度可达2.339±0.224mm以上,减小了由于保存带来的毛囊单位的损伤,避免了由此导致的手术时间延长,大大减轻了患者的痛苦。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例,并非对本发明做任何限制,凡是根据发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效结构变化,均仍属于本发明技术方案的保护范围内。
Claims (4)
1.一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,由胰岛素、氢化可的松、庆大霉素、DMEM培养液、人血清白蛋白和表皮生长因子组成;所述保存培养液中胰岛素的浓度为5μg/mL~15μg/mL,氢化可的松的浓度为0.2μg/mL~0.6μg/mL,庆大霉素的浓度为30U/mL~50U/mL,人血清白蛋白的浓度为5μg/mL~15μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.1μg/mL~0.3μg/mL。
2.根据权利要求1所述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述保存培养液中胰岛素的浓度为8μg/mL~12μg/mL,氢化可的松的浓度为0.3μg/mL~0.5μg/mL,庆大霉素的浓度为35U/mL~45U/mL,人血清白蛋白的浓度为8μg/mL~12μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.15μg/mL~0.25μg/mL。
3.根据权利要求2所述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述保存培养液中胰岛素的浓度为10μg/mL,氢化可的松的浓度为0.4μg/mL,庆大霉素的浓度为40U/mL,人血清白蛋白的浓度为10μg/mL,表皮生长因子的浓度为0.2μg/mL。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种毛囊单位保存培养液,其特征在于,所述DMEM培养液为高糖型DMEM培养液。
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